UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA

DISSERTAO DE MESTRADO

BIOSORO DE METAIS PESADOS PRESENTES EM GUAS

DE PRODUO DA INDSTRIA DE PETRLEO

Laerte de Medeiros Barros Jnior

NATAL-RN
SETEMBRO - 2001
BARROS JNIOR, Laerte de Medeiros Biosoro de metais pesados presentes em guas
de produo de campos de petrleo. Dissertao de Mestrado, UFRN, Programa de Ps-
Graduao em Engenharia Qumica, reas de Concentrao: Engenharia de Processos em
Plantas de Petrleo e Gs Natural, Natal/RN, Brasil.

Orientadora: Prof. Dra. Gorete Ribeiro de Macedo

Co-Orientadora: Prof. Dra. Mrcia Maria Lima Duarte

RESUMO:

Palavras chaves:
 ABSTRACT

Among the several effluents generated in the industry of petroleum, we find production
waters, complex mixtures of organic and inorganic materials suspended and dissolved.
Among these components there are heavy metals, whose concentration in these effluents can
exceed the limits allowed by environmental legislation in vigor, constituting a serious
environmental problem. There is a need to develop technologies that can remove toxic heavy
metal ions found in wastewaters. Uptake of heavy metal ions by fungal microorganisms is
used in a variety of industrial fermentation process that could serve as an economical and
constant supply source of biomass for the removal of metal ions. Therefore, a fungal biomass
can serve as an economical means for removal/ recovery of metal ions from aqueous solutions.
Experiments of heavy metal sorption using the fungus Aspergillus niger to remove metal
cadmium were carried out to investigate the factors influencing and optimizing the heavy
metal biosorption.. Through the batch isotherm study, the effect of the pH, time, amount of
biomass and heavy metal concentration in the rate of metallic biosorption was examined. The
experimental design was carried out to determine the optimum values of the studied variables.
A protocol for the regeneration of the biomass was also developed with the objective of
determining the capacity of the regenerated biomass in the biosorption of the metal in
solution. This research showed that with an adequate value of pH, time, amount of biomass
and heavy metal concentration the fungal biosorption had a potential to be used in the removal
of heavy metal ions from oil industry wastewaters.

Keywords: Apergillus niger, Biosorption, cadmium, experimental design

NDICE
LISTA DE FIGURAS
LISTA DE TABELAS
 NOMENCLATURA

A - pH
ARG Campo de Agulha
b constante do modelo de Langmuir (L/mg)
B concentrao inicial de cdmio (mg/L)
B stio adsortivo na fase slida
BC complexo stio adsortivo-on
BSW porcentagem volumtrica de gua e sedimentos em uma emulso gua/leo.
C quantidade de biomassa (g)
C concentrao do on na fase lquida (mg/L)
Ce concentrao de equilbrio (mg/L)
Ci - concentrao inicial do on metlico (mg/L)
Cf - concentrao final do on metlico (mg/L)
CAM Campo de Canto do Amaro.
CONAMA Conselho Nacional do Meio Ambiente
D tempo de contato entre as fases (minutos)
df graus de liberdade
E eficincia de biosoro (%)
EAA - espectrofotmetro de absoro atmica
EC estao coletora.
EPA Environmental Protection Agency (USEPA)
ET Campo de Estreito.
ETE estao de tratamento de efluentes.
ETO estao de tratamento de leo.
F parmetro estatstico
FEEMA Fundao Estadual de Engenharia do Meio Ambiente
FP Campo de Fazenda Pocinhos.
GMR Campo de Guamar.
K constante cintica de biosoro (min-1 )
K constante do modelo de Freundlich
Kads constante de equilbrio (mg/L)
m massa do biosorvente na mistura reacional (g)
mgEV miligramas endovenoso
ME mdia quadrtica
MS mdia quadrtica
[M]0 concentrao inicial do metal (mg/L)
n constante de equilbrio adimensional do modelo de freundlich
NIPDWR National nterim Primary Drinking Water Regulations
p parmetro estatstico
q massa de soluto adsorvida sobre a superfcie do biosorvente por unidade de massa do
biosorvente (mg/g)
qe capacidade de biosoro de equilbrio (mg/g)
qm capacidade mxima de soro correspondente a uma completa cobertura monocamada
(mg/g)
qt quantidade de cdmio biosorvida em um tempo t (mg/g)
R2 coeficiente de correlao
SAO separador gua/leo
SAB - sabouraud dextrose agar
SS soma quadrtica
t tempo (min)
UPGN unidade de processamento de gs natural.
V - volume da mistura reacional (L)
VMP valor mximo permissvel
Y varivel resposta
__________________________________
CAPTULO I
INTRODUO GERAL
__________________________________
I INTRODUO GERAL

O aumento da conscientizao dos efeitos nocivos provocados pela liberao de metais

txicos no meio ambiente aliado implantao de leis ambientais mais severas, tornou o
gerenciamento ambiental uma questo fundamental para as indstrias de petrleo e outras
indstrias. Este gerenciamento ambiental envolve vrios fatores relacionados ao processo, tais
como: tcnicas de produo, matrias-primas utilizadas, formas de tratamento dos efluentes,
fontes de energia e conservao das mesmas.

A defesa do meio ambiente comeou praticamente pelas guas residuais. At pouco

tempo, os resduos lquidos, gerados por processos industriais, eram lanados em rios e corpos
d gua sem muita preocupao com um tratamento adequado visando a reduo de sua carga
poluidora.

O acelerado desenvolvimento tecnolgico e industrial conduziu a comunidade cientfica

procura de novas tcnicas de preveno e controle da poluio, tentando oferecer, ou
recuperar, ao homem a possibilidade de uso de muitos recursos naturais. No Brasil, o dficit
de tratamento de efluentes e, conseqentemente, o impacto sobre o meio ambiente, a sade e a
qualidade de vida da populao, no deixa dvidas quanto a necessidade de pesquisar e
aplicar tcnicas de baixo custo na implantao e operao de tratamentos de resduos lquidos
e slidos.

Entre os diversos efluentes gerados na indstria de petrleo, encontram-se as guas de

produo, que so misturas complexas de materiais orgnicos e inorgnicos, suspensos e
dissolvidos, cuja composio varia com o tempo de explotao do reservatrio a qual
pertence. Dentre destes componentes encontra-se os metais pesados, cuja concentrao nestes
efluentes pode exceder os limites permissveis pela legislao em vigor, constituindo-se em
um grave problema ambiental (Ministerio de Salud, 1983 e 1984).

Diferentemente das espcies poluidoras orgnicas, que em muitos casos podem ser
degradadas, as espcies metlicas liberadas no ambiente tendem a persistir indefinidamente,
acumulando-se por toda a cadeia alimentar, colocando em risco a vida de animais e do
homem.
 No tratamento das guas de produo, as tcnicas fsico-qumicas convencionais, que
incluem precipitao filtrao, troca inica, osmose reversa, oxidao reduo,
recuperao eletroqumica, separao por membrana e outras tcnicas para a remoo de
metais pesados so pouco efetivas e de baixa competitividade econmica, dada a
complexidade da matriz e dos grandes volumes que devem ser tratados (Hansen e Davies,
1994).

O desenvolvimento de mtodos alternativos de tratamento de guas de produo, que

aliem ndices cada vez menores de substncias txicas e baixo custo, de extrema
importncia.

Certos tipos de biomassa microbiana podem reter relativamente grandes quantidades de

ons metlicos por soro passiva e/ou complexao. Este fenmeno conhecido por
BIOSORO.

Bactrias, fungos e algas podem remover metais pesados e compostos radioativos de

solues aquosas (Brierley, 1990; Volesky, 1994). Biosoro por fungos uma opo para o
tratamento de efluentes carregados com ons metlicos txicos (Kapoor e Viraraghavan, 1995;
Volesky e Holan, 1995). Estes microorganismos podem acumular metais metablicos e no
metablicos por precipitao ou pela ligao dos componentes presentes na parede celular ou
na membrana celular, como carboxila, hidroxila, fosfatos e outros ligantes negativos presentes
na parede celular. Materiais intracelulares que podem ser liberados depois de tratamentos
fsico ou qumico, podem tambm ligar ons metlicos. Tratamento da biomassa com NaOH e
outros reagentes alcalinos elevam a capacidade de Biosoro metlica.

Um aspecto importante da biosoro que ela pode ocorrer mesmo com clulas
metabolicamente inativas. Isto pode ser considerado uma grande vantagem, pois facilita a
recuperao do metal e possibilita a reutilizao do material biosorvente. Neste sentido, vrias
pesquisas vm sendo realizadas com o objetivo de selecionar materiais biosorventes
facilmente disponveis e abundantes.

O potencial industrial da biosoro depende de muitos fatores, tais como capacidade de

biosoro, eficincia e seletividade, facilidade de recuperao do metal e equivalncia com
processos tradicionais em desempenho, economia, imunidade a interferncias de outros
compostos do efluente ou condies de operao. Deve-se enfatizar, no entanto, que a
biosoro no necessariamente substitui metodologias existentes, mas pode atuar como um
sistema de polimento a processos que no so completamente eficientes.

No trabalho para a dissertao de mestrado que estou realizando no PPGEQ DEQ

UFRN com bolsa concedida pelo Programa de Recursos Humanos da ANP para o setor de
Petrleo e Gs PRH ANP/MME/MCT Edital de chamada n0 01/99, buscaremos
alternativas para a remoo de metais pesados das correntes de produo. Esta aplicao
uma inovao biotecnolgica e uma excelente ferramenta para ser utilizada nas formas
provveis de disposio final das guas de produo: lanamento em superfcie, reinjeo,
irrigao e abastecimento domstico aps tratamento simplificado.

Para uma melhor compreenso dividiu-se este trabalho em captulos. Esta introduo
correspondente ao Captulo I. O Captulo II abrange a reviso da literatura, compreendendo
tpicos tericos e resultados obtidos por outros autores com relao aos metais pesados,
processo de biosoro e a metodologia dos planos de experincias.

No Captulo III descreve-se a metodologia experimental aplicada para o cultivo do

Aspergillus niger, caracterizao fsico-qumica da gua de produo, ensaios de biosoro
em batelada para a determinao das condies timas para o tratamento da soluo sinttica
de cdmio, regenerao da biomassa e testes de biosoro com metais pesados presentes na
gua de produo.

Os resultados obtidos experimentalmente so apresentados e discutidos no Captulo IV

e serviram como base para as concluses descritas no Captulo V. Como este foi o primeiro
trabalho do grupo utilizando o processo de biosoro, verificou-se que muitos outros estudos
podem ser realizados envolvendo novos metais e biosorventes, o que fica como sugesto para
outras pesquisas.
__________________________________
CAPTULO II
ASPECTOS TERICOS E REVISO
BIBLIOGRFICA
__________________________________
II ASPECTOS TERICOS E REVISO BIBLIOGRFICA

II.1 Introduo

Dos vrios poluentes que podem atingir e modificar a qualidade das guas, destacam-se
os metais pesados utilizados em processamentos industriais.

Estudos recentes tm demonstrado a viabilidade da utilizao de processos de biosoro

para a remoo de metais txicos de resduos industriais. Atravs da escolha do biosorvente
apropriado, sob condies timas de operao, pode-se tornar o processo bastante efetivo e de
baixo custo (Volesky e Holan, 1995).

Segundo Kapoor, Viraraghavan e Cullimore (1999) existem pelo menos trs empresas
no Canad e nos Estados Unidos desenvolvendo processos de biosoro usando biomassa
morta para a remoo de ons metlicos txicos de efluentes industriais.

Neste captulo ser realizado uma reviso bibliogrfica sobre a industria de petrleo,
destacando o problema da gua de produo. Um estudo sobre as propriedades de alguns
metais pesados, seus efeitos nocivos sobre os seres humanos e algumas normas em relao
aos padres de qualidade da gua para os metais pesados. O processo de biosoro tambm
ser apresentado, bem como uma breve descrio sobre a utilizao do planejamento
experimental para interpretao de um determinado processo.

II.2 A indstria do petrleo

II.2.1 Petrleo

Petrleo (do latim petra = rocha e oleum = leo) o nome dado s misturas naturais de
hidrocarbonetos que podem ser encontradas nos estados slido, lquido e gasoso, a depender
das condies de presso e temperatura a que estejam submetidas. Tanto pode aparecer em
uma nica fase como pode apresentar mais de uma fase em equilbrio. Geograficamente
tambm pode ser encontrado nos mais diversos pontos do globo, tanto em acumulaes em
terra como em jazidas submarinas.

Sob o nome de hidrocarbonetos existe uma grande variedade de compostos de carbono e

hidrognio que quimicamente, de acordo com certas caractersticas, so agrupadas em srie.
Mais de 15 sries j foram identificadas, sendo que umas so encontradas com maior
frequncia que outras. As mais comumente encontradas so as parafinas ou alcanos, as
oleofinas ou alcenos, os alcinos e os aromticos. Dentro de uma mesma srie podem ser
encontrados desde compostos mais leves e quimicamente simples como por exemplo o
metano da srie das parafinas, a compostos bem mais pesados e quimicamente complexos.
Portanto de se esperar que os petrleos, de uma maneira geral, tenham constituies
bastante variadas.

Junto com a mistura de hidrocarbonetos vem sempre agregada uma certa quantidade de
impurezas, sendo as mais comuns o CO2 , O2 , N, H2 S e o He.

D-se mistura de hidrocarbonetos no estado gasoso o nome de gs natura.

Predominam nessas misturas os hidrocarbonetos mais leves da srie das parafinas, sendo o
metano o mais abundante. A densidade do gs natural medida em relao ao ar e varia entre
0,6 e 1,1.

Quando no estado lquido, o petrleo chamado de leo cru ou simplesmente de

leo. Alm de hidrocarbonetos lquidos, constam da sua composio, gases dissolvidos e
impurezas.

Se na mistura lquida houver predominncia de hidrocarbonetos da srie dos alcanos ou

parafinas, o leo classificado como base parafnica. Se a predominncia for de
componentes da srie das oleofinas ou alcenos, diz-se que o leo de base asfltica.
Quando as duas sries aparecem em propores aproximadamente iguais, o leo classificado
como de base mista. Esta classificao til apenas para efe ito de refino.
 II.2.2 Mecanismo de produo de reservatrio

A produo primria de hidrocarbonetos causada por uma srie de foras

armazenadas no reservatrio conhecidas por mecanismo de produo. Embora essas foras
possam atuar individualmente ou em conjunto, normalmente os mecanismo de produo
tornam-se efetivo de forma sucessiva, o que pode dificultar a identificao do mecanismo
predominante num determinado perodo produtivo. Dentre os mecanismos de produo
atuantes num reservatrio, podem ser mencionados:

q Gs em soluo;
q Capa de gs;
q Influxo de gua.

To logo um reservatrio colocado em produo, as foras mencionadas anteriormente

passam a drenar o leo e o gs em direo aos pontos de menor presso que, neste caso, so
representados pelos poos produtores. Tendo em vista que a determinao do mecanismo de
produo preponderante pode constituir um fator decisivo na definio da estratgia de
explotao de um reservatrio, o conhecimento das caractersticas de cada mecanismo de
produo de fundamental importncia para o gerenciamento dos reservatrios de petrleo

II.2.2.1 Gs em soluo

Depois que um poo completado num reservatrio do tipo gs em soluo e a

produo comea, a presso cai nas vizinhanas do ponto onde o poo penetrou o
reservatrio. Esta queda de presso no poo provoca uma expanso dos fluidos do
reservatrio, drenando o leo atravs dos finos canais porosos at o poo. A produo de
fluido, alm de proporcionar a vaporizao de mais componentes leves, acarreta a expanso
dos fluidos. Como o gs muito mais expansvel que o lquido, basicamente devido a sua
expanso que vai acontecer o deslocamento do lquido para fora do meio poroso (figura 1).
 FIGURA 1. Reservatrio de gs em soluo

Entretanto, a medida que a presso cai, mais e mais hidrocarbonetos vo se vaporizando

e o que inicialmente era apenas algumas bolhas dispersas no meio lquido, comea a aumentar
at formar uma fase contnua. A partir do instante em que o gs forma uma fase contnua, ele
comea a fluir no meio poroso e a ser produzido juntamente com o leo, fazendo com que a
prpria energia do reservatrio seja produzida. Em resumo pode-se citar as caractersticas e
tendncias principais deste tipo de mecanismo (tabela 1).

Tabela 1. Caractersticas e tendncias do mecanismo de gs em soluo

Caractersticas
Presso do reservatrio
Razo gs leo medida na superfcie
Produo de gua
Comportamento do poo
Recuperao de leo esperada
Tendncias
Declina rpida e continuamente
No incio baixa, depois cresce a um mximo e
ento cai
Nenhuma
Requer bombeio logo nos estgios iniciais da
vida produtiva
5 a 30% do leo originalmente no reservatrio

II.2.2.2 Capa de gs

Em muitas acumulaes de petrleo, a presena de fraes leves ocorre em proporo

superior quela que poderia ser dissolvida pelo leo nas condies de temperatura e presso
existentes no reservatrio. Quando isto ocorre, os materiais leves acrescidos de alguns
materiais intermedirios e pesados formam uma fase de gs livre. Este gs livre borbulha para
o topo da acumulao onde foi armadilhado e forma uma capa de gs acima do leo (figura
2).

FIGURA 2. Reservatrio de capa de gs

O mecanismo funciona da seguinte maneira: A zona de leo colocada em produo o

que acarreta uma reduo na sua presso devido retirada do fluido. Essa queda de presso se
transmite para a capa de gs que se expande penetrando gradativamente na zona de leo. Isto
naturalmente depende do volume de gs da capa comparado com o volume de leo. Como o
gs tem uma compressibilidade muito alta, a sua expanso ocorre sem que haja queda
substancial da presso.

A tabela 2 apresenta as tendncias gerais observadas durante a vida produtiva de um

reservatrio com mecanismo de capa de gs.

TABELA 2. Caractersticas e tendncias do mecanismo de capa de gs

Caractersticas
Presso do reservatrio
Razo gs leo medida na superfcie
Produo de gua
Comportamento do poo
Recuperao de leo esperada
Tendncias
Cai vagarosa e continuamente
Aumenta continuamente nos poos altos da
estrutura
Ausente, ou desprezvel
Grande tempo de surgncia (dependendo do
tamanho da capa)
20 a 40% do leo originalmente existente na
jazida.
 II.2.2.3 Influxo de gua

Para que ocorra esse tipo de mecanismo necessrio que a formao portadora de
hidrocarbonetos, leo ou gs, esteja em contato direto com uma grande acumulao de gua, e
que os dois, zona de gua e zona de leo, sob certos aspectos, estejam saturados como se
formassem um s corpo de rocha. Essas massas de rocha saturadas com gua que recebem o
nome de aqferos, podem se encontrar subjacentes ou ligadas lateralmente ao reservatrio
(figura 3).

FIGURA 3. Reservatrio com mecanismo de influxo de gua

O mecanismo se manifesta da seguinte maneira: A reduo da presso do reservatrio

causada pela produo de hidrocarbonetos, aps um certo tempo necessrio para a sua
transmisso se faz sentir no aqfero que responde a essa queda de presso atravs da
expanso da gua nele contida e da reduo de seu volume poroso. O resultado dessa
expanso da gua juntamente com a reduo dos poros que o espao poroso do aqfero no
mais suficiente para conter toda gua nele contida inicialmente. Haver portanto uma
invaso da zona de leo pelo volume de gua excedente. A tabela 3 apresenta as tendncias
gerais observadas durante a vida produtiva de um reservatrio com mecanismo de influxo de
gua.
 TABELA 3. Caractersticas e tendncias do mecanismo de influxo de gua.
Caractersticas Tendncias
Presso do reservatrio Permanece elevada
Razo gs leo medida na superfcie Permanece baixa
Produo de gua Comea cedo e cresce at valores bem elevados
Comportamento do poo Surgentes at que a produo de gua se torne
excessiva
Recuperao de leo esperada 35 a 75% do leo originalmente existente na
jazida

II.2.3 - Procedncia do efluente (gua produzida associada ao petrleo)

Durante o processo geolgico de formao do petrleo a matria orgnica depositada

com os sedimentos convertida, por processos bacterianos e termo - qumicos a grandes
profundidades e temperaturas relativamente elevadas, em hidrocarbonetos e gua.

Para que o petrleo acumule em quantidade comercialmente explotvel necessria a

existncia de rochas que permitam a sua gerao (rocha geradora) e um corpo poroso de
rochas permeveis onde ele acumulado (reservatrio), coberto por uma camada
impermevel que o impede de aflorar na superfcie onde seria degradada sofrendo alteraes
fsico-qumicas e bacteriolgicas (Simes, 1983).

A estrutura geolgica mais simples onde o petrleo ocorre chamada de formao

produtora e os fluidos (leo/ gs/ gua) contidos em sua rocha porosa esto submetidos s
mesmas condies de presso. As formaes produtoras podem ocorrer, dentro de uma
mesma estrutura geolgica, em varias profundidades formando um campo. Dentro de um
campo, as zonas produtoras de gs, leo e gua, geralmente esto separadas de acordo com a
densidade do fluido que ela contm, podendo existir intercalao entre as mesmas.
 II.2.3.1 Produo da gua contida no reservatrio

Os reservatrios de petrleo podem ser compostos por formaes produtoras que

apresentam zonas de leo, gua e gs. O gs pode estar solvel no leo ou se apresentar como
uma zona independente. A figura 4 mostra o esquema simplificado de trs poos, bem como a
posio relativa das zonas produtoras de gua e leo. Tanto o leo e a gua esto contidos
dentro dos poros da rocha permevel que formam o reservatrio.

FIGURA 4. Esquema generalizado da posio relativa de leo e gua no incio da produo

de um reservatrio

Devido a diferena de densidade uma grande quantidade de gua fica abaixo da zona de
leo. Mesmo no incio da vida do campo alguns dos poos que so perfurados prximos do
contato leo/gua produzem grandes quantidades de gua (poo A), enquanto aqueles
perfurados na zona produtora de leo (poos B e C) apresentam uma produo de leo quase
puro no incio de sua vida como poo produtor. A figura 5 apresenta o mesmo reservatrio em
um perodo posterior de sua vida. Outra causa da produo de gua em poos produtores de
leo a falha no revestimento do poo aliada a uma cimentao mal feita em um ponto acima
da zona produtora de leo, permitindo que a gua de uma zona superior entre no poo e
contamine a produo (figura 6).

FIGURA 5. Mesmo reservatrio da figura 4 em condies posteriores na vida do campo

 FIGURA 6. Contaminao do leo produzido devido a falha do revestimento e de sua
cimentao

II.2.3.2 Mtodos de recuperao secundria e aumento na produo de

gua

Outro motivo pelo qual a produo de gua em um determinado campo aumenta so os

mtodos de recuperao secundria onde gua na forma lquida ou de vapor injetada no
reservatrio com o objetivo de manter ou aumentar a produo de leo.

II.2.3.2.1 Injeo de gua

Usado basicamente para manter a presso do reservatrio, a injeo de gua o mtodo

de recuperao secundria mais utilizado em todo o mundo (Silva, 1986).

A gua de injeo utilizada pode ser gua do ma r (preferencialmente utilizada em

injeo nos campos situados na costa martima), gua de subsuperfcie (de uma zona de gua
do mesmo campo) e a prpria gua produzida tratada e reinjetada. Destas trs a que apresenta
maior custo e causa mais problemas operacionais a gua produzida (Ribeiro, 1986).

Independente da procedncia da gua, antes de injet- la no reservatrio necessrio

trat- la de modo a minimizar efeitos de corroso, incrustao e atividade microbiana.

Os principais produtos utilizados nesta atividade esto discriminados na tabela 4.

 TABELA 4. Principais produtos qumicos utilizados em injeo de gua para recuperao
secundria de petrleo.
Funo Produto1
Aminas Quaternrios de amnia Carbonatos
Microbiocida Fenis clorados Cianatos Sulfato de cobre
2 2
Cloro, Perxidos Aldedos Imidazolinas 2
Inibidor de corroso3 Sulfito de sdio Cromato Fosfato
2
Formaldedo Dixido de enxofre Bissulfito de sdio/ amnio
Inibidor de incrustao steres de fosfatos Fosfonatos orgnicos Polifosfatos inorgnicos
Polmeros orgnicos c. etilenodiaminotetractico

1 (Garbis, 1982 exceto onde indicado)

2 (Ostroff, 1965)
3 (Patton, 1977).

Todos estes produtos so solveis em gua e podem misturar com a gua intersticial
sendo produzidos junto com ela.

II.2.3.2.2 Injeo de vapor para recuperao secundria de petrleo

Utilizados nos campos onde a viscosidade do leo muito grande (> 100 cP), este
mtodo apresenta maior custo do que a injeo de gua devido aos altos investimentos com
geradores de vapor de alta presso, bem como a energia envolvida para gerao de vapor.

Por ser de resposta mais rpida que a injeo de gua, este mtodo conduz a um
crescimento mais rpido da porcentagem volumtrica de gua e sedimentos no petrleo
(BSW).

A gua produzida associada ao leo recuperado atravs da injeo de vapor requer

sempre maiores cuidados no seu tratamento para descarte, uma vez que o contato vapor/leo a
alta presso (1500 psi) e temperatura (3800 C) conduz formao de emulses leo em gua
muito estveis e com alto teor de hidrocarbonetos (1000 mg/l).
 II.2.4 Separao leo/gua

Durante a movimentao dos fluidos do reservatrio at os tanques de produo as fases

leo e gua so posta em contato. A agitao causada por acessrios e equipamentos da linha
de produo transformam parte da energia cintica do fluido em energia de cisalhamento
causando a disperso da gua na fase contnua leo. Temos assim a formao de um sistema
disperso, estvel e com propriedades fsico-qumicas diferentes das duas fases originais, uma
emulso de gua em leo (Franco et alii,1988 ).

A emulso estabilizada por compostos orgnicos solveis na fase leo tais como
asfaltenos, resinas, cidos orgnicos e compostos contendo nitrognio, enxofre e oxignio na
molcula.. Estes compostos migram para a interface leo/gua formando um filme ao redor
das gotas de gua que impedem a sua coalescncia e dificultando a separao das fases
(Andrade e Silva, 1984).

Os constituintes heteroatmicos tambm contribuem para o aumento da polaridade

dificultando a separao gua/leo (Brunning, 1988).

A acidez do petrleo, bem como a sua maior polaridade, podem ser consequncia da sua
biodegradao por microorganismos transformando as molculas mais simples dos
hidrocarbonetos (parafinas normais e ramificadas) em cidos naftnicos. Para hidrocarbonetos
aromticos a oxidao produz principalmente fenis conforme figura 7.

FIGURA 7. Biodegradao de hidrocarbonetos aromticos

Aps a separao das fases leo/ gua o leo encaminhado s refinarias enquanto a
gua contendo leo emulsionado, leo suspenso, leo solvel e slidos em suspenso tratada
e descartada.
 II.2.5 Escoamento da produo nos campos do RN

A coleta dos fluidos (basicamente leo e gua) realizada em pequenas estaes

coletoras (EC) e bombeada para cinco estaes centrais: EC-CAM (Canto do Amaro), EC-ET
(Estreito A e B), EC-ARG (Alto do Rodrigues), EC-FP (Fazenda Pocinhos).

As estaes centrais bombeiam o petrleo bruto, produzido em terra, at a UPGN-GMR

onde ele misturado com o leo produzido no mar. Toda a gua separada do leo, tratada e
descartada para o mar atravs de emissrio submarino (ver anexo I). O desemulsificante
dosado nas ECs de modo que, quando a gua chega na Estao de Tratamento de leo (ETO-
GMR), grande parte dela esta livre.

II.2.5.1 Tratamento do leo bruto em Guamar

A ETO-GMR processa 75.000 m3 /dia de petrleo com BSW de 80%. Um fluxograma

esquemtico da instalao mostrado no Anexo II.

O tratamento qumico consiste da desestabilizao da emulso gua em leo que

constitui o petrleo, atravs da utilizao de desemulsificantes.

Os tanques de lavagem ocupam grande rea, sendo utilizados de preferncia no

tratamento de leos recuperados com injeo de vapor, pois estes leos apresentam alta
porcentagem volumtrica de guas e sedimentos (BSW) alm de alta viscosidade,
necessitando de grande tempo de residncia e altas temperaturas de operao (65 a 80C). A
gua descartada nestes vasos geralmente contm maiores teores de leo do que no tratamento
a frio.

Os tratadores eletrostticos utilizam a coalescncia eltrica para separao das fases. As

tenses aplicadas s emulses nas regies de produo so da ordem de 20.000 V, enquanto
nas refinarias podem chegar a 30.000 V.

A gua separada bombeada para a ETE e o leo tratado armazenado nos tanques do
terminal de armazenamento de leo.
 II.2.5.2 Tratamento da gua produzida nos campos do RN

A ETE-GMR (Estao de tratamento de efluentes de Guamar) trata cerca de 60.000

m3
de gua separada do petrleo na ETO (Estao de tratamento de leo). A instalao
dia
consiste de dois separadores gua/leo (SAO), um tanque de mistura, dois flotadores a ar
dissolvido e um emissrio submarino que descarta a gua tratada a 7 Km da costa do Rio
Grande do Norte. O Dismulgan 3377 utilizado como desemulsificante para desestabilizao
da emulso leo/gua.

II.3 Poluio por metais pesados

II.3.1 Efeitos txicos de alguns metais pesados

Segundo Alloway e Ayres (1994) toxicologia o estudo dos efeitos de substncias

venenosas em seres vivos, incluindo a forma pela qual elas penetram no organismo. Acima de
certas concentraes o agente txico tem efeitos prejudiciais sobre algumas funes
biolgicas.

Os metais txicos lanados no meio ambiente causam maiores impactos ambientais do

que a poluio causada por pesticidas, dixido de enxofre, xidos de nitrognio e monxido
de carbono, pelo fato de no serem degradados. As sutis mudanas psicolgicas causadas por
traos de metais que podem passar despercebidas, ou se detectadas serem atribudas a outras
causas, um problema crtico na rea de pesquisa da sade pblica.

Sob o nome de metais pesados rene-se uma srie de elementos que ocupam as colunas
centrais da classificao peridica e tm densidade superior a 5 g/l. Todos eles tm
propriedades txicas, seja em estado de elemento, seja em estado combinado. Todos so
encontrados em pequenas doses no meio natural, e alguns so indispensveis, pois entram na
constituio de enzimas. Entretanto, se o meio estiver sobrecarregado de metais pesados, os
animais e vegetais absorvero quantidades excessivas destes elementos, podendo intoxicar-se.
No homem, o limite de toxicidade tanto mais baixo quanto menos t il for o elemento. Os
sintomas da intoxicao metlica dependem de cada metal em particular, mas de um modo
geral afetam os rins, o trato gastrointestinal e o crebro. Vrios metais pesados so causas de
doenas que se tornaram clssicas: o arsnico provoca doena de Hoffs; o cdmio, a doena
de Itai-Itai; o mercrio, a doena de Minamata (Andrs, 1975; Branco, 1987; Charbonneau,
1979).

Bioquimicamente, o mecanismo de ao dos metais txicos devido a elevada

afinidade dos ctions por enxofre pertencentes as enzimas que controlam a velocidade das
reaes metablicas crticas no corpo humano, os metais pesados atacam estas enzimas
afetando a sua atividade enzimtica, e portanto esta no pode agir normalmente afetando a
sade humana adversamente.

II.3.2 Poluio da gua por metais pesados

Existe uma srie de substncia txicas cuja presena na gua, acima de certas
concentraes, pode causar danos aos ciclos biolgicos normais. Entre estas, destacam-se pela
sua importncia, os compostos de metais pesados.

Segundo Braile e Cavalcanti (1979), a ocorrncia natural de sais de metais pesados

muito rara, sendo a indstria a principal responsvel por sua emisso nos cursos dgua. Este
fato representa um perigo de primeiro grau, pois o comportamento dos metais no pode ser
controlado na prtica, haja visto que as intoxicaes que eles provocam se desenvolvem-se
lentamente, sendo muitas vezes identificadas s depois de anos.

Branco (1987) mostra que em relao presena de metais pesados na gua, os

organismos aquticos podem apresentar, basicamente, dois tipos de comportamento:

q O organismo aqutico (ou, tambm, o ser que bebe a gua) sensvel a ao txica de
pequenas quantidades da substncia. Neste caso, tais organismos podem morrer ou
envenenar-se em conseqncia direta da presena da substncia na gua.
q O organismo aqutico, no sendo muito sensvel ao txica da substncia, absorve-a do
meio, acumulando-a em suas clulas ou tecidos. Outros organismos aquticos,
alimentando-se dos primeiros, acumulam ainda maiores quantidades de txicos e assim
 por diante. H, dessa forma, uma potencializao progressiva ou efeito cumulativo do
txico ao longo da cadeia trfica, de tal forma que os ltimos elementos dessa cadeia, ao
se alimentarem dos seus inferiores, recebem uma carga altamente concentrada da
substncia nociva, podendo perecer ou apresentar sintomas de doenas graves.

II.3.3 Caractersticas e efeitos txicos de alguns metais pesados

II.3.3.1 - Mercrio

Mercrio o mais voltil de todos os metais, e o vapor elevadamente txico.

Ventilao adequada necessria quando o mercrio usado em ambiente fechado, j que a
presso de vapor de equilbrio do mercrio centenas de vezes maior do que a mxima
recomendada para exposio. Mercrio lquido no elevadamente txico, pois a maioria que
enjerido excretado.

Emisso de mercrio de processos de grandes indstrias no pases desenvolvidos tem

sido sucessivamente reduzida, mas esta representa somente uma pequena parte do problema j
que este elemento liberado de vrias outras fontes. Grande quantidade de mercrio no estado
vapor liberado no ar como resultado da queima no regulada de carvo e leo combustvel,
ambos que sempre contm grandes quantidades deste elemento. A emisso total anual de
mercrio de todas as fontes do meio - ambiente estimada exceder 10.000 toneladas. No ar, a
grande maioria do mercrio est no estado vapor. O mercrio gasoso levado pelo ar
geralmente viaja longas distncias antes de ser oxidado e dissolvido pela chuva e
subsequentemente ser depositado em terra ou em oceanos.

O mercrio aparece principalmente em efluentes de indstrias que produzem soda

custica por processo eletroltico, lixiviao das cinzas de carvo ou fabricao de baterias
eltricas. Pode ser metilenizado por atividade bacteriana e ser introduzida na cadeia alimentar
aqutica (Kemmer, 1977). um elemento extremamente txico. A toxicidade aguda pode ser
fatal em 10 dias. A toxicidade crnica afeta as glndulas salivares, os rins e as funes
psicolgicas e psicomotoras.
 II.3.3.2 - Chumbo

um metal mole, pesado, cinzento-opaco, de pequena resistncia tenso. usado na

manufatura de tipos de imprensa, no recobrimento de cabos eltricos e em muitas ligas.

Exposto ao ar, o chumbo forma uma camada delgada externa de xido. gua dura
forma um revestimento semelhante sobre o chumbo, o que protege a gua de contaminao
posterior por meio de compostos solveis em chumbo. gua mole dissolve quantidades
apreciveis de chumbo, que venenoso e, por esse motivo, no se pode empregar canos de
chumbo para conduzir gua potvel (Pauling, 1972).

Sua presena em gua indicio de contaminao com gua proveniente de

metalrgicas. Tambm pode ser resultado do ataque corrosivo a ligas (soldas) que as contm
(Kemmer, 1977). Pode ser encontrado em tintas e gasolinas que ainda usam chumbo tetraetila
para aumentar a sua octanagem. altamente txico, acumulativo e concentra-se nos ossos.
Entra nos organismos atravs de alimentos, ar, fumaa de cigarro e gua. Causa danos ao
crebro, convulses, mudanas de comportamento e morte. Sua ingesto est limitada em 8
g
(Zamberlan e Farias, 1987). o nico dos metais que pode ser absorvido em fase slida.
L
Provoca saturnismo. Os sintomas mais comuns provocados pelo envenenamento com chumbo
so as convulses, tremores e insuficincia renal (Figueredo, s.d).

Os grupos humanos de maiores riscos de contaminao de baixos nveis de Chumbo so

fetos e crianas com idade de cerca de sete anos, elas so mais sensveis aos adultos devido ao
fato deles absorverem uma grande porcentagem de chumbo diettico para o crescimento
rpido dos seus crebros

II.3.3.3 - Cdmio

Geralmente introduzido por descartes industriais (indstrias de gua e niquelamento) o

cdmio mais encontrado em guas de superfcie do que em guas de poos. Possui
solubilidade limitada e pode ser precipitado como carbonato ou ser removido por troca inica
ou por mtodos biolgicos. um elemento potencialmente txico e suspeito de causa de
hipertenso e doenas cardiovasculares nos seres humanos. Interfere com o metabolismo do
 g
zinco e cobre. A sua ingesto limitada a 1 . encontrado no carvo, minerao de zinco,
g
cursos de gua e fumaa proveniente da queima de fumo. Segundo Figueredo (s.d.) o cdmio
atua sobre os rins e fgado. Ocasiona problemas nos ossos, irritao gastrintestinal com dores
mg
muito fortes e carcinognico em doses superiores a 0,01 .
L

II.3.3.4 - Cobre

um metal vermelho, mecanicamente resistente, com ponto de fuso moderadamente

elevado. Quando puro, um excelente condutor de calor e eletricidade, e comumente usado
como condutor eltrico (Pauling, 1972).

cobre pode estar presente na gua como resultado da corroso de tubos ou acessrios
feitos com cobre ou suas ligas. Tambm pode ser resultado da contaminao da gua com
restos minerais advindos da produo do cobre ou ter sido adicionado deliberadamente como
sulfato de cobre para controle do crescimento de algas (Kemmer, 1977). Tubulaes de cobre
tendem a liberar este metal nas guas provocando acmulo do mesmo nos trechos estagnados.
A ingesto desta gua pode provocar vmitos imediatos. O cobre elemento essencial em
baixas doses apresentando toxicidade em altas concentraes. No considerado um metal
acumulativo, quase todo cobre ingerido eliminado pelo organismo.

II.3.3.5 - Cromo

Presente em despejos de indstrias de niquelamento e descargas de fundo de torres de

resfriamento, o cromo solvel como cromato (Cr+6 ) atuando como agente oxidante. Como
Cr+3 apresenta-se na forma de hidrxido coloidal em pH neutro, podendo ser removido por
filtrao (Kemmer, 1977). Na forma trivalente essencial ao metabolismo humano e a sua
carncia causa doenas.

A ocorrncia natural dos sais de cromo hexavalente, os cromatos, muito rara, de modo
que quando esto presentes na gua, devem originar-se da poluio por despejos industriais.
Os sais de cromo hexavalente so largamente usados nas operaes de piquelagem e
cromagem de metais, corantes, explosivos, cermica, papel, etc. A dose txica para o homem
seria de 0,5 mg de bicromato de potssio. No se conhece ainda a quantidade de on cromato
que pode ser ingerida a longo prazo sem conseqncias adversas (Pauling, 1972; Chaborneau,
1979; Oga, 1996).

II.3.3.6 - Zinco

A presena de zinco na gua pode ser devida a descarte de efluentes de metalurgia,

minerao, ou operaes de acabamento de metais. Pode aparecer tambm como resultado da
corroso galvnica em tubulaes de ao. frequentemente includo em formulaes de
inibidores de corroso onde seu efeito na tubulao de ao similar quele da galvanizao
(Kemmer, 1977).

O zinco um cancergino lento, mas poderoso. Vrios metais pesados (cromo,

mercrio, nquel, chumbo, zinco) tm ao txica ou inibidora sobre o crescimento das algas
(Braile e Cavalcanti, 1979; Charbonneau, 1979).

II.3.3.7 - Nquel

um metal branco, ligeiramente amarelado. bastante utilizado na fabricao de ligas,

inclusive a liga de cobre e nquel (75% Cu, 25% Ni), empregada em cunhagem de moedas
(Pauling, 1972).

Encontrado em despejos de indstrias de chapas e resduos de minrio, o nquel

raramente apresenta-se como Ni+3 preferindo a forma Ni+2 . Tambm encontrado no leo
diesel, carvo, fumaa de fumo, catalisadores e ligas de ao e no ferroso. Precipita como
hidrxido e carbonato bsico. Os seus sulfetos so insolveis. Os ctions podem ser
removidos por troca inica (Kemmer, 1977). A ntoxicidade do nquel provoca reaes
alrgicas (dermatite, asma), nuseas, vmitos, fraqueza e alteraes funcionais cardaca e
uterina (Waitzberg, 1990).
 II.3.3.8 - Ferro

Ferro puro um metal branco-prateado brilhante que se mancha (oxida) rapidamente em

ar mido ou em gua que contenha oxignio dissolvido. mole, malevel e dctil, sendo
tambm fortemente magntico. Funde a 1535C e ferve a 3000C (Pauling, 1972).

o quarto elemento na ordem de abundncia e o metal mais barato; constitui o

ingrediente bsico de todos os aos. Faz parte do composto da hemoglobina e leva o oxignio
corrente sangunea.

encontrado em muitas rochas gneas e argilas minerais. Em seu estado reduzido (Fe+2 )
ele bastante solvel. Quando em seu estado oxidado (Fe+3 ) e na faixa de pH entre 7 a 8,5 o
ferro quase completamente insolvel (Kemmer, 1977).

A administrao de doses de ferro superior a 1 mgEV provoca cefalia, convulses,

nuseas, vmitos, febre, suor, hipotenso e at mesmo choque anafiltico (Waitzberg, 1990).

II.3.3.9 - Mangans

O mangans elementar cinza, semelhante ao ferro, porm, mais duro e quebradio,

possui nmero atmico 25 e densidade especfica de 7,21 a 7,4, dependendo da forma
alotrpica, ponto de fuso 1260C, ponto de ebulio 1962C e boa solubilidade em cidos
diludos.

O mangans proporciona ao mesmo tempo dureza e flexibilidade ao ferro, e parece

desempenhar papel semelhante nos ossos dos animais, pois sem ele os ossos tornam-se mais
esponjosos e quebram-se mais facilmente. ainda, ativador de muitas enzimas.

Em trabalhadores expostos concentraes elevadas so detectados nos pulmes,

fgado e rins.

Entre as principais aplicaes industriais responsveis pela ocorrncia de exposies ao

mangans pelos trabalhadores, destacam-se: fabricao de fsforos, pilhas secas, ligas no
ferrosas, esmalte parcelanizado, fertilizantes, fungicidas, raes, eletrodos para solda,
magnetos, catalisadores, vidros, tintas, cermicas, materiais eltricos e produtos farmacuticos
(Oga, 1996).

II.3.3.10 Outros metais pesados

O selnio geralmente est ausente ou aparece apenas como traos nas guas naturais. As
pessoas que habitam regies selenferas tm apresentado sintomas brandos de intoxicao,
parecendo tambm que, nas crianas, aumenta a ocorrncia de crie dentria. Experincias em
ratos tm demonstrado que o selnio pode ter ao cancergena.

A prata no encontrada com freqncia nas guas naturais. Muito dos seus sais so
insolveis e no elemento abundante na natureza. A indstria de artigos de prata, a
galvanoplastia, a fabricao de tintas, a fotografia, podem contribuir com seus despejos para
adicionar traos de prata s guas naturais. Uma vez ingerida, praticamente no eliminada e,
no caso de haver uso contnuo de tal gua, sua concentrao no organismo iria aumentando
paulatinamente. A dose letal para o homem de 10 g como nitrato de prata.

Devido baixa solubilidade do sulfato de brio, geralmente, apenas traos de brio so

encontrados nas guas naturais. Sob a forma de carbonatos, ocorre, naturalmente, em certas
fontes minerais. Tambm encontrado em efluentes de minerao. O brio considerado um
estimulante muscular, especialmente do corao. capaz de causar bloqueio nervoso e,
mesmo em doses pequenas ou moderadas, pode causar vaso constrio, com aumento da
presso sangunea. Para o homem, a dose letal de 0,8 a 0,9 g como cloreto (550-600 mg Ba).
No parece ter efeitos cumulativos e considera-se que o limite de 1 mg/L, para a gua, est
dentro da faixa de segurana.

Nas gua naturais freqente a ocorrncia de traos de arsnio, inofensivos sade. O

aumento do seu teor nas guas , em geral, devido a despejos industriais, atividades de
minerao ou por lavagem do solo, onde so utilizados inseticidas ou herbicidas base desse
elemento. A ingesto de 100 mg/L pode resultar em severa intoxicao e de 130 mg/L, em
acidente fatal. Pequenas doses de arsnio tem efeito cumulativo no organismo humano,
devido sua lenta eliminao, o que leva a graves intoxicaes.
II.4 Normas para metais pesados

Devido ao crescente aumento da populao, acompanhado pela intensificao de suas

atividades e pelo grande desenvolvimento industrial, passou-se a utilizar mais os recursos
naturais, degradando sua qualidade.

Para manter a qualidade da gua necessria para sua reutilizao, passou-se a exigir que
medidas de preservao fossem adotadas. Segundo Mota (1995) para cada uso da gua so
exigidos limites mximos de impurezas que a mesma pode conter. Estes limites, quando
estabelecidos por organismos oficiais, so chamados de padres de qualidade.

A seguir sero fornecidos para alguns metais pesados os teores mximos permissveis
estabelecidos no Brasil e em outras comunidades.

II.4.1 Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA)

O Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA) atravs da Resoluo N 20, de

18 de julho de 1986, estabeleceu a classificao das guas doces, salobras e salinas do
Territrio Nacional, definindo classes segundo seus usos prioritrios.

Os valores mximos permissveis de alguns metais, para guas destinadas ao

abastecimento domstico aps tratamento simplificado (Classe 1) e convencional (Classes 2 e
3) estabelecidos por este agente so apresentados na tabela 5.
 TABELA 5. Padres de potabilidade da gua para metais pesados (Mota, 1995).
METAL CLASSE 1 CLASSES 2 E 3
*
VMP (mg/L) VMP (mg/L)
Alumnio 0,100 0,100
Cdmio 0,001 0,010
Chumbo 0,030 0,050
Cobre 0,020 0,500
Cromo trivalente 0,500 0,500
Cromo hexavalente 0,050 0,050
Ferro solvel 0,300 5,000
Mangans 0,100 0,500
Mercrio 0,0002 0,002
Nquel 0,025 0,025
Zinco 0,180 5,000

(*) Valor mximo permissvel

Embora o CONAMA tenha enquadrado a gua em 9 classes, estabeleceu tambm na

Resoluo N 20 alguns padres para o descarte de efluentes. A tabela 6 fornece os valores
mximos admissveis para alguns metais (Mota, 1995).

Tabela 6. Valores mximos admissveis de alguns metais pesados para descarte em efluentes,
segundo a Resoluo N 20 do CONAMA (Mota, 1995).
METAL VMA* (mg/L) METAL VMA (mg/L)
Cdmio 0,20 Ferro solvel 15,0
Chumbo 0,50 Mangans solvel 1,00
Cobre 1,00 Mercrio 0,01
Cromo (VI) 0,50 Nquel 2,00
Cromo (III) 2,00 Zinco 5,00

(*) Valor mximo permissvel

II.4.2 Fundao Estadual de Engenharia do Meio Ambiente (FEEMA)

A Fundao Estadual de Engenharia do Meio Ambiente (FEEMA), do Estado do Rio de

Janeiro, estabeleceu critrios de qualidade para a gua potabilizvel, ou seja, aquela destinada
ao abastecimento domstico aps tratamento convencional (tabela 7).
TABELA 7. Critrios de qualidade de gua para abastecimento com tratamento convencional,
de acordo com a NT 307, da FEEMA (gua Potabilizvel) (Mota, 1995).
METAL VMP * (mg/L) METAL VMP * (mg/L
Cdmio 0,010 Cromo total 0,050
Chumbo 0,100 Mercrio 0,002
Cobre 1,000 Zinco 5,000

(*) Valor mximo permissvel

II.4.3 Portaria N 36 do Ministrio da sade para gua potvel

No Brasil os padres de potabilidade foram definidos pelo Ministrio da Sade atrvs

de sua Portaria N 36, de 01 de janeiro de 1990. Os valores estabelecidos para alguns ons
metlicos que podem estar presentes em gua potvel so mostrados na tabela 8.

TABELA 8. Valores mximos permissveis para metais pesados em gua potvel segundo a
Portaria N 36 do Ministrio da Sade (Mota, 1995).
METAL VMP * (mg/L) METAL VMP * (mg/L
Alumnio** 0,200 Cromo total 0,050
Cdmio 0,005 Mangans 0,100
Chumbo 0,050 Mercrio 0,001
Cobre 1,000 Zinco 5,000

(*) Valor mximo permissvel

(**) Sujeito reviso em funo de estudos toxicolgicos

II.4.4 Outros rgos regulamentadores internacionais

Nos Estados Unidos as substncias perigosas, definidas em termos de sua

inflamabilidade, corrosividade, reatividade e toxicidade, tm sido definidas pela
Environmental Protection Agency (EPA), rgo criado em 1970 por um ato presidencial com
o propsito de tornar-se a agncia central voltada para o controle de poluio do ar, da gua e
recursos das terras nacionais. Neste pas, a qualidade de corpos dgua que so supridores de
guas pblicas, julgada por uma regulamentao da USEPA-NIPDWR (United States
Environmental Protection Agency-National Interin Primary Drinking Water Regulations)
(Tchobanoglous e Burton, 1991; Montgomery, 1985).

II.5 Biosoro

Devido ao aumento da conscincia sobre os efeitos nocivos causados pela liberao dos
metais pesados, muitos estudos sobre a acumulao de metais, do ponto de vista de sua
remoo de solues aquosas, vm sendo realizados. Diferentemente das espcies poluidoras
orgnicas, que em muitos casos podem ser degradadas, as espcies metlicas liberadas no
ambiente tendem a persistir indefinidamente, circulando e, eventualmente acumulando-se ao
longo da cadeia alimentar, sendo uma verdadeira ameaa para o meio-ambiente, animais e
humanos.

O aumento das espcies metlicas liberadas no ambiente resultado tanto de atividades

de minerao como de guas residurias industriais, usadas diretamente no processamento de
metais ou atravs de outras atividades industriais.

Mtodos convencionais para a remoo de metais de solues aquosas incluem

precipitao qumica, deposio eletroltica, troca inica, osmose reversa, recuperao por
evaporao e aplicao da tecnologia de membrana. Contudo, quando metais so dissolvidos
em enormes volumes a concentraes relativamente baixa, estes mtodos tornam-se
ineficientes ou extremamente caro (Wilde and Benemann, 1993; Winter, Winter e Pohl, 1994;
Aderhold, Williams e Edyvean, 1996).

Mtodos alternativos para a remoo e recuperao esto sendo propostos, e a

BIOSORO vem se tornando uma alternativa potencialmente atrativa para uma grande
variedade de efluentes industriais.

A implantao no Brasil desta nova tecnologia, servir como uma alternativa

promissora na soluo de uns dos mais graves problemas existentes na indstria do petrleo e,
deste modo, poder contribuir para o tratamento das guas de produo, permitindo a sua
utilizao para irrigao e abastecimento domstico aps tratamento simplificado.
 II.5.1 Definio

A capacidade de certos microrganismos concentrar metais pesados bem conhecida.

Entretanto, somente durante as duas ltimas dcadas que os microorganismos esto sendo
usados como uma alternativa para a remoo e recuperao de metais. O termo biosoro
definido como um processo no qual slidos de origem natural ou seus derivados so usados na
reteno de metais pesados de um ambiente aquoso (Muraleedharan, Iyengar e Venkobachar,
1991).

A biosoro compreende a ligao de metais biomassa por um processo que no

envolva energia metablica ou transporte, embora tais processos possam ocorrer
simultaneamente quando biomassa viva for usada, pois a biosoro pode ocorrer com
biomassa viva ou morta (Tobin, White e Gadd, 1994).

Apesar de todo material biolgico ter uma habilidade biosortiva, a aplicao industrial
da biosoro tem sido principalmente direcionada sistemas microbianos, incluindo bactrias,
algas, fungos e leveduras (Gadd, 1990).

II.5.2 Mecanismo de acumulao de metais por microrganismos

O entendimento do mecanismo de biosoro no meramente uma questo de interesse

acadmico; benefcios prticos so tambm conseguidos. O principal objetivo de estudar o
processo de biosoro otimizar a sua aplicao. Para predizer quantitativamente quanto um
determinado fator influncia na remoo metlica, deve-se utilizar modelos matemticos
baseados no mecanismo prepoderante do processo. Por exemplo, sabendo que o mecanismo
de biosoro baseado principalmente na troca inica, fica evidente que as mudanas na fora
inica da soluo afetar a remoo do metal pesado. Alm disso, a escolha de um mtodo de
desoro apropriado tambm depende do mecanismo envolvido.

A biosoro de metais no baseada num nico mecanismo. Ela consiste de vrios

mecanismos que quantitativa e qualitativamente diferem de acordo com as espcies usadas, a
origem da biomassa e seu processamento. A biosoro de metais segue mecanismos
complexos, principalmente troca inica, quelao, adsoro por foras fsicas e o
aprisionamento de ons em capilares inter e intrafibrilaes e espaos da rede de polissacardeos
estruturais, como resultado do gradiente de concentrao e difuso atravs da parede celular e
membranas (Volesky e Holan, 1995).

H vrios grupos qumicos que podem atrair e reter metais pesados na biomassa: grupos
acetamido da quitina, polissacardeos estruturais de fungos, grupos amino e fosfa to em cidos
nuclicos, grupos amino, amido, sulfidrila e carboxila em protenas, grupos hidroxila em
polissacardeos, e principalmente carboxila e sulfatos em polissacardeos de algas marinhas.
Entretanto, a presena de alguns grupos funcionais no garante sua acessibilidade para soro,
talvez devido ao efeito estrico, conformao, ou outras barreiras (Volesky e Holan, 1995).

Embora clulas vivas e mortas sejam capazes de acumular metais, pode haver
diferenas nos mecanismos envolvidos em cada caso, dependendo da extenso da
dependncia metablica (Gaad, 1990).

A baixas concentraes, muitos metais pesados como cobre, zinco, mangans, so

essenciais para o crescimento e metabolismo celular, enquanto outros, como ouro, prata,
cdmio, chumbo, mercrio, alumnio, no possuem funo biolgica essencial conhecida.
Todos estes elementos podem ser altamente txicos para clulas vivas, o que aumenta o
problema para a remoo de metais por sistemas que utilizam biomassa viva.

O uso de biomassa morta ou de produtos derivados elimina o problema de toxicidade e

os aspectos econmicos referentes ao suprimento de nutrientes e manuteno da cultura.
Entretanto, as clulas vivas podem exibir uma maior variedade de mecanismos de acumulao
de metais (transporte, sntese de protenas intracelulares e extracelulares que se ligam a
metais, precipitao extracelular e formao de complexos como resultado da excreo de
metablitos. Gaad (1990) no verificou diferena significativa na remoo de metais pesados
utilizando biomassa fngica viva e morta.

Uma grande variedade de microrganismo pode se ligar a metais. Entretanto, h grandes

diferenas nas respostas das espcies microbianas quando expostas a solues metlicas.

As paredes de bactrias, algas e fungos so eficientes biosorventes metlicos, e em

muitos casos a ligao inicial pode ser seguida pela deposio inorgnica de quantidades
crescentes de metal. Ligaes covalentes e inicas podem estar envolvidas na biosoro, com
constituintes tais como protenas e polissacardeos. Em vrias espcies, a biosoro pode ser a
maior proporo da reteno total. Isto especialmente verdadeiro para metais pesados como
chumbo e alumnio, e radioativos como urnio e trio. As variaes na composio das
paredes celulares das clulas microbianas, que podem ser influenciadas pelas condies de
cultura, podem resultar em variaes considerveis na capacidade biosortiva e permitir algum
grau de acumulao seletiva (Gaad, 1990).

Os mecanismos pelos quais microrganismos removem metais de soluo so:

a) acumulao extracelular/precipitao;
b) soro na superfcie celular ou complexao;
c) acumulao intracelular.

Entre estes, o processo (b) pode ocorrer com organismos vivos ou mortos, o processo
(a) pode ser facilitado por microrganismos vivos, enquanto o processo (c) requer atividade
microbiana (Muraleedharan, Iyengar e Venkobachar, 1991).

a) Acumulao extracelular/precipitao

A remoo de metais por polissacardeos extracelulares tem sido muito estudada. O

aprisionamento fsico de metais precipitados na matriz polimrica e a complexao de
espcies solveis por constituintes carregados dos polmeros so formas importantes de
remoo de metais. Embora os polmeros microbianos sejam constitudos principalmente de
polissacardeos neutros, eles podem tambm conter compostos tais como cido urnico,
hexoaminas e fosfatos, que podem complexar ons metlicos. Como os polissacardeos
excretados pelos diferentes microrganismos diferem em composio, as propriedades de
ligao com metais tambm diferem de acordo com as espcies microbianas. As condies do
crescimento microbiano tambm influenciam significativamente a composio destes
polissacardeos, afetando a remoo de metais. Uma vez que os polmeros so produzidos, a
remoo de metais por este mecanismo provavelmente um fenmeno passivo, no
requerendo a participao dos organismos vivos. Entretanto, alguns trabalhos indicam que a
sntese destes polmeros induzida pela presena dos metais txicos (Muraleedharan, Iyengar
e Venkobachar, 1991).
b) Soro na superfcie celular ou complexao

Uma maneira comum pela qual os microrganismo resistem aos metais txico na
natureza acumulando-os em sua superfcie. A acumulao permite clula funcionar
normalmente mesmo na presena de elevadas concentraes de metais txicos no ambiente.
Em alguns casos, as clulas podem excretar produtos metablicos tais como H2 S ou H2 O2 que
podem precipitar os metais como sulfetos ou xidos, gerando substncias inofensivas. Esta
deposio extracelular pode depender tambm da produo celular de exopolmeros cidos
(negativamente carregados) capazes de ligar e concentrar ctions metlicos extracelularmente
(Ghiorse, 1986).

Em geral, a acumulao superficial o resultado de reaes de complexao/troca

inica entre o ns metlicos e os constituintes receptivos carregados da parede celular. Como a
biosoro uma reao fsica/qumica entre ons metlicos carregados positivamente e grupos
aninicos da superfcie celular, espera-se que a biosoro metlica seja fortemente
influenciada pelas condies experimentais tal como o pH, que afeta a especiao do metal e
grupos reativos. Alm disso, possvel que os grupos receptivos do biosorvente sejam
especficos a certos metais. A presena de certas enzimas na membrana celular dos
microrganismos pode tambm levar precipitao de metais pesados (Muraleedharan,
Iyengar e Venkobachar, 1991).

c) Acumulao intracelular

A reteno de ons metlicos por mecanismos dependentes do metabolismo

geralmente um processo mais lento que a biosoro, embora quantidades maiores de metal
posam ser acumuladas em alguns organismos. O transporte de ons metlicos para dentro das
clulas microbianas inibido por baixas temperaturas, inibidores metablicos e ausncia de
uma fonte de energia. As taxas de reteno so influenciadas pelo estado metablico das
clulas e pela composio do meio externo. Os sistemas de transporte encontrados nos
microrganismos variam em especificidade, e tantos elementos essenciais como no-essenciais
podem ser captados. A maioria dos mecanismos de transporte metlico parece se basear no
gradiente eletroqumico de prtons atravs da membrana celular, que tem um componente
qumico (o gradiente d pH) e um componente eltrico ( o potencial da membrana), cada um
dos quais podendo conduzir o transporte de solutos ionizados atravs das membranas. Em
vrios organismos, como nos fungos filamentosos, o transporte pode no ser um componente
significativo na reteno total. Alm disso em alguns casos, a reteno intracelular pode
ocorrer por difuso, particularmente onde efeitos txicos levam mudanas na
permeabilidade da membrana. Depois de captados dentro das clulas, os metais podem ser
depositados e/ou convertidos em formas mais incuas por ligao ou precipitao (Gaad,
1990).

Embora nem todos os biosorventes potencialmente aplicveis tenham sido

sistematicamente examinados, muitas evidncias tm levado identificao da troca inica
como o principal mecanismo da biosoro de metais. Esta hiptese foi formulada a partir de
estudos que revelaram uma diminuio da biosoro de ctions metlicos medida que o pH
diminua de 6 para 2,5. Como muitos metais precipitam em pH>5,5, inicialmente considerou-
se que em altos valores de pH os metais poderiam se acumular dentro das clulas e em
capilaridades da parede celular por um mecanismo combinado de soro- microprecipitao.
Entretanto, experimentos realizados em batelada sem ajuste de pH revelaram que a soro de
metais pesados em biomassa tratada com cido causaram um decrscimo do pH da soluo. A
partir desses resultados a hiptese de troca inica entre prtons e metais pesados foi
formulada.

Outros estudos revelaram que biomassas pr-tratadas com solues de clcio e sdio,
liberavam ctions desses dois metais na soluo medida que retinham zinco e chumbo, e a
quantidade de metais retidos e liberados era aproximadamente igual. Portanto, metais pesados
so biosorvidos de solues aquosas predominantemente por troca inica com os contra- ons
presentes na biomassa (Kratochvil e Vo lesky, 1998).

II.5.3 Avaliao do desempenho da soro

O desempenho da soro de um metal por um determinado biosorvente depende de

alguns fatores. Alm da presena de outros ons (que poderiam competir pelos mesmos stios
de ligao), bem como de materiais orgnicos em soluo (atuando como agentes
complexantes) e de produtos metablicos da clula em soluo (que poderiam causar
precipitao do metal), o pH, a temperatura, a concentrao do metal e condies de biomassa
(se viva ou morta, quantidade, tamanho, pr-tratamentos) podem afetar sua capacidade de
soro.

Uma comparao quantitativa de dois diferentes sistemas de soro s pode ser

realizada nas mesmas condies de concentrao de equilbrio (final). Qualquer outra
comparao conduz a um erro e pode somente servir como uma comparao qualitativa,
freqentemente usada para uma seleo rpida.

II.5.3.1 Efeito do pH

O valor do pH da soluo um dos fatores que mais afeta a soro de metais pesados.
Segundo Kuyucak e Volesky (1988) a soro aumenta com o aumento do valor do pH, devido
ao aumento da densidade de carga negativa na soluo, gerando stios ativos para interao
com o metal pesado. A exceo feita para os ons metlicos presentes como espcies
aninicas, onde a biosoro favorecida pelo decrscimo do valor do pH.

Alm de mudar o estado dos stios da ligao metlica, valores extremos de pH, como
os usados na regenerao (desoro), podem danificar a estrutura do material biosorvente. O
pH afeta tambm a especiao do on metlico na soluo, uma vez que ocorre um
decrscimo de solubilidade dos complexos metlicos com o aumento do pH. Isto pode impor
limitaes na faixa de pH vivel para o estudo da biosoro. Como a adsoro no depende
somente da atrao do sorbato pela superfcie do slido, mas tambm do comportamento
liofbico (a soro aumenta com o decrscimo da solubilidade), para a maioria dos metais isto
significa que a adsoro aumenta com o aumento do pH. Por outro lado, valores muito altos
do pH, que causam precipitao dos complexos metlicos, devem ser evitados durante
experimentos de soro, pois a distino entre soro e precipitao na remoo metlica seria
difcil (Schiewer e Volesky, 1995).

II.5.3.2 Influncia da temperatura

A biosoro no necessariamente uma reao exotrmica como as outras reaes de

adsoro fsica. A faixa de temperatura para a biosoro relativamente estreita, normalmente
situada entre 10 e 70C. e funo do tipo de biosorvente utilizado. Os estudos realizados tm
demonstrado que na faixa de 5 a 35C a temperatura exerce pouco efeito sobre a biosoro
(Tsezos e Volesky, 1981; Aksu e Kutsal, 1991; Kuyucak e Volesky, 1989a).

II.5.3.3 Influncia da concentrao do metal

Um dos fatores que mais importante que influencia a remoo metlica a concentrao
do metal pesado presente na soluo. Biosoro pode ser aplicada em uma ampla faixa de
concentrao metlica; Com o aumento da concentrao metlica de equilbrio, a capacidade
de biosoro (mg de metal por grama de biomassa) aumenta e a eficincia de biosoro
diminui (Sandau, Sandau e Pulz, et alli,, 1996). A capacidade de soro limitada pelo
nmero de stios ligantes na biomassa. Para baixas concentraes do metal pesado, como
ocorre em guas de produo da indstria de petrleo, so necessrias pequenas
concentraes de biomassa para atingir a capacidade mxima de remoo metlica.

II.5.3.4 Condies de biomassa

Muitos tipos de biomassa tm sido quimicamente processados com o objetivo de

refora- los para aplicaes em processos de soro, bem como aumentar o desempenho da
soro. Para o Aspergillus niger os tratamentos qumicos realizados com o hidrxido de sdio,
formaldedo e detergente aumentaram a capacidade de soro (Kappor e Virarahavan, 1998).
No possvel predizer o grau de modificao qumica para uma dada biomassa. O melhor
mtodo e condies experimentais dos tratamentos, bem como o tamanho, quantidade, forma
e estado da biomassa (viva ou morta) devem ser avaliados experimentalmente, em funes
das diferenas na estrutura e composio das paredes celulares dos biosorventes (Leusch,
Holan e Volesky, 1995).
 II.5.3.5 Isotermas de soro

A soro de metais sobre a parede celular tem sido tratada em termos de dois modelos:
(1) adsoro, no qual o metal se liga a um dos vrios stios livres, sem mudanas adicionais
neste stio e (2) troca inica, no qual um metal substitui outro on num processo de soro.

Kapoor, Viraraghavan e Cullimore (1999) mostraram que para fungos, a soro de ons
metlicos acompanhada pela substituio de outros ction. Um modelo de troca inica seria,
portanto, mais consistente com o sistema qumica. Infelizmente, a descrio de um sistema
por troca inica muito mais trabalhosa, pois a estequiometria da soro e desoro devem
ser demonstradas, alm de ser necessrio a determinao de quatro concentraes ao invs
dos dois valores tpicos da adsoro, a concentrao do soluto e a quantidade sorvida.

O dois modelos de soro mais utilizados para sistemas de soro com um soluto so o
modelo de Langmuir e o modelo de Freundlich.

O modelo de Langmuir assume as seguintes hipteses(Atkins, 1994; Cooney, 1999):

1 assumido que a adsoro ocorre em um nmero definido de stios da superfcie;

2 Cada stio pode abrigar somente uma molcula (cobertura monocamada);
3 A energia de adsoro, ou seja, a fora de ligao gerada entre a superfcie e as
molculas de adsorbato, igual par todos os stios.
4 No existem foras de interao entre molculas adsorvidas adjacentes, o que
implica que a habilidade de um molcula adsorver em um dado stio independente
da ocupao dos stios vizinhos.

Considerando a reao superficial:

B + C BC (1)

Em que C a concentrao do adsorbato na fase lquida e B um stio adsortivo na fase

slida, a lei da ao das massa para esta reao pode ser escrita como:
 K ads =
[BC ] (1)
[B ][BC ]

Considerando que o mero total de stios de ligao constante, a soma dos stios livres
e ocupados fornece a quantidade total de stios, ou seja:

q m = B + BC (2)

Combinando as equaes (1) e (2) obtm-se a equao da isoterma de Langmuir:

q mbC
q= (3)
1 + bc

1
em que b = .
K ads

A isoterma de Langmuir prediz a saturao da superfcie slida (q = qm) para altos

valores de C e uma adsoro linear para baixos valores de C. Em geral, qm e Kads so funes
do pH, meio inico e fora inica.

O valor da constante de Langmuir, qm, aumenta com o pH, mesmo a altas concentraes
de metal. Aparentemente, a fora motriz para a ligao no suficiente para causar a
substituio dos prtons de todos os stios. A remoo de prtons por um meio mais bsico
fornece stios aninicos que possuem energia favorvel para a ligao com o metal.
Entretanto, a relao entre os stios criados pela remoo de prtons so efetivos para a
adsoro metlica, uma vez que a adsoro de ons metlicos positivos pode reduzir a
densidade de carga superficial, deixando os stios restantes menos efetivos (Crist, Oberholser,
Schwartz, et alli, 1988).

Quando dados experimentais no se ajustam ao modelo de Langmuir, considera-se

geralmente que a adsoro ocorreu em multicamadas. Entretanto, esta no conformidade pode
tambm indicar que a adsoro pode estar envolvendo mais de um tipo de ligao (inica e
covalente) (Avery e Tobin, 1993).
 A isoterma de Freundlich uma equao emprica baseada na soro sobre uma
superfcie heterognea (etinkaya, Aksu, Ozturk, et alli, 1999). A isoterma de Freundlich
representada por:

1
q = K 'C n (4)

em que K e n so as constantes de Freundlich, caractersticas do sistema. K e n so

indicadores da capacidade e intensidade de adsoro.

A isoterma de Freundlich no prediz a saturao da superfcie slida pelo adsorbato.

Assim, o modelo permite a existncia de uma cobertura superficial infinita. A isoterma de
Freundlich freqentemente usada para modelar segmentos limitados de dados experimentais
(Reed e Matsumoto, 1993).

Ambos os modelos, embora capazes de descrever muitas isotermas de biosoro,

dificilmente podem ter uma interpretao fsica e significativa. Os resultados no podem ser
extrapolados, e nenhuma concluso preditiva pode ser feita para sistemas que operem sob
diferentes condies. Estes modelos tambm no incorporam os efeitos de qualquer outro
fator ambiental externo. Alm disso, as isotermas de biosoro podem exibir um padro
irregular devido natureza complexa tanto do material biosorvente e seus stios ativos
variados, quanto de algumas solues metlicas.

II.5.3 Materiais biosorventes

As caractersticas mais procuradas num adsorvente so capacidade, seletividade,

regenerabilidade, compatibilidade e baixo custo. Raramente um adsorvente ser timo em
todos estes aspectos.

A capacidade a quantidade de adsorbato retido pelo adsorvente por unidade de massa

ou volume de adsorvente, e normalmente a caracterstica mais importante de um adsorvente.
Ela afeta muito o custo capital, uma vez que determina a quantidade necessria de adsorvente
e o volume dos equipamentos utilizados.
 Para um dado adsorvente, a capacidade depende principalmente da concentrao da fase
fluida, temperatura e condies iniciais do adsorvente.

A seletividade a razo entre a capacidade de um adsorvente reter um componente e

sua capacidade para outro componente, numa dada concentrao da fase fluida.

A regenerabilidade essencial para todos as unidades de adsoro, pois o adsorvente

pode operar em ciclos seqenciais com desempenho uniforme. Isto significa que cada
componente deve ser fracamente adsorvido, isto , mais por adsoro fsica do que qumica. O
calor de adsoro fornece uma medida da energia necessria para a regenerao; do ponto de
vista da regenerao, baixos valores so desejveis.

A capacidade, seletividade e regenerabilidade so, na maioria dos casos, estabelecidas

por constantes de equilbrio. O entendimento das relaes de equilbrio envolvidas til para
a determinao experimental destas trs medidas do desempenho do adsorvente, as quais so
freqentemente necessrias na seleo dos mesmos (Knaebel, 1995).

O conhecimento da estrutura qumica dos biosorventes essencial para modelar e

predizer seus desempenhos em ligar metais em sistemas de purificao de gua. A efetividade
global de um biosorvente em remover metais depende tambm da faixa de concentrao pH
da soluo, cintica da reao, equipamento de soro, e composio do efluente. A
identificao dos stios de ligao em biosorventes eficientes seria til no processo de seleo
de novos tipos de biomassa, bem como na tentativa de melhorar suas propriedades
complexantes atravs de processos qumicos ou biolgicos (Fourest e Volesky, 1996).

Para a implementao de uma nova tecnologia de acumulao de metais pesados, uma

srie de requisitos deve ser estabelecida para a competitividade tcnica e econmica do
processo:

q A biomassa deve ter uma capacidade de acumulao elevada, da ordem de 70 a

100mg metal/g biomassa seca;
q A biosoro e a desoro devem ser rpidas e eficientes;
q O material biolgico deve apresentar baixo custo;
q O material biolgico deve ser reutilizvel;
 q O material biolgico deve ser adptvel a diferentes configuraes de ratores;
q A separao do metal retido deve ser fcil e de baixo custo.

Embora muitos materiais biolgicos possam se ligar a metais, somente aqueles com
capacidade de ligao e seletividade suficientemente altas para metais pesados so viveis
para o uso em processos biosortivos em grande escala. O primeiro maior desafio dos estudos
sobre biosoro foi selecionar os tipos mais promissores de biomassa de um conjunto
relativamente grande de biomateriais disponveis e de baixo custo. Embora esta etapa no
tenha sido completamente realizada, um bom nmero de tipos de biomassa j foram testadas
em suas capacidades de ligao sob vrias condies.

A tabela 9 resume as tentativas de obter os diferentes tipos de biomassa capaz de

remover vrios tipos de metais no mundo microbiano. Os resultados destes estudos varia
amplamente por causa dos diferentes critrios utilizados pelos autores na pesquisa dos
materiais convenientes. Uma concluso geral que existem materiais biosorventes com
potencial de biosorver os principais tipos de metais entre os tipos de biomassa facilmente
disponvel dos trs grupos: algas, fungos e bactrias, as duas precedentes talvez sendo os tipos
de biomassa de escolha mais abrangente.
 TABELA 9. Biosorventes para a remoo de metais pela biomassa microbiana
Metal Tipo de biomassa Classe da biomassa Remoo do metal a Referncia
(mg/g)
Ag (Alga de gua doce)b Biosolvente 86-94 Brierley e Vance, 1988
b
(Biomassa fngica) Biosolvente 65 Brierley, et alli., 1986
Rhizopus arrhizu Fungo 54 Tobin et alli., 1984
Saccharomyces cerevisae Levedura 4.7 Brady e Ducan, 1993
Au Sargassum natans Alga marrom 400 Volesky e Kuyucak, 1988
Aspergillus niger Fungo 176 Kuyucak e Volesky, 1988
Rhizopus arrhizus Fungo 164 Kuyucak e Volesky, 1988
Palmaria tevera Alga marinha 164 Kuyucak e Volesky, 1988
Cd Ascophllum nodosum Alga marinha marro m 215 Holan et alli., 1993
Sargassum natans Alga marinha marrom 135 Holan et alli., 1993
b
(Biomassa fngica) Biosolvente 135 Brierley et alli.,1986
b
(B. subtilis) Biosolvente 101 Brierley et alli.,1986
3+
Cr Bacillus Bactria 118 (Cr ) Brierley e Brierley, 1993
Rhizopus arrhizus Fungo 31 Tobin et alli., 1984
Candida tropicalis Levedura 4.6 Mattuschka et alli., 1993
Streptomyces nouresei Bactria filamentosa 1.8 Mattuschka et alli., 1993
b
Cu (Bacillus subtillis) Biosolvente 152 Beveridge, 1986
(Bacillus subtillis) Bactria 146 Beveridge, 1986
Candida tropicalis Levedura 80 Mattuschka et alli., 1993
b
(Biomassa fngica) Biosolvente 76 Beveridge, 1986
Fe (Bacillus sutillis) Bactria 201 Beveridge, 1986
Bacillus Bactria 107 Brierley e Brierley, 1993
Hg Rhizopus arrhizus Fungo 54 Tobin et alli., 1984
(Penicillium chrysogenum) b Fungo 20 Nemec et alli, 1977
Mn (Baccilus subtillis) Bactria 44 Beveridge, 1986
(Baccilus licheniformis)) Bactria 38 Beveridge, 1986
Ni Fucus vesicolosus Alga marinha marrom 40 Holan e Volesky, 1994
Ascophyllum nodosum Alga marinha marrom 30 Holan e Volesky, 1994
Sargassum natans Alga marinha marrom 24-44 Holan e Volesky, 1994
Candida tropicalis Levedura 20 Mattuschka et al., 1993
 TABELA 9. Continuao
Metal Tipo de biomassa Classe da biomassa Remoo do metal a Referncia
(mg/g)
Pb (Bacillus subtilis) b Biosolvente 601 Brierley et alli., 1986
b
(Biomassa fngica) Biosolvente 373 Brierley et alli., 1986
Absidia orchidis Fungo 351 Holan e Volesky, 1995
Fucus vesiculosus Alga marinha 220-370 Holan e Volesky, 1994
b
Pd (alga de gua doce) Biosolvente 436 Brierley e Vance, 1988
b
(Biomassa fngica) Biosolvente 65 Brierley et alli.,1986
U Streptomyces longwoodensis Bactria filamentosa 440 Friis e Myers-Keith, 1986
Rhizopus arrhizus Fungo 220 Volesky e Tsezos, 1981
Th Rhizopus arrhizus Fungo 160 Tsezos e Volesky, 1981
b
Zn (Bacillus subtillis) Biosolvente 137 Brierley et alli.,1986
(Biomassa fngica)b Biosolvente 98 Brierley et alli.,1986
Saccharomyces cerevisiae Levedura 14-40 Volesky e May-Phillips, 1995
Candida tropicalis Levedura 30 Mattuschka et alli., 1993
a
Remoo metlica como reportado no necessariamente a mxima
b
Biomassa no necessariamente no estado natural

A acumulao seletiva de metais pesados por microrganismos determinada pela

competio interinica, e a quantidade de ons adsorvidos por diferentes clulas microbianas
difere muito de espcie para espcie (Nakajima e Sakaguchi, 1986).

A biomassa de fungos de grande interesse na remoo de ons metlicos. A

localizao de metais retidos na parede celular sugere que os polmeros de que esta biomassa
constituda so os principais stios de ligao. A presena de quitosana, com alto teor de
nitrognio, pode explicar as propriedades de ligao dos fungos. Neste sentido, Jansson-
Charrier, Guibal, Roussy, et alli, (1996) avaliaram a dinmica de remoo de urnio usando
quitosana em um reator de leito fixo, verificando a influncia dos parmetros de operao, tais
como tamanho da partcula, velocidade de fluxo, altura da coluna e concentrao inicial do
metal. A influnc ia destes parmetros sobre as curvas de ruptura demonstraram que a etapa
limitante a difuso do soluto no polmero. Esta difuso controlada principalmente pela
especificao qumica do sorbato (hidrlise do on uranil e tamanho das molculas
hidrolizadas). Os resultados demonstraram, ainda, que o processo particularmente indicado
para efluentes diludos, e que a presena de ons que poderiam competir com o on uranil
(sulfatos ou outros nions) no causou interferncia significativa, com exceo dos ons
bicarbonato.

Guibal, Roulph e Le Cloirec (1992) realizaram um estudo sobre o mecanismo de soro

do urnio pela biomassa do Mucor miechi, um fungo usado em agro-indstrias. O pH exerceu
uma forte influncia neste processo, principalmente por sua influncia sobre o metal ou sobre
a qumica da parede celular. A hidroxilao do uranil, dependente do pH e da concentrao
total do metal, influenciou a cintica, via natureza das fases limitantes: difuso do metal
atravs das camadas constituintes da biomassa, precipitao dos ons uranil inicialmente
adsorvidos entre as membranas e mecanismos de soro. Com um pH moderado, a soro de
hidrxidos de urnio modificou as estruturas extracelulares do sorvente, induzindo uma
soro em multicamadas, oposta soro em monocamada obtida em pH cido.

A biosoro de metais por microrganismos vivos no fcil por causas da toxicidade do

metal, que geralmente inibe o crescimento microbiano. A separao dos estgios de
propagao da biomassa e biosoro do metal uma soluo para este problema, e tem levado
o desenvolvimento de materiais biosorventes inativos. A concentrao de metais pode
tambm ser feita utilizando resduos de biomassa, bem como clulas imobilizadas.

As indstria farmacuticas e de alimentos tm usado um grande nmero de processos

microbianos, gerando resduos biolgicos que precisam ser tratados. Estes resduos so
produzidos em grandes quantidades e a massa microbiana gerada est sendo disposta em
aterros ou incinerada. Os resduos de biomassa possuem um potencial de desenvolvimento e
poderiam ser usados como material de baixo custo no desenvolvimento d sistemas de
tratamentos de guas que contenham ons, tais como urnio, trio, rdio, etc.

II.5.4 - Seleo dos metais

Uma seleo apropriada de metais para estudos de biosoro extremamente

importante desde que o volume experimental aumente exponencialmente com cada espcie
metlica considerada para investigao. Dependendo do ngulo de interesse e o impacto de
diferentes metais, eles poderiam ser divididos em quatro categorias: (1) Metais pesados
txicos, (2) metais estratgicos, (3) metais preciosos, e (4) radioativos. Em termos de ameaa
ambiental, as categorias 1 e 4 so de interesse para a remoo do ambiente e/ou de efluentes
industriais.

Considerando o impacto ambiental de metais pesados, o mercrio, chumbo e cdmio,

so o que esto em mais evidncia (Volesky, 1990 a,b). O mercrio est sendo retirado de
processos industriais pela introduo de novas tecnologias. Com relao a contaminao por
chumbo, a propagao do chumbo no meio-ambiente tem sido restringida com a utilizao de
gasolina isenta de chumbo. Enquanto o uso do mercrio e do chumbo est sendo limitado,
cdmio txico e onipresente em distribuies atravs do mundo. O uso do cdmio em
ascenso, representa um reconhecimento de perigo para humanos e para o meio-ambiente.

II.5.5 - Fungos

A remoo de espcies metlicas pela biomassa fngica tem sido principalmente

atribuda a parede celular. A parede celular no necessariamente o nico stio onde os
metais removidos esto localizados. Eles podem tambm ser encontrados dentro da clula
associados com vria organelas ou cristalizados no citoplasma. Contudo, a parede celular
pode ser considerada como o stio primrio onde a maioria dos metais removidos so
encontrados.

A estrutura da parede celular de clulas fngicas constituda de duas fases: uma

camada interna de microfibras, usualmente embutidas em uma outra fase amorfa constituda
de uma camada adjacente de protena, uma camada de glicoproteina e finalmente uma camada
externa de - 1,3 e 1, 6, - glucan (Volesky, 1990).

Segundo (Volesky, 1990) a parede celular de clulas de Aspergillus niger composta

principalmente de carboidratos neutros (73 a 83%) e hexoamina (9 a 13%), com pequenas
quantidades de lipdeos (2 a 7%) e protena (0,15 a 2,5%). Fsforo constitui menos de 0,1% e
o acetil corresponde cerca de 3 a 3,4% do peso da parede celular.

Os fungos so utilizadas pelo homem desde h muito tempo para a preparao de

alimentos. A descoberta de alguns produtos de secreo, antibiticos e, particularmente, a
penicilina, revolucionou, desde a Segunda guerra mundial, o prognstico de temveis
infeces bacterianas, permitindo salvar milhes de vidas humanas.

So utilizados fungos na fabricao de produtos alimentcios, tais como: Penicillium

para a maturao de queijos fermentados (Geotrichum candidum), na fabricao de queijos e
para a fabricao de chucrute.

Os fungos podem ser utilizados como agentes de fermentao. Enquanto no Ocidente a

fabricao de bebidas alcolicas lana mo das leveduras, no Extremo Oriente utilizam-se
fungos. O saqu japons fabricado a partir do arroz. A hidrlise do amido, que precede a
fermentao, realizada pelas amilases de fungos da espcie Aspergillus orizae cujos esporos
so semeados em cima do arroz cozido no vapor.

As indstrias qumicas e farmacuticas fabricam substncias complexas, muito

importantes, tais como vitaminas, enzimas (proteases, pectinases, amilases de Aspergillus) e
antibiticos, atravs da biossntese. O Aspergillus niger responsvel pela produo dos
cidos ctrico e glucnico.

A penicilina foi o primeiro antibitico interessante produzido industrialmente, durante a

Segunda Guerra Mundial.

O estabelecimento da indstria da penicilina, entre 1940 e 1943, teve de resolver

problemas tecnolgicos difceis e complexos, diferentes das fermentaes tradicionais, e
constitui uma notvel conquista tecnolgica.

II.5.6 Biosoro por fungos

Estudos de remoo metlica por clulas de fungos surgiu do interesse no efeito de

espcies metlicas na atividade metablica de culturas fngicas geralmente envolvidas na
produo de compostos qumicos ou farmacuticos valiosos como produto de processos de
fermentao em larga escala. Metais pesados tem um efeito considervel na atividade de
enzimas envolvidas em reaes metablicas chaves. A presena ou ausncia de um certo
metal no meio ambiente pode levar a acumulao de intermedirios e produtos metablicos de
interesse que ocorre na clula ou no lquido circundando a clula. Este aspecto teve um
grande impacto na produo de produtos de fermentao comercial como cido ctrico e
itacnico ou certos antibiticos cuja biossntese extremamente sensvel a concentrao de
metais especficos, como ferro, zinco ou mangans no meio de cultura.

Estudos realizados sobre a tolerncia de culturas fngicas a metais pesados revelaram

no somente uma elevada tolerncia de alguns fungos, mas tambm acumulao de metais
pesados na biomassa. A observao deste fenmeno levou a descoberta da biosoro como
uma nova tecnologia para remoo metlica de solues aquosas.

Biosoro de ons metlicos por fungos pode oferecer um mtodo alternativo para
remoo de metais pesados de efluentes industriais. Para esta aplicao, a biomassa fngica
tem que estar facilmente disponvel em grandes quantidades. Fungos so utilizados em uma
variedade de processos de fermentao industrial que poderia servir como uma fonte de
suprimento de biomassa econmica e constante para a remoo de ons metlicos. Fungos so
facilmente cultivados em quantidades substanciais utilizando tcnicas de fermentao no
sofisticada e meios de crescimento barato. Portanto, a biomassa fngica poderia servir como
um meio econmico para remoo/recuperao de ons metlicos de solues aquosas.

Fungos do gnero Rhizopus e Penicillium j tem sido estudado como uma biomassa
potencial para a remoo de metais pesados de solues aquosas (Tobin, Cooper e Neufeld,
1984; Siegel, Galun e Siegel, 1990; Volesky and Holan, 1995). Pouco conhecido
conhecido na remoo de metais pesados como cdmio e ferro em guas de produo pelo
Aspergillus niger. Yakubu e Dudeney (1986) demonstrou que o Aspergillus niger foi
efetivamente capaz de remover ons urnio. Huang e Huang (1996) e Huang, Westman,
Huang, et alli, (1988) demonstraram que o Aspergillus oryzae pode remover ons cdmio e
cobre de solues aquosas.

II.6 Metodologia dos planos de experincias

Hoje em dia, possvel observar que boa parte dos problemas existentes na indstria se
baseiam na caracterizao, desenvolvimento e melhoramento de processos de produo. De
uma forma geral, pode-se representar processos ou sistemas sobre estudo por um modelo
representado na figura 8. Pode-se, tambm, visualiza- los como uma combinao de mquinas,
mtodos, pessoas e outros recursos que transforma algum tipo de entrada em um tipo de
sada que tem uma ou mais variveis resposta observveis (y). Algumas variveis do
processo, x1 , x2 , ..., xp so do tipo controlveis, enquanto que as outras variveis z1 , z2 ,...,zq
so no-controlveis.

FIGURA 8. Modelo geral de um processo ou sistema

As metodologias de pesquisa experimental so cada vez mais utilizadas para

caracterizao, desenvolvimento e melhoramento de um determinado processo. Um
planejamento experimental bem conduzido permite investigar com exatido as variveis de
um processo e os efeitos que elas provocam nos produtos.

O principal aspecto da metodologia de pesquisa experimental relacionar melhor a

descrio, previso e execuo do fenmeno estudado, integrando o conhecimento cientfico
ao ciclo de desenvolvimento contnuo de Box e Hunter (1978), induzindo a otimizao de um
processo, segundo o uso de tcnicas estatsticas associadas a uma reflexo crtica dos
resultados.

Em um processo onde se investiga a influncia de quatro variveis (independentes), A,

B, C e D sobre um rendimento, ou resposta, Y (eficincia de biosoro) pode ser utilizado um
planejamento experimental. O planejamento experimental exige a seleo de um nmero
razovel de nveis de operao, para cada varivel, assim como a presena de todas as
combinaes entre as mesmas.
 O planejamento experimental tem sido muito aplicado em pesquisas bsicas e
tecno lgicas (Routh, Swartz e Denton, 1977) e classificado como um mtodo do tipo
simultneo, onde as variveis de interesse que realmente apresentam influncias significativas
na resposta so avaliadas ao mesmo tempo (Barros Neto, Scarmnio e Bruns, 1995 e Bereton,
1987).

Para realizao de um planejamento fatorial, estabelece-se a lista de variveis que

podem interferir no mesmo. Define-se assim um fator que traduza toda e qualquer varivel
que influencia o fenmeno estudado, expressa na forma de uma funo resposta, y = f(x) ou
resposta experimental. A resposta pode ser uma propriedade qualitativa ou quantitativa
(rendimento, cor, pureza, etc), dependendo das caractersticas do sistema.

A ordenao das informaes utilizadas no planejamento experimental d-se, em geral,

na forma codificada de matrizes experimentais. De acordo com a metodologia dos planos de
experincia, essas matrizes so chamadas matrizes de experincias fatoriais (completas ou
fracionadas). As matrizes so chamadas de completas se todas as interaes esto
compreendidas entre os k fatores estudados. Cada fator pode ser definido por uma ou mais
varivel. Neste trabalho, particularmente, a cada fator corresponde uma s varivel (Capron,
Girou, Humbert, et alli, 1987).

A forma geral de um procedimento fatorial envolve a seleo de k variveis (fatores) em

nveis previamente fixados, Se l1 nveis so adotados para o primeiro fator, l2 para o segundo
e li para o isimo fator, ento l1 , l2 x...xli experimentos so requeridos. Atravs da realizao de
um plano fatorial completo pode-se, em um mnimo de experincias, quantificar a influncia
dos fatores estudados sobre a resposta experimental (Fargin, Sergent, Mathieu, et alli, 1985).

Quando se estuda a influncia dos fatores escolhido sobre a resposta Y, em

considerao, as respostas Yi (1<i<p) de n fatores X1 , X2 ...Xn de valores Xi1 , Xi2 ...Xin , pode-se
definir uma funo resposta para p experincias do tipo:

Yi = f ( X i1 , X i 2 ,..., X in ) + ei (5)

Onde ei representa o erro experimental ligado determinao de Yi.

 Supondo a funo Yi contnua e infinitamente derivvel, pode-se efetuar um
desenvolvimento de Taylor nas proximidades do contorno de interesse, de forma que:

n n n n n n n
Y = 0 + j X ij + jj X ij2 + ij ij ik + jkl X ij X ik X il + ei (6)
j =1 j =1 j =1 k =1 j =1 k =1 l =1

com j k l

Y a resposta experimental, 0 (constante) o valor esperado de Y no centro do

domnio experimental (Xj = Xi = 0), i a influncia ou efeito de uma varivel escolhida, ii
a influncia ou efeito de 2 ordem de uma varivel escolhida, ij a influncia ou efeito de 1
ordem de duas variveis e ijk a influncia ou efeito de 1 ordem de trs variveis quaisquer.
Uma comparao simples entre os coeficientes permite conhecer a influncia de cada fator e
de suas interaes sobre a resposta experimental (Box e Wilson, 1951).

Os coeficientes da funo resposta so obtidos por anlise de regresso (mtodo dos

mnimos quadrados) sobre os resultados experimentais. conveniente representar as variveis
escolhidas sob a forma codificada.

II.6.1 Anlise de varincia

Suponha que existem a nveis de um determinado fator que se deseja comparar. A

resposta observada de cada um dos nveis do fator uma varivel aleatria, visto que
realizaes do experimento sob condies idnticas produzem, em geral, diferentes valores da
resposta. A tabela 10 exibe uma forma de organizao das observaes para um experimento
com um fator. Cada valor yij representa a j-sima observao realizada no i- simo nvel do
fator de interesse
 TABELA 10. Forma organizacional para os dados de um experimento com um fator
Nveis do fator Observaes Totais Mdias
1 y11 y12 y13 y1n y1 y1
2 y21 y22 y23 y2n y2 y2
3 y31 y32 y33 y3n y3 y3
a ya1 ya2 ya3 yan ya ya

Pode-se descrever as observaes da tabela 1 pelo modelo linear:

y ij = + i + ij , i = 1,2,...a; j = 1,2,..., n (7)

onde yij a observao ij, um parmetro comum a todos os nveis do fator e denominado
mdia global, i um parmetro associado com o i-simo nvel do fator e denominado efeito
do i-simo nvel e ij uma componente do erro aleatrio associada com observao ij. Os
objetivos so no somente testar hipteses a cerca dos efeitos dos tratamentos, mas tambm
estima- los. Para os testes de hipteses, os erros so assumidos variveis aleatrias
independentes com distribuio normal, mdia zero e varincia 2 . Supe-se que a varincia
2 constante para todos os nveis do fator. Usualmente, os erros do modelo resultam de erro
de medida, os efeitos de variveis no includas no modelo, variao devido a causas comuns
no processo, e assim por diante.

A apresentao da anlise de varincia para o modelo de um experimento com um fator

ser realizada a seguir. Neste modelo, os efeitos dos nveis, i, i = 1,2,...,a, so usualmente
definidos como desvios da sua mdia geral, isto :

i =0 (8)
i =1

Sejam

n
y i = y ij : Total amostral das observaes sob o i-simo nvel;
j =1
 yi
yi = : mdia amostral de todas as observaes do i-simo nvel;
n
a n
y = yij : total amostral geral de todas as observaes;
i =1 j =1

y
y= : mdia amostral de todas as observaes.
N

de interesse testar a hiptese (nula) H0 : existe igualdade das mdias dos a nveis do
fator contra a alternativa H1 : pelo menos uma mdia difere das outras. Estas hipteses podem
ser escritas da seguinte forma:

H0 : 1 =2 =...=a = 0
H1 : i0, para ao menos um i.

O procedimento apropriado para testar essas hipteses denominado anlise de

varincia. O nome anlise de varincia derivado do fato que a tcnica se baseia em
decompor a variabilidade total dos dados em vrias partes. A soma de quadrados total
(corrigida pela mdia), definida por:

( ) ( )
a a n 2

SQT = n y i y + y ij y i
2
(9)
i =1 i =1 j =1

Esta equao estabelece que a variabilidade total dos dados, medida pela soma de
quadrados total corrigida, pode ser particionada em uma soma de quadrados de diferenas
entre as mdias dos nveis observados e a mdia geral, mais uma soma de quadrados das
diferenas de observaes dentro dos nveis. As diferenas entre as mdias dos nveis
observadas e a mdia geral medem as diferenas entre as verdadeiras mdias dos nveis
(populao), enquanto que as diferenas de observaes dentro de um nvel para a mdia
observada do nvel pode ser devida ao erro aleatrio. Assim, pode-se escrever a equao (9),
simbolicamente, como:

SQT = SQFATOR + SQE (10)

onde SQFATOR denominada soma de quadrados devido ao fator (isto , entre os nveis) e SQE
denominada soma de quadrados devido ao erro (isto , dentro dos nveis).

Se SQFATOR grande, devido a diferenas entre as mdias nos diferentes nveis do

fator. Assim, comparando-se as magnitudes da SQFATOR e SQ E, pode-se ver quanto da
variabilidade dos dados devida a diferenas nas mdias dos nveis do fator e quanto devido
ao erro aleatrio. Esta comparao melhor realizada se as somas de quadrados forem
escaladas pelos seus respectivos graus de liberdade. Assim, SQT tem N-1 graus de liberdade.
Como existem a nveis do fator, ento SQFATOR tem a-1 graus de liberdade. Finalmente,
dentro de cada nvel do fator existem n rplicas fornecendo n 1 graus de liberdade para o
erro. Desde que existem a nveis, ento o nmero de graus de liberdade para o erro de a(n-
1) = a.n-a=N-a.

A razo de uma soma de quadrados e os seus graus de liberdade denominado um

quadrado mdio (QM). Assim pode-se definir:

SQFATOR
QM FATOR = (11)
a 1
SQE
QM E = (12)
a(n 1)

Pode ser mostrado que o quadrado mdio QME estima no tendenciosamente a varincia do
erro experimental, 2 . Tambm, QMFATOR estima no tendenciosamente 2 se no existe
diferenas entre as mdias dos nveis dos fatores. Logo, o quociente entre dois quadrados
mdios ser prximo de um. Porm, quando pelo menos uma dessas mdias for diferentes das
demais, ento o valor esperado do QMFATOR ser maior que 2 . Portanto, o quociente entre os
dois quadrados mdios ser superior a um. Estes argumentos conduzem a um teste estatstico,
baseado na distribuio F de Snedecor, utilizando a estatstica:

QM FATOR
F0 = (13)
QM E
Seja F;a-1,a(n-1) o valor da distribuio F de Snedecor com a-1 e a(n-1) graus de liberdade no
numerador e denominador, respectivamente. Se F0 > F;a-1,a(n-1) ento conclui-se que h alguma
diferena entre as mdias dos nveis do fator de interesse.

comum, na anlise de varincia acrescentar um outro fator que exibe o nvel de

significncia associado a estatstica de teste observada F0 . Este nvel conhecido, tambm,
como fator p. O fator p representa a probabilidade de se observar, em uma distribuio F de
Snedecor, com a1 graus de liberdade no numerador e N-a graus de liberdade no
denominador, um valor superior a F0

A magnitude deste valor fornece um meio de avaliar o quanto se est distante da

hiptese nula H0 . Quanto maior for o valor p, menor ser a evidncia estatstica para a
rejeio de H0 ; enquanto que, quanto menor for o valor p, maior ser a evidncia estatstica
para a rejeio de H0 .

II.6.2 Anlise residual

A anlise de varincia assume que as observaes so independentes e normalmente

distribudas com a mesma varincia em cada nvel do fator. Estas suposies devem ser
checadas examinando-se os resduos. No experimento completamente aleatorizado, pode-se

definir o resduo associado com a observao ij por eij = y ij y i , isto a diferena entre o

valor da observao ij e a mdia do i-simo nvel.

Para checar a suposio de normalidade dos dados, pode-se construir o histograma dos
resduos. Para checar a suposio de igual varincia em cada nvel do fator, constri-se o
grfico dos resduos contra os nveis dos fatores e compara-se a disperso dos resduos.
tambm til construir o grfico dos resduos contra os valores preditos. A variabilidade dos
resduos no dever depender de nenhuma forma do valor de y i . Quando aparece um padro

de dependncia nestes grficos, necessrio transformar os dados para analisa- los em uma
escala diferente. Algum padro nestes grficos, tal como uma sequncia de resduos positivos
e negativos, pode indicar que as observaes no so independentes. Isto sugere que a ordem
do experimento importante ou que variveis que mudam com o tempo so importantes e no
foram includas no planejamento do experimento.
 II.6.3 - Mtodo de anlise de superfcie de resposta

Este mtodo classificado como um mtodo simultneo, sendo utilizado na etapa de

otimizao propriamente dita. Sua aplicao permite selecionar a combinao de nveis
timos na obteno da melhor resposta para uma dada situao (Nelder e Mead, 1965).

No mtodo da anlise de superfcie de resposta so realizados planejamentos fatoriais,

para cujos resultados so ajustados modelos matemticos. Estas etapas, conhecidas como
etapa de deslocamento e modelagem, respectivamente, so repetidas vrias vezes, mapeando
as superfcies de respostas obtidas na direo da regio no ponto de timo desejado. A
modelagem normalmente feita ajustando-se os modelos mais simples, como o linear e o
quadrtico. Por sua vez, o planejamento fatorial executado geralmente constitui-se de um
nmero pequeno e pr - determinado de experimentos, que so determinados atravs do ajuste
conseguido para o modelo que foi aplicado na etapa imediatamente anterior. Outro detalhe
importante o uso das variveis em sua forma escalonada, de fo rma que suas grandezas no
interfiram no desenvolvimento do processo de otimizao. Os cuidados na realizao dos
experimentos e de suas replicatas devem ser observados. Usualmente, a modelagem iniciada
utilizando-se o modelo linear.
 ___________________________
CAPTULO III
Metodologia Experimental
_____________________________
III METODOLOGIA EXPERIMENTAL

III.1 Introduo

Neste captulo so apresentados os procedimentos empregados para obteno da

biomassa e dados experimentais relevantes para a compreenso do processo de remoo de
ons metlicos pelo Aspergillus niger.

A tcnica analtica para a determinao da concentrao nas solues,

espectrofotometria de absoro atmica, ser tambm apresentada, dando enfoque as
condies operacionais para os metais em estudo.

III.2 Espao Fsico

Os experimentos foram realizados no Laboratrio de Engenharia Bioqumica,

pertencente ao Departamento de Engenharia Qumica da UFRN.

III.3 Reagentes

q cido clordrico, cido ntrico e hidrxido de sdio (reagentes P.A.).

q gua deionizada

q Meios de cultura

q Soluo sinttica contendo o metal pesado

III.4 Equipamentos Utilizados

Com relao aos equipamentos utilizados, citam-se os seguintes:

q Autoclave vertical (modelo AV 75)

q Balana analtica, METTLER TOLEDO AB 204 (quatro casas decimais)

q Bomba vcuo, QUIMIS (modelo Q 335B)

q Espectrofotmetro de absoro atmica (VARIAN SpectrAA 10 PLUS)

q Estufa bacteriolgica (modelo B3)

q pHmetro, DIGIMED (modelo DM 21)

q Shaker (modelo C25KC)

q Aquecedor, FISOTON (modelo 752 A)

III.5 Microrganismo e condies de manuteno

Neste trabalho foi utilizado uma linhagem de Aspergillus Niger (2003), pertencente
Coleo de Culturas do Departamento de Antibiticos da Universidade Federal de
Pernambuco.

A linhagem, crescida em meio SAB (Sabouraud Dextrose Agar), foi repicada em tubos
de ensaio esterilizados, contendo 5 mL de meio SAB. Incubou-se em estufa, a 25C, por sete
dias, aps decorrido este perodo, os tubos foram lacrados e armazenados na geladeira. O
meio utilizado para repicagem e manuteno do microrganismo teve a seguinte composio:
 Peptona 10,0 g

D (+) Glicose 40,0 g

gar 15,0 g

gua destilada 1000,0 mL

pH 5,6

III.6 Preparao do inculo

Tomou-se frascos erlenmeyer de 250 mL de capacidade, contendo 100 mL de meio de

manuteno (SAB). Estes frascos foram fechados com rodilho de algodo e gases e em
seguida esterilizados em autoclave a 120C por 30 minutos. Aps a esterilizao, os frascos
foram dispostos de forma inclinada at atingir temperatura ambiente.

Tendo-se certeza do sucesso da esterilizao dos frascos contendo o meio de

manuteno, transferiu-se os esporos at ento nos tubos de ensaio (tem III.4) para os frascos
contendo o meio SAB. Esta transfernc ia foi realizada, espalhando-se os esporos de
Aspergillus Niger em toda a superfcie do meio slido, com o auxlio de uma ala de platina
flambada.

Estes frascos foram incubados a 25C por um perodo de mnimo de 5 dias e mximo de
15 dias.

Aps o perodo de incubao, adicionou-se aos frascos, contendo a cultura j esporulada

50 mL de soluo de agente tensoativo (soluo de Tween 20), contendo juntamente com o
agente tensoativo, prolas de vidro.

Aps esta adio, os frascos foram agitados levemente, at que a grande maioria dos
esporos tenha sido suspensa. Esta suspenso foi utilizada como inculo para cultivo do
microrganismo em Shaker (incubador rotativo).
III.7 Produo de biomassa

A biomassa fngica foi cultivada em um meio lquido utilizando um incubador rotativo.

A suspenso de esporos, preparada no tem III.5, foi transferida para frascos erlenmeyer de
250 mL contendo 100 mL de meio de crescimento com a seguinte composio (g/L) (Kapoor,
Viraraghavan e Cullimore, 1999):

Bacto dextrose 20

Bacto peptona 10

NaCl 0.2

CaCl2 .2H2 O 0.1

KCl 0.1

K2 HPO4 0.5

NaHCO3 0.05

MgSO4 0.25

Fe(SO4 ).7H2 O 0.005

O pH do meio de crescimento foi ajustado para 5, utilizando HCl 1N. importante ressaltar
que todo o material utilizado neste trabalho foi previamente esterilizado a 120C durante 30
minutos.

Uma vez inoculados, os frascos foram agitados a 125 rpm por cinco dias a 25C. A
biomassa foi coletada por filtrao vcuo e submetida a um tratamento alcalino pelo
aquecimento em uma soluo de NaOH 0.5N por 15 minutos para gerar stios ativos e
aumentar a capacidade de biosoro (Kapoor e Viraraghavan, 1998) e ento lavada com gua
deionizada at que o pH da soluo de lavagem estivesse prximo do neutro (7.0 7.2).
Depois de lavada, a biomassa foi seca a 60C por 16 horas e pulverizada para ser utilizada nos
testes de biosoro em batelada.
 Das experincias dos pesquisadores (Volesky e Holan, 1995), sabe-se que existem um
grupo de variveis que afetam a biosoro do metal pesado. Algumas destas so: pH,
concentrao da biomassa, concentrao inicial do metal pesado, tempo de reao e a
interao entre elas. O efeito destas variveis e suas interaes no processo de biosoro do
cdmio metlico foram estudados neste trabalho.

III.8 Caracterizao fsicoqumica da gua de produo

A gua de produo foi coletada do emissrio submarino da estao de tratamento de

efluentes de Guamar - RN. As concentraes dos metais pesados presentes na gua de
produo foram determinadas diretamente por absoro atmica. Utilizou-se um
espectrofotmetro de absoro atmica (EAA). A seguir so apresentados as tcnicas de
preparao das solues padres para os metais analisados (Eaton, Clesceri e Greenberg,
1995):

Preparao da soluo padro

Cdmio: Dissolveu-se 1,0 g de cdmio metlico em um volume mnimo de cido ntrico 1:1.
Dilui-se para 1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Cd.

Chumbo: Dissolveu-se 1,0 g de chumbo metlico em uma soluo de cido ntrico 1:1. Dilui-
se para 1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Pb.

Cobre: Dissolveu-se 1,0 g de cobre metlico em um volume mnimo de cido ntrico 1:1 e
dilui-se para 1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/l de Cu.

Cromo: Dissolveu-se 1,0 g de cromo metlico em uma soluo de cido clordrico 1:1 com
um ligeiro aquecimento. Resfriou-se e diluiu-se para 1 litro para dar uma soluo de
1000mg/L de Cr.

Ferro: Dissolveu-se 1,0 g de ferro metlico em 20 ml de cido clordrico 1:1 e diluiu-se para
1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Fe.
Nquel: Dissolveu-se 1,0 g de nquel metlico em uma soluo de cido ntrico 1:1 e diluiu-se
para 1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Ni.

Prata: Dissolveu-se 1 g de prata em 20 ml de uma soluo de cido ntrico e diluiu-se

quantitativamente para 1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Ag.

Zinco: Dissolveu-se 1,0 g de zinco metlico em 40 ml de cido clordrico 1:1 e diluiu-se para
1 litro para dar uma soluo de 1000 mg/L de Zn.

A amostras foram diludas e digeridas de modo que as concentraes encontradas

estivessem dentro das curvas de calibrao de cada metal (Figura 9), mas no muito prximas
ao limite de deteco do mtodo.
 Cdmio Chumbo
1 1
Absorbncia

Absorbncia
0,8 0,8

0,6 0,6

0,4 0,4

0,2 0,2

0 0
0 1 2 3 4 0 10 20 30 40

Concentrao (mg/L) Concentrao (mg/L)

Cobre Cromo
1 1
Absorbncia

Absorbncia
0,8 0,8

0,6 0,6

0,4 0,4

0,2 0,2

0 0
0 2 4 6 8 10 0 5 10 15 20

Concentrao (mg/L) Concentrao (mg/L)

Ferro Nquel
1 1
Absorbncia
Absorbncia

0,8 0,8

0,6 0,6

0,4 0,4

0,2 0,2

0 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 5 10 15 20 25 30

Concentrao (mg/L) Concentrao (mg/L)

Prata Zinco
1
1
Absorbncia

Absorbncia

0,8 0,8

0,6 0,6

0,4 0,4

0,2 0,2

0 0
0 0,5 1 1,5 2
0 2 4 6 8 10
Concentrao (mg/L) Concentrao (mg/L)

FIGURA 9. Curvas de calibrao dos metais estudados

 Para uma anlise mais precisa, o mtodo determina que o equipamento seja calibrado
com uma soluo denominada branco, tendo sido utilizada, neste trabalho, gua destilada para
este fim.

O mtodo de espectrofotometria de absoro atmica consiste na aspirao da amostra

para uma chama e sua posterior atomizao. A soluo do elemento em estudo vaporizada
na chama e dispe-se uniformemente em pequeninas gotas, formando o aerosol (Gonalves,
1990; Eaton, Clesceri e Greenberg, 1995). Neste trabalho utilizou-se a chama de ar-acetileno
onde o ar funciona como comburente e o acetileno como combustvel. uma chama
totalmente transparente numa larga gama espectral, apresentando ao mesmo tempo uma baixa
emisso.

A fonte utilizada para a obteno das linhas de emisso foi uma lmpada do ctodo-oco,
que possui como componentes ativos o ctodo feito ou revestido do elemento em estudo e um
nodo constitudo apenas por um fio metlico. Estas lmpadas so altamente estveis, o que
aumenta a reprodutibilidade do mtodo.

A proximidade entre os valores encontrados experimentalmente e os tericos determina

a exatido da leitura. Sendo este um mtodo comparativo, a qualidade dos padres influncia
consideravelmente na preciso dos dados obtidos, o que sugere a utilizao de metais com
elevado grau de pureza na preparao das solues padres.

Para se obter uma boa reprodutibilidade necessrio controlar todos os parmetros

variveis, como: solvente, emissor, chama, altura da zona de seleo da chama, largura da
fenda bem como todos os fatores relacionados com a prpria natureza da amostra.

A anlise apresenta uma boa preciso se o aparelho obtiver reprodutibilidade nos

seguintes aspectos (Gonalves, 1990):

q Boa reprodutibilidade ao medir uma soluo vrias vezes sob condies de trabalho
praticamente invariveis;
q Estabilidade das leituras, ou registro de sinal, para uma s soluo sob uma longa
alimentao;

q Reprodutibilidade de resultados de uma sesso de trabalho para outra.

Em virtude das flutuaes que ocorrem normalmente no sistema de emisso, difcil

conseguir uma reprodutibilidade melhor que 0,5%. O que se obtm comumente so
coeficientes de variao entre 0,5 e 1,0% para a maioria das anlises, desde que se trabalhe
em boas condies operacionais.

As tabelas 11 e 12 fornecem as condies operacionais fixas e variveis utilizadas

durante a execuo do trabalho experimental.

TABELA 11. Condies operacionais fixas para leitura dos metais em EAA.

Condies operacionais fixas

Parmetros Ag/Cd/Cu/Ni Pb/Fe/Zn Cr

Combustvel Acetileno Acetileno Acetileno

Comburente Ar Ar Ar

Lmpada Ctodo - oco Ctodo - oco Ctodo - oco

Corrente da lmpada 4 mA 5 mA 7 mA

Estequiometria da chama Oxidante Oxidante Redutora

TABELA 12. Condies operacionais variveis para leitura dos metais em EAA.

Condies operacionais variveis

Metais Comprimento de onda Abertura da fenda Escala tima de trabalho
(nm) (nm) (g/L)
328,1 0,5 0,02 - 10
Ag
338,3 0,5 0,06 - 20
228,8 0,5 0,02 - 3
Cd
326,1 0,5 20 - 1000
357,9 0,2 0,06 - 15
425,4 0,2 0,4 40
Cr 428,9 0,5 1 100
520,8 0,2 20 2600
520,4 0,2 50 - 6000
324,7 0,5 0,03 10
327,4 0,2 0,1 24
217,9 0,2 0,2 60
Cu 218,2 0,2 0,3 80
222,6 0,2 1 280
249,2 0,5 4 800
244,2 1,0 10 - 2000
248,3 0,2 0,06 15
372,0 0,2 1 100
Fe
386,0 0,2 1,5 200
392,0 0,2 20 - 3200
232,0 0,2 0,1 20
341,5 0,2 1 100
Ni 352,4 0,5 1 100
351,5 0,5 3 180
362,5 0,5 100 - 8000

217,0 1,0 0,1 30

283,3 0,5 0,5 50
Pb 261,4 0,5 5 800
202,2 0,5 7 1000
205,3 0,5 50 - 8000
213,9 1,0 0,01 2
Zn
307,6 1,0 100 - 14000
III.9 Experimentos de biosoro em batelada

Experimentos de biosoro em batelada foram realizados separadamente para estudar o

efeito do pH, tempo, quantidade de biomassa e concentrao inicial do metal pesado na
remoo do cdmio metlico. Solues estoque do metal (100 mg/L) foram preparadas
utilizando cdmio metlico (99,99%, MERCK). Foram utilizadas solues de hidrxido de
sdio e cido ntrico para ajustar o pH no valor desejado. As concentraes do metal pesadas
foram determinadas a partir de um espectrofotmetro de absoro atmica. Todos os
experimentos de biosoro foram realizados em frascos erlenmeyer de 250 mL, contendo 75
mL de soluo de cdmio e agitados a 125 rpm em um shaker rotacional temperatura de
25C (Kapoor, Viraraghavan e Cullimore, 1999). Todos os experimentos foram realizados em
duplicata e valores mdios foram utilizados na anlise dos dados.

A quantidade de on metlico (mg) biosorvido por g (peso seco) da biomassa e a

eficincia de biosoro foram calculadas utilizando as equaes 14 e 15, respectivamente:

Ci C f
q = V (14)
m

Ci C f
E = (15)
Ci

Onde, q a quantidade de metal biosorvido por g de biomassa; Ci a concentrao inicial do

on metlico, mg L-1 ; Cf a concentrao final do on metlico, mg L-1 ; m a massa do
biosorvente na mistura reacional, g, V o volume da mistura reacional, L e E a eficincia de
biosoro (%).
 III.9.1 Determinao das variveis de operao do processo de biosoro

III.9.1.1 Efeito do pH na biosoro

Valores do pH da soluo metlica (75 mL) foram ajustados para 2,0 e incrementados
de 0,5 unidade entre 2,5 e 6,5. As solues do metal foram colocadas em contato com a
biomassa (0,1 g) por 15 horas em um shaker rotacional. O pH da mistura reacional no foi
controlado depois do incio dos experimentos. O pH final da mistura reacional foi medido e a
amostra foi filtrada vcuo atravs de uma membrana de acetato de celulose de 0.47 m.
Amostras do filtrado foram utilizados para anlise da concentrao do metal dissolvido. Com
os resultados foi possvel determinar a faixa de pH que produziu um maior eficincia na
remoo do metal pesado.

III.9.1.2 Cintica de biosoro

A avaliao da cintica de biosoro do cdmio pela biomassa de Aspergillus Niger foi

realizada em frascos erlenmeyer de 250 mL, contendo 75 mL da soluo de cdmio e cerca de
0,1 g de biomassa. A biomassa foi colocada em contato com a soluo metlica mantida sob
agitao constante (125 rpm) em um shaker rotacional. Amostras da soluo de cdmio foram
retiradas em diferentes intervalos de tempo, filtradas a vcuo atravs de uma membrana de
acetato de celulose de 0,47 m e analisadas em relao concentrao de cdmio em
espectrofotmetro de absoro atmica. Os nveis inferior e superior do tempo de reao
foram obtidos a partir da anlise dos resultados experimentais.

III.9.1.3 Efeito da quantidade de biomassa

Os experimentos de soro para avaliar o efeito da quantidade de biomassa na eficincia

de biosoro foram realizados em frascos erlenmeyer de 250 mL. Em cada frasco, uma certa
quantidade de biomassa (0,01 0,2 g) foi colocada em contato com 75 mL de soluo de
cdmio a um pH 5,0 e a mistura reacional foi agitada durante 6 horas (tempo necessrio para
que o equilbrio fosse atingido), em um shaker rotacional 125 rpm. Brancos, livre de metal e
livre de biomassa, foram utilizados como controle. Ao final do ensaio, a soluo de cdmio
foi separada da biomassa A concentrao inicial do cdmio metlico utilizados nestes
experimentos foi de aproximadamente 5,0 mg/L.

III.9.1.4 Efeito da concentrao inicial do metal e determinao da isoterma

de biosoro

Para determinao do efeito da concentrao inicial do metal na capacidade de

biosoro foram realizados simulaes com concentraes maiores do que presente na gua
de produo, pois estas concentraes estavam abaixo do limite de deteco do
espectrofotmetro de absoro atmica ((VARIAN SpectrAA 10 PLUS) disponvel no
departamento de engenharia qumica da UFRN. Concentraes iniciais de cdmio metlico
variando entre 5 90 mg/L (75 mL) foram colocadas em contato com a biomassa (0,1 g) em
um shaker rotacional (125 rpm) a um pH 5,0. A soluo de cdmio foi separada da biomassa
atravs de filtrao vcuo atravs de uma membrana de acetato de celulose (tamanho do
poro = 0,45 m). A concentrao inicial e de equilbrio de cada amostra foi analisada em
relao a concentrao de cdmio em espectrofotmetro de absoro atmica. A quantidade
de metal biosorvida (q) e a eficincia de biosoro (E) foram calculadas a partir das equaes
14 e 15.

A isoterma de biosoro foi determinada a partir dos resultados obtidos da capacidade

de biosoro (q) em funo da concentrao de equilbrio do cdmio metlico na soluo. O
modelo de Langmuir e Freundlich, representado pelas equaes 3 e 4. Foram utilizados para
ajustar os dados de equilbrio experimentais.

Com os nveis inferior e superior das variveis estudadas realizou-se um planejamento

experimental . nvel de laboratrio. Isto para obter os melhores valores destas variveis, para
que os testes de biosoro com a gua de produo obtivesse os melhores resultados.
III.10 Planejamento experimental

A modelagem do processo de biosoro estudado a nvel de laboratrio foi realizada

atravs de um planejamento experimental. Neste estudo utilizaram-se os programas
MODREG e STATISTIC for Windows, Release 5.5, consistindo em um planejamento
experimental com ponto central. Realizaram-se 27 experimentos, sendo os 16 primeiros com a
combinao (nvel superior e inferior) das variveis independentes, 3 no ponto central e 8
experimentos a uma distncia de 1,2 do ponto central (em variveis codificadas) e portanto
so localizadas de acordo com as coordenadas mostradas nas oito ltimas linhas da tabela 17.
Para cada experimento determinou-se a eficincia de biosoro (E), definida pela equao 15.

III.11 Desoro de ons metlicos biosorvidos e regenerao da biomassa

Depois da realizao dos experimentos de biosoro (tem III.8), procedeu-se a

desoro do cdmio metlico. Segundo Kapoor, Viraraghavan e Cullimore (1999), o cido
ntrico 0,05 N foi capaz de desorver cerca de 99% do cdmio metlico biosorvido, sendo este
utilizado na eluio do cdmio metlico.

A biomassa carregada de metal foi lavada com gua deionizada por 15 minutos e
colocada em contato com 25 mL de cido ntrico 0,05N por 1 hora temperatura de 25C em
um shaker rotacional. A biomassa foi separada da soluo por filtrao a vcuo e lavada com
gua deionizada at o pH da soluo de lavagem estivesse entre 5,0 5,4 e ento agitada em
uma soluo 0,001M de Ca+2 , Mg+2 e K+ por 30 minutos a 125 rpm em shaker rotacional. A
biomassa regenerada foi secada em estufa a 600 C e a capacidade de biosorver o cdmio
metlico foi examinada. O ciclo de biosoro-desoro do cdmio metlico biosorvido-
regenerao da biomassa foi repetido quatro vezes a fim de se determinar a capacidade de
biosoro da biomassa regenerada.
III.12 Testes de biosoro com os metais pesados presente na gua de produo

Testes de biosoro em batelada com as amostras da gua de produo da Petrobrs

foram realizados nvel de laboratrio, levando em considerao os valores das variveis
independente determinados na anlise estatstica. A concentrao inicial dos metais presentes
na gua de produo foi determinada de acordo com o tem III.7. Os experimentos foram
realizados em shaker pelo contato de 75 ml da amostra com a biomassa de Aspergillus Niger.
A amostra foi filtrada a vcuo atravs de uma membrana de acetato de celulose (0,47 m). A
anlise da concentrao final foi realizada no ITEP (Instituto de Tecnologia de Pernambuco
Recife), devido a existncia de um espectrofotmetro de absoro atmica por plasma, em
relao aos metais ferro e cdmio que apresentaram concentraes acima do permitido pelo
padro de potabilidade da gua para metais pesados (Tabela 5). A eficincia do tratamento na
remoo destes metais foi determinada pela equao 15.
 ___________________________
CAPTULO IV
RESULTADOS E DISCUSSES
_____________________________
IV RESULTADOS E DISCUSSES

IV.1 Introduo

Este captulo constitui a apresentao e discusso dos resultados obtidos

experimentalmente visando a otimizao e compreenso do processo de remoo de ons
metlicos por biosoro.

A primeira etapa do processo envolveu a caracterizao fsico-qumica da gua de

produo e a seleo do metal pesado estudado. A segunda etapa envolveu os experimentos
de biosoro em batelada para estudar o efeito do pH, tempo, quantidade de biomassa e
concentrao inicial do metal pesado na taxa de biosoro metlica.

Aps a obteno dos valores timos destas variveis, realizou-se os testes de biosoro
com os metais pesados presentes na gua de produo para determinao da eficincia de
remoo metlica.

IV.2 Caracterizao fsico qumica da gua de produo

A gua de produo foi coletada do emissrio submarino da ETE GMR (Estao de

tratamento de efluentes de Guamar) e analisada no Laboratrio qumico de Guamar RN.
A amostra foi concentrada para determinao exata da concentrao do metal pesado em
soluo. A tabela 13 mostra os resultados da anlise fsico-qumico para os principais metais
pesados poluidores encontrados na gua de produo gerada nos campos de petrleo do RN.
 TABELA 13 - Boletim de resultados da anlise da gua.
Limite aceitvel
Parmetros Unidade (Resoluo CONAMA 20) Resultados:
Artigo N 4 Artigo N21
pH Adm. 6,0/9,0 5,0/9,0 7,42
Teor de leos e Graxas (TOG) mg/L 0,0 20,0 7,40
Cdmio mg/L 0,001 0,2 0,004
Chumbo mg/L 0,03 0,5 0,02
Cobre mg/L 0,02 1,0 0,006
Cromo Total mg/L 0,5 2,0 0,007
Ferro Solvel mg/L 0,3 15,0 0,6
Mercrio mg/L 0,0002 0,01 <0,0002
Nquel mg/L 0,025 2,0 <0,01
Prata mg/L 0,01 0,1 <0,01
Zinco mg/L 0,18 5,0 0,12

Obs:
Nota: Os resultados dessas anlise aplicam-se a to somente s amostras coletadas

As concentraes dos metais pesados foram comparadas com a concentrao limite

aceitvel pelo artigo 4 da resoluo CONAMA 20, que dispe sobre gua para irrigao,
recreao, criao de peixes e consumo aps tratamento simplificado. A partir dos resultados
obtidos, constatou-se que o cdmio e o ferro solvel apresentaram concentraes acima do
permitido pela legislao ambiental estudada neste trabalho (artigo 4 do CONAMA 20),
portanto, sugere-se realizar um tratamento biotecnolgico, baseado na biosoro, para
remoo destes metais nveis aceitveis pela legislao ambiental. Para os testes de
biosoro em batelada, utilizou-se uma soluo sinttica de cdmio com concentraes
maiores do que a presente na gua de produo, pois a faixa de deteco (0.2 3 mg/L de
cdmio) do espectrofotmetro de absoro atmica disponvel no laboratrio de Engenharia
Qumica da UFRN maior do que a verificada na tabela 13.
IV.3 Experimentos de biosoro em batelada

IV.3.1 Influncia do pH sobre a biosoro de cdmio pelo Aspergillus niger

O pH da soluo aquosa um importante parmetro controlador em processos de

biosoro de ons metlicos. A influncia da concentrao de ons hidrognio foi examinada
pela biomassa de Aspergillus niger tratada com uma soluo de NaOH 0,05N em testes em
batelada utilizando um incubador rotativo (Shaker).

Nos experimentos de biosoro em batelada variou-se o pH entre 2 e 6,5 e a

concentrao da soluo sinttica de cdmio e a quantidade de biomassa foram mantidos
constantes (9 mg/L e 0,1 g), a uma temperatura de 25C e uma velocidade de agitao de 125
rpm. O efeito do pH sobre a biosoro do cdmio pela biomassa de Aspergillus niger pode ser
observado pela figura 10.

FIGURA 10. Biosoro do cdmio por Aspergillus Niger dependente do valor do pH

A partir dos resultados obtidos observou-se que pouca ou nenhuma biosoro do cdmio
metlico ocorreu para valores de pH menor que 3,0. A capacidade de remoo do metal
pesado aumentou rapidamente com o aumento do pH entre 3,0 e 4,0 e a partir de pH 4,0 a
capacidade de biosoro continuou a aumentar, mas de forma bem menos pronunciada. Este
fato pode ser explicado pelo aumento da densidade de carga negativa na superfcie da clula
causando a desprotonao dos stios ligantes da clula, aumentando a sua capacidade de
biosoro. Verificou-se que o pH desempenhou um papel importante no processo de soro.
Para o Aspergillus niger, a biosoro tima (mg de Cd/g de biomassa) e uma baixa
concentrao de equilbrio (mg de Cd/L) foram alcanadas numa faixa de pH variando entre
4,0 e 5,5. Sendo esta faixa escolhida para realizao do planejamento experimental.

Um teste com pH 7,0 (a 25C) foi realizado, sendo observada a existncia de um

precipitado de cdmio quando as solues foram filtradas. Alm disso, a anlise de um frasco
utilizado como controle (sem a presena de biosorvente) revelou que houve reduo na
concentrao de cdmio entre o incio e o final do experimento.

Esta dependncia do pH verificada na figura 10 pode ser explicada por uma competio
dos ons metlicos e dos prtons pelos mesmos stios de ligao, uma vez que nesta faixa de
pH o cdmio se apresenta como um ction, podendo se ligar a uma superfcie negativamente
carregada. Isto explica os resultados obtidos, em que as melhores capacidades de soro
foram verificados para valores altos do pH. Este fato pode ser usado na prtica para
regenerao do metal pesado carregado pela biomassa pela desoro dos ons metlicos
adsorvidos num pH abaixo de 2.

O efeito do pH sobre a biosoro de vrios metais tem sido objeto de estudo de vrios
pesquisadores. O comportamento obtido neste trabalho, em que a capacidade de soro do
ction aumentou com o aumento do pH, foi obtido em vrios outros estudos, com diferentes
ctions, tanto para biomassa fngica (Tsezos e Volesky, 1981; Guibal, Roulph e Le Cloirec,
1992) como para biomassa de algas (Darnall et al., 1986; Kuyucak e Volesky, 1989a, Aksu e
Kutsal, 1991; Garnham, Codd e Gaad, 1993; Volesky e Prasetyo, 1993).

Segundo Sears (1986) a troca inica o principal mecanismo envolvido na biosoro de

metais pesados por biomassa fngica, sendo os grupos carboxila, fosfato, sulfato e amina
apontados como os principais stios envolvidos. Como estes grupos so cidos, sua
disponibilidade dependente do pH. Na faixa de pH entre 3,5 e 5,5 os grupos carboxila geram
superfcies negativamente carregadas, e muitos metais apresentam-se como ctions. Assim, as
interaes eletrostticas entre as espcies catinicas e a superfcie celular negativamente
carregada podem ser responsveis pela biosoro dos metais.
 O pH afeta tambm a especiao do on metlico na soluo, ocorrendo um decrscimo
de solubilidade dos complexos metlicos com o aumento do pH. Apesar da soro aumentar
com o decrscimo da solubilidade, h limitaes na faixa de pH vivel para o estudo da
biosoro. Valores de pH que provoquem a precipitao dos complexos metlicos devem ser
evitados durante experimentos de soro, uma vez que a distino entre soro e precipitao
na remoo metlica seria difcil (Schiewer e Volesky, 1995).

Atravs da anlise da figura 11 observa-se que as espcies Cd+2 prevalecem somente a

valores de pH inferiores a 6,0, o que favorece a formao de complexos com uma extensa
variedade de ligantes, incluindo ligantes orgnicos sintticos e naturais. importante ressaltar
que as espcies catinicas esto presentes em maiores propores a baixos pHs, e que, a
valores de pH superiores a 6, comea a haver a precipitao do metal, conforme foi verificado
experimentalmente.

FIGURA 11. Especiao do cdmio em funo do pH (Morel, Mcduff e Morgan, 1973).

Outro fato observado durante os ensaios foi um aumento do pH da soluo aps o

contato com a biomassa. A tabela 14 o aumento do pH da soluo aps o contato com a
biomassa.
 TABELA 14. Aumento do pH da soluo aps os experimentos de biosoro

pHinicial 2,31 3,04 3,53 3,98 4,44 5,51 6,03 6,45

pHfinal 2,32 3,20 5,50 6,35 6,24 6,56 6,86 6,75

Efeitos similares foram observados por Kuyucak e Volesky (1989a) quando estudaram a
biosoro do cobalto por vrios tipos de algas marinhas, inclusive algas marrons, como o
Sargassum natans. Segundo estes autores, o aumento do pH da soluo pode ser decorrente
da dissoluo de componentes citoplasmticos ou da liberao de alguns ons, como
carbonatos.

IV.3.2 Avaliao da cintica de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger

O estudo cintico do processo de remoo de cdmio pelo Aspergillus niger foi

realizado com o propsito de obter informaes sobre o tempo em que o sistema atingiu o
equilbrio. Para a biomassa morta foram realizados ensaios em shaker rotacional (25C e 125
rpm) utilizando 0,1g do biosorvente e uma soluo sinttica de cdmio (pH = 5,37; [M]0 =
9,70 ppm e V = 75 mL). A biosoro do cdmio em funo do tempo sobre a biomassa de
Aspergillus niger apresentada na figura 12.
 FIGURA 12. Cintica de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger

Atravs dos resultados mostrados na figura 12 observa-se que a biosoro do cdmio

aumenta com o tempo de contato e atinge o equilbrio (biosoro constante) aps
aproximadamente 6 horas.

O tempo necessrio para que o equilbrio entre as fases seja atingido funo de vrios
fatores, entre eles o tipo de biomassa (quantidade e tipos de stios envolvidos na biosoro),
tamanho e forma da biomassa (ativa ou inativa, livre ou imobilizada), alm do metal
envolvido no sistema de biosoro.

Assim, a literatura apresenta testes cinticos em que o tempo de contato entre as fases
varia de duas horas (Aksu e Kutsal, 1991) a mais de dez dias (Nourbakhsh et al., 1994).

Este ensaio revelou ainda que a cintica de biosoro do cdmio pela biomassa de
Aspergillus niger rpida, uma vez que em 5 minutos de contato da biomassa com a soluo
de cdmio, o sistema j alcanava cerca de 84% da capacidade de saturao da biomassa
(figura 13).
FIGURA 13. Evoluo da frao de remoo do cdmio pela biomassa de Aspergillus niger

Verificou-se que em 1 hora a biomassa atingiu 94% da sua capacidade de saturao e

que a partir de 6 horas no ocorreu remoo significativa de cdmio. Portanto, escolheu-se
uma faixa de tempo de 1 e 6 horas como limite inferior e superior para ser usado no
planejamento experimental.

A seguir so apresentados, a ttulo de ilustrao, resultados obtidos por alguns autores,

em estudos feitos com fungos, algas e diferentes metais. Ressalta-se que os diferentes tipos de
biosorventes, bem como os diferentes metais torna extremamente difcil estabelecer algum
parmetro de comparao entre os resultados.

Ross e Townsley (1986) avaliaram a biosoro do cobre, cdmio e zinco pela biomassa
fngica de P. spinulosum, e verificaram 75% da remoo destes metais foram alcanadas
dentro de 5 minutos de contato, indicando um processo de soro bastante rpido.

Sandau et al. (1996) utilizando a alga marinha Fucus vesicolusus na biosoro do

cdmio, cobre e zinco, tambm evidenciaram uma cintica rpida, verificando que em 5
minutos de contato o sistema j atingia 80% da capacidade de biosoro do metal.

Kapoor, Viraraghavan e Cullimore, (1998) verificaram que a biosoro do cdmio,

chumbo, cobre e nquel pelo Aspergillus niger consistiu de duas fases: uma fase inicial onde a
soro foi rpida e contribuiu significativamente para a biosoro de equilbrio e uma fase
mais lenta cuja contribuio para a biosoro metlica total foi relativamente pequena.

Yang e Volesky (1996) tambm obtiveram resultados de rpido equilbrio trabalhando

com alga marinha Sargassum fluitans para biosoro de cdmio. Cerca de 75% da capacidade
de biosoro foi atingida em 15 minutos de contato, sendo que o equilbrio foi alcanado em 3
horas.

A constante cintica de adsoro para o processo de biosoro do cdmio sobre a

biomassa de Aspergillus niger foi determinada utilizando a equao de Lagergren, que
representa uma cintica de primeira ordem, ou seja, aquela cuja velocidade proporcional
concentrao de apenas um dos componentes da reao, sendo dada pela expresso (Ngah e
Liang, 1999; Zhang, Zhao, Yu et al., 1998).

log (q e qt ) = log q e
Kt
(16)
2,303

onde qt a quantidade de cdmio biosorvida (mg/g) em um tempo t, qe a quantidade

biosorvida no equilbrio (mg/g), t o tempo de biosoro e K a constante cintica de
biosoro (min-1 ) que pode ser determinada atravs de um grfico (figura 14) de log (qe-qt ) x t
que fornece uma reta de declividade K/2,303.
 FIGURA 14. Determinao da constante cintica de biosoro (K)

O modelo de lagergren descreveu adequadamente a cintica de biosoro do cdmio

pelo Aspergillus niger com coeficiente de correlao elevado (R2 = 0,96). O valor obtido da
constante cintica de biosoro foi de 7,6 x 10-3 min-1 .

A cintica de soro controlada por vrios fatores, incluindo os processos difusivos.

Para a difuso seis passos podem ser enumerados e aplicados remoo de cdmio (Janson-
Charrier, Guibal, Roussy et al., 1996):

(1) Transferncia do cdmio da fase volumtrica (bulk) at a camada limite ao redor da

superfcie do slido;
(2) Transporte do metal da camada limite at a superfcie do adsorvente;
(3) Transferncia do cdmio da superfcie at os stios ativos no interior da partcula;
(4) Remoo do ons metlicos por complexao, soro, troca inica e fenmenos de
precipitao intrapartcula;
(5) Difuso de calor na partcula;
(6) Difuso de calor na soluo.

O primeiro passo est relacionado com a agitao e homogenidade da amostra, nos

experimentos realizados, a agitao fornecida foi suficiente para desprezar esta etapa como
fase controladora da difuso.
 A soro um fenmeno exotrmico, o que faz com que a transferncia de calor deva
ser considerada mas, por ser a gua um excelente condutor trmico, os passos 5 e 6 foram
negligenciados.

O segundo passo est relacionado com a resistncia ocasionada pelo filme ao redor da
partcula e o terceiro passo est relacionado com a difuso intrapartcula. A soro (passo 4)
uma fase rpida e no limitante. Observou-se que o processo de biosoro do cdmio sobre o
Aspergillus niger seguiu o modelo descrito acima, indicando que o passo controlador do
processo difusivo foi a difuso no interior do biosorvente.

IV.3.3 Influncia da quantidade de biomassa sobre a biosoro de cdmio pelo

Aspergillus niger

Para determinao da influncia da quantidade de biomassa no processo de biosoro do

cdmio pelo Aspergillus niger foram realizados ensaios em shaker rotacional (25C e 125
rpm) utilizando um tempo de contato entre as fases de 6 horas (tempo necessrio para se
atingir o equilbrio) e uma soluo sinttica de cdmio (pH = 5; [M]0 = 5,3 ppm e V = 75
mL). Os resultados obtidos para estes experimentos so mostrados na figura 15.
 FIGURA 15. Biosoro do cdmio por Aspergillus niger dependente da quantidade de
biomassa

Os resultados obtidos permitem concluir que a quantidade de biomassa um importante

parmetro que afeta a eficincia e a capacidade de biosoro. Da anlise da figura 15 verifica-
se que h um aumento da eficincia e um decrscimo da capacidade de soro medida que
aumentou a quantidade de biomassa. Verificou-se tambm que para a concentrao inicial do
metal utilizado no ocorreu mudana na eficincia de biosoro a partir de 0,05g de biomassa
utilizada. A curva da eficincia de soro foi utilizada como parmetro para a anlise
estatstica e definiu-se 0,03 e 0,05g como os nveis inferior e superior para serem utilizados no
planejamento experimental.

Resultados semelhantes aos obtidos neste trabalho, em que a capacidade e a eficincia

de soro aumentou e diminuiu, respectivamente com o aumento da quantidade de biomassa,
foram tambm observados por Sandau, Sandau, Pulz, et al., (1996) na biosoro de cdmio
pela alga marinha Fucus vesicolusus e por Blanco, Sans, Llama, et al., (1999) na soro de
nquel pela bactria Phormidium laminosum.
 IV.3.4 Influncia da concentrao da soluo sinttica de cdmio

Com o propsito de verificar a influncia da concentrao inicial da soluo sinttica de

cdmio no processo de soro pela biomassa de Aspergillus niger foram realizados ensaios
em shaker rotacional (25C, 125 rpm e V = 75 mL) utilizando um tempo de contato entre as
fases de 6 horas (tempo necessrio para se atingir o equilbrio) e variando a concentrao
inicial do metal pesado de 5 a 42 mg L-1 para valores fixos de pH e quantidade de biomassa
(5,45 e0,05g), respectivamente. No foram utilizados valores de concentrao metlica a
nveis da presente na tabela 13, pois o espectrofotmetro de absoro atmica pertencente
sala de equipamentos do departamento de Engenharia Qumica da UFRN no detecta
concentraes to baixas do metal pesado. Os resultados obtidos para estes experimentos so
mostrados na figura 16.

FIGURA 16. Biosoro do cdmio por Aspergillus niger dependente da concentrao inicial
de cdmio

Os resultados obtidos mostraram que com o aumento da concentrao inicial do metal a

capacidade de soro aumentou at uma concentrao inicial de 30 mg/L, ocorrendo um
decrscimo a partir desta concentrao. A eficincia de soro diminuiu com o aumento da
concentrao inicial do cdmio metlico.
 A reduo na eficincia de soro de cerca de 62% com o aumento da concentrao
inicial do cdmio de 5 para 40 mg/L, pode ser devido a saturao da biomassa ou a uma
possvel inibio da biomassa pela presena de altas concentraes de cdmio metlico.

Os resultados obtidos permitem concluir que para se obter elevada eficincia na

remoo do metal pesado necessrio que o efluente apresente baixas concentraes do
metal, o que torna vivel aplicao na remoo de metais pesados presentes em guas de
produo da indstria de petrleo (tabela 13). Devido a limitao na faixa de deteco do
espectrofotmetro de absoro atmica disponvel no PPGEQ (Programa de Ps Graduao
em Engenharia Qumica) da UFRN a faixa de concentrao inicial do cdmio metlico
escolhida para ser utilizada no planejamento experimental foi de 5 e 10 mg/L.

Resultados semelhantes aos obtidos neste trabalho, em que a capacidade e a eficincia

de soro aumentou e diminuiu, respectivamente com o aumento da concentrao inicial do
cdmio metlico, foram tambm observados por Sandau, Sandau, Pulz, et al., (1996) na
biosoro de cdmio pela alga marinha Fucus vesicolusus e por Lodi, Solisio, Converti, et al.,
(1998) na soro de cdmio pela bactria Sphaerotilus natans.

Os resultados da escolha do domnio experimental esto apresentados na tabela 15.

TABELA 15 Resultados do domnio experimental

Fatores Unidade Smbolo Nvel Nvel Nvel Nvel Nvel
(-1,2) (-1) (0) (+1) (+1,2)

pH - A 3,85 4,0 4,75 5,5 5,65

Concentrao mg/L B 4,50 5,0 7,5 10,0 10,5
inicial de cdmio
Quantidade de grama C 0,028 0,03 0,04 0,05 0,052
biomassa
Tempo minutos D 30 60 210 360 390
 IV.3.5 Tratamento dos dados de equilbrio

Quando uma quantidade de biosorvente colocada em contato com um fluido contendo

o soluto, a biosoro ocorre at que o equilbrio seja atingido. Dados de equilbrio obtidos
experimentalmente so normalmente apresentados na forma de isotermas, que so diagramas
que mostram a variao da concentrao de equilbrio da fase biosorvida com a concentrao
da fase da fluida, a uma temperatura fixa.
O equilbrio de um soluto separado entre as fases slida e lquida descrito por vrios
modelos de isotermas de soro, tais como Langmuir e Freundlich. Para ajustar os dados
experimentais e calcular a capacidade mxima de soro, estes dois mtodos foram aplicados
na forma linearizada.

O modelo de Langmuir supe uma soro monocamada com uma distribuio

heterognea dos stios ativos e da energia de soro, sem que haja interaes entre as
molculas sorvidas e que cada centro ativo da superfcie s pode acomodar uma entidade
sorvida. O modelo de Langmuir descrito pela equao (3).

bq mC e
q= (3)
1 + bC e

Onde qm a capacidade mxima que pode ser atingida e b a constante de Langmuir.

Fisicamente qm representa a concentrao das espcies sorvidas sobre a superfcie quando
uma completa cobertura monocamada atingida.

Os valores de b e qm foram calculados atravs dos dados experimentais de q versus Ce,

utilizando a equao de Langmuir em sua forma linearizada, ou seja:

Ce 1 C
= + e (17)
q bq m q m

onde um grfico de Ce/qe x Ce fornece uma reta de declividade (1/qm) e interseo (1/b qm). O
conhecimento destes valores permite calcular os parmetros b e qm. As retas que melhor
ajustaram os dados experimentais para os dois adsorventes foram obtidas atravs de
procedimentos de ajuste linear. A figura 17 mostra os resultados obtidos para o Aspergillus
niger utilizando o modelo de Langmuir.
FIGURA 17. Isoterma de Langmuir a 25C

Algumas vezes a melhor representao terica para os dados obtidos

experimentalmente, para soro em fase lquida, feita pelo modelo de Freundlich. Esse
modelo sugere uma soro monocamada com interaes laterais entre as molculas sorvidas e
distribuio energtica heterognea dos stios. A equao do modelo de Freundlich dada
por:

1
q = K 'C e n (4)

onde K e so constantes de equilbrio adimensionais caractersticas do sistema em

considerao. Tomando-se o logaritmo em cada lado da equao de Freundlich, obtm-se:

1
log q = log K ' + log Ce (18)
n

O grfico de log q x log Ce fornece uma linha reta cuja declividade 1/n e a interseo
fornece o log K. A figura 18 mostra os resultados obtidos para o Aspergillus niger utilizando
o modelo de Freundlich.
 FIGURA 18. Isoterma de Freundlich a 25C

O grfico referente ao modelo de Freundlich no ser apresentado devido ao grande

desvio apresentado em relao aos dados experimentais. A isoterma de Langmuir
correlacionou melhor os dados experimentais obtidos e portanto foi escolhida como modelo
para representao dos dados de equilbrio.

A figura 19 apresenta os dados de equilbrio do sistema de biosoro do cdmio pelo

Aspergillus niger em pH 5,45 a 25C e a curva do modelo da isoterma de Langmuir obtida
pelo ajuste dos dados experimentais. A quantidade de biomassa utilizada foi de 0,05g.
 FIGURA 19. Modelo de Langmuir para a biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger. pH =
5,5; temperatura = 25C

A tabela 16 apresenta os valores calculados para qm e b, no modelo de Langmuir e de K

e n para o modelo de Freundlich na temperatura estudada e os coeficientes de correlao
obtidos para os modelos utilizados.

TABELA 16. Coeficiente de correlao para os modelos utilizados e parmetros do modelo

de Langmuir e Freundlich.
Freundlich Langmuir
R2 K n R2 qm (mg/g) b (L/g)
O,939 2,810 4,325 0,998 21,162 1,411

IV.4 Planejamento experimental

Com o objetivo de determinar os valores de pH, concentrao inicial de cdmio,

quantidade de biomassa e tempo para que se obtenha uma maior eficincia de biosoro de
cdmio pela biomassa de Aspergillus niger, realizou-se um planejamento experimental com
ponto central dentro da faixa experimental definida no item IV.3. A tabela 17 apresenta a
matriz de planejamento na forma codificada e a tabela 18 apresenta a matriz de planejamento
utilizada neste trabalho e a eficincia observada experimentalmente em cada combinao de
nveis. Ao todo foram realizados vinte e sete ensaios, sendo trs deles repeties no ponto
central.

TABELA 17. Matriz experimental na forma codificada para um planejamento experimental

com ponto central

Experimento A B C D Respostas
1 - - - -
2 + - - -
3 - + - -
4 + + - -
5 - - + -
6 + - + -
7 - + + -
8 + + + -
9 - - - +
10 + - - +
11 - + - +
12 + + - +
13 - - + +
14 + - + +
15 - + + +
16 + + + +
17 0 0 0 0
18 0 0 0 0
19 0 0 0 0
20 -1,2 0 0 0
21 1,2 0 0 0
22 0 -1,2 0 0
23 0 1,2 0 0
24 0 0 -1,2 0
25 0 0 1,2 0
26 0 0 0 -1,2
27 0 0 0 1,2
 TABELA 18. Resultados de um planejamento experimental com ponto central
Experimento A B C D Respostas
1 4,0 5,0 0,03 60 69,76
2 5,5 5,0 0,03 60 85,73
3 4,0 10,0 0,03 60 46,63
4 5,5 10,0 0,03 60 60,50
5 4,0 5,0 0,05 60 91,81
6 5,5 5,0 0,05 60 93,17
7 4,0 10,0 0,05 60 80,83
8 5,5 10,0 0,05 60 89,39
9 4,0 5,0 0,03 360 79,02
10 5,5 5,0 0,03 360 89,71
11 4,0 10,0 0,03 360 66,03
12 5,5 10,0 0,03 360 76,75
13 4,0 5,0 0,05 360 94,23
14 5,5 5,0 0,05 360 94,72
15 4,0 10,0 0,05 360 90,27
16 5,5 10,0 0,05 360 94,02
17 4,75 7,50 0,04 210 93,01
18 4,75 7,50 0,04 210 92,14
19 4,75 7,50 0,04 210 93,01
20 3,85 7,50 0,04 210 69,61
21 5,65 7,50 0,04 210 91,17
22 4,75 4,5 0,04 210 87,49
23 4,75 10,5 0,04 210 82,16
24 4,75 7,50 0,028 210 67,96
25 4,75 7,50 0,052 210 92,51
26 4,75 7,50 0,04 30 83,78
27 4,75 7,50 0,04 390 89,68
 IV.4.1 Anlise do planejamento experimental

A anlise do planejamento experimental foi realizado atravs do pacote computacional

STATIST for Windows, Release 5.5. Os resultados dos efeitos principais e de interao, dos
coeficientes de regresso e da anlise de varincia dos dados obtidos esto apresentados no
Anexo III.

A figura 20 apresenta o grfico de Pareto com nvel de significncia de 95% para

estimativa dos efeitos principais lineares e quadrticos e os efeitos de segunda ordem em
valor absoluto. A magnitude de cada efeito representado pelas colunas e a linha transversal
as colunas correspondente ao valor de p=0,05 indica o quo grande deve ser o efeito para ter
significado estatstico.

Grfico de Pareto
MS Residual=19,84138
p=,05

C(L) 9,49484
B(L) -5,17321
A(L) 4,716265
D(L) 3,823873
B(L) C(L) 3,080685
A(L) C(L) -2,08167
C(Q) -1,9149
A(Q) -1,86048
B(L) D(L) 1,824614
C(L) D(L) -1,73145
A(L) D(L) -,79192
A(L) B(L) ,4708863
D(Q) ,365652
B(Q) -,30324

-1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Efeito estimado (Valor aboluto)

FIGURA 20. Grfico de Pareto dos efeitos do planejamento fatorial

A anlise da figura 20 mostra que os efeitos principais lineares da quantidade de

biomassa, concentrao inicial do cdmio, pH e tempo e o efeito de interao entre a
concentrao inicial de cdmio e a quantidade de biomassa so os mais importantes para a
determinao da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger.

Considerando que um valor de probabilidade de 95% satisfatrio, foi possvel

estabelecer um modelo quadrtico para a funo resposta Y.
Y = 88,29 + 4,83 A 5,30 B + 9,73C + 3,92 D 3,68 A 2 0,60 B 2 3,79C 2 + 0,72 D 2 + 0,52 AB 2,32 AC
0,88 AD + 3, 43BC + 2,03 BD 1,93CD

A anlise de varincia e de regresso demonstraram a significncia estatstica do

modelo, pois o coeficiente de regresso teve um va lor elevado, R2 = 0,94012 e para 95% de
significncia o valor de F calculado para o modelo foi cinco vezes superior ao tabelado,
Fmodelo = 13,46 e F(14/12)tabelado = 2,64. O valores tabelado de F par 95% de significncia so
apresentados no Anexo III.

O modelo linear no foi discutido neste trabalho por apresentar um coeficiente de

regresso mais baixo do que o modelo quadrtico, R2 = 0,76738 Por esta razo preferiu-se
utilizar o modelo quadrtico.

A anlise e varincia assume que as observaes so independentes e normalmente

distribudas com a mesma varincia em cada nvel do fator. Estas suposies devem ser
checadas examinando-se os resduos.

Outra razo para preferir o modelo quadrtico vem do grfico dos resduos (figura 21).
Os resduos deixados pelo modela linear apresentam claramente um comportamento
sistemtico, com os valores progressivamente passando de negativos para positivos e depois
se tornando negativos novamente. Este padro verificado viola a suposio que as
observaes so independentes. Isto sugere que a ordem dos experimentos importante ou
que outras variveis so importantes e no foram includas no planejamento do experimento.
 FIGURA 21. Resduos deixados pelo ajuste de um modelo linear aos valores da
eficincia de biosoro do cdmio dados na tabela 18

Os grficos dos resduos para o modelo quadrtico so apresentados nas figuras 21 e 22.
A figura 21 apresenta o histograma dos resduos e a figura 22 apresenta o grfico dos resduos
versus os valores preditos da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger.

14

12

10

8
Frequncia

0
-12,5 -10,0 -7,5 -5,0 -2,5 0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
Resduo

FIGURA 21. Histograma dos resduos

 FIGURA 22. Resduos deixados pelo ajuste de um modelo quadrtico aos valores da
eficincia de biosoro do cdmio dados na tabela 18

Da anlise da figura 21 percebe-se que os resduos seguem uma distribuio normal,

validando a hiptese de distribuio normal dos resduos da anlise de varincia.

A figura 22 mostra que os resduos parecem flutuar aleatoriamente em torno do valor

zero. Outro fato verificado neste grfico que a varincia dos resduos parece no aumentar
com o valor da resposta. A anlise dos resduos para o modelo quadrtico no revela nenhuma
inadequabilidade sria ou problema no usual com as suposies da anlise de varincia,
justificado o emprego do modelo quadrtico no planejamento experimental.

IV.4.2 Anlise das curvas de isorespostas

O estudo dos efeitos principais, lineares e quadrticos, e de interao sobre a eficincia

de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger (resposta Y) pode ser realizado por meio da
anlises das curvas de isorespostas. Atravs das curvas de isorespostas, faz-se uma busca por
inspeo para se encontrar o ponto de melhor eficincia para a biosoro do cdmio.
 As curvas de isorespostas (figuras 23 a 28) expresso a eficincia de biosoro do
cdmio pelo Aspergillus niger em funo dos efeitos principais, lineares e quadrticos, e de
suas interaes. Uma anlise das mesmas levas aos seguintes comentrios:

q Para a biosoro do cdmio com quantidade de biomassa de 0,04g, tempo de contato entre
as fases de 210 minutos e com concentrao inicial de cdmio prximo ao valor
codificado 1,2 (4,5 ppm), e com pH variando entre 4,22 e 5,65, a eficincia de biosoro
do cdmio pelo Aspergillus niger est por volta de 92,85%.

q Para a biosoro do cdmio com concentrao inicial de cdmio de 7,5 ppm, tempo de
contato entre as fases de 210 minutos e com quantidade de biomassa prxima ao valor
codificado +1,2 (0,052g), e com pH variando entre 4,45 e 5,65, a eficincia de biosoro
do cdmio pelo Aspergillus niger est por volta de 90,59%.

q Para a biosoro do cdmio com concentrao inicial de cdmio de 7,5 ppm, quantidade
de biomassa de 0,04g e tempo de contato entre as fases prximo ao limite superior +1,2
(390 minutos), e com pH variando entre 4,82 e 5,65, a eficincia de biosoro do cdmio
pelo Aspergillus niger est por volta de 93,54%.

q Para a biosoro do cdmio com pH de 4,75, tempo de contato entre as fases de 210
minutos e concentrao inicial de cdmio prxima ao limite inferior 1,2 (4,5 ppm), e com
quantidade de biomassa variando entre 0,032 e 0,052 g, a eficincia de biosoro do
cdmio pelo Aspergillus niger est por volta de 92,11%.

q Para a biosoro do cdmio com pH de 4,75, quantidade de biomassa de 0,04g e

concentrao inicial de cdmio prxima ao limite inferior 1,2 (4,5 ppm), e para um
tempo de contato entre as fases variando entre 300 e 390 minutos, a eficincia de
biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger est por volta de 95,11%.

q Para a biosoro do cdmio com pH de 4,75, concentrao inicial de cdmio de 7,5 ppm e
tempo de contato entre as fases prximo ao limite superior +1,2 (390 minutos), e com
quantidade de biomassa variando entre 0,044 e 0,052 g, a eficincia de biosoro do
cdmio pelo Aspergillus niger est por volta de 94,89%.
 Da anlise anterior deduz que para se obter elevadas eficincia de biosoro de cdmio
pelo Aspergilus niger deve-se trabalhar com um pH elevado variando entre 4,68 e 5,65. pH
maiores no foram estudados neste trabalho devido ao fato que em pH elevado a solubilidade
do complexo muito baixa podendo ocorrer a precipitao do metal e portanto seria difcil
distinguir a biosoro da precipitao.

Os resultados tambm demonstraram que a eficincia de biosoro aumentou com o

decrscimo da concentrao inicial de cdmio. O que mostra a potenciabilidade desta tcnica
na remoo de metais pesados presentes em correntes de produo da indstria de petrleo, j
que estas guas apresentam baixas concentraes de metais pesados.

Podemos concluir tambm que a utilizao de uma elevada quantidade de biomassa

(variando entre 0,044 e 0,052 g) e de um elevado tempo de contato entre as fases (390
minutos) favoreceram a remoo do cdmio pelo Aspergillus niger.

Os resultados finais deste planejamento mostraram que o processo de biosoro do

cdmio pelo Aspergillus niger pode ser desenvolvido com bons rendimentos, trabalhando com
um pH de 5,0, uma concentrao inicial de cdmio de 4,5 ppm, uma quantidade de biomassa
de 0,052g e um tempo de contato entre as fases de 390 minutos.
FIGURA 23. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus
niger em funo do pH (A) e da concentrao inicial de cdmio (B), para quantidade de
biomassa de 0,04g e tempo de 210 minutos.

FIGURA 24. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus

niger em funo do pH (A) e da quantidade de biomassa (C), para concentrao inicial de
cdmio de 7,5 ppm e tempo de 210 minutos.
 FIGURA 25. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus
niger em funo do pH (A) e do tempo (D), para concentrao inicial de cdmio de 7,5 ppm e
quantidade de biomassa de 0,04g.

FIGURA 26. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus

niger em funo da concentrao inicial de cdmio (B) e da quantidade de biomassa (C), para
pH de 4,75 e tempo de 210 minutos.
FIGURA 27. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus
niger em funo da concentrao inicial de cdmio (B) e do tempo (D), para pH de 4,75 e
quantidade de biomassa de 0,04g.

FIGURA 28. Superfcie de resposta da eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus

niger em funo da quantidade de biomassa (C) e do tempo (D), para pH de 4,75 e
concentrao inicial de cdmio de 7,5 ppm.
IV.4 Desoro do cdmio biosorvido e regenerao da biomassa

O processo de desoro, ou eluio, aquele em que as espcies moleculares ou

atmicas que estavam presas ao slido deixam esta superfcie e passam para a fase fluida
ambiente. O solvente da desoro o eluente, e o canal efluente contendo o soluto desorvido
e o solvente eluente o eluato.

O processo de desoro de ons metlicos de biosorventes geralmente envolve

tratamentos cidos. Kappor, Viraraghavan e Cullimore (1999) utilizaram cido ntrico 0.05N
visando remover ons cdmio biosorvidos em Aspergillus niger alcanando uma eficincia de
99%. HCl foi utilizado como desorvente por Mattuschka, Junghans e Straube (1993). Estes
autores observaram que mais que 90% dos ons metlicos biosorvidos (Cu+2 , Cd+2 e Zn+2 )
foram desorvidos quando HCl 0,05N foi utilizado. Neste trabalho foi utilizado o cido ntrico
como agente eluente.

Segundo Kapoor e Viraraghavan (1997) a liberao de ons clcio, magnsio e potssio

foi observado durante a biosoro de ons metlicos. Aps a desoro metlica, a biomassa foi
lavada com gua deionizada e colocada em contato com uma soluo contendo ons Ca+2 ,
Mg+2 e K+, pois segundo estes autores a troca inica tem grande importncia na remoo de
ons metlicos por biosoro.

A figura 29 apresenta os ciclos de biosoro-desoro do cdmio metlico biosorvido-

regenerao da biomassa em funo da capacidade de biosoro. As condies timas de pH,
concentrao inicial de cdmio, quantidade de biomassa e tempo de contato entre as fases
definidas no planejamento experimental foram utilizadas para regenerao da biomassa.
 6

4
Capacidade de
biosoo (mg 3
Cd/ g BM)
2

0
1,0 2,0 3,0 4,0

Ciclo

FIGURA 29. Reutilizao da biomassa na biosoro do cdmio

A figura 29 mostra que a biomassa perdeu parte da capacidade de biosoro depois do

primeiro ciclo, mas foi capaz de manter a capacidade de biosoro durante os ciclos
posteriores. A biomassa perdeu cerca de 86% da capacidade de biosoro aps o quarto ciclo,
sendo necessrio um estudo de viabilidade econmica para a aplicao da biomassa de
Aspergillus niger em processos industriais.

IV.5 Biosoro de metais pesados presentes em guas de produo

IV.6 Fluxograma do processo de biosoro de cdmio pelo Aspergillus niger

Com o propsito de apresentar a metodologia desenvolvida ser mostrado a seguir o

fluxograma para o processo global de remoo de cdmio pelo Aspergillus niger.

FLUXOGRAMA
__________________________________
CAPTULO V
CONCLUSES
__________________________________
V CONCLUSES

Os resultados apresentados neste trabalho, de forma alguma devem ser vistos como
definitivos com relao utilizao da biomassa fngica Aspergillus niger como biosorvente
para remoo do cdmio (II) presentes em guas de produo de campos de petrleo. Com o
propsito de aperfeioar esta tcnica vrios parmetros foram avaliados, o que permitiu
chegar as seguintes concluses.

Em relao nveis de potabilidade, a gua de produo apresentou concentraes de

cdmio e ferro acima do permitido pela legislao em vigor (Artigo N 4 do CONAMA
20);

O pH desempenhou um papel importante no processo de soro do cdmio pela biomassa

de Aspergillus niger;

A cintica de biosoro do cdmio pela biomassa de Aspergillus niger relativamente

rpida, com cerca de 84% da capacidade de biosoro sendo alcanada em 5 minutos de
contato. O tempo de contato de 6 horas foi suficiente para que o equilbrio fosse atingido;

Observa-se um aumento da eficincia e um decrscimo da capacidade de soro medida

que aumenta a quantidade de biomassa;

Observa-se um aumento da capacidade de biosoro e um decrscimo da eficincia de

biosoro medida que aumenta a concentrao inicial da soluo sinttica de cdmio

Os dados de equilbrio da biosoro do cdmio pela biomassa de Aspergillus niger em

batelada podem ser representados pela equao de Langmuir, com seus parmetros, qmx e
b, iguais a 21,162 mg/g e 1,411, respectivamente;

A eficincia de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger, pode ser representada como
uma funo das variveis de operao pH, concentrao inicial da soluo sinttica de
 cdmio, quantidade de biomassa e tempo de contato entre as fases, atravs do modelo
quadrtico:

Y = 88 ,29 + 4,83 A 5,30 B + 9,73C + 3,92 D 3,68 A2 0 ,60 B 2 3,79 C 2 + 0,72 D 2 + 0,52 AB 2,32 AC
0,88 AD + 3,43 BC + 2,03 BD 1,93CD

O processo de biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger desenvolvido com boa

eficincia, desde que se opere com um pH de 5,0, concentrao inicial da soluo sinttica
de cdmio de 4,5 ppm, quantidade de biomassa de 0,052g e um tempo de contato entre as
fases de 390 minutos;

A biomassa de Aspergillus niger perdeu parte da capacidade de biosoro aps o ciclo # 1,

mas foi capaz de manter a capacidade de biosoro por outros trs ciclos. necessrio
realizar um estudo de viabilidade econmica do processo de biosoro para poder
recomend- lo;
 Sugestes para trabalhos futuros

Determinar as condies timas de operao com a prpria gua de produo proveniente

de indstrias de petrleo;

Testar outros materiais que sejam resduo de atividade industrial ou encontrados em

grandes quantidades na natureza como biosorventes;

Realizar estudos com outros metais pesados presentes em guas de produo para
determinar a seletividade em diferentes biomassas;

Estudar a influncia do tamanho da partcula biosorvente e da temperatura na biosoro de

metais pesados;

Estudar a influncia da forma inica do biosorvente sobre a biosoro de metais pesados.

Realizar um estudo econmico para validar o processo de biosoro de cdmio pelo

Aspergillus niger;

Estudar o processo de desoro de forma mais abrangente;

Realizar o estudo da dinmica da biosoro do cdmio pelo Aspergillus niger em coluna

de leito fixo;

Identificar os principais interferentes presentes nas guas de produo e avaliar o efeito

que estes interferentes provocam sobre a biosoro do cdmio, em ensaios batelada.
 ___________________________
REFERNCIAS
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___________________________
ANEXOS
____________________________
 ANEXO I

LAYOUT DO TRATAMENTO LEO/GUA DO RN

 ANEXO II

FLUXOGRAMA DO TRATAMENTO LEO/GUA EM GMR

 ANEXO III

CONJUNTO DE RESULTADOS DOS EFEITOS PRINCIPAIS E DE

INTERAO, DOS COEFICIENTES DE REGRESSO E DA ANLISE
DE VARINCIA

a) Efeitos principais e de interao

STAT. Effect Estimates; R-sqr=0,94012; 4 factors, 1 blocks, 27 runs; MS

EXPERIM. Residual=19,84138
DESIGN
Factor -95, % +95, %
Effect Std. Err. t (12) p Cnf. Limt Cnf. Limt
Mean/Interc. 88,2864* 1,806873* 48,86145* 0,000000* 84,34959* 92,22326*
A (L) 9,6697* 2,050288* 4,71626* 0,000500* 5,2025* 14,13690*
A (Q) -7,3592 3,955549 -1,86048 0,087491 -15,9776 1,25920
B (L) -10,6066* 2,050288* -5,17321* 0,000232* -15,0738* -6,13937*
B (Q) -1,1995 3,955549 -0,30324 0,766900 -9,8179 7,41892
C (L) 19,4672* 2,050288* 9,49484* 0,000001* 15,0000* 23,93436*
C (Q) -7,5745 3,955549 -1,91490 0,079642 -16,1929 1,04392
D (L) 7,8400* 2,050288* 3,82387* 0,002422* 3,3728* 12,30724*
D (Q) 1,4464 3,955549 0,36565 0,720989 -7,1720 10,06475
A (L) by B (L) 1,0488 2,227183 0,47089 0,646166 -3,8039 5,90137
A (L) by C (L) -4,6363 2,227183 -2,08167 0,059447 -9,4889 0,21637
A (L) by D (L) -1,7637 2,227183 -0,79192 0,443781 -6,6164 3,08887
B (L) by C (L) 6,8613* 2,227183* 3,08068* 0,009526* 2,0086* 11,71387*
B (L) by D (L) 4,0637 2,227183 1,82461 0,093041 -0,7889 8,91637
C (L) by D (L) -3,8563 2,227183 -1,73145 0,108975 -8,7089 0,99637
*
Parmetros estimados so estatisticamente significante a 95% de confiana
b) Anlise de varincia

STAT. EXPERIM. ANOVA; R-sqr=0,94012; 4 factors, 1 blocks, 27 runs; MS

DESIGN Residual=19,84138
Factor SS df MS F p
A (L) 441,335* 1* 441,335* 22,243* 0,000500*
A (Q) 68,678 1 68,678 3,461 0,087491
B (L) 530,997* 1* 530,997* 26,762* 0,000232*
B (Q) 1,824 1 1,824 0,092 0,766900
C (L) 1788,740* 1* 1788,740* 90,152* 0,000001*
C (Q) 72,755 1 72,755 3,667 0,079642
D (L) 290,121* 1* 290,121* 14,622* 0,002422*
D (Q) 2,653 1 2,653 0,134 0,720989
A (L) by B (L) 4,400 1 4,400 0,222 0,646166
A (L) by C (L) 85,979 1 85,979 4,333 0,059447
A (L) by D (L) 12,443 1 12,443 0,627 0,443781
B (L) by C (L) 188,307* 1* 188,307* 9,491* 0,009526*
B (L) by D (L) 66,056 1 66,056 3,329 0,093041
C (L) by D (L) 59,483 1 59,483 2,998 0,108975
Error 238,097 12 19,841
Total SS 3976,135 26
*
Parmetros estimados so estatisticamente significante a 95% de confiana
c) Coeficientes de regresso

STAT. Regr. Coefficients; R-sqr=0,94012; 4 factors, 1 blocks, 27 runs; MS

EXPERIM. Residual=19,84138
DESIGN
Factor Regressn -95, % +95, %
Coeff. Std. Err. t (12) p Cnf. Limt Cnf. Limt
Mean/Interc. 88,28642* 1,806873* 48,86145* 0,000000* 84,34959* 92,22326*
A (L) 4,83485* 1,025144* 4,71626* 0,000500* 2,60125* 7,06845*
A (Q) -3,67960 1,977774 -1,86048 0,087491 -7,98880 0,62960
B (L) -5,30328* 1,025144* -5,17321* 0,000232* -7,53688* -3,06969*
B (Q) -0,59974 1,977774 -0,30324 0,766900 -4,90894 3,70946
C (L) 9,73358* 1,025144* 9,49484* 0,000001* 7,49998* 11,96718*
C (Q) -3,78724 1,9777744 -1,91490 0,079642 -8,09644 0,52196
D (L) 3,92002* 1,025144* 3,82387* 0,002422* 1,68642* 6,15362*
D (Q) 0,72318 1,977774 0,36565 0,720989 -3,58602 5,03238
A (L) by B (L) 0,52438 1,113592 0,47089 0,646166 -1,90193 2,95068
A (L) by C (L) -2,31813 1,113592 -2,08167 0,059447 -4,74443 0,10818
A (L) by D (L) -0,88187 1,113592 -0,79192 0,443781 -3,30818 1,54443
B (L) by C (L) 3,43063* 1,113592* 3,08068* 0,009526* 1,00432* 5,85693*
B (L) by D (L) 2,03187 1,113592 1,82461 0,093041 -0,39443 4,45818
C (L) by D (L) -1,92813 1,113592 -1,73145 0,108975 -4,35443 0,49818
*
Parmetros estimados so estatisticamente significante a 95% de confiana
Xerocar a tabela do valor de F