CHLORIDE

Chloride
Thiocyanate-Hg. Colorimetric

Quantitative determination of chloride ion CALCULATIONS

IVD ( A ) Sample
x 125 (Standard conc.) = mmol/L chloride in the sample
Store at 2-8ºC ( A ) S tan dard
( A ) Sample
PRINCIPLE OF THE METHOD Urine 24 h: x 125 x vol. (dL) urine/24 h =mmol/24 h chloride
The quantitative displacement of thiocyanate by chloride from mercuric ( A ) S tan dard
thiocyanate and subsequent formation of a red ferric thiocyanate complex is
measured colorimetrically: Conversion factor: mmol/L = mEq/L.
2 Cl- + Hg (SCN)2 HgCl2 + 2 SCN-
SCN- + Fe+++ FeSCN++ QUALITY CONTROL
The intensity of the color formed is proportional to the chloride ion Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
concentration in the sample
1,2,3,4
. SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
If control values are found outside the defined range, check the instrument, reagents
CLINICAL SIGNIFICANCE and calibrator for problems.
Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective actions
It is important clinically the determination of chloride due regulation of osmotic
if controls do not meet the acceptable tolerances.
pressure of extra cellular fluid and to its significant role in acid-base balance.
Increases in chloride ion concentration may be found in severe dehydratation, 1
excessive intake of chloride, severe renal tubular damage and in patients with REFERENCE VALUES
cystic fibrosis.
Serum or plasma: 95 - 115 mmol/L CSF: 95 - 110 mmol/L
Decrease in chloride ion concentration may be found in metabolic acidosis, loss
2,7,8 Urine: 110 - 250 mmol/24h Sweat: Up to 60 mmol/L
from prolonged vomiting and chronic pyelonephritis .
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should integrate
clinical and other laboratory data. These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
reference range.
REAGENTS
Mercuric thiocyanate 4 mmol/L PERFORMANCE CHARACTERISTICS
R Ferric nitrate 40 mmol/L Measuring
Nitric acid range:45
From detection limit of 1.13 mmol/L to linearity limit of 130 mmol/L.
mmol/L
Thiocyanate-Hg Mercuric nitrate 2 mmol/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2 with
Nitric acid 45 mmol/L distilled water and multiply the result by 2.
CHLORIDE CAL Chloride aqueous primary standard 125 mmol/L Precision:
Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
PRECAUTIONS Mean (mmol/L) 90.7 106 91.6 108
Corrosive (C):R35:Causes severe burns.
SD 0.64 0.73 0.69 0.81
Mercury(II) thiocyanate :Harmful (Xn): R20/21/22:Harmful by inhalation, in
contact with skin and if swallowed. R33: Danger of cumulative effects. CV (%) 0.70 0.69 0.76 0.74
S13: Keep away from food, drink and animal feeding stuffs. S28: After contact Sensitivity: 1 mmol/L = 0.006 A.
with skin, wash immediately with plenty of water. S45: In case of accident or if Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents did not show systematic
you feel unwell, seek medical advice immediately (show the label where differences when compared with other commercial reagents. The results obtained
possible). S60: This material and its container must be disposed of as using 50 samples were the following:
hazardous. S61:Avoid release to the environment. Refer to special Correlation coefficient ( r ): 0.99
instructions/safety data sheets. Regression equation: y=0.9823x +2.3006
The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
PREPARATION All the reagents are ready to use.
INTERFERENCES
STORAGE AND STABILITY 1
Hemolysis. Anticoagulants other than heparin .
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label
Bilirubin up to 120 mg/L, bovine serum albumin up to 150 g/L and triglycerides up to 6
when stored tightly closed at 2-8ºC, protected from light and contaminations 4
g/L did not significantly alter the assay .
prevented during their use. Do not use reagents over the expiration date.
A list of drugs and other interfering substances with chloride determination has been
Signs of reagent deterioration: 5,6
reported by Young et. al .
- Presence of particles and turbidity.
- Blank absorbance (A) at 480 nm 0.15. NOTES
1. CHLORIDE CAL: Proceed carefully with this product because due its nature it
ADDITIONAL EQUIPMENT can get contamined easily.
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 480 nm. 2. It is recommended to use disposable material. If glassware is used the material
- Matched cuvettes 1.0 cm light path. should be scrupulously cleaned with H2SO4 - K2Cr2O7 Solution and then
(Note 1, 2, 3)
- General laboratory equipment . thoroughly rinsed it with distilled water.
3. Most of the detergents and water softening products used in the laboratories
SAMPLES contains chelating agents. A defective rinsing will invalidate the procedure.
1,2
- Serum, plasma, CSF, sweat and other body fluids : Free of hemolysis and 4. Avoid the contact with metal materials.
separated from cells as rapidly as possible. Anticoagulants such as oxalate or 5. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in automatic
EDTA are not acceptable they will interfere with results. procedures. In these cases, it is recommended to use a serum Calibrator.
1
- Urine : Collect 24-hour urine specimen in chloride free containers. Dilute a 6. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
sample 1/2 in distilled water. Mix. Multiply results by 2 (dilution factor). 7. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
Stability of the sample: Ion chloride is stable 1 week at room temperature (15- Instructions for many of them are available on request.
25ºC), in refrigerator (2-8ºC) or frozen (-20ºC) temperatures.
BIBLIOGRAPHY
PROCEDURE 1. Miller W.G. Chloride. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
1. Assay conditions: Toronto. Princeton 1984; 1059-1062 and 417.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 480 (440-500) nm 2. Ibbott F A. et al. New York Academic Press 1965: 101-111.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. light path 3. Schoenfeld R G et al. Clin Chem 1964 (10): 533-539.
Temperature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC /15-25ºC 4. Levinson S S. et al. In Faulkner WR et al editors. (9) AACC 1982: 143-148.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 5. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Pipette into a cuvette: 6. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
7. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Blank Standard Sample 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tes ts, 3rd ed AACC 1995.
R (mL) 1.0 1.0 1.0
(Note 4,5) PACKAGING
Standard ( L) -- 10 --
Sample ( L) -- -- 10 Cont.
Ref: 1001360 R: 2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mix and incubate for 5 min at 37ºC / 15-25ºC.
5. Read the absorbance (A) of the samples and Standard, against the Blank.
The color is stable for at least 30 minutes.

BSIS10-I 21/06/11 SPINREACT, S.A. / S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
 CHLORIDE

Cloruro
Tiocianato-Hg. Colorimétrico

Determinación cuantitativa de iones cloruro CALCULOS

IVD ( A ) Muestra
x 125 (Conc. Patrón) = mmol/L de iones cloruro
Conservar a 2-8ºC
( A ) Patrón
( A ) Muestra
PRINCIPIO DEL METODO Orina 24 h: x 125 x vol. (dL) orina/24 h = mmol/24 h iones cloruro
( A ) Patrón
Los iones cloruro de la muestra reaccionan con tiocianato de mercurio
desplazando el ión tiocianato. El tiocianato libre en presencia de iones férricos Factor de conversión: mmol/L= mEq/L.
forma un complejo coloreado medible colorimetricamente:
- -
2 Cl + Hg (SCN)2 HgCl2 + 2 SCN CONTROL DE CALIDAD
SCN- + Fe+++ FeSCN++ Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
La intensidad del color es proporcional a la concentración de iones cloruro SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
1,2,3,4 Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
presente en la muestra ensayada .
instrumento, los reactivos y el calibrador.
SIGNIFICADO CLINICO Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El control de la concentración de iones cloruro tiene gran interés clínico dada su correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
importancia en el balance ácido-base y la regulación osmótica del fluido
1
extracelular. Valores altos se relacionan con perdidas excesivas de agua o VALORES DE REFERENCIA
alteraciones del flujo renal y fibrosis quistica.
Valores bajos nos indican acidosis metabólica, trastornos gastrointestinales o Suero o plasma: 95 - 115 mmol/L LCR: 95 - 110 mmol/L
alteración de los mecanismos renales .
2,7,8 Orina: 110 - 250 mmol/24h Sudor: Hasta 60 mmol/L
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
clínicos y de laboratorio. propios valores de referencia.
REACTIVOS
Tiocianato de mercurio 4 mmol/L
CARACTERISTICAS DEL METODO
Rango de medida: Desde el limite de detección de 1,13 mmol/L hasta el limite de
R Nitrato de hierro 40 mmol/L linealidad de 130 mmol/L.
Tiocianato -Hg Nitrato de mercurio 2 mmol/L Si la concentración de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir 1/2 con agua
Ácido nítrico 45 mmol/L destilada y multiplicar el resultado final por 2.
CLORURO CAL Patrón primario acuoso de Cloruros 125 mmol/L Precisión:

PRECAUCIONES Intraserie (n=20) Interserie (n=20)

Corrosivo (C): R35: Provoca quemaduras graves. Media (mmol/L) 90,7 106 91,6 108
Tiocianato de mercurio: Nocivo (Xn): R20/21/22: Nocivo por inhalación, SD 0,64 0,73 0,69 0,81
ingestión y por contacto con la piel. R33: Peligro de efectos acumulativos.
CV (%) 0,70 0,69 0,76 0,74
S13: Manténgase lejos de alimentos y bebidas. S28: En caso de contacto con
la piel, lavar inmediatamente con abundante agua. S45: En caso de accidente o
Sensibilidad analítica: 1 mmol/L = 0,006 A.
malestar, acúdase inmediatamente al médico (si es posible, muéstresele la
Exactitud: Los reactivos SPINREACT no muestran diferencias sistemáticas
etiqueta). S60 :Elimínense el producto y su recipiente como residuos
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales.
peligrosos. S61: Evítese su liberación el medio ambiente. Recábense
Los resultados obtenidos con 50 muestras fuerin los siguientes:
instrucciones específicas/las fichas de datos de seguridad.
Coeficiente de regresión ( r ):0.99
Ecuación de la recta de regresión: y=0.9823x+2.3006
PREPARACION
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Reactivo y Patrón están listos para su uso.

CONSERVACION Y ESTABILIDAD
INTERFERENCIAS
1
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Hemólisis. Los anticoagulantes a excepción de la heparina .
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, Bilirrubina hasta 120 mg/L, albúmina bovina hasta 150 g/L y triglicéridos hasta 6 g/L
4
protegidos de la luz y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la no alteran significativamente los datos del ensayo .
fecha indicada. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren con la determinación
5,6
Indicadores de deterioro de los reactivos: del cloruro .
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancia (A) del Blanco a 480 nm 0,15. NOTAS
1. CHLORIDE CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable tratarlo
MATERIAL ADICIONAL con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
- Espectrofotómetro o analizador con cubeta para lecturas a 480 nm. 2. Se recomienda utilizar material de plástico de un solo uso para evitar
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. contaminaciones. En caso de utilizar material de vidrio deberá lavarse con una
(Nota 1, 2, 3)
- Equipamiento habitual de laboratorio . solución de H2SO4 - K2Cr2O7, enjuagar varias veces con agua destilada y secar
antes de su uso.
MUESTRAS 3. La mayoría de detergentes destinados a uso del laboratorio contienen agentes
1,2
- Suero, plasma, LCR, sudor y otros fluidos : Libre de hemólisis. Separado quelantes. Trazas de los mismos, como consecuencia de un mal aclarado del
lo antes posible de los hematies. No usar oxalato o EDTA como material, invalida la determinación.
anticoagulantes ya que interfiere en los resultados. 4. Evitar el contacto con partes metálicas.
1
- Orina : Efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de 5. La calibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a errores sistemáticos en
cloruros. Diluir la orina 1/2 en agua destilada para su análisis. Mezclar. métodos automáticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
Multiplicar el resultado obtenido por 2 (factor de dilución). séricos.
Estabilidad de la muestra: Los iones de cloruro son estables 1 semana a 6. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.
temperatura ambiente (15-25ºC) o en nevera (2-8ºC) o congelado (-20ºC). 7. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de
este reactivo en distintos analizadores.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFIA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . 480 (440-500) nm 1. Miller W.G. Chloride. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Cubeta:. . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Toronto. Princeton 1984; 1059-1062 and 417.
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37ºC /15-25ºC 2. Ibbott F A. et al. New York Academic Press 1965: 101-111.
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. 3. Schoenfeld R G et al. Clin Chem 1964 (10): 533-539.
3. Pipetear en una cubeta: 4. Levinson S S. et al. In Faulkner WR et al editors. (9) AACC 1982: 143-148.
5. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Blanco Patrón Muestra 6. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
R (mL) 1,0 1,0 1,0 7. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
(Nota4,5) 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Patrón ( L) -- 10 --
Muestra ( L) -- -- 10 PRESENTACION
4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC / 15-25ºC. Cont.
Ref: 1001360 R: 2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
5. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al Blanco de
reactivo. El color es estable 30 minutos.

BSIS10-E 21/06/11 SPINREACT, S.A. / S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
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