Professional Documents
Culture Documents
VEGF
VEGF
Introduction
Angiogenesis, the formation and maintenance of blood vessel structures, is essential for the
physiological functions of tissues and is important for the progression of diseases such as
cancer and inflammation.1,2 In recent decades, a variety of signaling molecules, such as
VEGF-VEGFRs, ephrin-Eph receptors, angiopoietin-Tie, and the Delta-Notch system, have
been identified as playing important roles in angiogenesis. Among these, vascular endothelial
growth factors (VEGFs) and receptors (VEGFRs) regulate both vasculogenesis, the
development of blood vessels from precursor cells during early embryogenesis, and
angiogenesis, the formation of blood vessels from pre-existing vessels at a later stage 3 (Fig.
1). The VEGF family of genes contains at least 7 members, including the viral genome
derived VEGF-E, whereas the VEGFR family of genes has 3 to 4 members depending on the
vertebrate species.4,5 VEGF-A and its receptors VEGFR-1 and VEGFR-2 play major roles in
physiological as well as pathological angiogenesis, including tumor angiogenesis. VEGF-
C/D and their receptor VEGFR-3 can regulate angiogenesis at early embryogenesis but
mostly function as critical regulators of lymphangiogenesis. 6
Figure 1.
The VEGF and VEGFR system. VEGF-A and its receptors, VEGFR-1 and
VEGFR-2, play a major role in vasculogenesis and angiogenesis. In
addition, sFlt-1, a soluble form of VEGFR-1, is expressed in various cells
such as trophoblasts and negatively regulates ...
Go to:
VEGF, also known as VEGF-A, is a protein with vascular permeability activity that was
originally purified from a fluid secreted by a tumor.9 A few years later, a protein with
angiogenic activity was independently purified and named VEGF.10 Molecular cloning,
however, revealed that these 2 proteins were identical and encoded by a single gene. 3 The
VEGF family includes VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, PlGF (placental growth
factor), VEGF-E (Orf-VEGF), and Trimeresurus flavoviridis svVEGF. With the exception of
the latter 2 members, 5 genes of the VEGF family exist in mammalian genomes, including
humans. Essentially, all the VEGFs have 8 conserved cysteine residues at fixed positions,
which are very similar to the PDGF family such as M-CSF (CSF-1), SCF (stem cell factor),
and Flt3L (Flt3 ligand). Among the 8 cysteines, 6 residues form 3 S-S intramolecular bonds
and generate 3 loop structures.11 The remaining 2 cysteines form 2 S-S intermolecular bonds,
contributing to the stable homodimer structure of VEGF. We have shown that a structure
combined with loop 1 and loop 3 in VEGF-A and VEGF-E is essential for the binding and
activation of VEGFR-2.12
VEGF-A
Through alternative splicing, the VEGF-A protein contains subtypes, such as peptides of 121,
165, 189, and 206 amino acids in humans.3 Except for VEGF-A121, the other peptides have a basic
stretch near the carboxyl terminus. The basic stretch of VEGF-A165has a weak affinity for acidic
materials such as heparin/heparan sulfate and to neuropilin-1, a membrane protein involved in
neuronal cell regulation and a coreceptor for VEGF-A. The basic stretch of VEGF-A189 has a
strong binding affinity to heparin/heparan sulfate, and thus, most of the VEGF-A189 molecules
appear to be localized on the cell surface or in the extracellular matrix.
The VEGF-A gene is unique in terms of its haploid insufficiency: even if only a single copy of
the VEGF-A gene is deficient (heterozygotic VEGF-A gene knockout mice;VEGF-A+/ mice),
the mutant embryo dies at early embryogenesis (E10-E11) due to immature formation and
dysfunction of the circulatory system.3 This indicates that the local concentration of VEGF-A in
tissue is tightly regulated in embryogenesis, and half the level of the VEGF-A protein is
insufficient to complete the formation of the closed circulatory system in the body.
Among subtypes of VEGF-A, VEGF-A165 is most important both quantitatively and qualitatively.
Maes et al. reported that VEGF-A165 is essential and sufficient for angiogenesis because VEGF-
A164 transgenic mice in a VEGF-Anull genetic background are alive and essentially
healthy.13 More recently, another subtype of VEGF-A, VEGF-Axxxb, was reported in
humans.14 VEGF-Axxxb activates the receptor much more weakly than the normal VEGF-A,
suggesting that VEGF-Axxxb could be a physiological competitor against VEGF-A.
VEGF-A binds to and activates both VEGFR-1 and VEGFR-2, promoting angiogenesis, vascular
permeability, cell migration, and gene expression.5 In addition, Lee et al. showed that an
autocrine loop of VEGF-A and its receptor system exist within vascular endothelial cells,
contributing to endothelial functions.15
These molecules bind to and activate only VEGFR-1. As will be described later, VEGFR-1 has
the ability to bind tightly to its ligands but has a weak tyrosine kinase activity, generating signals
weaker than VEGFR-2. Both PlGF/ and VEGF-B/ mice are alive at birth with no significant
defects related to angiogenesis, suggesting that these genes are dispensable at embryogenesis.
However, under pathological conditions, synergism between PlGF and VEGF-A has been shown
to contribute to angiogenesis.16VEGF-B/ mice have the phenotype of an atrial conduction
defect.17 In addition, VEGF-B was recently reported to protect against the degeneration of
sensory neurons.18These results indicate that, although PlGF and VEGF-B are not essential at
embryogenesis, they have a variety of functions under pathological or stressed conditions.
These 2 members of the VEGF family are produced as premature forms and are cleaved by
proteases such as furin in both the amino- and carboxyl-terminal portions.19 After processing,
these molecules develop a higher affinity for VEGFR-3, which is expressed on lymphatic
endothelial cells and stimulates the receptor for lymphangiogenesis. In addition, these proteins
have a weak affinity for VEGFR-2, activating angiogenesis to some extent. VEGF-C is
expressed during embryogenesis, whereas VEGF-D is expressed after birth during adult stages.
This difference in gene expression is thought to be a major cause for lethality in VEGF-C/
mice but not in VEGF-D/ mice. VEGF-C/ mice show severe accumulation of fluid in tissues
due to poor development of lymph vessels.6
Taken together, these results strongly suggest that the PLC-PKC-MAPK pathway
initiated from the VEGFR-2 1175-PY site plays a pivotal role in pro-angiogenic
signaling from VEGFR-2. A spontaneous mutant of zebrafish carrying the lethal
circulatory system abnormality was shown to have a mutation in the
fish PLC1 gene, indicating that the PLC-PKC pathway is also important for
angiogenesis in fish.30 VEGFR-2 stimulates not only angiogenic signals but also
the secretion of various proteins such as the von Willebrand factor (vWF) from
endothelial cells. vWF secretion was recently reported to be dependent on 1175-PY
in VEGFR-2.31 In addition, Sase et al. indicated that the signaling from the 1175-
PY site on VEGFR-2 to PLC is essential for endothelial specification of VEGFR-
2positive vascular progenitor cells in embryonic stem (ES) cell culture.32 On the
other hand, the 951-PY on VEGFR-2 is important for cell migration signals.33
VEGFR-1 has a much weaker kinase activity than VEGFR-2, and the signaling
cascade is not fully understood. The 1169-Y on VEGFR-1 corresponding to 1175-
Y on VEGFR-2 is a PLC activation site from VEGFR-1. However, we found that
1169-PY is not a major autophosphorylation site on VEGFR-1. Consistent with this
finding, direct pro-angiogenic activity from VEGFR-1 is usually weak or
undetectable.34
The biological functions of VEGFR-1 have been the topic of several studies.
Fong et al. demonstrated that flt-1null mutant mice (flt-1/ mice) die at
approximately E8.5 due to an overgrowth of vascular endothelial cells and
disorganization of blood vessels.36 This suggests a negative regulatory role of
VEGFR-1 (Flt-1) in angiogenesis at early embryogenesis. To examine whether the
tyrosine kinase of VEGFR-1 is essential to the negative role of this receptor, we
generated a mutant mouse strain that lacks the tyrosine kinase (TK) domain of
VEGFR-1 (flt-1 TK/ mice). To our surprise, the mutant mice were essentially
healthy with an almost normal circulatory system, indicating that the negative role
of VEGFR-1 is independent of its tyrosine kinase activity but dependent on the
ligand-binding domain.37 This flt-1 TK/ mouse is useful for clarifying the role of
the VEGFR-1 signal and to see whether it is important for the progression of
diseases such as cancer. Using the mutant mice, we have found, along with others,
that flt-1 TK/ mice show a slower tumor growth, a lower level of metastasis
(particularly lung metastasis in the carcinogenesis model), and a milder
inflammation reaction in the rheumatoid arthritis model compared with those in
wild-type mice.38-41 Furthermore, we and others have found that the wild-type mice
carrying the flt-1 TK/ bone marrow show slower tumor growth similar to that in
the flt-1 TK/ mice.38,39 Using an antiVEGFR-1 neutralizing antibody, Kaplan et
al. indicated that VEGFR-1positive bone marrow precursor cells play a
significant role in the formation of a premetastatic niche, which promotes tumor
metastasis.42 These results indicate that VEGFR-1 signaling is important for the
progression of tumors in vivo mostly via bone marrowderived VEGFR-1positive
cells. In addition, Wu et al. reported that some human tumors, such as breast
carcinomas, express VEGFR-1 and utilize its signaling directly for tumor growth.43
VEGFR-3 has a typical tyrosine kinase like other VEGFRs, and upon stimulation
with VEGF-C, the PKC pathway and Ras pathway were reported to be activated
for lymphangiogenesis. However, it remains to be clarified which
autophosphorylation site(s) on the tyrosine residues in VEGFR-3 is responsible for
these pathways and is critical for lymphangiogenesis.
In addition to these medicines, others that target the VEGF-VEGFR system, including
VEGF-Trap (a fusion protein of VEGFR-1 and VEGFR-2 ligand-binding domains), anti
VEGFR-1 or antiVEGFR- 2 neutralizing antibody, soluble VEGFR-3, VEGFR-1 or
VEGFR-2 peptide vaccine therapy,52 and anti-PlGF antibody,53,54 have been developed and are
undergoing preclinical and clinical trials.
Go to:
2.5. The Molecular Basis of Anti-Angiogenic Therapy
In 1993, Kim et al. demonstrated that antihuman VEGF-A neutralizing antibody efficiently
suppressed human tumor growth in immune-deficient mice. 55 In this case, the antibody only
suppressed tumor-derived human VEGF-A, but not the host-derived mouse VEGF-A, which
is secreted from mouse bone marrowderived cells as well as tumor-associated fibroblasts.
Furthermore, tumor growth was suppressed by the antibody treatment alone, without
combination with chemotherapy. This indicates that the major effect of the antiVEGF-A
antibody was to block the formation of blood vessels in tumor tissues as well as to suppress
pre-existing tumor vasculature by inducing apoptotic death of endothelial cells by blocking
tumor-derived VEGF-A.
However, in clinical trials, treatment of cancer patients with an antiVEGF-A antibody alone
did not produce significant suppression of tumor growth, except for renal cancer. In contrast
to murine tumor transplantation models, the growth rate of tumors in patients is usually
slower, and tumor angiogenesis may develop more slowly compared with the murine tumor
models. In clinics, the vasculature in tumors might be more stable than that in the murine
system and less sensitive to VEGF-A blockade alone.
Another hypothesis regarding the efficacy of the anti-VEGF antibody and anti-VEGFR
tyrosine kinase inhibitor on tumor growth in patients is termed vascular normalization,
whereby the absorption of VEGF-A induces a transiently normalized vascular structure, more
stabilized and well covered with pericytes with lower vascular permeability.56 These
conditions may result in a lower tissue pressure within tumors, having a better diffusion of
anticancer drugs. It is probable that both vascular normalization and suppression of new
tumor angiogenesis can occur in parallel within the tumors in patients treated with anti
VEGF-VEGFR drugs (Fig. 3).
Figure 3.
Many experimental models could be introduced and studied to understand this resistance.
Casanovas et al. reported that gene expression of angiogenic factors such as FGF other than
VEGF is a cause of resistance against anti-VEGF therapy in mice. 58 We hypothesized that,
under a long-term anti-angiogenic therapy, tumor cells may receive at least 2 stresses,
hypoxia and low nutrition conditions. We developed a simple in vitromodel system in which
tumor cells were cultured under these double stresses (double deprivation stress [DDS]).
After approximately 10 cycles of DDS culture, tumor cells showed up-regulation of
phospho-Akt, a higher survival rate, and increased invasiveness. 59 Thus, DDS under anti-
angiogenic therapy might induce, to some extent, a malignant phenotype of tumors. A
strategy should be developed to overcome this possible malignant phenotype after anti-
angiogenic therapy.
1. Pengantar
Angiogenesis, pembentukan dan pemeliharaan struktur pembuluh darah, sangat penting untuk
fungsi fisiologis jaringan dan penting bagi perkembangan penyakit seperti kanker dan
peradangan. 1 , 2 Dalam beberapa dekade terakhir, berbagai molekul sinyal, seperti VEGF-
VEGFRs, reseptor ephrin-Ef, angiopoietin-Tie, dan sistem Delta-Notch, telah diidentifikasi
sebagai memainkan peran penting dalam angiogenesis. Di antaranya, vaskular faktor endotel
pertumbuhan (VEGFs) dan reseptor (VEGFRs) mengatur kedua vasculogenesis, pengembangan
pembuluh darah dari sel prekursor selama embriogenesis awal, dan angiogenesis, pembentukan
pembuluh darah dari pembuluh yang sudah ada pada tahap berikutnya 3 ( Gambar. 1 ). Keluarga
VEGF gen mengandung setidaknya 7 anggota, termasuk virus genom diturunkan VEGF-E,
sedangkan keluarga VEGFR gen memiliki 3 sampai 4 anggota tergantung pada spesies
vertebrata. 4 , 5 VEGF-A dan reseptornya VEGFR-1 dan VEGFR-2 bermain peran utama dalam
fisiologis serta angiogenesis patologis, termasuk angiogenesis tumor. VEGF-C / D dan reseptor
mereka VEGFR-3 dapat mengatur angiogenesis pada embriogenesis awal tetapi kebanyakan
berfungsi sebagai regulator penting dari lymphangiogenesis. 6
2.7.
2.8. Gambar 1.
2.9. The VEGF dan VEGFR sistem. VEGF-A dan reseptor yang,
VEGFR-1 dan VEGFR-2, memainkan peran utama dalam
vasculogenesis dan angiogenesis. Selain itu, sFlt-1, bentuk
larut VEGFR-1, dinyatakan dalam berbagai sel seperti trofoblas
dan negatif mengatur ...
Di sisi lain, VEGFs memiliki potensi pro-angiogenik untuk pemeliharaan dari berbagai jaringan
di tingkat fisiologis dan untuk pembentukan pembuluh darah baru untuk mengatasi penyakit
iskemik. Utilitas dari anggota keluarga VEGF dalam pengobatan pro-angiogenik, bersama-sama
dengan efek samping yang mungkin, harus ditandai secara lebih rinci untuk aplikasi klinis.
VEGF, juga dikenal sebagai VEGF-A, merupakan protein dengan aktivitas permeabilitas
vaskuler yang awalnya dimurnikan dari cairan yang dikeluarkan oleh tumor. 9 Beberapa tahun
kemudian, protein dengan aktivitas angiogenik adalah independen dimurnikan dan bernama
VEGF. 10 kloning Molekuler, Namun, mengungkapkan bahwa 2 protein yang identik dan
dikodekan oleh gen tunggal. 3 Keluarga VEGF meliputi VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D,
PlGF (faktor pertumbuhan plasenta), VEGF-E (Orf- VEGF), dan Trimeresurus
flavoviridis svVEGF. Dengan pengecualian dari yang terakhir 2 anggota, 5 gen dari keluarga
VEGF ada di genom mamalia, termasuk manusia. Pada dasarnya, semua VEGFs memiliki 8
residu sistein dilestarikan di posisi tetap, yang sangat mirip dengan keluarga PDGF seperti M-
CSF (CSF-1), SCF (faktor sel batang), dan Flt3L (Flt3 ligan). Di antara 8 sistein, 6 residu
membentuk 3 ikatan intramolekul SS dan menghasilkan struktur 3 lingkaran. 11Sisa 2 sistein
membentuk ikatan antarmolekul 2 SS, berkontribusi terhadap struktur homodimer stabil
VEGF. Kami telah menunjukkan bahwa struktur dikombinasikan dengan lingkaran 1 dan loop 3
di VEGF-A dan VEGF-E sangat penting untuk aktivasi mengikat dan VEGFR-2. 12
2.11. VEGF-A
A 121, peptida lain memiliki hamparan dasar dekat ujung karboksil. Peregangan
dasar VEGF-A memiliki afinitas yang lemah untuk bahan asam seperti heparin /
165
heparan sulfat dan-neuropilin 1, protein membran yang terlibat dalam regulasi sel
saraf dan coreceptor untuk VEGF-A. Peregangan dasar VEGF-A memiliki
189
afinitas ikatan yang kuat untuk heparin / heparan sulfat, dan dengan demikian,
sebagian besar VEGF-A molekul tampaknya lokal pada permukaan sel atau
189
2.13. The VEGF-A gen unik dalam hal insufisiensi haploid yang: bahkan jika
hanya satu salinan dari VEGF-A gen kekurangan (tikus knockout
heterozygotic VEGF-A gen; VEGF-A +/- tikus), embrio mutan mati di
embriogenesis awal (E10-E11) karena pembentukan matang dan disfungsi dari
sistem peredaran darah. Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi lokal VEGF-A
3
dalam jaringan diatur ketat dalam embriogenesis, dan setengah tingkat VEGF-A
protein tidak cukup untuk menyelesaikan pembentukan sistem peredaran darah
tertutup dalam tubuh.
2.14. Di antara subtipe VEGF-A, VEGF-A adalah yang paling penting baik
165
secara kuantitatif dan kualitatif. Maes et al.melaporkan bahwa VEGF-A adalah 165
penting dan cukup untuk angiogenesis karena VEGF-A tikus transgenik di-A
164
VEGFlatar belakang -null genetik yang hidup dan pada dasarnya sehat. Baru- 13
baru ini, subtipe lain VEGF-A, VEGF-A xxxb,dilaporkan pada manusia. VEGF-
14
reseptor yang ada dalam sel endotel vaskular, berkontribusi terhadap fungsi
endotel. 15
-. tikus memiliki fenotip cacat konduksi atrium Selain itu, VEGF-B baru-baru ini
17
2.19. Ini 2 anggota keluarga VEGF diproduksi sebagai bentuk dini dan dibelah
oleh protease seperti furin di kedua bagian amino dan karboksil-terminal. Setelah19
pengolahan, molekul ini mengembangkan afinitas yang lebih tinggi untuk VEGFR-
3, yang dinyatakan pada sel endotel limfatik dan merangsang reseptor untuk
lymphangiogenesis. Selain itu, protein ini memiliki afinitas yang lemah untuk
VEGFR-2, mengaktifkan angiogenesis sampai batas tertentu. VEGF-C dinyatakan
selama embriogenesis, sedangkan VEGF-D dinyatakan setelah lahir selama tahap
dewasa. Perbedaan dalam ekspresi gen diduga menjadi penyebab utama untuk
mematikan di VEGF-C - / - tikus tapi tidak dalam VEGF-D - / -. Tikus VEGF-C - / -
tikus menunjukkan akumulasi cairan yang parah pada jaringan karena miskin
pengembangan pembuluh getah bening. 6
2.20. VEGF-E, sebuah Protein Angiogenik Pengkodean dalam Pro-Angiogenik Orf Virus
Genome
2.21. The Orf virus, sebuah parapoxvirus menginfeksi domba, kambing, dan
kadang-kadang manusia, yang dikenal untuk menginduksi angiogenesis pada situs
infeksi pada kulit. Pada tahun 1994, Lyttle et al. menemukan bahwa gen dalam
genom virus mengkode protein jauh dengan VEGF / PDGF. Identitas asam amino
20
produk gen ini dalam strain NZ7 virus Orf menunjukkan terbatas (25%) tingkat
identitas manusia VEGF-A dan 19% untuk PDGF manusia. Homologi rendah ini
menunjukkan bahwa protein NZ7 diturunkan mengikat lemah untuk VEGFR dan /
atau PDGFR. Namun, mengejutkan kami, kami menemukan bahwa protein ini
(ditunjuk VEGF-E NZ7) erat mengikat dan mengaktifkan VEGFR-2, tetapi tidak
VEGFRs lainnya (VEGFR-1, VEGFR-3) atau PDGFR ( Gbr. 2 ). Oleh karena itu,
21
VEGF-E adalah unik dalam hal kekhususan untuk VEGFR-2. Tak satu pun dari
faktor angiogenik dikodekan dalam genom manusia telah dilaporkan menunjukkan
seperti VEGFR-2 spesifisitas. Produk Orf klon virus lainnya, seperti NZ2 dan strain
D1701, juga menunjukkan dasarnya kekhususan yang sama.
3. Struktur VEGFRs
Selain sel endotel vaskular, VEGFR-1 diekspresikan pada sel-sel garis makrofag
dan memfasilitasi migrasi sel-sel ini. Baru-baru ini, kami telah menunjukkan
bahwa RACK1 protein perancah yang terlibat dalam sinyal migrasi ini dan bahwa
jalur VEGFR-1-RACK1-PI3K Akt tampaknya penting untuk sinyal ini. 35
VEGFR-3 memiliki tirosin kinase khas seperti VEGFRs lainnya, dan setelah
stimulasi dengan VEGF-C, jalur PKC dan Ras jalur dilaporkan diaktifkan untuk
lymphangiogenesis. Namun, masih harus diklarifikasi situs yang autofosforilasi (s)
pada residu tirosin di VEGFR-3 bertanggung jawab untuk jalur ini dan sangat
penting untuk lymphangiogenesis.
Sistem VEGF-VEGFR adalah unik karena terdiri dari jumlah yang sangat terbatas molekul yang
memainkan peran sentral dalam angiogenesis. Ligan utama (VEGF-A) adalah produk gen
tunggal, dan menggunakan hanya 2 TKRs (VEGFR-1 dan VEGFR-2), meskipun-neuropilin 1
digunakan sebagai coreceptor a. Ligan lainnya, seperti PlGF, VEGF-C, dan VEGF-D, dan
reseptor VEGFR-3 tampaknya sebagian terlibat dalam angiogenesis patologis, seperti pembuluh
darah tumor. Di sisi lain, tumor metastatik ke kelenjar getah bening mengungkapkan tingkat
yang lebih tinggi dari VEGF-C / D, menunjukkan bahwa VEGF-C / D dan VEGFR-3 sistem
memainkan peran penting dalam getah bening migrasi sel tumor tergantung kapal ke kelenjar
getah bening. Sistem angiopoietin-Tie juga terlibat dalam angiogenesis patologis, tapi rincian
perannya dalam proses karsinogenesis tidak sepenuhnya dipahami.
Atas dasar hasil ini, obat anti-VEGF-VEGFR seperti anti-VEGF-A antibodi penetral dan tyrosine
kinase inhibitor telah dikembangkan, dan bevacizumab (anti-VEGF-A manusiawi antibodi
monoklonal) telah disetujui untuk pengobatan kolorektal , payudara, paru-paru (jenis non-sel
kecil), dan kanker ginjal serta untuk pasien glioblastoma. 3 , 51 inhibitor multikinase seperti
sorafenib dan sunitinib sekarang disetujui untuk pasien kanker ginjal dan hati.
Selain obat-obatan, yang lain yang menargetkan sistem VEGF-VEGFR, termasuk VEGF-
Perangkap (protein fusi VEGFR-1 dan VEGFR-2 ligan mengikat domain), anti-VEGFR-1 atau
anti-VEGFR- 2 penetral antibodi , larut VEGFR-3, VEGFR-1 atau VEGFR-2 peptida terapi
vaksin, 52 dan antibodi anti-PlGF, 53 , 54 telah dikembangkan dan sedang menjalani uji praklinis
dan klinis.
2.22. Pergi ke:
Pada tahun 1993, Kim et al. menunjukkan bahwa antihuman VEGF-A antibodi penetral efisien
menekan pertumbuhan tumor manusia pada tikus kekebalan kekurangan. 55 Dalam hal ini,
antibodi hanya ditekan tumor yang diturunkan manusia VEGF-A, tetapi tidak host yang
diturunkan tikus VEGF-A, yang disekresikan dari sumsum tulang tikus yang diturunkan sel serta
fibroblast tumor terkait. Selanjutnya, pertumbuhan tumor ditekan oleh pengobatan antibodi
sendiri, tanpa kombinasi dengan kemoterapi. Hal ini menunjukkan bahwa efek utama dari anti-
VEGF-A antibodi adalah untuk memblokir pembentukan pembuluh darah di jaringan tumor serta
untuk menekan pembuluh darah tumor yang sudah ada dengan menginduksi kematian apoptosis
sel endotel dengan menghalangi tumor yang diturunkan VEGF-A .
Namun, dalam uji klinis, pengobatan pasien kanker dengan anti-VEGF-A antibodi sendiri tidak
menghasilkan penekanan yang signifikan dari pertumbuhan tumor, kecuali untuk kanker
ginjal. Berbeda dengan model transplantasi tumor murine, tingkat pertumbuhan tumor pada
pasien biasanya lebih lambat, dan angiogenesis tumor dapat mengembangkan lebih lambat
dibandingkan dengan model tumor murine. Di klinik, pembuluh darah pada tumor mungkin lebih
stabil daripada yang dalam sistem murine dan kurang sensitif terhadap VEGF-A blokade saja.
Hipotesis lain tentang kemanjuran antibodi anti-VEGF dan anti-VEGFR tyrosine kinase inhibitor
pada pertumbuhan tumor pada pasien disebut "normalisasi pembuluh darah," dimana penyerapan
VEGF-A menginduksi struktur pembuluh darah secara sementara normal, lebih stabil dan baik
ditutupi dengan pericytes dengan permeabilitas pembuluh darah yang lebih rendah. 56Kondisi ini
dapat mengakibatkan tekanan jaringan yang lebih rendah dalam tumor, memiliki difusi yang
lebih baik dari obat antikanker. Besar kemungkinan bahwa kedua normalisasi pembuluh darah
dan penekanan angiogenesis tumor baru dapat terjadi secara paralel dalam tumor pada pasien
yang diobati dengan obat anti-VEGF-VEGFR ( Gbr. 3 ).
2.23.
2.24. Gambar 3.
Berbagai efek samping, seperti hipertensi, disfungsi ginjal, proteinuria, trombosis, perdarahan,
dan aritmia, telah dilaporkan pada pasien di bawah anti-VEGF-VEGFR terapi. 7 , 8 Di antaranya,
frekuensi hipertensi dan proteinuria lebih tinggi dari orang lain, menunjukkan hubungan
langsung dengan penyumbatan VEGF-A pada jaringan. Penurunan tingkat VEGF-A pada ginjal
bisa menyebabkan kerusakan sel endotel vaskular pada glomeruli, dan disfungsi seperti
mikrovaskulatur glomerular dapat menyebabkan proteinuria. Namun, dasar molekul hipertensi
bawah VEGF-VEGFR penyumbatan masih harus diklarifikasi.
Apakah sel-sel tumor memperoleh refractoriness atau resistensi terhadap terapi anti-angiogenik
setelah pengobatan jangka panjang adalah pertanyaan penting. Dalam uji klinis, khasiat terapi
anti-VEGF-VEGFR pada peningkatan waktu kelangsungan hidup tampaknya kadang-kadang
tidak konsisten. Waktu kelangsungan hidup tidak meningkat secara stabil selama pengobatan,
dan dalam beberapa uji coba setelah lama, khasiat muncul menurun, menunjukkan resistensi atau
refractoriness tumor terhadap pengobatan ini. Selain itu, dalam beberapa uji praklinis dan klinis,
glioblastoma menunjukkan invasif ditingkatkan setelah terapi anti-angiogenik 57 ( Gbr. 3 ).
Banyak model eksperimental bisa diperkenalkan dan dipelajari untuk memahami perlawanan
ini. Casanovas et al. melaporkan bahwa ekspresi gen faktor angiogenik seperti FGF selain VEGF
merupakan penyebab perlawanan terhadap anti-VEGF terapi pada tikus. 58 Kami berhipotesis
bahwa, di bawah terapi anti-angiogenik jangka panjang, sel tumor dapat menerima setidaknya 2
tegangan, hipoksia dan kondisi gizi rendah. Kami mengembangkan sederhana dalam sistem
model vitro di mana sel-sel tumor yang dibudidayakan di bawah ini tekanan ganda (stres kurang
ganda [DDS]). Setelah sekitar 10 siklus budaya DDS, sel tumor muncul regulasi phospho-Akt,
tingkat kelangsungan hidup yang lebih tinggi, dan meningkatkan invasi. 59 Dengan demikian,
DDS bawah terapi anti-angiogenik mungkin menyebabkan, sampai batas tertentu, fenotipe ganas
tumor. Strategi harus dikembangkan untuk mengatasi hal ini fenotipe ganas mungkin setelah
terapi anti-angiogenik.