KARSINOGENESIS

KARSINOGENESIS,
IMUNOLOGI TUMOR
dan
TARGETED THERAPY
Syarifuddin Wahuid
Bagian Patologi Anatomi
Fak Kedokteran Unhas
Fak. Unhas.

PIB FKUH 28 November 2008

 MUTASI DAN KARSINOGENSIS

SEL TUMOR
???

SEL NORMAL MUTASI PENYAKIT LAIN

PENUAAN
 MUTASI DAN KARSINOGENSIS

Environmental agents
(Chemicals,radiation, Normal Cell DNA damage
viruses)

DNA repair DNA repair

gagal

apoptosis
 MUTASI DAN KARSINOGENSIS

Environmental agents
g Failure of
Normal Cell DNA damage
(Chemicals,radiation, DNA repair 1
viruses)
DNA repair

Permanent DNA damage Failure

apoptosis

Mutation in the genome of

Somatic cells
 MUTASI DAN KARSINOGENSIS

Environmental agents Failure of

(Chemicals,radiation,
Normal Cell DNA damage
DNA repair 1
viruses)
DNA repair Permanent DNA damage

Mutation in the genome of Failure

Somatic cells apoptosis

2 Activation of growth- Tumor suppressor Alteration in gene

promoting oncogenes 3 genes
4 Regulate apoptosis
 MUTASI DAN KARSINOGENSIS

Environmental agents Failure of

(Chemicals,radiation,
Normal Cell DNA damage
DNA repair 1
viruses)
DNA repair Permanent DNA damage

Mutation in the g
genome of Failure
Somatic cells apoptosis

2 Activation of growth
growth- Tumor suppressor Alteration in gene
promoting oncogenes 3 genes
4 Regulate apoptosis

Unregulated cell proliferation Decreased apoptosis

Clonal Expansion
 MUTASI DAN KARSINOGENSIS
Environmental agents Failure of
(Chemicals,radiation,
Normal Cell DNA damage
DNA repair 1
viruses)
DNA repair Permanent DNA damage

Mutation in the genome of Failure

Somatic cells apoptosis

2 Activation of growth- Tumor suppressor Alteration in gene

promoting oncogenes 3 genes
4 Regulate apoptosis

Unregulated cell proliferation Decreased apoptosis

Clonal Expansion
5 angiogenesis
Additional mutation6
7 Escape from immunity
Tumor Progression
Invasion and
metastasis
8
MALIGNANT NEOPLASM
Mismatch repair abnormallities
APC mutation
t ti
K-ras mutation DC LOH,
LOH LOH off P53 mutation
t ti
DNA methylation Other Genes on 18q And/or LOH
abnormalities

Hyperproliperative Adenoma of increasing size and Invasive carcinoma

epithelium degree of dysplasia

GASTROINTESTINAL CANCER, 2004.

Loss of P53 gene on
Chromosome 17p
IMUNOLOGI TUMOR
Sel Tumor
CANCER TARGETED THERAPY
 Tujuan utama:
Menghambat pertumbuhan dan penyebaran sel
tumor dengan cara:
1. Memblok signal pertumbuhan sel tumor
2. Menghambat
g layanan
y darah ke jjaringan
g
tumor.
gg
3. Menggunakan kemoterapi/radiasi
p yyangg
dituntun oleh antibodi terhadap suatu
g p
molekul target pada sel tumor.
 Sasaran obat
Molekul spesifik yang:
1. Terlibat dlm proses karsinogenesis,
pertumbuhan
t b h d dan penyebaran
b
tumor.
2. Terlibat dalam angiogenesis.
3. Menjadi
j marker dari sel tumor
bersangkutan.
(Molecularly targeted therapy)
 Transformasi: Onkogen HER2
Normal Amplifikasi/Overekspresi
HER2 reseptor
protein
3
HER2
mRNA

2
1
4
Cytoplasm
y p HER2 DNA
Nukleus
Cytoplasmic
membrane
1 = ↑ jumlah copy gen
2 = ↑ transkripsi mRNA
3 = ↑ ekspresi reseptor protein permukaan sel
4 = ↑ pelepasan reseptor dari bgn extraselluler
VEGF
 B CELL DEVELOPMENT
H chain
h i H & L chain IgM IgD
IgM,IgD

Mature B
Stem Cell Pro-B Pre-B Immature B Activated B
Bone Marrow Peripheral lymphoid
organ or tissue
No antigen dependence Self antigen Foreign antigen
RAG-1 & RAG-2 expression
CD43+
CD43+ CD19+ B220 IgM(low)
CD10+ CD43+ CD43- IgM(high) IgM(high)
CD20
CD20 CD20
CD20 CD20
CD20 CD20
CD20 CD20
CD20
 Tipe targeted therapy
1. Fokus pada molekul yang merupa-
kan komponen internal dan fungsi
sel. (Menggunakan molekul kecil yang
dapat mencapai sel dan meng meng-hambat
hambat
fungsi sel dan akhirnya mati).
- Single
Si l ttransduction
d ti inhibitor
i hibit
(Imatinib mesylate, Genefitinib, Laptinib,
HER2 tyrosine kinase inhibitor)
inhibitor),
- Biologic response Modifier Agent
(D il ki diftit
(Denileukin diftitox),
) ddan
- proteosome inhibitor (Bortezomib).
 Tipe targeted therapy
2. Fokus pada molekul di bagian luar sel
(membran sel) misalnya reseptor atau molekul
membran lainnya.
(Menggunakan antibodi monoklonal)
mis: Anti HER2, Anti CD20
3. Fokus pada molekul (growh factor) yang ada
dalam sirkulasi
(Menggunakan antibodi monoklonal)
Mi : A
Mis Anti
ti VEGF
4. Fokus pada gen (Gene therapies).
JENIS TARGETED THERAPY

1. Menggunakan
gg Small Molecule Drug
g
(SMD)
2. Menggunakan Monoclonal Antibody
(MAB)
3 Menggunakan Gene Therapy
3.
Cara Kerja Small Molecule (SMG)

Melakukan interferensi pada

proses internal yang berkaitan
d
dengan pertumbuhan
t b h sell tumor
t
dengan cara menghambat signal
mulai dari reseptor di permukaan
sel sampai
p ke inti.
Gambar 4. Penghambatan
ligan dan reseptor VEGF
oleh smal molecule drugs
 Cara kerja MAB
Menghambat signal pertumbuhan tumor atau
yang memfasilitasi pertumbuhan tumor
• Mengikat growth factor atau molekul
lainnya (mis. angiogenesis) yang ada dalam
sirkulasi sehingga tidak bisa binding
dengan reseptornya.
• Binding dengan reseptor growth factor
atau angiogenesis sehingga tidak bisa
dicapai oleh growth factor atau molekul
angiogenesis.
p
• Memicu internalisasi reseptor atau
pelepasan reseptor fari membran sel.
 Cara kerja
j MAB
Sebagai pencari sel tumor.
Mengikat
M ik t molekul
l k l yag ada
d di permukaan
k sell tumor
t
sehingga bahan aktip antikanker (kemoterapi atau
radioterapi) yang diikutkan di MAB dapat mencapai
dengan tepat sel tumor.
tumor (Mengantar obat
kemoterapi atau radioaktip mencapai target.
Mengefektifkan sistem imun tubuh membunuh
sel tumor (humanized MAB)
Binding dengan protein permukaan (reseptor atau
tumor marker) kemudian berinteraksi dengan
sistem imun tubuh ang akan membunuh sel target
target.
Memicu apoptosis sel tumor.
CARA PEMBUATAN
ANTIBODI MONOKLONAL
MONOCLONAL ANTIBODY
for
TUMOR ANTIGENS

ANIMAL
Antigen Antibody

Diagnose &
Therapy

TUMOR CELLS
 Antigen-X

MONOCLONAL
ANTIBODY
Mouse myeloma
Anti-X antibody- Cell line
FUSION
producing spleen cells

In vitro selection in HAT medium

“Clone” cells

Screen supernatant for presence of anti-X antibody

Hybridomas producing
Monoclonal anti-X antibody
y
 Antigen-X

MONOCLONAL
ANTIBODY
Mouse myeloma
Anti-X antibody-
producing spleen cells Cell line
FUSION

In vitro selection in HAT medium

“Clone” cells

Screen supernatant for presence of anti-X antibody

Hybridomas producing
Parent mouse
Monoclonal anti-X antibody
y antibody

Genetic engineering
HUMAN/MOUSE CHIMERIC MONOCLONAL ANTIBODY (HUMANIZED MAB)
 Antigen-X

MONOCLONAL
ANTIBODY
Mouse myeloma
Anti-X antibody-
producing spleen cells Cell line
FUSION

Genetic engineering In vitro selection in HAT medium

“Clone” cells
MONOCLONAL
ANYIBODY-LIKE
MOLECULE

Screen supernatant for presence of anti-X antibody

Hybridomas producing
Parent mouse
Monoclonal anti-X antibody
y antibody

Genetic engineering
HUMAN/MOUSE CHIMERIC MONOCLONAL ANTIBODY (HUMANIZED MAB)
 HUMAN/MOUSE CHIMERIC
Idiotype MONOCLONAL ANTIBODY Antigen
(cdr) (HUMANIZED MAB) Binding Site
H-Chain
Murine
Variable
Fab region
L Ch i
L-Chain (biru)

Human constant қ region

papain -s-s-
Constan
Human constant Fc region
region
Fc (merah)

Gambar 12. Struktur humanized

monoclonal antibody.
 HUMAN/MOUSE
CHIMERIC MONOCLONAL ANTIBODY
(HUMANIZED MAB)

Variable region
a amino tikus (murin)
a.amino
(<10%)

Constant region
a.amino manusia
(>90%)
 Keuntungan chimeric antibody
• Pembuatan antigeng binding g site (Fab
(
variable region) yang spesifik pada mencit
akan menjamin ikatan efektif dengan target
antigen.
antigen
• Unsur human pada Fc constan region
memungkinkan interaksi lebih efektif dengan
human effector mechanisms dari respon
imun pasien untuk membunuh sel target.
• Unsur human pada struktur antibodi di atas
90% memperkecil kemugkinan timbulnya
reaksi penolakan/allergi/syok dari pasien
pasien.
 CANCER TARGETED DRUGS
Gefitinib :
- SMD mengikat HER1 dari EGFR
- Non-small
N ll cellll llung cancer.
Imatinib
- SMD menghambat aktipitas protein
tyrosine kinases
kinases.
- Chronic Myelogeous leukemia, GIST
 CANCER TARGETED DRUGS
Trastuzumab
- MAB terhadap terhadap HER-2 dari EGFR
- Metastatic Breast Cancer
Rituximab - MAB terhadap CD20.
- non-Hodgkin
non Hodgkin’s
s lymphoma
Gemtuzumab - MAB-chemotherapy
complex
- Acute myeloid leukemia
 CANCER TARGETED DRUGS
Ibritumomab tiuxetan
- Radio-conyugate MAB drug terhadap
CD20.
CD20
- Follicular B-cell non-Hodgkin Lymphoma
T it
Tositumomab b
- Radio (Iodine 131)-conyugate MAB
terhadap CD20.
- Follicular non-Hodgkin Lymphoma.
 CANCER TARGETED DRUGS
Bevacizumab
- MAB terhadap VEGF.
,
- metastatic colorectal cancer,BC dan NSCLC
Cetuximab
- MAB terhadap EGFR
- colorectal cancer
Alemtuzumab
- MAB terhadap reseptor CD52
- B-cell Chronic Lymphocytis Leukemia.