1

Penghargaan

Syukur Alhamdulillah, akhirnya kerja kursus ini dapat saya siapkan dengan
jayanya. Tanpa bantuan dan sokongan daripada pelbagai pihak sudah pastilah hasilnya
tidak sempurna dan pastinya menemui jalan buntu.

Pertama sekali, ribuan terima kasih diucapkan kepada Pengarah Kolej Teknologi
Makmal Perubatan, Tn Hj. Awang Damit b. Ibrahim, kerana memberi kebenaran dan
kepercayaan kepada saya bagi melaksanakan latihan klinikal ini serta memberi peluang
kepada saya bagi menyiapkan kerja kursus latihan klinikal saya ini. Ribuan terima
kasih diucapkan.

Kalungan budi seterusnya buat penyelaras saya, Puan Thulasiprevinnah A/P

Santhanathas kerana telah banyak membantu saya menjalani latihan klinikal ini. Tanpa
bantuan, sokongan dan panduan yang di berikan oleh beliau kepada saya, mustahil
bagi saya untuk mempersiapkan diri bagi menghadiri latihan pra klinikal pada kali ini
serta mustahil bagi saya untuk menyiapkan kerja kursus ini.

Sekalung penghargaan juga ditujukan khas buat JTMP serta staf-staf di

Hospital Raja Permaisuri Bainun kerana telah memberi keizinan serta menyambut
kehadiran saya dengan lapang dada serta dengan tangan terbuka untuk saya menjalani
latihan praktikal di sini. Terima kasih yang tidak terhingga kerana sudi memberi tunjuk
ajar kepada saya.

Saya merasa amat bersyukur di atas jasa-jasa dan tunjuk ajar yang di berikan
kepada saya. Ribuan terima kasih sekali lagi saya ucapkan kepada semua yang
terlibat secara langsung ataupun tidak langsung dengan klinikal saya ini. Sekian, terima
kasih.

2
 ISI KANDUNGAN
PENGHARGAAN 2
PENGENALAN 4-7
KAEDAH PENAKSIRAN 8-17
LAMPIRAN 18-20
RUJUKAN 21

3
 PENGENALAN
Buah pinggang atau ginjal merupakan satu organ rumit yang terdapat di dalam
badan manusia yang memiliki pelbagai peranan biologi. Peranan utama buah pinggang
adalah mengekalkan keseimbangan homeostatik cecair badan dengan cara penapisan
dan penyingkiran metabolit seperti urea dan bahan-bahan buangan dari darah dengan
cara menyingkirkannya sebagai air kencing.

Buah pinggang bukan sahaja mengekalkan keseimbangan homeostatik cecair

badan, tetapi buah pinggang juga mempunyai pelbagai fungsi lain, antaranya ialah,
penapisan darah, penyingkiran bahan kumuhan, mengimbangi asid-bes, mengawal
tekanan darah, mengesan isipadu plasma serta merembeskan pelbagai jenis hormon.

Oleh kerana buah pinggang mempunyai pelbagai fungsi penting di dalam badan
seseorang manusia, maka pelbagai ujian penaksiran fungsi renal di jalankan bagi
menentukan jumlah bahan-bahan tertentu yang dikeluarkan oleh buah pinggang.

Hal ini kerana, kita pada kebiasaannya tidak menyedari sebarang

ketidakselesaan terjadi kepada buah pinggang kita dan kita akan menyedarinya apabila
kita mengalami simptom-simptom klinikal seperti keletihan yang melampau, mengalami
pembengkakan pada mana-mana anggota tubuh badan, kekerapan membuang air
kencing dan sebagainya.

Disebabkan itu, ujian penaksiran fungsi renal ini dijalankan bagi mengetahui
tahap kesihatan buah pinggang kita yang sebenarnya dan kita boleh menggunakan
ujian darah bagi menentukan tahap kesihatan buah pinggang kita. Antara ujian-ujian
yang boleh dilakukan termasuklah ujian penaksiran kreatinin, urea, asid urik, sodium,
potassium, kalsium, fosfat, dan kloride.

4
 I. Kreatinin
Ujian penaksiran kreatinin dijalankan apabila berlakunya
peningkatan aras kreatinin yang disebabkan oleh penurunan aras
penapisan glomerular. Hal ini mungkin disebabkan oleh pre-renal (e.g.
hypotension, hypovolaemia ), renal atau post-renal (e.g. obstruction).
Parah kreatinin yang rendah adalah pada pesakit dengan reducedmuscle
mass (e.g. the ederly ) dan ini juga boleh menyebabkan kerosakkan hati.
II. Kalsium

Ujian penaksiran kalsium atau total calcium tidak sepatutnya kita

jadikan satu aras penilaian terhadap seseorang pesakit. Hal ini kerana,
dalam kebanyakkan situasi, pembetulan kalsium digunakan untuk
pengiraan ‘binding protein’ (albumin) concentration. Kalsium ionize hanya
diperlukan sekiranya kalsium kompleks tinggi terutamanya semasa
“massive transfusion” serta nilai pH adalah abnormal ataupon
keabnormaliti kalsium adalah sedikit. Penurunan palsu dalam kalsium
akan berlaku apabila bahan EDTA, heparin yang tidak stabil atau oxalate
digunakan sebagai anticoagulant untuk pemungutan spesimen.
Keputusan sebagai hypercalcaemic berkemungkinan artifaktual
(terutamanya jika potassium adalah meningkat). Hal ini adalah kerana,
ianya sangat penting bagi keputusan pengurangan pembetulan kalsium
yang tidak dijangka. Keputusan bagi ujian ini disahkan dengan
mengulangi semula ujian dengan menggunakan sample baru dan ujian
telah terbukti secara klinikal.

III. Sodium
Kepekatan sodium bergantung kepada keadan hidrasi, kandungan
sodium dalam badan dan water shifts diantara plasma dengan bahagian
cecair badan yang lain. Terapi isotonic saline serta intravenous mungkin
akan menyebabkan hypernatraemia dan jumlah penggantian dengan
dextrose akan menyebabkan hyponatraemia. Hyponatraemia berlaku

5
 kepada pesakit semasa diuretic theraphy iaitu didalam sebilangan kecil
sahaja dan selalunya akan terjadi kepada golongan yang tua.
Hyperlipidemia atau hyperproteinaemia yang teruk mungkin akan
menyebabkan pseudohyponatraemia. Sodium akan disimpan dengan
mineralcorticoid excess dan akan hilang bersama mineralcorticoid
deficiency, gastrointestinal dan renal loss atau semasa perpeluhan yang
berlebihan berlaku. Hyponatraemia terjadi adalah disebabkan oleh fluid
retention yang dilihat didalam renal dan cardiac disease.
IV. Klorida
Metabolik alkalosis dan hyponatraemia selalu dikaitkan dengan
hypochloraemia. Hypernatraemia sertametabolik asidosis pula terjadi
adalah disebabkan oleh asidosis tubular renal atau kehilangan bikarbonat.
Hal ini sering dikaitkan dengan hyperchloraemia, iaitu peningkatan anion
gap yang menunjukkkan pengumpulan anion selain daripada klorida
(contohnya lactate dan hydroxybutyrate). Hal ini kerana keadaan seperti
ini sering berlaku dengan metabolik acidosis.
V. Potassium
Peningkatan paras potassium biasanya ditemui dalam keadaan
asidosis, kerosakan tisu, kegagalan buah pinggang dan kekurangan
mineralcorticoid. Penurunan tahap yang ditemui bergabung dengan
gelung atau diuretik thiazide theraphy, muntah-muntah atau cirit-birit,
alkalosis semasa rawatan asidosis dan dengan mineralocorticoid.
VI. Asid urik
Peluang untuk penyakit gout terjadi adalah rendah jika kepekatan
serum urate sentisa berada di bawah 0.42mmol/L. Risiko untuk mendapat
gout adalah tiga kali ganda apabila kepekatan serum urate tetap berada di
atas 0.42 mmol/L. Walaubagaimanapun, peningkatan serum urate sahaja
tidak mencukupi untuk mendiagnos gout. Kerosakan fungsi renal,
pregnancy-induced hypertension, diuretics, fasting, hyperlactataemia,
hyperketonaemia dan dos salicylates yang rendah boleh menghasilkan
urate level yang tinggi.

6
 Hypouricaemia dapat dilihat pada pesakit dengan pengambilan
purine yang rendah, dalam SIADH dengan hypouricaemic drugs
contohnya: allopurinol dan dalam keadaan xanthinuria yang jarang
ditemui.
VII. Urea
Peningkatan paras urea dilihat dengan pengurangan penurasan
glomerular kerana renal atau pre-renal disease, pendarahan ke dalam
saluran gastrousus dan keadaan hypercatabolic. Penurunan nilai bacaan
dilihat semasa kehamilan, dengan water retention, dengan pengurangan
sintesis sebagai hasil pengambilan protein sedikit, penyakit hati yang
teruk atau urea-cycle defects.
VIII. Phosphate
Peningkatan terhadap aras phosphate ditemui dalam tindakbalas
terhadap parathyroid hormone levels yang rendah (contohnya,
hypoparathyroidism, hypercalcaemia yang disebabkan oleh malignancy
dan penyebab non-parathyroid yang lain) dan dalam kegagalan buah
pinggang. Penurunan paras phosphate sering dijumpai dalam pesakit
dengan primary hyperparathyroidism,dalam sesetengah kes seperti
hypercalcaemia associated with malignancy, dalam renal tubular disorder
dan pada pesakit yang menggunakan magnesium dan aluminium yang
mengandungi antacid.
Aras phosphate mungkin menurun semasa prolonged intravenous
theraphy jika pembekalan phosphate tidak mencukupi. Paras phosphate
turut berkurangan bergantung kepada makanan yang kaya karbohidrat
yang disebabkan cellular uptake of phosphate terdapat pelbagai keadaan
yang boleh memberi kesan kepada paras serum phosphate. Keputusan
peningkatan phosphate mungkin artifactual (terutamanya jika jumlah
potassium nauk secara tidak dijangka). Penting bagi keputusan
peningkatan phosphate yang tidak dijangkadisahkan dengan mengulangi
ujian dengan sampel yang baru jika terbukti secara klinikal.

7
 KAEDAH PENAKSIRAN
A. Kreatinin

Ujian kreatinin adalah untuk membandingkan paras kreatinin di dalam urin dengan
paras kreatinin di dalam darah. Ujian ini membantu dalam memberikan maklumat
mengenai fungsi ginjal.

Jenis specimen: - serum

- Urin 24 jam
- Timed urin

Prosedur pemungutan urin 24 jam.

1. Anda perlu memungut setiap titis urin semasa dalam tempoh 24 jam. Tidak kisah
sama ada urin yang dikeluarka adalah sangat sedikit asalkan ada.
2. Mulakan dengan pungutan urin awal pagi selepas bangun tidur,selepas anda
mengosongkan bladder untuk kali pertama.
3. Buang urin untuk kali pertama dan flush ke dalam toilet. Lihat masa ( contoh 6.15
pagi) dan anda akan mulakan pengumpulan urin bermula pada masa ini.
4. Pungut setiap urin siang dan malam di dalam botol yang telah disediakan.
Simpan botol di suhu bilik atau di dalam peti sejuk.
5. Tamatkan pungutan urin pada keesokan pagi, pungut urin ke dalam botol
sehinggan pukul 6.15 pagi.

Kaedah penaksiran: - Kaedah kimia-Jaffe’

-Kaedah enzimatik- Creatinase
- Creatininase dan Creatinase
- Creatinine Deaminase

8
Kaedah kimia-Jaffe’.
Prinsip: Protein yang terdapat dalam sampel akan dimendakkan oleh acid tungstik dan
diasingkan melalui emparan. Kreatinin yang berada pada supernatant
bertindakbalas dengan picrate ion dalam larutan beralkali dan menghasilkan
kompleks orange-red terang (kompleks Janovski). Tindakbalas ini dinamakan
tindakbalas Jaffe’. Keamatan warna akan diukur menggunakan spektrofotometer
(520 nm) yang berkadar langsung dengan kepekatan kreatinin dalam spesimen.

Bahanuji: - larutan asid Tungstik

-Larutan 0.036M asid picric
- Larutan 1.4M Natrium hidroksida
- Larutan simpanan piawai kreatinin (100 mg/dL)

Kaedah penaksiran:

Peringkat pertama: Pemisahan protein

Ambil satu tabung uji empar dan label UJIAN.

Pipetkan ke dalam tiub

1. Larutan asid tungstik 4.0 mL
2. Spesimen 0.5 mL
Biarkan selama 10 minit dan emparkan pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit.

9
Peringkat kedua: Tindakbalas kimia.

Pipetkan ke dalam tiub KOSONG (K) PIAWAI(P) UJIAN(U)

1. Air suling (mL) 3.0 2.9 -
2. Larutan Piawai - 0.1 -
10 mg/dL (mL)
3. Supernatant (mL) - - 3.0
4. 0.036M asid pikrik(mL) 1.0 1.0 1.0
sebatikan
5. 1.4M NaOH (mL) 0.5 0.5 0.5
6. Sebatikan dan biarkan selam 15 minit di tempat gelap.
7. Baca absorbans di spektrofotometer pada jarak gelombang 520nm atau
menggunakan penapis hijau Ilford 625. Sifar alat dengan KOSONG.

Pengiraan:
Aras kreatinin serum (mg/100 mL serum) dikira berdasarkan Hukukum Beer yang
membandingkan bacaan absorbans UJIAN dengan absorbans PIAWAI.

Kreatinin serum dalam mg/100 mL serum

= Abs ujian x Faktor Pencairan Ujian x Kepekatan Piawai (mg/dL)
Abs Piawai Faktor Pencairan Piawai

Anggaran rujukan: o.7-2.0 mg/dL

10
 B. Kalsium
Jenis spesimen: serum atau Heparinised plasma.

Jenis-jenis kaedah penaksiran kalsium: - kaedah fotometrik

-Ion selective Membrane electrode
- Flame emission (teknik lama)

Ujian Arsenazo III.

Prinsip: Iron calcium yang terdapat dalam serum bertindakbalas dengan Arsenazo III
Menghasilkan kompleks biru dalam pH neutral. Magnesium akan disingkirkan
Dengan penambahan 8-hidroksiquinoline 5- acid sulfonic.

Anggaran normal:
Kanak-kanak 8.8-10.8 mg/dL x 0.25-2.70 mmol/L

Kaedah Penaksiran Kalsium Bebas ( ISE).

Prinsip: An ideal I.S.E. consists of a thin membrane across which only the
intended ion can be transported.
The transport of ions from a high concentration to a low one through a
selective binding with some sites within the membrane creates a
potential difference.

Jenis-jenis ISE:
1. Glass membrane (i.e. H+ electrode)
2. Solid-state electrode (e.g. F- electrode uses a Eu2+-dopedLaF3 crystal)
3. Liquid-based electrode (e.g. Ca2+electrode uses a liquid chelator)
4. Compound electrode (e.g. CO2 gas sensing electrode)

11
 Advantage :
1. Linear response: over 4 to 6 orders of magnitude of A.
2. Non-destructive: no consumption of analyte.
3. Tiada kontaminasi.
4. Short response time: in sec. or min. useful in indust. applications.
5. Unaffected by colour or turbidity of the sampel.

Limitation:
1. Precision is rarely better than 1%.
2. Electrodes can be fouled by proteins or other organic solutes.
3. Interference by other ions.
4. Electrodes are fragile and have limited shelf life.
5. Electrodes respond to the activity of uncomplexed ion. So
ligands must be absent or masked. µ must be kept constant.

C. Asid urik

Spesimen: - serum

Kaedah penaksiran: - Phosphotungstic Acid (PTA)

-Enzimatik
- High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

Kaedah Eichorn et al.

Prinsip: Protein di dalam serum dimendapkan oleh asid tungstik. Asid uric yang berada
didalam supernatant akan menurunkan asid fosfotungstik dalam medium alkali untuk
menghasilkan warna biru. Warna biru ini akn disukat di spektrofotometer pada jarak
gelombang 640nm.

12
Prosedur:

Peringkat pertama: Pemendapaan protein.

Pipetkan ke dalam taabung uji pengempar

1. Larutan 2% Natrium tungstat 3.0 mL
2. Specimen 0.6 mL
3. 1/12 M Asid sulfat 2.4 mL
4. Sebatikan dan emparkan selama 10 minit.

Peringkat kedua: Penghasilan warna.

Pipetkan dalam tabung uji kosong Piawai Piawai Ujian

rendah tinggi
1. Air suling(mL) 4.0 2.0 - -
2. Larutan piawai 1 mg/dL - 2.0 4.0 -
(mL)
3. Supernatant (mL) - - - 4.0
4. Larutan karbonat urea 0.8 0.8 0.8 0.8
(mL). sebatikan
5. Larutan asid fosfotungstik 0.2 0.2 0.2 0.2
(mL).Sebatikan
6. Biarkan selama 11 minit di tempat gelap.
7. Baca absorbans di spektofotometer pada 640nm. Bacaan hendaklah
Dilakukan dalam masa 5 minit. Sifar alat dengan kosong.

*Berikan tempoh masa 1 minit sebelum memasukkan larutan asid fosfotungstik ke dalam tiap-
tiap tabunguji berikutnya.

13
Pengiraan:
Paras asid uric serum (dalam mg/100 mL serum) dikira bedasarkan Hukum Beer dengan
membandingkanabsorban ujian dengan absorbans piawai.

Kepekatan asid uric serum

= Absorbans ujian x Faktor pencairan ujian x kepekatan piawai
Absorbans piawai Faktor pencairaan piawai

Anggaran rujukan: 2.0-7.6 mg/dL

D. Urea

Spesimen: - serum
-plasma
- urin 24 jam (bahan pengawet thymol)

Kaedah penaksiran: -Direct – Kaedah Diacetyl

-Kaedah O-phthalaldehyde
Indirect- Coupled enzymatic
-Indicator dye
- Konduktimetri
- ISE
- Nesslerization
- Berthelot

Kaedah Diacetyl.
Prinsip: Diecetyl monoxime dihidrolisis kediacetyl dan hydroxylamine. Urea dikondensekan
dengan diacetyl dan hasilnya dioksidakan oleh campuran phosphonitric acid
menghasilkan warna kuning yang diukur dengan spektrofotometer pada jarak
gelombang 480nm.

14
Prosedur:
-Peringkat pertama: Pemendakan protein.
Pipetkan ke dalam tiub empar
1. Larutan pencair isotonic 4.6 mL
2. Specimen serum/urin tercair 1/20 0.2 mL
3. 0.5N NaOH 0.2 mL
4. Sebatikan dengan baik dan emparkan pada 3000 rpm selama 5 minit.

-Peringkat kedua: Tindakbalas kimia

Pipetkan ke dalam tiub KOSONG PIAWAI SPESIMEN
1. Air suling(mL)
2. Piawai urea 4 mg/dL (mL)
3. Supernatant (mL)
4. Larutan kerja Diacetyl monoxime
(mL)
5. Larutan phosphonitric acid (mL)
6. Sebatikan dan tutupkn tabung uji dengan guli. Didihkan dalam boiling bath selama
30 minit.
7. Keluarkan tabung uji dan sejukan dalaam air yang mengalir. Sebatikan sebelum
dibaca absorbans dengan spektrofotometer pada jarak gelombang 480nm.
Bacaan absorbans

Pengiraan :
Paras urea darah ( dalam mg/dL) ataau paras urea urin (g/L) dikira berdasarka Hukum Beer
dengan membandingkan absobans ujian dengan absorbans piawai.

15
Kepekatan urea dalam sampel
= Abs ujian x Faktor pencairan x Kepekatan piawai
Abs piawai

Anggaran rujukan:

Urea darah: 17-45 mg/dL

Urea urin : 25 g/24 jam.

Kaedah indirect: ISE

1. Kaedah ini menggunakan ammonia ion selective electrode bagi monitoring tindakbalas
urease.
2. Urease berikatan pada membrane electrode.
3. Kemudian tindakbalas ini akan menghidrolisiskan urea kepada ammonia dan karbon
dioksida.
4. Pembentukan ammonia yang terhasil dikesa dengan menggunakan menggunakan
elektrod ammonium.
5. Kaedah ini adalah sangat spesifik.

Blood urea nitrogen.

Blood urea nitrogen (BUN) mengukur jumlah urea nitrogen, sejenis bahan
hasil metabolism protein di dalam darah. Urea terbentuk oleh hepar dan dibawa oleh
darah kepada ginjal untuk dikumuhkan. Disebabkan oleh urea dikeluarkan daripada
salur darah oleh ginjal , satu ujian untuk mengukur sebanyak mana urea nitrogen yang
masih ada dalam darah boleh digunakan sebagai ujian untuk fungsi renal.
Walaubagaimanapun , terdapat banyak faktor yang boleh menyebabkan penyakit renal
yang menjadikan BUN alterations, termasuklah protein breakdown, hydration status dan
liver failure.

16
1 molekul urea tedapat 2 atom nitrogen.

Berat molekul urea=60

Berat molekul nitrogen=14

Berat molekul nitrogen dalam urea=14x2

=18
: 60 g/L urea=28 g/L BUN

E. Fosforus

Spesimen: - serum
-heparinized plasma
- urin

Kaedah penaksiran: - Kaedah Fotometrik UV

-Hydroquinone
- ANS( 1-amino-2-naphthol-4-sulfonic acid)

Kaedah Fotometrik UV.

Prinsip: Iron phosphate bertindakbalas dengan Ammonium moblidate dengan asid sulfuric
menghasilkan kompleks fosfat moblidek inorganic.

17
LAMPIRAN

18
19
20
 RUJUKAN
Arthur J.Vander, M.d., Renal Physiology (fourth edition), 1991, McGRAW-HILL
International Book, Co.
Sir Douglas Black, M.D. F.R.C.P.,Renal Disease (Third edition), 1972, Blackwell
Scientific Publication.
Helmut G. Rennke, M.D., Bradley M.Denker, M.D, Renal Pathophysiology The
Essentials (third edition), 2010, Lippincott Williams and Wilkins, Co.
Barry M. Brenner, M.D. J.Michael Lazarus, M.D., Acute Renal Failure (second
edition), 1988, Churchill Livingstone Inc.
C.Craig Tisher, M.D., Barry M. Benner,M.D., Renal Pathology With Clinical and
Functional Correlations (volume 1 and 2), 1989, Lippincott Company.
pro2services.com/Lectures/Spring/Renaltest.htm
www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003611.htm

21