11

Alternatif Bir Enerji Kayna Olarak

Biyoetanol
(Bioethanol as an Alternative Energy Source)
Mustafa YTOLU*, Murat NAL, Murat GKGZ
Krkkale niversitesi Fen Edebiyat Fakltesi Kimya Blm, 71450, Yahihan, Krkkale
*E-mail: mustafa_yigitoglu@mynet.com

ZET: Dnya nfusunun hzl art ve teknolojinin geliimine bal olarak enerji ihtiyac da her geen gn
artmaktadr. Enerji kayna olarak petrol ve petrol trevlerinin ar kullanm sonucu evresel kirlenme ve sera
etkisinin artmas toplumunu nemli bir ekilde tehdit etmektedir. Fosil yakt kaynaklarnn hzla azalmasndan
dolay yenilenebilir, temiz, srdrlebilir, verimli, dk maliyetli ve gvenli alternatif enerji kaynaklarna
ihtiya vardr. Biyoetanol dnya apnda ulam sektrnde en yaygn olarak kullanlan alternatif bir enerji
kaynadr. Biyoetanol tek bana yakt olarak kullanlabildii gibi, genellikle benzinle eitli yzdelerde
kartrlarak ta kullanlabilmektedir. Aralarda benzinle biyoetanol karmlarnn kullanlmas, petrol
kullanmn ve sera gaz emisyonlarn nemli lde azaltabilir. Biyoetanol, fermantasyon yoluyla eitli ham
maddelerden elde edilmektedir. Bu ham maddeler basit ekerler, niasta ve lignoselloz olarak snflandrlabilir.
Biyoetanol fermantasyonunda serbest ve immobilize edilmi pek ok mikroorganizma kullanlmaktadr. Etanol
retiminde immobilize sistemlerin kullanlmas serbest hcre fermantasyonuna gre rn inhibisyonunun
azalmas, filtrasyonun kolaylamas, tekrar kullanlabilirlii, mikrobiyal kontaminasyon riskinin azalmas,
srekli sistemlerde kullanlabilmesi ve rn verimliliinin artmas gibi pek ok avantajlar salamaktadr.
Anahtar Szckler: Alternatif enerji kaynaklar, biyoetanol, fermantasyon, immobilizasyon, maya.
ABSTRACT: The need for energy is increasing with each passing day, depending on the rapid increase in world
population and developments in technology. The increasing of environmental pollution and greenhouse effect is
a significant threat to society, as a result of excessive use of oil and oil derivatives as a energy source. Due to the
diminishing fossil fuel reserves, alternative energy sources need to be renewable, cleaner, sustainable, efficient,
cost-effective, convenient and safe. Bioethanol is the most commonly used an alternative energy source in the
transportation sector worldwide. Bioethanol can be used alone as a fuel, but usually it can be used to mixed with
gasoline in various proportions. Using bioethanol blended gasoline fuel in vehicles can significantly reduce
petroleum use and greenhouse gas emission. Bioethanol can be produced from different kinds of raw materials
by fermentation. These raw materials are classified such as simple sugars, starch and lignocellulose. Many free
and immobilized microorganisms are used in bioethanol fermentation. The use of immobilized systems for
ethanol production offers many advantages over free cells fermentation such as, reduction of product inhibition,
ease of filtration, reusability, reduction of the risk of microbial contamination, use as a continuous process and
increasing crop productivity.
Key Words: Alternative energy sources, bioethanol, fermentation, immobilization, yeast.

1. GR
Son yllarda dnyadaki petrol rezervlerinin
sanlandan daha hzl bir ekilde sonlanmasna bal
olarak, zellikle tamaclkta kullanlan yaktlarn
ve petrol trevi rnlerin ar kullanm sonucu
evresel kirlenme ve sera etkisinin artmas nemli
bir tehdit oluturmaktadr. Bu sebeple fosil
yaktlarnn hzla azalmasna bal olarak ve
CO
2
nin atmosferdeki deriiminin kontrol edilmesini
salayacak daha temiz, daha gvenilir, yenilenebilir,
dk maliyetli ve fosil yaktlarna olan bamll
azaltacak alternatif enerji kaynaklarna ihtiya vardr
[1-4]. Fosil kkenli yenilenemez enerji kaynaklarna
gre, yenilenebilir enerji kaynaklar oluumlar ok
daha ksa zaman alan kaynaklardr. Bu sebepten
dolay, su, rzgr, gne, jeotermal, gel-git ve aknt,
dalga ve biyolojik ktle (biyoktle) gibi
yenilenebilir enerji kaynaklarnn nemi her geen
gn daha da artmaktadr [5]. Biyoktle enerji
kaynaklar, enerjiye dntrlrken bulunduklar
fiziksel hale gre kat biyoktle, sv biyoktle ve
gaz biyoktle olarak temel ksma ayrlmaktadr.
Sv biyoktleler genellikle tat motorlarnda yakt
hammaddesi olarak kullanldklar iin biyoyakt
olarak isimlendirilirler ve biyoetanol, biyodizel,
12

biyometanol, biyodimetileter, biyoetiltersiyer-
btileter ve bitkisel yalardan olumaktadr [6].
Geen 10 ylda, biyoetanol retimi geleneksel bir
enerji kayna olmamasna ramen ok nemli bir
seenek olarak ortaya kmtr.
Bugn endstriyel lekte etanol,
fermantasyon yoluyla Saccharomyces cerevisiae,
Pichia stipitis ve Kluyveromyces marxianus gibi
mayalar kullanlarak retilmektedir.
Mikroorganizmalarn bir destek zerine tutulmasna
veya bir destein iine hapsedilmesine
immobilizasyon denilmektedir. mmobilize edilmi
mikroorganizmalarla yrtlen fermantasyonun,
serbest mikroorganizmalara oranla; substrat ve rn
inhibisyonunu azaltmas, rnden
mikroorganizmalarn ayrlmasn kolaylatrmas,
birim hacimdeki mikroorganizma younluunun
daha yksek olmas ile yksek rn verimi ve retim
hz elde edilmesi gibi avantajlar salad
bilinmektedir [3,4,7,8]. Serbest ve immobilize
edilmi mayalardan biyoetanol retimiyle ilgili
literatrde pek ok alma mevcuttur [1, 9-15]. Bu
almalarda immobilizasyon sayesinde, yksek
substrat deriimi ile retilen etanolden kaynaklanan
inhibasyonun nlendii, yksek oranda maya
deriimine bal olarak fermantasyon zamanlarnn
ksald, rn veriminin ve rn yzdesinin artt,
hcrelerin rn retim potansiyelinde kayp
olmakszn ok uzun sreler saklanabildii
anlalmtr [4,10,16,17].
2. BYOETANOL
Etanol, molekl arl 46,07 g/mol, younluu
0,789 g/cm
3
, erime noktas -114
o
C ve kaynama
noktas 78
o
C olan uucu, yanc, renksiz bir svdr.
Sentetik etil alkol, ham petrol, doal gaz veya
kmrden petrokimyasal olarak etilenin hidrasyonu
yoluyla elde edilmektedir. Biyoetanol ise, tahllar,
melas, meyveler, eker kam z, selloz ve ok
sayda dier kaynaklardan mikroorganizmalar
tarafndan ekerlerin fermante edilmesiyle biyolojik
olarak retilmekte ve sonra damtmayla elde
edilebilmektedir. Mayalarn (rnein
Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces bayanus,
Pichia stipitis) ve bakterilerin (rnein
Zymomonas mobilis, Clostridium ljungdahlii..)
belirli trleri ekerleri eitli yollardan etanol ve
karbondioksite evirmektedirler [18]. Hem
fermantasyon hem de sentetik olarak elde edilen
etanol kimyasal olarak ayndr [19,20].
Biyoetanol, yakt olarak dorudan kullanlabildii
gibi benzinle kartrlarak da kullanlmaktadr [21].
Etanol, mkemmel bir benzin karm bileeni olarak
yksek oktan saysna, yksek alevlenme hzna ve
yksek buharlama ssna sahiptir. Bu zellikleri,
daha ksa yanma sreleri salayarak, bu sayede iten
yanmal motorlarda benzine gre daha yksek verim
alnmasn ve bir aracn en iyi performansla yakt
sistemini temiz tutarak almasna yardmc olur
[22,23]. Etanoln buharlama ss benzinden daha
fazladr, buna karlk alev scakl ise daha
dktr. Ayrca, %35 oksijen ieren oksijenli bir
yakt olduu iin benzinin aksine yanmak iin daha
az havaya ihtiya duymaktadr. Biyoetanol, zellikle
ocuklar ve yallar iin tehlike oluturan
karbonmonoksit, uucu organik bileikler, toksik
maddeler ve solunabilir partikllerin yaylmlarn
azaltmaktadr [24-26].

2.1. Biyoetanoln Dnyadaki retim ve Kullanm
Potansiyeli
2010 ylnda dnya genelinde retilen
biyoyakt (biyoetanol+biyodizel) miktar 59,26
milyon ton edeeri petroldr (mtep)(ekil 1.1.). Bu
retimde en byk pay 25,35 mtep retimle
Amerika Birleik Devletleri (ABD)nindir. Toplam
retimin % 43n tek bana karlayan ABDden
sonraki en byk retici % 26 ile Brezilyadr.
Avrupada ise Almanya, Fransa ve spanya en byk
biyoyakt reticileri konumundadrlar [27].
lkemizde 2000li yllara kadar biyoyaktlarn
retimine ynelik alma says snrldr. Bununla
birlikte, zellikle petrol fiyatlarndaki ar artlar,
dnyadaki deiimlere uyum salamak ve Avrupa
Birlii uyum srecindeki gelimeler erevesinde
zellikle son 10 ylda biyodizel bata olmak zere
biyoyakt retimi konusunda nemli gelimeler
salanmtr. zellikle tarm sektrnde iletmelerin
kendi ihtiyalarn karlamak amacyla biyodizel
retimi son yllarda olduka yaygnlam olmasna
ramen Trkiyede retilmekte olan biyoetanol
halen yrrlkteki zel tketim vergisi muafiyetinin
yzde 2 ile snrlandrlmas sebebiyle yalnzca bu
oranda benzinle harmanlanarak satlmaktadr
[28,29].

ABD
43%
Arjantin
3%
Almanya
5%
Dier
15%
spanya
2%
Brezilya
26%
in
2%
Fransa
4%

ekil 1. Dnyadaki lkelerin biyoyakt retme
oranlar [27]
13

Trkiyede yalnzca firma, Tarmsal Kimya
Teknolojileri (TARKM) Sanayi ve Ticaret A..,
Tezkim Tarmsal Kimya (TEZKM) naat Sanayi
ve Ticaret A.. ve Konya eker Sanayi ve Ticaret
A.., tarafndan aralarda yakt olarak
kullanlabilecek nitelikte susuz biyoetanol
retilmektedir. lkemizde son yllarda yukarda
saydmz firmalar haricinde biyoetanol retimi
yapan kurulular sadece eker fabrikalardr. eker
fabrikalarnda biyoetanol, eker pancarndan ekerin
retim srecinde ham erbet, sulu erbet ve koyu
erbet gibi ara rnlerin veya melasn
fermantasyonu ile elde edilmektedir. [30-35].
3. FERMANTASYON
Fermantasyon biyokimyaclar tarafndan,
organik bileiklerin paralanmas sonucu enerji
retimi olarak anlamlandrlmasna ramen,
endstriyel mikrobiyolojide ok daha geni ekilde
ifade edilmektedir. Fermantasyon kelimesi biyolojik
deiim anlamyla tannmakta ve yaygn ekilde
kullanlmaktadr. En genel haliyle ise Tek
mikroorganizma ile belirli en uygun koullarda
gerekletirilen biyolojik deiimler yoluyla retim
teknolojisi eklinde tanmlanabilir [36,37].
Fermantasyon teknolojisindeki elde edilen
gelimeler ile antibiyotikler, vitaminler, bitki
hormonlar, aminoasitler ve enzimler gibi yeni
maddeler retilebilmektedir.
Fermantasyon srecinin basamaklar
aadaki ekilde zetlenebilir [36];
1. nokulumun hazrlanmas srecinde ve
endstriyel lekte retimin yaplaca
fermanterde kullanlmak zere organizmann
geliimi iin kullanlacak ortamn bileiminin
belirlenmesi.
2. Byme ortamnn, fermanterin ve yardmc
paralarn sterilizasyonu.
3. Yeterli miktarda aktif, saf kltrn retim
yapmak amacyla fermante verilmesi.
4. rn oluumu iin uygun koullar altnda
fermanterde mikroorganizmann bymesi.
5. rnlerin ortamdan ayrlmas ve
saflatrlmas.
6. Mikroorganizma tarafndan retilen atk
rnlerin yok edilmesi.

Fermantasyonda esas ama mmkn olan en
ksa srede, en az hammadde kullanarak en fazla
rn elde edilmesidir. Uygulanan ilem ve kullanlan
mikroorganizmaya bal olarak gerek retim
ortamnn yaps, gerekse fermantasyon sreleri
farkllk gstermektedir. Ayrca
mikroorganizmalarn geliimi ve maksimum rn
elde edilmesi iin gerekli en uygun retim ortam
tam olarak belirlenmek zorundadr. Eer retim
ortam uygun seilmemise ya mikroorganizma
bymesi az olacak ya da fermantasyon rn
verimli elde edilemeyecektir. deal bir retim
ortamnn; substrattan rn veya biyoktleyi hzl
ve maksimum verim ile retebilmesi, istenmeyen
yan rnlerin miktarnn dk olmas, kararlln
uzun sre koruyabilmesi, hazrlanmas ve
sterilizasyonu srasnda sorunlara neden olmamas,
zellikle fermantasyon srasnda havalandrma,
kartrma, saflatrma aamalarnda herhangi bir
olumsuzluk oluturmamas gibi zellikleri tamas
istenmektedir. Mikroorganizmalarn retimi iin
ihtiya duyulan besinler u ekilde sralanabilir
[36,37];
a. Mikroorganizmann yapsn meydana getiren
karbon, azot, hidrojen ve oksijen gibi
elementleri ieren besinler.
b. Mikroorganizma iin ikinci derecede nemli
olan magnezyum, fosfor, kkrt, potasyum
gibi elementleri salayan besinler.
c. Mikroorganizmann yapsnda enzimlerin
ilevi iin gerekli vitaminleri salayan
besinler.
d. oalma iin gerek duyulan eser elementleri
(Fe, Zn, Cu, Mn, Co, Mo, B v.b) salayan
besinler.

3.1. Etanol Fermantasyonu
Alkol fermantasyonu olarak da adlandrlan
etanol fermantasyonu, bata glikoz olmak zere
deiik karbonhidratlardan mikroorganizmalarn
enerji retmek amacyla eitli metabolik
admlardan geerek rn olarak etanol ve
karbondioksit oluturduklar biyolojik bir sretir.
Alkoll ieceklerde kullanlan ve yakt olarak
kullanlacak etanoln byk ounluu, etanol
fermantasyonu ile retilmektedir.
Mikroorganizmalardan bata Saccharomyces
cerevisiae, Saccharomyces bayanus, Kluyveromyces
marxianus, Pichia stipitis v.b. mayalar ve
Zymomonas mobilis, Clostridium ljungdahlii v.b
bakteriler en iyi bilinen etanol reticileridir
[3,4,18,38].
Etanol fermantasyonundaki metabolik dng
glikolizi iermektedir. Glikoz maya hcrelerine
girdiinde stoplazmada bir seri tepkimeye girerek
privata dnr. Maya hcreleri oksijensiz
solunum yapabildikleri iin, privik asit
kademesinden daha ileri bir paralanmay
gerekletirebilirler. Fermantasyonda son elektron
alcs, mayalarda etanol hayvanlarda laktik asit, baz
bakterilerde gliserol ya da sirke bakterilerinde asetik
asittir. Mayalardaki glikoliz olaynda, privik asit
nce CO
2
gaz kararak asetaldehite dnr. Daha
sonra da asetaldehit etanole indirgenir [39]. ekil
1.2de grlen bu oksijensiz solunuma Etanol
Fermantasyonu denir.

14

Glikoz
Glikoliz
2 ADP + 2 P 2 ATP
C
C
O
CH
3
O
O
2 pirvat
C
H
O
CH
3
2 asetaldehit
2 NAD
+
2 NADH
+2 H
+
HC
H
OH
CH
3
2 etil alkol
2 CO
2
ekil 2. Glikozun glikoliz dngs ile etanole
dnm mekanizmas
Etanol fermantasyonunda bata glikoz olmak
zere eitli karbonhidratlar kullanlmaktadr.
Gnmzde ucuz karbonhidrat kaynaklarndan
etanol retimine olan ilgi dnya apnda hzla
artmaktadr [40]. Son yllarda, msr, eker kam,
soya fasulyesi gibi yenilenebilir enerji kaynaklardan
etanol retimi yaygnlamaktadr. Etanol
fermantasyonunda kullanlan hammaddeler ana
gruba ayrlabilir: (1) eker ieren hammaddeler
(rnein, eker kam, eker pancar, sprge dars
ve meyveler), (2) niastal hammaddeler (rnein
msr, buday, pirin, patates ve arpa) ve (3)
lignosellozik biyoktleler (rnein, tarm ve aa
ilemedeki atk rnler, im, odun, saman ve otlar).
Genel olarak, etanol, birinci nesil olarak adlandrlan
niasta ve eker gibi hammaddelerden
retilmektedir, fakat bu maddelerin pahal oluu
dezavantajl ynlerini oluturmaktadr [41-46].
Etanol fermantasyonunda bu hammaddelere
alternatif 2. nesil atk biyoktle materyalleri
kullanlabilir ve bu hammaddeler balca
lignosellozik atklardr [41,47-53]. Lignosellozik
hammaddelerin en byk kaynaklar alt karbonlu
heksoz ve be karbonlu pentoz ekerleridir.
Lignosellozik hammaddeler selloz, hemiselloz
ve lignin gibi karbonhidrat polimerlerinin bir
birleimidir ve bu yzden seyreltik asitler ve
enzimlerle hidroliz edilerek fermante edilebilir
ekerlere dntrlebilmektedir [54,55].
3.1.1. Direkt Fermante Edilebilir ekerlerden
Biyoetanol retimi
Biyoetanol retiminde eker kayna olarak
genellikle eker kam, eker pancar ve sprge
dars kullanlmaktadr. eker endstrisinin yan
rn olan melas yaklak %45-50 civarnda
fermante edilebilir eker iermektedir [56].
Kopsahelis ve arkadalar bira retilen tahl
artklarna tutuklanm Saccharomyces cerevisiae ile
substrat olarak kullandklar melastan etanol
retmilerdir. Etanol retimine, scakln,
immobilizasyon materyallerinin zelliklerinin ve
melas ierisindeki eker deriiminin etkisini
aratrmladr. En iyi biyoetanol retimini, taze tahl
artklarna immobilize ettikleri mayalardan 187 g/L
eker ieren besi ortamnda 30
o
Cde hacimce %9,03
ve retim hzn 68,48 g/Lgn olarak bulmulardr
[57].
Farfan ve arkadalar henequen bitkisinin lif
sular ve melas karmn eker kayna olarak
kullanarak Saccharomyces cerevisiae,
Kluyveromyces marxianus ve ikili maya karmndan
etanol retmilerdir. Etanol retimine ikili maya
karmn ve lif suyu-melas orannn etkisini
aratrmlardr. En iyi etanol retimini %25 S.
cerevisiae- %75 K. marxianus ieren maya karm
ile ktlece %10 lif suyu ekeri ve ktlece %12 melas
ekeri karm ieren fermantasyon ortamnda
hacimce %5,22 olarak belirlemilerdir [58].
Liu ve arkadalar kalsiyum aljinata
tutuklanm Saccharomyces cerevisiae ile sprge
dars saplarnn sularn eker kayna olarak
kullanarak 10 litrelik bir reaktrde etanol
retmilerdir. Etanol retimine fermantasyon
ortamna eklenen inorganik tuzlarn etkisini
aratrmlardr. Tuzlarn en uygun bileimini %0,2
(NH
4
)
2
SO
4
, %0,05 MgSO
4
ve %0 K
2
HPO
4
olarak
belirlemilerdir. En iyi etanol retimini 5 saat
sonunda hacimce %6,2 ve fermantasyon verimini
%91,61 olarak bulmulardr [1].
Liang ve arkadalar eker kam paralarna
tutuklanm Saccharomyces cerevisiae ile eker
kam suyu ve melas karmn eker kayna
olarak kullanarak etanol retmilerdir. Tutuklanm
mayalar, aktivitelerinde herhangi bir kayp
olmakszn 10 defa kullanlabilmiledir. En yksek
etanol retimi, 89,73 g/L, retim hz 62,79 g/Lgn
ve fermantasyon verimi %99,80 olarak belirlenmitir
[59].
Gomez ve arkadalar Rio, M81E ve Della
adn verdikleri tatl, Tato ve Thor adn verdikleri
yiyecek sprge darlarndan elde ettikleri ekeri,
substrat kayna olarak kullanarak Saccharomyces
cerevisiae ile etanol retmilerdir. Sprge darlar
ekstrakte edilmi ve sonuta frktoz, skroz ve
glikoz ieren bir karm oluturulmutur.
Fermantasyon ortamnda azot kayna olarak
sprge darlarnda bulunan serbest amino
kullanlmtr. En yksek etanol retimi Rio ad
verilen sprge dars ekstrakt ile 56,36 mL/L,
fermantasyon verimi ise Tato olarak adlandrlan
sprge dars ekstrakt ile %89,75 olarak
bulunmutur [60].
Siqueira ve arkadalar soya fasulyesi
melasndan elde ettikleri ekeri substrat kayna
olarak kullanarak Saccharomyces cerevisiae ile
etanol retmilerdir. Melas mayalar tarafndan
fermante edilebilir %28,4 (w/w) skroz
iermektedir. Etanol retimine eker deriiminin,
besi ortamna eklenen maddelerin etkisini
aratrmlardr. MgSO
4
ve NH
4
NO
3
gibi maddelerin
15

etanol retimin azalttklarn belirlemilerdir.
Ktlece %30 eker ieren melas ile en yksek etanol
retim hz 1,867 g/Lsaat ve fermantasyon verimi
ortalama %40,97 olarak bulunmutur [61].

3.1.2. Niasta eren Maddelerden Biyoetanol
retimi
Niasta, ok nemli ve doada bol olarak
bulunan farkl oranlarda amiloz ve amilopektin
polimerlerinin bir bileimi olan doal kat bir
substrattr. zellikle mantarlar olmak zere pek ok
mikroorganizma niastay hidroliz edebilmektedir,
ancak genellikle niasta etkin bir ekilde hidroliz
edildikten sonra kullanlmaktadr. Niastal
maddeler, su ile stlarak etkiletirilir ve hidroliz
edilir. Bu ekilde elde edilen hidrolize niastada
mikroorganizmalar tarafndan fermante edilebilir
ekerlere dntrlm olur [56].
Hashem ve arkadalar patates niastasn 100
o
C %1 H
2
SO
4
(v/v) ile hidrolize ettikten sonra elde
ettikleri eker ile Saccharomyces cerevisiae ile
etanol retmilerdir. Fermantasyon ortamna ZnCl
2

ve NH
4
NO
3
eklenmesinin ve scakln etanol
retimine etkisini incelemilerdir. Maksimum etanol
retimi 36 saat sonunda 35
o
Cde 0,4 g/L ZnCl
2
ieren fermantasyon ortamnda 5,52 g/L olarak
bulunmutur [62].
Amutha ve arkadalar Cassava aacnn
kklerinden elde ettikleri niastay -amilaz enzimi
yardmyla hidroliz etmilerdir. Elde ettikleri 150
g/L eker ile kalsiyum aljinata immobilize edilmi
Saccharomyces diastaticus ve Zymomonas mobilis
karm ile etanol retmilerdir. mmobilize
krelerin fermantasyon ortamna orann hacimce
%20 olarak almlardr. Yalnz S. diastaticus
immobilize kreler ile 37,5 g/L, S. diastaticus ve Z.
mobilis karm ile 46,7 g/L, serbest
mikroorganizma karm ile 34,5 g/L etanol
retmilerdir. Mikroorganizma karm immobilize
edilmi krelerden srekli fermantasyonda etanol
retiminin 53,5 g/Lye kadar ulatn bulmulardr
[63].
Rattanachomsri ve arkadalar niasta
retiminde yan rn olarak kan Cassava kspesini
Aspergillus nigerden rettikleri selllaz, pektinaz
ve hemiselllaz ieren enzim karm ile 48 saat 40
o
C hidroliz etmilerdir. Sonuta 1 g Cassava
kspesinden fermante edilebilir 716 mg glikoz ve 67
mg ksiloz elde etmilerdir. %4 (w/v) Cassava
kspesi ieren fermantasyon ortamnda Candida
tropicalis ile etanol retmiler ve 30 saat sonunda
etanol deriimini 14,3 g/L, retim hzn 0,48 g/Lh
ve fermantasyon verimini %93,7 olarak
belirlemilerdir [64].
Jamai ve arkadalar (niasta1) msr
niastasn -amilaz enzimi yardmyla ile hidroliz
etmilerdir. Sonuta niastadan %96 verimle etanol
retiminde kullanlacak eker elde etmilerdir. %9
(w/v) znebilir niasta ieren fermantasyon
ortamnda 65 saat sonunda etanol deriimini 43,1
g/L ve retim hzn 0,65 g/Lsaat olarak
bulmulardr [9].
Yamada ve arkadalar -amilaz ve
glikoamilaz genleri ile rekombinant eit
Saccharomyces cerevisiae suu ile niasta
atklarndan etanol retmilerdir. MT8-1SS ve
NBRC1440SS ad verilen mayalar atk niastay
srasyla %58 ve %53 hidroliz etmiler ve sonuta
84 saat sonunda 26 ve 28 g/L etanol retmilerdir.
MN8140SS adn verdikleri maya atk niastay %89
hidroliz etmi ve 84 saat sonunda 39 g/L etanol
retmitir. MN8140SS suunun etanol retim hzn
dierlerine oranla 1,5 kat fazla bulmulardr [65].

3.1.3. Lignosellozik Biyoktlelerden Biyoetanol
retimi
Lignoselloz, bitki hcre duvarlarnn iinde
selloz mikrofibrilleri, lignin, hemiselloz ve
pektinden oluan bir yapdr. Bitki materyalleri her
bir kimyasal bileikten deiik oranlarda
iermektedir. Lignosellozun paralanarak
kullanmn snrlayan iki nemli unsur vardr; (I)
sellozun, selloz 1-4 olarak bilinen drt tannm
kristal yaps vardr. eitli kimyasal ya da termal
ilemlerle bu kristal yaplar amorf hale getirilebilir
veya (II) sellozu paralayarak fermante edilebilir
ekerlere evirmek iin hcre ii ve d selllaz
veya sellobiaz gibi farkl enzimler gerekmektedir
[56,66].
Lignosellozik malzemeler bol ve ucuz bir
kaynak olduu iin sv ulam yaktlarnn srekli
retimine destek verebilecei dnlmektedir[67].
Sert aa ve bitki artklarndaki hemisellozda
bulunan en nemli eker 5 karbonlu ksilozdur,
bundan sonra en ok glikoz bulunmaktadr. 6
karbonlu ekerlerin yannda hemisellozda bulunan
ksilozunda biyoetanol retiminde kullanlmas
fiyatlar nemli lde azaltacaktr [68].
Gupta ve arkadalar Prosopis juliflora bitkisi
artklarn H
2
SO
4
ile hidroliz etmilerdir. En uygun
H
2
SO
4
deriimini %3 (v/v) olarak belirlemilerdir.
Daha sonra oluan sellozik artklar selllaz ve -
glukosidaz enzim karmyla hidroliz etmilerdir ve
elde ettikleri pentoz ekerlerinden Pichia stipitis ve
Saccharomyces cerevisiae mayalar ile etanol
retmilerdir. Maksimum enzimatik hidroliz oran
%82,8 olarak bulunmutur. 18,24 g/L eker ieren
hemisellozik hidrolizattan P. stipitis mayas ile
etanol retimini 7,13 g/L, retim hzn 0,3 g/Lsaat
ve verimi 0,39 g/g olarak bulmulardr. Buna
karlk 37,47 g/L eker ieren sellozik
hidrolizattan S. cerevisiae mayas ile maksimum
etanol retimini 18,52 g/L, retim hzn 1,16
g/Lsaat ve verimi 0,49 g/g olarak belirlemilerdir
[69].
Ballesteros ve arkadalar kavak, okalipts,
sprge dars, buday saman ve Brassica carinata
bitkisi artklarn hidrolize ederek bunlardan
16

Kluyveromyces marxianus mayas ile etanol
retmilerdir. Artklar ilk olarak H
2
SO
4
ile hidroliz
etmilerdir. Daha sonra elde edilen sellozik
hidrolizat selllaz enzimi ile tekrar hidroliz ederek
ayn ortamda etanol retmilerdir. Btn artklar iin
elde ettikleri etanol retimini 16,2-19,0 g/L ve etanol
verimini 0,31-0,36 g/g aralnda deien deerlerde
bulmulardr [70].
Taherzadeh ve arkadalar hu ve ladin aac
artklarn seyreltik asit ile hidroliz ederek, elde
ettikleri ekerlerden Saccharomyces cerevisiae
mayas ile etanol retmilerdir. Hu aac
artklarndan S. cerevisiae tarafndan fermante
edilebilir 39 g/L glikoz elde edilmitir. Hu aac
hidrolizatndan 10000 mL/saat besleme hznda 60
saat sonunda 48 g etanol retmilerdir [71].



3.2. mmobilize Mayalar Kullanlarak Biyoetanol
retimi
Mikroorganizma immobilizasyonu; istenilen
katalitik aktivitenin varlnda gerekli blgelere
mikroorganizmalarn yerlemesi veya fiziksel
hapsolmas olarak tanmlanr. mmobilizasyon
serbest mikroorga- nizmalarla karlatrldnda,
mikroorganizmalarn kararlln arttrmas, yksek
hcre younluu dolaysyla fermantasyon verimini
arttrmas, dzenlemenin dk maliyeti, tekrar
tekrar kullanlabilmesi, srekli fermantasyona uygun
olmas gibi avantajlar sebebiyle fermantasyon
almalarnda byk neme sahiptir. Son yllarda,
yakt etanol retimi iin fermantasyon ilemlerinde
immobilize mikroorganizma teknolojisine daha ok
nem verilmektedir. mmobilize hcre sisteminin
fermantasyon performansnda nemli bir rol
oynad kabul edilmektedir [4,7,72-79].
mmobilize mayalardan biyoetanol retim sreci
ekil 4.te gsterilmitir.


ekil 3. mmobilize mayalardan biyoetanol retim sreci
Mikroorganizmalarn immobilizasyonu iin organik
veya anorganik materyaller, doal veya sentetik
polimerler olmak zere eitli destekler kullanlmaktadr.
mmobilizasyon iin kullanlan desteklere; zm
kabuu[80], portakal kabuu[81], sprge dars[17] gibi
organik materyaller, mineral kil[82] ve -almina[83] gibi
anorganik materyaller, sodyum aljinat[4,10], kitosan[84],
- karragenan [85,86] gibi doal veya poli(vinil
alkol)[87], poli(akril amit)[88], poliretan[89] gibi
sentetik polimerler rnek olarak verilebilir. Bu destek
materyalleri ile yaplan almalardan bazlar ve retilen
biyoetanol miktarlar yle zetlenebilir.
Yu ve arkadalar doal sprge darsna
Saccharomyces cerevisiae hcrelerini adsorpsiyon
Polimer
zeltisi
Maya hcreleri
Stok
Kltr
Erlen
Kltr
Polimer+Maya
Fermanter
Immobilize Mayalar
Hammadde
ETANOL
apraz
Balayc
Damtma Susuzlatrma
n Bytme
Ortam
12

yoluyla immobilize etmilerdir. Kesikli fermantasyon
deneylerinde balang eker deriimi 200g/L olduunda
fermantasyonun 16 saatte tamamlandn ve etanol
verimi ve etanol retim hzn srasyla 4,9 g/g ve 5,72
g/L.saat olduunu bulmulardr. mmobilize hcrelerin
etanol retim hznn serbest hcrelerden 2,24 kat daha
byk olduunu belitmilerdir [17].
Chendel ve arkadalar sya dayankl
Saccharomyces cerevisiaey eker kam saplarna
immobilize etmiler ve maksimum etanol retimini 22,85
g/L, etanol verimini ise 0,45 olarak bulmulardr [90].
Castellar ve arkadalar da karbon kayna olarak
glikoz kullanarak Saccharomyces bayanus ile etanol
retimine ortama eklenen zeolit miktarnn etkisini
incelemilerdir. 220-350 g/L aralnda glikoz
kullandklar fermantasyonun sonunda 90-120 g/L etanol
retimine ulamlardr. Ayrca etanol verimi 0,39-0,43 ve
etanol retim hz da 1,5 -3,0 g/L.saat aralnda
deimektedir [91].
Nigam ve arkadalar agara Saccharomyces
cerevisiae immobilize ederek yaptklar fermantasyonda
255 g/L glikoz kullandklarnda 94.4 g etanol rettiklerini
belirtmiler ve etanol verimini 0,37 olarak bulmulardr
[92].
Yine Nigam yapt baka bir almada
Saccharomyces cerevisiaey -karregenana immobilize
ettikten sonra srekli fermantasyonda kullanm ve
yaklak 48 g/L etanol rettiini bildirmitir [93].
Guo ve arkadalar K. marxianus ve Saccharomyces
cerevisiae kltr karmn aljinata immobilize etmiler
ve 100 g/L toplam ekerden serbest K. Marxianus % 3,8
(v/v) etanol retirken, immobilize kark kltrn % 5,3
(v/v) etanol rettiini bulmulardr [94].
Baptista ve arkadalar iki farkl Saccharomyces
cerevisiae mayas suunu poliretan kpk materyaline
immobilize ettikten sonra srekli sistemde etanol
retiminde kullanmlardr. 100g/L glikoz kullanarak
yrttkleri fermantasyon ileminde 28 ve 40 g/L etanol
retirken etanol retim hzlarn ise 11 ve 16 g/Lsaat
olarak bulmulardr [95].
ztop ve arkadalar hidroksimetilmetakrilat
/akrilamit hidrojellerine Saccharomyces cerevisiae
immobilize ederek yaptklar fermantasyonda,
hidrojeldeki hidrofilik karakteri arttran akrilamit yzdesi
arttka etanol retiminin arttn ve 3-6 g/L/g jel
aralnda olduunu bulmulardr [96].
Gkgz ve Yiitolu poli(N-vinil-2-pirolidon)u
karboksimetilselloza farkl oranlarda alayarak elde
ettikleri a kopolimerlere Saccharomyces cerevisiae
immobilize etmiler ve immobilize Saccharomyces
cerevisiaey etanol fermantasyonunda kullanmlardr.
Kopolimerdeki poli(N-vinil-2-pirolidon) yzdesi
arttnda ve balang glikoz deriimi 100g/L olduunda,
etanol retiminin 46,4 g/Lden 59,3 g/Lye ykseldiini
ve en yksek etanol retim hznn 1,75-2,25 g/Lsaat
aralnda olduunu bulmulardr. Ayrca maya
immobilize edilmi sistemlerin aktivitelerini kaybetmeden
4 kez tekrar tekrar kullanlabilidiini belirtmilerdir [97].
nal ve Yiitolu yaptklar almada sodyum
aljinat-a-poli(N-vinil-2-pirolidon) kopolimerlerine
Saccharomyces cerevisiae immobilize ederek, maya
immobilize edilmi krelerin etanol retimleri zerine
alama yzdesinin, apraz balayc deriiminin ve
immobilize maya miktarnn etkisini aratrmlardr. En
yksek etanol retim miktar, retim hz ve verimini ise
srasyla 69,68 g/L, 8,71g/Lsaat ve 0,697 g/g olarak
bulmulardr [98].

4. SONU VE NERLER
Yurtd petrol alm miktarnn azaltlmas ve
evrenin korunmas bakmndan lkemizde biyoetanol
retiminin ve kullanmnn yaygnlatrlmas, yasal
olarak tevik edilerek desteklenmesi son derece
nemlidir.
Kaynaklar
[1] Liu, R., Li, J., Shen, F., Refining bioethanol from
stalk juice of sweet sorghum by immobilized yeast
fermentation. Renew. Energ., 33, 11301135,
2008.
[2] Staniszewski, M., Kujawski, W., Lewandowska,
M., Ethanol production from whey in bioreactor
with co-immobilized enzyme and yeast cells
followed by pervaporative recovery of product
Kinetic model predictions. J. Food Eng., 82, 618
625, 2007.
[3] Bai, F.W., Anderson, W.A., Moo-Young, M.,
Ethanol fermentation technologies from sugar and
starch feedstocks. Biotechnol. Adv., 26, 89105,
2008.
[4] Najafpour, G., Younesi, H., Ismail, K.S.K.,
Ethanol fermentation in an immobilized cell
reactor using Saccharomyces cerevisiae.
Bioresource Technol., 92, 251260, 2004.
[5] Anonim, Properties of fuels,
http://www.afdc.energy.gov/afdc/pdfs/fueltable.pd
f. (Eriim tarihi: 11.10.2011).
[6] Ar, F.F., Biyoyaktlar Tehdit mi-Frsat m?,
Mhendis ve Makina, 49: 3-9, 2008.
[7] Kourkoutas, Y., Bekatorou, A., Banat, I.M.,
Marchant, R., Koutinas, A.A., Immobilization
technologies and support materials suitable in
alcohol beverages production: a review. Food
Microbiol., 21, 377397, 2004.
[8] Isono, Y., Araya, G.-., Hoshino, A.,
Immobilization of Saccharomyces cerevisiae for
ethanol fermentation on -alumina particles using a
spray-dryer. Process Biochem., 30, 743746, 1995.
[9] Jamai, L., Ettayebi, K., El Yamani, J., Ettayebi,
M., Production of ethanol from starch by free and
immobilized Candida tropicalis in the presence of
-amylase. Bioresource Technol., 98, 27652770,
2007.
13

[10] Liu, C.Z., Wang, F., Ou-Yang, F., Ethanol
fermentation in a magnetically fluidized bed
reactor with immobilized Saccharomyces
cerevisiae in magnetic particles. Bioresource
Technol., 100, 878882, 2009.
[11] Kannan, T.R., Sangiliyandi, G., Gunasekaran, P.,
Improved ethanol production from sucrose by a
mutant of Zymomonas mobilis lacking sucrases in
immobilized cell fermentation. Enzyme Microb.
Tech., 22, 179-184, 1998.
[12] Telli-Okur, M., Eken-Saraolu, N., Fermentation
of sunflower seed hull hydrolysate to ethanol by
Pichia stipitis. Bioresource Technol., 99, 2162
2169, 2008.
[13] Guo, G.L., Chen, W.H., Chen, W.H., Men, L.C.,
Hwang, W.S., Characterization of dilute acid
pretreatment of silvergrass for ethanol production.
Bioresource Technol., 99, 60466053, 2008.
[14] Ruanglek, V., Maneewatthana, D., Tripetchkul, S.,
Evaluation of Thai agro-industrial wastes for bio-
ethanol production by Zymomonas mobilis.
Process Biochem., 41, 14321437, 2006.
[15] Phisalaphong, M., Budiraharjo, R., Bangrak, P.,
Mongkolkajit, J., Limtong, S., Alginate-loofa as
carrier matrix for ethanol production. J. Biosci.
Bioeng., 104, 214217, 2007.
[16] Plessas, S., Bekatorou, A., Koutinas, A.A.,
Soupioni, M., Banat, I.M., Marchant, R., Use of
Saccharomyces cerevisiae cells immobilized on
orange peel as biocatalyst for alcoholic
fermentation. Bioresource Technol., 98, 860865,
2007.
[17] Yu, J., Zhang, X., Tan, T., An novel
immobilization method of Saccharomyces
cerevisiae to sorghum bagasse for ethanol
production. J. Biotechnol., 129, 415420, 2007.
[18] Madigan, M.T., Martinko, J.M., Parker, J.,
Nutrition and metabolism. Brock biology of
microbiology, 9th edition. Prentice Hall, New
Jersey, 2000.
[19] Mills, G.A., Ecklund, E.E., Alcohols as
Components of Transportation Fuels. Annu. Rev.
Energy, 12, 4780, 1987.
[20] Berg, C., World Fuel Ethanol Analysis and
Outlook, F.O. Licht, April 2004.
http://www.distill.com/World-Fuel-Ethanol-A&O-
2004.html (Eriim tarihi: 24.08.2011).
[21] Lodgsdon, J.E., Ethanol. In the Encyclopedia of
Chemical Technology Ed by J.I. Kroschwitz, John
Wiley & Sons New York, 1994.
[22] Kumar, S., Singh, N., Prasad, R., Anhydrous
ethanol: A renewable source of energy. Renew.
Sust. Energ. Rev., 14, 18301844, 2010.
[23] Balat, M., Global bio-fuel processing and
production trends. Energ. Explor. Exploit., 25,
195218, 2007.
[24] Mala, J., Freire, F., Renewability and life-cycle
energy efficiency of bioethanol and bio-ethyl
tertiary butyl ether (bioETBE): assessing the
implications of allocation. Energy, 31, 33623380,
2006.
[25] Wang, M., Saricks, C., Santini, D., Effects of fuel
ethanol use on fuel-cycle energy and greenhouse
gas emissions. Argonne (IL): Argonne National
Laboratory, 1999.
[26] Bowman, C. T., Control of combustion-generated
nitrogen oxide emissions: Technology driven by
regulation. Symposium (International) on
Combustion, 24, 859878, 1992.
[27] Anonim, BP Statistical Review of World Energy,
June 2011 http://www.bp.com/statisticalreview
(Eriim tarihi: 22.11.2011).
[28] Tadan, K.,Biyoyaktlarn trkiye tarm rnleri
piyasalarna olas etkileri biyobenzin- etanol,
Tarm ve mhendislik, 75, 2729, 2005.
[29] Trkiyeden: Yakt Biyoetanolnn Trkiye in
Stratejik nemi,
http://www.gidasanayii.com/modules.php?name=N
ews&file=article&sid=12421 (Eriim tarihi:
25.09.2011)
[30] Anonim, Tarkim hakknda,
http://www.tarkim.com.tr/biyoetanol/index.php
(Eriim tarihi: 29.06.2011)
[31] Anonim, Tezkim hakknda ve rnlerimiz,
http://www.tezkim.com/hakkimizda.html (Eriim
tarihi: 12.07.2011)
[32] Oru, N., eker Pancarndan Alternatif Yakt
Kayna Olarak Biyoetanol retimi: Eskiehir
eker-Alkol Fabrikas, VII. Ulusal Temiz Enerji
Sempozyumu, 17-19 Aralk 2008, stanbul.
[33] Karaosmanolu, F.,Yakt Alkol: Mevcut Durumu
ve Gelecei, Su ve evre Teknolojileri, 5460,
2008.
[34] Recep Konuk, Konya eker Fabrikas Yn. Krl.
Bk. ve Pankobirlik Genel Bakan, Biyoetanol
lke iin bir frsattr,
http://www.globalenerji.com.tr/hab-23000205-
104,25@2300.html (Eriim tarihi: 11.08.2011)
[35] Biyoetanol ve biyoetanol retimi,
http://www.konyaseker.com.tr/?sayfa=icerik&pgid
=208&text=208 (Eriim tarihi: 25.04.2011)
[36] Stanbury, P.F., Whitaker, A., Hall, S.J., Principles
of Fermentation Technology, Butterworth-
Heinemann Elsevier Science, ngiltere, 1995.
[37] etin, E.T., Endstriyel mikrobiyoloji, stanbul
niversitesi Tp Fakltesi Vakf Yaynlar,
stanbul, 1983.
[38] Gupta, R., Sharma, K.K., Kuhad, R.C., Separate
hydrolysis and fermentation (SHF) of Prosopis
juliflora, a woody substrate, for the production of
cellulosic ethanol by Saccharomyces cerevisiae
and Pichia stipitis-NCIM 3498. Bioresource
Technol., 100, 12141220, 2009.
[39] Bai, F.W., Anderson, W.A., Moo-Young, M.,
Ethanol fermentation technologies from sugar and
starch feedstocks. Biotechnol. Adv. 26: 89105,
2008.
14

[40] Mohanty, S.M., Behera, S., Swain, M.R., Ray,
R.C., Bioethanol production from mahula
(Madhuca latifolia L.) flowers by solid-state
fermentation. Appl. Energy., 86, 640644, 2009.
[41] Engudanos, M., Soria, A., Kavalov, B., Jensen, P.,
Techno-economic analysis of bioalcohol
production in the EU: a short summary for
decision-makers. IPTS/JRC, Report EUR 20280
EN, Sevilla; May 2002.
http://ftp.jrc.es/EURdoc/eur20280en.pdf. (Eriim
tarihi: 20.11.2010)
[42] Kim, S., Dale, B.E., Global potential bioethanol
production from wasted crops and crop residues.
Biomass. Bioenerg., 26, 361375, 2004.
[43] Nguyen, T.L.T., Gheewala, S.H., Garivait, S.,
Fossil energy savings and GHG mitigation
potentials of ethanol as a gasoline substitute in
Thailand. Energ. Policy, 35, 51955205, 2007.
[44] Lechon, Y., Cabal, H., Saez, R., Life cycle
analysis of wheat and barley crops for bioethanol
production in Spain. Int. J. Agric. Resour. Gov.
Ecol., 4, 113122, 2005.
[45] Macedo, I.C., Seabra, J.E.A., Silva, J.E.A.R.,
Green house gases emissions in the production and
use of ethanol from sugarcane in Brazil: the
2005/2006 averages and a prediction for 2020.
Biomass Bioenerg., 32, 582595, 2008.
[46] Balat, M., Balat, H., Recent trends in global
production and utilization of bio-ethanol fuel.
Appl. Energ., 86, 22732282, 2009.
[47] Kim, S., Dale, B.E., Environmental aspects of
ethanol derived from no-tilled corn grain:
nonrenewable energy consumption and greenhouse
gas emissions. Biomass Bioenerg., 28, 475489,
2005.
[48] Reijnders, L., Ethanol production from crop
residues and soil organic carbon. Resour. Conserv.
Recycl.,52, 653658, 2008.
[49] Najafi, G., Ghobadian, B., Tavakoli, T., Yusaf, T.,
Potential of bioethanol production from
agricultural wastes in Iran. Renew. Sust. Energ.
Rev., 13, 14181427, 2009.
[50] Dien, B.S., Jung, H.J.G., Vogel, K.P., Casler,
M.D., Lamb, J.F.S., Iten, L, Mitchell, R.B., Sarath,
G., Chemical composition and response to dilute-
acid pretreatment and enzymatic saccharification of
alfalfa, reed canarygrass, and switchgrass. Biomass
Bioenerg., 30, 880891, 2006.
[51] Sassner, P., Galbe, M., Zacchi, G., Techno-
economic evaluation of bioethanol production from
three different lignocellulosic materials. Biomass
Bioenerg., 32, 422430, 2008.
[52] Luo, L.,Van der Voet, E., Huppes, G., Life cycle
assessment and life cycle costing of bioethanol
from sugarcane in Brazil. Renew. Sust. Energ.
Rev., 13, 16131619, 2009.
[53] Saha, B.C., Iten, L.B., Cotta, M.A., Wu, Y.V.,
Dilute acid pretreatment, enzymatic
saccharification and fermentation of wheat straw to
ethanol. Process. Biochem., 40, 36933700, 2005.
[54] Kaparaju, P., Serrano, M., Thomsen, A.B.,
Kongjan, P., Angelidaki, I., Bioethanol,
biohydrogen and biogas production from wheat
Straw in a biorefinery concept. Bioresource
Technol., 100, 25622568, 2009.
[55] Aden, A., Ruth, M., Ibsen, K., Jechura, J., Neeves,
K., Sheenhan, J., Wallace, B., Montague, L.,
Slayton, A., Lukas, J., Lignocellulosic biomass to
ethanol process design and economics utilizing co-
current dilute acid prehydrolysis and enzymatic
hydrolysis for corn stover. National renewable
energy lab golden Co., June 2002.
http://www.nrel.gov/docs/fy02osti/32438.pdf
(Eriim tarihi:21.01.2011)
[56] Prasad, S., Singh, A., Joshi, H.C., Ethanol as an
alternative fuel from agricultural, industrial and
urban residues. Resour. Conserv. Recy., 50, 139,
2007.
[57] Kopsahelis, N., Agouridis, N., Bekatorou, A.,
Kanellaki, M., Comparative study of spent grains
and deligniWed spent grains as yeas supports for
alcohol production from molasses. Bioresource
Technol., 98, 14401447, 2007.
[58] Cceres-Farfn, M., Lappe, P., Larqu-Saavedra,
A., Magdub-Mndez, A., Barahona-Prez, L.,
Ethanol production from henequen (Agave
fourcroydes Lem.) juice and molasses by a mixture
of two yeasts. Bioresource Technol., 99, 9036
9039, 2008.
[59] Liang, L., Zhang, Y.-P., Zhang, L., Zhu, M.-J.,
Liang, S.-Z., Huang, Y.-N., Study of sugarcane
pieces as yeast supports for ethanol production
from sugarcane juice and molasses. J. Ind.
Microbiol. Biotechnol., 35, 1605-1613, 2008.
[60] Davila-Gomez, F.J., Chuck-Hernandez, C., Perez-
Carrillo, E., Rooney, W.L., Serna-Saldivar, S.O,
Evaluation of bioethanol production from five
different varieties of sweet and forage sorghums
(Sorghum bicolor (L) Moench). Ind. Crop. Prod.,
33, 611616, 2011.
[61] Siqueira, P.F., Karp, S.G., Carvalho, J.C., Sturm,
W., Rodrguez-Len, J.A., Tholozan, J.L.,
Singhania, R.R., Pandey, A., Soccol, C.R.,
Production of bio-ethanol from soybean molasses
by Saccharomyces cerevisiae at laboratory, pilot
and industrial scales. Bioresource Technol., 99,
81568163, 2008.
[62] Hashem, M., Darwish, S.M.I., Production of
bioethanol and associated by-products from potato
starch residue stream by Saccharomyces
cerevisiae. Biomass Bioenerg., 34,953959, 2010.
[63] Amutha, R., Gunasekaran, P., Production of
Ethanol from Liquefied Cassava Starch Using Co-
Immobilized Cells of Zymomonas mobilis and
Saccharomyces diastaticus. J. Biosci. Bioeng., 92,
560-564, 2001.
15

[64] Rattanachomsri, U., Tanapongpipat, S.,
Eurwilaichitr, L., Champreda, V., Simultaneous
non-thermal saccharification of cassava pulp by
multi-enzyme activity and ethanol fermentation by
Candida tropicalis. J. Biosci. Bioeng., 107, 488
493, 2009.
[65] Yamadaa, R., Bitoa, Y., Adachia, T., Tanakab, T.,
Oginoa, C., Fukudab, H., Kondoa, A., Efficient
production of ethanol from raw starch by a mated
diploid Saccharomyces cerevisiae with integrated
-amylase and glucoamylase genes. Enzyme
Microb. Tech., 44, 344349, 2009.
[66] Raimbault, M., General and microbiological
aspects of solid substrate fermentation. Electr. J.
Biotechnol., 1, 174188, 1998.
[67] Pitkanen, J., Aristidou, A., Salusjarvi, L.,
Ruohonen, L., Penttila, M., Metabolic flux analysis
of xylose metabolism in recombinant
Saccharomyces cerevisiae using continuous
culture. Metabol. Eng., 5, 1631, 2003.
[68] Olsson, L., Hahn-Hagerdal, B., Fermentation of
lignocellulosic hydrolysates for ethanol production.
Enzyme Microb. Tech., 18, 312331, 1996.
[69] Gupta, R., Sharma, K.K., Kuhad, R.C., Separate
hydrolysis and fermentation (SHF) of Prosopis
juliflora, a woody substrate, for the production of
cellulosic ethanol by Saccharomyces cerevisiae
and Pichia stipitis-NCIM 3498. Bioresource
Technol., 100, 12141220, 2009.
[70] Ballesteros, M., Oliva, J.M., Negro, M.J.,
Manzanares, P., Ballesteros, I., Ethanol from
lignocellulosic materials by a simultaneous
saccharification and fermentation process (SFS)
with Kluyveromyces marxianus CECT 10875.
Process Biochem., 39, 18431848, 2004.
[71] Taherzadeh, M.J., Niklasson, C., Liden, G.,
Conversion of dilute-acid hydrolyzates of spruce
and birch to ethanol by fed-batch fermentation.
Bioresource Technol., 69, 59-66, 1999.
[72] Karel, S.F., Libicki, S.B., Robertson, C.R., The
immobilization of whole cells: Engineering
principles. Chem. Eng. Sci., 40, 1321354, 1985.
[73] Margaritis, A., Merchant, F.J.A.,. Advances in
ethanol production using immobilized cell systems.
Crit. Rev. Biotechnol. 2, 339393, 1984.
[74] Stewart, G.G., Russel, I.,. One hundred years of
yeast research and development in the brewing
industry. J. Inst. Brew., 92, 537558, 1986.
[75] Tzeng, J.-W., Fan, L.-S., Gan. Y.R., Hu, T.-T.,
Ethanol fermentation using immobilized cells in a
multistage fluidized bed bioreactor. Biotechnol.
Bioeng., 38, 12531258, 1991.
[76] Gikas, P., Livingston, A.G., Specific ATP and
specific oxygen uptake rate in immobilized cell
aggregates: Experimental results and theoretical
analysis using a structured model of immobilized
cell growth. Biotechnol. Bioeng., 55, 660673,
1997.
[77] Divies, C., Cachon, R., Gavin, J.-F., Prevost, H.,
Immobilized cell technology in wine fermentation.
Crit. Rev. Biotechnol., 14, 135153, 1994.
[78] Singh, R. S., Sooch, B.S., High cell density
reactors in production of fruits wine with special
reference to cider-An overview. Indian Nat. Prod.
Res., 8, 323333, 2009.
[79] Karandikar, S., Prabhune, A., Kalele, S.A., Gosavi,
S.W.,. Kulkarni, S.K., Immobilization of
Thermotolerant Kluyveromyces marxianus on
Silica Aerogel for Continuous Production of Invert
Syrup. Res. J. Biotechnol., 1, 1619, 2006.
[80] Mallouchos, A., Reppa, P., Aggelis, G., Koutinas,
A.A., Kanellaki, M., Komaitis, M., Grape skins as
a natural support for yeast immobilization.
Biotechnol. Lett., 24, 13311335, 2002.
[81] Plessas, S., Bekatorou, A., Koutinas, A.A.,
Soupioni, M., Banat, I.M., Marchant, R., Use of
Saccharomyces cerevisiae cells immobilized on
orange peel as biocatalyst for alcoholic
fermentation. Bioresource Technol., 98, 860865,
2007.
[82] Bakoyianis, V., Kanellaki, M., Kalliafas, A.,
Koutinas, A.A., Low-temperature wine making by
immobilized cells on mineral kissiris. J. Agr. Food
Chem., 40, 12931296, 1992.
[83] Loukatos, P., Kiaris, M., Ligas, I., Bourgos, G.,
Kanellaki, M., Komaitis, M., Koutinas, A.A.,
Continuous wine making by -alumina-supported
biocatalyst quality of the wine and distillates. Appl.
Biochem. Biotech., 89, 113, 2000.
[84] Spagna, G., Barbagallo, R.N., Casarini, D., Pifferi,
P.G., A novel chitosan derivative to immobilize -
L-rhamnopyranosidase from Aspergillus niger for
application in beverage Technologies. Enzyme
Microb. Tech., 28, 427438, 2001.
[85] Chi, M.-C., Lyu, R.-C., Lin, L.-L.,Huang, H.-
B.,Characterization of Bacillus kaustophilus
leucine aminopeptidase immobilized in Ca-
alginate/-carrageenan beads. Biochem. Eng. J.,
39, 376382, 2008.
[86] Adinarayana, K., Jyothi, B., Ellaiah, P., Production
of Alkaline Protease With Immobilized Cells of
Bacillus subtilis PE-11 in Various Matrices by
Entrapment Technique. AAPS PharmSciTech., 6,
E391E397, 2005.
[87] Bezbradica, D., Obradovic, B., Leskosek-
Cukalovic, I., Bugarski, B., Nedovic, V.,
Immobilization of yeast cells in PVA particles for
beer fermentation. Process Biochem., 42, 1348
1351, 2007.
[88] ztop, H.N., ztop, A.Y., Karada, E., Ikver, Y.,
Saraydn, D., Immobilization of Saccharomyces
cerevisiae on to acrylamidesodium acrylate
hydrogels for production of ethyl alcohol. Enzyme
Microb. Tech., 32, 114119, 2003.
[89] Liu, C., Moon, K., Honda, H., Kobayashi, T.,
Immobilization of rice (Oryza sativa L.) callus in
16

polyurethane foam using a turbine blade reactor.
Biochem. Eng. J., 4, 169175, 2000.
[90] Chandel, A.K., Narasu, M.L., Chandrasekhar, G.,
Manikyam, A., Venkateswar Rao, L., Use of
Saccharum spontaneum (wild sugarcane) as
biomaterial for cell immobilization and modulated
ethanol production by thermotolerant
Saccharomyces cerevisiae VS3. Bioresource
Technol., 100, 2404-2410, 2009.
[91] Castellar, R., Barros, M.R., Cabral, J.M.S., Iborra,
J.L., Effect of Zeolite Addition on Ethanol
Production from Glucose by Saccharomyces
bayanus. J. Chem. Technol. Biotechnol., 73, 377-
384, 1998.
[92] Nigam J.N., Gogoi B.K., Bezbaruah R.L.,
Alcoholic fermentation by agar immobilized yeast
cells. World J. Microb. Biot. 14: 457-459, 1998.
[93] Nigam, J.N., Continuous ethanol production from
pineapple cannery waste using immobilized yeast
cells. J. Biotechnol., 80, 189-193, 2000.
[94] Guo, X., Zhou, J., Xiao, D., Improved Ethanol
Production by Mixed Immobilized Cells of
Kluyveromyces marxianus and Saccharomyces
cerevisiae from Cheese Whey Powder Solution
Fermentation. Appl Biochem Biotechnol. 160,
532538, 2010.
[95] Baptista, C.M.S.G., Coias, J.M.A., Oliveira,
A.C.M., Oliveira, N.M.C., Rocha, J.M.S.,
Dempsey, M.J., Lannigan, K.C., Benson P.S.,
Natural immobilisation of microorganisms for
continuous ethanol production. Enzyme Microb.
Tech., 40, 127131, 2006.
[96] ztop, H.N., ztop, A.Y., Ikver, Y., Saraydn,
D., mmobilization of Saccharomyces cerevisiae
on to radiation crosslinked HEMA/AAm hydrogels
for production of ethyl alcohol. Process Biochem.,
37, 651-657, 2002.
[97] Gkgz, M., Yiitolu, M., mmobilization of
Saccharomyces cerevisiae on to modified
carboxymethylcellulose for production of ethanol.
Bioprocess Biosyst Eng., 34, 849-857, 2011.
[98] nal, M., Yiitolu, M., Production of bioethanol
by immobilized Saccharomyces Cerevisiae onto
modified sodium alginate gel. J. Chem. Technol.
Biotechnol., 86, 1548-1554, 2011.