FIZI KO-HEMIJSKA FIZIKO-HEMIJSKA KARAKTERIZACIJA LEKOVA

LEK CILJNO MESTO DEJSTVA

LEK

Rastvorljivost

Lipoproteinska membrana

Plazma
Nejonizovani lek Jonizovani lek

Nejonizovani lek Jonizovani lek

Stepen jonizacije

Lipofilnost

krvotok
CILJNO MESTO

KONCENTRACIJA LEKA NA CILJNOM MESTU

ta moe da utie na koncentraciju leka (aktivnost) na ciljnom mestu? RESORPCIJA: uglavnom rastvoreni i neutralni lekovi prolaze kroz lipidne barijere KONCENTRACIJA SLOBODNOG LEKA U PLAZMI: lekovi u anjonskom obliku mogu da se vezuju za proteine plazme lekovi u katjonskom obliku mogu da se veu za nukleinske kiseline DEPONOVANJE LEKA: veoma lipofilni lekovi mogu biti deponovani u masnom tkivu ELIMINACIJA LEKA polarni lekovi se lako izluuju preko bubrega

FIZIKO-HEMIJSKA KARAKTERIZACIJA LEKOVA

ta je, pored aktivnosti, od znaaja za lek? RASTVORLJIVOST u vodi
(lek treba da bude rastvoren u gastrointestinalnom traktu (GIT-u) i krvnoj plazmi)

LIPOFILNOST (lek treba da prolazi kroz lipidne barijere) STEPEN JONIZACIJE

(nejonizovani oblik leka prolazi kroz elijsku membranu)

HEMIJSKA I METABOLIKA STABILNOST

(otpornost na degradaciju leka usled niske pH u stomaku i prisustva enzima)

JONIZACIJA LEKOVA
-veina lekova su slabe kiseline ili slabe baze -ravnotea jonizovanog i nejonizovanog oblika slabih kiselina i baza u vodenim rastvorima
lekovi - slabe kiseline: lekovi - slabe baze:

HA
A-

H+

A-

B + H+

BH+

HA - nejonizovani oblik leka (kiseline) - jonizovani oblik leka (kiseline)

B - nejonizovani oblik leka (baze) BH+ - jonizovani oblik leka (baze)

STEPEN JONIZACIJE LEKA U F-JI pH RASTVORA

ZNAAJ ODREIVANJA STEPENA JONIZACIJE LEKOVA

nejonizovani oblik leka prolazi lipidne membrane jonizovani oblik leka je rastvorljiviji lekovi u anjonskom obliku mogu da se vezuju za proteine plazme lekovi u katjonskom obliku mogu da se veu za nukleinske kiseline

KISELE FUNKCIONALNE GRUPE KOJE JONIZUJU

fenol (9-11) fenolat sulfonamidat

sulfonamid (9-10)

imid (9-10) alkiltiol (10-11) tiofenol (9-10)

imidat tiolat tiofenolat

N-arilsulfonamid (6-7)

N-arilsulfonamidat

sulfonomid (5-6)

sulfonimidat

alkilkarboksilna kiselina (5-6) arilkarboksilna kiselina (4-5) sulfonska kiselina (0-1)

alkilkarboksilat arilkarboksilat sulfonat

BAZNE FUNKCIONALNE GRUPE KOJE JONIZUJU

arilamin (9-11) aromatini amin (5-6) imin (3-4)

aril amonijum aromatini amonijum iminijum

alkilamin 2(10-11) 3(9-10)

alkilamonijum

amidin (10-11)

amidinijum

gvanidin (12-13)

gvanidinijum

FUNKCIONALNE GRUPE KOJE SU NEUTRALNE (POD FIZIOLOKIM USLOVIMA)

alkil alkohol

etar

estar

estar sulfonske kiseline

amid

diarilamin

nitril

kvaternarni amonijum

amino oksid

keton & aldehid

tioetar

sulfoksid

sulfon

HENDERSON-HASSELBALCH-ova JEDNAINA
Kiseline HA
Ka =

Baze (konjugovane kiseline) A BH+ B + H+

Ka = [H+ ][B] [BH+ ]

H+

[H+ ] [ A- ] [HA]
pKa = -log10Ka

jaina kiseline Ka

jaina baze Ka
Ka konjugovane kiseline

pK a = pH + log

[HA]

[A ]

pK a = pH + log

[BH ]
+

[B ]

H-H jednaina za kiseline pKa + pKb = 14

H-H jednaina za baze

pKa
pK a

[HA] = pH + log

[A ]

pK a = pH + log

[BH ]
+

[B ]

[HA] = [A-], ili [BH+] = [B],

pKa = pH pKa vrednost - pH na kojoj je 50% molekula jonizovano

JONIZACIJA MONOPROTONSKIH BAZA

H3C H3C NH2+ HO H3C H3C NH HO

OHB

BH+
O

H+

BH+

Propranolol (konjugovana kiselina) pKa = 9.53

www.sirius-analytical.com

Raspodela jonizovanog i nejonizovanog oblika propranolola

JONIZACIJA MONOPROTONSKIH KISELINA

HA
F O N CH3 H O O

A-

OO

OHH+

N CH3

HA

A-

Flumehin (kiselina) pKa = 6.27

www.sirius-analytical.com

Raspodela jonizovanog i nejonizovanog oblika flumehina

JONIZACIJA CVITERJONA
XH2+
CH3 S H H NH O O NH3+ N CH3 COOH H CH3 S N

XH
CH3 CH3 COOH H O NH3+ S N CH3

XCOO-

H NH

NH

O NH2

XH2+

XH

X-

Ampicilin (cviterjon) pKas = 7.14, 2.55

www.sirius-analytical.com

Primer: amino kiseline

Raspodela jonizovanih oblika ampicilina

JONIZACIJA AMFOLITA
HO

XH2+

HO

XH0

O-

H NH+

CH3

H N CH3

O H N CH3 HO

HO

HO

Morfin (amfolit) pKas = 9.26, 8.17

XH2+ XH0 X-

www.sirius-analytical.com

Raspodela jonizovanih i nejonizovanog oblika morfina

pKa
pKa vrednost predstavlja jainu kiselina ili baza na osnovu pKa vrednosti ne moe se zakljuiti da li je jedinjenje kiselina ili baza na osnovu poznate pKa vrednosti moe se izraunati pH vodenog rastvora kiseline ili baze

[A ] pH = pKa + log

za kiseline

[AH ]

pH = pKa + log
za baze

[BH ]
+

[B]

Jedinjenje
Kiseline Aspirin Paracetamol Fenobarbiton Baze Kokain Diazepam Difenilhidramin Amfoliti Morfin Adrenalin

pKa vrednost
3.5 9.5 7.4

8.6 3.3 9.0

8.0 (amin) i 9.9 (fenol) 8.7 (amin) i 10.2 i 12.0 (fenol)

POREENJE JAINA KISELINA

1. pKa (CH3COOH) = 4.7 2. pKa (ClCH2COOH) = 2.7

Koja kiselina je jaa? Koliko puta?

pKa(2) pKa (1) = 2.7 - 4.7 = -2 pKa = -logKa, antilog 2 = 100

Kiselina 2 je 100 puta jaa od kiseline 1

JONIZACIJA LEKA U FIZIOLOKIM USLOVIMA

pH (pun) 5.0 (0.1 h) pH (prazan) 1.7 (1.4 -2.1h) eludac 0.1 m2 Dvanaestopalano crevo 0.1 m2 jejunum 60 m2 ileum 60 m2 Debelo crevo 0.3 m2 3-4 sata prolaska kroz tanko crevo

4.6 (2.4 - 6.8) 4.5 - 5.5 (1 h) 4.7 (2 h) 6.1 (5.8 - 6.2) 6.5 (6.0 - 7.0)

6.5

8.0 5.0 - 8.0

eludac (pH 1-2) apsorbuju se slabe kiseline tanko crevo (6-7) apsorbuju se slabe baze

plazma (pH 7.4 (jonizovani oblik leka u vezanom obliku)

PREDVIANJE STEPENA JONIZACIJE U F-JI pH ZA SLABE KISELINE

pH = pKa (oko 50% molekula je jonizovano) pH = pKa + 1 (oko 90% molekula je jonizovano) pH = pKa + 2 (oko 99% molekula je jonizovano) pH = pKa + 3 (oko 99.9% molekula je jonizovano) pH = pKa + 4 (oko 99.99% molekula je jonizovano)

10

PREDVIANJE STEPENA JONIZACIJE U F-JI pH ZA SLABE BAZE

pH = pKa (oko 50% molekula je jonizovano) pH = pKa - 1 (oko 90% molekula je jonizovano) pH = pKa - 2 (oko 99% molekula je jonizovano) pH = pKa - 3 (oko 99.9% molekula je jonizovano) pH = pKa - 4 (oko 99.99% molekula je jonizovano)

ODREIVANJE STEPENA JONIZACIJE LEKA

pK a = pH + log
pH pKa= log[A-]/[HA] 10pH-pka = 10log[A-]/[HA] = [A-]/[HA] [HA]/[A-] = 10pKa-pH

[HA]

[A ]

pK a = pH + log

[BH ]
+

[B ]

pH pKa= log[B]/[BH+] 10pH-pka = 10log[B]/[BH+] = [B]/[BH+] [B]/[BH+] = 10pH-pKa [B] %jonizacije = [BH+]/ [B]+[BH+] x 100 [HA]

%jonizacije = [A-]/ [A-]+[HA] x 100

% jonizacije = 100 / 1 + 10pKa pH

za kiseline

% jonizacije = 100 / 1 + 10pH-pKa

za baze

11

Primer: pentobarbiton u plazmi

O C2 H5 NH

Izraunati procenat doze pentobarbitona koji e biti jonizovan u plazmi, pH 7.4.

% jonizacije = 100 / 1 + 10pKa pH za kiseline

C5 H 11 O

NH

pKa = 8.0

% jonizacije = 100 / 1 + 108.0 7.4 = 100 / 1 + 100.6 = 100 / 1 + 3.98 = 100 /4.98 = 20.1% %jonizovanog oblika na pH 7.4 = 20.1% % nejonizovanog oblika na pH 7.4 = 79.9%

Primer: aspirin u GIT-u

% jonizacije = 100 / 1 + 10pKa pH za kiseline
COOH

COO-

OCOCH3

OCOCH3

pKa = 3.5 nejonizovan eludani sok (pH=2) tanko crevo (pH=6) debelo crevo (pH=8) 96.9% 0.3% 0.0% jonizovan 3.1% 99.7% 100%

12

UTICAJ ELEKTRONSKIH EFEKATA NA pKa

-grupe koje su akceptori elektrona smanjuju pKa vrednosti kiselina i baza tj. poveavaju jainu kiselina i smanjuju jainu baza Grupe koje su AKCEPTORI elektrona:
+NR3, NO2, SO2R, CN, F, Cl, Br, I, CF3, COX (X=OH, NH2, OR), COR, OR, SR, NH2, C6H5, R=alkil
O

H3C
F F

OH

pKa = 4.54 na 25C i 0.15M I (jonske jaine)

OH

pKa = 0.32 na 25 C i 0.15M I

F O

UTICAJ ELEKTRONSKIH EFEKATA NA pKa

-grupe koje su donori elektrona poveavaju pKa vrednosti kiselina i baza, tj. smanjuju jainu kiselina i poveavaju jainu baza Grupe koje su DONORI elektrona:
COO-, O-, NH-, alkil
O

H3C

OH

pKa = 4.54 na 25C i 0.15M I

O H3C OH H3C CH3

pKa = 4.83 na 25C i 0.15M I

13

UTICAJ INDUKTIVNOG EFEKTA NA pKa

+I
H COOH CH3 CH3CH2 CH3CH2CH2 CH3

pKa 3.75

-I
CH3CH2CH2 COOH CH2CH2CH2 COOH Cl CH3 CH CH2 Cl COOH

pKa 4.8 4.5 4.0 2.9

rastojanje

COOH 4.75 COOH 4.87 COOH 4.81

CH3CH2

CH COOH Cl

CH3 C COOH CH3

5.02

veliina radikala

UTICAJ MEZOMERNOG EFEKTA NA pKa

-grupe koje ispoljavaju negativni mezomerni efekat smanjuju pKa vrednosti kiselina i baza, tj. poveavaju jainu kiselina i smanjuju jainu baza Grupe koje ispoljavaju () mezomernim efekat:
NO2, CN, COR, SO2R
OH

pKa = 9.80 na 25C i 0.15M I

OH

pKa = 6.97 na 25C i 0.15M I

O
-

mezomerni efekat : dvostruke veze u konjugaciji sa jonizujuim centrom

14

PRIMENA pKa VREDNOSTI

predvianje APSORPCIJE, DISTRIBUCIJE i ELIMINACIJE lekova REGULISANJE reapsorpcije ili izluivanja leka iz organizma podeavanje pH urina (5.7 5.8), npr. oralnim dozama NH4Cl ili NaHCO3) da bi se: -postigla reapsorpcija nejonizovane molekule za terapeutske svrhe -olakalo izluivanje jonizovanog oblika molekula u sluajevima intoksikacije (slabe kiseline mogu da se izlue u alkalnom urinu, slabe baze mogu da se eliminiu u kiselom urinu) maksimiziranje proizvoda reakcije ili proizvoda sinteze

Literatura
Graham L. Patrick An Introduction to Medicinal Chemistry Oxford University Press, second edition, 2001. Donald Cairns Essentials of Pharmaceutical Chemistry Pharmaceutical Press, 2002.

Thomas L. Lemke Review of Organic Functional Groups, Introduction to Medicinal Organic Chemistry, Lippincott Williams & Wilkins, 2003.

Sirius Analytical Instruments Ltd. www.sirius-analytical.com

Gareth Thomas Medicinal Chemistry, An Introduction, John Wiley & Sons, Ltd, 2002.

15