PLANT PHYSIOLOGY LABORATORY

WORK
Diffusion and Osmotic (Permeability and

Plasmolysis of Cell Membrane)

Written By
Name : Nur Meili Zakiyah
NIM

: 110210153004

Class : X

BIOLOGY EDUCATION PROGRAM STUDY

MATHEMATIC AND SCIENCE DEPARTMENT
TEACHER TRAINING AND EDUCATION FACULTY

JEMBER UNIVERSITY
2013
a. TITLE : Diffusion and Osmotic (Permeability and Plasmolysis Membrane
Cell)
b. PURPOSE :
- to observe the impact of physical treatment (temperature) and
chemical treatment (Kind of solvent) to the permeability of cell
-

membrane
to know the influence of hypertonic and hypotonic solvent to the plant
cell

c. BASE OF THEORY
Cell is basic units of structure and function. Live cell always have the
environment that influence the living cell. The environment include physical,
chemical and biological environment. One of the environment that influence
the cell is liquid or the materials around the cell. In animal cell, especially in
free-living unicellular organism, the substance around the cell is very easy to
enter to the cell through some way. The part of cell that used to filter the
substance is cell membrane. In plant cell, there are two limit : Cell wall and
cell membrane, but the part that has function to filter is cell membrane.
There are some way to transport the substance : Active and Passive
transport. Both of it is important to cell.
Passive transport is the transport that not needed ATP, this way just
depend on the difference of concentration between 2 part, for example :
Diffusion, Osmotic, and Facilitated diffusion. While the Active transport is the
transport of substance through cell membrane that need energy or ATP, for
example Sodium-Potassium Pump (Hall. 1976 : 304).
Water uptake and loss must balance. Water enters and leaves cells by
osmosis. Osmosis is a special case of diffusion, is the movement of water
across a selectively permeable membrane. It occurs whenever WiO solutions
separated by the membrane differ in osmotic pressure. or osmolarity (total

solute concentration expressed as molarity, or moles of solute per liter of

solution). The unit of measurement for osmolarity used in this chapter is
milliOsmoles per liter (mOsm/L); 1 mOsm/L is equivalent to a total solute
concentration of 10-3 M.
If two solutions separated by a selectively permeable membrane have
the same osmolarity, they are said to be isoosmotic. Under these conditions.
water molecules continually cross the membrane. but they do so at equal
rates in both directions. In other words, there is no net movement of water by
osmosis

between isoosmotic solutions. When two solutions differ in

osmolarity, the one with the greater concentration of solutes is said to be

hyperosmotic, and the more dilute solution is said to be hypoosmotic (Figure
44.2). Water nows by osmosis from a hypoosmotic solution to a hyperosmotic
one (Campbell. 2008)
With the membrane, cell can be in right location in the complex
chemical substance environment that always change, can take and feed
some substance that needed by cell, and throw the waste product. Cell
membrane prepare the easily of biochemical to move the minerals ion,
glucose, amino acid, electron, and other metabolite through cell membrane.
The substance that solute in the solvent through membrane by diffusion,
active transport and non-specific osmotic
Transport process need the energy for the actuating. Beside it, the
enter of particles to the cell should be pierce the cell wall and cell membrane
as the barrier, so the rate of particle movement in and out from the cell is
slower. In this case, the enter and out the substance is determined by ability
of membrane to pierced by substance and called as the membrane
permeability. The substances that in and out and in to the cell is gasses,
water and ions. The characteristic of third group is different, so the
membrane permeability to the solute is different, so the way to absorb is
different (Ross. 1970 : 129).
Two types of electrophysiological behavior were observed in voltageclamped plasmolysed cells. Seven out of nine cells became very conductive,

and were strongly depolarized by plasmolysis. The two remaining cells were
relatively unaffected by plasmolysis.
Almost any perturbation to these cells caused large and irreversible
changes to the conductance. In this sense, cells which show a low
conductance upon plasmolysis seem to represent some kind of unstable
equilibrium state where any small change is likely to cause the cell to
irreversibly enter the PHC state.
Range of different osmotic, or the rate at which the osmolarity of the
outside medium was increased, did not consistently affect the behaviour of
the cells at plasmolysis. Charasome density was also suspected to play some
role in cell plasmolysis. Charasome density can be repressed by culture at
low pH, or by storage in darkness (McCulloch. 1995 : 383)
Storage in darkness slightly improved the cell readiness to plasmolyse,
but further investigation is necessary. Weakly selective anion/cation channels
are activated in the plasmalemma of Chora challenged by plasmolysing
media (Lenaz. 1987).
In the osmotic system, there are 3 kinds of solvent : Hypertonic (the
concentration of solvent is higher than the cytoplasm), Hypotonic (the
concentration of solvent is lower than the cytoplasm), and isotonic (two
solvent with same concentration).
If there are two solvents that not same the concentration, the water
molecule will through cell membrane until both of solvent balance. In
hypertonic, almost of the water molecule is bond by glucose molecule (that
dissolved), so just some of water molecule that can free through the cell
membrane. In hypotonic, the amount of free water molecule is higher (not
bound by dissolved molecule), so the water molecule is more than in the
hypertonic condition. Because of that, in the osmosis, the Nett current of
water molecule is from hypotonic to hypertonic.
The cell that located in isotonic will constant in volume. In this case, the
water volume that get by is same. If the cell in hypotonic condition, the cell
will get many water, it can cause break (Litic) in animal cell, while in plant

cell is high turgidity. In opposite, if the cell in the hypertonic, cell will be lost
in the water in much volume, it can cause the cell become small and died.
The diffusion process is the movement of higher solution to lower
concentration of solution without through the membrane. For example: the
solute process of sugar in a glass of water, a glass of water will become
sweet. Permeability and semipermiability is the ability of cell membrane to
filter particles that will pass in or out from the cell. The permeability of
membrane depends on the fluidity of hydrophobic protein and the activity of
transporting protein.
Membrane fluidity is certainly a prerequisite to allow diffusion of
proteins

and

other

molecules

to

occur

in

membranes;

however,

diffusion-coupled processes do not appear, in general, to also be diffusioncontrolled (Hall. 1976 : 327).
The fluidity of lipid bilayer is affected by temberature, fatty acid
composition and cholesterol content. At low temperature, the hydrocarbon
tiles of bilayer lipids can pack closely together to form an oedered
arrangement (or gel stage) wich is fairly rigid. As temperature increased, the
lipid molecule vibrate more rapidly, causing the bilayer to melt into 3 more
disorder arrangement

(liquid state) wich is more fluid. The same short of

change can be seen in butter, which is solid when cool and liquid when ir
warmed. The temperature at which the lipid bilayer melts is called the
transision temperature : for most biological membrane this is in range 10-40 0
C.
Bilayer fluiditu also depend on the lipid composition : the transision
temperature is lower (i.e. the bilayer is more liquid) if the lipids tail are short
or have double bonds. Short chain will interact less with one another than will
long chains, hence a lower temperature is needed to melt the bilayer
containing them. Double bonds put bends in the hydrocarbon tail, making it
more difficult to phospholipid to pack together, and bilayer fluidity is thus
increased. This is why olive oil is liquid in room temperature, whereas lard
(beef fat) is solid : 80% of the olive oil acyl chains contain one or mre double
bonds, compared with only 46% of the beef fat acyl chains.

Bilayer

fluidity

is

influenced

by

cholesterol.

Eucaryot

animal

membranes containing approximately one cholesterol molechule for every

two phospholipid molecules. Cholesterol fits between the bilayer phospholipid
heads, and its hydrophobic tings and side-chain buried within the fatty acid
chains of the membrane interior. The rigid steroid ring interact with the
neihbouring regions of the lipid tails and stiffen them. Making the membrane
less fluid (Brown. 1996 : 11).
d. METHOD OF PRACTICE
Tools and Materials
Tools :

Microscope

Cutter

Beaker glass

Object Glass

Stove

Rack of reaction

Cover Glass

Reaction Tube

tube

Digital Camera

Pipette

Materials :

Turmeric

Leaf of Rhoeo discolor

Aseton

Bulb of Allium cepa

Aquadest

NaCl Solvent

Glucose Solvent

Water

Steps of Work
a. Permeability Cell Membrane
- Temperature
Make 10 cubics of Tumeric (1 cm x 1 cm x 1 cm)
Make 10 cubics of Tumeric (1 cm x 1 cm x 1 cm)

Place each 2 cubics to the reaction tube filled with water temperature 70o, 50o, 40o (30 minute

After 30 minutes, the reaction tube shaked and leave the tube
Observe the change happen and compare each tube

- Kind of Solvent
Prepare 6 tubes : fill 2 tubes with water, 2 tubes with aseton, and 2 tubes with etanol

Fill each tube with 1 cube, shake and leave the tube
After 30 minutes, the reaction tube shaked and leave the tube
Observe the change happen and compare each tube
b. Plasmolysis of Cell Membrane
Prepare the Object and Cover glass
Slice the epidermal cell of onion and Roeo discolor leaf
Slice the epidermal cell of onion and Roeo discolor leaf
Leave toon3 the
minutes and
observe
the changing
of(Water-Hypotonic)
the cell
PlacePlace
the sclicing
glass
and drop
with with
water
the sclicing on object
the object
glass
and drop
water
(Isotonic)
Take the picture of the cell observed
Dry the water with tissue
Drop with the NaCl 0,9 % (Garfis solvent)
Leave to 3 minutes and observe the changing of the cell
Take the picture of the cell observed
Compare the cell in water and grafis solvent in Allium cepa and Rhoeo discolor epiderm

This step is replay to Aquadest and Glucose solvent

e. RESULT OF OBSERVATION

f. DISCUSSION
Permeabilitas Membran sel
Praktikum kali ini berkaitan dengan Difusi dan Osmosis. Topik ini
kemudian dibagi lagi menjadi dua yaitu tentang Permeabilitas membran sel
dan plasmolisis. Kedua peristiwa yang akan dibahas ini sangat berkaitan
dengan keluar masuknya suatu zat melalui membran sel, dan mengamati
perubahan yang terjadi pada kedua sel tumbuhan yang diamati yaitu sel
epidermis Allium cepa dan daun Rhoeo discolor. Kedua jenis tumbuhan ini
memiliki zat warna ungu pada selnya sehingga memudahkan praktikan untuk
dapat mengamati perubahan yang terjadi pada membran sel tumbuhan
mengingat biasanya pembatas yang nampak dibawah mikroskop hanyalah
dinding sel pada sel epidermis yang tak berwarna.
Pada percobaan permeabilitas membran sel, bahan yang digunakan
adalah kunyit dengan 3 macam larutan sebagai pembanding. Larutan
tersebut adalah air, metanol dan aseton. Kunyit memiliki warna kuning pada
selnya sehingga memudahkan untuk pengamatan. Kunyit dipotong dadu
dengan ukuran 1cm x 1cm x 1 cm dan disediakan kurang lebih 10 kubus.
Dalam percobaan permeabilitas membran sel, dilakukan 2 macam
perlakuan, yaitu dengan perbedaan suhu dan perbedaan jenis larutan yang
digunakan. Pada suhu, larutan yang digunakan adalah air dengan suhu 70 0,
500, dan 400 C. Mula-mula air dipanaskan sampai didapat suhu yang
dikehendaki, kemudian air dimasukkan kedalam tabung reaksi dengan volum
yang sama, masing-masing ukuran suhu adalah 2 tabung reaksi. Setelah itu
dadu kunyit dimasukkan dalam tabung masing-masing 1 dadu, kemudian
praktikan mengocok tabung dan membiarkannya selama 30 menit. Setelah
30 menit, potongan dadu diamati dan dibandingkan perubahan yang terjadi
pada tiap tabung. Hal yang sama dilakukan pada percobaan permeabilitas

membran sel terhadap jenis larutan, yaitu dengan mengisi tiap 2 tabung
dengan 1 macam larutan yaitu air, aseton, dan metanol. Kemudian dalam
tiap tabung dimasukkan 1 dadu kunyit, setelah itu dikocok dan didiamkan
selama 30 menit. Setelah itu dadu kunyit diamati dan dibandingkan antara 1
cairan dengan cairan lainnya.
Permeabilitas membran sel yaitu suatu kemampuan membran sel
untuk memfilter atau mengatur zat-zat yang dapat keluar dan masuk dalam
sel. Permeabilitas suatu membran berbeda-beda antara satu tumbuhan
dengan

tumbuhan

lainnya,

permeabilitas

suatu

membran

ini

juga

dipengaruhi oleh keadaan lingkungan disekitarnya, terutama dipengaruhi

oleh jenis larutan dan ion maupun substansi yang terlarut didalam larutan
tersebut. Permeabilitas membran sel sangat penting bagi sel untuk
mempertahankan cairan sitoplasmanya, sitoplasma ini digunakan untuk
berbagai keperluan sel, seperti metabolime dan pembelahan sel. Cairan
sitoplasma dapat berkurang pada kondisi lingkungan yang hipertonik akibat
adanya osmosis, dan dapat bertambah pada kondisi lingkungan yang
hipotonik.
Pada percobaan permeabilitas membran sel, didapatkan 2 data, data
pertama yaitu permeabilitas membran sel berkaitan dengan suhu larutan dan
yang kedua adalah permeabilitas membrane sel tumbuhan terhadap pelarut.
Pada pengamatan tentang permeabilitas terhadap suhu, didapatkan data
berupa perubahan kepekatan air. Pada awalnya air dengan tiga varian suhu
tersebut bening sampai beberapa menit setelah dikocok dengan balok kunyit
didalamnya, namun setelah ditunggu selama 30 menit, terjadi perubahan
warna yang signifikan pada varian suhu 40, 50 dan 70 0 C. berdasarkan hasil
percobaan, pada suhu 400 C diperoleh bahwa semua tabung menunjukkan
warna kuning bening. Pada varian suhu 50 0 C, 3 tabung dari 6 tabung uji
menunjukkan kuning lebih keruh, sedangkan 3 tabung lainnya menunjukkan
kuning bening. Sedangkan pada varian suhu 700 C, hasil yang diperoleh
adalah bening dan sedikit kekuningan.
Membran sel tumbuhan berbeda dengan dinding sel tumbuhan.
Membrane sel disusun oleh protein dan lipid, sedangkan dinding sel

tumbuhan tersusun dari polisakarida. Lipid dan protein sangat dipengaruhi

oleh suhu, sedangkan dinding sel tidak begitu menunjukkan respon akibat
pemanasan. Pada suhu tinggi, lipid dan protein mengalami perubahan
struktur, pada suhu tinggi lemak menjadi lebih encer, begitu juga protein
dapat dengan mudah terdenaturasi karena panas. Sama halnya seperti pada
membrane sel, pada suhu panas, lipid dan protein dalam membrane sel
menjadi lebih encer daripada suhu normal atau suhu lebih rendah. Pada suhu
400 C, warna larutan tidak keruh, tetap bening dan berwanra kuning. Warna
kuning berasal dari kunyit, warna kuning menyebar dari kunyit ke seluruh
pelarut yang menyebabkan pelarut berwarna kuning. Proses ini disebut difusi
karena zat warna menyebar ke seluruh pelarut yang memiliki konsentrasi
lebih rendah. Pada suhu 400 C, sel tumbuhan masih dapat mentolelit keadaan
sehingga protein yang ada dalam sel tidak begitu terdenaturasi dan tidak
begitu

rusak.

Pada

suhu

ini,

membrane

sel

juga

tidak

mengalami

pengenceran yang besar sehingga membrane sel relative stabil dan dapat
mempertahankan fungsinya dengan baik sebagai penyaring zat-zat yang
melewatinya.

Karena

membran

sel

relative

stabil

dan

masih

dapat

mempertahankan fungsinya, maka tidak banyak pigmen yang dapat keluar

maupun masuk kedalam sel, oleh karen itu warna air tetap bening karena
hanya mengandung pewarna kuning dari kunyit. Warna kuning yang muncul
adalah bersal dari vakuola kubik kunyit.
Pada air dengan suhu 500 C, didapatkan hasil bahwa warna air yang
dihasilkan lebih keruh daripada pada suhu 400 C, tetapi tetap berwarna
bening. Pada suhu yang lebih tinggi, protein akan lebih mudah didenaturasi.
Pada suhu ini, membrane sel sudah mulai tidak bersahabat atau tidak dapat
mempertahankan bentuknya. Inti sel hidrofobik mungkin semakin encer yang
menyebabkan sel membran menjadi menjadi lebih encer. Itulah mengapa
hasil yang didapat menunjukkan warna larutan yang lebih keruh. Proteinprotein yang berada dalam sel baik berupa organel kecil ataupun berupa
molekul-molekul kecil lebih mudah keluar dari sel karena kondisi membrane
sel. Setelah dikocok, kekeruhan ini semakin bertambah karena sel-sel yang

ada dalam tabung reksi dikocok dengna tangan. Warna kuning yang muncul
adalah bersal dari vakuola kubik kunyit.
Variasi suhu ketiga yaitu suhu 700 C. Suhu ini tergolong amat tinggi
bagi kehidupan sel, apalagi sel yang sudah dipisahkan dari tubuh tumbuhan
seperti kubik kunyit. Pada suhu ini, membrane plasma menjadi sangat
permiabel dan mudah dilalui zat-zat baik keluar maupun kedalam sel. Inti
hidrofobik lipid bilayer mejadi encer yang menyebabkan membrane sel
menjadi encer. Yang dimaksud dengan membrane bukan hanya membrane
yang

membatasi

sel

dengan lingkungan,

tapi

juga

membrane

yang

membatasi organel-organel lain dari sitoplasma, karena komposisi membrane

pada organel dan membran sel sama, maka yang terjadi pada membran
organel adalah sama dengan yang terjadi pada membrane sel. Akibat
keenceran membrane yang tidak terkendali ini, maka zat-zat dapat keluar
masuk sel dan organel secara bebas, hal ini menyebabkan air berwarna
keruh, karena zat-zat, molekul yang ada didalam sel keluar dari sel dan
memenuhi seluruh air, sama seperti pada peristiwa difusi, zat yang meiliki
konsentrasi lebih besar akan cenderung untuk tersebar pada zat yang
memiliki konsentrasi lebih kecil. Protein-protein dalam sel juga ikut keluar.
Protein-protein ini terdenaturasi karena suhu yang tinggi sehingga pada
keadaan terdenaturasi seperti ini, protein tidak dapat kembali lagi. Jadi
apabila potongan kunyit ditempatkan pada suhu normalnya lagi, tidak aka
nada yang berubah dalam susunan protein sel yang telah terdenaturasi
tersebut. Warna kuning yang muncul adalah bersal dari vakuola kubik kunyit.
Warna kuning pada air adalah pigmen yang terkandung dalam vakuola
kubik kunyit. Warna kuning yang semakin kuat pada peningkatan suhu dapat
disebabkan oleh keluarnya pigmen kunyit dari dalam vakuola sel akibat
membrane sel yang sangat permiabel terhadap berbagai zat pada suhu
tinggi. Inilah yang menyebabkan warna kubik kunyit menjadi lebih pucat saat
dicelupkan dalam air. Pada awalnya warna pucat pada kunyit hanya terjadi
pada sel-sel luar kubus, namun lama kelamaan, semua sel dalam kubus
kunyit tersebut pasti akan pucat seluruhnya. Hal ini karena adanya hubungan
antar sel yaitu plasmodesmata. Apabila satu sel mengalami suatu kondisi dan

kondisi itu berlangsung relative lama, maka sel-sel yang ada disekiratnya
juga akan memperoleh kondisi yang sama seperti satu sel tadi. Karena
plasmodesmata cenderung akan mempertahankan komposisi yang sama
melalui pertukaran zat pada sel tumbuhan.
Pada percobaan dengan menggunakan suhu 70 0 C, hasil yang diperoleh
adalah warna air bening dan sedikit kekuningan. Hal ini tidak sesuai dengan
teori yang menyatakan bahwa semakin tinggi suhu maka air akan semakin
keruh (berkaitan dengan permeabilitas membrane sel yang akan menjadi
sangat encer pada suhu tinggi yang menyebabkan zat dapat keluar masuk
dengan lebih bebas, semakin tinggi suhu maka semakin encer membran).
Menurut Brown (1996 : 11) dalam Buku Biologycal membranes : The fluidity
of lipid bilayer is affected by temberature, fatty acid composition and
cholesterol content. At low temperature, the hydrocarbon tiles of bilayer
lipids can pack closely together to form an oedered arrangement (or gel
stage) wich is fairly rigid. As temperature increased, the lipid molecule
vibrate more rapidly, causing the bilayer to melt into 3 more disorder
arrangement (liquid state) wich is more fluid. The same short of change can
be seen in butter, which is solid when cool and liquid when ir warmed. The
temperature at which the lipid bilayer melts is called the transision
temperature : for most biological membrane this is in range 10-40 0 C. Maka
hasil yang diperoleh pada percobaan ini kurang benar karena hasilnya
menunjukkan warna bening. Kesalahan ini mungkin dapat disebabkan oleh
beberapa faktor, seperti mungkin saja saat pencucian, kunyit dicuci terlalu
lama sehingga sebagian warna dan komponen sel bagian luar sudah terkikis
oleh air, sehingga tidak terlalu memberikan respon pada suhu yang paling
tinggi.
Data kedua yang didapat adalah mengenai permeabilitas membran sel
berkenaan dengan jenis larutan, yaitu air, metanol dan aseton. Selain kedua
larutan tesebut, juga digunakan air sebagai kontrol. Masing-masing larutan
ini dikocok dengan kunyit dan didiamkan selama 30 menit, setelah itu
dilakukan pengamatan. Dari hasil percobaan, menunjukkan 3 hasil yang
berbeda, pada air, warna air adalah kuning bening dan tidak terjadi

pengerutan pada kubik kunyit. Pada aseton, hasil yang didapat adalah warna
larutan aseton berubah menjadi agak keruh dan kekuningan, dan sel kunyit
menjadi mengkerut. Sedangkan pada methanol, warna akhir methanol
adalah kuning keruh, yaitu diantara air dan aseton, dan kunyit mengkerut.
Jadi yang paling keruh adalah cairan aseton, dan yang menunjukkan kunyit
paling mengkerut adalah kunyit pada aseton.
Pada air, kunyit tidak mengalami pengerutan karena air merupakan
larutan isotonic yang menjaga bentuk dan ukuran sel kunyit sehingga sel
kunyit tidak berubah. Warna kuning pada air adalah berasal dari pigmen
kuning kunyit yang keluar dari sel. Namun pengeluaran ini hanya sebagian
kecil saja melalui proses difusi yang menyebarkan warna kuning ke seluruh
air. Pada air suhu normal, membrane sel tidak mengalami gangguan dan
masih dapat mempertahankan kemampuan dan fungsinya, sehingga tidak
terjadi difusi ataupun sampai kebocoran zat yang menyebabkan air dalam
tabung reaksi menjadi keruh.
Pada larutan methanol, warna yang diperlihatkan oleh cairan adalah
kuning keruh, dan kentang mengkerut. Dari ketiga macam pelarut, methanol
adalah pelarut yang menunjukkan hasil paling keruh. Metanol merupakan
senyawa alkohol yang bersifat polar dan mudah berikatan dengan membran
sel (adhesi). Ikatan ini menyebabkan senyawa organic penyusun membran
sel menjadi larut. Metanol juga memiliki panjang rantai paling pendek
sehingga dengan waktu yang sama pada methanol tidak memerlukan waktu
yang banyak untuk pecahnya membrane sel dan larut dalam senyawa kimia
methanol tersebut. Karena membrane sel tumbuhan telah rusak, maka
membrane sel tidak dapat menjalanjan fungsi semestinya yaitu sebagai
penyaring zat-zat keluar masuk sel, oleh karena itu protein dan substansi lain
dalam sel keluar dari sel dan memenuhi methanol untuk selanjutnya larut
dalam methanol. Namun dinding sel tumbuhan tetap dipertahankan sehingga
kunyit tetap berbentuk kubus. Namun keadaan sel yang berada pada
permukaan paling luar kubus kunyit yang berkenaan langsung dengan
methanol tidak mengalami perubahan signifikan berkenaan dengan ukuran
kubus kunyit. Kerutan hanya terjadi sangat sedikit. Hal ini dapat dilogika

karena membrane sel tumbuhan sudah rusak, sehingga zat dapat masuk
keluar seenaknya dari dan kedalam sel, karena itu methanol yang merupakan
cairan luar sel juga dapat memasuki sel melalui proses difusi bukan lagi
osmosis

karena

peran membran sel sudah tidak berlaku. Difusi ini

menyebabkan larutan methanol dapat masuk dan mengisi isi sel sampai
konsentrasi antara dua daerah ini stabil, seperti prinsip pada difusi.
Pada tabung reaksi kedua yaitu tebung reaksi yang berisi aseton,
warna aseton adalah kuning pekat dan tidak keruh seperti pada methanol. Itu
artinya aseton tidak memberikan dampak yang begitu besar pada perusakan
membrane sel. Sedangkan kubus kunyit pada aseton lebih mengkerut
daripada pada methanol. Kerutan ini awalnya hanya terjadi pada satu, dua
atau beberapa sel yang ada di luar permukaan kubus kunyit. Namun bila
perendaman ini dilakukan terus menerus, maka kubus kunyit akan mengkerut
semuanya, hal ini dapat terjadi karena adanya plasmodesmata atau
hubungan antar sel yang menyebabkan kondisi yang sama pada seluruh sel.
Aseton merupakan senyawa nonpolar. Pemberian aseton pada sel tumbuhan
tidak meberikan dampak yang signifikan pada sel. Sel mengkerut terjadi
karena sel mengalamu osmosis, yaitu keluarnya cairan dari dalam sel keluar
sel. Hal ini karena larutan aseton memiliki kepekatan yang lebih tinggi
daripada sitoplasma sehingga menyebabkan tumbuhan kehilangan air untuk
menyeimbangkan

kondisi

luar

dan

dalam.

Kehilangan

air

ini

dapat

menyebabkan plasmolisis sehingga sel mengecil dan mengkerut. Sedangkan

pigmen kuning pada aseton terlihat lebih banyak daripada pada methanol,
hal ini karena pada methanol cairan keruh sehingga pigmen kuning tidak
terlalu menonjol, sementara pada aseton, komponen sel tidak keluar dari sel
yang menyebabkan aseton tetap bening dan meiliki warna kuning yang lebh
menonjol.
Air digunakan dalam kontrol, air merupakan senyawa polar seperti
pada methanol, namun tingkat kepolarannya sangat rendah. Air merupakan
cairan isotonic yang dapat mempertahankan bentuk asli dan ukuran sel. Oleh
karena itulah air digunakan sebagai kontrol. Dengan menggunakan air, dapat
diketahui bentuk asli dari kunyit. Pada air, dihasilkan warna yang kuning

bening, namun warna kuning yang dihasilkan jauh lebih pucat daripada yang
dihasilkan oleh aseton. Hal ini karena pada air, pertukaran zat yang terjadi
amat sedikit, karena isotonic dan tidak mengalami perbedaan konsentrasi
yang besar sehingga warnya yang terjadi hanya kuning pucat. Warna kuning
dihasilkan dari pigmen kuning kunyit yang berdifusi keseluruh molekul air.

Plasmolisis
Percobaan kedua dalam topik ini yaitu plasmolisis membran sel.

Plasmolisis yaitu peristiwa terlepasnya membran sel dari dinding sel akibat
kekurangan cairan. Pada plasmolisis, sebagian besar cairan sitoplasma
dikeluarkan dalam sel sehingga hanya sedikit cairan yang ada dalam sel,
volume sel juga mengecil dan diikuti dengan mengecilnya membran sel,
sementara dinding sel merupakan struktur kaku yang susah untuk berubah.
Karena itulah membran sel dapat terlepas dari dinding sel.
Pada percobaan kali ini, bahan yang digunakan adalah dua macam sel
epidermis tumbuhan yaitu sel epidermis bawang merah atau Allium cepa,
dan epidermis daun Jadam atau Rhoeo discolor. Untuk mengamati sel
epidermis, maka praktikan mengiris tipis bagian permukaan daun agar sel
yang didapat tidak bertumpuk dan mudah untuk diamati. Sel yang diamati
yaitu epidermis bawang merah dan epidermis jadam memiliki warna ungu
yang dapat memudahkan pengamatan. Hal ini karena pada pengamatan
mikroskop terhadap sel biasa, sel yang tidak memiliki warna, membran
selnya susah untuk diamati, karena berwarna transparan seperti bagian sel
lainnya. Bagian yang biasa terlihat saat pengamatan sel dibawah mikroskop
adalah dinding sel yang membentuk seperti unit-unit kecil. Dengan adanya
warna, kita dapat membedakan isi sel yang dibatasi dengan membran sel
dengan dinding selnya. Meskipun membran sel tidak dapa dilihat dengan
jelas, namun sitoplasma yang berwarna menyebabkan pengamatan mudah
terjadi.
Setelah disayat, sel epidermis dari masing-masing tumbuhan tersebut
kemudian diletakkan diatas gelas benda dan ditambahkan air sebagai
lingkungan

isotonik

(konsentrasi

larutan

sama

dengan

konsentrasi

sitoplasma) sel tersebut. Sebelum meninggalkan, praktikan mengamati

terlebih dahulu bentuk selnya. Praktikan kemudian meninggalkan atau
mendiamkan sel tersebut dalam tetesan air dan setelah kurang lebih 3 menit
mengamati perubahan yang terjadi pada sel dengan mikroskop. Pada
pengamatan ini, didapatkan bahwa ukuran sel berubah dari ukuran normal
pada awal pengamatan. Ukuran sel sekarang adalah agak sedikit lebih besar,
namun perubahan ini tidak terlalu signifikan. Pada kondisi lingkungan
isotonik, umumnya sel tidak akan mengalami perubahan ukuran, karena
tidak ada perbedaan konsentrasi antara dua cairan yang dapat menyebabkan
aliran konsentrasi ke yang lebih rendah. Lingkungan isotonik memberikan
lingkungan yang stabil dengan kondisi sel, oleh karena itu sel tidak perlu
menetabilkan lagi kondisinya dengan kondisi lingkungan sehingga proses
osmosis melewati membran dan dinding sel tidak berjalan signifikan.
Menurut teori, ukuran sel memang tidak berubah, namun pada sel yang kami
amati, ukuran sel berubah sedikit lebih besar. Hal ini mungkin karena
kesediaan air dilingkungan sel banyak sehingga memungkinkan air untuk
masuk

kedalam

sel,

memperbanyak

volume

cairan

seitoplasma

dan

memperbesar ukuran sel. Selain itu sel juga terlihat kaku dan mantap karena
tekanan turgor sel besar.
Setelah ditetesi air, selanjutnya sel akan diberi perlakuan berbeda yaitu
dengan membedakan larutan yang akan diteteskan pada sel. Cairan
selanjutnya yang digunakan adalah larutan NaCl 0.09 % sebagai larutan
garfis. Sel yang ada di gelas benda dikeringkan dengan cara menghisap
cairan yang ada disekitar sel dengan tisu, setelah itu ditetesi larutan NaCl
0.09% dan didiamkan selama kurang lebih 3 menit. Setelah itu diamati lagi
dibawah mikroskop dan membandingkan perubahan yang terjadi pada sel
saat sebelum dan setelah ditetesi cairan NaCl 0.09 %. Kedua sel epidermis
yang diperlakukan dalam percobaan ini menunjukkan tanda-tanda krenasi.
Selain NaCl 0.09%, larutan yang digunakan adalah larutan aquades dan
larutan gula.
Hasil yang diperoleh yaitu 3 macam respon yang berbeda, yaitu Sel
tetap dalam ukuran normalnya saat ditetesi dengan air, sel mengalami

pembesaran volume saat ditetesi dengan aquades, dan sel mengalami

plasmolisis saat ditetesi dengan glukosa dan larutan garfish.
Pada sel epidermis daun jadam, jelas terlihat bahwa warna ungu hanya
dijumpai pada daerah tertentu dalam sel, tidak merata pada semua sel
seperti pada kondisi normal. Warna ungu ini menunjukkan sel yang dibatasi
membrannya, sel semakin mengecil dan terpusat ditengah, sebagian
membran sel sudah terlepas dari dinding sel. Hal ini terjadi karena sel
mengalami kehilangan cairan, melalui proses osmosis. Cairan garfish dan
glukosa bersifat lebih pekat atau hipertonik daripada sitoplasma, kedua jenis
cairan ini berinteraksi pada ruang yang berbeda. Karena kadar zat terlarut
dalam larutan garfis lebih pekat, sama artinya dengan larutan tersebut
memiliki jumlah air yang lebih sedikit bila dibandingkan dengan pelarutnya.
Oleh karena

itu, cairan yang ada

didalam sel (yang lebih banyak

mengandung air bila dibandingkan zat pelarutnya) akan keluar menuju

larutan garfis diluar sel, hal ini untuk menyeimbangkan konsentrasi antara
dua

larutan

tersebut.

Akibatnya

sel

mengalami

kehilangan

air

dan

mengkerut. Zat yang keluar dari sel hanya berupa pelarut, tanpa zat terlarut
apalagi organelnya, hal ini karena ukuran pelarut jauh lebih kecil daripada
ukuran zat terlarut, sehingga zat terlarut akan tertahan dalam sel karena
tidak bisa menembus membrane yang berlubang amat kecil. Peristiwa
krenasi juga terjadi pada sel yang ditetesi dengan larutan glukosa dengan
mekanisme kehilangan air yang sama.
Keluarnya air dari dalam sel tersebut melewati dua pembatas yaitu
membran sel, fosfolipid bilayer melalui transport pasif osmosis dan melewati
dinding sel. Pergerakan molekul air melewati dinding sel tidak sama seperti
pada saat air melewati membran sel, karena struktur dinding sel yang
berbeda dengan membran sel, yaitu lebih kaku dan tidak berongga, hanya
ada plasmodesmata. Air keluar dari lubang plasmodesmata sel, ke daerah
ekstraseluler atau lingkungan. Plasmodesmata yaitu celah pada dinding sel
yang berfungsi salah satunya sebagai komunikasi sel yang menghubungkan
satu sel dengan sel lainnya, dan hanya ditemukan pada sel tumbuhan.
Melalui plasmodesmata, sel satu dan lainnya dapat berkomunikasi dan

memiliki komposisi substansi yang sama, karena plasmodesmata juga

digunakan oleh sel untuk menjaga keseimbangan cairan sel antara satu sel
dengan lainnya. Pada sel bagian ujung yang telah dipotong, plasmodesmata
akan terbuka sehingga aliran air ke lingkungan atau daerah ekstrasel lebih
mudah.
Saat satu sel mengalami kehilangan air, sel lainnya akan menyesuaikan
dengan sel tersebut, yaitu dengan cara difusi dari sel yang memiliki cairan
tinggi ke sel yang memiliki cairan rendah, sehingga semua sel memiliki
cairan dan komposisi zat yang sama. Hal semacam ini dapat dianalogikan
seperti ruang-ruang yang memiliki pintu-pintu penghubung tiap ruang,
sehingga apabila terjadi banjir atau kelebihan pada suatu ruang, maka air
akan menyebar ke seluruh ruangan sampai volume air tiap ruangan sama.
Apabila sel terus menerus pada kondisi lingkungan hipertonik, itu artinya sel
akan terus menerus mengalami kehilangan air, kehilangan air pada satu atau
beberapa sel akan diikuti oleh sel lainnya karena air akan mengalir kearah
yang lebih rendah konsentrasinya untuk menyamakan kondisi sel-sel
disekitarnya, sehingga plasmolisis akan terjadi pada sebagian besar ataupun
seluruh kelompok sel tersebut.
Sedangkan

pada

sel

epidermis

bawang

merah,

sel-selnya

juga

mengalami krenasi, tapi tidak sesignifikan pada epidermis daun jadam. Hal
ini dikarenakan epidermis bawang merah tidak mengandung warna sehingga
lebih sulit untuk diamati. Pada epidermis bawang merah setelah dilakukan
perlakuan kedua dengan NaCl, sel-sel epidermis berbentuk tidak rata
(dinding sel melenggot-lenggot atau tidak lurus seperti pada kondisi normal),
selain itu juga ditandai dengan mengecilnya volume sel namun tidak begitu
signifikan, tanda yang dapat diamati terakhir adalah banyaknya nukleus dari
sel yang berada pada posisi di pinggir dinding sel. Semua hal ini terjadi sama
seperti pada peristiwa jadam diatas, yaitu karena sel mengalami plasmolisis
saat ditempatkan pada lingkungan hiertonik. Mekanisme yang terjadipun
juga sama.
Apabila kondisi ini (sel berada pada lingkungan hipertonik) terus
terjadi, maka membran plasma dapat lepas sepenuhnya dari dinding sel, hal

ini dapat menyebabkan kematian sel. Namun apabila kondisi sel masih bisa
dipertahankan, sel akan menjadi normal kembali bila ditempatkan pada
kondisi lingkungan hipotonik. Kondisi lingkungan hipotonik menyebabkan sel
memperoleh pasokan air melalui proses osmosis, karena konsentrasi cairan
diluar sel lebih rendah daripada cairan didalam sel, hal ini diimbangkan
dengan adanya osmosis, sehingga perbedaan konsentrasi antara sitoplasma
dan lingkungan relatif stabil. Mekanisme osmosis pada cairan hipotonik sama
dengan mekanisme osmosis pada cairan hipertonik.
Respon terakhir yang diberikan sel terjadi pada sel yang ditetesi
dengan larutan aquades. Konsentrasi larutan aquades lebih rendah daripada
konsentrasi sitoplasma, dan larutan aquades disebut juga larutan hipotonik
terhadap sitoplasma. Akibatnya, larutan aquades kan masuk kedalam sel
melalui membrane dan dinding sel untuk selanjutnya bergabung dengan
sitoplasma untuk mengisi sel. Proses yang terjadi adalah osmosis karena
hanya air yang berpindah melewati membran sel, perpindahan air dari
konsentrasi air tinggi ke konsentrasi air yang lebih rendah. Sehingga
menyebabkan sel kebanyakan cairan dan menggembung. Pada sel hewan
dikenal dengan istilah lisis, namun sel tumbuhan tidak mengalami lisis
karena pada sel tumbuhan terdapat dinding sel yang kuat yang dapat
menjaga sel dari pecah. Kondisi sel ini dapat balik ke keadaan normal bila sel
ditempatkan ke larutan isotoniknya.
g. CONCLUSSION
- Temperature give the significant impact in cell membrane. If the
temperature higher (700, 500, 400 C), so the cell membrane more liquid
and cause the exchange of substance is more free. While in the solvent, if
the polarity level of solvent higher (Metanol, Aseton, Air), so the
damaging of cell membrane is bigger and cause the exchange of
-

substance is more free.

Effect of hypertonic environment is cause the cell do plasmolysis because
cell lost of water through the osmosis process. Water flow out to balance
the condition of sytoplasm and environment because the environment
has higher concentration than cytoplasm. In hypotonic environment, the

cell becomes bigger because water will flow in to the cell, to balance the
condition of cell that has higher concentration.
REFERENCES
Brown, Bernard. 1997. Biologycal Membrane. USA. University of oxford Road
Campbell et al. 2008. Biologi Edisi 8 Jilid 1. Jakarta. Erlangga
Cleon w. Ross, 1970. Plant Physiology Laboratory Manual ,

Wadsworth

Publ.Comp.
Hall, M.A. (ed). 1976. Plant Structure, Function and Adaptation. The English
Language Book Socie. and Macmillan
Lenaz, Giorgio . 1987. Lipid Fluidity and Membrane Protein Dynamics. Plenum
Publishing

Corporation.

Vol.

7,

No.

11,

1987.

http://www-04.all-

portland.net/bsr/007/0823/0070823.pdf [17th of October 2013]

McCulloch and Beilby2. 1997. The electrophysiology of plasmolysed cells of
Chara Australis. Oxford University Press. Vol. 48, No. 312, pp. 1383-1392,
July 1997. http://jxb.oxfordjournals.org/content/48/7/1383 [17th of October
2013]
Ridge, I. 1991. Plant Physiology. Hodder & Stoughton: Open Univ.

ATTACHMENT
1. Permeability of Cell Membrane
Temperature 700
700 C
500 C
400 C

Kind of Solvent

Water

2. Plasmolysis

Metanol

Aseton

Allium cepa
Normal (First

Water

Observation)

Glucose

NaCl 0,09 %

Rhoeo discolor
Normal (First Observatio)

Water

Glucose

NaCl 0,09 %