BI 2.

XC NH CHUA, M V MN
TRONG THC PHM
1. Xc !" # c"$% &'(!) *(+(,&.
N)$-.! &/c 0c !"
Dng dung dch NaOH 0,1N trung ha lng acid c trong mu vi ch!t ch" th l#
$h%nol$hal%in 1& ho'c dng i(n c)c ch" th* +,t gi-t d NaOH ./ l#m dung dch 0u!t
hi(n m#u h1ng 234n trong 50gi678* 9o th t:ch NaOH ti;u t<n ta 0=c nh c h#m
lng acid trong mu d)a v#o nh lu>t ?ng lng*
H1% c"2& 34 &"56& 7
H1% c"2&@ dung dch NaOH 0,1N v# H
A
B
A
O
C
0,1N*
V%5 &'8 c9% "1% c"2&:
- N%OH: D# dung dch chuEn ,
BH
5
2BH8OHFBOOH G NaOH H BH
5
2BH8OHFBOONa G H
A
O*
- H
2
C
2
O
;
<,1N@ Hi(u ch"nh n1ng , NaOH cIn $ha*
2J=c nh lKi n1ng , cLa NaOH 3Mng H
A
B
A
O
C
0,1N, hNt Oml dung dch H
A
B
A
O
C
0,1N cho
v#o 3Pnh tam gi=c AO0ml th;m 10ml nc c!t G Agi-t ch" th QQ* BhuEn 3Mng NaOH Rn
Shi 0u!t hi(n m#u h1ng nhKt8*
NaOH G H
A
B
A
O
C
H B
A
O
C
Na
A
G AH
A
O
T"56& 7
+=7 chuEn , i(n thR*
9i(n c)c ST$ thL7 tinh*
+=7 Shu!7 tU v# c= tU*
2. Xc !" # =+ &'(!) >(+%& +?+.
Qh?ng $h=$ chng c!t@ Qh?ng $h=$ n#7 thVng .W dXng 0=c nh , Em cLa
mu th)c $hEm c nhi4u ch!t dY 3a7 h?i ho'c chZa nhi4u ch!t 3To*
N)$-.! &/c 0c !"
Dng m,t dung m[i h\u c? th:ch h$ chng c!t l[i cu<n th%o nc trong th)c
$hEm* Dung m[i v# nc c ngng tX trong m,t <ng o c Sh]c vKch th#nh hai l$
ri;ng 3i(t* 9-c th t:ch l$ nc l]ng ^ $h:a di, tU t:nh ra c , Em cLa mu th)c
$hEm*
*.$ c@$ A$!) +B5@
B nhi(t , .[i cao h?n nc m,t chNt Shi dung m[i 3a7 h?i ./ STo th%o nc
trong th)c $hEm*
_h[ng tan trong nc dung m[i v# nc $h6n th#nh hai l$ ri;ng 3i(t trong <ng
o*
Nh` h?n nc l$ nc ^ di l$ dung m[i trong <ng o*
1
Dung m[i thVng c .W dXng l# aolu%n 2nhi(t , .[i 110
0
B8 ha7 07l%n 2nhi(t , .[i
15b c 1CC
0
B8*
H1% c"2& 34 &"56& 7
H1% c"2&: dung m[i aolu%n ho'c J7l%n, c=t .Kch*
V%5 &'8 "1% c"2&
- C$!) +B5 T(D$E! "(Fc X-DE!@ Dng l[i cu<n Em ra Shdi*
- C& ,Gc"@ D#m cho mu Sh[ng 3 d:nh v#o th#nh 3Pnh, Sh[ng
3 ng vn lKi vi nhau, dY 3<c h?i nc, mu Sh[ng 3
ch=7*
T"56& 7@ 3, chng c!t J7l%n, c6n*
CH!) cH@ e%ch%r 100ml*
I. Xc !" B +F! &'(!) !JKc +/+.
N)$-.! &/c 0c !"
_hi cho dung dch chuEn fgNO
5
v#o dung dch trung t:nh c chZa NaBl Shi 0g7 ra
$hgn Zng gi\a fg
G
v# Bl
c
tKo ra fgBl*
_hi NaBl trong dung dch h $hgn Zng hRt vi fgNO
5
, m,t gi-t fgNO
5
d ./ $hgn
Zng vi ch" th _
A
BrO
C
tKo SRt tLa fg
A
BrO
C
m#u d gKch*
Afg
G
G BrO
C
Ai
H fg
A
BrO
C
j
9 l# d!u hi(u nh>n 3iRt SRt thNc ku= trPnh chuEn ,, tU th t:ch fgNO
5
ti;u t<n ta
t:nh ra lng NaBl cLa mu $h6n t:ch*
H1% c"2&, &"56& 7
H1% c"2&: Dung dch fgNO
5
0,1Nl ch" th _
A
BrO
C
10&*
V%5 &'8 "1% c"2&@
C$!) Ac" A)NO
I
<,1N@ dung dch chuEn ,* Bho v#o dung dch c chZa NaBl 0g7 ra
$hgn Zng
fg
G
G Bl
c
H fgBl*
L
2
C'O
;
1<M@ ch!t ch" th* D!u hi(u nh>n 3iRt SRt thNc chuEn , Shi dung dch trong
3Pnh tam gi=c 0u!t hi(n m#u d gKch*
Afg
G
G BrO
C
Ai
H fg
A
BrO
C
j
T"56& 7: D nung, 3R$ i(n*
CH!) cH:
eur%t 10ml n6u
Qi$%t Sh]c vKch Aml
ePnh tam gi=c 100ml
BhTn nung
ePnh nh mZc 100ml*
A
BI I. XC NH TRO TON PHNN, C%, M) TRONG THC PHM
1. Xc !" &'( &(4! O"@! &'(!) ,P% 7#&
N)$-.! &/c c"$!)
+u c than ha, .au tro ha ^ mO0
0
B, c=c h$ ch!t h\u c? 3a7 hRt, cn lKi c'n
tr]ng* Bho c<c chZa mu .au Shi tro ha v#o 3Pnh hNt Em, ngu,i v# c6n Rn Sh<i
lng Sh[ng ni 2ch;nh l(ch Sh<i lng gi\a hai lIn li;n tiR$ 0,000Og8* 9, ch;nh l(ch
v4 Sh<i lng gi\a c<c Sh[ng 3an Iu v# .au Shi nung mu ch:nh l# h#m lng tro c
trong mu*
1*1 H1% c"2& 34 &"56& 7:
H1% c"2&: HNO
5
ho'c H
A
O
A
50&*
V%5 &'8 "1% c"2&:
HNO
I
"(Fc H
2
O
2
I<M l# c=c t=c nh6n o07 ha o07 ha ho#n to#n c=c ch!t h\u c?
c trong mu $h6n t:ch*
T"56& 7@ 3R$ i(n, l nung, c6n*
CH!) cH@ chTn nung mi(ng r,ng, dung t:ch O0ml*
1.2 T56! "4!"
C"Q R@
5
BhuEn 3 dXng cX, thiRt 3
BhuEn 3 mu
ahan ha
a:nh SRt kug
aro ha
G e>t l nung, c#i 't nhi(t , mO0
0
B
G oWa .Kch, nung, l#m ngu,i chTn nung trong
3Pnh hNt Em
G B6n Sh<i lng chTn nung@ m
1
2g8
G 91ng nh!t mu
G Bho Og 0,000Ag mu
9<t tr;n 3R$ i(n cho Rn Shi mu th#nh
than %n hRt 3<c Shi tr]ng*
G Bho chTn nung c mu v#o l nung ^ mO0
0
B
G Nung cho Rn Shi tro tr]ng
G phi Sh<i lng chTn nung v# tro .au Shi nung@
m
A
2g8
Garong ku= trPnh nung mu Rn Sh<i lng Sh[ng ni, nRu cn tro %n, l!7 ra
ngu,i, th;m v#i gi-t H
A
O
A
50& ha7 HNO
5
>m 'c v# nung lKi cho Rn tro tr]ng*
G _hi chTn nung cn nng v#o 3Pnh hNt Em, cIn >7 n]$ hT m^ lNc 3an Iu ha7
m^ vi Sh[ng Sh: tr;n n]$ 3Pnh hNt Em, tr=nh Sh[ng Sh: nng n^ ra E7 3>t l#m vq n]$
3Pnh*
1.I L6& S$T
H#m lng tro to#n $hIn t:nh 3Mng & th%o c[ng thZc
arong @
m
0
l# Sh<i lng mu 2g8
m
1
l# Sh<i lng chTn nung 2g8
m
A
l# Sh<i lng chTn nung v# tro 2g8
,%$ 2 D@! &"U !)"5V+ &% JWc:
2. Xc !" C%, M) &'(!) ,P% 7#& "(Fc O"(+%&
N)$-.! &/c c"$!)@
Qhgn Zng chuEn , 2trong m[i trVng $H r 108
H
A
H G Ba
Ai
r Bas
Ai
G AH
i
H
A
s G +g
Ai
r +gs
Ai
G AH
i
DoKi gnh h^ng cLa c=c ion Sim loKi g67 cgn tr^ 2fl
5G
, t%
5G
, Bo
AG
, Bu
AG
, Bd
AG
, Ni
AG
,
un
AG
8 3Mng _BN, Na
A
v ha7 NH
A
OH, HBl*
Qhgn Zng nhanh ^ nhi(t , m0
0
B
9im cu<i cLa chuEn , l# Shi dung dch chu7n tU m#u h1ng .ang 0anh 2ch" th l#
wriochrom% elKcS a8*
2.1 H1% c"2& 34 &"56& 7:
H1% c"2&@
HCD@ 9 chu7n mu<i $hot$hat, cac3onat th#nh mu<i clorua*
+gBO
5
G HBl +gBl
A
G H
A
O G BO
A

Ba
5
2QO
C
8
A
G mHBl 5BaBl
A
G QO
C
5i
G mH
G
Xc !" &X!) C%
2Y
34 M)
2Y

V+ %+(!5 OH Z 1<@ tKo m[i trVng
NH
I
1<M@ Sh<ng chR Sh[ng cho $H txng ku= 10, dng NH
5
10& n6ng $H 2th;m
NH
5
10& tU <ng nhd gi-t vUa th;m vUa thW 3Mng gi!7 $H8*
[CTOO 1M 2trong NaBl ho'c trong (m 108@ ch!t ch" th*
C$!) Ac" [CTA <,<2N@ 2%th7l%n% diamin% t%traac%tic acid8 67 l# ligand Sh= $hn 3iRn
trong chuEn , $hZc ch!t*
tKo $hZc 1@1 34n v# tan trong nc vi hIu hRt c=c ion Sim loKi trU c=c Sim loKi nhm
yf*
B hMng .< c6n 3Mng Sh= ln*
C
J2&8 r
m
Ac
m
1

m
0

0 100
D# m,t ch!t g<c
wDaf c th tKo t<i a m cIu n<i vi c=c cation Sim loKi* _hi $hgn Zng vi c=c ion Sim
loKi c .< $h<i tr l# m thP wDaf ./ gigi $hng A ion H
G
l#m tha7 ni $H cLa dung dch*
arc Shi chuEn ,@
_hi chuEn ,
Xc !" '5.!) M)
2Y
@
N%OH 2N@ n6ng $H r 1A chu7n +g i v#o SRt kug +g2OH8
A
2Shi +g
AG
Sh[ng c
Shg nxng tKo $hZc wDaf8*
m+
nG
G nf
mi
+
m
f
n

M$'E05AE 1M@ Bh" th tKo $hZc Sim loKi
2.2 T56! "4!"
C"$=! 7 +\$:
Xc !" &X!) C%
2Y
, M)
2Y
O
HOOB c BH
A
HOOB c BH
A
N c BHA c BHA c N

BH
A
i BOOH
BH
A
i BOOH
Baynd
Ai
G H
A
s
Ai
+gynd
Ai
G H
A
s
Ai
Bas
Ai
G ynd
Ai
GH
A
O
+gs
Ai
G ynd
Ai
GH
A
O
$H r bi10
$H r bi10
Ba
AG
G H
C
ynd
+g
AG
G H
C
ynd
Baynd
Ai
G CH
G
+gynd
Ai
G CH
G
$H r bi10
$H r bi10
D!7 tro ^ th: nghi(m 0=c nh tro to#n $hIn G Oml HBl AN, un nh`
Rn Shi .[i gIn cKn G 10ml nc c!t AlIn, Shu!7 nh`*
Bhu7n v#o 3Pnh nh mZc 100ml, nh mZc ti vKch 3Mng nc
c!t AlIn*
Dung dch 0=c nh Ba
AG
, +g
AG
D!7 tro ^ th: nghi(m 0=c nh tro to#n $hIn G Oml HBl AN, un nh`
Rn Shi .[i gIn cKn G 10ml nc c!t AlIn, Shu!7 nh`*
Bhu7n v#o 3Pnh nh mZc 100ml, nh mZc ti vKch 3Mng nc
c!t AlIn*
Dung dch 0=c nh Ba
AG
, +g
AG
Bho v#o 3Pnh tam gi=c AO0ml@ 10ml mu v# th;m tUng gi-t
NH
5
10& G Oml (m $Hr10 G 5gi-t ch" th waOO
BhuEn , 3Mng dung dch chuEn wDaf Shi dung dch chu7n tU
n6u d nho .ang 0anh ch#m
Xc !" M)
2Y
2.I L6& S$T
CB!) &"]c &U!" "4+ DJW!) M)
2Y
CB!) &"]c &U!" "4+ DJW!) C%
2Y
arong @
z
1
@ ah t:ch wDaf ti;u t<n chuEn , Ba
AG
v# +g
AG
z
A
@ ah t:ch wDaf ti;u t<n chuEn , +g
AG
m@ _h<i lng mu %m i tro ha 2g8*

m
Bho v#o 3Pnh tam gi=c AO0ml@ 10ml mu v# th;m tUng gi-t
NH
5
10& G Aml NaOH AN G ch" th +ur%0id% 1&
BhuEn , 3Mng dung dch chuEn wDaf Shi dung dch chu7n tU
m#u h1ng .ang t:m hoa c#
J2&8 r
0,0AC.z
A
m
z
dm
z
dd
.
J2&8 r
0,0C2z
1
c z
A8
m
z
dm
z
dd
.
BA^I _. XA`C IaNH AaM TbcNG TRONG THdaC PHecM Bf^NG PHdgNG PHA`P
Lh[iCAHi
1. N)$-.! &j`c c"$!)
_hi <t nng mu $h6n t:ch vi H
A
vO
C
>m 'c, c=c h$ ch!t h\u c? 3 o0i ha* B=c h$
ch!t cac3on v# h7dro tKo th#nh BO
A
v# H
A
O* Bn N
A
.au Shi c gigi $hng ra di
dKng NH
5
SRt h$ vi H
A
vO
C
tKo th#nh 2NH
C
8
A
vO
C
tan trong dung dch* 9uni NH
5
Shdi
dung dch 3Mng NaOH 1ng thVi c!t v# thu NH
5
3Mng lng d H
A
vO
C
0,1N* 9nh $h6n
lng H
A
vO
C
0,1N cn lKi 3Mng dung dch NaOH 0,1N chuEn, kua t:nh c lng
nit? c trong mu ngu7;n li(u th: nghi(m*
2. C$a!) c$a
3Pnh S{%ldahl
I. H1% c"2&
zai tro| cu}a ho~a ch6~t
C$kO
;
: L
2
kO
;
Z 1:1<
arong th: nghi(m no~ c ta~ c dung la|m cho nxng l?ng hoat ho~a cu}a nit? gia}m 0u[~ng*
arong giai oan v[ c? ho~a m6u, . co~ mxt cu}a 0u~c ta~c BuvO
C
@ _
A
vO
C
thi~ch h?$ ;}
chu7;}n toa|n 3[ h[n h?$ ch~a N
A
co~ trong m6u tha|nh NH
C
G
*
H
2
kO
;
arong giai oan $ha~ m6u@ H
A
vO
C
6m xc, [~t cha~7 h[n h?$ hu c? 2Shi [~t n[~ng m6u
v?~i H
A
vO
C
6m xc, ca~ c h?$ ch6~t hu c? co~ trong m6u 3i o0i ho~a H vO
5
, vO
5
$h6n l7
tha|nh vO
A
va| o0i ngu7;n t}* O0i ?c tha}i ra .% o0i ho~a h7dro va| cac3on cu} a h?$ ch6~t
hu c? co~ trong m6u ;} tao tha|nh BO
A
va| H
A
O@
Bo|n N
A
.% ? c chu7;}n tha|nh dang NH
5
va| Shi~ NH
5
na|7 .% S;~t h?$ v?~i H
A
vO
C
d tao
tha|nh 2NH
C
8
A
vO
C
tan trong dung dich, $h?ng tri|nh t[}ng kua~t*
arong giai oan h6~$ thu@ H
A
vO
C
0,1N c vai tr h!$ thX NH
5
3a7 ra trong ku= trPnh chng
c!t@ H
A
vO
C
G ANH
5
H 2NH
C
8
A
vO
C

HCDO
;
2a0it $%rchloric8
v) c m't cLa a0it n#7 trong hn h$ l#m txng nhi(t , .[i, l#m txng v>n t<c ku= trPnh
$hgn Zng, gigi $hng o0i cho ku= trPnh o0i ha*
NaOH
NaOH C0&, trung ha hRt a0it ^ giai oKn $h= mu 218 v# E7 NH
5
ra Shdi mu<i
2NH
C
8
A
vO
C
218*
ANaOH G H
A
vO
C
H Na
A
vO
C
G AH
A
O 218
ANaOH G 2NH
C
8
A
vO
C
H ANH
5
G AH
A
O G Na
A
vO
C
2A8
NH
5
.inh ra trong $h?ng trPnh 2A8 ./ c h!$ thX 3Mng H
A
vO
C
0,1N ^ 3Pnh hZng*
NaOH 0,1N l# dung dch chuEn ,, trung ha hRt lng a0it H
A
vO
C
0,1N d vi ch" th
ta.hiro, Rn Shi dung dch chu7n tU m#u t:m .ang m#u 0anh nhKt*

Qrot%in, $ol7$%$tid,
$%$ton%, acid amin***
H
A
vO
C
Ju~c ta~c
2NH
C
8
A
vO
C
G vO
A
G BO
A
G H
A
O
aa.hiro l# ch!t ch" th, trong m[i trVng acid c m#u t:m, trong m[i trVng 3a? c m#u
0anh*
;. T56! "4!"
_. L6& S$T
b
B6n 1,Og BuvO
C
@ _
A
vO
C
r 1@10 v#o c<c O0ml .Kch, rgi 4u to#n 3, 0Nc t=c l;n
to#n 3, !7 c<c
B6n tiR$ v#o c<c 0,Ag omat cZng, .ao cho l)ong c6n c 3ao 3-c 3^i 0Nc t=c,
tr=nh d:nh =7 c<c* cEn th>n chu7n v#o 3Pnh $h= mu S{%ldalGOml H
A
vO
Cdd
G1ml
HBlO
Cdd
* 9't m,t $hu thL7 tinh l;n mi(ng cLa 3Pnh $h= mu*
aiRn h#nh v[ c? ha mu trong tL hNt Rn Shi dung dch c m#u v#ng ho'c 0anh
trong .u<t*
D]$ r=$ h( th<ng, 3Pnh h!$ thX A0ml H
A
vO
C
0,1NGO gi-t ch" th ta.ihro* _im tra
, S:n cLa h( th<ng v# nc ho#n lu*
Bhu7n to#n 3, 3Pnh chng c!t kua $hu, dng nc c!t tr=n 5 lIn, mi lIn
Shogng 10ml*
ah;m 50ml NaOH C0&, Shi cn Shogng 1ml thP Sha $hu lKi* th;m O0ml nc
c!t, m^ Sha cho dung dch chg7 0u<ng, cn Shogng Oml thP Sha lKi*
aiRn h#nh chng c!t cho Rn Shi hRt NH
5
thW 3Mng gi!7 $H* HK 3Pnh h!$ thX
0u<ng, dng 3Pnh tia rWa u[i <ng .inh h#n, l!7 gi!7 $H thW*
BhuEn , dung dch chuEn NaOH 0,1N Rn Shi dung dch chu7n tU m#u t:m
.ang m#u 0anh nhKt*
_Rt thNc th: nghi(m v# t:nh SRt kug
BI l. XC NH mM TnNG TRONG NdoC MpM BqNG PHdgNG PHP
N[kki[R.
1. N)$-.! &/c c"$!).
fmoniac t) do c nh lng nhV $hgn Zng gi\a amoniac vi thu<c thW N%..l%r .inh
ra m,t h$ ch!t mang m#u* BVng , m#u $hX thu,c v#o lng NH
5
c trong mu*
2. CH!) cH
I. H1% c"2&
zai tr cLa ha ch!t*
HWO c"2& 0Qc &c@ c t=c dXng l#m cho nxng l)c hoKt ha cLa nito gigm 0u<ng*
piai oKn v[ c? ha mu vi .) c m't cLa 0Nc t=c th:ch h$ chu7n to#n 3, N
A
c
trong mu th)c $hEm v4 NH
;
Y
*
T"$rc &"s NE,,DE'@ Hgyy
A
do Hgy
C
Ai
ng vai tr l# Digand*
Hgy
C
Ai
G NH
C
G
2NH
C
8
A
Hgy
C
2v#ng nhKt .ang v#ng n6u8*
C$!) Ac": N A0$$m@ dung dch d)ng chuEn*
V+ OH Z l l#m ch!t ch%* zi .) c m't cLa ch!t ch% th:ch h$ cho to#n 3, NH
;
Y
tKo
$hZc vi thu<c thW N%..l%r tKo 3Mng m,t h$ ch!t m#u v#ng .ang v#ng n6u*
H
A
vO
C
>m 'c@ l#m cho h$ ch!t h\u c? 3 ch=7*
_hi <t nng mu th)c $hEm vi H
A
vO
C
>m 'c, c=c ch!t h\u c? 3 o07 ha v# thgi ra
vO
5
* ch!t n#7 $h6n l7 th#nh vO
A
v# o07 ngu7;n tW* O07 thgi ra ./ o07 ha h7dro v#
cac3on cLa h$ ch!t h\u c? tKo th#nh BO
A
, H
A
O* Bn nit? .au Shi c gigi $hng ra
di dKng NH
5
SRt h$ vi H
A
vO
C
tKo th#nh 2NH
C
8
A
vO
C
tan trong dung dch*
NaOH 1&@ trung ha lng acid d* ANaOH G H
A
vO
C
H Na
A
vO
C
G AH
A
O
T56! "4!"

H
A
vO
C'c
, t
o
Bh!t 0Nc t=c
2NH
C
8
A
vO
C
G vO
A
GBO
A
G H
A
O
Qrot%in, $ol7$%$tid, $%$ton
v# c=c h$ ch!t h\u c?
91ng nh!t mu nc m]m
BI t. XC NH mM THuI vNH
I
w V mM AMIN vmM >ORMONw
1. !" DJW!) N5&x %c5A %+5! vO"Jx!) O"O y('+(!w
N)$-.! &/c c"$!)
B=c a0it amin trong dung dch nc thP trung t:nh* _hi g'$ ormon, c=c a0it
amin 3 m!t t:nh Si4m, t:nh a0it cLa nhm BOOH tr,i l;n* Do c th nh lng nhm
BOOH 3Mng m,t dung dch Si4m chuEn vi i(n c)c ch" th*
BH aHBH
i B=c mu<i amoni, th: dX NH
C
Bl ^ dung dch trung t:nh, Shi g'$ ormon cng
l#m cho dung dch tr^ th#nh a0it n;n gnh h^ng Rn SRt kug $h6n t:ch
i 967 l# trVng h$ m,t a0it 7Ru c chuEn , 3Mng Si4m mKnh n;n im
t?ng ?ng $hgi ^ $H Si4m 2$H r ,O8 do $hgn Zng SRt thNc Shi QQ chu7n m#u
d t?i chZ Sh[ng $hgi m#u h1ng 2$H r b,5 nh th[ng thVng8
i NRu trong ch!t thW c c=c mu<i $hot$hat ho'c cac3onat, c=c mu<i n#7 ./ l#m
dung dch tr^ th#nh dung dch (m v# $H Sh txng Rn ,O, l#m gnh h^ng Rn SRt
kug, do cIn $hgi loKi 3d 3Mng c=ch SRt tLa vi eaBl
A
v# ea2OH8
A
i 9im chu7n m#u r!t Sh nh>n vP Sh 0=c nh lNc n#o l# chu7n .ang m#u d
t?i* Do n;n c dung dch m#u .o .=nh* NgVi ta dng 100ml dung dch Na
A
HQO
C
0,1N 2$H r,58 tr,n 4u vi 0,Oml $h%nol$htal%in 1& c m#u d t?i l#m mu .o
.=nh m#u cLa im t?ng ?ng
1.2 H1% c"2&, &"56& 7:
H1% c"2&
B%CD
2
: loKi trU BO
5
Ai
, QO
C
5i
B%vOHw
2
@ Dng n6ng $H r b*5
H
2
C
2
O
;
<,1N@ Hi(u ch"nh n1ng , NaOH
ANaOH G H
A
B
A
O
C
B
A
O
C
Na
A
G AH
A
O*
HCHO 2<M@ ah[ng thVng dung dch ormon 3ao giV cng ^ $H a0it do ormon 3 o0i
ha th#nh a0it ormic* Do Shi .W dXng $hgi trung ha lKi ormon 3Mng dung dch
NaOH 0,AN vi QQ l#m ch" th m#u Rn m#u $ht h1ng 34n v\ng* 9Km amin trong th)c
$hEm c cho t=c dXng vi m,t lng d dung dch ormand%hit trung t:nh .inh ra
m,t lng d H
G
t?ng ?ng*
p<c amino acid@
fmino acid G HBHO
zP NH
C
G
2trong Km th<i8 G HBHO 2BH
A
8
m
N
G
G H
A
O*
PP: Bh!t ch" th
N%OH <,1N: dung dch chuEn ,*
CH!) cH:
10
BO
5
Ai
G ea
AG
QO
C
AiG
ea
AG
eaBO
5

ea
5
2QO
C
8
A
$H r b*5
$H r b*5
o BOOH
NH
A
o BOOH
2BH
A
8
m
N
C
e%ch%r 100ml
ePnh nh mZc 100ml
ePnh tia
e%ch%r AO0ml
T"56& 7:
+=7 Shu!7 tU G c= tU
+=7 $H
A* !" DJW!) G+ NH
I
vG+ &"r5w
N)$-.! &/c c"$!)
9E7 mu<i amoni ra th t) do 3Mng m,t ch!t Si4m mKnh h?n amoniac nhng
Sh[ng mKnh l]m tr=nh gnh h^ng Rn th)c $hEm, v: dX nh +g2OH8
A
, Na
A
BO
5

Dng h?i nc STo amoniac h c gigi $hng ra th t) do .ang 3Pnh chuEn , v# SRt
h$ vi m,t lng d H
A
vO
C
0,1N* BhuEn , lng H
A
vO
C
d .au Shi c!t 0ong vi ch" th
aliarin natri .unonat 1&*
NRu Sh[ng c ch" th aliarin natri .unonat 1& thP c th tha7 3Mng dung dch
aa.hiro 2hn h$ th%o t l( A@1 cLa dung dich m%t7l d 0,1 & v# m%t7l 0anh 0,1&8
ANH
C
Bl G +g2OH8
A
r ANH
5
G AH
A
O G+gBl
A
ANH
5
G H
A
vO
C
r 2NH
C
8
A
vO
C

H
A
vO
C
G ANaOH r Na
A
vO
C
G H
A
O
H1% c"2&, &"56& 7
H1% c"2&
7z&: ar=nh tKo 3-t
H
2
kO
;
<,1N: 9 h!$ thX NH
5
3a7 ra trong ku= trPnh c!t Km
ANH
5
G H
A
vO
C
2NH
C
8
A
vO
C
T%,"5'(: Bh!t ch" th
N%CO
I
2<M: 9E7 mu<i amoni ra th t) do
NH
C
Bl G NaBO
5
NH
5
G BO
A
G NaBl
N%OH <,1N: Dung dch chuEn , lng d H
A
vO
C
H
A
vO
C
G ANaOH Na
A
vO
C
G H
A
O
T"56& 7@
B6n
CH!) cH@
B<i .Z
Bh#7
B<c AO0ml
pi!7 l-c
QhYu
ePnh chng c!t
11
BI {. NH id|NG iACTOk[ TRONG k}A C C~ dNG BqNG
PHdgNG PHP B[CTRANC
1. N)$-.! &/c
Qh?ng $h=$ d)a tr;n c? .^ m[i trVng Si4m, Vng lacto.% 2?ng ShW8 c th d
d#ng ShW 1ng yy o0id th#nh 1ng y o0id 2Bu
AG
Bu
G
8, SRt tLa 1ng y o0id c m#u d
gKch, kua t:nh c lng Vng lacto.% 2Vng ShW8*
9nh lng Vng ShW thVng dng thu<c thW t%lling* ahu<c thW %lling l# hn h$
21@18 cLa hai dung dch %lling f 2m,A g BuvO
C
G0,O l:t G 10ml H
A
vO
C
>m 'c, ha tan
v# nh mZc 3Mng nc c!t Rn 1l:t8 v# dung dch %lling e 25C,mg _alinatritactrat 1O& G
O l:t nc G 10g NaOH v# nh mZc 3Mng nc c!t Rn 100ml8*
_hi tr,n dung dch %lling f v# %lling e vi nhau thP 0g7 ra $hgn Zng gi\a chNng
th%o hai giai oKn* 9Iu ti;n tKo th#nh SRt tLa Bu2OH8
A
m#u 0anh da trVi*
BuvO
C
G ANaOH Bu2OH8
A
G Na
A
vO
C
vau Bu2OH8
A
t=c dXng vi mu<i _alinatritactrat tKo th#nh mu<i $hZc ha tan,
dung dch c m#u 0anh thEm@
+u<i $hZc tr;n l# m,t mu<i Sh[ng 34n* B=c Vng c chZa nhm ald%hid ho'c c%ton
2Vng ShW8 d d#ng ShW Bu
AG
th#nh Bu
G
, tKo n;n SRt tLa 1ng 2y8 o0it m#u d gKch v#
Vng 3 o0i ha Shi t=c dXng vi dung dch %lling*
9 nh lng 1ng 2y8 o0it tKo th#nh, trc hRt o0i ha n 3Mng .]t 2yyy8 .unat trong
m[i trVng a0it .unuric, Bu
G
3 o0i ha tr^ lKi th#nh Bu
AG
, cn t%
5G
3 ShW th#nh t%
AG
@
Bu
A
O G t%
A
2vO
C
8
5
G H
A
vO
C
r ABu
A
vO
C
G At%vO
C
G H
A
O
Dng t%
AG
tKo th#nh c 0=c nh 3Mng c=ch o0i ha nV dung dch _+nO
C
trong
m[i trVng acid*
10t%vO
C
G A_+nO
C
G bH
A
vO
C
r Ot%
A
2vO
C
8
5
G A+nvO
C
G _
A
vO
C
G bH
A
O
aU lng _+nO
C
ti;u t<n trong chuEn ,, c th t:nh lng Bu
G
v# tU t:nh lng
Vng lacto.% trong dung dch*
2. CH!) cH
B<c thL7 tinh O0 ml
ePnh nh mZc 100 ml
ePnh tam gi=c AO0 ml
1A
Bu2OH8
A
G
HO c BH c BOONa
HO c BH c BOO_

O c BH c BOONa
O c BH c BOO_
Bu G AH
A
O
+#u 0anh thEm
O c BH c BOONa
O c BH c BOO_
Bu
BHO
2BHOH8
C
G
BH
A
OH


BOOH
2BHOH8
C
G
BH
A
OH
HO c BH c BOONa
AHO c BH c BOO_
G Bu
A
O
B<c thL7 tinh O00 ml
B6n i(n tW
Qi$%t 10 ml
+=7 l-c =$ .u!t
I. H1% c"2&
v\a 'c c Vng
Dung dch Sali%rrocianua 1O& 2_
C
t%2BN8
m
8
_/m ac%tat 50& 2un2BH
5
BOO8
A
50&8
t%lling f, t%lling e
Dung dch t%
A
2vO
C
8
5

15
BI 1<. XC NH TnNG ku CHT BO
1. Xc !" &X!) 7( &'(!) ,P% 7#& 7!) O"Jx!) O"O k(0DE&.
Dng dung m[i S nc tr:ch l7 ho#n to#n li$id tU ngu7;n li(u h Xc nghi4n nhd* +,t
.< th#nh $hIn Sh=c trong ch!t 3To cng c tr:ch l7 th%o 3ao g1m .]c t<, vitamin tan
trong ch!t 3To, c=c ch!t mitu7 nhi;n h#m lng cLa chNng th!$* Do c ln tK$ ch!t
n;n $hIn tr:ch l7 c g-i l# li$id tnng ha7 dIu th[*
H#m lng li$id c th c t:nh 3Mng c=ch c6n tr)c tiR$ lng dIu .au Shi chng c!t
loKi .Kch dung m[i ho'c t:nh gi=n tiR$ tU 3h cn lKi*
u im cLa c=ch t:nh gi=n tiR$ l# c th tr:ch l7 1ng thVi nhi4u mu trong cng m,t trX
chiRt*
A* J=c nh ch!t tnng 3To trong .\a 3,t 3Mng $h?ng $h=$ vo0l%t*
A*1 DXng cX thiRt 3
e, vo0hl%t 23Pnh cIu, trX chiRt, <ng .inh h#n8
aL .!7
B6n $h6n t:ch
pi!7 l-c g!$ th#nh tNi )ng ngu7;n li(u
2.2. H1% c"2&
Dung m[i tr:ch l7@ di%th7l %th%r
zai tr cLa ha ch!t@ di%th7l %th%r l# dung m[i h\u c? ha tan ch!t 3To t) do
2.I T56! "4!"
Qh?ng $h=$ 0=c nh tr)c tiR$ 2c6n lng dIu thu c d)a v#o lng dIu thu c t:nh
SRt kug8*
2.; 6& S$T
1C
ePnh cIu, .\a 3,t v# gi!7 l-c .!7 Sh[ 10O
0
B trong 50 $hNt, chu7n v#o 3Pnh hNt Em
.W dXng* B6n 0=c nh tr-ng lng 3Pnh cIu m
A
B6n O g .\a 3,t v#o <ng gi!7 hPnh trX 23iRt trc Sh<i lng8, cho v#o <ng 0i $h[ng*
9n ng>$ I7 <ng 0i$h[ng 3Mng di%th7l %th%r, chN cho %t% d trU hao $hIn %t%
3a7 h?i*
D]$ h( th<ng # tiRn h#nh chiRt ^ nhi(t , C0 c O0
0
B 2nhi(t , .[i vUa cLa dung m[i8*
vau 5 lIn chiRt, th=o 3Pnh thu h1i %t%* ah=o h( th<ng, %m 3Pnh cIu .!7 ^ 10O
0
B
trong 1giV, l#m ngu,i trong 3Pnh hNt Em v# c6n Sh<i lng m
1
_Rt thNc th: nghi(m v# t:nh to=n SRt kug
_h<i lng 3Pnh cIu .au Shi .!7 2Sh<i lng 3Pnh Sh[ng8 m
A
r
_h<i lng 3Pnh cIu .au Shi c!t 23Pnh G dIu8 m
1
r
& ch!t 3To c t:nh th%o c[ng thZc@
& 3To
1. !" DJW!) D5O5A &'(!) +\$ D!) 7!) O"Jx!) O"O AA%+ R(,E
Ngu7;n l
m[i trVng amoniac v# c1n, chiRt 0u!t li$id 3Mng %t% v# %t% dIu hda* 9 3a7 h?i
hRt %t% v# dIu hda, c6n li$id v# tU t:nh ra h#m lng li$id trong 100g th)c $hEm
fmoniac c nhi(m vX ha tan $rot%in, l#m tha7 ni .Zc cxng m't ngo#i cLa c=c
ch!t 3To, c]t d67 n<i gi\a ch!t 3To v# Km li$id ha tan dY d#ng h?n
B1n c t:nh ch!t hNt nc l#m cho li$id dY ha tan trong %t% h?n, tham gia v#o
vi(c c]t d67 n<i gi\a ch!t 3To v# Km v# .au cng %t% hn h$ vi .\a dY d#ng h?n
wt% c t:nh ch!t ha tan li$id, nhng cng ha tan c=c ch!t Sh=c nh nc v# c=c
ch!t ha tan trong nc nh@ lacto.%, mu<i Sho=ngDo ngVi ta $hgi dng th;m %t%
dIu hda* wt% dIu hda dY hNt nc h?n %t% thVng, c t:nh ch!t E7 nc v# c=c ch!t ha
tan trong nc ra Shdi %t% thVng, l#m cho %t% thVng ch" chZa ch!t 3To v# %t% dIu hda*
_h[ng th dng %t% dIu hda tha7 cho %t% thVng c vP dIu hda Sh[ng th ha
tan c c=c ch!t 3To c chZa nc*
1O
2m
1
c m
A
8 0 100
m
m
2m
1
r m
m
G m
gi!7
8
l.1. !)"%
Di$id g1m t!t cg c=c %.t% cLa gl70%rin vi c=c a0it 3To* f0it 3To c th l# a0it 3To
no ho'c a0it 3To Sh[ng no v# cg nh\ng amit cLa a0it 3To vP t:nh ch!t l h-c, .inh h-c cLa
n cng gi<ng nh c=c %.t% cLa c=c a0it 3To*
l.2. !" DJW!) D5O5A &"B &'(!) &"c O"=+ '/! 7!) O"Jx!) O"O k(0"DE&
9 0=c nh h#m lng ch!t 3To c th dng c=c $h?ng $h=$ .au@
Qh?ng $h=$ tr)c tiR$@ chiRt ch!t 3To ra Shdi ngu7;n li(u, c6n lng li$id thu
c*
Qh?ng $h=$ gi=n tiR$@ chiRt ch!t 3To ra Shdi ngu7;n li(u, c6n lng mu ngu7;n
li(u cn lKi* Qh?ng $h=$ n#7 c dng Shi cIn 0=c nh h#ng loKt mu m,t lNc*
6.2.1. Nguyn tc
Dng dung m[i h\u c? ha tan t!t ch!t 3To t) do c trong th)c $hEm, .au
uni %t% %t7lic, .!7 Sh[ ch!t 3To thu c v# t:nh ra h#m lng ch!t 3To c trong th)c
$hEm*
B=c dung m[i chiRt ch!t 3To thVng dng l# %t% %t7lic, 3%n%n, t%rtraclorua
cac3onB=c dung m[i $hgi c tr-ng lng ri;ng nhd, nhi(t , .[i th!$, cho $hT$ chiRt
nhanh chng ch!t 3To* Nhi(t , .[i cLa dung m[i c#ng th!$ thP n c#ng dY loKi 3d i .au
Shi chiRt* arong $hng th: nghi(m thVng dng nh!t l# %t% %t7lic vP n c , 3a7 h?i cao,
nhi(t , .[i th!$, dY tinh chR* a<c , v# mZc , chiRt ch!t 3To ho#n to#n $hX thu,c v#o
mZc , nghi4n nhd cLa ngu7;n li(u, 3gn ch!t v# , thuIn ShiRt cLa dung m[i* Dung m[i
$hgi th>t Sh[ v# .Kch, Sh[ng cn chZa nc*
6.2.2. Dung cu , thit b, ha cht
vaa a;n dXng cX vaa a;n dXng cX
1 B6n $h6n t:ch m ePnh hNt Em
A aL .!7 e, chiRt ch!t 3To
5 eR$ c=ch thL7 b ng gi!7 l-c
C B<i ch#7 .Z +'t S:nh 1ng h1
O 9a thL7 tinh 10 BhTn .!7
1m
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
Ngu7;n t]c hoKt ,ng cLa 3, chiRt vo0hl%t@ %t% %t7lic trong 3Pnh 2a8 c un
.[i tr;n 3R$ c=ch thL7 Sh[ng ku= CO
0
B O0
0
B* H?i dung m[i th%o <ng dn l;n tr;n trX
chiRt ti <ng .inh h#n* aKi 67 %t% c l#m lKnh, ngng tX lKi v# chg7 v4 trX chiRt*
_hi lng %t% trong trX chiRt vt l;n , cao cLa <ng 0iong thP to#n 3, %t% h ha tan
ch!t 3To trong trX chiRt ./ tr#n v4 3Pnh cIu* H?i dung m[i lKi tiR$ tXc 3a7 l;n v# chu
trPnh chiRt tr;n lKi tiR$ diYn*
6.2.3. Tin hnh
u= trPnh nh lng li$id c tm t]t nh .? 1 .au@
e=o c=o th: nghi(m 1 an 0Anhm h-c 0A
BhuEn 3 3Pnh cIu
BhuEn 3 mu
BhuEn 3 chiRt
aiRn h#nh chiRt
v!7 Rn m r hMng .<
a:nh SRt kug
Hnh 5 : B chit cht bo Soxhlet
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
ec 1@ BhuEn 3 3Pnh cIu
i oWa .Kch 3Pnh cIu*
i v!7 3Pnh cIu ^ nhi(t , 10O
0
B Rn Sh<i lng Sh[ng ni*
i D#m ngu,i trong 3Pnh hNt Em*
i B6n Sh<i lng 3Pnh cIu m
0
2g8*
i Bho %t% %t7lic Rn Shogng A5 th t:ch 3Pnh*
ec A@ BhuEn 3 mu
i Nghi4n nhd mu 3Mng c<i, ch#7*
i B6n Shogng Og mu ch:nh 0=c Rn 0,0001g v#o chTn .!7, m

2g8*
i v!7 mu ^ nhi(t , 10O
0
B trong 1 giV*
i D!7 ra l#m ngu,i trong 3Pnh hNt Em Shogng 50 $hNt*
i Bhu7n mu v#o <ng gi!7 l-c, g!$ cEn th>n, cho v#o <ng chiRt cLa 3,
vo0hl%t*
ec 5@ BhuEn 3 chiRt
i D]$ 3, chiRt*
i +^ nc chg7 v#o <ng .inh h#n*
ec C@ aiRn h#nh chiRt
i 9un 3Pnh cIu tr;n 3R$ c=ch thL7 Rn nhi(t , CO
0
B O0
0
B*
i aiRn h#nh chiRt m b giV vi i4u Si(n trong 1 giV Sh[ng :t h?n O m lIn v#
Sh[ng nhi4u ku= b 10 lIn %t% tr#n v4 3Pnh cIu*
i BhiRt Rn Shi ho#n to#n hRt li$id* ahW hRt li$id 3Mng c=ch@
G D!7 v#i gi-t %t% ^ trX chiRt nhd l;n m't S:nh 1ng h1*
G uan .=t m't S:nh 1ng h1 Shi %t% h 3a7 h?i hRt*
G NRu Sh[ng cn vRt loang ch!t 3To l# h chiRt 0ong*
ec O@ v!7 ch!t 3To Rn Sh<i lng Sh[ng ni
i +ang 3Pnh cIu i chng c!t thu h1i dung m[i*
i v!7 3Pnh cIu c ch!t 3To ^ nhi(t , 10O
0
B trong 1 giV* D#m ngu,i trong 3Pnh
hNt Em v# c6n*
i aiR$ tXc .!7, l#m ngu,i v# c6n Rn Sh<i lng Sh[ng ni* ahVi gian mi lIn
.!7 tiR$ th%o l# 50 $hNt*
e=o c=o th: nghi(m 1b an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
i phi lKi Sh<i lng 3Pnh cIu v# ch!t 3To .au Shi .!7 m
1
2g8
ec m@ a:nh SRt kug
H#m lng ch!t 3To t:nh 3Mng & th%o c[ng thZc@

m
m m
X
0 1
2&8

=
m
0
l# Sh<i lng cLa 3Pnh cIu 2g8
m
1
l# Sh<i lng cLa 3Pnh cIu v# ch!t 3To 2g8
m l# Sh<i lng mu 2g8
_Rt kug cu<i cng l# trung 3Pnh c,ng cLa hai SRt kug thW .ong .ong, t:nh
ch:nh 0=c Rn 0,1&
Bh;nh l(ch SRt kug gi\a hai lIn thW .ong .ong Sh[ng c ln h?n 0,5&*
l.I. !" DJW!) D5O5A &'(!) &"c O"=+ D!) vO"Jx!) O"O AA%+ R(,Ew
6.3.1. Nguyn tc
m[i trVng amoniac v# c1n, chiRt 0u!t li$id 3Mng %t% v# %t% dIu hda* 9 3a7
h?i hRt %t% v# dIu hda, c6n li$id v# tU t:nh ra h#m lng li$id trong 100g th)c $hEm
fmoniac c nhi(m vX ha tan $rot%in, l#m tha7 ni .Zc cxng m't ngo#i cLa c=c
ch!t 3To, c]t d67 n<i gi\a ch!t 3To v# Km li$id ha tan dY d#ng h?n
B1n c t:nh ch!t hNt nc l#m cho li$id dY ha tan trong %t% h?n, tham gia v#o
vi(c c]t d67 n<i gi\a ch!t 3To v# Km v# .au cng %t% hn h$ vi .\a dY d#ng h?n
wt% c t:nh ch!t ha tan li$id, nhng cng ha tan c=c ch!t Sh=c nh nc v#
c=c ch!t ha tan trong nc nh@ lacto.%, mu<i Sho=ngDo ngVi ta $hgi dng
th;m %t% dIu hda* wt% dIu hda dY hNt nc h?n %t% thVng, c t:nh ch!t E7 nc v#
c=c ch!t ha tan trong nc ra Shdi %t% thVng, l#m cho %t% thVng ch" chZa ch!t 3To
v# %t% dIu hda*
_h[ng th dng %t% dIu hda tha7 cho %t% thVng c vP dIu hda Sh[ng th
ha tan c c=c ch!t 3To c chZa nc*
6.3.2. Dng c, ha cht
6.3.3. Tin hnh
Bho v#o 3Pnh l]ng gKn@
G ah)c $hEm@ 10ml
G Dung dch c1n amoniac@ 10ml
e=o c=o th: nghi(m 1 an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
G wt%@ 11ml
G Bh" th $h%nol$htal%in@ A gi-t
DNc Iu l]c Sh/, .au l]c mKnh dIn v# cu<i cng l]c th>t mKnh* 9 7;n trong 50
$hNt, trong 3Pnh ./ chia l#m A l$@
G D$ di l# l$ amoniac ha tan $rotit v# c=c th#nh $hIn Sh=c cLa th)c $hEm
G D$ tr;n l# %t% ha tan ch!t 3To v# c ln m,t .< ch!t Sh=c*
a=ch l!7 l$ %t%, 3d l$ dung dch amoniac ho'c gi\ l!7 nh lng $rotit
th%o $h?ng $h=$ SRt tLa 3^i a0it*
Bho th;m v#o l$ %t% 10ml %t% dIu hda, l]c th>t mKnh r1i 7;n 1O $hNt, c=c
ch!t Sh[ng $hgi l# ch!t 3To ./ t=ch ra v# l]ng 0u<ng di =7 3Pnh l]ng gKn, c d1n
v#o l$ dung dch amoniac*
Bhu7n hRt $hIn %t% v#o chTn thL7 tinh h .!7 Sh[, c6n .n* oWa 3Pnh l]ng gKn
A lIn, mi lIn vi Oml %t% v# d1n hRt cg v#o chTn thL7 tinh* 9 3<c hRt h?i %t% ^ nhi(t
, thVng, .au cho cg v#o tL .!7 10O
0
B trong 50 $hNt, l!7 ra v#o 3Pnh hNt Em
cho Rn ngu,i v# c6n*
l.I.;. TU!" 6& S$T
H#m lng ch!t 3To@
J2gl8 r 2m
1
c m
0
8*1000z
mu
arong @
m
1
@ tr-ng lng chTn v# li$id
m
0@
tr-ng lng chTn
z
mu
@ tr-ng lng mu
6.3.5. Mt !" #n $% c&n '(u )
e=o c=o th: nghi(m A0 an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
BI 11. XC NH CH ku ACIC, CH ku IOC V CH ku P[ROXIC
TRONG CNU fN*
N)$-.! D5V$@ +u dIu xn h c chi;n i chi;n lKi nhi4u lIn, mu l!7 trong ku=n
c?m*
1. Xc !" c" ,r %c5A
1.1 N)$-.! &/c
arung ha lng acid 3To t) do c trong ch!t 3To 2dIu xn8 3Mng dung dch NaOH
0,0ON, $hgn Zng 0g7 ra@
oBOOH G NaOH H oBOONa G H
A
O 218
1.2 CH!) cH
i eurr%tt% AO ml, c Shogng chia , 0,0Oml
i ePnh tam gi=c AO0ml, c nNt nh=m
i Qi$%t 10ml
1.I H1% c"2&
i Di%th7l %th%r, ru wth7lic b
0
i Dung dch NaOH 0,0ON
i Qh%nol$htal%in 1&
V%5 &'8 c9% "1% c"2&@
i Di%th7l %th%r, ru wth7lic b
0
@ Dng ha tan ch!t 3To
i Dung dch NaOH 0,0ON@ l# ch!t chuEn ,, trung ha acid 3To th%o $hgn Zng
218*
i Qh%nol$htal%in 1& 2QQ 1&8@ D# thc thW 2m,t gi-t NaOH d ./ l#m cho dung
dch n#7 chu7n .ang m#u h1ng8*
1.; T56! "4!" v&"c "5V! &"U !)"5V+ 2 D@!w
BJKc 1. B6n Shogng Ogram dIu v#o A 3Pnh tam gi=c AO0ml Sh[, cX th@
ePnh 1@ C, gram
ePnh Al O,0AO gram
BJKc 2* ah;m A0ml hn h$ Di%th7l %th%r i ru wth7lic b
0
t" l( 21@18 ha tan ch!t
3To* 9>7 n]$ l]c cho ch!t 3To tan hRt, .au th;m 5 gi-t QQ 1& v#o l]c 4u*
BJKc I* BhuEn , hn h$ 3Mng dung dch NaOH 0,0ON cho Rn Shi dung dch c
m#u h1ng 34n trong 50 gi67*
1._ L6& S$T
ah t:ch NaOH 0,0ON ti;u t<n chuEn , cho mi 3Pnh l#@
ePnh 1, z
NaOH
r C,Aml
ePnh A, z
NaOH
r C,Cml
Bh" .< acid c t:nh th%o c[ng thZc .au@
e=o c=o th: nghi(m A1 an 0Anhm h-c 0A
Bh" .< acid r
A,0bO * z
NaOH
*
m
mu
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
arong @
z
NaOH
i th t:ch dung dch NaOh dng chuEn , 2ml8
m
mu
i Sh<i lng mu th: nghi(m 2gram8
A,0bO c .< mg NaOH c trong 1ml dung dch NaOH 0,0ON
c h( .< hi(u ch"nh n1ng , NaOH .W dXng 2 r 18*
L6& S$T@
Bh" .< acid trong mu 3Pnh 1@
Bh" .< acid trong mu 3Pnh A@
Bh" .< acid trung 3Pnh kua A lIn 0=c nh l#@ 1, 2mg NaOHg mu8
N"! 0&@
ua SRt kug Sim tra ta th!7, trong ku= trPnh .W dXng 2chi;n8 nhi4u lIn mZc , thL7
$h6n cLa ch!t 3To ln H h#m lng acid 3To t) do txng cao* 2ch" ti;u <i vi dIu tinh
lu7(n l#, fz 0,A mg_OHg dIu8*
zP v>7 ta Sh[ng n;n .W dXng dIu h kua chi;n i chi;n lKi nhi4u lIn*
2. Xc !" c" ,r I(A
2.1 N)$-.! &/c
Bh" .< iod l# .< g iod SRt h$ vi 100g ch!t 3To
Qh?ng $h=$ n#7 d)a tr;n ngu7;n t]c iod SRt h$ vi c=c acid 3To ^ c=c v tr: n<i
[i* nhi(t , thVng iod $hgn Zng vi acid 3To c trong th#nh $hIn cLa ch!t 3To
ch>m, Shi un nng thP iod SRt h$ vi c=c n<i [i Sh[ng 1ng 4u, Sh[ng l#m no
c ho#n to#n c=c n<i [i* B=c halog%n Sh=c 2clo, 3rom8 $hgn Zng vi acid 3To r!t
mKnh, n;n tha7 iod 3Mng c=c h$ ch!t cLa n vi c=c halog%n Sh=c* _hi cho ch!t 3To
t=c dXng vi m,t lng thUa halog%n v# nh lng halog%n thUa 3Mng dung dch _y
H gigi $hng y
A
* aa ./ .u7 ra c ch" .< y
A
trong mu Shi cho Na
A
v
A
O
5
t=c dXng hRt y
A
.inh ra 2$h?ng $h=$ thR8*
2.2 CH!) cH
i Qi$%t 10ml
i ePnh tam gi=c AO0ml c nNt nh=m
i B<c thL7 tinh O0 ml
2.I H1% c"2&
i Dung dch i{{.@ Bho 1,5g y
A
tinh th v#o c<c thu tinh AO0ml, th;m 100ml
a0ita0%tic >m 'c* 9un tr;n 31i un c=ch thu cho tan ho#n to#n y
A
, l!7 c<c ra
ngu,i* D!7 ri;ng ra A0ml dung dch tr;n, $hIn cn lKi %m .Xc Sh: Bl
A
Sh[ v#
.Kch v#o 2Sh: Bl
A
i4u chR c cIn cho l,i kua 3Pnh chZa H
A
vO
C
>m 'c
l#m Sh[8 Rn Shi n#o m#u cLa y
A
t) do m!t i v# hi(n m#u d n6u thP th[i* NRu
e=o c=o th: nghi(m AA an 0Anhm h-c 0A
Bh" .< acid r
A,0bO * C,A
C,
r 1,m 2mg NaOHg mu8
Bh" .< acid r
A,0bO * C,C
O,0AO
r 1,bA 2mg NaOHg mu8
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
.Xc Sh: Bl
A
ku= nhi4u thP m#u ./ nhKt, cIn cho th;m dung dch y
A
h l!7 ri;ng
2A0ml8 v#o*
Dung dch i{{. vUa i4u chR c l# dung dch yBy trong BH
5
BOOH 'c, Sh[ng
chZc Bl
A
v# y
A
t) do* NRu dng dung dch Na
A
vO
5
0,1N chuEn , dung dch i{{. thP
ti;u hao $hgi g!$ A lIn .o vi Shi cha .Xc Sh: Bl
A
*
i Dung dch _y A&
i Dung dch tinh 3,t 1&
i Dung dch Na
A
v
A
O
5
0,1N
i Dung dch BHBl
5
zai tr cLa ha ch!t
i Dung dch yv 2h$ ch!t c chZa halog%n8 chNng t=c dXng vi c=c acid 3To,
thR chn cho li;n SRt y
A
trong c=c n<i [i cLa acid 3To*
i Qhgn Zng@
i Dng _y gigi $hng y
A
tU lng 2 8
i Na
A
v
A
O
5
0,1N chuEn , y
A
tKo th#nh@ y
A
G ANa
A
v
A
O
5
H Na
A
v
C
O
m
G ANay
2.; T56! H4!" 2Sim tra A lIn8
BJKc 1* B6n mu v#o A 3Pnh tam gi=c AO0ml, mi 3Pnh@
i ePnh 1@ 1,05 gram
i ePnh Al 1,0O gram
ah;m 10ml BHBl
5
v#o, >7 nNt nh=m lKi, l]c cho tan hRt mu*
ec A* ah;m 10ml yv, >7 n]$ v# l]c trong t<i 1 giV* vau th;m 10ml dung
dch _y A& r1i th;m O0ml nc c!t, >7 n]$ l]c 4u*
BJKc I* BhuEn , 3]ng dung dch Na
A
v
A
O
5
0,1N 2h c hi(u ch"nh8 Rn m#u v#ng
r?m, th;m O gi-t thu<c thW H1 tinh 3,t 1& v# tiR$ tXc chuEn Rn m!t m#u 0anh* phi
lKi th t:ch ti;u t<n 2z8*
G5T5 &"Uc"@ BhuEn , 3]ng dung dch Na
A
v
A
O
5
0,1N Rn m#u v#ng r?m 2gIn im
t?ng ?ng8 lNc n#7 lng iod cn trong dung dch r!t :t* NRu th;m h1 tinh 3,t ku=
.m, iod trong dung dch cn nhi4u, tinh 3,t h!$ $hX nhi4u iod l#m cho iod $hgn Zng
ch>m vi thio.unat natri, do ./ d chuEn , ku=*
2._ L6& S$T
ah t:ch dung dch Na
A
v
A
O
5
0,1N ti;u t<n cho mi 3Pnh l#
i ePnh 1, z r 5,Oml
i ePnh A, z r 5, ml
e=o c=o th: nghi(m A5 an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
I. Xc !" c" ,r OE'(05&
I.1 N)$-.! &/c
B=c $%ro0it tKo th#nh trong ku= trPnh [i ha cLa ch!t 3To, trong m[i trVng acid c
Shg nxng $hgn Zng vi _y gigi $hng iod th%o $hgn Zng@
Dng iod gigi $hng ra ./ c chuEn , 3Mng dung dch Na
A
v
A
O
5
@
ANa
A
v
A
O
5
G y
A
ANay G Na
A
v
C
O
m
I.2 CH!) cH
i eurr%t AOml
i ePnh tam gi=c AO0ml c nNt nh=m
i Qi$%t 10ml
i Qi$%t 1ml
I.I H1% c"2&
i fcid ac%tic BH
5
BOOH CN
i Na
A
BO
5

i Bloroorm 2BHBl
5
8
i Dung dch _y 10N
i Dung dch Na
A
v
A
O
5
0,0AN
i H1 tinh 3,t 1&
V%5 &'8 c9% "1% c"2&
i BH
5
BOOH CN tKo m[i trVng acid, vP trong m[i trVng acid thP _y mi t=c
dXng mKnh vi c=c h$ ch!t $%ro0id tKo ra iod*
i Na
A
BO
5
c vai tr l# dung dch (m $H
i _y dng t=c dXng vi c=c h$ ch!t $%ro0id trong m[i trVng acid 2A8
i Na
A
v
A
O
5
0,1N chuEn , y
A
tKo th#nh@ y
A
G ANa
A
v
A
O
5
H Na
A
v
C
O
m
G ANay
e=o c=o th: nghi(m AC an 0Anhm h-c 0A
o
1
cBHcBHco
A
G A_y G ABH
5
BOOH o
1
cBHcBHco
A
G ABH
5
BOO_ GH
A
O G y
A
2A8
O O O
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
5*C aiRn h#nh
ec 1* B6n mu v#o A 3Pnh tam gi=c AO0ml c nNt nh=m Sh[ .Kch@
ePnh 1@ 1,0Ogram
ePnh A, 1,0 gram
ah;m 1g Na
A
BO
5
GOml BH
5
BOOH CN >7 n]$ lKi v# l]c cho Rn Shi Na
A
BO
5
tan hRt*
BJKc 2* +^ n]$ cho nhanh v#o 3Pnh 10ml BHBl
5
, l]c cho Rn Shi mu tan hRt r1i
th;m nhanh 1ml _y 10N, l]c trong t<i 1O $hNt*
ah;m Oml nc c!t 2un .[i ngu,i8 l]c 4u*
BJKc I* ah;m O gi-t h1 tinh 3,t 1&, v# chuEn , 3Mng dung dch Na
A
v
A
O
5
0,0AN cho
Rn Shi m!t m#u 0anh* y
A
G ANa
A
v
A
O
5
H Na
A
v
C
O
m
G ANay
_Rt thNc th: nghi(m, ghi lKi th t:ch dung dch Na
A
v
A
O
5
0,0AN ti;u t<n*
I._ L6& S$T
ah t:ch dung dch Na
A
v
A
O
5
0,1N ti;u t<n cho mi 3Pnh l#
ePnh 1, z r A,ml
ePnh A, z r A,b ml
Bh" .< $%ro0it c t:nh th%o c[ng thZc@
arong @ Q
0
zi ch" .< $%ro0it 2m%kSg8
z
1
i .< ml Na
A
v
A
O
5
0,0AN ti;u t<n Shi chuEn , mu th: nghi(m
z
A
i .< ml Na
A
v
A
O
5
0,0AN ti;u t<n Shi chuEn , mu tr]ng 2z
A
r08
i h( .< hi(u ch"nh n1ng , Na
A
v
A
O
5
2 r 18
Ni n1ng , ?ng lng gam Na
A
v
A
O
5
m
mu
i _h<i l)ong mu th: nghi(m 2g8
1000i h( .< ku7 chuEn cho 1Sg ch!t 3To 2mu8*
ah%o SRt kug tiRn h#nh, ta c@
ePnh 1@
ePnh A@
Bh" .< $%ro0it kua A lIn 0=c nh l#@ Q
0
z r C,O 2m%kSg8
e=o c=o th: nghi(m AO an 0Anhm h-c 0A
Q
0
z r
2z
1
c z
A
8**N*1000
m
mu
Q
0
z r
2A,O c 08 * 1 * 0,0A * 1000
1,0O
r C,m 2m%kSg8
Q
0
z r
2A, c 08 * 1 * 0,0A * 1000
1,0O
r O1,C 2m%kSg8
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
e=o c=o th: nghi(m Am an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
BI {: XC NH PROT[IN THb TRONG THC PHM
I. CHUN B i THU*T
1a:nh ch!t ho= h-c cLa $rot%in th[ trong th)c $hEm*
1* B=c $h?ng $h=$ 0=c nh $rot%in th[ trong th)c $hEm*
A* Ngu7;n l cLa $h?ng $h=$ _{%ldahl@
i a!t cg c=c dKng nit? trong c? th, ha7 c=c m[, c=c tR 3#o c g-i l# nit? tnng .<* Nit?
c trong th#nh $hIn amino acid cLa $rot%in c g-i l# nit? $rot%in* Nit? Sh[ng c
trong th#nh $hIn cLa $rot%in nh cLa c=c mu<i v[ c?, acid nitric, ur%, amino acid t)
do,*** c g-i l# nit? $hi $rot%in*
i Ni m,t c=ch Sh=c@ Nit? tnng .< r nit? $rot%in G nit? $hi $rot%in*
Ngu7;n l cLa $h?ng $h=$@
i +u c v[ c? ha 3Mng H
A
vO
C
>m 'c ^ nhi(t , cao vi ch!t 0Nc t=c* Qhgn Zng
cLa ku= trPnh v[ c? ha 0g7 ra th%o thZ t) .au@
AH
A
vO
C
AH
A
O G AvO
A
G O
A
B=c ch!t chZa nit?
4 2
S O H
NH
5
ANH
5
G H
A
vO
C
2NH
C
8
A
vO
C
i Dng dung dch NaOH uni NH
5
ra Shdi dung dch* aa c $hgn Zng .au@
2NH
C
8
A
vO
C
G ANaOH Na
A
vO
C
G H
A
O G ANH
5
i NH
5
3a7 .ang 3Pnh hZng c chZa dung dch H
A
vO
C
2h 3iRt trc n1ng ,, th t:ch8*
Qhgn Zng 0g7 ra nh .au@
ANH
5
G AH
A
O ANH
C
OH
ANH
C
OH G H
A
vO
C
2NH
C
8
A
vO
C
G A H
A
O
9nh $h6n lng H
A
vO
C
d 3Mng dung dch NaOH, tU ta 0=c nh c lng H
A
vO
C
h
$hgn Zng v# t:nh c h#m lng nit? tnng c trong mu*
II. CNG C V THIT B
i 1 3, +icroS{%ldahl
i 1 3Pnh _{%ldahl, gi= q 3Pnh
i 1 3R$ i(n, 1 li amiang
i 1 3R$ un 3Pnh cIu
i 1 3ur%tt% AOml, 1 gi= q 3ur%tt%
i 1 $i$%t 10ml
i 5 %rl%n AO0ml
i 1 %rl%n 100ml
i 1 3Pnh nh mZc 100ml*
i 1 3%ch%r AO0ml*
i 1 3$ cao .u
i 1 $hYu thL7 tinh nhd
III. H~A CHT.
i +u th)c $hEm@ nc m]m
i Dung dch H
A
vO
C
>m 'c
i Dung dch $h%nol$htal%in 1& trong %tanol
m0&
i Dung dch H
A
vO
C
0,1N*
i Dung dch NaOH 50&*
e=o c=o th: nghi(m A an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
i Hnn h$ 0c tc @ BuvO
C
@ _
A
vO
C
t l( 1@1
i Bh" th +o 1&@
IV. THC HNH.
1. VB cx "1% +\$:
i B6n Shogng Ogam nc m]m cho v#o 3Pnh _{%ldahl vi A0ml H
A
vO
C
>m 'c v# Shogng
Ag hnn h$ ch!t 0Nc t=c* 9>7 3Pnh 3Mng $hYu nhd*
i 9 nghi;ng 3Pnh _{%ldahl
CO
0
tr;n 3R$ i(n un tU tU cho
Rn Shi nhi(t , cLa ku= trPnh
$h6n gihi Kt nhi(t , C00
0
B
2 ku= trPnh c th th)c hi(n tr;n
3R$ i(n d67 +ai0o ha7 c th
3Mng 3, $h6n gigi chu7;n
dng8 * 9un .[i cho Rn Shi
dung dch trong .u<t c m#u
0anh l? cLa BuvO
C
, ngu,i*
I. C"J!) c2&:
i *hu+n b b,nh h-ng. hNt
O0 ml H
A
vO
C
0*1N cho v#o %rl%n 100ml* Bho th;m A gi-t ch" th +o v#o 3Pnh* D]$ %rl%n v#o
di <ng .inh h#n .ao cho Iu <ng .inh h#n ng>$ v#o trong dung dch*
i *hu+n b /ch ch(ng ct. Bhu7n dung dch h v[ c? ha trong 3Pnh _{%ldanhl v#o 3Pnh
chng c!t cLa m=7 c!t Km, tr=ng nhi4u lIn dung dch $h6n gihi 3Mng nc c!t r1i chu7n v#o
3Pnh chng c!t, th;m O gi-t ch" th $h%nol$htal%in 1&* arung ha dung dch trong 3Pnh
chng c!t 3Mng NaOH 50& 2 Qhgi trung ha tU tU vP 67 l# $hgn Zng gi\a a0it mKnh v# 3a
mKnh ^ n1ng , >m 'c n;n 0h7 ra r!t mKnh8 cho Rn Shi dung dch trong 3Pnh chu7n m#u
h1ng 2 c th nh>n 3iRt 3Mng .) 0u!t hi(n cLa SRt tLa 1ng c m#u 0anh %n 8 * vau cho
th;m Aml dung dch NaOH 50& v# Sha $hYu lKi* Bho v#o m,t :t nc c!t l;n $hYu Sim
tra , S:n cLa thiRt 3*
i *h(ng ct.
Bho b00ml nc c!t v#o 3Pnh un* +^ nc cLa <ng .inh h#n* Bhng c!t li;n tXc C0
$hNt S tU Shi 3Pnh 3]t Iu .[i* HK 3Pnh hZng* oWa .Kch Iu <ng .inh h#n 3Mng nc c!t* 9't
gi!7 $H .=t mi(ng <ng .inh h#n* NRu gi!7 $H Sh[ng ni m#u thP ku= trPnh chng c!t h ho#n
t!t* 2 arong .u<t ku= trPnh chng c!t thP m#u cLa 3Pnh hZng NH
5
$hgi Sh[ng ni m#u , nRu
chu7n m#u kua m#u 0anh d?ng c ngha l# lng a0it dng h!$ $hX thiRu, lNc $hgi l#m
lKi v# txng lng a0it h!$ $hX l;n v: dX l# O0ml8
e=o c=o th: nghi(m Ab an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
9nh lng H
A
vO
C
d trong 3Pnh hZng 3Mng dung dch NaOH 0,1N cho Rn Shi dung
dch chu7n .ang m#u v#ng nhKt*
;. TU!" 6& S$T:
i H#m lng nit? to#n $hIn t:nh 3Mng c[ng thZc@
Nit? to#n $hIn 2&8 r
bd
m
V N V N 100 8 2 01C * 0
A A 1 1

arong
+ z
1
@ .< ml H
A
vO
C
0,1N cho v#o 3Pnh hZng SRt h$ vi NH
5
*
+ N
1
@ n1ng , ?ng lng cLa dung dch H
A
vO
C
cho v#o 3Pnh hZng
2r0,1N8
+ z
A
@ .< ml NaOH 0,1N dng chuEn , H
A
vO
C
thUa*
+ N
A
@ n1ng , ?ng lng cLa dung dch NaOH dng chuEn ,
2r0,1N8
+ z @ th t:ch mu thW t:nh 3Mng ml*
+ 100 @ ku7 ni v4 &
+ 0*01C @ Sh<i lng cLa m,t mdlg N
H#m lng $rot%in th[ 2&8 r nit? tan $hIn 0 m,AO
G m,AO l# h( .< kui ni tU &N .ang $rot%in Zng vi mu l# nc m]m, tht ,c=***
G NRu mu l# ngL c<c , rau, kug thP h( .< kui ni l# O,bO
G NRu mu l# .\a , omat nh\ng .hn $hEm t?ng t) thP h( .< kui ni l# m,5b
i *h0 ) .
+ arVng h$ th)c $hEm c chZa nitrat, $hgi $h6n t:ch nitrat ri;ng v# SRt kug nit? h\u
c? ch:nh l# hi(u .< gi\a nit? to#n $hIn v# nit? trong nitrat* H#m lng $rot%in 3Mng
SRt kug nit? h\u c? nh6n vi m*AO*
V. CeU HI CHUN B:
1* z[ c? ha mu ngha l# gP ziRt $h?ng trPnh $hgn Zng 0g7 ra trong ku= trPnh v[ c?
ha mu*
A* ziRt $h?ng trPnh $hgn Zng 0g7 ra trong ku= trPnh chng c!t v# chuEn , mu*
5* B nh\ng dKng cgi 3i;n n#o cLa h( th<ng _{%ldahl* N;u 'c im cLa c=c h( th<ng
*
C* Qrot%in th[ c 'c t:nh chung l# gP zi(c Sim tra h#m lng $rot%in th[ c ngha
nh thR n#o <i vi .gn $hEm th)c $hEm*
e=o c=o th: nghi(m A an 0Anhm h-c 0A
aH $h6n t:ch th)c $hEm pzHD@ Hunh ah=i Ngu7;n
e=o c=o th: nghi(m 50 an 0Anhm h-c 0A