TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP.

HỒ CHÍ MINH
KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC-THỰC PHẨM
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ HÓA HỌC

BÁO CÁO THÍ NGHIỆM

MÔN HỌC: THÍ NGHIỆM HÓA HỮU CƠ

BÀI 5

KỸ THUẬT SẮC KÝ CỘT

ĐIỂM
Ngày thí nghiệm: .......................................................................
Lớp: ..............................................Nhóm: .................................
Tên: ..............................................MSSV: ................................. CHỮ KÝ GVHD
Tên: ..............................................MSSV: .................................
Tên: ..............................................MSSV: .................................
Tên:….......……………………….MSSV:……………………..

I. CHUẨN BỊ BÀI THÍ NGHIỆM

(Sinh viên phải hoàn thành trước khi trước khi vào PTN làm thí nghiệm)
1) Mục tiêu bài thí nghiệm
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
2) Qui trình tiến hành thí nghiệm
(Sinh viên trình bày bằng hình vẽ hoặc sơ đồ mô tả lại các bước tiến hành thí nghiệm;
các thông số hóa lý của các hóa chất sử dụng)
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
II. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM
1. Mô tả hiện tượng quá trình sắc ký cột
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
2. Kết quả sắc ký bản mỏng các phân đoạn thu được từ sắc ký cột
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
III. CÂU HỎI
1. Pha tĩnh trong kỹ thuật sắc ký cột là chất gì? Đặc tính kỹ thuật của pha tĩnh
dùng trong sắc ký cột có gì khác so với kỹ thuật sắc ký bản mỏng?
2. Vì sao chọn hexane làm dung môi giải ly đầu tiên cho sắc ký cột?
3. Trong quá trình sắc ký cột với dịch acetone lá spinach (mồng tơi), giải ly với
100% hexane, vì sao vạch màu vàng β-Carotene xuất hiện và tách ra phía dưới
cột?
4. Sau khi tách loại β-Carotene, đề nghị dung môi (hệ dung môi) để cô lập
Chlorophyll bằng sắc ký cột?
5. Để chuẩn bị cho quá trình sắc ký cột đối với dung dịch acetone chứa β-Carotene
và Chlorophyll từ lá spinach (mồng tơi) bằng acetone, tại sao phải đuổi hết
acetone rồi thêm một ít hexane để tạo dang sệt rồi mới tiến hành nạp cột?
6. Dung môi ethanol được xem là dung môi vạn năng, ethanol sẽ trích tất cả các
chất từ không phân cực đến phân cực. Sau khi trích tất cả các hợp chất từ lá khô
spinach (mồng tơi) bằng ethanol, loại dung môi thu được cao lá spinach (mồng
tơi). Giả sử muốn cô lập riêng β-Carotene từ cao lá spinach (mồng tơi) bằng sắc
ký cột, dung môi (hệ dung môi) nào được sử dụng để tiến hành? Vì sao?
7. Nguyên nhân cột bị “gãy” trong quá trình giải ly là do nguyên nhân gì? Cách
khắc phục?
8. Sau khi cô lập xong hợp chất hữu cơ, có thể dùng kỹ thuật TLC để xác định gần
đúng độ tinh sạch của chất được cô lập không? Cách tiến hành?
9. Cho một mẫu là hỗn hợp gồm biphenyl, benzoic acid và benzyl alcohol. Mẫu
được chạy sắc ký cột silica gel và triển khai với dung môi giải ly đầu tiên là
cyclohexane, tăng dần độ phân cực với việc bổ sung methylene chloride. Hãy
dự đoán thứ tự các chất ra khỏi cột theo thời gian.
10. Một chất màu cam vừa được nạp vào đầu cột sắc ký. Dung môi được thêm vào
ngay lập tức làm cho toàn bộ lượng dung môi trong bình chứa dung môi đầu cột
có màu cam. Trong trường hợp này sự tách sẽ không hiệu quả. Hãy giải thích.
11. Một chất màu vàng, hòa tan trong methylene chloride, được nạp vào cột sắc ký.
Quá trình giải ly được bắt đầu với petroleum ether. Sau khi chạy với 6 L dung
môi, dải chất màu vàng vẫn chưa xuống. Cần phải làm gì để cải thiện tình hình
này ?
12. Bạn cần tinh chế 0.5 g một hỗn hợp bằng sắc ký cột. Hãy ước lượng lượng chất
hấp phụ cần sử dụng. Và cần dùng cột có đường kính và chiều cao như thế nào?
13. Làm cách nào có thể theo dõi tiến trình sắc ký cột khi mẫu là chất không màu?