INTRODUCCION

Enzymes are catalysts very potent and effective, chemically are proteins as
catalysts, the enzymes Act in small amount and recover indefinitely. They do not
carry out reactions that are energetically unfavourable, they do not alter the sense
of the chemical balances, and they accelerate their achievement. You can also say
are catalysts of protein nature which govern the speed at which are physiological
processes, produced by living organisms. As a result, deficiencies in the enzymatic
function cause pathologies.
The enzymes in biological systems constitute the bases of complex and varied
reactions that characterize the vital phenomena. Fixation of solar energy and the
synthesis of alimentary substances carried out by plants depend on the enzyme
present in plants. Animals, in turn, are equipped with the enzymes that allow them
to take advantage of food energy or structural purposes; the functions of internal
metabolism and life of relationship, such as locomotion, excitability, irritability, cell
division, reproduction, etc. They are governed by the activity of numerous enzymes
responsible for the reactions are carried out in conditions favourable to the
individual, without sudden releases of energy at temperature fixed on a medium of
pH, salt concentration, etc.; virtually constant.

OBJECTIVES

Define is an enzyme and these act in reactions within the cell.

Identify the different factors that affect enzyme activity.
differentiate between inhibition competitive and non-competitive
Learn about the different types of enzymes and the characteristics of each
one.

PROPIEDADES GENERALES
Una enzima es una protena que acta como catalizador biolgico, llevando a
cabo reacciones bioqumicas a muy altas velocidades, no se consume durante la
reaccin y en general presenta un elevado grado de especificidad. Las enzimas
as como cualquier otra estructura presentan propiedades generales que las
logran caracterizar en su totalidad.
1) Son los catalizadores de las reacciones qumicas de los sistemas
biolgicos.
Los catalizadores son sustancias que modulan o influyen en la velocidad de las
reacciones sin alterar su punto de equilibrio. Los nicos catalizadores del mundo
son las enzimas, estas aceleran las reacciones qumicas de los sistemas
biolgicos, participan en una reaccin y experimentan cambios fsicos durante ella,
pero regresan a su estado original cuando la reaccin termina. Las enzimas hacen
posible la vida en la tierra; en ausencia de estas, la mayora de las
transformaciones qumicas requeridas para mantener activas las clulas tardaran
mucho tiempo en efectuarse o simplemente no procederan.
2) Las enzimas aceleran las reacciones qumicas de los sistemas biolgicos.
Las molculas en enzimas son catalizadores extraordinarios, muy eficientes para
acelerar la transformacin de sustratos en productos finales. Una sola molcula de
enzima puede efectuar el cambio de 10 000 a 1 milln de molculas de sustrato
por minuto.
3) No cambian la constante de equilibrio de las reacciones que catalizan.
La concentracin de la enzima no tiene efecto sobre la constante de equilibrio.
Dicho de otra manera, puesto que las enzimas afectan a las velocidades y no a las
constantes de velocidad, ellas no pueden afectar a Keq (constante de equilibrio),
que es una relacin de constantes de velocidad. De aqu que la Keq de una
reaccin sea la misma independientemente de que se alcance el equilibrio con
catlisis enzimtica o sin ella.
4) Poseen un elevado grado de especificidad de sustrato
La gran mayora de las enzimas tiene la capacidad de catalizar reacciones ms o
menos especficas; es decir, su intervalo de accin se limita a un determinado tipo
de compuesto que debe reunir ciertas caractersticas para que pueda ser utilizado
como sustrato. En concreto esto significa que las clulas generalmente producen
diferentes enzimas para cada compuesto que metabolizan. Adems, cada enzima
interviene en un solo paso o cambio del sustrato.

5) La mayora de las enzimas son protenas.

Todas las enzimas se presentan como protenas, tienen una estructura
tridimensional globular, estn formadas generalmente por una sola cadena
polipeptdica, y slo logran ser activas cuando los polmeros desarrollan una
conformacin que permite establecer su centro activo. La mayora de las enzimas
estn constituidas por ms de 100 aminocidos, los cuales confieren a la molcula
una masa mayor de 10kDa y un dimetro de 25.
6) No se consumen ni se alteran durante el proceso qumico que estn
catalizando, pudiendo actuar una y otra vez.
Las enzimas no se consumen ni se alteran durante la reaccin, por lo que pueden
actuar en pequeas cantidades ya que una misma enzima puede catalizar varias
reacciones.
7) Aceleran la velocidad de la reaccin al disminuir la energa de activacin.
Las enzimas son molculas que estn para disminuir la energa de activacin solo
de las reacciones necesarias para la supervivencia celular.

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL TRABAJO ENZIMTICO

Debido a su naturaleza qumica, a las enzimas les afectan los mismos factores
que alteran a las protenas; por esta razn, cada una de ellas requiere de ciertas
condiciones para trabajar ptimamente como la temperatura, el pH, la fuerza
inica, etctera. Otros factores que influyen en el trabajo enzimtico son:
concentracin de la enzima y concentracin del sustrato.

1. Efecto de la temperatura.
Como sucede en la mayora de las reacciones qumicas, la velocidad de las
enzimas aumenta con la temperatura, debido al incremento en la energa cintica
de las molculas reactantes (en general, por cada 10C de incremento, duplica e
incluso triplica la velocidad de reaccin), pero esto ocurre slo en el intervalo de
temperatura en el que la enzima es estable y retiene su capacidad cataltica; en
casos extremos, cuando se incremente mucho la temperatura, se favorece la
desnaturalizacin y consecuentemente esta protena pierde su capacidad
catalizadora. Por esta razn, cada enzima tiene un intervalo ptimo de
temperatura en el cual se logra la mayor actividad; la mayora tiene su temperatura
ptima entre 30oC y 40oC, y se inactiva a ms de 55oC. La desnaturalizacin
puede ser reversible o irreversible, por lo que la enzima en ciertas condiciones,
llega a recuperar su funcin despus de un tratamiento trmico.
Habitualmente cuando el efecto de la temperatura no es muy intenso, se puede
regenerar nuevamente su actividad al adquirir otra vez su estructura tridimensional
de origen. Pero, a medida que esta es mayor, se favorece la inactivacin
irreversible y el sitio activo se pierde sin tener la oportunidad de regenerarse al
enfriarse el sistema.
Habitualmente la desnaturalizacin a alta temperatura es irreversible, debido a que
se rompen las fuerzas dbiles de enlace al aumentar la vibracin trmica de los
tomos componentes, fenmeno que daa la estructura tridimensional.
Temperaturas extremadamente bajas, detienen la actividad enzimtica pero no las
destruyen. Muchas enzimas se pueden conservar metindolas a 0C o
temperaturas ms bajas, logrando recuperar su actividad despus de
descongelarse, segn la intensidad y la forma en la que se efectu el
congelamiento.
Para casi todas las enzimas, las temperaturas ptimas son iguales o mayores a
las de las clulas en las que se encuentra.

2. Efecto del pH.

La actividad de las enzimas depende mucho de la concentracin de iones de
hidrgeno del medio, ya que esto afecta el grado de ionizacin de los aminocidos
del sitio activo, del sustrato, o del complejo enzima-sustrato; todo eso llega a influir
en la afinidad que tenga la enzima por el sustrato.
Las enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2;
tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos. Segn el pH
del medio, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra.
Como la conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas
elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser las ms adecuada para la
actividad cataltica.
En los casos en el que los sustratos son no ionizables (la mayora de los hidratos
de carbono y lpidos), los grupos inicos de las enzimas son los nicos afectados
por el pH.
Por esta razn, todas las enzimas presentan una mxima actividad cataltica a un
cierto valor ptimo de pH, en un intervalo de 5 a 8 (El pH ptimo de la mayora de
los enzimas es prximo a 7), aun cuando existen excepciones muy importantes,
como enel caso de la pepsina del estmago, que tiene un pH ptimo de 1.8, u
otros como la tripsina tienen un pH ptimo algo alcalino (pH ptimo = 7,8).
La mayora de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones
de pocas dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar
drsticamente su actividad. As, la pepsina gstrica tiene un pH ptimo de 2, la
ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la izquierda).
Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalizacin de la protena,

los seres vivos han desarrollado sistemas ms o menos complejos para mantener
estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiolgicos.

Las enzimas adems pueden experimentar cambios de conformacin con las

variaciones del pH. Podra ser necesario un grupo cargado distal a la regin del
sustrato donde se ha fijado, para conservar una estructura activa terciaria o
cuaternaria. Conforme cambia la carga en este grupo, la protena puede
desenrollarse, volverse ms compacta o disociarse en protmeros, todo lo cual
conduce a la perdida de la actividad. Dependiendo de la gravedad de estos
cambios, la actividad puede ser restablecida o no cuando la enzima regresa a su
pH ptimo.

3. Concentracin del sustrato

A mayor concentracin del sustrato, a una concentracin fija de la enzima se
obtiene la velocidad mxima. Despus de que se alcanza esta velocidad, un
aumento en la concentracin del sustrato no tiene efecto en la velocidad de la
reaccin. Algunas enzimas permanecen libres en concentraciones bajas de
sustrato y no se alcanza la mxima velocidad. Cuando el sustrato se encuentra en
exceso, toda la enzima se transforma en ES y la reaccin se realiza a su mxima
velocidad.
4. Concentracin de la enzima
Siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentracin de la
enzima aumenta la velocidad enzimtica hacia cierto lmite.
5. Efectos de otros agentes
Las enzimas se ven afectadas tambin por otros factores como son la actividad de
agua, pues la mayora de los biopolmeros requieren de agua para desarrollar su
conformacin estable con caractersticas de agentes biolgicamente activo; sin
embargo, algunas enzimas llegan a actuar con un mnimo de agua, como ocurre
con las lipasas que contienen los aceites puros. En este caso la amplia
disponibilidad del sustrato hace que las reacciones se logren aun en condiciones
de sequedad.
Por otra parte, los metales pesados, como mercurio, plata y plomo, inhiben la
accin enzimtica, mientras que el calcio, el magnesio, el sodio, el potasio, el
manganeso, el hierro y el zinc, actan como agentes activadores de muchas otras.
Estos activadores se denominan Cofactores. Este efecto activador se debe
probablemente a que forman parte del sitio activo, que se requieren para la
creacin del complejo enzima-sustrato, o que ayudan a mantener la conformacin
tridimensional. Casi un tercio de los enzimas conocidos requieren cofactores.
Cuando el cofactor es una molcula orgnica se llama coenzima.
COFACTORES ENZIMTICOS
Existen enzimas que son protenas simples y otras que requieren para su funcin
la presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catlisis: los
cofactores. Los Cofactores son sustancias que se combinan con el enzima
potenciando su accin cataltica.
Minerales y su funcin como cofactores
Estos cofactores suelen ser iones metlicos como hierro (Fe++), cobre (Cu+
+),magnesio (Mg++), manganeso (Mn++) y zinc (Zn++), a estos cofactores se los
conoce como coenzimas inorgnicas.

De estos cofactores enzimticos podemos resaltar los de mayor importancia:

a. Magnesio

Cofactor de enzimas que transfieren grupos fosfatos desde el ATP.

Cofactor de la enzima acetilcolinesterasa.

b. Cobre

Cofactor de enzimas Cu-dependientes que intervienen en la formacin de:

hemoglobina, colgeno, lecitina, mielina.

c. Zinc

Cofactor de metalo-enzimas (anhidrasa carbnica, fosfatasa alcalina,

carboxipeptidasa, ARN polimerasa, ADN polimerasa, etc.).

d. Hierro

Constitucin como cofactor de enzimas oxidasas (peroxidasa, catalasas,

citocromo C, etc.)

e. Manganeso

Cofactor de enzimas como la arginasa y la ribonucleotidoreductasa

Cuando el cofactor es una molcula de naturaleza orgnica se le llama coenzima.

NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN
Desde sus inicios la nomenclatura enzimtica ha sido poco sistemtica, y carece
de los lineamientos necesarios para darles nombres adecuados. Existen muchas
enzimas cuyos nombres no ofrecen ninguna informacin sobre su actividad o sus
propiedades, como es el caso de la tripsina, la quimotripsina, la pepsina y algunas
otras. Unas se han designado con el nombre del descubridor, otras, como la
papana, de acuerdo con su procedencia (papaya), y en otros casos, como la
lactasa, segn el sustrato que utilizan, que en este caso es la lactosa.
Debido a esta falta de homogeneidad en la nomenclatura, se integr la Comisin
de enzimas de la Unin Internacional de Bioqumica (UIB), que desarroll un
mtodo que identifica cada una con cuatro dgitos separados por puntos
encabezado por las letras EC (enzyme commission), que caracteriza al tipo de
reaccin segn la clase (primer dgito), subclase (segundo dgito), sub-subclase
(tercer dgito), y un cuarto dgito que es para la enzima especfica.

El primer dgito de la nomenclatura, representa el grupo al que pertenecen:

1) Oxido-reductasas
Catalizan reacciones de oxido-reduccin, es decir, transferencia de hidrgeno (H)
o electrones (e-) de un sustrato a otro. Entre estos tenemos la succinato
deshidrogenasa o la citocromo c oxidasa

2) Transferasas:

Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del hidrgeno) de un

sustrato a otro. Por ejemplo la glucoquinasa, que cataliza la reaccin de
transferencia de un grupo fosfrico del ATP al carbono 6 de la glucosa para formar
glucosa-6-fosfato y ADP.

3) Hidrolasas:
Llevan a cabo la ruptura de enlaces qumicos con la introduccin de una molcula
de agua. Un ejemplo es la lactasa, que cataliza la reaccin de rompimiento de la
molcula de lactosa mediante la adicin de una molcula de agua, para formar
glucosa y galactosa.

4) Liasas:
Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos sin la participacin del
agua. Un ejemplo es la acetacetato descarboxilasa, que cataliza la reaccin:

5) Isomerasas:
Catalizan las isomerizaciones de distintos compuestos. Entre ellas tenemos la
fosfotriosaisomerasa y la fosfoglucosaisomerasa, que catalizan las reacciones
representadas en la tabla inferior:

MECANISMOS DE REACCIN
Por las notables propiedades catalticas de las enzimas y el papel que juegan en
el proceso de la vida, muchos investigadores han dado preferencia a investigar
sus mecanismos de reaccin.
La activacin de la molcula de sustrato se produce debido a la gran afinidad
qumica (electrnica) del sustrato por ciertas reas de la superficie de la enzima,
sitios activos. Este sitio activo corresponde a una depresin o hendidura
relativamente pequea que posee la geometra y distribucin de cargas (positivas
y negativas) para unirse especficamente y en forma complementaria a un
determinado sustrato.
El sustrato se une al sitio activo de la enzima por medio interacciones hidrofbicas
y electrostticas, puentes de hidrgeno y fuerzas de van der Waals. Los residuos
de aminocidos de la enzima que participan en la interaccin con el sustrato, se
encuentran alejados unos de otros en la secuencia lineal de aminocidos de la
protena: pero como resultado del plegamiento de sta, se agrupan para formar el
sitio activo de la enzima. Algunos de estos residuos participan solamente en la
unin de sustrato y definen una regin del sitio activo que se llama sitio de fijacin
o de unin del sustrato. Otros residuos del sitio activo, los catalticos, se encargan
directamente de la transformacin del sustrato en producto y forman el sitio

cataltico. Normalmente el nmero de residuos que intervienen en la unin del

sustrato es mayor que el de los residuos catalticos. Este sitio activo es el lugar
donde a travs del reconocimiento molecular ocurren reacciones de ruptura y
formacin de enlaces, formndose as un complejo enzima-sustrato en el que las
molculas de las sustancias reactantes (sustratos) quedan muy prximas entre si,
condicin indispensable para que se lleve a cabo la reaccin qumica de ellas. Se
produce una deformacin o distorsin en alguna unin de la molcula de sustrato,
se hace lbil y sufre un cambio por la enzima en particular. Las molculas
alteradas pierden su afinidad por los sitios activos y por ello son puestas en
libertad. Entonces las enzimas quedan libres e intactas para combinarse con ms
sustrato y la biosntesis de nuevos productos iguales a los anteriores.
Se debe agregar que la activacin hace que caiga o disminuya la barrera
energtica que el sustrato debe vencer antes de que se transforme en producto.
As, una reaccin catalizada por enzimas necesita baja energa de activacin para
que pueda efectuarse.

Este anlisis se aplica a los sustratos que han sido degradados o tambin se han
utilizado en la biosntesis. Aunque se puede aplicar el mismo tipo de explicacin
para describir la sntesis, o la construccin de compuestos complejos, a partir de
otros simples. En esta forma, dos molculas diferentes de sustrato se pueden
pegar a los sitios adyacentes en la superficie de la enzima. Una sola activacin del
sustrato por la enzima permite el establecimiento de una unin entre las dos
molculas, de tal modo que se crea un compuesto nuevo a partir de los dos
sustratos originales. Este producto tiene poca afinidad por el sitio activo y se
desprende. En realidad el sitio activo y se desprende.

En realidad, el sitio activo de la superficie de una enzima es un rea muy pequea,

lo que significa que las grandes porciones de la protena no contribuyen a la
especificidad enzimtica o a la accin de las enzimas. Por eso, solo relativamente
pocos residuos de aminocidos estn implicados directamente en el proceso
cataltico quizs menos de cinco! Se debe sealar tambin que el ajuste entre
una parte de la superficie de la enzima y el sustrato no se encuentra esttico, sino
que es una interaccin dinmica en la que el sustrato induce a cambios
estructurales a la molcula de la enzima, como la mano cambia de aspecto dentro
de un guante.
INHIBICIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
La actividad de una enzima se puede inhibir de diferentes maneras con agentes
qumicos. Si a un sistema enzimtico se aaden sustancias que impidan la
realizacin de la actividad propia de la enzima, se dice que el sistema ha sido
inhibido, y la sustancia usada con estos fines se denomina inhibidor.
De acuerdo con esto, es posible clasificar los fenmenos de inhibicin enzimtica
en diversos grupos: inhibicin reversible e inhibicin irreversible.
Inhibicin reversible
En la inhibicin reversible las regiones funcionales de la molcula de la enzima no
cambian y la enzima y el inhibidor se equilibran rpidamente. La inhibicin
reversible puede ser efectuada por alguno de los tres tipos generales de
inhibidores: competitivo, no competitivo o mixto.
Inhibicin competitiva:
En este caso el inhibidor no permite la formacin del complejo enzima sustrato
normal, ya que el inhibidor es una molcula que tiene una similitud estructural con
el sustrato, por lo que compite con el sustrato por el mismo sitio activo de la
enzima, formndose un complejo enzima-inhibidor. Una vez que el inhibidor ocupa
el lugar en el sitio activo de la enzima, el complejo enzima inhibidor, no se
separa, en vista de que la enzima es especfica para su sustrato, por lo que no
tiene accin sobre el inhibidor y, por lo tanto, queda bloqueada la parte activa de la
enzima. El sustrato no puede entrar al lugar activo, que est ocupado por el
inhibidor y, de esta manera, se impide la accin enzimtica.

Al aadir el inhibidor, la actividad enzimtica disminuye sin embargo, si se aaden

cantidades mayores del sustrato natural de la enzima nuevamente empieza a
aparecer actividad enzimtica, y cuando las cantidades de sustrato natural
aadido sobrepasan considerablemente a las presentes del inhibidor, la actividad
enzimtica se restablece por completo.

Inhibicin no competitiva:
El inhibidor y el substrato se pueden unir en forma simultnea a la molcula de la
enzima, lo que significa que los dos deben ocupar sitios de unin diferentes sobre
la superficie enzimtica. Un inhibidor no competitivo disminuye el nmero de
recambio de una enzima, en tanto que un inhibidor competitivo reduce la
proporcin de las molculas de la enzima que han unido el sustrato. La inhibicin
no competitiva es una forma de inhibicin donde la unin del inhibidor con la
enzima reduce su actividad pero no afecta la unin con el sustrato. Como
resultado, el grado de inhibicin depende solamente de la concentracin de
inhibidor, por lo que no se puede revertir mediante el incremento de la
concentracin del sustrato. El inhibidor no competitivo solo se une al complejo ES.
Un inhibidor competitivo aumenta el valor de Km pero no se altera el de Vmax. Por
otra parte, un inhibidor no competitivo reduce Vmax, pero no tiene efecto sobre
Km. De este modo puede predecirse que la inhibicin competitiva se puede
superar en una concentracin de substrato lo suficientemente alta, mientras que la
inhibicin no competitiva no puede ser invertida al incrementar la concentracin
del
substrato.

Inhibidor mixto:
Al igual que la inhibicin no competitiva, el inhibidor tambin se fija a un sitio
distinto al del sustrato, pero se fija tanto a la enzima como al complejo enzimasustrato (ES).

Inhibicin irreversible
Los inhibidores reversibles son los que se combinan con o destruyen un grupo de
la enzima que es esencial para su actividad, o aquellos que forman una asociacin
covalente muy estable entre el inhibidor y la enzima.
En la inhibicin irreversible, ocurren modificaciones en los grupos funcionales de la
molcula de la enzima. Adems, el inhibidor est unido tan estrechamente a la
enzima que las dos molculas se disocian con mucha lentitud. Los inhibidores
irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no inactivan a
todas las protenas. No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino
alterando especficamente la estructura tridimensional del sitio activo
inhabilitndolo.
En
estas
circunstancias
la
actividad enzimtica se reduce
notablemente o incluso se pierde.
Varias sustancias txicas para el
sistema nervioso, incluyendo los
agentes
activos
de
varios
insecticidas,
actan
como
inhibidores irreversibles de la
actividad
enzimtica.
Incluso
despus de que se ha eliminado
el inhibidor, la actividad enzimtica no puede ser restaurada ya que ha habido una
modificacin sustancial o crucial de la molcula de la enzima.

CONCLUSION
The functions of enzymes, intertwine and fold one or more polypeptide chains,
which provide a small group of amino acids to form the active site, or place where
the substrate attaches, and where the reaction takes place. An enzyme and
substrate fail to adhere if its forms do not fit exactly. This fact ensures that the
enzyme is not involved in wrong reactions.
Among the factors that include the enzymatic reactions have: changes in pH,
changes in temperature, presence of cofactors, the concentrations of the substrate
and of the final products, activation, costs, availability is important to know what is
the temperature and enzymes it is lifting increases the speed of a reaction
catalysed by enzymes. At the beginning the reaction rate increases when the
temperature rises due to the increase in the kinetic energy of the reactant
molecules. This temperature prevails denaturation with abrupt loss of catalytic
activity. For both enzymes show an optimum temperature of action.
As well as it is also necessary to know the pH is the maximum intensity of the
activity of the enzyme, it occurs at the optimum pH, with rapid decrease in activity
on each side of this pH value. The optimal activity is usually observed between the
values of 5 and 9. The optimum pH of an enzyme can save with some electric
charge from the surface, or relationship with optimal conditions for fixation of the
enzyme to its substrate. The intracellular are responsible for cellular degradation.
In these processes, basic nutrients are obtained from giving them structural
materials of the cells when the contribution through the diet is interrupted and the
extracellular are those that are activated on the outside of the plasma membrane
or cell wall of cells, many of them comply catalytic metabolic processes aimed at
the degradation of the matter into chemical energy,

BIBLIOGRAPHY

Lehninger. Principios de Bioqumica , 4 ed. D.L. Nelson y M. M. Cox.

Ediciones Omega, S.A. 2006

Bioqumica. D. Voet y J.G. Voet, Ediciones Panamericana, 2006

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