Professional Documents
Culture Documents
BPF Media Pikov
BPF Media Pikov
ABSTRACT
Phosphate solubilizing bacteria (PSB) were collected from plant rhizosphere at Cikaniki (1100 m asl.), soil at Botol Mountain (1000, 1500,
and 1800 m asl.), and Ciptarasa (600, 1000, and 1500 m asl.), area at Gunung Halimun National Park (GHNP). The soil ware collected
randomly from 3 areas and taken from 0-15 cm depth in the plants rhizosphere at Cikaniki and forest floor soil in Gunung Botol and
Ciptarasa. The result showed that the difference of elevation area, soil pH, forest vegetation, and microbial habitat (rhizosphere and forest
floor) were not the inhabitation factors of the biodiversity of PSB and their ability to solubilize insoluble phosphate, but the inhabitation
factors on the growth of the PSB population. The highest population of PSB at GHNP was founded in the plant rhizosphere of Altingia
7 8
exelsa Norona and Schima wallichii (Dc.) Korth (10 sel/g soil) at Cikaniki and in the forest floor soil (10 sel/g soil) at Botol Mountain (1000
m asl.). Pseudomonas sp., Bacillus sp., Bacillus megaterium, and Chromobacterium sp. dominated Cikaniki, Botol Mountain and Ciptarasa
area. Those isolates could solubilize insoluble phosphate on solid Pikovskaya medium with the range of diameter is 1.5-2.5 cm.
Key words: phosphate solubilizing bacteria (PSB), Cikaniki, Gunung Botol, and Ciptarasa area.
o
membebaskan nutrien dari fraksi mineral tanah sehingga hari pada suhu 28 C. Koloni yang mempunyai daerah
tersedia bagi tanaman (Atlas dan Bartha, 1993). Salah satu bening (selanjutnya ditulis holozone) diamati dan dihitung.
bakteri yang penting adalah bakteri pelarut fosfat (BPF) Koloni tersebut dimurnikan.
yang berperan dalam melarutkan fosfat organik dan
anorganik menjadi fosfat terlarut sehingga dapat Uji kemampuan BPF melarutkan P dalam media pikovskaya
digunakan/diserap oleh akar tanaman dan mikroba tanah padat dan identifikasi BPF
lainnya (Rao, 1982; Kpomblekou dan Tabatabai, 1994). Bakteri pelarut fosfat yang telah murni kemudian diuji
BPF juga dapat memacu pertumbuhan tanaman (Widawati kemampuannya melarutkan P dalam cawan petri berisi
dkk., 2001). media pikovskaya padat steril. Sebagai sumber fosfat
Pseudomonas sp., Bacillus sp., Bacillus megaterium, digunakan P alam dari Ciamis. Dosis P alam yang
dan Chromobacterium sp. adalah sebagian dari kelompok digunakan sebanyak 2,5 g/l media (pH pupuk alam = 7;
BPF yang mempunyai kemampuan tinggi sebagai P2O5 larut dalam HCl = 9,0%; larut dalam asam sitrat =
biofertilizer dengan cara melarutkan unsur P yang terikat 0,7%; larut dalam CaO = 0,5%). Bakteri pelarut fosfat yang
pada unsur lain (Fe, Al, Ca, dan Mg), sehingga unsur P membentuk holozone di sekitar koloni paling cepat
tersebut menjadi tersedia bagi tanaman. Unsur P adalah dengan diameter paling besar akan diidentifikasi jenisnya
salah satu unsur hara penting yang berperan dalam dengan melihat: morfologi (bentuk sel: coccus, rod, short
metabolisme dan proses mikrobiologis tanah dan mutlak rod), gram (positip/negatif), gerakan sel (motil, formasi
diperlukan oleh mikroba tanah (selain BPF) maupun spora, single, paired atau chain). Isolat tersebut diuji
kelangsungan kehidupan tanaman. Persentase kandungan dengan reaksi gula-gula metode Bergey (Krieg dan Holt,
unsur P dalam ekosistem tanah juga sangat tergantung dari 1984).
adanya BPF dalam ekosistem tanah tersebut.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui besarnya
populasi dan jenis BPF yang berpotensi sebagai
HASIL DAN PEMBAHASAN
biofertilizer di area Cikaniki, Gunung Botol, dan Ciptarasa
pada ketinggian lokasi, pH tanah, vegetasi hutan dan
habitat mikroba (daerah perakaran/rhizosfer dan lantai Hasil analisis populasi BPF dan kemampuannya dalam
hutan) yang berbeda dan melihat kemampuannya dalam melarutkan P tak larut di media pikovskaya padat pada
melarutkan P terikat di media pikovskaya padat. sampel tanah daerah rhizosfer tanaman A. excelsa, S.
wallichii, dan C. javanica. diketinggian 1100 m dpl. (Cikanili)
dapat dilihat pada Tabel 1. Sedangkan Tabel 2
menunjukkan hasil analisis yang sama dengan Tabel 1
BAHAN DAN METODE untuk sampel tanah lantai hutan di ketinggian 1000-1800 m
dpl. (Gunung Botol) dan 600-1500 m dpl. (Ciptarasa).
Pengambilan sampel tanah di SPC (Stasiun Penelitian
Cikaniki) (1100 m dpl.), dilakukan secara acak pada plot Populasi BPF
penelitian yang sudah ada, yaitu Plot Suzuki I, II, dan III. Tanah hutan mampu memberikan sumber karbon
Tanah diambil dari daerah rhizosfer tanaman rasamala organik dan sumber energi untuk flora, fauna, dan mikroba.
(Altingia excelsa Norona), puspa (Schima wallichii (Dc.) Seperti terlihat pada Tabel 1, populasi BPF dalam tanah di
Korth) dan kianak (Castonopsis javanica (Bl.) Dc.) dengan daerah Cikaniki (1100 m dpl.), menunjukkan bahwa BPF di
kedalaman 15 cm dari permukaan tanah. Di area Gunung daerah rhizosfer (plot A1, A2, A3, B1, B2, B3) yang diambil
Botol, sampel tanah diambil secara acak dari lantai hutan dari kedalaman 15 cm pada tanaman A. excelsa, S.
dengan ketinggian 1000, 1500, dan 1800 m dpl, sedangkan wallichii, dan C. javanica, populasinya lebih tinggi
di area Ciptarasa dilakukan hal yang sama dari ketinggian dibandingkan dengan plot tanpa tanaman (kontrol A dan B).
600, 1000, dan 1500 m dpl. Sampel tanah dimasukkan ke Hal tersebut mungkin disebabkan pengaruh perubahan
dalam plastik berwarna hitam dan dimasukkan dalam fisik-kimia tanah, temperatur tanah. Kemungkinan
termos es, kemudian dibawa ke Laboratorium tanah penyebab lainnya adalah hilangnya vegetasi yang hidup di
Mikrobiologi-LIPI. Tanah dikeringanginkan dan diukur pH, lokasi kontrol A dan B sehingga terjadi leaching material
diisolasi bakterinya dan dihitung populasinya dengan teknik organik dan nutrien akibatnya nutrien yang dibutuhkan
penghitungan cawan petri (Thompson, 1989; Ravina et al. untuk pertumbuhan bakteri hilang dan jumlah populasi BPF
(1992), dimurnikan dan diuji kemampuannya dalam menurun.
melarutkan P terikat (Rao, 1982), serta diidentifikasi 6 7
Jumlah BPF di daerah rhizosfer rata-rata 10 -10 sel/g
jenisnya dengan metode Bergey (Krieg dan Holt, 1984). 5
tanah, sedangkan di luar daerah rhizosfer 10 sel/g tanah
(Tabel 1). Hal ini karena daerah rhizosfer merupakan
Isolasi dan penghitungan jumlah populasi BPF daerah yang kaya akan komponen karbon (C) yang dapat
Sepuluh gram tanah yang sudah dikeringanginkan digunakan sebagai sumber energi untuk pertumbuhan
dimasukkan ke dalam 90 mL aquades steril, kemudian mikroba tanah dan salah satunya adalah BPF. Jumlah
digojok selama 1 jam dengan kecepatan 120 rpm. populasi BPF tertinggi didapatkan pada daerah rhizosfer
Sebanyak 1 mL dari ekstrak tersebut dimasukkan dalam tanaman S. wallichii (6,8x107 sel/g tanah) di plot suzuki A2
tabung reaksi berisi 9 mL aquadest steril, kemudian di dan A. excelsa (7,5x107 sel/g tanah) di plot suzuki A3,
kocok hingga homogen dan 1 mL dipindahkan ke tabung sedangkan jumlah populasi terendah dijumpai pada area
berikutnya, begitu seterusnya hingga terjadi seri 5
tanpa tanaman (kontrol B), yaitu 1,1x10 sel/g tanah.
pengenceran 10-1-10-7. Sebanyak 0,2 mL ekstrak dari seri Terjadinya hal tersebut tidak terlepas dari mikroba rhizosfer
-3 -5 -7
pengenceran tersebut (10 , 10 , 10 ) dimasukkan ke yang merupakan kelompok aktivitas kehidupan mikroba
dalam petridish steril dan kemudian dituangkan media sekitar perakaran tumbuhan. Waksman (1963)
selektif Pikovskaya (5 g Ca3(PO4)2, 10 g glukosa, 0,2 g mengemukakan, bahwa bakteri rhizosfer dapat meningkat
NaCl, 0,2 g KCl, 0,1 g MgSO4.7H2O, 0,5 g NH4SO4, 0,5 dengan cepat berdasarkan adanya hubungan kelompok
eksrak ragi, sedikit MnSO4 dan FeSO4 dilarutkan dalam 1 yang menguntungkan, kelompok yang merugikan, dan
liter H2O, pH = 6,8) ke dalamnya dan diinkubasi selama 3-7
WIDAWATI dan SULIASIH BPF sebagai pemacu pertumbuhan Brasica caventis 111
Table 1. Populasi dan nama BPF di daerah rhizosfer di area Cikaniki (1100 m dpl.) serta Hasil penghitungan populasi
kemampuannya melarutkan P terikat yang ditunjukkan pada besar kecilnya holozone. BPF di tanah lantai hutan pada
ketinggian yang berbeda, pH tanah
PSB berbeda dengan vegetasi yang
Plot No. Daerah rhizosfer tanaman (sel/g Holozone Nama BPF bervariasi didapatkan jumlah
tanah) (cm) populasi BPF yang bervariasi pula
7
Suzuki A1 425 Altingia excelsa Norona 2,3 x10 2,50 Pseudomonas sp. (Tabel 2). Populasi populasi BPF di
2,50 Pseudomonas sp.
ketinggian yang sama (1000 m
2,50 Bacillus megaterium
486 Schima wallichii (Dc.) Korth 3,7 x10
7
2,50 Pseudomonas sp. dpl.) dan pH berbeda (5,5 dan 3,5)
2,00 Chromobacterium sp. populasinya lebih tinggi di area
8
2,50 Bacillus megaterium Gunung Botol (5,8x10 sel/g tanah)
6 5
494 Castonopsis javanica (Bl.) Dc. 5,7 x10 2,50 Pseudomonas sp. dari pada Ciptarasa (3,5x10 sel/g
2,00 Chromobacterium sp. tanah). Di area Gunung Botol
2,50 Bacillus megaterium didapatkan jumlah populasi BPF
7
Suzuki A2 524 Altingia excelsa Norona 1,9 x10 2,50 Bacillus sp. rata-rata 107-108 sel/g tanah untuk
2,00 Pseudomonas sp.
ketinggian area 1000-1800 m dpl
2,00 Chromobacterium sp.
518 Schima wallichii (Dc.) Korth 6,8 x10
7
2,50 Pseudomonas sp. dengan pH tanah 5,5, sedangkan
2,50 Pseudomonas sp. di area Ciptarasa didapatkan
2,00 Pseudomonas sp. jumlah populasi BPF rata-rata 105-
6 6
519 Castonopsis javanica (Bl.) Dc. 4,2 x10 2,50 Pseudomonas sp. 10 sel/g tanah untuk ketinggian
2,50 Pseudomonas sp. tertinggi area 600-1500 m dpl.
2,50 Pseudomonas sp. dengan variasi pH 6,0; 3,9; dan
7
Suzuki A3 580 Altingia excelsa Norona 7,5 x10 2,00 Pseudomonas sp. 3,5. Jumlah populasi BPF yang
2,00 Bacillus sp beragam dan fluktuatif mungkin
2,00 Pseudomonas sp. disebabkan oleh pengaruh faktor
7
579 Schima wallichii (Dc.) Korth 2,1x10 2,00 Bacillus sp.
2,00 Pseudomonas sp.
suhu lingkungan, tipe vegetasi,
2,00 Bacillus sp. kemasaman tanah, kelembaban,
567 Castonopsis javanica (Bl.) Dc. 3,5 x10
6
2,00 Bacillus sp. suhu dan aerasi tanah di ke dua
2,00 Bacillus sp. area tersebut (Gunung Botol dan
2,00 Bacillus sp. Ciptarasa). Seperti dikemukakan
5
Kotrol A C Tanpa tumbuhan 1,4 x10 0,80 Unidentified oleh Taha et al. (1969), bahwa
7
faktor kimia dan fisika tanah serta
Suzuki B1 113 Altingia excelsa Norona 1,3 x10 2,50 Bacillus megaterium vegetasi, rotasi tanaman, dan
2,00 Bacillus sp.
2,00 Pseudomonas sp.
kondisi lingkungan sangat
120 Schima wallichii (Dc.) Korth 1,5 x10
7
2,50 Bacillus megaterium mempengaruhi populasi mikroba
2,50 Bacillus sp. tanah termasuk BPF. Selanjutnya
2,00 Pseudomonas sp. Jha et al. (1992), mengemukakan
6
96 Castonopsis javanica (Bl.) Dc 2,0 x10 2,50 Pseudomonas sp. bahwa komposisi populasi dan
2,50 Bacillus sp. aktivitas mikroba tanah (BPF) akan
2,50 Bacillus sp. beraneka ragam karena adanya
7
Suzuki B2 45 Altingia excelsa Norona 1,5 x10 2,00 Pseudomonas sp. perbedaan sifat fisika-kimia tanah,
2,00 Bacillus megaterium iklim dan vegetasi yang berbeda.
2,00 Chromobacterium sp.
7 Menurut Setiadi (1989), mikroba
53 Schima wallichii (Dc.) Korth 2,0 x10 2,00 Pseudomonas sp.
2,00 Bacillus sp. disekitar tanah jumlah populasinya
2,00 Chromobacterium sp. tergantung kepada kepekaan
63 Castonopsis javanica (Bl.) Dc 3,5 x10
6
2,00 Bacillus sp. mikroba itu sendiri, kesuburan
2,00 Chromobacterium sp. tanah, kelembaban, dan intensitas
2,00 Pseudomonas sp. cahaya, serta temperatur tanah.
7
Suzuki B3 6 Altingia excelsa Norona 3,5 x10 2,00 Bacillus megaterium Jadi populasi BPF dalam tanah
2,00 Pseudomonas sp. dipengaruhi oleh suhu, karena
2,00 Bacillus sp. suhu selain berperan dalam reaksi
7
19 Schima wallichii (Dc.) Korth 2,5 x10 2,00 Chromobacterium sp. fisiologi sel, juga pada ciri fisika-
2,00 Chromobacterium sp.
kimia lingkungan yang meliputi
2,00 Chromobacterium sp.
7 Castonopsis javanica (Bl.) Dc 3,5 x10
6
2,00 Bacillus sp. antara lain volume tanah, tekanan,
2,00 Pseudomonas sp. potensi, oksidasi-reduksi, difusi,
2,00 Pseudomonas sp. gerakan brown, viskositas,
5
Control B C Tanpa tumbuhan 1,1 x10 0,80 Unidentified tegangan permukaan dn struktur
Keterangan: Identifikasi BPF dilakukan hanya pada bakteri yang mempunyai diameter air (Paul dan Clark, 1989).
holozone 1,00 cm. Analisis penghitungan jumlah
populasi BPF pada Tabel 1 dan 2,
menunjukkan bahwa pada tanah di
kelompok yang netral. Di luar daerah rhizosfer populasi daerah rhizosfer tanaman A. excelsa yang tumbuh pada
BPF tidak sebanyak di daerah rhizosfer, sehingga tanah berpH 5,5 di ketinggian 1100 m dpl. (Cikaniki)
kesuburan tanah hutan merupakan keseimbangan antara 7
didapatkan jumlah populasi tertinggi 7,5x10 , sedangkan
aspek kimia, fisika dan biologi tanah. Daerah rhizosfer pada tanah lantai hutan di ke dua area berbeda (Gunung
merupakan daerah yang kaya dengan aktivitas biologi Botol dan Ciptarasa) pada ketinggian 1000 m dpl. dan 600
seperti aktivitas bakteri pelarut fosfat dan mikroba lainnya. m dpl. dengan pH 5,5 dan 6,0 didaptkan jumlah populasi
112 B I O D I V E R S I T A S Vol. 7, No. 2, April 2006, hal. 109-113
Table 2. Populasi dan nama BPF di lantai hutan Gunung Botol (ketinggian 1000, 1500, 1800 m dpl.) serta Ciptarasa (ketinggian 600, 100,
1500 m dpl.).
tertinggi 5,8x108 dan 3,0x106 sell/g tanah. Hal tersebut (asam sitrat, asam glutamat, asam suksinat, asam laktat,
secara lebih jelas menunjukkan bahwa pH, asam oksalat, asam glikooksalat, asam malat, asam
keanekaragaman vegetasi, ketinggian area, dan jenis fumarat, asam tartarat, asam alfa ketobutirat) yang
habitat mikroba (rhizosfer dan lantai hutan) yang berbeda dihasilkan oleh mikroba tersebut dan berakibat pada
membuat pertumbuhan populasi BPF berbeda pula. Hal ini terjadinya pelarutan P terikat. Asam-asam tersebut akan
karena di area rhizosfer terdapat bahan organik yang mengingat kation dalam bentuk kompleks yang stabil
2+ 2+ 3+ 3+
mencukupi dan merangsang pertumbuhan mikroba tanah dengan Ca , Mg , Fe , dan Al (Rao, 1994).
pada permukaan akar sehingga jumlahnya akan mencapai Uji kemampuan BPF melarutkan unsur P terikat pada
10-100 kali lebih banyak pada daerah rhizosfer unsur lain sehingga menjadi tersedia bagi tanaman ditandai
dibandingkan dengan daerah dekat areal tanah mineral dengan reaksi positif pada media pikovskaya padat + batu
(Setiadi, 1989). Jumlah populasi BPF yang masih lebih fosfat alam dengan membentuk daerah yang berwarna
tinggi di tanah lantai hutan, menurut Setiadi (1989), putih bening (holozone) di sekeliling koloni (Tabel 1 dan
disebabkan oleh adanya kegiatan yang umumnya jauh lebih 2). Aktivitas BPF dalam melarutkan P tak larut sangat
aktif di dalam tanah hutan dari pada perladangan. Pada tergantung pada temperatur, kelembaban, pH, suplai
tanah hutan juga mengandung sejumlah besar bahan makanan kondisi lingkungan dan selama pertumbuhannya.
organik dan mineral yang tersedia sebagai karbon dan Rachmiati (1995) berpendapat, bahwa setiap jenis BPF
sumber-sumber energi yang cocok untuk berbagai populasi mempunyai kemampuan berbeda secara genetik dalam
tanaman, hewan dan mikroba tanah. Secara fungsional menghasilkan jumlah jenis asam-asam organik yang
bahan organik dan anorganik yang dilepas oleh tanaman berperan dalam menentukan tinggi rendahnya pelarutan P.
(vegetasi hutan) ke dalam lingkungan (berupa eksudat), Hasil uji pelarutan unsur P terikat oleh BPF menunjukkan,
akan dimanfaatkan oleh mikroba tanah dan sebaliknya bahwa daerah di luar rhizosfer, populasi BPF dan
mikroba tanah berperan penting dalam menyintesis dan kemampuan melarutkan P terikat/tak larut tidak sebanyak
melepaskan kembali zat hara ke dalam bentuk bahan dan sebaik di daerah rhizosfer (Tabel 1 dan 2). Hal ini
organik yang tersedia bagi tanaman (Setiadi, 1989). ditandai oleh rata-rata diameter holozone yang terbentuk
Ketinggian area, pH tanah, vegetasi hutan dan habitat di sekeliling koloni BPF dari daerah rhizosfer (2,00-2,50 cm)
mikroba (rhizosfer dan lantai hutan) yang berbeda (Tabel 1) lebih besar dibandingkan dengan diameter
merupakan faktor penghambat bagi pertumbuhan populasi holozone yang terbentuk disekeliling koloni BPF dari lantai
BPF. hutan (1,50 cm)(Tabel 2). Hasil penelitian Rachmiati (1995),
diketahui bahwa luas holozone yang terbentuk disekitar
Uji kemampuan BPF melarutkan P terikat pada media koloni BPF secara kualitatif memang menunjukkan besar
pikovskaya padat dan identifikasi BPF kecilnya kemampuan BPF dalam melarutkan unsur P dari
Jenis BPF yang didapat di area Cikaniki, Gunung Botol, fosfat yang sukar larut.
dan Ciptarasa, rata-rata mampu melarutkan unsur P yang Diameter holozone di sekeliling koloni BPF dari area
terikat pada unsur lain. Hal ini menunjukkan bahwa Cikaniki (kontrol A dan B) merupakan diameter holozone
efektivitas BPF pada area tersebut cukup baik untuk terkecil (0,8 cm). Kemungkinan pada daerah di luar
membantu menyediakan unsur P bagi keberlangsungan rhizosfer tersebut tidak terjadi hubungan asosiasi antara
hidup vegetasi hutan. Mekanisme pelarutan unsur P terikat mikroba dengan vegetasi setempat (rumput), sehingga
oleh BPF terjadi karena adanya beberapa enzim fosfatase populasi BPF kurang baik. Jika tidak terjadi asosiasi antara
(fosfomonoesterase, fosfodiesterase, trifosfomonoesterase, mikroba dan vegetasi, maka akar tanaman akan
dan fosfoamidase) yang umumnya terdapat dalam tanah. melepaskan bahan organik dan anorganik berupa eksudat
Enzim-enzim tersebut mungkin bertanggung jawab dalam yang penting ke dalam daerah rhizosfer dan menciptakan
hidrolisis bahan organik yang mengandung fosfor menjadi lingkungan baru untuk keberlangsungan hidup mikroba
-2 -1 tanah seperti BPF. Mikroba tanah (BPF) sebagai perombak
fosfat organik (HPO4 dan HPO4 ) yang tersedia bagi
tanaman (Tabatabai, 1982). Dikemukakan oleh Illmer dan dan pelarut bahan organik terikat, akan mensintesis dan
Schinner (1995), bahwa proses pelarutan fosfat terjadi melepaskan kembali dalam bentuk bahan organik yang
karena efektivitas BPF mereduksi pH substrat dengan tersedia bagi tanaman (Setiadi, 1989).
mensekresi sejumlah asam-asam organik non-volatile
WIDAWATI dan SULIASIH BPF sebagai pemacu pertumbuhan Brasica caventis 113