Endokrini sistem

Hipotalamus/hipofiza/Pinealka Tiroidea/Paratiroidea Timus Adrenalka Pankreas Bubreg

Ovarije
Testisi

Adrenal Cortex: Steroid Hormone Production

Figure 23-2: Synthesis pathways of steroid hormones

SPOLNI HORMONI
Testosteron=najvaniji androgen(testisi) Estradiol(ovariji)=najvaniji estrogen., koncentracija varira kroz menstrualni ciklus, malo ga ima i u plazmi mukaraca

Progesteron=produkt ovarija i lui se nakon stvaranja corpus Luteum

U normalnoj plazmi niska i koncentracija testosterona ( 50% potjee iz ovarija i 50% iz periferne konverzije Androstendiona i DHAS(dehidoapiandrosteron sulfata) -adrenalni korteks

*Estradiol i Testosteron (95%)cirkuliraju vezani za proteine plazme(globulin koji vezuju polne hormone)-SHBG.

*Koncentracija SHBG 2 puta vea kod ena od mukaraca. Primarno vezivanje za SHBG: DHEA,testosteron, estradiol Kada raste SHBG------rastu i estradiol sini efekti Pad SHBG------rast androgen efekata
*Drugi oblici: transkortin, albumin. Ovi proteini imaju nizak kapacitet vezivanja, a visok afinitet, za razliku od alfa 1 kiselog glikoproteina. Testosteron: 65% SHBG, 30% albumin, 2% slobodni *Za alfa 1 glikoprotein se vee progesteron *Za albumine-svi steroidi

ANDROGENI HORMONI Testosteron: Procjena testikularne aktivnosti mukarca Kontrola nastupanja puberteta u djeaka Dijagnoza i praenje lijeenja hiperandragonemije hirsutizma(ena),policistini ovariji Raste testosteron kada je LH/FSH vee od 2 Androstendion-prekurzor u sintezi testosterona Dijagnoza: hiperandragonemija(hirsutizam), sindrom PCO DHEAS sinteza u kori nadbubrega, ene tokom trudnoe Diferencijalna dijagnostika hirsutizma/virilizma Dijagnoza i praenje PCO,KAH

DHEA-dehidroepiandrosteron Androgen iz adrenalke RIA za odreivanje DHEA te konjugacioni produkt DHEA-S u plazmi Esej esto zamijenjen analizom 17 ketosteroida Direktni RIA za DHEA i DHEA-S bez ekstrakcije EDTA ili heparinizirana plazma, stabilnost 7 dana na sobnoj temp. Vrijednost testa: Utvrivanje funkcije adrenalke

Spermatogeneza
GnRH LH/FSH Hipotalamus

hipofiza

Inhibin
Testosteron

Testisi

Spermatogeneza

Serum FSH ili Inhibin B

Serum FSH reflektira spermatogenezu

Serum Inhibin B je marker za funkciju Sertolijvih elija kod mukaraca, i korelira obrnuto proporcionalno sa FSH)
Serum inhibin B je dobar indikator aktivne spermatogeneze i korelira sa volumenom testisa i gustinom sperme.(Klingmuller 1997) Kombinirano mjerenje FSH i Inhibina je bolji indikator spermatogeneze nego bilo koji marker sam po sebi. (Pierik 1998) Ovi testovi ne mogu napraviti razliku izmeu individua sa normalnom spermom i onih u spermatogenom arrestu. (Bohring 1999, Foresta 1999)

Spermatogeneza
Leydig elije Sertoli elije T T T

Primarni spermatocit
Sekundarni spermatocit spermatozoa Okrugli spermatid

Detekcija Spermatogeneze

Konvencionalna analiza sjemene tekuine

Serum FSH ili inhibin B Veliki broj funkcionalnih testova-in vitro penetracija mukusa, test penetracije sa hamster jajima i test post coitus

Analiza sjemene tekuine

volumen > 2 ml pH 7.2 8 Koncentracija Spermatozoida > 20 miliona / ml Ukupni broj spermat > 40 milion/ ml pokretljivost > 25 % brza progresija i > 50 % sa progresijom prema naprijed

Analiza sjemene tekuine

Potrebno je ispitati barem dva uzorka u istoj laboratoriji Putem masturbacije na temp (15C to 38C) i brzo isporuiti u laboratoriju WHO kriteriji (1999): >20 million/ml >40% progresivna pokretljivost >30% normalni oblici

Semen Analiza
Vitalnost > 75 % ivi i < 25 % mrtvi Morfologija > 14 % normalni oblici (Krugers) WBC < 1 million / ml Immunobead test < 20 % Mjeani antiglobulin reakcija < 10 %

Endokrina evaluacija
Ako je abnormalna niska koncenracija spermatooida < 5milion / ml Poremeaj seksualne funkcije Drugi kliniki pokazatelji koji ukazuju na specifinu endokrinopatiju.

Post ejakulatna analiza urina

Indikacije: -Nizak volumen ejakulata -Nema ejakulata -Izbjei ako postoje pokazatelji hipogonadizma Uzroci niskog volumena / bez ejakulata : -Retrogradna ejakulacija -Nedostatna emisija -Obstrukcija ejakulacijskih vodova

Imaging mukih genitalija

Transrektalno skaniranje iskljuuje obstrukcije na razini ejakulatornih duktusa Izvodi se kod azo / oligosperminih osoba sa niskim volumenom ejakulata i palpabilnom vasom. Ako je teko ispitivanje, tada se radi skrotalna ultrasonografija

Specializirani kliniki testovi na sjemenoj tekuini i spermi

Leukociti u sjemenoj tek > 1 milion / ml potreban tretman Penetracija Cervikalnog mukusa i post coitus test Antisperm antitijela Test viabilnosti sperme (HOS test)

Endokrinologija seruma
Testosteron FSH, LH Funkcionalni testovi-tiroidna lijezda prolaktin

Poremeaji na razini mukih spolnih hormona

1.Deficit u produkciji sperme-mehaniki nedostatak u transportu sperme, poremeaji na nivou funkcije spermija, blokiranje duktusa,
droge duhan, marihuana,alkohol

azospermija, oligospermija normalne razine hormona LH, FSH, Test 2.Smanjena sekrecija testosterona Uzroci: Deficit testisa-primarni poremeaji Hipergonadotropni hipogonadizam Defekt hipotalamus ili hipofiza(sekundarni. Poremeaji ili Hipogonadotropni hipogonadizam (nema oba gonadotropina ili samo LH)., generalizirani poremeaj na razini hipofize

3.Poremeaji vezani za seksualnu diferencijaciju mukaraca Rijetki poremeaji Produkcija testosterona poremeena, defekt produkcije Test 17 beta ketosteroid reduktaza nedostaje

Poremeaj- sindrom testikularne feminizacije-neaktivni androgen receptori, nema odgovora ciljanih tkiva

Uzroci primarnog hipogonadizma:

1. Kongenitalni defekti-Klinefelter sindrom ili ageneza testisa

2. Steeni defekti uslijed infekcija testisa(zauke), trauma, iradijacija, citotoksini lijekovi

Nalazi: pad Test, pad FSH, pad LH

Uzroci sekundarnog hipogonadizma :

a) Tumori hipofize b) Poremeaji na razini hipotalamusa(Kallman sindrom)
Opada testosteron, raste FSH, raste LH ?

Testovi: Dinamiki testovi kao stimulacija sa GNRH utvrdjuje uzrok hipogonadizma kod nekih pacijenata

Kliniko stanje

FSH

LH

Testosteron

Prolaktin

Normalna Spermatogeneza

Hipogonadotropni Nizak gonadizam Abnormalna Spermatogeneza Complete Test Failure Prolaktin luei tumor Visok

Nizak

Nizak

Visok

visok

N/nizak

N/nizak

N/nizak

nizak

visok

N=normalan

DHEA-dehidroepiandrosteron Androgen iz adrenalke RIA za odreivanje DHEA te konjugacioni produkt DHEA-S u plazmi Esej esto zamijenjen analizom 17 ketosteroida Direktni RIA za DHEA i DHEA-S bez ekstrakcije EDTA ili heparinizirana plazma, stabilnost 7 dana na sobnoj temp. Vrijednost testa: Utvrivanje funkcije adrenalke

Testosteron (RIA, EIA) 1. Imunoesej, prethodno dodati 8 anilino 1 naftalen sulfonat Serum/heparinizirana plazma su uzorci(stabilnost 1 nedjelja na +4, 6 mjeseci na 20C. Najvee koncentracije su ujutro, opada 25% po noi. 2. SHBG esej vezivanja specifini imunoesej 3. Biodostupni test (slobodni + albumin vezani Selektivna precipitacija sa amonijum sulfatom za SHBG. 4. Mjerenje prekurzora i metabolita (DHT, androstendion, DHEA)

Osa Hipotalamus-hipofiza-ovarije osa

Potrebna za zdravo sazrijevanje, ciklinost, i reproduktivnu sposobnost Hipotalamus: GnRH se oslabaa putem GnRH pulsnog generatora svakih 6090 minuta. Hipofiza: GnRH simulira gonadotropine da oslobode FSH i LH Ovarijeve folikule: Pulsatilno osobaanje LH i FSH potrebno je za razvoj ovarijevih folikula koji lue spolne hormone potrebne za ciklinost u sklopu samog ciklusa

Cikline promjene na nivou enskih hormona reprodukcije

FSH LH Estradiol Progesterone

12

Ovulacija
16

20

24

28

Poetak ciklusa FSH-injiciranje rasta folikula Sredina ciklusa- luenje LH-izazivanje ovulacije

Days since onset of menses

zrela folikula-diferencijacija corpus luteum sekrecija PG i estradiolapriprema endometrija

Nivo E2, LH i Progesterona u toku normalnog menstrualnog ciklusa

LH Progesteron

E2

LH/FSH

12 14 Dani ciklusa

21

28

Ovulacija
Primarne folikule Oocit Sekundarna folikula

Graafijeva folikula

Rupturirana folikula Corpus albicans

Corpus luteum

Gonadotropini FSH odgovoran za rani razvoj folikula u ovarijima ena LH-ovulacija Mukarac-FSH- odgovoran za spermatogenezu RIA Ispitivanje infertilnosti, hipogonadizma LH-ispitivanje ovulacije Razvoj EIA (urin) Kuno testiranje(za detekciju ovulacije)

Odreivanje i znaaj FSH i LH 1.RIA metode FSH moe biti veoma nizak ispod 0,5 U/L na litar-loe luenje GnRH, hipogonadotropni hipogonadizam

FSH iznad 20 U , insuficijencija jajnika, menopauza

LH-ovulacijski rast iznad 20 IU/I

Policistini janici-raspon 13-25 IU/L, normalan FSH

Najvaniji gestagen Progesteron U ciklusu maks luenje u 21 om danu U lutealnoj fazi-potvrda ovulacije

U trudnoi sinteza mu raste nakon 8 nedjelja

Znaaj:

1. Dokazivanje ovulacije 2. Funkcija utog tijela 3. Defekt 20-22 liaze(ne sintetie se PG) ili 17 alfa hidroksilaze(raste PG)

Progesteron-oslobaa ga corpus luteum nakon ovulacije

Uloga:priprema endometrija na trudnou priprema dojki za laktaciju inaktivira se u jetri Hiperprogesteronemija-nema mensturacije, vrlo rijetko

Hipoprogesteronemija- proizvodi variranja u samom ciklusu i koliini izluene krvi Infertilnost Nedovoljna produkcija PG od strane corpus luteum est abortus u prvom trimestru.

Estradiol Najpotentniji estrogen Esej kompetitivnog vezivanja., RIA Skupljanje u odreeno doba dana Za funkciju ovarija (tumori ovarija,adrenalki , testikularnog porijekla uzrokuju rast) Raste u trudnoi, kod aplikacije gonadotropina Pad nivoa-primarna i sekundarna disfunkcija ovarija i adrenalki Progesteron Urinarni metabolit-pregnandiol RIA Evaluacija fertilnosti kod ena i detekcija ovulacije

Estradiol- najvaniji estrogen

a) b) c) d) e) f) g) h) Sekundarne karakteristike ena Stimulacija ili rast folikula Razvoj endometrija Razvoj falopijevih tuba Razvoj vagine Stimulacija razvoja dojki Sazrijevanje spoljnjih genitalija Zavretak linearnog rasta

Uloga: priprema uterusa za trudnou i dojke za laktaciju Dijagnostika vanost: Ovulacija, funkcija jajnika, pad kon.-smanjena funkcija jajnika Neplodnost, nastupanje puberteta kod djevojica(ispod 36 umol/L prije) Funkcija jajnika prije menopauze

Poremeaji na razini enskih spolnih hormona

*Subfertilnost, amenoreja i oligomenoreja

(odsustvo krvarenja) primarni poremeaj(nema nikako krvarenja) sekundarni poremeaj-nema menzesa 6 mjeseci *Hirsutizamrast dlaka sa mukom distribucijom uzroci inzulinska rezistencija povezana sa policistinim obolenjem ovarija * Virilizam-abnormalan razvoj sekundarnih mukih karakteristika(rast testosterona), uveanje klitorisa, dubok glas atrofija dojke est uzrok-tumori ovarija,adrenalki

Kada se kod ena dobije visok testosteron, vei od 2000ng po ml ispitati SHBG, mjeriti androstendion, DHA sulfat. Razlog:sinteza ovog proteina u jetri depresirana visokom koncentracijom testosterona.

Ako raste DHAS-adrenalka ima produkciju androgena Ako je uzrok ovarije-onda raste androstendion.

Klasini poremeaji kod ena

1.Abnormalnosti vezane za sekreciju estrogena se javljaju zbog primarnih poremeaja na nivou ovarija, sekundarno vezano za iregularnosti u produkciji FSH ili pak oboje. manifestacija: poremeaji ciklusa, odgoen pubertet ili oboje, infertilnost 2.Hiperstrinizam-Klinike manifestacije ovise od starosti pacijenta., iregularan Menzes, infertilnost, uterina krvarenja 3. Prerani pubertet 4. Iregularnosti na nivou menzesa i infertilnost

INFERTILNOST
Infertilnost

je nesposobnost para da ima potomstvo nakon jednu godinu seksualnog ivota bez kontracepcije

U 6-om mjesecu intrauterinog ivota: 6 miliona ovarijevih folikula

Pri roenju:oko dva miliona preivi

U menopauzi: 400,000 viabilnih folikula

Kod zdrave ene koja nikad ne postane trudna i koja ima ovulacije 13 puta godinje u starosnoj dobi od 15-50 godina starosti: manje od 500 od originalnih 6 miliona folikula doe do ovulacije.

Uzroci subfertilnosti kod ena

1.Poveana sekrecija ANDROGENA(OVARIJE) KAO ODGOVOR NA INZULINSKU REZISTENCIJU 2.Primarno oteenje ovarija(rastu gonadotropini, opada estradiol) 3.Hiperprolaktinemija 4.Bolest policistinih ovarija(raste LH, normalan FSH), estradiol Evidentan hirsutizam(raste testosteron i konc sHBG) 5.Hipogonadotropni hipogonadizam (rijedak uzrok tumor hipofize)

Subfertilnost -MUKARCI: 1. Primarni testikularni nedostatak(oteene tubule i intersticij, raste FSH, raste LH, opada testosteron) Obolenja hipotalamus-hipofiza(opada testosteron., niski ili normalni gonadotropini) Hiperprolaktinemija

3.

Faktori kod mukarca

Analiza sjemene tekuine Serum Testosteron, LH, FSH i (? Prolaktin)

Na primjer: Historija zauki / kriptohidizam

Testosteron LH FSH 18 nmol/L 3.5 IU/L 23 IU/L

Ispitivanje ovulacije
Zadebljanje mukisa cerviksa Regularan menstrualni ciklus mid lutealni serum progesteron > 30 nmol/L Ultrazvuni monitoring folikulogeneze i ovulacije Bazalna tjelesna temperatura Detekcija LH u urinu

Endokrini profil

Bazno linijski profil prva tri dana menstrualnog ciklusa Gonadotropini (FSH, LH) Androgeni Funkcija tiroideje Prolaktin Estrogen Test tolerancije na glukozu

Faktori kod ene

Oligomenorea/amenorea

Disfunkcija ovarija /PCOS: Serum LH, FSH, E2, androgeni, SHBG Hiperprolaktinemia: Serum prolaktin Poremeaji Tiroidne lijezde: serum TSH

Ispitivanje infertilnosti
Regularni ciklus

Amenorea/oligo

Serum progesteron za detekciju ovulacije Histerografija za potenciju tubusa

Serum LH/FSH/E2/ testosteron/17-OHP Serum prolaktin Serum TSH

Analiza tekuine

sjemene

Historija i ispitivanje

Regularan ciklus

Oligo/amenorea

Dan 21 progesteron

sa
Hirsutismom

bez
Hirsutisma

>30 nmol/L
Normalna lutealna faza

<30 nmol/L
? Lutealna faza Insuficijencija S. Prolaktin U/S Endometrialna biopsija S. Testosteron S. DHEA-S S. 17-OHP U. Slobodni kortizol S. FSH/LH S. E2 S. TSH S. prolaktin

PROMJENE NAKON UZIMANJA ORALNIH KONTRACEPTIVA

1.75 % zena razvija netoleranciju na ugljene hidrate, dijabetes Induciran steroidima

2.za 20% rast TG I VLDL, mali porast LDL holesterola I pad HDL Holesterola, najveci utjecaj estrogena, indukcija hepatocelularnih Enzima/promjene u sastavu zuci 3.Promjene koncentracije proteina, pad albumina,rast nosaca, povecana agregacija trombocita 4.Promjene koncentracije kortikosteroida i hormona tiroideje Rast za 50%

FUNKCIJA JETRE 1.Holestatski efekti/40% promjene BSP test, raste ALP, GGT 2.Idiosinkratska zutica/efekat progestagena 3, Rast transaminaza 4.Rast zeljeza, TIBC, rast transferina/progesteronska komponenta

Trudnoa= stanje razvoja embria ili fetusa u organizmu ene

Biohemijske promjene u trudnoi :

1.Zadravanje tekuine/ redukcija plazma natrija,i ureje
Ekspanzija ECF/opadaju koncentracije albumina i ukupnih proteina, uticaj na klirens proteina, brzinu glomerularne filtracije, opadaju kreatinin i ureja., prisustvo intermitentne glikozurije zbog redukcije bubrenog praga za glukozu) (javljaju se humani placentalni laktogen, specifini beta glikoprotein trudnoe

1a. Poveana produkcija proteina koji egzistiraju na nivou obje cirkulacije(Estrogen, progesteron, rana trudnoa-nivo odravanja PG, u napredovaloj trudnoi placenta izvor progesterona )
2.Raste tiroksin, ali urinarna ekskrecija T4 je normalna, rast TBG, opada FT4 , rast ukupnih kortikosteroida, rast kortizola

3. Rast placentalne ALP 2 do 3 puta, raste aktivnost oksicotinaze(enzim slian cistin aminopeptidazi 4. eljezo.,stupanj promjena ovistan o profilaksi 5.Metabolizam masti-rastu TG, holesterol, fosfolipidi, masne kiseline

Patologija koja se asocira sa trudnoom: a) Dijabetina trudnoa- asocira se sa poveanim rizikom mortaliteta fetusa Hiperglikemija kod majke-Promocija hiperinsulinizma na nivou fetusa (in utero manifestacija povean rast, postnatalno dolazi do neonatalne hipoglikemije) b) Hipertenzija-povean rizik insuficijencije placente, retardacija fetalnog intrauterinog rasta. Eklampsija-(druga polovina trudnoe) konvulzije, hipertenzija, poremeena funkcija bubrega koja ukljuuje proteinuriju c) Obstetrika holestaza-rast unih kiselina seruma beba intrauterina smrt nakon 36 nedjelja d) Koritenje lijekova-posebno anti konvulzivi.

Placenta
Lui proteinske hormone, estrogen i PG
Biohemijski testovi imaju ogranienu vrijednost u monitoringu razvoja fetusa

1.HCG(humani korioni gonadotropin)

Testiranje na beta podjedinicu, danas na intaktan oblik Beta podjedinica-analitika(pacijenti sa HCG neoplazmama)
Intaktan HCG-detekcija trudnoe(1-2 dana nakon fertilizacije) Raste do 70-90 og dana trudnoe, opada za 10-15% kasnije

Sekrecija HCG odrava produkciju PG od strane C.luteum u ranoj fazi trudnoe

HCG stimulira: a) Razvoj gonada fetusa b) Sintezu androgena u testisima fetusa

Dijagnoza ektopine trudnoe Predvianje spontanog abortusa Detekcija vie trudnoa odjednom Detekcija u monitoringu HCG produkujuih tumora, Praenje rasta, tretmana

Imunohemija

1. Ukupni HCG 1. Intaktni HCG(1 At specifino za alfa lanac) (At specifino za beta lanac)

3. Slobodna beta podjedinica (At specifino za epitop na beta lancu)

Odreivanje beta HCG 1. Test aglutinacije-inhibicije(na staklu ili epruveti)

Princip:Eritrociti ovce presvueni sa HCG pomijeaju se sa uzorkom Reakcija sa HCG At____ posljedica aglutinacija inhibicija

Tehnika neosjetljiva-lano neg.rez

Problemi: lano poz reakcija: proteini, eritrociti, leukociti, bakterije

2. Imunoenzimatski koncentracijski esej-sendvi tip

HCG u uzorku uhvaen od prvog At se vezuje za vrstu fazu Dodaje se detektor antitijelo., sendvi vrsta tehnika

3.RIA HCG------vezivanje za anti HCG, vrlo osjetljiv

4. Imunoenzimometrijska tehnika(Elisa), HCG uzorak + HCG
At vezano za vrstu fazu, anti HCG detektor At(E*)-----sendvi

HUMANI PLACENTALNI LAKTOGEN(HPL)

(humani korioni somatotropin)

Strukturalno i imunoloki slian hormonu rasta i prolaktinu Raste do 37 nedjelje trudnoe Djeluje sa HCG u stimulaciji sinteze estrogena i PG putem corpus lutum Stimulira razvoj mlijene lijezde, ima somatotropno dejstvo Raste sa gestacijom, korelira sa masom placente Odreivanje: RIA serum

Steroidi
PRODUKCIJA ESTRIOLA Fetus Placenta
Holesterol Pregnenolon <---- Pregnenolon <---- --------->

Majka
Holesterol

<---- Progesteron ---------> DHEA-S ---------> DHEAS

<---- Estradiol/estron---------> 16 hidroksi DHEAS ---------> 16 hidroksi DHEAS <----

Estriol

--------->

ESTRIOL

Slab estrogen, 100-i dio potencije estradiola, deseti dio potencije estrona po jedinici teine,osnovni estrogen u urinu trudnica
Uloga:Obezbjeivanje optimalnog protoka u gravidnom uterusu Evaluacija fetoplacentalne jedinice kod majki dijabetiarapad estriola od 40 %- predikcija fetalnog distresa

Identifikacija postdatumske gestacije.dijete rizik od razvoja sindroma postzrelosti, pad nakon 40 nedjelje gestacije
Dijagnoza intrauterine retardacije rasta- nivo estriola nizak Refleksija fetoplacentalne jedinice Dobrobit fetusa

Estriol metaboliti*

PLAZMA

URIN

Nekonjugirani estriol
Estriol 3 sulfat

0%
4%

9%
15%

Estriol 3 glukuronid
Estriol 16 glukuronid

13%
73 %

15%
21%

Estriol 3 sulfat-16 glukuronid

10 %

40%

Analitika estriola(urin) 1.Reakcija po Koberu (spektrofotometrija) Odreuju se ukupni estrogeni., uzorak zagrijati u prisustvu H2SO4 i hidrohinona, stvaranje ljubiasto obojenog hromogena na 514 nm Hidroliziran urin dobar uzorak, estrogeni ekstrakcija u fenil etil acetatu, Alen korekcija na 472 i 556 nm., ekstrakcija hromofora u hloroformu 2.Ittrich metoda*fluorimetrija-ukupni estrogeni Ekstrakcija hromofora, eksitacija na 530 nm, emisija 550 nm uto zelena fluorescencija

3.gasno tena hromatografija-koristi se plameni jonizacioni detektor., hromatografija isparljivih derivata sa N2 mobilnom Fazom.,ovom prethodi hidroliza slobodnog estriola 4.HPLC-uv ili fluorescentna detekcija Estriol-hromatografija na obrnutoj fazi C18., detekcija 280 nm Fluorescencija 220 nm, emisija 608 nm-dansil derivati 5.RIA-esej kompetitivnog vezivanja 3H ili 125I estriol, Oslobaanje od vezanog biljega, separacija drugim At 6.EIA esej kompetitivnog vezivanja., estriol enzim konjugat Separiran od slobodnog enzima, enzimatska reakcija 463 nm

Estriol-urin

Plazma ESTRIOL-mjera fetoplacentalne jedinice

Raste sa trudnoom Nalazi se pod djelovanjem hepatalne i renalne funkcije majke Prati se kod trudnoa sa visokim stepenom rizinosti Pad od 40-50 % , rani znak fetoplacentalnog distresa

ANALITIKA:
1.RIA-slobodni i ukupni estriol (esta) Antibiotici interferiraju sa procedurom 2.EIA-rijetka

3.HPLC elektrohemijska detekcija

Ekstrahirani nekonjugirani estriol se hromatografira hromatografijom na obrnutoj fazi, detekcija elektrohemijskom detekcijom

Alfa fetoprotein (AFP)

Produkcija hepatociti, fetus Raste do 32 nedjelje trudnoe, strukturalno slian albuminu Pojavljuje se u urinu fetusa, prisutan u amnionskoj tekuini i krvi majke Dijagnostiki znaaj:

a)Otvoreni defekti neuralne cijevi i defekti ventralnog zida

(anencefalija, spina bifida)

b)Down sindrom , mrtvoroenad, bebe malih teina

Uporedo raditi AFP majke-voditi rauna o godinama starosti Majke, rasi te prisustvu dijabetesa tipa I
(MSAFP 10% vei kod crnkinja, dijabetiari 20-40% nii)

Mogunost nastanka hromozomskih aberacija Nizak MSAFP korelira sa rizikom za Down sindrom

Najei poremeaji- abnormalnosti na razini fetusa:

1. Fetalni distres
Pad estriola i HPL-a u urinu i serumu majke, danas zamjena Ultrazvuk

2. Erithroblastosis fetalis
Obolenje izazvano inkompatibilnou krvi djeteta i majke Produkcija At majke orijentiranih prema povrinskim Ag eritrocita fetusa Posljedice: destrukcija, anemija, optereeno fetalno srce Stimulacija hematopoeze u kotanoj sri fetusa, guterae i jetre Razaranje elija jetre Smanjena sinteza albumina, smanjen onhotski pritisak Stupanj destrukcije se odreuje preko razine bilirubina u amnionskoj tekuini 3.Gestacioni dijabetes Makrozomija(veliki fetus u fazi gestacije) Uzrok: hipersekrecija inzulina u fetusu Detekcija: mjerenje inzulina u amnionskoj tekuini

Defekti neuralne cijevi Velike koncentracije AFP-a u amnionskoj tekuini u

95 % sluajeva (16 nedjeljA GESTACIJE) DALJA IDENTIFIKACIJA: Ultrazvuk, amniocenteza Ako se dijagnoza postavi prije 20 nedjelje trudnoe, zaustaviti trudnou!

Mjerenje aktivnosti AChE kada fetus ima ovaj defekt

Skrining na Down sindrom-amniocenteza

Opada Majin AFP i protein asociran sa trudnoom Raste HCG Raste nekonjugirani estriol

Ostale analize u amnionskoj tekuini

1. Bilirubin-ispitivanje rizika po fetus Rh inkompatibilnost Posljedica-hemoliza, anemija,prevelika sinteza bilirubina Nekonjugirani bilirubin-max 450 nm u amnionskoj tekuini Rast ovog max-erithroblastosis fatalis Amnionska tekuina-amniocenteza-ubacivanje igle kroz abdominalni i uterini zid majke u amnionsku upljinu

22 nedjelja gestacije(historijat hemolitike bolesti ili pak Seroloka evidencija inkompatibilnosti Skanirati uzorke 350-750 nm Ako poraste A 450, a stariji je fetus, ozbiljnije je obolenje Prisustvo mekonija-ekstremni fetalni distres (350-400 nm)

Masti u surfaktantu
Pluni surfaktant: Lecitin(fosfatidil holin) i fosfatidil glicerol (PG) Skladite se u kasnoj fazi fetalnog razvoja

Dijagn. znaaj: evaluacija zrelosti fetalnih plua, prevencija respiratornog Distress sindroma)
Surfaktant sa PG ima vee stabilizacijske osobine-prisustvo znai zrela plua Mjerenje stabilnosti pjene, povrinskog napona, mikroviskoznosti Kvalitativni esej:test stabilnosti pjene (Fosfolipidi surfaktanta grade stabilne mjehurie u prisustvu etanola)

Priprema amnionske tekuine za mjerenje L/S

Centrifugiranje pri niim brzinama, supernatant drati na +4 ili zalediti Dio fosfolipida izgubljen u talogu Izbjegavati rad sa uzorcima kontaminiranim sa krvlju(rastu fosfolipidi) Nalaz validan ako je prisutan PG

Odreivanje:
Stabilnost pjene(test mijeanja)-stvaranje mjehuria u prisustvu etanola Povrinska tenzija Mikroviskozitet tekuine Interference: krv,mekonij , vaginalni sekreti

Razliit spektar obolenja: Neonatalni problemi Endokrinoloki Gastroenteroloki Uroene mane Poremeaji na nivou DNK Neonatalni: Bebe male teine utica Hipoglikemija Hipokalcemija Neonatalni skrining

Endokrinoloki poremeaji Nemogunost rasta Odgoeni pubertet Poremeaji na nivou adrenalke Poremeaji na nivou tiroidne lijezde Poremeaji na nivou paratiroidne lijezde Dijabetes tipa II kod tinejera Gastroenteroloki poremeaji

Cistina fibroza Netolerancija proteina Netolerancija na ugljene hidrate Nasljedni poremeaji transporta

Problemi sa neonatusima

1.Problem raanja djece manje tjelesne mase 2. utica 3.Hipoglikemija 4.Hipokalcemija(Mg) 5.Neonatalni skrining 6.Dehidratacija

Nezrelost neonatalne jetre-niska aktivnost enzima detoksikacije

Rizici za razvoj kernikterusa: spol, nain poroda, ABO inkompatibilnost, teina , gestaciona starost

Hipoglikemija
Ozbiljna hipoglikemija-permanentno oteenje mozga kod djece
Najee se javlja kod beba malih za svoju starosnu dob, majki dijabetiarki

Kod prijevremeno roene djece hipoglikemija na razini ispod 1,4 mmol/L prvih nedjelja ivota Vrijednost konc glukoze ispod 1,9 mmol/L -indikator ozbiljne hipoglikemije za normalno roenu djecu u prva tri dana ivota Nakon ovog perioda hipoglikemija se definira kao ( 2,2-2,5 mmol/L), poinje tretman kod novoroenadi Test na ketone, ali isti nije pozitivan kod hiperinsulinizma

Dehidratacija

Ukupna tjelesna voda kod bebe- 75% tj .mase Prvih nedjelja nakon roenja kontrakcija ECF-a-bebe gube na teini, poslije dobivaju Funkcija bubrenih tubula nije adekvatna Sposobnost koncentriranja urina loa Maksimum osmolalitet urina = 600 mmol/L Reapsorpcija bikarbonata i glukoze reducirana
Posljedica: Niske koncentracije bikarbonata, glikozurija Hidratacija se ispituje preko mjerenja tj. mase

Nivo kalcijuma
Prilikom roenja, nivo kalcijuma je 1,75-2,00 mmol/L u prvoj nedjelji Kasna neonatalna hipokalcemija izmeu 4-10 dana starosti
Uzrok: Vit D kod majke nizak, nizak Mg-nekad uzrok hiperfosfatemija, problem bubreg

Rast vrijednosti kod odraslih nakon 1,5 do 2 godine starosti Pad kalcijuma manje izraen kod djece dijabetinih majki Prijevremeno roena djeca-depresija u razini kalcijuma seruma Potencijalno: neonatalna tetanija-iritabilnost, konvulzije Neonatalni rahitis Hipokalcemija,defektna mineralizacija kostiju, rast aktivnosti alkalne fosfataze Izraena kod prematurusa uslijed poveanih potreba za kalcijumom, fosfatom, vit D Rijetko uzrok konvulzija Hipomagnezemijauzrok neonatalnih konvulzija, uvijek vezana za kalcij Defekt u crijevnoj apsorbciji magnezijuma Netretirana djeca- opadne do 0,1 mmol

CK(kreatin kinaza)
Carski rez- bebe nii CK MM, CK MB od transvaginalnih Raste aktivnost enzima i rast moe trajati do 10 dana

Potencijalna nutriciona ispitivanja

Albumini-mjera hepatalne zrelosti,marker nutricionog statusa eljezo-brzo se mijenja u prvoj godini ivota Hemoglobin Lipoproteini-mjera nutricionog statusa i genetskog rizika za razvojem koronarnog obolenja arterija

Praktini problemi prilikom rukovanja sa uzorcima ove populacije: Uzorkovanje Volumen Tip uzorka Interferencije Instrumenti

Problemi kod uzorkovanja

Kapilarna krv Volumen Evaporacija Hemoliza Lipemija Bilirubin Tip antikoagulansa

Hematokrit neonatus i mala beba

Efekti evaporacije uzorak 0.1 mL

Referentni opseg/Interpretacija Starost/spol Uticaj majke Nain poroda Nezrelost Nain prehrane Rast Zrelost organa Starosne grupe: Neonatusi- manje od mjesec Beba- 1 mjesec do 2 godine Dijete- 2-12 godina Odraslo dijete 12-18 godina

Problemi sa interpretacijom rezultata-fosfat oFosfat kod malih beba pada u okvire referentnih vrijednosti za odrasle

oRezultati normalni, ali de facto niski za tu dob

oKod djeteta registrovan rahitis nakon par mjeseci

Plazma fosfat

Beba roena majci sa dijagnozom hipotiroidizma 14.06 2005

15.06 TSH 34,8 mU/L FT4 27,3 pmol/L

Majci reeno da su rezultati nenormalni 21.06 2005-neonatalni skrining na suhoj mrlji 3 mU/L-rezultat normalan

Promjene u koncentraciji hormona tiroideje kod normalnih neonatusa

IgM Uticaj majke

AFP (kU/L)
-10 ned 38910-2034000 -8 ned 15960-988900 -6 ned 6548-480800 4 ned 2686-233800 2 ned 1102-113700 0 452-55270 2 185-26870 4 76-13070 5 31-6353 8 13-3089 10 5-1502 12 Ispod 4 do 730 14 Ispod 4 do 355 16 Ispod 4 do 173 18 Ispod 4 do 84 20 Ispod 4 do 41 vie od 8 mjeseci ispod 10

Problem zrelosti

Nain prehrane

Rast

Zrelost organa
Embriogeneza bubrega

8 nedjelja- 200 nefrona

20 nedjelja-350,000 nefrona 28 nedjelja-766000 nefrona Roenje 822,ooo nefrona Brzina glom. Filtracije proporcionalna ukupnoj tjelesnoj povrini od tree godine do srednjih godina Rauna se na bazi konc plazma kreatinina ili za tanije mjerenje koristiti Cr(51) EDTA ili klirens inulina

GFR=kx Ht/Pcr ht=visina K=30 kod prijevremeno roenih beba K=40 kod beba roenih na vrijeme

Problem: vremenski skupljanje

Mjerenja zasnovana na ranim jutarnjim uzorcima i sluajnim Uzorcima Vezati ekskreciju za klirens kreatinina Omjer protein/kreatinin konstantan od 3-16 godina starosti,bez Spolnih razlika Ne moe se precizirati vremenski slijed uzimanja uzoraka

Organizacija laboratorije
Odjel za uzimanje uzoraka Opa pedijatrijska bolnica Neonatalni skrinig Uroene metabolike mane DNK laboratorija Analitiari imaju problem malog volumena uzoraka Teko automatizirati proces Tee raditi Manje optereenje, ali treba brz odgovor esto potrebno prisustvo roditelja

Servis neonatalnog skrininga:

Fenil ketonurija Kongenitalni hipotiroidizam Srpasta anemija +- cistina fibroza +-MCAD Specijalizirna tehnologija: tandem Masena spektrometrija