Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

AKTIVITAS PROLIFERASI SEL LIMFOSIT

MENCIT SECARA IN VITRO DARI EKSTRAK
BAWANG PUTIH (Allium sativum)
(Proliferation of Mice Lymphocyte Cells Activity
In Vitro of Garlic (Allium sativum) Extracts)
Ening Wiedosari

Balai Besar Penelitian Veteriner, Jl. RE Martadinata No. 30, Bogor 16114

ABSTRACT

Garlic (Allium sativum) is known as a traditional medicine with broad therapeutic properties ranging from
antibacterial, anticancer and anticoagulant. However, mechamisms of their actions are not sufficiently
elucidated. In this study it was examined the effects of garlic ethanolic extract on proliferation of mice
splenocytes by XTT assay, as one parameter to asses modulation of immune functions. This assay based on
the metabolism of the tetrazolium dye into formazan which are obyective indicators of the viability of living
cells present (proliferation of cells). Formazan levels are expressed as the mean absorbance at 450 nm
ofquadruplicate wells. Wells of cell culture plates were filled 10 x 10 4 cells in RPMI with foetal calf
serum,antibiotics and garlic extracts 2.5 g/ml, 25 g/ml dan 250 g/mlper well and incubating at 37C for 5
days in vitro. Wells as positif control (with Con A )and as negative control (cells only) were included each
plate. The result showed that the garlic extracts significantly modulate lymphocyte proliferation (P<0.05), the
effect was stronger when higher concentration of the extracts (250 g/ml) was used.
Key Words: Garlic, Lymphocyte Proliferation, Immunomodulation

ABSTRAK

Bawang putih dikenal bermanfaat sebagai obat tradisional yang berkhasiat antimikroba, antikanker dan
antikoagulan, tetapi mekanisme kerjanya belum dimengerti. Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh
ekstrak etanol dari bawang putih terhadap aktivitas proliferasi sel limfosit mencit secara in vitro, sebagai
indikator sifat imunomodulator dengan menggunakan metode XTT. Metode ini berdasarkan kemampuan
enzim dalam sel untuk mentransformasi garam tetrazolium dari XTT menjadi produk berwarna biru yaitu
formazan. Jumlah produk formazan sebanding dengan jumlah sel yang hidup (proliferasi sel) dan
diekspresikan melalui nilai rataan serapan optik (optical dencity/OD) dari 4 ulangan pada 450 nm. Uji ini
menggunakan 10 x 104 sel/ml dalam media RPMI, antibiotik, serum janin sapi (SJS) dan konsentrasi ekstrak
bawang putih 2,5 g/ml, 25 g/ml dan 250 g/ml yang diinkubasi pada 37C selama 5 hari. Kontrol positif
(Con A) dan negatif (hanya sel) disertakan pada tiap lempeng kultur sel. Hasil penelitian menunjukkan
adanya peningkatan aktivitas proliferasi sel limfosit pada kelompok yang diberi ekstrak bawang putih dan
berbeda nyata (P<0,05) jika dibandingkan dengan kelompok tanpa ekstrak bawang putih. Aktivitas tertinggi
ditunjukkan pada kelompok dengan konsentrasi bawang putih tertinggi yaitu 250 g/ml.
Kata Kunci: Bawang Putih, Proliferasi Limfosit, Imunomodulator

PENDAHULUAN mengandung khasiat antimikroba, antiradang

Pemanfaatan obat-obatan tradisional yang
berasal dari tanaman semakin diminati karena
tidak mempunyai efek samping seperti halnya
obat-obatan dari bahan kimia atau
sintetis.Bawang putih (Allium sativum ) adalah
salah satu tumbuhan yang banyak digunakan
dalam pengobatan tradisional. Tanaman ini
dan antitumor (Hageman et al. 1997; Pai et al.
1995; Amagase, 2013). Selain itu, berbagai
studi menunjukkan kemampuan bawang putih
dalam mencegah dan mengobati penyakit
diabetes dan sebagai antikoagulan (Simons et
al. 1995 Spelman et al. 2006).Zat-zat bioaktif
yang terdapat dalam bawang putih antara lain
vitamin A, B, C, kalsium, potasium, besi,

413
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
karoten, dan selenium. Tetapi yang paling
dominan dalam memerangi kanker adalah
komponen allyl sulfur seperti diallyl sulfide,
diallyl disulfide, diallyl trisulfide (DATS), S-
allyl cysteine, S-allylmercaptocysteine, allicin,
dan ajoene (Hageman et al. 1997; Amagase
2013).
Khasiat bawang putih dalam menghambat
atau menghentikan sel-sel kanker secara in
vitro dan in vivo menunjukkan bahwa
komponen aktif yang dikandungnya
kemungkinan memiliki sifat sebagai
sitostatikadan sitotoksika. Komponen ini
terutama adalah fraksi protein yang
kemungkinan bekerja sebagai imunostimulator
dengan cara meningkatkan fungsi dan aktivitas
sel-sel imun seperti sel limfosit T, sel NK
(natural killer) maupun sel makrofag (Morioka
et al. 1993; Scharfenberg et al. 1994; Butt et al.
2009).Namun demikian mekanisme kerjanya
belum begitu dimengerti sehingga perlu
dilakukan penelitian yang lebih seksama.
Penelitian ini bertujuan untuk melihat
pengaruh ekstrak bawang putih terhadap
aktivitas proliferasi sel limfosit mencit secara
in vitrosebagai indikator sifat imunomodulator.
Imunomodulator adalah substansi atau obat
yang dapat memodulasi fungsi dan aktivitas
sistem imun, dibagi menjadi 3 kelompok: i)
imunostimulator, berfungsi untuk
meningkatkan fungsi dan aktivitas sistem
imun, ii) imunoregulator, artinya dapat
meregulasi sistem imun, dan iii)
imunosupresor yang dapat menghambat atau
menekan aktivitas sistem imun. Kebanyakan
tanaman obat yang telah diteliti membuktikan
adanya kerja imunostimulator, sedangkan
untuk imunosupresor masih jarang dijumpai.
Pemakaian tanaman obat sebagai
imunostimulator bertujuan untuk menekan atau
mengurangi infeksi viral dan bakteri
intraseluler, untuk mengatasi imunodefisiensi
atau untuk memicu pertumbuhan sel-sel
pertahanan tubuh dalam sistem imunitas.
Bahan yang dapat menstimulasi sistem imun
disebut biological response modifiers (BRM)
(Block dan Mead 2003).
Pada prinsipnya kerja sistem imun dalam
menghadapi invasi bahan asing atau infeksi
penyakit dari luar tubuh bekerja secara
serempak, ibaratnya seperti suatu konser musik
dengansel limfosit T atau T-helper(Th)CD4+
414
sebagai dirigen-nya. Dengan kata lain,
suseptibilitas dan resistensi tubuhterhadap
infeksi mikroba sangat tergantung pada
aktivasi dari sel limfosit ThCD4+ yang
berdiferensiasi menjadi 2 kelompok
berdasarkan pola sekresi sitokin, yakni pola
responsel limfosit Th1 dan Th2. Sitokin
merupakan protein pembawa pesan kimiawi,
atau mediator komunikasi interseluler yang
sangat penting berperan dalam mengendalikan
respon imun baik pada sistem imunitas seluler
maupun humoral (Abbas et al. 1996). Sel
limfosit T akan teraktivasi, berdiferensiasi dan
berproliferasi bila dipicu oleh antigen atau
mitogen. Kemampuan sel ini untuk
berproliferasi atau membentuk klon
menunjukkan kemampuan respon imunologik.
Sel limfosit memberikan respon melalui
reseptor permukaan secara langsung terhadap
benda asing atau rangsangan mitogen tertentu
seperti lektin yang merupakan salah satu
glikoprotein asal tanaman. Mitogen adalah zat
yang dapat merangsang terjadinya
transformasi-blast populasi sel limfosit T
(Tizard, 2000).Terdapat beberapa macam
mitogen antara lain phytohemaglutinin (PHA)
dan konkanavalin A (Con A),dalam penelitian
ini yang digunakan adalah Con A. Uji aktivitas
proliferasi sel limfosit T dilakukan dengan cara
menghitung jumlah sel limfosit pada kontrol
negatif yang hanya terdiri kultur sel limfosit
tanpa perlakuan dan untuk kontrol positif
mengandung mitogen Con A. Kemudian
membandingkannya dengan jumlah sel limfosit
dalam media yang diberi ekstrak senyawa yang
diuji (bawang putih), maka dapat diketahui
aktivitas dari senyawa pemacu proliferasi sel
limfosit yang ada pada ekstrak tersebut
(Wiedosari, 2005).
MATERI DAN METODE
Pengukuran kadar air bawang putih
Bawang putih segar sebanyak 25 g dikupas
dan dibersihkan, kemudian dibagi menjadi 4
kelompok dan ditimbang. Selanjutnya
dikeringkan dalam oven selama 2-3 hari
sampai semua air menguap, akhirnya
ditimbang Tabel 1. Sehingga diperoleh kadar
air di dalam bawang putih.
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
Pembuatan ekstrak bawang putih
Dalam penelitian ini digunakan bahan
rimpang bawang putih segar sebanyak 40 gram
yang dikupas dan digerus sampai halus.
Selanjutnya dimasukkan dalam labu erlemeyer
yang berisi etanol 96% sebanyak 80 ml,
ditutup dengan aluminium foil dan didiamkan
pada suhu ruang selama 24 jam. Setelah itu,
disaring dengan kertas saring, hasilnya
diuapkan pada penangas air suhu 80C sampai
semua etanol menguap. Ekstrak diencerkan
menjadi 3 konsentrasi yaitu 2,5 g, 25 g dan
250 g, selanjutnya disaring dengan
mikrofilter berukuran 0,2 mm dan disimpan
dalam refrigerator suhu 5C.
Pembuatan media RPMI (phenol red-free
Roswell Park Memorial Institute culture
media)
Media yang digunakan untuk kultur sel
limfosit adalah media RPMI 1640 sebanyak
10,42 g, diberi NaHCO3 2g/l medium, larutan
penyangga organik hepes 20 mM/ml, antibiotik
gentamisin sulfat solution 0,1%, penicillin 100
g/ml, streptomisin 100 g/ml dan fungizone
2,5 g/ml. Campuran ini diberi akuades
sehingga menjadi 1000 ml dan disaring dengan
mikrofilter (0,45 m). Sebelum digunakan
media dasar ini ditambah dengan serum janin
sapi (SJS) 5% yang selanjutnya disebut media
komplit.
Isolasi sel limfosit
Sel limfosit untuk kultur sel diperoleh dari
organ limpa mencit yang berumur sekitar 2
bulan, diperoleh dari Balai Besar Penelitian
Veteriner Bogor. Setelah mencit dibunuh,
limpa dikeluarkan dan dicuci dengan aquades
steril, selanjutnya digerus dalam cawan petri
yang berisi larutan media dasar 5 ml. Larutan
limfosit disentrifus dengan kecepatan 1500
rpm selama 10 menit. Jaringan yang
mengendap dibuang, suspensi selnya ditambah
larutan media dasar dan disentrifus lagi pada
2000 rpm selama 10 menit. Sel limfosit yang
mengendap diencerkan dengan 10 ml larutan
media komplit. Uji viabilitasnya digunakan
tripanblue 0,4% dan penghitungannya
menggunakan hemositometer.
Reagen XTT:(sodium 3-1-phenylamino-
carbonyl-3,4-tetrazolium)-bis (4-methoxy-6-
nitro)benzene -sulfonic acid hydrate
Dalam penelitian ini metode proliferasi sel
limfosit yang dilakukan menggunakan reagen
XTT-Menadion. Sejumlah 1 ml Menadion
konsentrasi 10mg/ml dilarutkan dalam 9 ml
DMSO (Dimethylsulfoxide), selanjutnya
diambil 100 l untuk dicampur dengan 25 l
reagen XTT konsentrasi 1 mg/ml (dalam
larutan PBS/Posphat Buffer Saline). Pada
prinsipnya metode ini berdasarkan pada
kapasitas enzim mitokondria suksinat
dehidrogenase untuk mentransformasi garam
tetrazolium dari XTT menjadi produk
berwarna biru yaitu formazan. Konversi XTT
hanya pada sel yang hidup dan jumlah
produksi formazan sebanding dengan banyak
jumlah sel (sel yang berproliferasi). Untuk
hasil yang lebih bagus dikombinasikan dengan
Menadion (Roehm et al. 1991).
Uji penetapan jumlah sel limfosit dan
konsentrasi Con A optimum
Untuk mengetahui jumlah sel limfosit dan
konsentrasi Con A yang tepat digunakan pada
uji aktivitas proliferasi sel limfosit, maka
dilakukan uji pendahuluan. Uji ini
menggunakan kultur sel limfosit sebesar 1x10 4
sel/ml, 2x104 sel/ml, 4x104 sel/ml,dan
10x104sel/ml. Sedangkan konsentrasi ConA
digunakan 10 g/ml, 25 g/ml, 50 g/ml, 75
g/ml dan 100 g/ml (Tabel 2). Uji
menggunakan medium RPMI komplit dan
diinkubasi pada lempeng sel kultur selama 48
jam. Hasil yang memberikanrataan jumlah sel
limfosit tertinggi akan dipakai di penelitian
selanjutnya.
Uji aktivitas proliferasi sel limfosit
Uji aktivitas proliferasi limfosit
menggunakan ekstrak bawang putih dilakukan
dengan cara yang aseptis. Terdapat 5 kelompok
perlakuan dengan 4 ulangan pada masing-
masing kelompok, yaitu: 3 kelompok kultur sel
limfosit masing-masing dengan ekstrak
bawang putih konsentrasi 2,5 g/ml, 25 g/ml
dan 250 g/ml, dan 2 kelompok sebagai
kontrol positif (con A) dan negatif (hanya
415
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

kultur sel limfosit).Masing-masing perlakuan yang digunakan dalam penelitian ini

dimasukkan dalam lempeng sel kultur dengan
96 lubang, dibuat 5 lempeng yang sama untuk
pengamatan selama 5 hari. Selanjutnya
disimpan dalam inkubator dengan suhu 37C,
5% CO2 dengan kelembaban 95%. Setiap hari
diambil 1 lempeng untuk mengetahui aktivitas
proliferasi limfosit dengan melihat serapannya
(oprical dencity) menggunakan alat Elisa
Readerpada 450 nm, setelah sebelumnya setiap
lubang ditetesi dengan 40 l larutan XTT-
Menadion.
Analisis statistik
Hasil penelitian dianalisis menggunakan
Sidik Ragam (Analisis Varians) yang
dilanjutkan uji Duncan pada P<0,05 (Program
SPSS).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada tahap awal telah dilakukan uji
pendahuluan untuk mengetahui kadar air dari
bawang putih yang dipakai dalam penelitian
ini, hasilnya tercantum pada Tabel 1. Dari hasil
perhitungan kadar air, maka bawang putih
mengandung air sekitar 64,97%. Dengan
demikian diharapkan akan diperoleh ekstrak
bawang putih yang efektif dalam
meningkatkan proliferasi sel limfosit.
Untuk mengetahui jumlah sel limfosit dan
konsentrasi Con A yang tepat digunakan pada
uji aktivitas proliferasi limfosit, maka
dilakukan uji pendahuluan danhasil
pengamatannya seperti terlihat dalam Tabel 2.
Jumlah sel limfosit yang optimal digunakan
pada uji aktivitas proliferasi sel limfosit yaitu
10x104 sel/ml, hal ini berdasarkan pada level
tersebut memberikan jumlah sel limfosit
dengan rata-rata yang paling tinggi. Sedangkan
konsentrasi Con A yang digunakan adalah 25
g/ml, karena pada konsentrasi ini juga
memperlihatkan peningkatan proliferasi sel
limfosit.
Hasil uji aktivitas proliferasi sel limfosit
dari semua perlakuan disajikan pada Gambar 1,
nilai rataan dari proliferasi sel limfosit
dinyatakan sebagai bentuk serapan(optical
density/ 450 nm). Aktivitas proliferasi sel
limfosit pada kelompok sel yang ditambahkan
Con A (kontrol positif) menunjukkan respon
lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok
kontrol (hanya sel). Hasil ini menunjukkan

Tabel 1. Kadar air bawang putih

Kelompok Berat basah (g) Berat kering (g) Kadar air (%)
1 5,82 2,09 64
2 5,68 2,06 63,9
3 2,70 0,97 64
4 6,45 2,32 64

Tabel 2. Konsentrasi sel limfosit dan Con A optimum

Konsentrasi Con A (g/ml)

Jumlah sel
0 10 25 50 75 100
10 x 1040,3 1,50 1,70 1,60 1,78 1,47
4 x 1040,29 1,59 1,26 1,1 1,47 1,2
2 x 1040,29 1,17 1,21 1,22 1,37 1,2
1 x 1040,32 1,04 1,04 1,20 1,10 1,05

bahwa sel limfosit yang digunakan pada uji in bawang putih, terlihat peningkatan aktivitas
vitro ini dalam keadaan hidup. Begitu pula proliferasi sel limfosit lebih tinggi dan berbeda
pada kelompok sel yang ditambahkan ekstrak nyata (P<0,05) dibandingkan dengan kelompok

416
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

kontrol. Secara keseluruhan pada kelompok
perlakuan menunjukkan aktivitas proliferasi
mencapai puncaknya pada hari ke-4, kemudian
pada hari ke-5 mengalami penurunan. Hal ini
sesuai dengan pendapat Tizard (2000) bahwa
puncak respons sel limfosit normal terjadi pada
hari ketiga atau keempat setelah stimulasi,
sedangkan pada gangguan fungsi sel limfosit
responnya lebih lambat atau bahkan tidak ada
respons.
Aktivitas proliferasi sel limfosit tertinggi
diperoleh pada konsentrasi bawang putih 250
g/ml dan berbeda nyata (P<0,05) apabila
dibandingkan dengan kelompokyang diberi
bawang putih konsentrasi 2,5 g/ml dan 25
g/ml Tabel 3. Selain itu, dari tabel tersebut
menunjukkan bahwa semakin tinggi
konsentrasi bawang putih, maka aktivitasnya
cenderung meningkat.Hal ini diduga dengan
semakin tingginya konsentrasi bawang putih
maka kandungan bahan aktifnya juga
meningkat.

2,5
2,5

22
kontrol
Optical dencity

1,5
1,5 con a
bp 2,5 ?g/ml
1 bp 25 ?g/ml

bp 250 ?g/ml
0,5
0,5

0
1 2 3 4 5

Hari

Gambar 1. Rataan aktivitas proliferasi sel limfosit mencit yang ditunjukkan dengan nilai serapan
(OD/optical dencity), pada kelompok kontrol, Con A, ekstrak bawang putih 2,5 g/ml, 25 g/ml
dan 250 g/ml

Tabel 3. Rataan aktivitas proliferasi sel limfosit (OD) antara kelompok kontrol, Con A dan ekstrak bawang
putih 2,5 g/ml, 25 g/ml, 250 g/ml. Angka dengan superscript berbeda menunjukkan perbedaan
yang nyata. hasil uji Duncan pada P<0,05

Perlakuan Rataan proliferasi sel limfosit (OD)

Kontrol 0,6606a
Con A 2,0815b
Bawang putih 2,5 g/ml 1,4001c
Bawang putih 25 g/ml 1,6591d
Bawang putih250 g/ml 1,7540e

Hasil penelitian ini mengukuhkan hasil pemberian ekstrak bawang putih berkhasiat
studi sebelumnya yang dilakukan oleh Lau et sebagai imunomodulator.Fraksi protein dari
al. 1991; Clement et al. 2010) bahwa ekstrak bawang putih dapat menstimulasi

417
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
aktivitas proliferasi sel limfosit T terhadap
mitogen phytohemaglutinin (PHA). Sel
limfosit T yang distimulasi akan memproduksi
sitokin berupa interferon- (IFN- ) dan
interlukin -2 (IL-2). IFN- akan berperan
dalam aktivasi sel makrofag dan dapat
menginduksiekspresi molekul major
histocompatibility complex (MHC) kelas II
pada sel makrofag, sehingga membantu fungsi
sel makrofag pada folikel limfoid untuk
mengenali substansi asing. Sel makrofag juga
dapat melepas sitokin, yaitu IL-1 yang
berperan dalam memacu proliferasi sel Thdan
sel B. Sedangkan IL-2 tidak hanya berperan
pada ekspansi klon sel limfosit T setelah
dikenal antigen, tetapi juga meningkatkan
proliferasi dan diferensiasi sel imun lain seperti
sel NK dan sel B (Tizard, 2000).
Selain itu, ekstrak bawang putih dapat
meningkatkan respiratory burst dari sel
makrofag (Lau et al. 1991; Clement et al.
2010). Sel makrofag mempunyai peranan
penting dalam sistem imun non-spesifik
sebagai pertahanan awal terhadap invasi
mikroorganisme maupun imunitas anti-tumor
dengan fungsinya sebagai sebagai fagosit
profesional untuk menghancurkan dan
menyajikan antigen kepada sel limfosit. Sel
makrofag yang teraktivasi akan melaksanakan
fungsi efektornya sebagai aktivator sel
limfosit, mikrobisidal dan tumorisidal.
Komponen bioaktif yang mempunyai sifat
mengaktivasi sel makrofag atau bekerja
sebagai imunomodulator bermanfaat sebagai
terapi tambahan (ajuvan) bagi penderita kanker
dalam kaitan meningkatkan sistem imun non-
spesifik penderita melawan infeksi,
meningkatkan efektivitas terapi melalui sistem
efektor tumorisidal.
Morioka et al. (1993) juga menggunakan
fraksi protein dari bawang putih dan ternyata
dapat meningkatkan aktivitas sitotoksisitas sel
limfosit darah tepi pada manusia yang
potensinya tidak kalah dibandingkan dengan
aktivitas sitotoksisitas sel Natural Killer ( NK)
dari sel lestari K 562 dan M 14, dan aktivitas
sitotoksisitas sel limfosit T ini semakin kuat
apabila distimulasi dengan interlukin 2 (IL-2).
Seperti diketahui sel NK adalah sel yang
berperan sangat poten dalam sitotoksisitas
alami melawan tumor. Wen et al. (1995)
memperlihatkan bahwa diperkirakan 96% dari
total komponen protein yang dikandung
418
bawang putih merupakan protein fraksi 14
KDa dan 40 KDa. Fraksi ini terdiri dari gugus
sulfihydril (SH) dan diperkirakan sebagai
senyawa organosulfur. Walaupun mekanisme
reaksi biologik dari protein tersebut belum
diteliti, tetapi efek mikrobisidal dan
tumorisidal dari bawang putih selalu dikaitkan
dengan sulfihydril (Wagner et al. 1987;
Hageman et al. 1997).
Komponen lain dalam bawang putih yaitu
ajoenes diduga tidak hanya bersifat sebagai
sitotoksik, tetapi juga memiliki sifat sebagai
sitostatika yang berarti menghambat atau
menghentikan pertumbuhan sel-sel kanker
(Schanfenberg et al. 1994). Hal ini berdasarkan
hasil penelitiannya bahwa ajoenes yang
diekstraksi dari bawang putih dapat
menghambat pertumbuhan sel B limfoma dari
sel lestari dengan cara meningkatkan aktivitas
antitumor melalui pelepasanreactive oxygen.
Hasil serupa diperoleh Dirsch et al. (1998) dan
Borek (2001) bahwa mekanisme sitotoksisitas
terhadap sel tumor terutama melalui induksi
terhadap apoptosis atau programmed cell death
dimana faktor protein intraseluler seperti
nuclear factor (NF) kappa B, ROI (reactive
oxygenintermediates) dan RNI (reactive
nitrogenintermediates) terlibat dalam proses
tersebut. Sedangkan Romano et al. (1997)
menggunakan ajoene untuk menstimulasi
proliferasi sel limfosit manusia terhadap
mitogen PHA dan phorbolmyristate (PMA).Zat
aktif yang berupa senyawa sulfur yaitu DATS
yang terdapat dalam ekstrak bawang putih juga
menunjukkan sifat imunomodulator(Feng et al.
1994).
Dari hasil penelitian ini dan dari beberapa
peneliti yang telah diuraikan di atas setidaknya
menggambarkan bahwa ekstrak bawang putih
maupun zak aktif yang dikandungnya seperti
ajoene, DATS dan SH dapat berfungsi sebagai
imunomodulator secara in vitro dengan
meningkatkan fungsi dan aktivitas sistem imun
terutama terhadap sel limfosit T. Tetapi
kaitannya dengan kemungkinan dapatnya
bawang putih menjadi suatu obat yang dapat
digunakan secara in vivo belum jelas
mekanisme kerjanya. Tetapi hasil penelitian
Ghazanfari et al. (2000) menunjukkan bahwa
ekstrak bawang putih sangat efektif dalam
menanggulangi infeksi parasit darah
Leishmania major padamencit BALB/c dengan
respon imun cenderung berpolarisasi ke arah
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
Th1 melalui produksi sitokin yaitu interferon-
(IFN- ) dan IL-2.Pola respon Th1berarti
bawang putih sebagai imunostimulator,
mekanismenya dalam memodulasi sistem imun
adalah secara sitotoksisitas seluler yang sangat
penting dalam memerangi patogen intraseluler
seperti virus, beberapa jenis bakteri dan parasit.
Oleh karenanya, untuk mengatakan bahwa
bawang putih memiliki aktivitas
imunomodulator masih perlu dilakukan
penelitian terhadap fungsi sel limfosit termasuk
sitokin yang dihasilkannya(Spelman et al.
2006). Telah diketahui bahwa sel limfosit
ThCD4+ berdiferensiasi menjadi 2 subset
berdasarkan pola sekresi sitokin setelah
distimulasi oleh antigen/mitogen. Subset sel
limfosit Th1 melalui produksinya yaitu
interferon- (IFN- ), IL-2 dan IL-12.
Sedangkan subset Th2 memproduksi IL-4, IL-
5, IL-6, IL-9 dan IL-10. Sitokin yang
dihasilkan sel Th1 menghambat kerja sel Th2,
demikian pula sebaliknya sehingga respon
imun cenderung memilih salah satu pola
respon, pola respon Th1 atau pola respon Th2.
(Tizard, 2000).
KESIMPULAN
Dalam penelitian ini disimpulkan bahwa
ekstrak bawang putih dapat memicuaktivitas
proliferasi sel limfosit mencit secara in vitro.
Aktivitas proliferasi tertinggi terjadi pada
ekstrak bawang putih dengan konsentrasi 250
g/ml. Untuk menyimpulkan bahwabawang
putih berpotensi sebagai imunomodulatormasih
perlu dilakukan penelitian terhadap fungsi dan
aktivitas sistem imun lainnya, terutama
mengenai sitokinyang dihasilkan oleh sel
tersebut.
DAFTAR PUSTAKA
ABBAS AK, Murphy KM, Sher A. 1996.
Functional diversity of helper T lymphocytes.
Nature. 383:787-793.
Amagase H. 2013. Claryfying the real bioactive
constituents of Garlic. J Nutr. 7 Juli: 716S-
725S.
Block KI, Mead MN. 2003. Immune system effects
of Echinacea, Ginseng, and Astragalus: A
Review. Integrative cancer therapies.
2(3):247-267.
Borek C. 2001.Antioxidant health effects of aged
garlic extract. J Nutr. 131(3s):1010S-5S.
Butt MS, Sultan MT, Iqbal J. 2009. Garlic: natures
protection against physiological threats. Crit.
Rev Food Sci Nutr. 49(6):538-51.
Clement F, Pramod SN, Venkatesh YP. 2010.
Identity of the immunomodulatory proteins
from garlic (Allium sativum) with the major
garlic lectins or agglutinins. Int.
Immunopharmacol. 10(3):316-24.
Dirsch VM, Gerbes AL, Vollmar AM. 1998. Ajone,
a compound of garlic, induces apoptosis in
human promyeloleucemic cells, accompanied
by generation of reactive oxygen species and
activation of nuclear factor kappaB. Mol.
Pharmacol. 53:402-7.
Feng ZH, Zhang GM, Jiang ZY. 1994. Effect of
diallyl trisulfide on the activation of T cell and
macrophage-mediated cytotoxicity. J Tongji
Med Univ. 14:142-47.
Ghazanfari T, Hassan ZM, Azar A. 2000. Garlic
induces a shift in cytokine pattern in
Leishmania major infected BALB/c mice.
Scan. J. Immunol. 52:491-5.
Hageman G, Krul C, Schilderman P, Kleinjans J.
1997. Assessment of the
anticarcinogenicpotential of raw garlic in
humans, Cancer Lett. 114:161-2.
Lau BH, Yamasaki T, Gridley DS, 1991. Garlic
compounds modulate macrophage and T-
lymphocyte function. Mol. Biother. 3:103-07.
Morioka N, Morton DL, Irie RF. 1993. A protein
fraction from aged garlic extract enhances
cytotoxicity of human lymphocytes mediated
by interleukin 2 and concanavalin A. Cancer
Immunol. Immunother. 37:316-22.
Pai ST, Platt MW. 1995. Antifungal effects of
Allium sativum (garlic) extract against the
Aspergillus species involved in otomycosis.
Lett Appl Microbiol. 1:14-8.
Roehm NW, Hatfield SM, Glaserbrook AL. 1991.
An improved colorimetric assay for cell
proliferation and viability utilizing the
tetrazolium salt XTT. J. Immunol. Meth.
142:257-265.
Romano EL, Montano RF, Gebran S, Soyano A.
1997. Effects of Ajoene on macrophage
membrane-dependent functions.
Immunopharmacol. Immunotoxicol. 19:15-36.
Schanfenberg K, Wagner R, Wagner KG. 1994.
Injuries to cultivated BJA-B cells by ajoene, a
garlic derived natural compound cell viability,
419
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

glutathione metabolism, and pools of acidic
amino acids. J Cell Physiol. 158:55-60.
Simons LA, Simons J, Peters W. 1995. On the effect
of garlic on plasma lipids and lipoproteins in
mild hypercholesterolaemia.Atherosclerosis
113:219-25.
Spelman K, Burns JJ, Tenborg M. 2006. Modulation
of cytokine expression by tradisional
medicines: a review of herbal
immunomodulators. Alternative Medicine
Review. 11:128-146.
Tizard IR. 2000.Immunology: An Introduction. Ed
ke-6. New York: Saunders College
Publishing. p. 98-161.
Wagner H, Wierer M, Fessler B. 1987. Effects of
garlic constituents on arachidonate
metabolism. Planta Med. 53:305-6.
Wen GY, Malik MN, Kim KS. 1995. Light and
electron microscopic immunocytochemical
localization of two major proteins in garlic
bulb. J Cell Biochem. 58:481-89.
Wiedosari E. 2005. Perbedaan ekspresi mRNA
sitokin antara domba Ekor Tipis dan Merino
terhadap infeksi Fasciola gigantica. Disertasi
IPB Bogor.

DISKUSI

Pertanyaan:
Mengapa digunakan konsentrasi ekstrak bawang putih 2,5 g/ml, 25 g/ml dan 250 g/ml.

Jawaban:

Ada beberapa pertimbangan mengapa digunakan dosis dengan rentang yang tinggi:
a. Penghitungan konsentrasi dari ekstrak bawang putih yang digunakan dalam penelitian ini
ditentukan berdasarkan pengukuran kadar air bawang putih segar ( Tabel 1 ).
b. Penelitian ini masih awal dan bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya efek
imunostimulator, dan ternyata dari dosis 2,5 g/ml-250 g/ml menunjukkan adanya efek
tersebut. Jadi untuk penelitian selanjutnya dengan alasan efisiensi bisa dipakai dosis
terendah.
c. Perlu diketahui obat-obatan tradisional yang berasal dari tanaman tidak mempunyai efek
samping seperti halnya obat-obatan dari bahan kimia.

420