ARGENE @ stro 6-280 Anti-ADENOVIRUS C € CONCENTRADO vo] REF] 11-020 Isotipo: Ig2a ¥ allquota 0.5 mi de anticorpo monoclonal puricado (40x), ‘Tampio Fostato pH: 7.2 Hospedeiro: Establizante proteico alo, Detergente Gieeot Purificagao: Fete toctn 300° como conservante® Purifcado em coluna de protaina A recomibinante, * Consutte a secgo Directvas de seguranca e utiizacto. | Armazenagem antes e depois da abertura Reagente A. + Fotheto informative = ‘uma temperatura de #2/+8°C (no dluldo) até a0 prazo de + Folhet informativo fomecido na embalagem ou a pare de ‘validage inciead na embalagem, wwvu.biomereux.comitechib Especificidade: Determinada por imunotuorescéncia indirecta em células MRGS infectadas por AdV 1, 2 3, 4, 5, 6, 7,8, 9,10, 12,13, 14, 16, 22,28, 38,43, 44, 45, 46, 47, 0 teagente reconhocs um antigeno especifco do grupo e dé uma fluorescéncia nuclear eiou ou etoplasmica em mote caracteristica. ‘Auséncia de reacpdo cruzada com os outros virus resporatérios (A, IB, Para 1, 2, 3, VRS, sarampo e papeira). 1. Intoresse do teste 2 2. Indicagses de utlizago 2 3. Principio do test. 2 4. Directvas de seguranca e utlizasso, 2 5. Colheita 6 transporte das amostras 3 6. Reconstiui¢so dos reagentos 4 7. Detecgao rapa dos Adenovirus em secregces nasofaringeas por imunofuorescéncia 4 8, Revolagae da cultura do Adenovius por imunottuoreseéneia 5 9. Leitura@interpretagao dos resultados 6 10, _Difculdades encontradas na imunofluorescéneia / Explicagbes & Solugses, 7 11. Desempentos: ° 12, Materiais © reagentes necessérios nao fomeciéos 10 13. Outros reagentes. 10 14, Releréncias " 15. Quatro de simboles. n 16. Histrico das revisoes 2 Page 1/12ARGENE @ aires @ 1. A Interesse do teste ‘Adenovirus, Virus resplratério sinciial (VRS), Parainfluenzavirus (PIV) ¢ Influenzavirus A © B + 0s virus respiratrios Sinctal, Infuenza A e B, Parainfuenza 1, 2, 3 e 0 Adenovirus s80 responsavels por infeogbes respiratirias frequentes, que podem ser graves nos lactenies © nos idosos cu naqueles cuja sade se encontra debiltada. O diagnostic vial declas infecrdes ¢ essencal para a apicagdo da terapéulica © das medidas de preven¢do adequadas. + 0 diagnéstco’serolégico nao fomece quaisquer informagées no caso de uma infeccéo aguda: a percentagom de articorpos sé aumenia de forma signifeaiva docorridos 10 a 18 dias sobre a manifstardo dos sinais clinicas. Segundo os testes ullizados, os ‘nticorpos podem néo ser detectados no lacente +O método de referéncia 6 0 isolamanto @ ientiicacdo dos vieus em cultura celular (inhagens colulares: HeLa, KB, HEp-2 ou oélulas fibroblastcas numanas de origom embrionaia: MRC-5), a de uma colheta nasal, esftegapo ou lavagem nasofaringea, de uma aspirapso traquecbronquica ou de um Iquido de lavagem broncoalveolar, a colhelts deve ser efectuada durante a fase maxima de Tipertagéo do virus, ou sea, capidamente, apds a manifestagdo dos sinais clinics (menos de 3 dias). [A detecga0 dos Virus directamente nas colhetas eefectuacas nos doertes permite realizar um dlagnéstico répido destas infeogbes, som passar pola delicada atapa da cultura cella. A técnica da imunafluerescéncia, praicada na amostra respiatéra 6 um metodo Simple e ofeaz, gragas & Ultzagdo de anlicorpas monoclonals especiicas destesvius, ‘+ 05 antcorpos monaclansis ant-proteinas vras foram selecciondos pela sua especicidade e pela qualidade da imagem observada ‘om munofuorescéncia 0 aspecte habitual 6 o de uma incksdo fuorescente granular ou parteula bem viivel na ctoplagma ou no Iicleo das células infectadas. Estes anticorpos monoclonals podem ser iqualmente utizados para identfcar os Vitus apds © seu ‘solamento em cultura cellar. Indicagées de utilizacao + Este reagente permite a detecea0, por imunofuorescéncia indirecta, de um antigeno especifico de grupo em amasiras de secregoes rnasais ou iraquesbrénquicas de doentes sinlomalicas infectados. Principio do teste + Este reagente destina-se & detecgéo do Adenovirus nas cflulas infectadas. A delecr0 decorre pela técnica da imunofluorescéncia Indrecta, nas células das vias respiratéias, ou om cultura de células infoctadas. + Este reagent fixe-se especiicamente no antigenio expresso no nncleo das oélulasinfectadas. + 0 antcorpo monoclonal fxado nas célulasinfectadas & em seguida evidenciado, gragas @ incluso de um segundo anticorpo diigido contra 0 primeiro. Este segundo antcorpo & marcado por fuoresceina. ‘+ As eélulas infectadas pelo Adenovrus fxaram o antcorpo monoclonal e aparecem fuorwscentes na observagdo sob uz UV. Directivas de seguranga e utilizagao Este reagenia des na-se excusivamenteaulizagdo in vito Directv de manuseamento para imunotogia ‘+ Controlarperiodicament 0 microsespio de espectro luminoso vsivel ou UV (Impeza das objectvas,focagem e desgaste da lémpada) + Utlizar laminas de video limpas e sem gordura impeza com aleoo). Precaugées gerais de manipulacéo: + Leratentamente todas as instuges, antes de iniciar a manipulagao Manusear @ ellminar todas as amosiras, material, reagentos e efluentes, como se estes fossem suscoptivels de transmit agentes infectiosos, em conformidade com a lecislag4o em vigor. ‘+ Este reagente deve apenas ser ulizado por pessoal qualficado e com formagao adequada, + Leratentamente todas as instugoes antes de qualquer manuseamento. + Respeitar os tompos, as tomporaturas o a volocidade de centitugacao presenta ‘+ Nia utilizar os reagentes apdeo prazo de validade impresso na respeciva ebquela, Respeilar as condigSes de armazenagem, +O contolo © a manutengso dos equipamentos utlizacos devem ser efectuados segundo as normas-ipo GBEA, BPL ov equvalentes. + Usar luvas descartivels quando do manuseamento de reagertes © amostras. Lavar cuidadosamente as mfos apés. cada manuseamerto, ‘+ Equilbra os agentes & temperatura ambiente antes do tlizar + Homogensizar bem os reagentes, antes da sua ulizapto, 1 Nao forar as tampas dos frascos. ‘+ Nunca fazer pipetagens com a boca. ‘Nao beber, fumar ou come no local de trabalho. ‘+ 0s reagentes no utilzados devom ser elminados eeguindo os procedimentos relavas aos residuos quimicas pergosos. Eliminar os reagentes utllzados bem como os materais descaravels contaminados sequindo os procedimentos relatvos aos produtos infecciosos au potencialmenteinfeciasos. E da responsablidade de cada laboralrio geri o$ residuos @ os efluantes que este produz consoante a sua nalureza @ 0 seu perigo, © assegurar (ou fazer assegurar)o tratamento e a ellminagao em conformidade com as regulamentagdes aplicaves. Page 2/12ARGENE @ ve * Polavra-sinal: ATENCAO Adverténcia de perigo H317 : Pode provocar uma reacgo alérgica cuténea, Reecomendacao de prudéncia 280 : Usar luvas de protecgaolvestuario de protecrSolproteccao oculariproteceo facial 902 + P352:: SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE: lavar abundantemente com agua, Para mais informagées, consular a fcha de segurana. 5. Colheita e transporte das amostras A. Colhelta das amostras: + Aqualidade da amosira 6 o factor essencal que datermina a eficdcia © a fabildade do método, + 0s Adenovirus so procurados nas cahelas das secresbes nasls ou traquedbrénqucas dos dostes,efectuadas quer por aepirapo (cariz ou raqueiatbronquies), quer, como 6 0 casa se 9 narz da doenfa se encontra seco, por lavagem nasofaringea AA. Aspiragao nasofaringea * Incinar a cabega do doente cerca de 70" para tts (hiperextensto), ) + Colocar a sonda de aspiragao na parte anterior da rnofaringe © adaptar 0 aspirador de mucosidades (bomba de van ‘aspragio) oua seringa, 2 + Sem parar de aspirar © muco, retire suavemente @ sonda, + Lavar, se necessério, 0 catéter com uma solugao salina ou como meio de transporte {+ Desearregar a iqudo recalhido num tubo cantando, ee necessario, um meia de ‘ransporte (var «Transport das amostass), Tdade do deonte | Tamanho do Prossio de eatéter aspiragao Babs promaturos 3 0-100 mig Lactentes 2 20-100 mm Ciiangas detente 10 700-120 mmig dade Changes: a TORO AMG Faolescantes 4 720-150 mig ‘adultos ‘A. Lavagem nasofaringea ‘+ Inclinar a cabega do doente cerca de 70° para ras (hiperextensa0} \ + Inserr 3 a mI de sor fisiclbgico estéi numa narina, com uma seringa ou uma borracha estéi “+ Reasprar de imaciato 0 lquido para a seringa ou a barracha. + Descarrogar 0 iqudo recolhido para Um tubo contendo, 86 necesséro, um mela de transporte (ver eTransporte das ‘amostrass) AS. Esfregago nasofaringeo + ttoduzit 0 escovnao numa das narinas. + Fazondovo pensirar mais a fundo mediante rolagdo suave, inttoduzir 9 escavilhdo no nariz até encontrar Tesisténcla ao nivel dos selas perinasals (menos de 2,5 em desde a entrada das narnae). + Rodar o escovilhéo por diversas vezes contra a parede nasal + Retia-o, calocé-lo nur tubo ester contend 1 ml 82 ml de meio de transporte (ver eTransporte das amostras»). + Esfragar energicamente o escovihao nas paredes do tubo. ‘+ Retiraro maximo de liquide do escovilhso, compriminde-o contra as pared do tubo e dear 0 escovihao fora, B.Transporte das amostras + O'meio de transporte ullizado pelo laboratério deve ser validado no Ambito deste teste. Utiiza-se, por exemple, Meio de Eagle nriquecido am soro de feta de bovina,contendo aventualmente anibisticos, a fim de reduzir a prolferagao da flora associads. ‘+ As amostras devem ser ransportadas e ratadas labovatorialment, 0 mais rapidamente possivel + Para um exame por imunofluarescéncia do material calhido, um periodo de conservacsa inferior a 3 horas, & temperatura ambiente, ou ‘de 48 horas a uma lomperatura ent +2 e +8°C, ndo allra a qualidade dos anigenios vials o das cblulas, + Se se pretender o isolamento do virus por cultura celular, a naculagae nao deve ser dferente da colheia de amostras. A poténc'a infecciosa do virus diminui rapidamente apés a calheita de amosttas @ @ prépra amastra deve inperativamenta ser conservada @ Luma tomperatura eri +2 0 +8°C durante esto interval do tomo. Page 3/12