PRAVILNI ODGOVORI IN KOMENTARJI

PRI NEKATERIH NALOGAH KOLOKVIJA

KOLOKVIJ FARMACEVTSKA BIOLOGIJA - VAJE
1. rok, 24.5.2005
BOTANIČNI DEL:

1. V spodnjo tabelo vpiši podatke o rastlinah, ki jih prepoznaš s projekcije!

Latinsko ime rastline Slovensko ime rastline Družina

A.

B.

C.
točke 3/…..
Izmed rastlin na projekciji (obkroži pravilne trditve):
a) vsaj ena spada med enokaličnice
b) vsaj ena je strupena
c) vsaj ena vsebuje fosfolipide
d) vsaj ena ima sestavljene liste
e) vsaj ena naravno ne uspeva v Sloveniji
f) vsaj ena nima cvetov
g) vsaj ena ima zvezdaste cvetove
h) vsaj ena ima somerne cvetove
točke 2/…..
2. Naštej vsaj tri značilnosti smreke in jelke, po katerih lahko razlikujemo ti dve vrsti.

točke 1,5/…..

3. Katere vrste kristalov kalcijevega oksalata poznaš in kateri so značilni za Allium cepa L. in kateri za
razhudnikovke?

Pravilen odgovor: stiloidi, druze pesek in rafidi . Čebula - stiloidi, voljčja češnja - pesek, kristavec-stiloidi, zobnik-stiloidi

točke 1/…..
4. Na podlagi katerih parametrov tvorimo filogenetska drevesa ali dendrograme?

Pravilen odgovor:
1. Morfološke lastnosti
2. Kemotaksonomija
3. Fosili
4. Molekularno-biološko
točke 1/…..

5. Poveži pojme:
1. prevodno tkivo a) palisadne celice Pravilni odgovori:
1. 2. središčno tkivo b) sklerenhim e
2. 3. parenhim c) žilni kambij c
3. 4. oporno tkivo d) rastni vršiček a
4. b
5. meristem e) ksilem
5. d ali c ali c,d
6.
6. organ f) korenina f
točke 1/…..

(stran 1 od 7)
6. Dopolni:
Pravilni odgovori:
Islandski lišaj - _______________________(latinsko ime rastline)
- Cetraria islandica
Islandski lišaj - _______________________(latinsko ime droge) - Lichen islandicus
- Parmeliaceae
Družina:_____________________________
- lihenin
Droga vsebuje: 1.______________________, ki je strukturno podoben celulozi; - izolihenin
- usninsko kislino
2.______________________, ki je strukturno podoben škrobu;
- antitusik, antiseptik,
3._______________________, ki spada med grenke lišajske kisline; spodbijevalec imunskega odziva,
vpliva na apetit
Učinki islanskega lišaja so: 1.__________________________
antitusik ni enako kot
2.__________________________ ekspektorans!
3.__________________________ točke 3/…..

7. Obkroži pravilen(ne) odgovor(e)::

(stran 2 od 7)
Celokupno število jeder, ki je potrebno pri dvojni oploditvi Katere strukture v rastlinski celici obdajajo membrane?
pri kritosemenkah je: a) kromoplaste
a) ŠEST- 2 spermalni, 1 jajčno, 3 endospermalna b) mitohondrije ribosome sestavljajo rRNA in
b) PET- 2 spermalni, 1 jajčno, 2 polarni c) vakuolo proteini in tudi membranski
c) ŠTIRI- 2 spermalni, 1 jajčno, 1 endospermalno d) jedro organeli so obdani z
membranami!
d) TRI- 1 spermalno, 1 jajčno, 2 polarni e) ribosome
e) DVA- 1 spermalno, 1 jajčno f) peroksisome

Makromolekule v rastlinah so: Koščica pri breskvi je:

a) celuloza a) seme
b) saponini Rastline ne vsebujejo b) seme in endokarp
GLIKOGENA!
c) čreslovine c) seme in eksokarp
Glive ne sodijo med
d) mitohondrijska DNA rastline d) seme in perikarp
e) glukoza e) ahena
f) glikogen

V rastlinah najdemo naslednje nukleinske kisline: Morchella esculenta tvori plodišča v obliki:
a) kromosomsko DNA a) kleistotecija
b) prenašalne DNA b) apotecija
c) informacijske DNA DNA molekula ni RNA! c) peritecija
d) mitohondrijsko DNA d) psevdotecija
e) plastidno DNA e) ne tvori plodišč
f) ribosomalne DNA

Koliko apikalnih meristemov se nahaja v embriju semena?

a) ena
b) dva
c) tri
d) deset točke 3,5/…..
e) preveč

8. Na kratko opiši katere vrste spolnega razmnoževanja poznaš in kaj je za posamezno vrsto značilno!

Pravilen odgovor: dovolj je, če ste omenili posamezno vrsto razmnoževanja, oogamijo, anizogamijo in izogamijo ter jo
natančno opisali.

Gemetangijogamija ter somatogamija, pa sta predmet le glivnega kraljestva, vprašanje je bilo precej bolj splošno, vendar ste
tudi v tem primeru dobili del točk

točke 1/…..

9. Poimenuj označene strukture na sliki

A. _______________________________
B. _______________________________
C. _______________________________
D. _______________________________

b) Za katero družino je značilna struktura označena z A?

c) Naštej tri droge, ki spadajo v to družino (latinska imena).

d) Katere od označenih struktur ne vsebujejo kloroplastov?

(stran 3 od 7)
 točke 4/…..

10. Naštej razlike v prečnem prerezu stebla enokaličnic in dvokaličnic.

točke 2/…..

KEMIJSKI DEL:

1. Katera molekula je na sliki desno?

Ni tebain ali skopolamin ali derivat morfina!

1/a V katero skupino spojin spada?

1/b Naštej vsaj dva reagenta za dokazovanje tega tipa spojin!

1/c V kateri rastlini (latinsko ime) jo najdemo?

1/d Kakšen je učinek spojine?

Naveden mora biti vsaj analgetični učinek
točke 3/…..

2. Kakšne učinke imajo droge s čreslovinami?

Za vse točke mora biti omenjen adstringentni učinek na beljakovine ter učinek notranje - antidiaroično in učinek
zunanje -antiseptično.
točke 1/…..

3. Na vajah smo eterična olja pridobivali s pomočjo ekstrakcije z vodno paro. Naštej vsaj še tri alternativne
metode pridobivanja eteričnih olj.

točke 1/…..
4. Vsebnost flavonoidov v listih breze (Betulae folium) bomo določali po Evropski farmakopeji. Ta predpisuje, da
morajo listi breze vsebovati vsaj 1,5 % flavonoidov, izraženih kot hiperozid (M=464,4).
ASSAY
Stock solution. In a 100 ml round-bottomed flask introduce 0.2 g [1] of the powdered drug (355), 1 ml [2] of a 5 g/l
solution of hexamethylenetetramine R, 20 ml [3] of acetone R and 2 ml [4] of hydrochloric acid R1. Boil the mixture
under a reflux condenser for 30 min [5]. Filter the liquid through a plug of absorbent cotton in a 100 ml flask. Add the
absorbent cotton to the residue in the round-bottomed flask and extract with two quantities, each of 20 ml [6], of acetone
R, each time boiling under a reflux condenser for 10 min [7]. Allow to cool to room temperature, filter the liquid through
a plug of absorbent cotton then filter the solution through a filter-paper in the volumetric flask, and dilute to 100 ml [8]
with acetone R by rinsing of the flask and filter. Introduce 20 ml [9] of the solution into a separating funnel, add 20 ml
[10] of water R and extract the mixture with one quantity of 15 ml [11] and then three quantities, each of 10 ml [12], of
ethyl acetate R. Combine the ethyl acetate extracts in a separating funnel, rinse with two quantities, each of 50 ml [13], of
water R, and filter the extract over 10 g [14] of anhydrous sodium sulphate R into a 50 ml volumetric flask and dilute to
50 ml [15] with ethyl acetate R.

(stran 4 od 7)
Test solution. To 10 ml [16] of the stock solution add 1 ml [17] of aluminium chloride reagent R and dilute to 25 ml [17]
with a 5 per cent V/V solution of glacial acetic acid R in methanol R.
Compensation solution. Dilute 10 ml [18] of the stock solution to 25 ml [19] with a 5 per cent V/V solution of glacial
acetic acid R in methanol R.
Measure the absorbance [20] of the test solution after 30 min [21], by comparison with the compensation solution at 425
nm.
Calculate the percentage content of flavonoids, calculated as hyperoside, from the expression:
A F
i.e. taking the specific absorbance of hyperoside to be 500.
m
A = absorbance at 425 nm,
m = mass of the substance to be examined, in grams.

1/a Katere od 21 meritev, ki so v postopku [označene z oglatimi oklepaji] moramo izvesti z večjo natančnostjo?
Natančne
meritve:
točke 3/…..
4/b Izračunaj faktor F v zgornji formuli!

Pravilen odgovor: F= 1,25 %g

Za nastavljeno enačbo dobite 1 točko, za pravilen izračun še 1 točko. Najpogostejši napaki sta bili napačni končni
volumen vzorca (25 mL in ne 10 mL) in faktor alikvotiranja, ki je 25.

točke 2/…..

4/c Pri analizi enega od vzorcev smo izmerili absorbanco 0,299. Izračunaj vsebnost flavonoidov v tem vzorcu!

točke 2/…..

4/d Ali analizirani vzorec ustreza predpisu? Kolikšna je mejna izmerjena absorbanca, pri kateri vzorec še ustreza
predpisu?

točke 1/…..

4/e Koliko mL etilacetata potrebujemo za analizo treh vzorcev, če vsakega od njih analiziramo trikrat?
Pravilen odgovor: 450 mL
Pri vsaki analizi dopolnimo z etilacetatom do 50 mL. Ker bi analizirali 3 vzorce 3x, bi porabili 450 mL topila.
točke 1/…..

5. Antrakinone dokazujemo z Bornträgerjevo reakcijo. V kakšni obliki morajo biti antrakinoni, da dajo pozitivno
reakcijo? Opiši princip reakcije!

Za vse točke je potrebno napisati samo(!) sledeče:

Antrakinoni morjao biti v obliki 1,8-dihidroksi antrakinonski obliki.
Princip reakcije se nanaša na 1,8-dihidroksi antrakinone, ki v alkalnem mediju zardi delokalizacije elektronov
obarvajo rdeče.

(stran 5 od 7)
Po nepotrebnem ste pisali postopek/metodo priprave 1,8-dihidroksi antrakinonov! Mg2+ ioni niso potrebni!

točke 2/…..

6. Na kakšen način oziroma zakaj saponini povzročajo hemolizo?

Potrebno je bilo omeniti interakcijo z celično membrano eritrocitov, ki zaradi destabilizacije prepusti vodo v
notranjost celice po principu osmoze.

točke 1/…..

7. Kako dajemo saponine, če hočemo, da izzovejo ekspektorativni učinek in kakšen je njegov mehanizem
nastanka?
Potrebno je bilo omeniti draženje vagusa in posledično(!) redkejšo sluz.
Kdor ni navedel gastropulmonalnega refleksa za bruhanje preko vagusa, je dobil 0,5 točke manj! Saponinov ne
inhaliramo ali grgramo!

točke 1/…..

8. Kaj sta produkta hidrolize linamarina z emulzinom? Napiši reakcijo.

Nekateri ste namesto linamarina risali amigdalin!

točke 1/…..

9. V listih čajevca sta prisotna tako kofein kot teofilin. Kako smo ti sicer podobni spojini med izolacijo ločili?

točke 2/…..

10. Obkroži rastlino, ki ne vsebuje fenolnih glikozidov:

Vaccinium myrtillus, Arctostaphylos uva-ursi, Buxus sempervirens, Vaccinium vitis-idaea točke 0,5/…..

(stran 6 od 7)
BIOTEHNOLOŠKI DEL:

1. Obkroži pravilen(ne) odgovor(e):

DNA lahko izoliramo iz:
a) listov
b) krvi Velika večina je pozabila hife, ki imajo jedra!
c) las
d) nohtov
e) hif
f) kostnega mozga točke 0,5/…..

2. Kako bi izolirali informacijsko RNA iz mešanice s kromosomsko, plastidno in mitohondrijsko DNA?

Pravilen odgovor je afinitetna kromatografija s poli-dT

- DNaze bi DNA samo še bolj sfragmentirale, ne bi jo pa razgradile na posamezne nukleotide!
- Z ostalimi metodami, ki ste jih našteli, pa mRNA ne bi bilo mogoče izolirati! Lahko bi jo bilo do neke mere videti na gelu

točke 1/…..
3. Naštej mogoče vzroke za fazo platoja pri kinetičnem profilu verižne reakcije s polimerazo?

Pravilen odgovor: V plato pridemo zaradi kopičenja produkta in s tem inhibicijo PCR reakcije.
Prevelika količina produkta preseže kapaciteto Taq polimeraze, da bi v vsakem ciklu iz ene kopije naredila dve kopiji -
učinkovitost pomnoževanja se upočasni! Ostale snovi so v tolikšnem presežku, da ne vplivajo bistveno, poleg tega poznamo
danes že takšnje modifikacije Taq polimeraze, da se sprosti iz nosilca ob dvigu T nad 94 stopinj - zato se v vsakem ciklu
sprosti le del celotnega nabora encima
točke 1/…..
4. Kako bi optimirali reakcijsko zmes in reakcijske pogoje PCR reakcije?

1. Kaj je pojem optimizacije reakcije?

Pufri ter temperature denaturecije, elongacije nikoli niso stvar optimizacije, ampak prepogoj, ki ga moramo zadostiti.
Denaturacija poteka enako pri 94, 95, 96 stopinjah celzija, temperature elongacije pa je pogojena z encimom in je zato ne
optimiramo, ampak uporabimo 72 stopinj, ki je temperaturni optimum Taq polimeraze.
Pravilen odgovor:
1. z iskanjem optimalne T naleganja začetnikov - annealinga
3. v zmesi sprememinjamo koncentracijo Mg2+ ionov, možni so tudi Mn2+
4. v zmesi spreminjamo koncentracijo DNA
točke 2/…..

5. V bakterijskem lizatu bi radi določili celokupno količino nukleinskih kislin. Kako bi lahko to storili:
a) gravimetrično b) spektrofotometrično?

Predpogoj je, da iz izolata nukleinske kisline izoliramo (npr. po postopku, ki je opisan v skripti).
Pravilen odgovor:
a) nukleinske kisline oborimo s CTAB, ter oborino stehtamo!
b) raztopini nukleinskih kislin izmerjenjem absorbance A260
Vsebnosti nukleinskih kislin ne določamo z EtBr pri katerem bi merili fluorescenco in ne absorbance.
točke 2/…..
6. Kakšna je interakcija, če sploh pride do interakcije, etidijevega bromida z: a) DNA b) RNA?

a) EtBr se interkalira, vloži med baze preko hidrofobnih interakcij, pri tem pa ob ekscitaciji DNA le ta začne imitirati
svetlobo določene valovne dolžine - začne fluorescirati, zato ne merimo absorbance!!!!! in zato se ne premakne absorpcijski
maksimum!!!!!!!!!!!!, ampak merimo oziroma zaznamo fluorescenco.

b) Velika večina je pozabila na RNA rep, ki ste ga videli na gelu, tudi RNA tvori sekundarno strukturo v obliki dvovijačnice,
vendar pa le na določenih predelih, enoverižna RNA tako ni linearna, ampak tvori sekundarne strukture, spomnite se samo
na obliko, ki jo ima tRNA. Se pa pojavljajo te strukture tudi pri vseh drugih RNA molekulah. Kjerkoli imate povezavo med
baznimi pari, pa je to mesto kamor se vloži EtBr, tako, da EtBr prav tako interagira z RNA!

Intrekcija z DNA, RNA pa je vse prej kot kovalentna, saj ne nastane kovalentna vez! Etidijev bromid se interkalira s pomočjo
hidrofobnih intrakcij (fenantrenski del je planaren in je zato mogoče vsidranje med baze), deloma pa tudi z vodikovimi vezmi
in ionskimi privlaki.

(stran 7 od 7)
(stran 8 od 7)
ČAJI:

1. Dopolni slovenska in latinska imena drog v recepturi čajne mešanice:

LATINSKO IME DROGE SLOVENSKO IME DROGE

A. _______________________ zel tavžentrože 30,0

B. Millefolii herba ________________________ 25,0
C. _______________________ korenina rumenega svišča 15,0
D. _______________________ list navadnega mrzličnika 15,0
E. Menthae piperitae folium ________________________ 15,0

Kakšno indikacijo ima navedena čajna mešanica?

Napiši, katere so glavne, dopolnilne in pomožne droge!

Za vsako drogo napiši glavni učinek, ki je pomemben za omenjeno čajno mešanico!

A. ___________________________________
B. ___________________________________
C. ___________________________________
D. ___________________________________ točke 6/…..
E. ___________________________________

2. Iz največ 5 drog sestavi čaj za lajšanje izkašljevanja. Recepturo napiši z latinskimi in slovenskimi imeni drog.
Napiši tudi količinsko sestavo in označi katere droge so glavne, dopolnilne in pomožne.

Droge niso rastline!!!!!!

točke 4/…..

3. Naštej tri droge s karminativnim delovanjem. Droge poimenuj tudi z latinskimi imeni.

točke 1,5/…..

4. Kaj je potrebno za dober uroantiseptični učinek urološkega čaja, ki vsebuje liste vednozelenega gornika, in kako
to dosežemo?

točke 1/…..

(stran 9 od 7)