j

a
n
z
v
o
g
e
j
n
I
m
a
r
g
o
i
b
i
t
An

Antibiogram je metoda ispitivanja osetljivosti

bakterija prema antibakterijskim lekovima
Pre primene nekog antibakterijskog leka u
terapiji oboljenja potrebno je in vitro ispitati
ponaanje mikroorganizma izolovanog u istoj
kulturi, na odreena antibakterijska sredstva
Ovo ispitivanje se vri na 2 naina : difuzionim
I dilucionim metodama

Difuziona metoda

Princip ove metode je da antibakterijski lek difunduje

u hranljivu podlogu I deluje inhibitorno, uveoj ili
manjoj meri, na razmnoavanje bakterija prethodno
zasejanh na tu podlogu
Disk metoda ( metoda tablete ) to je najee
primenjena metoda. Upotrebljavaju se diskovi ili tablete
obloeni tano odreenom koncentracijom
antibakterijskog leka, koja je odgovarajua onoj koja se
postie u organizmu primenom terapijskih doza tog leka

Difuziona metoda
Hranljiva podloga se prethodno zaseje
suspenzijom odreene gustine iste kulture
ispitivanog soja ( inokulum ) a potom se stave
diskovi ili tablete iz kojih lek difunduje u
podlogu.

Difuziona metoda
Nakon inkubacije od 18-24 asa na 37 C
oitava se prenik zone inhibicije.
Ako su svi uslovi standardizovani ( pritisak,
temperatura, pH, vreme inkubacije ) onda je
prenik zone inhibicije proporcionalan
koncentraciji datog antibakterijskog sredstva

Difuziona metoda

Difuziona metoda
Naime, ako je zasejana bakterija osetljiva na dejstvo
leka, ona nee porasti u zoni njegove aktivnosti
irina te zone inhibicije predstavnja stepen
osetljivosti bakterije S ( senzitivan osetljiv soj ) I
( intermedijaran srednje osetljiv soj )
Ako je bakterija otporna na dejstvo leka zona
inhibicije je uska ili uopte ne postoji R ( rezistentan
otporan soj )

Difuziona metoda
Na irinu zone inhibicije mogu da utiu sledei
faktori:
Osobine podloge
Veliina inokuluma
Faza raazmnoavanja u kojoj se nalazi ispitivana
bakterija
Stabilnost antibakterijskog sredstva

Difuziona metoda
Da bi se otklonio uticaj ovih faktora za
izvoenje antibiograma se koristi standardna
Mueller Hintonova podloga

Diluciona metoda
Pomou dilucione metode odreuje se
osetljivost izolovanih bakterijskih sojeva prema
antimikrobnim lekovima kao I aktivnost tih
lekova u telesnim tenostima u toku terapije
Postoje 2 vrste dilucionih metoda :
Diluciona metoda u epruveti
Agar diluciona metoda

Diluciona metoda u epruveti

Metoda se zasniva na diluciji ( razreenju )
ispitivanog antibakterijskog leka tako da se sve
manje koncentracije leka dodaju epruvetama sa
odgovarajuom tenom podlogom.Svakoj
epruveti se dodaje jednaka koliina tene kulture
ispitivanog bakterijskog soja ( isti broj bakterija )
Nakon inkubacije 18- 24 asa na 37 C rezultat se
oitava na sledei nain:

Diluciona metoda u epruveti

Ukoliko je bakterijski soj preiveo koncentraciju
antibakterijskog leka u podlozi registruje se
zamuenje podloge dok podloge u kojima je dolo
do inhibicije razmnoavanja ili smrti ispitivane
bakterije ostaju bistre
Epruveta sa najmanjom koliinom antibiotika u
kojoj nema zamuenja ( porasta bakterija )
najmanja je koncentracija antibakterijskog sredstva
prema kome je ispitivana bakterija osetljiva

Diluciona metoda u epruveti

Ta koncentracija se oznaava kao minimalna
inhibitorna koncentracija ( MIK ) spreava
razmnoavanje bakterije tj. deluje
bakteriostatski
Da bi se odredila najmanja koncentracija
antibakterijskog sredstva koja ubija organizam
sadraj iz epruveta u kojima nema zamuenja
presejava se na vrste podloge u Petrijevoj olji

Diluciona metoda u epruveti

Nakon inkubacije od 18-24 asa na 37 C
oitava se rezultat baktericidnog efekta:
Ukoliko na podlozi nema porasta bakterijskih
kolonija koncentracija antibiotika u epruveti iz
koje je izvreno presejavanje je minimalna
baktericidna koncentracija ( MBK )

Agar diluciona metoda

Princip ove metode je da se odreen koliine
antibakterijskog leka inkorporiraju u vrstu
podlogu I zasejavaju inokulumom odreene
gustine ispitivanih bakterija
Na ovaj nain se na istoj podlozi testira ak 10-16
razliitih bakterijskih sojeva
Naime, samo one bakterijske elije koje su
rezistentne na koncentraciju leka koja je
inkorporirana u agaru imae vidljiv rast

Difuzione metode su jednostavnije za

izvoenje, bre I jeftinije ali su dilucione
metode preciznije