ng dng phng php phn tch cng c

Phng php phn tch cng c l phng php thuc b mn ca ngnh ha (Ha
phn tch) nghin cu v thnh phn cu to v hm lng cc thnh phn ca
nhng mu kho st. Ha phn tch thng c chia thnh Ha phn tch nh
tnh v Ha phn tch nh lng nhng cng hay c chia thnh Ha phn tch
v c v Ha phn tch hu c.
Cc phng php ca ha phn tch c th c chia thnh hai loi: nh tnh v
nh lng. Ngoi ra cn c phn loi thnh cc phng php ha hc v cc
phng php vt l.
Ha phn tch thc cht l ngnh phn tch ng vai tr quan trng trong khoa hc,
k thut, trong nghin cu khoa hc; iu tra c bn pht trin tim nng, khai
thc ti nguyn khong sn; nh gi cht lng sn phm.
Sc k l mt h cc k thut ha phn tch dng tch cc cht trong mt hn
hp. N bao gm vic cho mu cha cht cn phn tch trong "pha ng", thng
l dng chy ca dung mi, di chuyn qua "pha tnh." Pha tnh tr hon s di
chuyn ca cc thnh phn trong mu. Khi cc thnh phn ny di chuyn qua h
thng vi tc khc nhau, chng s c tch khi nhau theo thi gian, ging
nh cc vn ng vin chy maratng. Mt cch l tng, mi thnh phn i qua
h thng trong mt khong thi gian ring bit, gi l "thi gian lu."
Trong k thut sc k, hn hp c chuyn ch trong cht lng hoc kh v cc
thnh phn ca n c tch ra do s phn b khc nhau ca cc cht tan khi
chng chy qua pha tnh rn hay lng. Nhiu k thut khc nhau c dng
phn tch hp cht phc tp da trn i tnh khc nhau ca cc cht trong mi
trng ng kh hoc lng v i vi mi trng hp ph tnh m chng di chuyn
qua, nh giy, gelatin hay gel magnesium silicate. Ta phn loi phng php sc
k nh sau:
Sc k: - Sc k kh: + Sc k kh lng (GLC)
+ Sc k kh rn (GSC)
- Sc k lng: + Sc k lng-lng (LLC)
+ Sc k lng-rn (LSC)
+ Sc k trao i ion (IEC)

+ Sc k loi tr (EC)
Trong cc phng php sc k th phng php sc k lng hiu nng cao hin nay
l phng php hin i v hiu qu hn c do chng ta tm hiu v ng dng
n trong thc t.
Nguyn tc h thng my HPLC:


O 1 2 3 4 5

O: Ngun cung cp pha ng (mobile phase)
- Bnh cha pha ng
1: Bm cao p (h thng cung cp dung
mi)
- Bm pha ng vo ct tch
- iu khin tc ng, p sut capha ng

2. Van bm mu (Injection valve):
- Bm mu PT vao ct tach theo nhng lng
mu nht nh
Tim mu bng tay


Tiem mu t ng
3: Ct tach (Column)
- Ct cha pha tnh
- Yu t quyt nh qua trinh tach sc ky
- Ct tch c kch ckhc nhau
- Chiu di: 10 25cm
- ng kinh: 2 5mm
4: u do (detector)
- Thit b phat hin cht phn tch (nh tnh
v nh lng)
- Co nhiu loi khac nhau tuy mc ch phn

tch: UVVIS, Hunh quang....
5. H thng ghi nhn v x l tn hiu:
- Thu thp v x l kt qu
- Recorder, Computer + printer,
software




H thng HPLC
Detector
UV-Vis: detector ph hp thu phn t
Xc nh cc cht c kh nng hp th quang
Hunh quang (Fluorescence detector): xc
nh cc cht c kh nng pht hunh quang
- Alflatoxin, Mycotoxin, Amino Acid, thuc tr su
h Carbamate,.
u o ch s khc x (
Refractive Index Detector: RI)
u do dn (Conductivity detector):
Xac nh cac ion v c, hu c
u do khi ph (MS: mass spectrometry)
Xac nh phn ln cc cht hu c
3. Cac qu trnh tch trong sc k lng
- Qua trnh quan trng nht trong phng php sc k
- Nhng cn bng ng xy ra gia pha tnh v pha ng trong ct sc k
- L s vn chuyn v phn b lin tc ca cht
PT t u ct n cui ct
- Cht phn tch lun phn b gia 2 pha,
trong o pha ng lun chy qua ct tch vi mt tc nht nh hoc gradient
- Hiu qu ca qua trinh tach ph thuc rt

nhiu vo tng tc gia cc cht trong pha tnh va pha ng
- Mc ch chnh ca sc k l tch v nh
tnh cc cht trong hn hp cht phc tp
Thigian cht PT b pha tnh lu gi (thi
gian lu) quyt nh bi:
Bn cht ca pha tnh, cu truc va tinhcht ca cht PT
Bn cht va thanh phn ca pha ng dung ra gii cht PT ra khi ct sc k
(pha tnh)
Ghi li tan b qu trnh tch sc k ca hn hp cht PT sc k gm nhiu
peak.
- c im ca peak PT:
Cc peak co th tch ri nhau han tan
Chp nhau mt phn
Chp nhau han tan
- Sc k phn nh qu trnh tch sc k trong ct tt hay khng tt.
- Tch tt: hn hp c bao nhiu cht c by nhieu peak ring bit khng chp
nhau
- Cht no b lu gi mnh s c ra
gii ra sau cng, cht lu gi kem s ra
trc
4. u im ca phng php sc k
- C th phn tch ng thi nhiu hp cht
- Khng cn lm bay hi mu
- phn gii cao nh qu trnh tch trn ct
- nhy cao (ppm-ppb) nh u do
- Th tich mu phn tch nh (1-100mL)
V d : XC NH AXIT HU C T L, V QU MNG CT BNG
SC K LNG CAO P

TM TT
Axit hu c trong l, v qu mng ct kh c xc nh bng phng php
sc k lng cao p. L ti v v qu mng ct kh c chit vi nc
nhit 127
0
C thi gian 30-60 pht di p sut 0,15 MPa. ng thi, v
qu ba kh c chit bng dung mi (axeton v metanol) trong b chit
soxhlet nhit 75
0
C trong thi gian 8 gi. Mu c bm vo my sc
k lng cao p cng vi axit photphoric 0,01 M v metanol vi tc dng
l 0,7 ml/pht s dng etect 210 nm. Axit hu c ch yu trong l, v qu
mng ct kh c tm thy l axit (-) hyroxy xitric hm lng ln lt l

2,863 v 15,221 %. Phn axit cn li trong l, v qu mng ct l lng nh
axit xitric. y l kt qu u tin xc nh thnh phn cc axit hu c t
mng ct (Garcinia oblongifolia Champ. ex Benth.).


1. M u
Trong mt vi nm gn y, cc cu t c khi lng nh v phc tp c
chit t nhiu loi mng ct (Garcinia Cowa, Garcinia cambogia, Garcinia indica,
Garcinia antroViridis) trong c axit (-)-hyroxy xitric (HCA; 1,2-di hydroxy
propan-1,2,3 tri cacboxylic axit; hnh 1), lacton ca (-) axit hydroxy citric (hnh 1))
c tnh sinh hc l th gy ch i vi cc nh ho sinh cc bc s chuyn
khoa sc kho. l kh nng iu chnh qu trnh tng hp axit bo, s hnh
thnh lipit, s ngon ming, v gim cn. ng
phn ca (-)-HCA gp phn ln trong lnh
vc dc hc nh tc nhn c vai tr quan trng
trong mc ch gim cn, bo v tim mch, hiu
chnh trng thi bt bnh thng ca cc lipid,
v kh nng chu ng trong luyn tp th thao
[3] [4] [5] [6]. V qu ba c tnh sn da v hi
ng, mt, hi c, c tc dng tiu vim, h
nhit, lm sn da, hn vt thng; tr: Lot d
dy, lot t trng; Vim d dy rut, km tiu ho; Vim ming, bnh cn rng; Ho
ra mu. Dng ngoi tr bng, mn nht, su qung, eczema, d ng mn nga, rt
cc vt n m vo tht; L ba c v chua thng c dng thi nh nu canh
chua; Ht c o ht chua, n c, cng dng nu canh chua. Nha ba dng tr
bng [1]. Cc nghin cu chit tch ngun HCA ch thc hin trn cc loi ba ca
n . V vy, s khm ph axit hu c trong cy ba ti Vit Nam l ht sc cn
thit, cy ba c tn khoa hc l Garcinia oblongifolia Champ. ex Benth., thuc h
Ba (h mng ct) - Clusiaceae.
Bi bo ny trnh by phng php chit tch, xc nh thnh phn axit hu
c chnh c trong l, v qu mng ct v cc thng s vt l khc.

2. Nguyn liu v phng php nghin cu
2.1. Nguyn liu
L, v qu ca cy mng ct (Garcinia oblongifolia Champ. ex Benth.) ti x
Ha Lin, huyn Ha Vang, TP. Nng v t thnh ph H Ch Minh.
COOH C
H
HO
COOH HO C
COOH C H
H
COOH C
H
COOH HO C
C H
H
C=O
O
Hnh 1: Cu trc ca (-) axit hydroxy citric
v lacton ca (-) axit hydroxy citric