PRÀCTICA BIOQUÍMICA 6: Determinació de proteïnes

Full professor

Objectiu: Observar la desnaturalització de les proteïnes en diferents condicions.

Aplicar la prova de Biuret per a la determinació de proteïnes.

Material:
Tubs d'assaig, àcid clorhídric, àcid nítric, hidròxid sòdic, clorur sòdic, sulfat de coure.
Substàncies per assajar: dissolució de clara d'ou i llet.
Cal preparar: una dissolució saturada de clorur de sodi, una dissolució al 20% d'hidròxid sòdic,
una dissolució a l'1% de sulfat de coure i una dissolució de clorhídric o de nítric al 10%.
La clara d'ou es pot preparar diluint una clara d'un ou en aigua.

Procediment

· Desnaturalització
· Fes sèries de quatre tubs amb 2 ml de dissolució de clara d'ou i numera'ls. Fes el mateix amb la
llet.
· Afegeix 2 ml d'àcid clorhídric als tubs número 1.
· Afegeix 2 ml de dissolució satura de clorur de sodi als tubs 2.
· Afegeix 2 ml de solució d'hidròxid de sodi als tubs 3.
· Esclafa suaument els tubs 4, sense afegir-hi res.
· Anota els resultats de cada sèrie de tubs.

.Prova de Biuret
· Prepara dos tubs d'assaig amb 2 ml de les dissolucions proteiques.
· Afegeix a cada tub 2 ml de dissolució d'hidroxid sòdical 20%. Remena-ho i deixa-hi caure quatre
o cinc gotes d'una solució a l'1% de sulfat de coure.
· Anota'n els resultats.

Fonament teòric : Explica darrere del full:

- En què consisteix la desnaturalització de les
proteïnes.
Els alumnes han d'explicar que la desnaturalització
consisteix en la pèrdua de l'estructura terciària de
les proteînes que fa que es tornin insolubles i
perdin la seva funcionalitat.

Resultats:

Hauràs de recollir en dues taules les proves que heu realitzat. Dissenyeu amb el vostre grup les
taules que millor us vagin i construïu-les al darrere

Pel que fa a la desnaturalització cal que facin constar que s'observen en tots els casos l'aparició
de "grumolls" o coàguls blancs, es tracta de les proteïnes desnaturalitzades que han precipitat.
Es pot donar el cas que, si la solució salina no és prou concentrada no es produeixi la
precipitació.
Pel que fa a la desnaturalització cal que facin constar que s'observen en tots els casos l'aparició
de "grumolls" o coàguls blancs, es tracta de les proteïnes desnaturalitzades que han precipitat.
Es pot donar el cas que, si la solució salina no és prou concentrada no es produeixi la
precipitació.
En el cas de la llet, en escalfar-la, la desnaturalització és poc evident.

Conclusions:

Redacta una frase per explicar les condicons en què es produeix la desnaturalització de les
proteïnes.
Les condicions que porten a la desnaturalització són les que hem reproduït:
- canvis de pH en el medi : àcid ( amb àcid clorhídric) o bàsic ( amb l'hodròxcid sòdic)
- augment de la temperatura, superant els 70ªC
- canvis de salinitat en el medi.
Quins tipus de proteïnes contenen la llet i la clara d'ou?. Busca informació de l'enciclopèdia.
Les proteïnes de la llet (caseïna) i de la clara d'ou ( ovoalbúmina) són proteïnes solubles amb
una funció de reserva.