1. Mengambil aquades sebanyak 100ml dan dimasukkan ke dalam beaker glas 250ml 2. Timbang amilum sebanyak 5% (b/v) dari volume aquades 3. Panaskan aquades sampai mendidih menggunakan spirtus 4. Amilum diencerkan terlebih dahulu menggunakan aquades secukupnya, kemudian teteskan larutan amilum ke dalam aquades pelan-pelan sambil diaduk 5. Diamkan sampai suhu ruang 6. Menimbang urea sebanyak 0,3% (b/v) dari volume aquades 7. Tambahkan urea pada larutan kemudian diaduk 8. Masukan larutan ke dalam erlenmeyer 125ml 9. Tambahkan jamur aspergulus niger sebanyak 4 spatula jamur ke dalam erlenmeyer tersebut 10. Larutan diaduk secara aseptis menggunakan shake dengan kecepatan 300rpm selama 15 menit 11. Fermentasi larutan, Variabel Kelompok/Hari ke- 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 B. Standarisasi Fehling 1. Membuat larutan gula standar dengan konsentrasi 0,1 M dalam 100ml aquades 2. Mengambil 0,5ml fehling A dan 0,5ml fehling B ke dalam erlenmeyer kemudian ditambahkan 10ml aquades setelah itu dipanaskan sampai mendidih 3. Melakukan titrasi larutan fehling (A+B+aquades) dengan larutan gula standar dalam kondisi mendidih dan diaduk 4. Kesetimbangan tercapai ketika larutan fehling menjadi bening dan terbentuk endapan (cokelat, merah, hijau) 5. Mengulang titrasi sebanyak 3 kali 6. Menghitung konsentrasi fehling dengan rumus V1.N1=V2.N2
C. Menentukan Kadar Gula Reduksi
1. Mengambil cairan hasil hidrolisis 10 ml kemudian diencerkan sampai 100ml dengan aquades dalam labu takar 100ml 2. Mengatur pH sampai netral 3. Mengambil 0,5ml fehling A dan 0,5ml fehling B ke dalam erlenmeyer kemudian tambahkan 10 ml aquades setelah itu dipanaskan sampai mendidih 4. Mentitrasi larutan fehling(A+B+aquades) dengan larutan sampel dalam kondisi mendidih dan diaduk 5. Kesetimbangan tercapai ketika larutan fehling menjadi bening dan terbentuk endapan merah bata 6. Mengulangi titrasi sebanyak 3 kali