AKTIONSPOTENTIALET

(1, 2)
• Membran passive egenskaber
• Aktionspotentialets udvikling
• Ion kanaler
• Aktionspotentiale udbredelse
• Ekstracellulære afledning og stimulation

Jean-Francois Perrier 24.3.39

perrier@sund.ku.dk
Civilingeniør I Medicin & Teknologi
Noter kan findes Absalon 4. semester
 Ladning, strøm, spænding og modstand

-  Ladning (Q) måles i Coulomb (C)

-  Ladnings bærer: Na+, K+, Cl-, Ca2+, H+
-  Strøm (I) måles i Ampere (A)
-  I: ladningsmængde, der passerer et tværsnit af lederen per tidsenhed; I=Q/t
-  Spænding (V) måles i Volt (V)
-  Modstand (R) måles i Ohm (Ω)
-  Konduktans (G) måles i Siemens (S); G=1/R
-  Ohms lov:
V=RI V=I/G
 Kapacitet
+ + + + + + +
++ ++
C
-- -- m
- - - - - - -

Q = CV
Kapaciteten (C) måles i Farad (F)

dQ dV dV
=C  Ic = C
dt dt dt

Hvis V er konstant (dV=0), IC=0

 Membranpotentialet
Na+ -
Ekstracellulær Cl K+
2 K+

gNa=0.025 gCl=0.05 gK=1

Intracellulær
Na+ Cl-

1- Der er forskel på ionkoncentrationerne på de to sider af membranen K + ATP ADP

3 Na+
2- Permeabiliteten for K+, Na+ og Cl- er forskellig Nernst’s ligning R: gas konstant
T: temperatur (K)
3- Koncentrationsforskellene fastholdes pga. Na/K-ATPase pumpe RT ⎛ Cout ⎞
Eeq = ln⎜ ⎟ z: ions ladning
zF ⎜⎝ Cin ⎟⎠ F: 96 480 C/mol
Intracellulær Ekstracellulær Ligevægts
koncentration koncentration potentiale
Millman’s ligning
K+ 130 mM 4 mM -90 mV

Na+ 10 mM 140 mM +50mV

Goldman’s ligning
Cl- 6 mM 104 mM -75mV

Vm ≈ -70 mV
 Millman’s ligning
-Når membranen er i hvile, er membran potentialet konstant. Derfor er nettomembranstrømmen lige med 0.

I Na + I K + I Cl = 0 V=RI (Ohms lov)  V=I/g I x = g x (V − E x )

g Na (Vm − E Na ) + g K (Vm − E K ) + g Cl (Vm − ECl ) = 0

E Na g Na + E K g K + ECl g Cl Millmans ligning: Membranpotentialet kan beskrives som summen af

Vm = ionernes ligevægts potentialer og deres membrankonduktans divideret
g Na + g K + g Cl med summen af ionernes konduktanser.

Når membranen er i hvile, gK>>gCl>gNa , Derfor Vm≈ Ek

KDR channel
Na channel

Leak K channel

Cl channel
 Kapacitet ændrer membrans spændings tids udvikling
τ
τ er membrans tidskonstant
Vm

1-e-1
1
ΔVm

Ic
Ic
Ii Ii tid
Ii IC
Im
Vm dV
++ + Im=IC+Ii V
Ii = m Ic = C
dV
=> Im = +C m
R dt R dt
Rm Cm
--- Im ⎡ −t
⎤ τ=R.C
ΔVm (t ) = ΔVm ,∞ ⎢1 − e τ ⎥ Vm,∞ = Im.R
⎣ ⎦
ERP
Hvis t = τ
ΔVm = ΔVm ,∞ 1 − e −1[ ]
ΔVm = ΔVm ,∞ [1 − 0.37]

ΔVm = 0.63.ΔVm ,∞
Længdekonstant (λ)
ro

rm
Cm

ri
−x

Vm (mV)
ΔVm ( x ) = ΔV0e λ

100%
rm rm
λ= ≈
ri + ro ri
37%
1/e

λ ≈ 1-2mm
λ

Afstand (mm)
 Aktionspotentialet
V1 V2 Alt eller intet

Hvordan kan man analysere aktionspotentials mekanismer?

- Spænding ændres med afstand

- Strøm (kapacitiv og ionisk)

repolarisering - Spænding ændres med tid

- Strøm (kapacitiv og ionisk)

depolarisering
Man kan måle ion strøm ved hjælp af Voltage clamp teknik

Nobel Prize in Physiology or Medicine 1963

50mV For their discoveries concerning the ionic mechanisms
involved in excitation and inhibition in the peripheral
and central portions of the nerve cell membrane

V1
V2
efterhyperpolarisering
Im
Alan Hodgkin Andrew Huxley
1ms
 Voltage clamp

Vm
-
+

Error
Im Signal=Im Vcommand
0 mV

rm -70 mV
ri bliver mindre og derfor bliver λ meget større λ ≈
ri 1
Afstandsparameter er fjernet (space clamp) 10% Na
IM 0
Man kan holde spændingen på en bestemt værdi (mA/cm2)
100% Na
dVm dV -1
=0 => Ic = C m = 0
dt dt INa Forskel strøm
+70mV
Vm (mV) +30mV 1 ms
-10mV
Inward strømmen forsvinder når man fjerner ekstracellulær Na+
-60mV
+70 Kortvarig inward strøm er medført af natrium

1
+30 Langsom outward strøm er medført af kalium
-10
IM 0
(mA/cm2)
-1 1 ms

Depolarisering medfører en difasisk strøm: inward og outward

Inward strømmen vender ved +50 mV
Outward strømmen vender ikke ved depolarisering
 Konduktansændring

VM (mV)
0 mV 1 I
g= =
+70mV R V
+30mV -70 mV
VM (mV)
-10mV 1 IK I Na
-60mV 10% Na g Na =
V − E Na
+70 IM 0
(mA/cm2)
+30 100% Na IK
1 gK=
-1 V − EK
-10
IM 0
INa Forskel strøm=INa
(mA/cm2)
-1 1 ms
1 ms

0 mV

VM (mV)
IM (mA/cm2)

-70 mV
5 gNa: hurtig aktivering
20 gNa

Konduktans (mS/cm2)
langsom inaktivering
10
20
10 gK gK: langsom aktivering
Ingen inaktivering
-50
0 2 4 6 8 10
0 50 VM (mV) Tid (ms)

gNa: aktivering og inaktivering antyder at Na

konduktansen har 2 gates
-5
Lineær sammenhæng
 Ækvivalensdiagram for axonmembran

Ydersiden
3 slags konduktans:

- Natrium
Spændingsafhængige
- Kalium
- Leak
gL gK gNa Cm

EL EK ENa

Indersiden

Modificeret fra Hodgkin & Huxley 1952

Den aktive membrans egenskaber er bestemt af
spændingsfølsomme ion kanaler

Leak kanaler Natrium kanaler Kalium kanaler

(altid åbne)
Spændingsafhængige ion kanaler
 Enkelt kanal optagelse
Nobel Prize in Physiology or Medicine 1991
For their discoveries concerning the
function of single ion channels in cells

Erwin Neher Bert Sakmann

 Na+ kanaler: sandsynlighed for åbning

-30mV
-50mV
-50mV -70mV
Vp Vp
-120mV
-120mV

sandsynlighed
Ip
0.2 pA -70mV

Åbnings
-30mV
-50mV
Ip
Ip -50mV
-30mV
-70mV

Tid (ms)
5 pA sandsynlighed for åbnings af Na+ kanaler er spændingsafhængig

10 ms
sandsynlighed for åbnings af Na+ kanaler er tidsafhængig
 Na+ kanaler: åbningssandsynlighed
HVILE DEPOLARISERING

Inaktiverings gate Aktiverings gate

100%

Fraktion af åben gates

50%

lukket åben inaktiveret

deaktivering
-80 -60 -40 -20 0 20
Vm (mV)
Aktiveringsgate
Inaktiveringsgate

Inaktiveringsgate
 Na+ kanaler: aktivering/inaktivering
Voltage clamp
-10mV
-30mV
-50mV
-120mV
Vh
Vh(mV)

INa (nA)
aktivering -40 -0 40

inaktivering

1 nA

Whole cell optagelse Current clamp Tærskel ≈ -50 mV

50mV

aktivering inaktivering

1ms
Im
 K+ kanaler : åbningssandsynlighed

+50mV -10mV
-30mV
Vp -100mV -50mV
Aktiverings protokol
Vh
Ip 2 pA -80mV

I (µA)
Whole cell optagelse

30

20

I (µA)
10

Ip 1 pA
-100 0 100
Vh (mV)
10 ms
Kaliumkanaler inaktiveres ikke tærskel ≈ -60 mV

Kaliumkanaler åbner med en forsinkelse

= ”Delayed Rectifier” (KDR)
Na+ og K+ kanaler: Current clamp
Vm

50mV

Vm

Kalium strøm forkorter aktionspotentialet

Im

1ms
Aktionspotentialets udbredelse
Axon uden myelin Axon med myelin

Schwann celle

+ + + + + -+-+-+-+-+ -+ -+ -+ + + + + + + +
- - - - - -+ -+ -++
- -+-+-++ --------

Ranvier’sk
indsnøring Myelin

Tid mellem stimulus

og aktionspotential
Refraktær
membran

Afstand

Myelin forhøjer udbredelses hastigheden

 Registrering med eksterne elektroder: difasisk aktionspotential
1mV
En differentialforstærker trækker signalerne fra de to
elektroder fra hinanden: 0mV
Signalet i minus indgangen trækkes fra signalet i plus
indgangen: (+) - (-) -1mV
+
_

+ + + _+_ _ +_ _ + + + + + + + + + + + + + + + + +
- - - -+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
+ + + + + + + +
_____ + + + + + + + + + + + + + +
Registrering med eksterne elektroder: invertering af måleelektroder
1mV
0mV

-1mV
_
+

+ + + _+_ _ +_ _ + + + + + + + + + + + + + + + + +
- - - -+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
+ + + + + + + +
_____ + + + + + + + + + + + + + +
Registrering med eksterne elektroder: lille afstand mellem elektroderne
1mV
0mV

-1mV
+
_

+ + + _+_ _ +_ _ + + + + + + + + + + + + + + + + +
- - - -+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
+ + + + + + + +
_____ + + + + + + + + + + + + + +
Registrering med eksterne elektroder: stor afstand mellem elektroderne
1mV
0mV

-1mV
+
_

+ + + _+_ _ +_ _ + + + + + + + + + + + + + + + + +
- - - -+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

+++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
+ + + + + + + +
_____ + + + + + + + + + + + + + +

2 monofasiske aktionspotentialer
Registrering med eksterne elektroder: monofasisk aktionspotential
1mV
0mV

-1mV
trifasisk aktionspotential
+
_

+ + + _+_ _ +_ _ + + + _
+__
+__
+ + + + + + + + + + + +
- - - -+++++
- - - - - -+++++
- - - - - - - - - - - - - - -

+++++ +++++
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
+ + + + + + + +
_____ + +
_____ + + + + + + + + + + + +
Kaliums betydning for excitabilitet: Høj ekstracellulær K+

RT [K ]o [K]o=4mM og [K]i=130mM  EK=-87mV

Ek = ln [K]o=6mM og [K]i=130mM  EK=-77mV
F [K ]i
Millman’s ligning

Hvis EK er mindre negativ bliver membraner depolariseret

0 mV

Derfor stiger excitabiliteten

Tærskel

Vm’
Vm

EKK’
 Kaliums betydning for excitabilitet: Høj ekstracellulær K+
Hvis EK bliver endnu mindre negativ ([K+]o meget høj):
ENa

Aktivering
0 mV
Inaktivering af Na+ kanaler
af Na+ kanaler Aktivering af IKDR
Intet aktionspotentiale. Derfor bliver celler mindre excitable
Alle natrium kanaler er inaktiveret

Vm’

Tærskel
Vm
IKDR
E
EKK’

Inaktivering af Natrium kanaler bliver fjernet

pga. hyperpolarisering
Kaliums betydning for excitabilitet: Lav ekstracellulær K+

Hvis EK er mere negativ bliver membraner hyperpolariseret

0 mV

Tærskel

Vm’
Vm

EKK’

Derfor bliver celler mindre excitable

 Calciums betydning for excitabilitet: Charge screening

Membran potential = Transmembran potential Membran potential > Transmembran potential Membran potential > Transmembran potential

- - -

0 mV
++ - - -
0 mV
- - -
++ - ++- -
EM
- - -
++ - - -
-70 mV -70 mV

Høj [Ca2+]o Lav [Ca2+]o [Ca2+]o=0

Membranen bliver hyperexcitable

Elektriske potentialprofil