VISI (2012) 20 (1) 838-852

Peranan Subtipe miRNA pada Keadaan Post Infark Miokardium

Christine Verawaty Sibuea
ABSTRACT
microRNAs (miRNAs) are single strands of non-coding RNA molecules
consisting of 20-24 nucleotides, and a post-transcriptional regulator of gene
expression by inhibiting translation of mRNA in protein synthesis or causing mRNA
degradation. Many studies have found the function of miRNAs in regulating various
growth and physiological functions and pathological conditions, even when
miRNAs increasingly involved in the regulation of physiological and pathological
conditions of the heart. In the pathophysiology of myocardial infarction, many
subtypes Mirna have an important role, as well as on the state of post-myocardial
infarction. Some cardiacspecific miRNAs, including mir-1, mir-133a, and mir-208,
plays an important role in maintaining growth and cardiac function, and in many
previous studies mir-1, mir-133a, mir-499, and mir-208 high in the blood of
patients with myocardial infarction compared with those from patients without
myocardial infarction. In addition, mir-21 has a protective effect against ischemiacell apoptosis. To test miRs role in human pathology, most studies using highthrough put method to analyze the expression of mir in clinical samples. Right now,
AntimiRNA oligonucleotides have become the tools necessary to research
miRNAdan also been suggested to be a potential therapeutic agent.
------------Key Words: microRNA, myocardial infarction, cardiacspecific miRNAs, antimiRNA

Pendahuluan
MicroRNAs (miRNAs) adalah untaian tunggal molekul RNA non-coding
yang terdiri dari 20-24 nukleotida, dan merupakan regulator ekspresi gen paska
transkripsi.1,2 Dengan bekerja pada pada mRNA, mereka menghambat translasi
mRNA dalam sintesis protein atau menyebabkan degradasi mRNA. miRNAs telah
ditemukan untuk mengatur berbagai fungsi perkembangan dan fisiologis
(misalnya diferensiasi stem sel, neurogenesis, haematopoiesis, immunoreaksi, dan
metabolisme (Fazi dan Nervi, 2008; Williams, 2008). Mereka terkait dengan
berbagai kondisi patologi; seperti kanker, penyakit autoimun, inflamasi dan
gangguan neurodegeneratif (Williams, 2008). Ada bukti yang menunjukkan bahwa
miRNAs juga semakin terlibat dalam regulasi fisiologis dan kondisi patologis
jantung (Scalbert dan Bril, 2008). 1
Infark miokardium telah lama menjadi penyebab utama kematian di negara
maju.Infark miokardium yang disebabkan oklusi arteri koroner merupakan
penyebab utama morbiditas dan mortalitas manusia. Hal ini dikarenakan
hilangnya aliran darah ke otot ventrikel kiri jantung setelah infark miokardium.3,4
Ada diperkirakan sebanyak 1.000 miRNAs disandikan oleh genom
manusia.4 Beberapa laporan terbaru menunjukkan bahwa miRNAs memainkan
peran penting dalam patofisiologi infark miokardium. Yang et al. menemukan
838
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

bahwa mir-1, meningkat di dalam jantung manusia dengan penyakit jantung
koroner dan di dalam jantung tikus dengan infark miokardium. Perubahan ekspresi
hasil mir-1 di dalam jantung manusia dengan penyakit arteri koroner masih
kontroversial, karena penelitian terbaru telah menunjukkan bahwa ekspresi mir-1
cenderung down regulated di dalam jantung manusia dengan penyakit arteri
koroner. Keterlibatan potensi miRNAs di infark miokardium juga disarankan
dalam penelitian mir-126 pada tikus, di mana Wang et al. telah menemukan bahwa
tingkat kelangsungan hidup pada tikus mir-126 setelah infark miokardium
berkurang secara signifikan dibandingkan pada tikus liar. Peneliti juga
menemukan bahwa mir-29 memainkan peran penting dalam fibrosis jantung
selama proses perbaikan setelah infark miokardium. Dalam iskemia reperfusi in
vitro, ditemukan bahwa, di dalam hati tikus yang diinjeksikan dengan mir-21,
ukuran infark miokardium setelah iskemia reperfusi in vitro berkurang. Hebatnya,
ekspresi mir-21 secara signifikan down regulated di daerah infark, tapi up
regulated di daerah-daerah perbatasan. 5
Tabel 1 Studi tentang delesi miRNA-encoding genes dan gen yang berhubungan 6
Genes
deleted
Dicer-1

Agronaute
-2

Dgcr8

Mir-1-2

Mir-126

Functions

Target
Genes

Further process pre-miRNA

to produce mature miRNA

Phenotype after gene

deletion
Lethality in early embryonic
stages, depletion of
multipotent stem celss,
embryonics stem cells
unable to diffrentiate, lost of
epigenetic silencing
of centromeric sequences.

A core component of the

functional miRNA-included
silencing complex (miRISC)

Lethality at mid-gestation,
lethality in early
embryonic stages.

a cofactor that is required

for Drosha function

Lethality ie early embryonic

stages, embryonic
stem cells unable to
differentiate.

Encodes miR-1, promotes

muscle cell differentiation,
inhibits cell proliferation,
controls the thickness of
the ventricular wall
Spesifically expressed in
endothelium, governs
vascular
integrity and angiogenesis

HAND2,
IRX5

spred-1

Cardiac morphogenetic and

electrophysiological
defects, fatal with
variablepenetrance.

Leaky vessels, hemorrhage

and partial embryonic
lethality, due to a loss of
vascular integrity and
defects in endothelial cell
proliferation, migration
and angiogenesis; the subset
of mutant animals
that survive displays ?

839
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

Defective cardiac neovascularization after myocardial
infarction.

Mir-150

Nir-155

Mir-223

Spesifically expressed in
mature lymphocytes,
modulates lymphocyte
differentiation and immune
response.
prominently expressed in
many hemopoietic cell
types,
involved in mammalian
innate and adaptive
immunity,
viral infection and
oncogenesis.

nearly exclusively expressed

in bone marrow, modulates
hematopoietic diffrentiation
as induced during leneage
diffrentiation, a fine-tuner
ofgranulocyte production
and
the inflammatory responses.

c-Myb

Expanded lymphocyte B1
population, decreased
lymphocyte B2, increased
immunoglobulin production and increased c-Myb.

c-MAF

Defective adaptive
immunity,fibrosis and
infiltration of the lung, defects
in germinal centre
reaction (decreased
interleukin-2, interferon-),
decreased production of
immunoglobulin.

Mef2c

neutrophilia, which could be

due to expanded
neutrophil progenitor
population and senescent
characteristics.

Biogenesis microRNAs
miRs pendek ( 22 nukleotida) ditemukan sebagai regulator pada elegans
caenorhabditis. 2,3,7,8,9,10 Segera setelah penemuan mereka, peran penting dalam
mengatur ekspresi gen pada spesies lain, termasuk manusia telah dibuktikan.
Setiap miR mampu mengganggu ekspresi gen beberapa target dan sering terlibat
pada jalur yang sama. Oleh karena itu telah dihitung bahwa sekitar 30% dari gen
manusia diatur oleh miRs. Sebaliknya, gen masing-masing dapat menjadi target
beberapa miRs. Lebih dari 50% kasus terorganisir dalam transkripsi polisistronik.
Mereka sering terlokalisasi antara urutan intronik atau intergenik region.
Transkripsi mereka berada di bawah kendali faktor transkripsi klasik dan
dioperasikan oleh RNA polimerase II atau III. Transkrip primer (mir primer)
sampai dengan 1000 nukleotida panjang, dengan struktur hair pin pendek di
tengah dan mengalami pembelahan endonucleolitic oleh enzim ribonuklease III
yaitu Drosha, dan bertindak sebagai kofaktor yaitu DGCRG8/Pasha. Kemudian
diekspor ke sitoplasma oleh Exportin 5/RanGTP. Di dalam sitoplasma pra-mir
mengalami perpecahan endonukleolitik kedua oleh Dicer dengan produksi matur
double stranded mir. Salah satu filamen dari mir matur (untai pemandu)
dimasukkan ke dalam RNA Silencing Interfering Complex (RISC) melalui
840
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

interaksi dengan protein Argonaute dan diarahkan ke urutan komplementer lokal
di wilayah 3 UTR dari mRNA target. Aturan susunan tidak diperlukan antara mir
dan mRNA. 2,7,10

Gambar 1 : Mekanisme biogenesis dan maturasi miRNA 7

Patogenesis Infark Miokardium

Semua manifestasi klinis fenomena infark miokardium sama, yaitu
ketidakseimbangan antara kebutuhan oksigen miokard dan suplai darah.
Patogenesis bentuk infark miokardium merupakan hasil dari kombinasi variabel
tingkat penyumbatan arteri koroner dengan konsekuensi pengurangan cadangan
pembuluh darah koroner dan peningkatan konsumsi oksigen miokard. Saat ini
ditetapkan bahwa penyumbatan arteri koroner adalah salah satu hasil dari lesi
aterosklerotik di pembuluh koroner konduktansi epikardial dengan atau tanpa
vasokonstriksi (angina stabil kronis) atau vasokonstriksi akibat resistensi
pembuluh koroner (penyakit jantung sindrom X).
Bentuk unstable dari Ischemia Heart Disease, secara umum diindikasikan
sebagai acute coronary syndromes (ACS), termasuk unstable angina, non-STelevation myocardial infarction (NSTEMI) dan ST-elevation myocardial
infarction (STEMI). Dalam banyak kasus ACS, terdapat gangguan dari plak
aterosklerotik koroner atau oklusi trombus. Konsekuensi berkepanjangan oklusi
arteri koroner di ACS diwakili oleh nekrosis miokard, yaitu infark miokardium.
Iskemia miokard akut atau kronis dapat dipengaruhi oleh berbagai mekanisme
seperti myocardial stunning, myocardial hibernation, preconditioning dan
postconditioning. Istilah myocardial stunning mengacu pada keadaan gangguan
841
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

fungsi miokard setelah iskemia berkepanjangan bahkan setelah pemulihkan aliran
koroner normal. Myocardial hibernation adalah kondisi ketenangan metabolik
tanpa aktivitas kontraktil dari segmen miokard hipo-perfusi kronis. Setelah
periode iskemia miokard, ventrikel lebih tahan terhadap iskemia berkepanjangan:
fenomena ini disebut preconditioning. Postconditioning mengacu pada
perlindungan terhadap cedera reperfusi iskemia, terjadi modulasi munculnya
kembali aliran darah normal setelah oklusi arteri koroner berkepanjangan di infark
miokardium. Iskemik kronis merupakan disfungsi ventrikel kiri, menunjuk sebuah
kondisi yang dicirikan dengan pembesaran ventrikel kiri dengan penurunan fungsi
sistolik dan diastolik ventrikel kiri akibat luka akinetik infark miokardium
sebelumnya dan atau dengan tingkat myocardial stunning, myocardial
hibernation, untuk iskemia berulang atau kronis.
Faktor risiko untuk penyakit jantung iskemik dapat dibagi menjadi faktor
resiko "konvensional" : merokok, hipertensi, hiperlipidemia, resistensi insulin dan
diabetes, penurunan aktivitas obesitas, fisik dan faktor risiko "novel" termasuk
high sensitivity C-reaktive protein (hsCRP), homosistein dan lipoprotein.
Pencegahan primer dan sekunder penyakit jantung iskemik terdiri dari
pengendalian faktor risiko. Salah satu yang paling penting dari mereka diwakili
oleh hiperkolesterolemia. Baru-baru ini dikembangkan obat: statin dan ezetimibe
telah dibuktikan untuk dapat memperoleh penurunan yang signifikan tingkat
kolesterol dan banyak uji klinis baru-baru ini bermanfaat menurunkan kadar
kolesterol bahkan pada subyek dengan tingkat basal normal. Namun obat ini dapat
memiliki efek samping yang tidak diinginkan. Penelitian obat anti-kolesterol baru,
lebih mujarab dan ditoleransi dengan menggunakan senjata yang berasal dari studi
mir dan teknologi antisense oligonukleotida. Hal ini dimungkinkan untuk
menggunakan terapi mir berbasis menargetkan target Sterol Regulatory Element
Binding Protein 1 (SREBP1), sebuah protein yang terlibat dalam pengembangan
dan pemeliharaan hiperlipidemia dan hiperkolesterolemia. 7
Tabel 2 : miRNA yang terlibat dalam patogenesis Penyakit Jantung Koroner dan
aplikasi klinis potensial lainnya 7
MiR

miR-29

miR-21

Targets
Collagents type
11, type 12 and
type 31, Fibrillin1
Spry 1

Pathogenetic
Pathway

First
Author

Ye
ar

Post-MI fibrosis

Van Rooij
E

200
8

PNAS

Fibroblast-driven
myocardial

Thum T

200
8

Nature

Journal

Fibrosis
miR208
miR-1

THRAP-1
Connexin 43, kir
2.1

miR-21

PTEN, Bel-2

Post-MI heart failure

Post-MI cardiac
arrhythmias
Post-angioplasty
restenosis

Van Rooij
E
Yang B
Ji R

200
7
200
7
200
7

Science
Nat Med
Circ Res

842
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

let-7
miR-27
miR126
miR210
miR-1
miR133

Thrombospondin1
Thrombospondin1

Angiogenesis

Kuebacker
A
Kuebacker
A

Spred-1

Angiogenesis

Wang S

Ephrin A-3

Angiogenesis
Stem cell fate
determination
Stem cell fate
determination

Fasanaro P

Delta-like-1

Angiogenesis

THRAP1

Delta-like-1
Sprouty
homologue 1.
Thyroid Hormone
Receptor
Assosiated Protein
1.

PTEN

Phosphatase and Tensin homologue.

Spry 1

Ivey KN
Ivey KN

200
7
200
7
200
8
200
8
200
8
200
8

Circ Res
Circ Res
Dev Cell
J Biol Chem
Cell Stem
Cell
Cell Stem
Cell

mir-29 disajikan dalam fibroblas jantung dan ekspresinya berada di bawah

kontrol Transformasi Growth Factor Beta (TGF-). TGF- adalah salah satu
penentu utama fibrosis jantung yang bertindak sebagai pengatur utama produksi
kolagen di miokardium. Para penulis menemukan bahwa TGF- menginduksi
downregulation mir-29. Banyak ECM protein seperti Fibrillin-1, tipe Kolagen
11, Kolagen tipe 12 dan tipe Kolagen 31 telah diidentifikasi sebagai target
mir-29, menyebabkan pengurangan mir-29 melalui antagomiRs dan menemukan
peningkatan mRNA kolagen. Selain itu memicu penurunan tingkat mRNA kolase
dalam kultur fibroblas melalui over-ekspresi mir-29. Studi ini menggarisbawahi
kemungkinan peluang terapi baru untuk mengurangi reaksi fibrosis setelah infark
miokardium dan konsekuensi patofisiologis yang tidak diinginkan. Hasil Van
Rooij's baru-baru ini dikonfirmasi oleh Wang dkk. dalam sebuah penelitian
bertujuan untuk mengungkap aspek molekul reverse remodeling pada tikus.
Para penulis juga menemukan bahwa, dalam suatu model tikus dengan
gagal jantung, ada upregulation mir-21 tapi mir ini terlokalisir terutama di
fibroblast dengan tingkat yang rendah hanya di kardiomiosit. Target mir-21 adalah
Spry-1 (sprouty homolog 1), penghambat jalur ERK / MAP kinase signaling. ERK
/ MAP kinase jalur memberikan peranan penting dalam mengatur kelangsungan
hidup fibroblas dan sekresi faktor pertumbuhan, mengendalikan tingkat fibrosis
miokard. 7
MicroRNAs dan Infark Miokard
Setelah oklusi tiba-tiba arteri koroner, terjadi nekrosis miokard.
Perpanjangan cedera otot jantung tidak hanya penyumbatan untuk daerah yang
disediakan oleh arteri koroner saja, tetapi juga oleh karena lama iskemia dan
besarnya jaminan sirkulasi. Saat ini diyakini bahwa sebagian kecil dari
kardiomiosit mati pada saat reperfusi, melalui beberapa mekanisme termasuk
843
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

cepat pulihnya pH fisiologis, kelebihan kalsium intraseluler, generasi spesies
oksigen reaktif, reenergization mithocondrial dan afflux sel-sel inflamasi. Secara
global jenis ini disebut cedera reperfusi miokard, dan apoptosis seharusnya
menjadi mekanisme terkemuka sekarang. Adalah mungkin untuk mengurangi
cedera reperfusi miokard, di tingkat eksperimental, untuk target (dengan sirnas)
apoptosis protein terkait seperti Fas.7 Salah satu faktor penentu utama kurangnya
kontraktilitas dan perbaikan negatif setelah infark miokardium adalah fibrosis
peningkatan matriks ekstraseluler (ECM). Meningkatnya kekakuan fibrosis
miokard menyebabkan disfungsi diastolik, memberikan kontribusi pada hilangnya
fungsi pompa dan mencegah perbaikan miokard. Ini juga merupakan faktor
predisposisi untuk aritmia jantung melalui kelainan pada jantung konduktansi.
Fibrosis setelah infark miokardium merupakan hasil dari transformasi fenotipik
fibroblas miokard ke myofibroblasts mensekresi molekul ECM. Rooij et al Van.
menguraikan peran microRNAs dalam reaksi fibrosis untuk MI dalam sebuah
karya. 4
Infark miokardium merupakan penyebab terkemuka di dunia morbiditas
dan kematian. Sebuah diagnosis dini dan benar mungkin memerlukan inisiasi
segera terapi reperfusi yang berpotensi mengurangi tingkat kematian. Biomarker
yang digunakan untuk menegakkan diagnosa pada pasien dengan infark
miokardium, sebagian besar adalah analisa protein miokard dan penting untuk
diagnosis infark miokardium. Biomarker seperti isoenzim creatine kinase-MB,
mioglobin jantung, dan troponin telah banyak diterapkan dalam diagnosis klinis.
Di antaranya, troponin jantung saat ini dianggap sebagai gold standard untuk
diagnosis infark miokardium. Namun, eksplorasi biomarker baru dengan
sensitivitas tinggi dan spesifisitas dalam diagnosis awal infark miokardium tidak
pernah berhenti.
microRNAs (miRNAs) adalah kelas dari RNA noncoding 19-25nukleotida yang telah terlibat dalam mengatur proses diversecellular, seperti
proliferasi, diferensiasi, pengembangan, dan kematian sel. Meskipun fungsi
biologis miRNAs tidak sepenuhnya dipahami, jelas bahwa beberapa miRNAs
hadir secara jaringan atau sel-spesifik. Beberapa cardiacspecific miRNAs,
termasuk mir-1, mir-133a, dan mir-208, memainkan peran penting dalam
mempertahankan pembangunan dan fungsi. mir-499 dan-mir 208 secara khusus
dipresentasikan dalam jantung, sedangkan mir-1 dan mir-133a dipresentasikan
jantung dan otot rangka. mir-1, mir-133a, mir-499, dan mir-208 tinggi dalam
darah dari pasien dengan infark miokardium dibandingkan dengan mereka yang
berasal dari pasien tanpa infark miokardium. Penerima analisis karakteristik lebih
lanjut menunjukkan bahwa keempat miRNAs mungkin biomarker baik untuk
diagnosis infark miokardium. Hasil ini sebagian didukung oleh laporan yang
sangat baru yang mir-1 secara signifikan lebih tinggi dalam plasma dari pasien
infark miokardium dibandingkan dengan subyek non- infark miokardium. Namun,
hasil ekspresi profil sebelumnya mengungkapkan adanya mir-1, mir-133a, dan
mir-499 dalam otot rangka sehingga mir-1 dan mir-133a pada otot rangka yang
844
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

bahkan lebih tinggi daripada yang di dalam jantung. Hasil dari percobaan hewan
menunjukkan bahwa peningkatan kadar plasma ketiga miRNAs mungkin karena
cedera otot rangka, menunjukkan bahwa mir-1, mir-133a, dan mir-499 juga bisa
dilepaskan dari otot rangka injured selama prosedur operasi dan dengan demikian
kurang kekhususan-mutlak. Iskemia miokard adalah suatu kondisi di mana aliran
darah ke jantung koroner berkurang, yang menyebabkan kekurangan oksigen dan
pasokan nutrisi ke jantung. Dalam pengaturan klinis, reperfusi jantung iskemik
dicapai dengan angioplasti primer, sebuah proses yang, jika diinduksi awal,
menyelamatkan sebagian besar dari infark miokardium. Namun, hal ini sering
dikaburkan oleh proses yang merugikan seperti cedera yang menakjubkan
miokard dan remodeling jantung, hipertrofi ventrikel yaitu, fibrosis interstisial,
disfungsi kontraktil, peradangan, dan dilatasi ruang.
Baik kardiomiosit dan non-miosit yang terkena, dan pada tingkat
molekuler, beberapa sistem sinyal ekstra dan intraselular yang terlibat, merancang
banyak faktor yang menentukan manifestasi fenotipik akhir dari cedera dan
prognosis penyakit. Pada fase akut miokard-reperfusi iskemia (I/R), aktivasi
metaloproteinase matriks (MMPs) memungkinkan degradasi kolagen sehubungan
dengan urat saraf dan pembelahan membrane sekitar miosit nekrotik merupakan
prasyarat untuk invasi dan proliferasi sel, misalnya fibroblast, inflamasi, dan selsel vaskular untuk memastikan perbaikan jaringan dan pembentukan parut. Hal ini
untuk kepentingan klinis dalam memahami proses mengidentifikasi terapi baru
untuk mencegah cedera ventrikel dan remodeling maladaptif dan disfungsi dalam
menanggapi I/R. Dalam hal ini, studi oleh Roy et al. membuka aspek novel
dengan menunjukkan bahwa-microRNA 21 (mir-21) meningkatkan susunan dalam
fibroblas jantung setelah I/ R injured dan ada yang berpotensi memainkan peran
penting dalam mengatur jalur sinyal utama dan efektor hilir mereka. Roy dkk.,
menggunakan laser microdiseksi menangkap, melaporkan induksi mir -21 khusus
di zona infark jantung dikenakan ke I/R. Sebagai target langsung mir-21 di
fibroblas, penulis mengidentifikasi homolog phosphatase and tension homologue
(PTEN), dan protein fosfatase, yang secara negatif mengatur PI3K-Akt signaling
serta jalur sinyal lain dan mempengaruhi fitur seluler seperti kelangsungan hidup,
pertumbuhan, metabolisme, sintesis protein, dan aktivitas sekresi. Represi mir-21dependent PTEN menyebabkan induksi signifikan PI3K dan aktivitas Akt
ditinggikan. Down regulated
mir-21 di daerah infark dihambat oleh
preconditioning iskemik, cara perlindungan jantung. Ekspresi mir-21 melalui
adenovirus mengekspresikan mir-21 (Ad-mir-21) menurunkan ukuran infark
miokard sebesar 29% pada 24 jam dan menurunkan dimensi ventrikel kiri di 2
minggu sesudah infark miokardium. Menggunakan kedua pendekatan gain-of
function dan loss-of-function di jantung kultur miosit, kami mengidentifikasi
bahwa mir-21 memiliki efek perlindungan terhadap iskemia-apoptosis sel yang
dikaitkan dengan kematian sel gen target dan protein aktivator jalur 1. Dampak
perlindungan mir-21 terhadap kerusakan miosit akibat iskemia jantung selanjutnya
dikonfirmasikan in vivo dengan apoptosis di perbatasan dan daerah infark dari
845
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

jantung tikus setelah pengobatan dengan Ad-mir-21. Jaringan elemen laser
ditangkap dari tempat infark menunjukkan induksi mir-21. Dalam penelitian
hibridisasi in situ menggunakan probe mir-21-spesifik diidentifikasi daerah infark
jantung. Imunohistokimia data menunjukkan bahwa fibroblas jantung (CF) adalah
tipe sel utama di zona infark. Studi dengan CF isolasi menunjukkan bahwa
fosfatase dan homolog tensin (PTEN) adalah target langsung mir-21. Modulasi
ekspresi mir-21 diatur metalloprotease matriks-2 (MMP-2) melalui jalur PTEN.
Terdapat penurunan tajam dalam ekspresi PTEN di zona infark. Penurunan ini
dikaitkan dengan peningkatan ekspresi MMP-2 di daerah infark. Dapat
disimpulkan bahwa mir-21 mengatur ekspresi MMP-2 di CF dari zona infark
melalui jalur PTEN. 7

Lokalisasi mir-21 di bagian jantung dicapai dengan menggunakan analisa hibridisasi in

situ. (A) mir-21 (biru) terbukti di wilayah infark (i). Fibroblast mewakili tipe sel utama di
wilayah ini diidentifikasi menggunakan analisis imunohistokimia dengan antibodi antivimentin (coklat) (ii,) mir-21 (i)] tidak jelas di bagian serial ketika LNA probe miRNA ini
digunakan (iii). (B) gambar dari daerah non-infark tidak menunjukkan atau sinyal lemah
(biru) untuk (i) mir-21. Distribusi fibroblas dan miosit dalam infark non-(kontrol)
ditunjukkan dengan menggunakan anti-vimentin (ii, coklat, fibroblas), atau aktin anti-otot
(iii coklat, miosit) antibodi pewarnaan imunohistokimia.11

miRNAs dan Apoptosis Kardiomiosit

Kehilangan miosit jantung akibat kematian sel apoptosis adalah umum
untuk iskemi miokard, hipertrofi jantung, dan kegagalan jantung. Semakin banyak
bukti menunjukkan bahwa regulator apoptosis miRNAs juga terlibat dalam
penyakit jantung. Baru-baru ini ditunjukkan bahwa level mir-1meningkat pada
846
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

infark miokardium dimana apoptosis memainkan peran penting dalam perubahan
yang merugikan jantung. Selain miRNAs merangsang hipertrofi; -mir 1, mir-133,
dan mir-21, dikenal sebagai regulator apoptosis. miRNAs lain seperti mir-195,
mir-18b, dan mir-208 yang mengatur hipertrofi, juga memiliki potensi untuk
mengatur apoptosis, meskipun data percobaan masih kurang. Menurut prediksi
bioinformatika, mir-195 bisa menekan beberapa gen kelangsungan hidup termasuk
gen Bcl-2, gen E2F, Akt, dan NF2, sebagai regulator proapoptosis. Demikian pula,
mir-18b juga memiliki potensial untuk mengatur beberapa gen antiapoptosis,
termasuk Akt, Sp1 Bcl-2, E2F, dan IGF1. 10
miRNA dan AntimiRNA
Peran miRNAs dalam patogenesis jantung dan pembuluh bertujuan kepada
kemungkinan miRNAs sebagai target untuk pengobatan penyakit jantung. Untuk
mencapai itu, strategi untuk memanipulasi miRNAs dengan mempengaruhi
ekspresi mereka, stabilitas, dan fungsi diperlukan. Strategi melibatkan pendekatan
gain-of function dan loss-of-function. Beberapa teknologi yang inovatif telah
dikembangkan untuk tujuan ini selama beberapa tahun terakhir. Pengadaan
miRNAs buatan Beberapa miRNAs menurun ekspresinya dalam jaringan
kardiovaskular dan koreksi ekspresi miRNAs ini dengan "terapi penggantian"
mungkin merupakan pendekatan yang efisien.
Pengenalan miRNAs sintetis ke dalam sel sebagai gain-of function telah
terbukti layak dalam banyak kondisi. AntimiRNA oligonukleotida antisense
inhibitor merupakan artifisial komplementer oligonukleotida dirancang untuk
menargetkan miRNAs. Dengan cara ini, AntimiRNA oligonukleotida
menghapuskan target miRNAs. Hal ini mengakibatkan inhibisi spesifik mirna,
memperkuat strategi loss-of-function untuk mengganggu ekspresi. Ketika
miRNA terpasang dengan gugus kolesterol dan dapat memsuki sel, AntimiRNA
oligonukleotida itu disebut "antagomirs".
Antagomirs dapat digunakan untuk mengikat miRNAs yang tidak
diinginkan dan telah terbukti mampu membungkam miRNAs di jantung tikus.
Saat ini, AntimiRNA oligonukleotida telah menjadi alat yang diperlukan untuk
penelitian miRNAdan juga telah diusulkan untuk menjadi agen terapi yang
potensial. Ebert et al. menemukan pendekatan inovatif dengan fakta bahwa
interaksi antara miRNA dan target tergantung pada pasangan basa di posisi 2-8
dari miRNA. Para penulis mengikatkan miRNA ke 3'UTR didorong oleh
promotor sitomegalovirus, yang dapat menghasilkan ekspresi berlimpah transkrip
inhibitor kompetitif dan hal ini mencegah pembelahan RNA jenis gangguan dan
degradasi RNA. Gen masing-masing mungkin beregulasi oleh beberapa miRNAs.
Hal ini menunjukkan bahwa tindakan miRNAs adalah mengikat urutan tertentu
tetapi tidak spesifik sama, demikian juga, AntimiRNA oligonukleotida. Hal ini
merupakan kendala bagi pengembangan sebagai obat karena mereka mungkin
menimbulkan efek samping yang tidak diinginkan dan toksisitas. Untuk mengatasi
masalah ini, dikembangkan mir-Mask yang dirancang untuk menjadi persis
847
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

antisense ke
miRNA endogen pada 3'UTR dari mRNA target. Setelah
diperkenalkan ke dalam sel, mir-mask dapat membentuk dupleks dengan mRNA
target dengan afinitas yang lebih tinggi dari miRNA endogen. Dengan cara ini,
tindakan mir-Mask sebagai pelindung target memblokir miRNA akibat dari efek
represif yang dihasilkan oleh miRNA itu. 10
Rancang Studi microRNA
Untuk menguji peran miRs dalam patologi manusia, kebanyakan studi
menggunakan metode high through put untuk menganalisis ekspresi mir dalam
sampel klinis. Profil miRs merupakan tantangan bagi beberapa alasan. Pertama,
teknik konvensional digunakan untuk profiling mRNA harus disesuaikan dengan
molekul yang sangat pendek (dalam jangkauan primer PCR konvensional),
dengan perbedaan minimal dalam urutan antara satu sama lain (kadang-kadang
hanya satu nukleotida), dengan berbagai temperatur leleh dan tanpa ekor poli A
pada ujung 3. Namun, banyak metode telah dikembangkan menunjukkan
semakin pentingnya miRs profil dalam penelitian dan dalam aplikasi diagnostik
dan terapi yang potensial.
Secara historis, Northern Blotting metode terlebih dahulu. Northern
Blotting memiliki keunggulan untuk mendapatkan pemisahan molekul yang
berbeda dalam rangka untuk mengidentifikasi mereka dan memberikan beberapa
informasi tentang dimensi yang berguna untuk membedakan antara pra-mir dan
bentuk dewasa.
Metode High trough puts diwakili oleh microarray microRNA dan QRTPCR. Sebuah studi microarray adalah teknik untuk mRNA atau mir profiling
berdasarkan beberapa, reaksi hibridisasi simultan, antara amobil probe (biasanya
terlihat di permukaan slide kaca) dan sasaran diberi label. Dalam microarray mir
target adalah miRs diekstraksi dari sampel biologis dan probe yang sintetis,
pendek, oligonukleotida melengkapi. Croce et al. adalah yang pertama untuk
menerapkan teknik untuk mir profil pada tahun 2004. Amplifikasi target sebelum
hibridisasi memberikan kesulitan karena ketidakmungkinan untuk menggunakan
primer PCR konvensional karena mereka berada dalam rentang dimensi yang
sama template. Setting optimal kondisi hibridisasi adalah penting juga, karena
array harus membedakan antara molekul yang terkadang berbeda hanya untuk satu
nukleotida. Selain itu, kelompok bahan kimia tambahan tidak boleh mengganggu
hibridisasi dan harus memberikan sinyal cukup kuat untuk dideteksi. Keuntungan
utama dari microarray mir adalah, dalam sintesis, diwakili oleh kekhususan tinggi
reaksi, sedangkan kelemahannya utama adalah diwakili oleh sensibilitas rendah.
Saat ini dapat diisolasi, label dan mempersiapkan mikroarray microRNA
untuk mengkarakterisasi miRs untuk diagnostik, prognostik dan penatalaksanaan.
Kuantitatif-RT-PCR adalah metode lain high through put yang menyajikan
beberapa kesulitan teknis utama (karena sesak template) bila diterapkan untuk
mempelajari miRs. Kebanyakan makalah penelitian ilmiah menerbitkan
penggunaan microarray mir dikombinasikan dengan analisis statistik sebagai
848
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

metode high through put yang disukai. Namun masing-masing metode ini hanya
memberikan bukti bahwa ekspresi diubah atau pemrosesan dari beberapa miRs
terlibat dalam penyakit manusia tertentu. Untuk membangun peran kausal dalam
patogenesis penyakit tertentu langkah selanjutnya adalah diwakili oleh validasi
hasil yang diperoleh dalam fase pertama melalui metode alternatif sebagai QRTPCR (jika kita awalnya digunakan microarray atau sebaliknya) atau Northern
Blotting. Setelah terfokus pada sejumlah calon beberapa miRs maka dimulai "in
silico", target miRs disregulasi diendapkan pada database line dan untuk
menguraikan hipotesis patogenesis. Akhirnya, ada perkembangan in vitro dan in
vivo model overekspresi atau downregulation dari miRs yang dipilih. 7
Tabel 3

Metode Profilling miRNA

Advantages

Norther
n
Blotting
qRT-PCR

MicroRN
A
microarr
ay

Supplies both
qualitative and
quantitative
information High
specificity
High sensibility
Requires low starting
amount of total RNA
Allows discrimination
between miRs that
differ only by few
nucleotides

Disadvantages

Requires
Retro
Transcri
pt.

High-through-out

Laborious

No

No

Low sensibility
Requires sample

Yes

Yes

Optional

Yes

Yes

Yes

Yes

Yes

No

Yes

manipulation (retro
transcription)
Technically
challenging

Specificity
Ease of automation
It is able to study
hundred of miRs in
a single experiment

Bead
based
method
e

Specificity
Requires high starting
amount of total RNA

MIRAGE

Allows identification of
new miRs

RAKE

High sensibility

Low sensibility
Requires high starting
amount of total RNA
Requires a flow
cytometer
Requires both
amplification
and hybridization
steps
Requires both
amplification
and hybridization
steps
Requires sequencing
Requires an

849
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

qRT-PCR
MIRAGE
RAKE

amplification
Allows discrimination
step to magnify the
between miRs that
signal
differ only by few
nucleotides
No sample manipulation
:
Quantitative Real Time PCR
:
MicroRNA serial Analysis of Gene Expression
:
RNA primed-Array-based Klenow Enzyme assay

Kesimpulan dan Saran

Mengingat bahwa banyak penyakit yang ditandai oleh ekspresi mir
abnormal, miRs dapat digunakan sebagai penanda diagnostik dan prognostik baru.
Beberapa cardiacspecific miRNAs, termasuk mir-1, mir-133a, dan mir-208,
memainkan peran penting dalam mempertahankan pembangunan dan fungsi. mir499 dan-mir 208 secara khusus dipresentasikan dalam jantung, sedangkan mir-1
dan mir-133a dipresentasikan jantung dan otot rangka. mir-1, mir-133a, mir-499,
dan mir-208 tinggi dalam darah dari pasien dengan infark miokardium
dibandingkan dengan mereka yang berasal dari pasien tanpa infark miokardium.
mir-21 memiliki efek perlindungan terhadap iskemia-apoptosis sel yang dikaitkan
dengan kematian sel gen target dan protein aktivator . Identifikasi miRNA sangat
diperlukan untuk menemukan awal dan diferensial diagnosis penyakit yang
ditandai dengan tingkat abnormal miRs tertentu pada jaringan atau lebih baik,
dalam serum. Untuk menguji peran miRNA dalam patologi manusia, kebanyakan
studi menggunakan metode high through put untuk menganalisis ekspresi mir
dalam sampel klinis. Saat ini juga, AntimiRNA oligonukleotida telah menjadi alat
yang diperlukan untuk penelitian miRNAdan juga telah diusulkan untuk menjadi
agen terapi yang potensial.
DAFTAR PUSTAKA
Ardekani, Ali M, Moslemi, Mozhgan. The Role of MicroRNAs in Human
Diseases. J Med Biotech. 2010; 2: 161-179
BOTJANI, E. MicroRNA miR-1 is Up-regulated in Remote Myocardium in
Patients with Myocardial Infarction. Folia Biologica (Praha). 2010; 56: pp.
27-31
Cheng, Yunhui et al. MicroRNA-21 protects against the H2O2-induced injury on
cardiac myocytes via its target gene PDCD4. Journal of Molecular and
Cellular Cardiology. 2009; 47: pp. 514
DAlessandra Yuri et al. Circulating microRNAs are new and sensitive biomarkers
of myocardial infarction. European Heart Journal. 2010; 31: pp. 27652773

850
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

Dong, Shimin et al. MicroRNA Expression Signature and the Role of MicroRNA21 in the Early Phase of Acute Myocardial Infarction. THE JOURNAL OF
BIOLOGICAL CHEMISTRY. 2009 October 23; 284: pp. 2951429525
Fiedler, S, Gupta, S. K, Thum, T. MicroRNA-Based Theurapetic Approaches in
the Cardiovascular System. Cardiovascular Theurapetics. 2010.
Gerald, Karp. Expression of Genetic Material:From Transcription to translation,
Cell and Molecular Biology,4th Edition, 436-476.
Greco, Simona et al. Common micro-RNA signature in skeletal muscle damage
and regeneration induced by Duchennemuscular dystrophy and acute
ischemia. The FASEB Journal. 2009; 23: pp. 33353346
Haghikia, Arash Haghikia, Hilfiker-Kleiner, Denise. MiRNA-21: a key to
controlling the cardiac fibroblast compartment?. 2009; 82
Hebert, Sebastien. Putative Role of MicroRNA-Regulated Pathways in
Comorbid Neurological and Cardiovascular Disorders. Hindawi Publishing
Corporation Cardiovascular Psychiatry and Neurology. 2009
Hu, Hailiang, Gatti, Ricahard A. MicroRNA : new players in the DNA damage
response. Journal of Molecular Cell Biology Advance. 2010
Hsieh et all. 123RMicroRNA profiling in ischemic injury of the gracilis muscle in
rats. BMC Musculoskeletal Disorders. 2010; 11: 123
Idikio, Halliday. A Post myocardial Infarct Remodeling and Heart Failure :
Potential Contributions from Pro-and Antiaging Factors. SAGE Hindawi
Accessto Research Cardiology Research and Practice. 2011
Latronico, Michael V G, Condorelli, Gianluigi. microRNAs in hypertrophy and
heart failure. Experimental Biology and Medicine. 2011
Pocock, Roger. Decoding the microRNA response to hypoxia. Pflugers Arch - Eur
J Physiol. 2011; 461: pp. 307315
Roy, Sashwati et al. MicroRNA expression in response to murine myocardial
infarction: miR-21 regulates fibroblast metalloprotease-2 via phosphatase
and tensin homologue. cardiovascres.oxfordjournals.org. 2011 April 10
Silvestri, Pasquale. MicroRNAs and Ischemic Heart Disease: Towards a Better
Comprehension of Pathogenesis, New Diagnostic Tools and New
Therapeutic Targets. Cardiovascular Drug Discovery. 2009; 4: 109-118
Van Rooij, Eva. Dysregulation of microRNAs after myocardial infarction reveals
a role of miR-29 in cardiac fibrosis. PNAS. 2008 September 2; 105: pp.
1302713032

851
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

Wang, Guo-Kun. Circulating microRNA: a novel potential biomarker for early
diagnosis of acute myocardial infarction in humans. European Heart
Journal. 2010; 31: pp. 659666
Wang, Zhiguo et al. miRNAs at the heart of the matter. J Mol Med. 2008; pp. 771
783
Yi, SHI. MicroRNA in cell differentiation and development. Science in China
Series C: Life Sciences. 2009 Mar; 52: 205-211
Yellon, Derek M, Hausenloy, Derek J. Myocardial Reperfusion Injury. Engl J
Med. 2007; 357: pp. 1121-1135
Zhang, Chunxiang. MicroRNA : role in cardiovascular biology and disease.
Clinical Science. 2008; 114: pp. 699-706.

852
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

1. BOTJANI, E et al.MicroRNA miR-1 is Up-regulated in

Remote Myocardium in Patients with Myocardial Infarction.
Folia Biologica (Praha). 2010; 56: pp. 27-31
853
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

2. Pocock, Roger. Decoding the microRNA response to hypoxia.

Pflugers Arch - Eur J Physiol. 2011; 461: pp. 307315
3. Van Rooij, Eva. Dysregulation of microRNAs after myocardial
infarction reveals a role of miR-29 in cardiac fibrosis. PNAS.
2008 September 2; 105: pp. 1302713032
4. Haghikia, Arash Haghikia, Hilfiker-Kleiner, Denise. MiRNA21: a key to controlling the cardiac fibroblast compartment?.
2009; 82
5. Dong, Shimin et al. MicroRNA Expression Signature and the
Role of MicroRNA-21 in the Early Phase of Acute Myocardial
Infarction. THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY.
2009 October 23; 284: pp. 2951429525
6. Yi, SHI. MicroRNA in cell differentiation and development.
Science in China Series C: Life Sciences. 2009 Mar; 52: 205211
7. Silvestri, Pasquale. MicroRNAs and Ischemic Heart Disease:
Towards a Better Comprehension of Pathogenesis, New
Diagnostic Tools and New Therapeutic Targets. Cardiovascular
Drug Discovery. 2009; 4: 109-118
8. DAlessandra Yuri et al. Circulating microRNAs are new and
sensitive biomarkers of myocardial infarction. European Heart
Journal. 2010; 31: pp. 27652773

854
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

9. Ardekani, Ali M, Moslemi, Mozhgan. The Role of MicroRNAs

in Human Diseases. J Med Biotech. 2010; 2: 161-179
10. Wang, Zhiguo et al. miRNAs at the heart of the matter. J Mol
Med. 2008; pp. 771783
11. Roy, Sashwati et al. MicroRNA expression in response to
murine myocardial infarction: miR-21 regulates fibroblast
metalloprotease-2 via phosphatase and tensin homologue.
cardiovascres.oxfordjournals.org. 2011 April 10
12. Wang, Guo-Kun. Circulating microRNA: a novel potential
biomarker for early diagnosis of acute myocardial infarction in
humans. European Heart Journal. 2010; 31: pp. 659666
13. Gerald, Karp. Expression of Genetic Material:From
Transcription to translation, Cell and Molecular Biology,4th
Edition, 436-476.
14. Fiedler, S, Gupta, S. K, Thum, T. MicroRNA-Based
Theurapetic Approaches

in the

Cardiovascular

System.

Cardiovascular Theurapetics. 2010.

15. Zhang, Chunxiang. MicroRNA : role in cardiovascular biology
and disease. Clinical Science. 2008; 114: pp. 699-706.
16. Hu, Hailiang, Gatti, Ricahard A. MicroRNA : new players in
the DNA damage response. Journal of Molecular Cell Biology
Advance. 2010

855
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

17. Latronico, Michael V G, Condorelli, Gianluigi. microRNAs in

hypertrophy and heart failure. Experimental Biology and
Medicine. 2011
18. Idikio, Halliday. A Post myocardial Infarct Remodeling and
Heart Failure : Potential Contributions from Pro-and Antiaging
Factors. SAGE Hindawi Accessto Research Cardiology
Research and Practice. 2011
19. Hsieh et all. 123RMicroRNA profiling in ischemic injury of the
gracilis muscle in rats. BMC Musculoskeletal Disorders. 2010;
11: 123
20. Hebert, Sebastien. Putative Role of MicroRNA-Regulated
Pathways in Comorbid Neurological and Cardiovascular
Disorders. Hindawi Publishing Corporation Cardiovascular
Psychiatry and Neurology. 2009
21. Greco, Simona et al. Common micro-RNA signature in skeletal
muscle

damage

and

regeneration

induced

by

Duchennemuscular dystrophy and acute ischemia. The FASEB

Journal. 2009; 23: pp. 33353346
22. Cheng, Yunhui et al. MicroRNA-21 protects against the H2O2induced injury on cardiac myocytes via its target gene PDCD4.
Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 2009; 47: pp. 5
14
856
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

23. Yellon, Derek M, Hausenloy, Derek J. Myocardial Reperfusion

Injury. Engl J Med. 2007; 357: pp. 1121-1135

Bagaimana Studi microRNA Dirancang?

ABSTRACT
microRNAs (miRNAs) are single strands of non-coding RNA molecules
consisting of 20-24 nucleotides, and a post-transcriptional regulator of gene
expression by inhibiting translation of mRNA in protein synthesis or causing
mRNA degradation. Many studies have found the function of miRNAs in regulating
various growth and physiological functions and pathological conditions, even when
miRNAs increasingly involved in the regulation of physiological and pathological
conditions of the heart. In the pathophysiology of myocardial infarction, many
subtypes Mirna have an important role, as well as on the state of post-myocardial
infarction. Some cardiacspecific miRNAs, including mir-1, mir-133a, and mir-208,
plays an important role in maintaining growth and cardiac function, and in many
previous studies mir-1, mir-133a, mir-499, and mir-208 high in the blood of patients
with myocardial infarction compared with those from patients without myocardial
infarction. In addition, mir-21 has a protective effect against ischemia-cell
apoptosis. To test miRs role in human pathology, most studies using high-through
put method to analyze the expression of mir in clinical samples. Right now,
AntimiRNA oligonucleotides have become the tools necessary to research
miRNAdan also been suggested to be a potential therapeutic agent.
------------Key Words : microRNA, myocardial infarction, cardiacspecific miRNAs,
antimiRNA

ABSTRAK
microRNAs (miRNAs) adalah untaian tunggal molekul RNA noncoding yang terdiri dari 20-24 nukleotida, dan merupakan regulator ekspresi
gen paska transkripsi dengan cara menghambat translasi mRNA dalam
mensintesis protein atau menyebabkan degradasi mRNA. Banyak penelitian
menemukan fungsi miRNAs
dalam pengaturan berbagai fungsi
perkembangan dan fisiologis, dan kondisi patologi, bahkan saat ini miRNAs
semakin terlibat dalam regulasi fisiologis dan kondisi patologis jantung.
857
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

Dalam patofisiologi infark miokardium, banyak subtipe miRNA mempunyai
peranan penting, termasuk juga pada keadaan post infark miokardium.
Beberapa cardiacspecific miRNAs, termasuk mir-1, mir-133a, dan mir-208,
memainkan peran penting dalam mempertahankan pertumbuhan dan fungsi
jantung; dan dalam banyak penelitian sebelumnya mir-1, mir-133a, mir-499,
dan mir-208 tinggi dalam darah dari pasien dengan infark miokardium
dibandingkan dengan mereka yang berasal dari pasien tanpa infark
miokardium. Selain itu mir-21 memiliki efek perlindungan terhadap
iskemia-apoptosis sel. Untuk menguji peran miRs dalam patologi manusia,
kebanyakan studi menggunakan metode high through put untuk
menganalisis ekspresi mir dalam sampel klinis. Saat ini juga, AntimiRNA
oligonukleotida telah menjadi alat yang diperlukan untuk penelitian
miRNAdan juga telah diusulkan untuk menjadi agen terapi yang potensial.
---------------Kata Kunci : microRNA, infark miokardium, cardiacspecific miRNAs,
antimiRNA

Peranan Subtipe miRNA pada

Keadaan Post Infark
Miokardium

Christine Verawaty Sibuea

Staff Departemen Biokimia

858
_____________
ISSN 0853-0203

VISI (2012) 20 (1) 838-852

Fakultas Kedokteran Universitas HKBP

Nomensen

Alamat Korespondensi :
Fakultas Kedokteran Universitas HKBP Nomensen
Jl.Sutomo no 4A
Telp : (061) 4533545

859
_____________
ISSN 0853-0203