IZRADA KRVNOG

RAZMAZA
 Pribor za bojanje po Pappenheimu

dvije predmetnice
tapi
kapaljka
otopina May-Grnwald
otopina Giemsa
destilirana voda
 - srednje veliku kap krvi
nanese se tapiem na
predmetnicu poloenu na
ravnu podlogu

- rub druge predmetnice

primakne se kapi krvi pod
kutem od 45

45
 - predmetnicu se lagano
prisloni uz kap krvi
(kapljica krvi se razlije uz
rub predmetnice)

- razvue se krv po predmetnici

ravnomjernim povlaenjem
gornje predmetnice u
suprotnom smjeru
 - razmaz krvi se oznai
(podaci o pacijentu)
- sui se na zraku najmanje
2 sata (najvie 24 sata)

http://www.youtube.com/watch?v=iA6ce-3sYgk
POSTUPAK BOJENJA:

- kapaljkom ili pipetom nanosi se na preparat originalne otopine boje May-

Grnwald da prekrije stakalce - ostaje na preparatu 3 MINUTE
- potom se nalije na preparat destilirane vode (da prekrije stakalce) i ostavi
na preparatu 1 MINUTU
- preparat se opere destiliranom vodom i ocijedi voda
POSTUPAK BOJENJA:
- nanese se oko 3 ml svjee razrijeene otopine Giemse (1 kap
originalne otopine Giemse na 1 ml destilirane vode) i ostavi
stajati 20-30 MINUTA

- po isteku vremena bojenja preparate se ispere destiliranom

vodom, ocijedi, s donje strane obrie i sui u kosom poloaju
HEMOGLOBIN
HEMOGLOBIN

- sinteza hemoglobina poinje u eritroblastima i

nastavlja se u normoblastima i retikulocitima
- protein globin, pigment hem

- labavo i reverzibilno vezanje kisika

DERIVATI:
- oksihemoglobin O2
- karbaminohemoglobin CO2
- karboksihemoglobin CO
- methemoglobin Fe trovalentno

mioglobin = miini hemoglobin za kratko pohranjivanje O2

 HEMOGLOBIN
KOLORIMETRIJSKA METODA

Princip reakcije:
Hemoglobin se oksidira kalij-fericijanidom u methemoglobin
koji s kalij-cijanidom stvara stabilan obojen kompleks
cijanmethemoglobin.

Kemikalije: cijanid reagens (otrovan - pipetirati samo

automatskom pipetom)
Radna otopina: Reagens otopiti u odgovarajuoj koliini
destilirane vode.
Uzorak za analizu: krv
 Uvjeti odreivanja:
Valna duljina: 540 nm
Staklena kiveta: 1 cm
Temperatura: 20-25 oC
Slijepa proba: radni reagens ili destilirana voda

Proba Standard
Radni reagens 5,0 ml -
Uzorak 0,02 ml -
Standard - 5,0 ml
Dobro se promijea. Nakon 5 minuta izmjeri se apsorbancija
probe (Ap) i standarda (As) prema slijepoj probi.

RAUN Ap
Hemoglobin g/L= x150
As
ODREIVANJE ERITROCITNIH KONSTANTI
-izraunavaju se kod svakog uzorka krvi nakon odreivanja vrijednosti
hemoglobina, broja eritrocita i vrijednosti hematokrita
- daju podatke o veliini eritrocita i udjelu hemoglobina u eritrocitima

MCV = mean corpuscular volume

= prosjean volumen (zapremnina) eritrocita

= volumen eritrocita (hematokrit) kojega ine eritrociti u litri krvi, podijeljen s
brojem eritrocita u litri krvi

hematokrit
MCV = (fL)
E 1012 / L

visok MCV deficit vitamina B6, B12, folne kis., nizak deficit eljeza
 MCH (mean corpuscular hemoglobin)
prosjena koliina hemoglobina po eritrocitu

= koliina hemoglobina iskazana u g/L podijeli s brojem eritrocita

u litri krvi

hemoglobin g L
MCH = (pg)
E 1012 / L

Visok MCH: anemija, bolesti jetre, hipotireoidizam, retikulocitoza

Nizak MCH: deficit bakra, deficit vitamina C i B6, eljeza, toksikoze
MCHC
Prosjena koncentracija hemoglobina u eritrocitima (MCHC =
mean corpuscular hemoglobin concentration) izraunava se
tako da se hemoglobin iskazan u gramima na litru, podijeli s
hematokritom u litri krvi.

hemoglobin ( g L)
MCHC =
hematokrit ( L / L)
(g/L)

- povien ili smanjen isto kao i kod MCV

Predmeci za decimalne jedinice
Deci d (10-1)
Centi c (10-2)
Mili m (10-3)
Mikro (10-6)
Nano n (10-9)
Piko p (10-12)
Femto f (10-15)
Ato a (10-18)
 Eritrocitne konstante u domaih ivotinja

MCV (fl) MCH (pg) MCHC (g/dl)

IVOTINJA
ANIMAL
Koko / Chicken 115-125 25-27 21-23

Pas / Dog 59-69 20-24 30-35

Maka / Cat 51-63 13-17 32-34

Svinja / Pig 58 19 33
opraena / at birth 64-96 21-31 32-34
1 tjedan / 1 week 71-78 22-25 30-33
3 tjedna / 3 weeks 61-75 20-23 29-33
4-6 tjedna /4-6 w. 53-66 16-20 28-35

Govedo / Cattle 52-58 19 32

Konj / Horse 42-52 18 34

Ovca / Sheep 35- 44 13 35

Koza / Goat 16-19 8 32