Biosinteza ksantana na otpadnoj vodi industrije skroba

Student: Isi Biljana

Novi Sad, 2012

Mentor: Dodi Jelena

Uvod:
- Ksantan: osobine i primena

- Godinja proizvodnja: 86 000 t u vrednosti od 270 miliona $; do 2015. god 400 miliona $
- Otpadne vode prehrambenih industrija: zagaivai i supstrat - Karakteristika biosinteze ksantana je nespecifinost ugljenohidratnog supstrata

Cilj:
- Ispitivanje mogunosti biosinteze ksantana na otpadnoj vodi industrije skroba i

- Opravdanost njenog obogaivanja hidrolizovanim i nehidrolizovanim skrobom sa ciljem poveanja produktivnosti biosinteze

Kultivacija: priprema inokuluma

- Hranljiva podloga (YMA): glukoza, kvaev ekstrakt, sladni ekstrakt, pepton i agar - Proizvodni mikroorganizam:

Xanthomonas campestris
- Uslovi: 4C; aerobni, 28C, 48h, eksterno meanje - Umnoavanje u dva koraka: 30 ml (100 ml); 150 ml (500 ml)

Kultivacija: biosinteza ksantana

- Hranljiva podloga (dodati: azot, mineralne soli):

Podloga 1: nehidrolizovan skrob Podloga 2: enzimski hidrolizovan skrob Podloga 3: glukoza

- Uslovi: 28C, protok 0,01 lvazduh/lKT, 48 h; 30C, protok 0,02 lvazduh/lKT, 72 h; eksterno meanje

Rezultati : procesni parametri kultivacije

- Odreivanje pH
7.5

7.0

6.5 pH [1] 6.0 5.5 5.0 0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj nutrijenata tokom kultivacije

- Odreivanje sadraja redukujuih eera
18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

sadraj redukujuih eera [mg/ml]

Rezultati: sadraj nutrijenata tokom kultivacije

- Odreivanje ukupnog azota
0.35 0.30

0.25 ukupan azot [mg/ml]

0.20

0.15

0.10

0.05

0.00 0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj nutrijenata tokom kultivacije

- Odreivanje asimilabilnog azota
0.20
0.18 0.16 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02

asimilabilni azot [mg/ml]

0.00
0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj nutrijenata tokom kultivacije

- Odreivanje sadraja ukupnih rastvorenih soli
3.0 2.8 2.6

ukupne rastvorene soli [mg/ml]

2.4 2.2 2.0 1.8 1.6 1.4

1.2
1.0 0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj proizvoda tokom kultivacije

- Odreivanje mutnoe
2.5

2.0 apsorbancija na 660nm

1.5

1.0

0.5

0.0
0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj proizvoda tokom kultivacije

- Odreivanje vremena isticanja
305

255

205

vreme isticanja [s]

155

105

55

5
0 24 48 vreme kultivacije [h] Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 72 96 120

Rezultati: sadraj proizvoda tokom kultivacije

Podloga Sadraj glukoze [mg/ml] S0(1) Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 2,36 13,77 15,27 S(2) 0,75 3,97 2,58 Stepen konverzije(3) [%] 68,22 71,17 83,10 Prinos ksantana, P [mg/ml] 5,10 5,78 7,52 Konverzija(4) [%]

34,00* 41,95 49,23

(1) sadraj glukoze u zasejanoj podlozi (2) sadraj glukoze nakon 120 h kultivacije (3) stepen konverzije % = (S0-S)/S0100 (4) konverzija % = P/S0100 * teorijska vrednost izraunata na osnovu dodate koliine skroba na poetku kultivacije

Rezultati: sadraj proizvoda tokom kultivacije

12 Napon smicanja - (Pa)

- Krive proticanja
14 12 Napon smicanja - (Pa)

10 8 6

Podloga 2

Podloga 1
0h
72h

4
2

24h
96h

48h
120h

10 8 6 4 2 0 0 200 400 600 D (1/s) 80020 18 Napon smicanja - (Pa) 16 14 12 1000 1200

0 0 200 400 600 D (1/s) 800 1000 1200 1400

1400

Podloga 3

10
8 6 4 2 0 0 200 400 600 D (1/s) 800 1000 1200 1400

Rezultati: sadraj proizvoda tokom kultivacije

- Vrednosti reolokih parametara i koeficijenata korelacije
Faktor konzistencije (K) Indeks toka (n) Koeficijent korelacije (R2) Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 Podloga 1 Podloga 2 Podloga 3 vreme kultivacije 0h 24 h 48 h 72 h 0.168 0.139 0.121 0.131 0.147 0.139 0.116 0.115 0.139 0.111 0.101 0.212 0.228 0.312 0.415 0.542 0.206 0.312 0.444 0.561 0.312 0.435 0.580 0.569 0.670 0.767 0.870 0.980 0.556 0.767 0.910 0.975 0.556 0.868 0.962 0.985

96 h
120 h

0.196
0.244

0.141
0.195

0.312
0.378

0.535
0.581

0.588
0.550

0.547
0.523

0.983
0.990

0.990
0.993

0.989
0.997

Zakljuak:
- Otpadna voda industrije skroba, uz dodatak izvora azota, mineralnih materija i skroba, moe se primeniti kao podloga za biosintezu ksantana.

- U podlozi sa skrobom i podlozi sa hidrolizovanim skrobom dobijene su bliske vrednosti prinosa i stepena konverzije eera upotreba amilolitikih enzima, radi poveanja prinosa nije opravdana.