प्लां ट से ल कल्चर से ल की एक अद्वितीय सां पद्वि पर आधलररत है , यलनी, टोद्वटपोटें सी द्विसे प्रयोगशललल में

उपयु क्त भौद्वतक स्थिद्वतयोां के तहत एक पररभलद्वित कृद्विम पोिक मलध्यम पर पूरे सां यांि में पुन: उत्पन्न करने
के द्वलए एक प्लां ट से ल की क्षमतल के रूप में पररभलद्वित द्वकयल िल सकतल है । वलस्तव में, यह श्वलन िल द्विसने
पहली बलर इस तथ्य पर ध्यलन आकद्विित द्वकयल द्वक एक एकल कोद्वशकल दोनोां को एक स्व द्वनयलमक फैशन
में बढ़ने और द्ववभलद्वित करने की क्षमतल रखती है और यह भी द्वक एक एकल कोद्वशकल टोद्वटपोटें ट भी है ।
यह प्रद्वसद्ध 'से ल द्वसद्धलां त' में कहल गयल िल द्विसे 19 वी ां शतलब्दी की शुरुआत में श्ले डेन और श्वलन िलरल
प्रस्तलद्ववत द्वकयल गयल िल। गोटद्वलब है बरलैंड, द्विन्हें 'फलदर ऑफ प्लां ट द्वटश्यू कल्चर' के रूप में मलनल िलतल है ,
ने पहली बलर 1902 में एक सलधलरण पोिक मलध्यम पर यां िवत् पृिक पौधे की पिी की कोद्वशकलओां की
खेती करने कल प्रयलस द्वकयल िल। हलललां द्वक सु सांस्कृत कोद्वशकलओां के द्ववकलस और भे दभलव को प्रलप्त करने में
असफल रहे , उन्होांने पौधे के ऊतक सां वधि न में कई भद्ववष्यवलद्वणयलां की हैं िैसे द्ववकलस हलमोन की अवधलरणल,
भ्रू ण िैली तरल पदलिि कल उपयोग, दै द्वहक कोद्वशकलओां से कृद्विम भ्रू ण की खेती, आद्वद और वलस्तव में सभी।
उनकी भद्ववष्यवलद्वणयोां को सत्य पलयल गयल िैसल द्वक बलद के शोधकतलि ओां िलरल प्रदद्वशित द्वकयल गयल िल। 1902
- 1930 की अवद्वध के दौरलन पहले चरण में, कई वै ज्ञलद्वनकोां िलरल िडोां और शूट एद्वपस (अांग सां स्कृद्वत) िैसे
पृिक पौधोां के अांगोां की सांस्कृद्वत के द्वलए प्रयलस द्वकए गए िे। 1940 - 1970 के दशक के दौरलन दू सरे चरण
में, सां स्कृद्वत पौधोां के ऊतकोां, भ्रू ण, परलग, कोद्वशकलओां और प्रोटोप्लस्ट के द्वलए उपयु क्त पोिक तत्व मीद्वडयल को
द्ववकद्वसत करने के द्वलए व्यलपक अध्ययन द्वकए गए, और सु सांस्कृत ऊतकोां से पूणि पौधोां (इन द्ववटर ो
मॉफोिेनेद्वसस) के उत्थलन कल कलयि द्वकयल गयल। कोद्वशकलओां। 1980 के दशक के बलद से , एक नए यु ग ने
आनुवलां द्वशक रूप से सां शोद्वधत (िीएम) यल टर लां सिेद्वनक फसलोां को बे हतर द्ववशेितलओां के सलि द्ववकद्वसत करने
के द्वलए से ल और द्वटशू कल्चर द्वसस्टम कल उपयोग करके फसल के पौधोां में द्ववदे शी िीन को शलद्वमल करनल
शुरू कर द्वदयल है , िो हो सकतल है

'दू सरी हररत क्लां द्वत के द्वलए द्विम्मेदलर।

6.2.2। से ल और ऊतक सां स्कृद्वत तकनीक

मूल तकनीक

पूरे पौधोां को वस्तु तः द्वकसी भी पौधे के द्वहस्से (उत्खनन के रूप में सां दद्वभित) यल से पुनिीद्ववत द्वकयल िल
सकतल है

कोद्वशकलओां। प्लां ट द्वटशू कल्चर (द्वचि 1) की मूल तकनीक में द्वनम्नद्वलस्खत चरण शलद्वमल हैं :

1. उपयु क्त खोि िैसे शूट द्वटप, पिी, कोद्वटलेडोन और हलइपोकॉद्वटल्स कल चयन।

2. कीटलणु नलशक (िैसे सोद्वडयम हलइपोक्लोरलइट) िलरल द्ववस्फोटकोां की सतह की नसबां दी और द्वफर बलाँ झ
आसु त िल के सलि द्ववस्फोटकोां को धोनल।
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3. उपयु क्त पोिक मलध्यम पर द्ववस्फोटकोां कल इनोक्यू लेशन (थिलनलां तरण) (शूट पुनििनन मलध्यम, द्विसे
आटोक्लेद्ववांग यल द्व़िल्टर-द्वनष्फल िलरल द्वनष्फल द्वकयल िलतल है ।

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सां यांि से ल सां स्कृद्वत और आवे दन

बलाँ झ पररस्थिद्वतयोां (यलनी, ललद्वमनल कल प्रवलह कैद्वबनेट में) के तहत सां स्कृद्वत के िहलिोां में मलइक्ोद्वबयल
सां दूिण)।

4. द्ववकलस कक्ष यल प्लां ट द्वटशू कल्चर रूम (द्वचि। 2 ए) में सां स्कृद्वतयोां को बढ़लनल, उद्वचत भौद्वतक पररस्थिद्वतयोां
[अिलि त, कृद्विम प्रकलश (16 एच फोटोपेररयोड), तलपमलन (~ 26oC) और सलपेक्ष आर्द्ितल (50-60%) होनल ]।

5. सु सांस्कृत पौधोां के ऊतकोां और उनके बढ़लव से शू ट कल पुनिि नन।

6. रूद्वटांग मलध्यम पर पुनिीद्ववत शूद्वटांग की िड।

7. पौधोां के टर लां सिेद्वनक ग्रीन-हलउस (छद्वव 2 बी) यल क्षे ि की स्थिद्वत को पुन: उत्पन्न पौधोां के सां चय (ऊतक
सख्त) के बलद थिलनलां तररत करनल।

पोिक मीद्वडयल
पौधोां के भलगोां यल कोद्वशकलओां की इन द्ववटर ो सां स्कृद्वत में अक्षु ण्ण पौधोां के द्ववपरीत द्ववद्वभन्न पोिक तत्वोां और
उपयु क्त भौद्वतक स्थिद्वतयोां की आवश्यकतल होती है , िो प्रकलश, CO2, िल और खद्वनिोां कल उपयोग करके
अपने द्ववकलस और द्ववकलस के द्वलए आवश्यक कई अन्य आवश्यक यौद्वगकोां को सां श्लेद्वित कर सकते हैं ।
प्लां ट द्वटशू कल्चर मीद्वडयम की सां रचनल अलग-अलग हो सकती है , िो द्वक द्वटशू के प्रकलर यल कोद्वशकलओां
पर द्वनभि र करतल है िो द्वक सां स्कृद्वत के द्वलए उपयोग की िलती हैं ।

द्ववद्वशष्ट पलदप ऊतक सां वधि न पोिक तत्व में अकलबि द्वनक लवण (सू क्ष्म और थिूल तत्व दोनोां), एक कलबि न स्रोत
(आमतौर पर सू क्ोि), द्ववटलद्वमन (िैसे द्वनकोद्वटद्वनक एद्वसड, िलयद्वमन, पलइररडोस्िन और मलयो-इनोद्वसटोल),
अमीनो एद्वसड (िैसे, आद्वििद्वनन) होते हैं । ) और द्ववकलस द्वनयलमकोां (िैसे ऑस्िन, सलइटोद्वकद्वनन और
द्वगब्रे द्वलन)। कैद्वसइन हलइडरोललइजेट, नलररयल कल दू ध, मलल्ट अकि, खमीर द्वनकललने, टमलटर कल रस आद्वद िैसे
अन्य यौद्वगकोां को िोडल िल सकतल है ।

अांिीर। 1. द्वटशू कल्चर तकनीक कल उपयोग करके पूरे पौधोां के उत्थलन में शलद्वमल द्ववद्वभन्न कदम। (ए) फलोां
के सलि सलइटर स सां यांि, (बी) पोिक मलध्यम पर सलइटर स के बीि अांकुररत करके उठलए गए अांकुर, (सी) शूट
पुनिि नन मलध्यम पर एद्वपकोद्वटल के द्ववस्फोटकोां कल थिलनलां तरण, (डी) द्ववस्फोटकोां से शूट कल इां डक्शन, (ई)
शूटोां कल बढ़लव, ( एफ) इन द्ववटर ो शूट की िड, (िी) एक बति न में पुनिीद्ववत सां यांि।

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सां यांि से ल सां स्कृद्वत और आवे दन

अांिीर। 2. प्लां ट द्वटशू कल्चर रूम (ए) और टर लां सिेद्वनक ग्रीन-हलउस (बी)।

द्ववद्वशष्ट उद्दे श्योां के द्वलए। पलदप हलमोन द्ववकलस और सु सांस्कृत कोद्वशकलओां और ऊतकोां के भे दभलव में
महत्वपूणि भू द्वमकल द्वनभलते हैं । एक इष्टतम पीएच (आमतौर पर 5.7) भी बहुत महत्वपूणि है ।

मीद्वडयल के दो प्रकलर हैं - तरल और ठोस मीद्वडयल, और बलद के मलमले में मध्यम के िमने के द्वलए एक
अदरक एिेंट िै से अगर (एक ललल शैवलल से प्रलप्त एक पॉलीसे केरलइड, गे द्वलद्वडयम अमलां द्वस) िोडल िलतल है ।
कई प्रकलर के मीद्वडयल हैं िैसे MS, LS, B5 और Nitsch कल मलध्यम, और मीद्वडयल की पसां द पौधोां की
प्रिलद्वतयोां, द्ववद्ववधतल यल पौधे के द्वहस्से िलरल द्वनधलि ररत होती है। हलललां द्वक, सबसे अद्वधक उपयोग द्वकयल िलने वललल
पोिक तत्व मलध्यम एमएस मलध्यम है , द्विसे 1962 में मुरलद्वशगे और स्कोग िलरल द्ववकद्वसत द्वकयल गयल िल।
सां वद्वधित कोद्वशकलओां और ऊतकोां से पौधे के उत्थलन की सफलतल कलफी हद तक सां स्कृद्वत मलध्यम की
सां रचनल िलरल द्वनयां द्वित होती है । मलइक्ोद्वबयल सां दूिण से बचने के द्वलए आटोक्लेद्ववांग यल द्वझल्ली द्वफल्टर-
नसबां दी िलरल पोिक तत्व मीद्वडयल की नसबां दी अत्यांत महत्वपूणि है ।

सां स्कृद्वतयोां के प्रकलर

ऑगि न कल्चर: यह प्रयोगशललल स्थिद्वतयोां (इन द्ववटर ो) के तहत पृिक अांगोां (िैसे िडोां) की सां स्कृद्वत से
सां बांद्वधत है , और सां स्कृद्वत के द्वलए उपयोग द्वकए गए अांग के आधलर पर अलग-अलग नलम द्वदए गए हैं ।
उदलहरण के द्वलए, िडोां की सां स्कृद्वत, एां डोस्पमि, अां डलशय, अांडलकलर और एिेर को i) रूट सां स्कृद्वत कहल िलतल है ,
ii) एां डोस्पमि सां स्कृद्वत, iii) अांडलशय सां स्कृद्वत, iv) अांडलकलर सां स्कृद्वत और v) एिेर सां स्कृद्वत क्मशः।

व्यलख्यलत्मक सां स्कृद्वत: पलदप भलगोां (खोिकतलि ) की सां स्कृद्वत को अन्वे िण सां स्कृद्वत के रूप में िलनल िलतल है ।
खोिकतलि पौधे कल कोई भी भलग हो सकतल है िैसे तनल, पिी, कोद्वटलेडोन, हलइपोकॉद्वटल्स, आद्वद के टु कडे ।
आमतौर पर खोिी सां स्कृद्वतयोां कल उपयोग कैलस यल पौधे पुनिि नन को प्रेररत करने के द्वलए द्वकयल िलतल है ।

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सां यांि से ल सां स्कृद्वत और आवे दन

कैलस सां स्कृद्वत: कैलस कोद्वशकलओां के एक असां गद्वठत र्द्व्यमलन को सां दद्वभित करतल है , िो आम तौर पर
प्रकृद्वत में पैरेन्कलइमलटस होते हैं (द्वचि 3)। द्ववद्वभन्न प्रकलर के पौधोां के द्वहस्सोां को आकििक प्रद्वतद्वक्यल द्वदखलने
के द्वलए प्रेररत द्वकयल िल सकतल है , लेद्वकन प्रद्वतद्वक्यल सां स्कृद्वत मीद्वडयल की सां रचनल के सलि बदलती है । आम
तौर पर, कैलस इां डक्शन के द्वलए ऑस्िन को सां स्कृद्वत के मलध्यम से िोडल िलतल है ले द्वकन िोडल गयल
ऑस्िन की प्रकृद्वत और मलिल अन्य कलरकोां के अललवल खोिकतलि और उसके िीनोटलइप की प्रकृद्वत और
स्रोत पर द्वनभि र करती है । बलर-बलर उप-सां स्कृद्वत िलरल लांबे समय तक कैलस सां स्कृद्वतयोां को बनलए रखल िल
सकतल है । कैलस सां स्कृद्वतयोां के द्वलए उपयोग द्वकयल िलतल है
• सां यांि पुनििनन।

• एकल कोद्वशकल द्वनलांबन और प्रोटोप्लस्ट की तै यलरी।

• आनुवांद्वशक पररवति न अध्ययन।

से ल सस्पेंशन कल्चर: एकल कोद्वशकलओां को कैलस यल पौधे के द्वकसी अन्य द्वहस्से (िै से पिी) से अलग
द्वकयल िल सकतल है और तरल मलध्यम में सु सांस्कृत द्वकयल िल सकतल है । पौधोां की कोद्वशकलओां के अलगलव
के द्वलए यलां द्विक और एां िलइमेद्वटक दोनोां तरीकोां कल इस्ते मलल द्वकयल िल सकतल है । यलां द्विक द्ववद्वध में से ल मलबे
से छु टकलरल पलने के द्वलए द्वनस्पांदन / सें टरीफ्यू िेशन िलरल पीछल द्वकए गए एक बफर द्वनलांबन में ऊतक को
ठीक से पीसनल शलद्वमल है । एां िलइमैद्वटक द्ववद्वध एां िलइमोां (पेस्िनेि / मैक्ोइिलइम) के उपयोग पर आधलररत
है , िो कोद्वशकलओां के बीच मध्य ललमे लल को द्ववघद्वटत करते हैं , अिलि त, एकल कोद्वशकलएां िलरी करने के द्वलए
अांतर-कोद्वशकीय सीमेंट। एक बलर कोद्वशकलओां को अलग-िलग कर दे ने के बलद, उन्हें बै च सां स्कृद्वतयोां यल
द्वनरां तर सां स्कृद्वतयोां िलरल सु सांस्कृत द्वकयल िल सकतल है , द्विनके बलरे में द्ववस्तलर से चचलि की गई है (द्वपछले
अध्यलय को दे खें)। से ल द्वनलां बन सां स्कृद्वतयोां के द्वलए इस्ते मलल द्वकयल िल सकतल है :

• दै द्वहक भ्रू ण / अांकुर की प्रेरण।

• इन द्ववटर ो उत्पररवति न और उत्पररवती चयन।

• आनुवांद्वशक पररवति न।

• द्वितीयक चयलपचयोां कल उत्पलदन।

मलस से ल कल्चर: इसमें द्ववशेि रूप से द्वडजलइन द्वकए गए ior प्लां ट बलयोररएिर ’में कोद्वशकलओां की बडे
पैमलने पर सां स्कृद्वत शलद्वमल होती है , द्विसमें अद्वनवलयि रूप से स्टलयरर नही ां होतल है (क्योांद्वक पलदप कोद्वशकलएाँ
सां वेदी होती हैं )। स्स्टरर के थिलन पर, गै स को धीरे से बु दबु दलयल िलतल है , िो एक उच्च ऑिीिन की
आपूद्वति की मलां ग को पूरल करने के सलि-सलि सरगमी प्रदलन करतल है । बडे पैमलने पर कोद्वशकल सां वधि न
औिधीय रूप से महत्वपूणि मलध्यद्वमक चयलपचयोां के उत्पलदन के द्वलए आदशि होते हैं ।

प्रोटोप्लस्ट कल्चर: प्रोटोप्लस्ट् स कोद्वशकल द्वभद्वि के द्वबनल पलदप कोद्वशकलएाँ होती हैं (द्वचि 3 बी) और
कोद्वशकल द्वभद्वि एां िलइमोां (से लुलस, हे मसे ल्यूद्वलस) कल उपयोग करके एां िलइमैद्वटक द्ववद्वध िलरल द्ववद्वभन्न प्रकलर के
पौधोां के ऊतकोां (आमतौर पर पद्वियोां, कैलस के टु कडोां, एकल कोद्वशकलओां यल परलग कणोां) से अलग द्वकयल
िल सकतल है । और पेस्िनैस)। प्रोटोप्लस्ट आमतौर पर पेटरी प्ेटोां में द्वनलांबन सां स्कृद्वत िलरल सु सांस्कृत होते
हैं । िैसे प्रोटोप्लस्ट में कोद्वशकल द्वभद्वि की कमी होती है , उनकल उपयोग कई उद्दे श्योां के द्वलए द्वकयल िल
सकतल है िैसे:

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द्ववद्वभन्न िैव रलसलयद्वनक और चयलपचय अध्ययन।

दै द्वहक सां कर कल उत्पलदन करने के द्वलए दो दै द्वहक कोद्वशकलओां कल सां लयन।

सलइटोप्लस्िक हलइद्वब्रड् स (सलइद्वब्रड् स) कल उत्पलदन करने के द्वलए एनक्लोज्ड और न्यूस्क्लये टेड प्रोटोप्लस्ट
कल फ्यूिन। आनुवांद्वशक पररवति न।

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सां यांि से ल सां स्कृद्वत और आवे दनz