Professional Documents
Culture Documents
2507 HR PDF
2507 HR PDF
Ref. 2507
2018/12
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
NAMJENA
Komplet CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) namijenjen je za odvajanje normalnih hemoglobina (A, A2 i F) u uzorcima ljudske krvi te za detekciju najznačajnijih
hemoglobinskih varijanti (S, C, E i D) metodom kapilarne elektroforeze u lužnatom puferu (pH 9,4) pomoću instrumenta SEBIA CAPILLARYS 3.
Instrument CAPILLARYS 3 automatizirani je analizator kojim se dobiva potpuni profil hemoglobina za kvantitativnu analizu normalnih hemoglobinskih
frakcija A, A2 i F te za detekciju glavnih hemoglobinskih varijanti S, C, E i D. Test se provodi na hemolizatu uzoraka pune krvi koji se skupljaju u
epruvete s KEDTA kao antikoagulansom.
NAPOMENA : U ovim uputama naziv "CAPILLARYS 3" obuhvaća automatizirane instrumente SEBIA CAPILLARYS 3 OCTA i CAPILLARYS 3 TERA.
PRINCIP TESTA1-20
Hemoglobin je kompleksna molekula sastavljena od dva para polipeptidnih lanaca. Svaki lanac vezan je na hem, tetrapirolični nukleus (porfirin) koji
kelira atom željeza. Hem je zajednički svim hemoglobinima i njihovim varijantama. Tip hemoglobina određen je proteinskim dijelom koji se naziva
globin. Polipeptidni lanci α, ß, δ, i γ čine normalne ljudske hemoglobine:
• hemoglobin A ..................................... = α 2 ß 2
• hemoglobin A2 .................................... = α 2 δ 2
• fetalni hemoglobin F........................... = α 2 γ 2
Svim trima lancima hemoglobina zajednički je α‑lanac.
Prostorna struktura hemoglobina i druga molekularna svojstva (kao i ona za sve proteine) ovise o prirodi i sekvenci aminokiselina od kojih su lanci
sastavljeni. Zamjena aminokiselina kao posljedica mutacije odgovorna je za nastanak hemoglobinskih varijanti različite površinske napetosti i,
posljedično tomu, različitih elektroforetskih mobilnosti, što također ovisi o pH i ionskoj snazi pufera.
Kvalitativne (ili strukturne) nenormalnosti koje nastaju kao rezultat toga, nazivaju se hemoglobinopatijama (9,10,13). Smanjena sinteza jednog od
hemoglobinskih lanaca dovodi do kvantitativnih (ili regulacijskih) nenormalnosti koje se nazivaju talasemije.
Elektroforeza hemoglobina dobro je uhodana tehnika koja se rutinski primjenjuje u kliničkim laboratorijima za probir uzoraka s abnormalnostima
hemoglobina (1, 2, 3, 4, 12). Uz tehnike elektroforeze koje se provode na različitim medijima, uključujući agarozni gel i kromatografiju, razvijena je
kapilarna elektroforeza kako bi se omogućila potpuna automatizacija ovog testiranja uz brzo odvajanje i dobru rezoluciju. Definirana je kao
elektrokinetička separacija koja se provodi u epruveti unutrašnjeg promjera manjeg od 100 μm, napunjenoj puferom sastavljenim od elektrolita. U
mnogo pogleda ova se metodologija može smatrati posrednom vrstom tehnike između klasične zonske elektroforeze i tekućinske kromatografije (8, 11).
Instrument CAPILLARYS 3 koristi princip kapilarne elektroforeze u slobodnoj otopini, što je najčešći oblik kapilarne elektroforeze. Tom se tehnikom
nabijene molekule razdvajaju zbog svoje elektroforetske mobilnosti u lužnatom puferu specifične pH vrijednosti. Razdvajanje se događa i prema pH
vrijednosti elektrolita i elektroosmotskom toku (5).
Instrument CAPILLARYS 3 ima cjevčice od kvarcnog stakla (kapilare) koje funkcioniraju paralelno, što omogućava 8 istodobnih analiza
(CAPILLARYS 3 OCTA) ili 12 istodobnih analiza (CAPILLARYS 3 TERA) za kvantifikaciju hemoglobina u uzorku pune krvi. Razrijeđen uzorak
pripremljen s tekućinom za hemolizu, ubrizgava se aspiracijom na anodnom kraju kapilare. Zatim se pod visokim naponom provodi separacija proteina,
a na katodnom kraju kapilare provodi se izravna detekcija hemoglobina pri 415 nm, što je valna duljina apsorbancije specifična za hemoglobine. Prije
svake analize kapilare se ispiru otopinom za ispiranje i pripremaju za sljedeću analizu s puferom.
Izravna detekcija omogućava relativnu kvantifikaciju pojedine frakcije hemoglobina od posebnog interesa, kao što je hemoglobin A2 za dijagnostiku
ß talasemije, a dobiveni elektroforegrami procjenjuju se također zbog odstupanja obrasca. Osim toga, visoka rezolucija ovog postupka treba omogućiti
identifikaciju varijanti hemoglobina, a osobito diferencijaciju hemoglobina S od D te hemoglobina E od C.
Kvantifikaciju hemoglobina A2 moguće je provesti i kada je prisutan hemoglobin E.
Primjenom pufera lužnate pH‑vrijednosti, od katode prema anodi detektiraju se normalni i abnormalni hemoglobini (ili varijanta) sljedećim redoslijedom:
δA’2 (A2 varijanta), C, A2/O‑Arab, E, S, D, G‑Philadelphia, F, A, Hope, Bartov hemoglobin, J, N‑Baltimore i H.
Ugljikova anhidraza ne vizualizira se na elektroforetskim obrascima hemoglobina dobivenih kapilarnom elektroforezom, a to dopušta identifikaciju
hemoglobinskih varijanti A2 u ovoj migracijskoj zoni.
Tijekom prijevoza, komplet se može 15 dana držati izvan hladnjaka (na temperaturi od 15 do 30 °C) bez negativnih učinaka na djelotvornost.
ZA OPTIMALNO PRAĆENJE SLJEDIVOSTI: Sve reagense iz istog kompleta treba upotrijebiti zajedno.
ZA POSTIZANJE OČEKIVANOG DJELOVANJA: Potrebno je pratiti upute priložene uz komplet.
UPOZORENJE: Nemojte upotrebljavati deioniziranu vodu dostupnu na tržištu, kao što je na primjer voda za glačanje (opasnost od
značajnog oštećenja kapilara). Upotrebljavajte jedino vodu ultra čiste kvalitete, kao što je voda za injekcije.
1. PUFER
Priprema
Pufer je spreman za upotrebu. Sadrži: pufersku otopinu pH 9,4 ± 0,5, aditive koji u upotrijebljenim koncentracijama nisu štetni, a potrebni su za
postizanje optimalnog učinka.
Upotreba
Pufer za analizu hemoglobina tehnikom kapilarne elektroforeze.
Čuvanje, stabilnost i znakovi promjena
Čuvajte pufer u hladnjaku (na temperaturi od 2 do 8 °C). Stabilan je do isteka roka valjanosti naznačenog na pakiranju ili na naljepnicama bočica s
puferom. Izbjegavajte čuvanje na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C) tijekom dužeg vremenskog razdoblja, u blizini prozora ili izvora topline.
NEMOJTE ZAMRZAVATI.
VAŽNO: Kada se čuva na temperaturi od 2 - 8 °C te prije upotrebe, pufer treba postići sobnu temperaturu (od 15 do 30 °C); ako je bočica s puferom
puna, ostavite je prije upotrebe na sobnoj temperaturi najmanje 3 sata. Nepridržavanje ove mjere opreza može utjecati na djelotvornost postupka.
UPOZORENJE: Ne predgrijavajte pufer u vrućoj vodi.
Otvorena bočica pufera stavljena u instrument CAPILLARYS 3, bit će stabilna najviše 1 mjesec (akumulirano) na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C).
Nakon svake upotrebe, pufer treba neizostavno i bez odlaganja pohraniti u hladnjak (između 2 i 8 °C); u tom slučaju bit će stabilan do isteka roka
valjanosti naznačenog na naljepnici bočice pufera.
VAŽNO: Sveukupno (akumulirano) vrijeme koje je pufer pohranjen na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C) ne smije prelaziti 1 mjesec. Ovo vrijeme
pohrane od 1 mjeseca uzima u obzir vrijeme koje je potrebno da se pufer razvije na sobnoj temperaturi.
Ako pufer promijeni izgled, npr. postane mutan zbog kontaminacije mikrobima, bacite ga.
2. OTOPINA ZA HEMOLIZU
Priprema
Otopina za hemolizu spremna je za upotrebu. Sadrži pufersku otopinu pH 8,5 ± 0,5 i aditive koji u upotrijebljenim koncentracijama nisu štetni, a
potrebni su za postizanje optimalnog učinka.
Upotreba
Za razrjeđivanje i hemolizu crvenih krvnih stanica iz pune krve.
Čuvanje, stabilnost i znakovi promjena
Otopinu za hemolizu čuvajte na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C) ili u hladnjaku (od 2 do 8 °C). Stabilna je do isteka roka trajanja naznačenog na
pakiranju kompleta ili na naljepnici bočice s otopinom za hemolizu. NEMOJTE ZAMRZAVATI.
Kada je bočica s otopinom za hemolizu otvorena i stavljena u instrument CAPILLARYS 3, stabilna je najviše 3 mjeseca (akumulirano). Ako se bočicu
s tekućinom za hemolizu planira koristiti dulje od 3 mjeseca, bočicu treba izvaditi iz instrumenta nakon svake upotrebe i držati na sobnoj temperaturi
(od 15 do 30 °C) ili u hladnjaku (od 2 do 8 °C); otopina za hemolizu tada je stabilna do isteka roka valjanosti navedenog na naljepnici bočice s
tekućinom za hemolizu.
Ako otopina za hemolizu promijeni izgled, npr. postane zamućena zbog kontaminacije mikrobima, bacite je.
3. FILTRI
Upotreba
Jednokratni filtri za filtriranje pufera za analizu, otopine za hemolizu i destilirane ili deionizirane vode (koristi se za isplahnjivanje kapilara).
VAŽNO: Pri promjeni kompleta, sustavno promijenite sve filtre. Pri rukovanju i ugradnji filtara nosite čiste rukavice.
Pričvrstite jedan filtar na konektor smješten na vrhu svake epruvete koja ulazi u bočice s puferom, otopinom za hemolizu i destiliranom ili deioniziranom
vodom. Kada postavljate filtre na instrument, isplahnite konektore i epruvete destiliranom ili deioniziranom vodom.
Čuvanje
Prije upotrebe filtre držite u njihovim nepropusno zatvorenim pakiranjima na suhom mjestu, na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C) ili u hladnjaku (od
2 do 8 °C).
1. NORMAL Hb A2 CONTROL
Namjena
Normalni kontrolni uzorci Normal Hb A2 Control (SEBIA, kat. br. 4778) namijenjeni su za kontrolu migracije i kontrolu kakvoće kvantifikacije ljudskog
hemoglobina A2 postupkom elektroforeze CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) koji se provodi na automatiziranom instrumentu za kapilarnu elektroforezu
CAPILLARYS 3.
Dobivene vrijednosti moraju biti unutar raspona koji se dobiju za svaku seriju uzoraka Normal Hb A2 Control.
Sastav
Normalni kontrolni uzorak Normal Hb A2 Control dobiven je iz skupa objedinjenih uzoraka normalne ljudske krvi. Uzorak Normal Hb A2 Control je u
stabiliziranom liofiliziranom obliku.
Upotreba
VAŽNO: Za optimalnu primjenu uzoraka Normal Hb A2 Control u instrumentu CAPILLARYS 3 potrebno je upotrijebiti epruvetu namijenjenu posebno
za kontrolne uzorke krvi i odgovarajući zatvarač (vidjeti "POTREBNA OPREMA I DODACI", Epruvete i zatvarači za kontrolne uzorke) te obilježiti tu
epruvetu naljepnicom s bar kodom za kontrolni uzorak Normal Hb A2 Control.
- 144 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
- Rekonstituirajte svaku bočicu liofiliziranog uzorka Normal Hb A2 Control volumenom destilirane ili deionizirane vode kako je navedeno u uputama
za upotrebu priloženoj uz Normal Hb A2 Control. Ostavite stajati 30 minuta i lagano promućkajte (izbjeći stvaranje pjene).
NAPOMENA: Preciznost koju treba održavati za volumen dobiven rekonstitucijom iznosi ± 1,0 %.
- Od cijele količine rekonstituiranog kontrolnog uzorka pripremite 2 alikvota jednakog volumena (≈ 0,850 mL) u koničnim epruvetama za kontrolne
uzorke krvi i zatvorite ih pripadajućim zatvaračima.
- Svaku epruvetu obilježite naljepnicom s bar kodom za uzorke Normal Hb A2 Control.
Kontrola migracije:
Za kontrolu migracije pri analizi uzorka Normal Hb A2 Control, preporuke su sljedeće:
• Provedite s kontrolnim uzorkom 1 seriju analiza:
- prije početka nove sekvence analize,
- na kraju sekvence analize.
• Provedite s kontrolnim uzorkom 2 uzastopne serije analiza:
- nakon promjene serijskog broja pufera,
- nakon promjene tehnike,
- nakon sekvence čišćenja kapilara otopinom CAPICLEAN,
- nakon nadograđivanja softvera,
- nakon aktivacije kapilara.
• Provedite s kontrolnim uzorkom 3 uzastopne serije analiza:
- kada prvi put pokrećete program za analizu "HEMOGLOBIN(E)" na instrumentu CAPILLARYS 3,
- nakon duljeg prekida (dulje od 1 tjedna).
- Epruvetu s rekonstituiranim uzorkom Normal Hb A2 Control stavite na mjesto br. 1 na nosaču uzoraka br. 0 instrumenta CAPILLARYS 3 (drugu
epruvetu pohranite prema indikacijama u uputama za upotrebu Normal Hb A2 Control).
- Umetnite nosač uzoraka br. 0 u instrument CAPILLARYS 3 i analiza će započeti automatski.
- U prozorčiću koji se pojavi na zaslonu odaberite broj analiza koje treba provesti za kontrolni uzorak i validirajte.
- Rezultati se zatim automatski obrađuju uz pomoć softvera za analizu podataka.
VAŽNO: Frakcija hemoglobina A u uzorku Normal Hb A2 Control mora pokazati minimalnu optičku gustoću (OD) od 0,10. U slučaju nižih vrijednosti,
ponovno centriranje elektroforetskog obrasca neće se provesti ispravno. Identifikacija hemoglobinskih frakcija Hb A, Hb F, Hb A2 i Hb C te određivanje
migracijske zone drugih varijanti može biti nemoguća ili netočna (vidjeti odjeljak ANALIZA REZULTATA).
NAPOMENA: Nakon instalacije instrumenta CAPILLARYS 3, tijekom prve sekvence analize uzoraka pojavit će se crveni signal upozorenja u slučaju
odsutnosti hemoglobina u jednom uzorku (a ponovno centriranje elektroforetskog uzorka neće biti moguće, vidjeti odjeljak "Analiza rezultata").
Tada se preporučuje analizirati uzorak krvi s hemoglobinom A na određenoj kapilari i ponovno analizirati uzorak bez hemoglobina A postavljanjem
uzorka na mjesto koje odgovara kapilari koja je već detektirala hemoglobin A.
Kontrola kakvoće:
U svaku seriju analiza uzoraka preporučuje se uključiti jednu analizu uzorka Normal Hb A2 Control, a treba ga upotrijebiti kao normalnu ljudsku krv.
Nakon rekonstitucije izravno analizirajte jedan od alikvota uzorka Normal Hb A2 Control (nanesen u epruvetu za kontrolni uzorak sa zatvaračem,
obilježenu naljepnicom s bar kodom) kao uzorak za analizu na nosaču. On će se automatski razrijediti otopinom za hemolizu.
Uzorak Normal Hb A2 Control može se također analizirati na nosaču uzoraka br. 0, vidjeti prethodni odjeljak (Kontrola migracije).
Dobivene vrijednosti moraju biti unutar raspona koji se dobiju za svaku seriju uzoraka Normal Hb A2 Control.
UPOZORENJE: Nijedna metoda testiranja ne može u potpunosti jamčiti odsutnost HIV‑a, hepatitisa B i C ili drugih uzročnika zaraze. Stoga s
kontrolnim uzorkom Normal Hb A2 Control postupajte kao s opasnim biološkim materijalom.
U ispitivanjima koje je odobrila FDA ili neka ekvivalentna regulatorna agencija EU‑a, za ovu seriju kontrolnog uzorka krvi ustanovljeno je da je
negativna:
- protiv površinskog antigena hepatitisa B,
- za antitijela na HCV,
- za antitijela na HIV1 i HIV2.
* NAPOMENA: Otopina CAPIprotect može se upotrijebiti i za razrjeđivanje gotove otopine za pranje. U tom slučaju, razrijeđena otopina za pranje može
postati više ili manje izražene žute boje, ali to nema nikakvog štetnog utjecaja na njenu djelotvornost.
- 145 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
3. CAPILLARYS 3 CAPICLEAN
Sastav
Bočica CAPICLEAN koncentrirane otopine (SEBIA, kat. br. 2060, 1 bočica od 25 mL) sadrži: proteolitičke enzime, tenzide i aditive koji nisu štetni u
upotrijebljenim koncentracijama, a potrebni su za postizanje optimalnog učinka.
Upotreba
Za čišćenje sonde za uzorke u automatiziranom sustavu za kapilarnu elektroforezu CAPILLARYS 3, SEBIA za vrijeme sekvence čišćenja
CAPICLEAN.
VAŽNO:
- Kada se unutar tjedan dana analizira manje od 500 uzoraka, pokrenite sekvencu čišćenja CAPICLEAN najmanje jedanput na tjedan.
- Kada se unutar jednog dana analizira manje od 500 uzoraka, ali se analizira više od 500 uzoraka u tjedan dana, sekvencu čišćenja CAPICLEAN
pokrenite nakon svakih 500 analiza.
- Kada se unutar jednog dana analizira više od 500 uzoraka, pokrenite sekvencu čišćenja CAPICLEAN jednom dnevno.
Vidjeti upute za CAPILLARYS 3 CAPICLEAN i priručnik s uputama za CAPILLARYS 3, SEBIA.
Čuvanje, stabilnost i znakovi promjena
Vidjeti upute za upotrebu CAPILLARYS 3 CAPICLEAN, SEBIA.
6. FIZIOLOŠKA OTOPINA
Priprema
Pripremite 0,15 M (0,9 g/dL) otopine NaCl u destiliranoj ili deioniziranoj vodi.
Upotreba
Analiza uzoraka s dodatnom frakcijom u zoni migracije Z(C) (zona migracije Hb C) ili zoni migracije Z(A2) (zona migracije Hb A2) (vidjeti odjeljak
Priprema uzorka, posebni slučajevi).
Čuvanje, stabilnost i znakovi promjena
Fiziološku otopinu čuvajte na sobnoj temperaturi (od 15 do 30 °C) ili u hladnjaku (od 2 do 8 °C).
Bacite je nakon 3 mjeseca ili ako promijeni izgled, npr. postane zamućena zbog kontaminacije mikrobima. Za dulja razdoblja čuvanja dodajte 0,1 g/dL
natrijevog azida.
NAPOMENE:
Testovi koji su provedeni za validaciju reagensa pokazali su da za različite otopine te uz primjenu opreme prilagođene za rekonstituciju volumena,
varijacija od ± 5 % za konačni volumen nema štetni učinak na analizu.
U destiliranoj ili deioniziranoj vodi koja se upotrebljava za rekonstituciju otopina, ne smije postojati proliferacija bakterija i plijesan (upotrijebiti filtar
≤ 0,45 μm) i voda mora biti vodljivosti manje od 3 μS/cm, što odgovara otporu većem od 0,33 MΩcm.
- 146 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
1. Instrument za kapilarnu elektroforezu SEBIA CAPILLARYS 3 : CAPILLARYS 3 OCTA PN 1245 ili CAPILLARYS 3 TERA PN 1246, spojeni na
računalo opremljeno softverom za obradu podataka PHORESIS.
2. Nosači uzoraka isporučeni uz instrument CAPILLARYS 3.
3. Prekidač CAPILLARYS 3 & MC SWITCH RACK FOR HEMOGLOBIN(E) (1), SEBIA, kat. br. 1373, za automatsko pokretanje promjene tehnike na
postupak HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
4. Nosači uzoraka krvi malog volumena CAPILLARYS 3 & MC LOW VOLUMES RACKS (5), SEBIA, kat. br. 1364, za analizu uzoraka volumena
manjih od 800 μL u instrumentu CAPILLARYS 3.
5. Komplet spremnika isporučen uz instrument CAPILLARYS 3: spremnik za isplahnjivanje (za punjenje destiliranom ili deioniziranom vodom), za
otopinu za ispiranje i spremnik za otpad.
6. CAPI 3 REAGENT CUPS (24 x 14), SEBIA, PN 2582, uključujući 24 pakiranja po 14 reagens čašica CAPI 3 : Čašice za jednokratnu upotrebu za
pripremu bioloških uzoraka za analizu u automatiziranom instrumentu. Postavljaju se na automatizirani sustav za punjenje čašica instrumenta
CAPILLARYS 3. Jedna čašica za reagens namijenjena je za analizu 8 uzoraka u CAPILLARYS 3 OCTA i 12 uzoraka u CAPILLARYS 3 TERA.
UPOZORENJE : Nakon upotrebe, čašicama reagensa s biološkim uzorcima treba rukovati pažljivo. Kada analiza završi, čašice reagensa
treba baciti kao biološki otpad i NIKADA ih se ne smije ponovno upotrijebiti.
Čuvanje : Prije upotrebe, čašice reagensa čuvajte u njihovu nepropusnom pakiranju na čistom i suhom mjestu te na temperaturi između 2 i 30 °C.
7. CAPI 3 POSUDE ZA UPOTRIJEBLJENE ČAŠICE ZA REAGENS (5), SEBIA, PN 2581 : Posude namijenjene za automatizirano skupljanje
upotrijebljenih reagens čašica u sustavu CAPILLARYS 3. Stavljaju se u CAPILLARYS 3, na mjesto koje je namijenjeno za ovu svrhu.
UPOZORENJE: Pažljivo rukovati posudama koje sadrže korištene reagens čašice s biološkim uzorcima.
8. Epruvete za sakupljanje uzoraka promjera 13 mm i njihovi pripadajući zatvarači (maksimalna dužina epruvete sa zatvaračem: 91 mm, maksimalni
promjer zatvarača: 17 mm) : npr. epruvete BD Vacutainer, Terumo Venosafe 5 mL, Greiner Bio‑one Vacuette 1, 2, 3 ili 4 mL ili epruvete Sarstedt
S‑Monovette 2,6, 2,7 ili 3,4 mL (13 x 75 mm),
ili
epruvete za skupljanje uzoraka promjera 11 mm i njihovi pripadajući zatvarači (maksimalna dužina epruvete sa zatvaračem: 91 mm, maksimalni
promjer zatvarača: 17 mm) , npr. epruvete Sarstedt S‑Monovette 2,7 mL ili Kabe Labortechnik Primavette S 2,6 mL (11 x 66 mm),
ili epruvete za skupljanje uzoraka podjednakih dimenzija, odobrene za klinička testiranja.
UPOZORENJE:
- Ove epruvete za skupljanje uzoraka nemojte upotrebljavati s nosačem br. 0 u instrumentu CAPILLARYS 3 (nosač uzoraka br. 0
smije se upotrebljavati samo s koničnim epruvetama za analizu kontrolnih uzoraka krvi).
- Na nosač uzoraka malog volumena CAPILLARYS 3 & MC LOW VOLUMES ne stavljajte epruvete Sarstedt S‑Monovette (značajan
rizik od oštećenja instrumenta i epruveta).
9. EPRUVETE SA ZATVARAČIMA ZA KONTROLNE UZORKE, SEBIA kat. br. 9202 (20 epruveta) ili kat. br. 9205 (500 epruveta): konične epruvete
i pripadajući zatvarači za analizu kontrolnih krvnih uzoraka i uzoraka malog volumena (vidjeti odjeljak Priprema uzoraka) u instrumentu
CAPILLARYS 3.
10. EPRUVETE ZA TESTIRANJE, SEBIA, kat. br. 9214: 200 epruveta od 100 mm (bez zatvarača) za otopinu natrijeva hipoklorita namijenjene za
čišćenje sonde za uzorkovanje ili epruvete (bez zatvarača) ekvivalentnih dimenzija (duljine između 90 i 100 mm, a promjera između 13 i 16 mm).
UZORCI ZA ANALIZU
U uzorcima pohranjenim na temperaturi od 2 do 8 °C može doći do progresivne degradacije hemoglobina (Hb).
Kada su uzorci krvi pohranjeni više od 7 dana na temperaturi od 2 do 8 °C:
• u zoni migracije Hb S pojavi se slaba frakcija koja odgovara methemoglobinu,
• kada je prisutan Hb C, frakcija koja odgovara degradiranom Hb C javlja se anodnije nego Hb A2 koji s njim ne interferira (Z(E) zona),
• kada je prisutan Hb O-Arab, frakcija koja odgovara degradiranom Hb O-Arab javlja se u zoni migracije Hb S (Z(S) zona),
• kada je prisutan Hb E, frakcija koja odgovara degradiranom Hb E javlja se u zoni migracije Z(D),
• kada je prisutan Hb S, frakcija koja odgovara degradiranom Hb S javlja se u zoni migracije Hb F (Z(F) zona),
• kada je prisutan Hb A, frakcija koja odgovara degradiranom Hb A (Hb A "frakcija koja stari"), javlja se anodnije (zona Z11).
Kada je prisutan Hb F (u uzorcima krvi novorođenčadi), zbog degradacije uzorka frakcija se javlja u migracijskoj zoni Hb A (Z(A) zona).
Ako se čuva više od 10 dana, u crvenim krvnim stanicama opažaju se viskozne nakupine; treba ih baciti prije analize.
Za pohranu na dulje vrijeme, uzorke pune krvi treba brzo zamrznuti na - 70 / - 80 °C (unutar najviše 8 sati od uzimanja uzorka) bez prethodne pripreme.
Zamrznuti uzorci krvi stabilni su najviše 3 mjeseca na temperaturi od - 70 / - 80 °C.
VAŽNO: Za optimalno čuvanje uzoraka krvi, nemojte ih čuvati na - 20 °C nego na - 80 °C (vidjeti BIBLIOGRAFIJU, J. Bardakdjian-Michau et al, 2003).
- 147 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Priprema uzorka
• Upotrijebiti izravno uzorke pune krvi.
• Provjerite da sve epruvete sadrže najmanje 800 μL krvi i da su čvrsto zatvorene.
• Uzorke krvi držane tjedan dana na temperaturi od 2 do 8 °C ili pohranjene na - 70 / - 80 °C zavrtite na 5 sekundi.
UPOZORENJE: Epruvete treba zatvoriti njihovim odgovarajućim zatvaračima namijenjenim za postupak CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) proveden
u instrumentu CAPILLARYS 3 (vidjeti POTREBNA OPREMA i DODACI).
Posebni slučajevi:
Analiza uzoraka bez Hb A ili Hb A2 (ti su uzorci potpuno kvantificirani ali nisu identificirani po zonama):
Kako bi se identificirale hemoglobinske frakcije uzorka bez hemoglobina A ili hemoglobina A2, preporučuje se uzorak pripremiti prema sljedećem
postupku:
- Uzorak pune krvi zavrtite na 5 sekundi.
- U koničnu epruvetu za kontrolne uzorke izmiješajte jedan volumen (50 μL) pune krvi za analizu s jednim volumenom (50 μL) uzorka Normal Hb A2
Control i zatvorite epruvetu.
- Zavrtite u trajanju od 5 sekundi.
- Stavite epruvetu na nosač CAPILLARYS 3 & MC LOW VOLUMES.
- Umetnite nosač u instrument CAPILLARYS 3.
- Provedite analizu tog uzorka prema standardnom postupku kao da se radi o običnom uzorku krvi.
Rezultati se zatim automatski obrađuju uz pomoć softvera za analizu podataka.
VAŽNO: Za uzorak bez Hb A ili Hb A2 pripremljen ovim postupkom, rezultat koji se dobije uz taj miješani uzorak omogućava identifikaciju vjerojatne
varijante na temelju pozicioniranja hemoglobinskih frakcija u odgovarajućim zonama identifikacije. U izvještaju nemojte navoditi rezultat relativne
kvantifikacije iz miješanog uzorka.
Kao relativnu kvantifikaciju hemoglobina treba uzeti rezultat za početni, neizmiješani uzorak (bez razrjeđivanja u kontrolnom uzorku krvi).
Analiza uzorka s dodatnom frakcijom u zoni migracije Z(C) (zona migracije Hb C) ili Z(A2) (zona migracije Hb A2):
Kada se opaža hemoglobinska frakcija u migracijskim zonama Z(C) ili Z(A2), može se sumnjati na prisutnost varijante Hb Constant Spring. Ova frakcija
može biti prisutna i zbog plazmatskih proteina iz uzorka (npr. u slučaju bolesnika s anemijom koji ima smanjeni omjer [crvene krvne stanice] / [plazma]).
Analiza crvenih krvnih stanica istog uzorka, ali bez plazmatskih proteina, potvrdit će prisutnost te varijante.
Uzorak pripremite prema sljedećem postupku:
- Centrifugirajte uzorak pune krvi da dobijete nakupinu crvenih krvnih stanica, a plazmu bacite.
- U koničnu epruvetu za kontrolne uzorke izmiješajte jedan volumen (50 μL) crvenih krvnih stanica s jednim volumenom (50 μL) fiziološke otopine i
zatvorite epruvetu.
- Zavrtite u trajanju od 5 sekundi.
- Stavite epruvetu na nosač CAPILLARYS 3 & MC LOW VOLUMES.
- Umetnite nosač u instrument CAPILLARYS 3.
- Provedite analizu tog uzorka prema standardnom postupku kao da se radi o običnom uzorku krvi.
Rezultati se zatim automatski obrađuju uz pomoć softvera za analizu podataka.
STANDARDNA EPRUVETA
EPRUVETE I ZATVARAČI ZA KONTROLNE UZORKE
STANDARDNA EPRUVETA (OSIM ZA Sarstedt
(konične epruvete, kat. br. 9202 i 9205)
S‑Monovette epruvete)
NOSAČI UZORAKA NOSAČI UZORAKA MALOG NOSAČI UZORAKA NOSAČI UZORAKA MALOG
CAPILLARYS 3 & MC VOLUMENA CAPILLARYS 3 CAPILLARYS 3 & MC VOLUMENA CAPILLARYS 3
(kat. br. 1369) & MC (kat. br. 1364) (kat. br. 1369) & MC (kat. br. 1364)
Verzija softvera za
≥ 1.08 ≥ 1.08 ≥ 1.08 ≥ 1.08
HEMOGLOBIN(E)
Nema rukovanja —> Nema rukovanja —> Nanesite najmanje 400 μL Nanesite najmanje 100 μL
Rukovanje uzorkom
potpuna sljedivost potpuna sljedivost uzorka u koničnu epruvetu uzorka u koničnu epruvetu
(1) Analiza uzoraka kojima je volumen između 300 i 800 μL (OSIM za Sarstedt S‑Monovette epruvete):
- Zatvorenu epruvetu s uzorkom pune krvi za analizu (najmanje 300 μL) stavite na nosač za uzorke malog volumena CAPILLARYS 3 & MC
LOW VOLUMES.
- Umetnite nosač u instrument CAPILLARYS 3.
UPOZORENJE: Na nosač uzoraka malog volumena CAPILLARYS 3 & MC LOW VOLUMES ne stavljajte epruvete Sarstedt
S‑Monovette (značajan rizik od oštećenja instrumenta i epruveta). Za uzorke volumena ispod 800 μL u ovoj vrsti epruveta,
pridržavajte se postupka koji odgovara volumenu za analizu.
- 148 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
(2) Analiza uzoraka kojima je volumen između 400 i 800 μL (osobito za Sarstedt S‑Monovette epruvete):
- Uzorak pune krvi za analizu zavrtite na 5 sekundi.
- U koničnu epruvetu za kontrolu stavite uzorak pune krvi (najmanje 400 μL) i zatvorite epruvetu.
- Obilježite epruvetu naljepnicom s bar kodom odgovarajućim za uzorak.
- Stavite epruvetu na nosač CAPILLARYS 3 & MC SAMPLE.
- Kliznim pokretom umetnite nosač u instrument CAPILLARYS 3 na početku serije analiza.
NAPOMENA: Preporučuje se sve uzorke volumena između 400 i 800 μL staviti na isti nosač uzoraka i analizirati ih na početku serije analiza.
Uzorak stavljen u koničnu epruvetu za analizu treba dobro promućkati prije umetanja nosača uzoraka u automatizirani instrument. Uzorak
ne može biti prepoznat ako na koničnoj epruveti nema naljepnice s bar kodom.
POSTUPAK
CAPILLARYS 3 je multiparametarski instrument za analizu hemoglobina na paralelnim kapilarama. U analizi uzoraka hemoglobina koristi se 8 ili
12 kapilara.
Slijed automatiziranih koraka:
• radiofrekvencijska potvrda nosača uzoraka (engl. Radio Frequency Identification, RFID),
• očitavanje bar koda epruveta s uzorcima (do 8 epruveta),
• mućkanje krvnih uzoraka prije analize,
• hemoliza uzoraka i razrjeđivanje iz primarnih epruveta u čašice reagensa,
• ispiranje kapilara,
• ubrizgavanje hemoliziranih uzoraka,
• razdvajanje hemoglobina i izravna detekcija razdvojenih hemoglobina na kapilarama.
- 149 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Kada softver ustanovi hemoglobinsku frakciju u definiranoj zoni, naziv te zone prikaže se u okviru.
Dobiveni uzorci automatski se prilagođavaju s obzirom na frakcije Hb A i Hb A2 kako bi se olakšalo tumačenje:
- ako se frakcije Hb A i/ili Hb A2 ne detektiraju na elektroforetskom obrascu, pojavi se žuti signal upozorenja, podešavanje se provodi na temelju
položaja frakcije Hb A na dva prethodna obrasca dobivena u istoj kapilari; tada nema identificirane frakcije (osim kada se detektira Hb C; u tom
slučaju identificirane su frakcije Hb A2 i Hb C),
- ako se Hb F detektira na elektroforetskom obrascu bez detekcije Hb A, ne pojavi se žuti signal upozorenja, podešavanje se provodi na temelju
položaja Hb F frakcije, a identificiraju se Hb F i/ili Hb A i/ili Hb A2 frakcije,
- ako podešavanje nije moguće, pojavi se crveni signal upozorenja, a frakcije Hb F i Hb A2 u tom slučaju nisu identificirane (nazovite tvrtku SEBIA),
- ako se ustanovi nedovoljna optička gustoća (OD) na elektroforetskom obrascu kontrole migracije (dobivenom uz Normal Hb A2 Control, obilježenom
odgovarajućom naljepnicom s bar kodom na nosaču uzorka br. 0), prikaže se poruka upozorenja kako bi se ova analiza za određivanje položaja
frakcije Hb A razmotrila ili zanemarila. Zatim se purpurni signal upozorenja pojavi na prozorčiću za pregled, a frakcije Hb A i Hb A2 nisu identificirane.
Ni u jednom se slučaju različite migracijske zone (Z1 do Z15) ne pojavljuju ni na zaslonu sustava, ni u ispisanim podacima.
Na elektroforetskom obrascu izračunate su i ponovno nacrtane krivulje frakcija Hb A2 i Hb C usklađene podešavanjem (ili već jesu usklađene), a
prekriva ih nativna krivulja. Ovakav prikaz omogućava kvantifikaciju frakcije Hb A2 ako je Hb C prisutan u uzorku.
UPOZORENJE: U nekim slučajevima hemoglobina C (homozigotnog) ili poslije tehničkog problema, hemoglobini A2 i C nisu podešeni; te
su frakcije tada prenisko kvantificirane. U tom slučaju preporučuje se frakciju Hb A2 kvantificirati primjenom druge tehnike.
- 150 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
UPOZORENJE: Nemojte upotrebljavati deioniziranu vodu dostupnu na tržištu, kao što je na primjer voda za glačanje (opasnost od
značajnog oštećenja kapilara). Upotrebljavajte jedino vodu ultra čiste kvalitete, kao što je voda za injekcije.
VAŽNO: Prije punjenja, preporučuje se spremnik za isplahnjivanje obilno isprati destiliranom ili deioniziranom vodom.
KONTROLA KAKVOĆE
Također se savjetuje u svaki ciklus analize uzoraka uključiti jedan testirani kontrolni uzorak krvi (npr. uzorak krvi koji sadrži hemoglobine A, F, C i S,
kao što su Hb AFSC Control, SEBIA, kat. br. 4792 ili normalni uzorak krvi Normal Hb A2 Control, SEBIA, kat. br. 4778 ili patološki kontrolni uzorak
Pathological Hb A2 Control, SEBIA, kat. br. 4779).
VAŽNO: Za optimalnu analizu kontrolnih uzoraka krvi u instrumentu CAPILLARYS 3, potrebne su posebne konične epruvete za kontrolne uzorke s
odgovarajućim zatvaračima (vidjeti "POTREBNA OPREMA I DODACI") i naljepnice s bar kodom namijenjene za obilježavanje epruveta s kontrolnim
uzorcima krvi za analizu.
REZULTATI
Vrijednosti
Direktnom detekcijom pri 415 nm u kapilarama, dobiju se relativne koncentracije (postoci) zona pojedinačnih hemoglobina.
Referentne vrijednosti za pojedinačne najznačajnije elektroforetske zone hemoglobina ustanovljene su na temelju vrijednosti normalnog hemoglobina
određenog HPLC tehnikom u 113 odraslih osoba (muškaraca i žena) zdrave populacije:
NAPOMENA: Referentne vrijednosti ustanovljene su primjenom standardnih parametara softvera (izravnanje 0 i automatska kvantifikacija
hemoglobinskih frakcija programom za analizu HEMOGLOBIN(E)).
UPOZORENJE: Referentne vrijednosti treba uzeti u obzir samo u slučaju kada nema varijanti hemoglobina.
Tumačenje
Vidjeti ELEKTROFORETSKI OBRASCI, slike 1 – 18.
Različite zone migracija varijanti hemoglobina (nazivaju se Z1 to Z15) prikažu se na zaslonu sustava i na ispisu rezultata. Prelazeći kursorom miša
iznad naziva zone, prikaže se ikona s informacijom o mogućim varijantama hemoglobina koje se mogu vidjeti u toj zoni.
Za svaku frakciju, maksimalna pozicija definira zonu migracije.
Pogledajte tablicu na kojoj su prikazane potencijalne varijante locirane u svakoj zoni.
Hemoglobin S
Hemoglobin S je najčešći. To je zbog toga što dolazi do zamjene jedne glutamatne kiseline (kisela aminokiselina br. 6) u ß‑lancu valinom (neutralna
aminokiselina): u usporedbi s Hb A izoelektrična točka je povišena, a ukupni se negativni naboj smanjuje kad se provodi pH analiza. Stoga je
elektroforetska mobilnost ovog hemoglobina u kapilari povećana, i on je brži nego frakcija A. U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) s lužnatim
puferom, hemoglobin S migrira između frakcija A i A2, blizu Hb A2.
Hemoglobin C
Jedna glutamatna kiselina iz ß‑lanca zamijenjena je lizinom (bazna(lužnata) aminokiselina br. 6); njegova je mobilnost snažno smanjena. U usporedbi
s Hb A, izoelektrična točka jako je povišena, a ukupni se negativni naboj smanjuje kad se provodi pH analiza. Stoga je elektroforetska mobilnost ovog
hemoglobina u kapilari povećana, on je brži nego frakcija A, a to omogućava njegovo razlikovanje. Hemoglobini C, E i O‑Arab nisu superponirani na
elektroforetski profil i lako ih je identificirati.
Hemoglobin E
Jedna glutamatna kiselina iz ß‑lanca (br. 26) zamijenjena je lizinom. U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) hemoglobin E migrira anodno iza
hemoglobina A2 i od njega se potpuno razdvaja. Tako, kada je prisutan hemoglobin E, može se izmjeriti A2 frakcija kako bi se detektirala ß‑talasemija.
- 151 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Hemoglobin O-Arab
Jedna glutamatna kiselina iz ß‑lanca (br. 121) zamijenjena je lizinom. U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E), hemoglobin O‑Arab migrira točno kao i
hemoglobin A2. U tom slučaju hemoglobin A2 nije moguće kvantificirati. Kada je ta frakcija > 9 %, treba sumnjati na hemoglobin O‑Arab.
Vodite računa da Hb O‑Arab migrira različito od hemoglobina C i E.
Alfa-talasemije
Karakterizira ih smanjena sinteza α‑lanaca što posljedično utječe na sintezu svih normalnih hemoglobina. Prekomjerna sinteza ß‑ i γ‑lanaca u odnosu
na α‑lance potiče stvaranje tetramera bez α‑lanca:
• Bartov hemoglobin = γ4
• hemoglobin H = ß4.
Hemoglobin H predstavlja izoelektričnu točku niske vrijednosti; u postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) on migrira anodnije od hemoglobina A (i može
se pojaviti kao jedna ili nekoliko frakcija).
Beta-talasemije
Obilježava ih smanjena sinteza ß‑lanaca. Utječu samo na sintezu hemoglobina A.
Stoga su postoci hemoglobina F i hemoglobina A2 povišeni u odnosu na hemoglobin A. U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) detekcija
beta‑talasemija moguća je na temelju vrijednosti dobivenih za različite normalne hemoglobinske frakcije.
3. Posebni slučajevi
• Ako u uzorku nema hemoglobina A, u njegovoj migracijskoj zoni može se opaziti mala frakcija; ta frakcija može biti acetilirani hemoglobin F koji
predstavlja oko 15 do 25 % hemoglobina F. Sustav CAPILLARYS 3 može bez ikakve zabune identificirati taj acetilirani hemoglobin odvojeno od
hemoglobina A.
• Kada mala frakcija (oko 0,5 do 3 %) migrira između hemoglobina F i δA’2 (varijanta A2), može se sumnjati na varijantu hemoglobina A2.
• Kada se detektira varijanta A2 (δA’2 ili neka druga varijanta A2), preporučuje dodati njezin postotak hemoglobinu A2 kako bi se beta‑talasemija bolje
dijagnosticirala.
• Neke varijante hemoglobina (kao npr. Hb Camperdown i Hb Okayama) migriraju blizu Hb A i možda neće biti od njega razdvojeni.
• Neke varijante hemoglobina (kao npr. Hb Porto‑Alegre i degradirani Hb S) migriraju blizu Hb F i možda neće biti od njega razdvojeni.
• Slabe hemoglobinske frakcije koje migriraju u zonu Z12 ponekad su neprecizno kvantificirane (npr. previše asimetričan Bartov Hb). Stoga je
potrebno obrisati automatsku kvantifikaciju i kvantificirati ih ručno.
• Kod tehnike CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u dijabetičkih bolesnika s povišenim HbA1c (iznad 10 %), opaža se mala frakcija koja se konačno identificira
kao vrh u zoni Z10.
• Slabe frakcije mogu se opaziti u zonama migracije Z14 i Z15. Tada je potrebno analizirati hematološko stanje bolesnika i provesti komplementarne
analize kako bi se okarakterizirale te frakcije (artefakt ili abnormalnost hemoglobina).
• Kada se analiziraju uzorci krvi novorođenčadi, Hb A iz uzoraka koji sadrže Hb F u visokim koncentracijama može se poremetiti, osobito zbog
prisutnosti degradiranog Hb F u njegovoj zoni migracije. Postotak Hb A koji pokaže softver može biti precijenjen. Osim toga, kada su hemoglobinske
varijante (> 4 %, kao što su Hb S, Hb C, Hb E ili Hb D‑Punjab) prisutne u uzorcima krvi koji sadrže visoke koncentracije Hb F (> 60 %), potrebno
je provesti komplementarne analize kako bi se potvrdila prisutnost Hb A.
• U novorođenčadi u dobi do 6 – 9 mjeseci, za provjeru koncentracije Hb F preporučuje se analizirati mnogo uzoraka krvi (prikupljanih npr. mjesečno).
To će omogućiti provjeru smanjenja koncentracije Hb F i moguće prisutnosti druge vrste hemoglobina. U slučaju nesigurnosti savjetuje se potvrditi
rezultate pomoću komplementarnih ispitivanja i analizirati uzorke krvi roditelja.
• U slučaju uzorka krvi s niskom razinom Hb A (< 10 %) a visokom razinom Hb S (primjerice, uzorak krvi bolesnika koji je transfuzijom primio krv s
bolešću srpastih stanica ili sa S beta‑talasemijom), frakcija Hb S može se pojaviti s pomakom iz zone Z(S) u zonu Z(D). U tom slučaju izmiješajte
uzorak s kontrolnim uzorkom Normal Hb A2 Control prema postupku opisanom u odlomku "UZORCI ZA ANALIZU", dio "Posebni slučajevi", kako
biste potvrdili položaj varijante u migracijskoj zoni Z(S). Da bi se potvrdila prisutnost Hb S, potrebno je analizirati hematološki status i provesti
komplementarna ispitivanja.
• Prilikom analize uzoraka krvi bolesnika s bolešću srpastih stanica prije transfuzije, u analizama za istog bolesnika moguće je opaziti varijaciju frakcije
Hb S zbog nehomogenosti ovog tipa uzorka. Stoga se ovaj tip krvnog uzorka preporučuje homogenizirati prije analize.
- 152 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Interferencija i ograničenja
• Vidjeti UZORCI ZA ANALIZU.
• Analizirajte samo uzorke krvi koji se nalaze u epruvetama za skupljanje uzoraka opisanim u odlomku "POTREBNA OPREMA I DODACI" ili u
epruvetama jednakih dimenzija odobrenim za kliničke testove. Za više informacija nazovite tehničku službu tvrtke SEBIA.
• Ne analizirajte izravno epruvete koje sadrže manje od 800 μL krvnog uzorka.
• Izbjegavajte stare, nepravilno čuvane uzorke krvi; produkti degradacije (ili artefakti) mogu utjecati na elektroforetski obrazac nakon 7 dana čuvanja.
• Nakon čuvanja od 10 dana mogu se pojaviti viskozne nakupine nastale u crvenim krvnim stanicama; treba ih baciti prije analize.
• Pri analizi krvnih uzoraka sa smanjenim omjerom [crvene krvne stanice] / [plazma] (uzetih od bolesnika s anemijom), kada se opazi frakcija u
migracijskim zonama Z(C) ili Z(A2) može se sumnjati na varijantu hemoglobina Constant Spring. Ova se frakcija može pojaviti zbog plazmatskih
proteina prisutnih u uzorku (vidjeti odlomak Priprema uzoraka, Posebni slučajevi).
• Kada se detektira nenormalni hemoglobin, upotrijebite drugi način identifikacije (npr. elektroforeza globinskog lanca) ili zatražite savjet ili pošaljite
uzorak u specijalizirani laboratorij.
VAŽNO: Kao komplementarne rezultate potrebno je također analizirati hematološki status.
• Migracija varijante hemoglobina blizu Hb A može dovesti do podcijenjene frakcije Hb A i varijante, a posljedično tomu precijenjene frakcije Hb A2.
Kako bi se precizno kvantificiralo Hb A2, potrebno je ukloniti odvojenu integraciju obiju varijanti i Hb A te kvantificirati te frakcije zajedno.
• Neke homozigotne "S" osobe liječe se lijekom "Hydrea"® (hidroksiureja) koji može potaknuti sintezu fetalnog hemoglobina. U postupku CAPI 3
HEMOGLOBIN(E) mobilnost induciranog hemoglobina F ne razlikuje se od one fiziološkog hemoglobina F.
• Zbog rezolucije i granica osjetljivosti zonske elektroforeze, moguće je da se ovom metodom neke hemoglobinske varijante ne mogu detektirati.
• Postupak CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) koji se provodi na instrumentu CAPILLARYS 3 nije bio procijenjen u populaciji novorođenčadi (raspon – od
rođenja do 28 dana).
• U slučaju bolesnika s hiperleukocitozom migracija u uzorku može biti brža, što dovodi do pomaka profila, a posljedica može biti neprepoznavanje
zona.
Česti interferirajući faktori u postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) kad se provodi instrumentom CAPILLARYS 3 (trigliceridi i bilirubin) procijenjeni su u
ispitivanjima na temelju smjernice EP7‑A2 "Testiranje interferencije u kliničkoj kemiji" američkog Instituta za kliničke laboratorijske standarde (Clinical
Laboratory Standards Institute, CLSI – USA).
Slijedi sažeti prikaz rezultata:
- U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) provedeom na instrumentu CAPILLARYS 3 nije opažena kvalitativna ili kvantitativna interferencija ako je
koncentracija bilirubina jednaka ili manja od 46,7 mg/dL ili 799 μmol/L.
- U postupku CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) provedenom na instrumentu CAPILLARYS 3 nije opažena kvalitativna ili kvantitativna interferencija ako je
koncentracija triglicerida jednaka ili manja od 2,3 g/dL ili 26,5 mmol/L.
Rješavanje problema
Nazovite tehničku službu tvrtke SEBIA dobavljača kada test ne funkcionira pravilno, a pažljivo ste slijedili upute za pripremu i pohranu materijala te
upute za provedbu postupka.
Sigurnosno-tehnički listovi za komplet reagensa i informacije o i) čišćenju i zbrinjavanju otpadnih tvari, ii) označavanju i pravilima sigurnosti koje
primjenjuje SEBIA, iii) pakiranju za transport bioloških uzoraka i iv) čišćenju instrumenata, dostupni su na ekstranet web‑stranici tvrtke SEBIA
www.sebia.com.
PODACI O DJELOVANJU
Preciznost
Preciznost postupka CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) procijenjena je u ispitivanju na temelju smjernice EP5‑A2 "Procjena preciznosti metoda kvantitativnog
mjerenja; odobrena smjernica - drugo izdanje", američkog Instituta za kliničke i laboratorijske standarde ("Evaluation of Precision Performance of
Quantitative Measurements Methods; Approved Guideline – Second Edition", Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI – USA).
Prosječne vrijednosti i koeficijenti varijacije (KV %) izračunati su za postotak (%) hemoglobinskih frakcija u svakom uzorku primjenom statističkih alata
prema preporuci CLSI-a.
- 153 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
- 154 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Linearnost
Frakcija Hb A2
Dva karakteristična uzorka krvi, jedan s deplecijom Hb A2 (sadržavao je 13,6 g/dL ukupnog hemoglobina s 0,0 % Hb A2) i drugi obogaćen s Hb A2
(sadržavao je 14,4 g/dL ukupnog hemoglobina s 9,1 % Hb A2) Izmiješana su u različitim omjerima, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3. Za svaku mješavinu uzorci su analizirani tri puta.
Za testove je utvrđeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona za frakciju Hb A2 do maksimalne koncentracije od otprilike 1.3 g/dL (između
0,2 i 9,1 % Hb A2).
Frakcija Hb F
Dva karakteristična uzorka krvi, jedan s normalnom razinom Hb A2 (sadržavao je 13,6 g/dL ukupnog hemoglobina s 0,0% Hb F) i drugi s povišenom
razinom Hb F (sadržavao je 13,7 g/dL ukupnog hemoglobina s 83,1 % Hb F) Izmiješana su u različitim omjerima, a mješavine su podvrgnuta
elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3. Za svaku mješavinu uzorci su analizirani tri puta.
Za testove je utvrđeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona za frakciju Hb F do maksimalne koncentracije od otprilike 11,4 g/dL (između
0,5 i 83,1 % Hb F).
Frakcija Hb C
Dva karakteristična uzorka krvi, jedan s normalnom razinom Hb A2 (sadržavao je 12,9 g/dL ukupnog hemoglobina s 0,0 % Hb C) i drugi s Hb C
(sadržavao je 9,3 g/dL ukupnog hemoglobina s 82,0 % Hb C) izmiješana su u različitim omjerima, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3. Za svaku mješavinu uzorci su analizirani tri puta.
Za testove je utvrđeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona za frakciju Hb C do maksimalne koncentracije od otprilike 7,6 g/dL (između
0,3 i 82,0 % Hb C).
Frakcija Hb D
Dva karakteristična uzorka krvi, jedan s normalnom razinom Hb A2 (sadržavao je 16,4 g/dL ukupnog hemoglobina s 0,0 % Hb D) i drugi s Hb D
(sadržavao je 12,7 g/dL ukupnog hemoglobina s 43,5 % Hb D) izmiješana su u različitim omjerima, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3. Za svaku mješavinu uzorci su analizirani tri puta.
Za testove je utvrđeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona za frakciju Hb D do maksimalne koncentracije od otprilike 5,5 g/dL (između
0,7 i 43,5 % Hb D).
Frakcija Hb E
Dva karakteristična uzorka krvi, jedan s normalnom razinom Hb A2 (sadržavao je 12,5 g/dL ukupnog hemoglobina s 0,0 % Hb E) i drugi s Hb E
(sadržavao je 8,8 g/dL ukupnog hemoglobina s 86,9 % Hb E) izmiješana su u različitim omjerima, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3. Za svaku mješavinu uzorci su analizirani tri puta.
Za testove je utvrđeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona za frakciju Hb E do maksimalne koncentracije od otprilike 7,6 g/dL (između 0,2
i 86,9 % Hb E).
Frakcije Hb A i Hb F
Uzorak krvi s povećanom razinom Hb F (sadržavao je 10,5 g/dL ukupnog hemoglobina s 18,7 % Hb A i 81,3 % Hb F) koncentriran je i serijski razrijeđen
u otopini za hemolizu, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 1,1 do 21,0 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcija Hb A i Hb F.
Frakcija Hb A2
Uzorak krvi s normalnom razinom Hb A2 (sadržavao je 9,2 g/dL ukupnog hemoglobina s 2,6% Hb A2) koncentriran je i serijski razrijeđen u otopini za
hemolizu, a mješavine su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 1,8 do 21,9 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcija Hb A2.
Frakcija Hb S
Uzorak krvi s Hb S (sadržavao je 12,5 g/dL ukupnog hemoglobina s 40,7 % Hb S) koncentriran je i serijski razrijeđen u otopini za hemolizu, a mješavine
su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 2,5 do 20,9 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcija Hb S.
- 155 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
Frakcija Hb C
Uzorak krvi s Hb C (sadržavao je 11,9 g/dL ukupnog hemoglobina s 31,5 % Hb C) koncentriran je i serijski razrijeđen u otopini za hemolizu, a mješavine
su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 2,4 do 19,9 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcije Hb C.
Frakcija Hb D
Uzorak krvi s Hb D (sadržavao je 9,7 g/dL ukupnog hemoglobina s 43,2 % Hb D) koncentriran je i serijski razrijeđen u otopini za hemolizu, a mješavine
su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 1,9 do 19,4 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcije Hb D.
Frakcija Hb E
Uzorak krvi s Hb E (sadržavao je 8,9 g/dL ukupnog hemoglobina s 24,5 % Hb E) koncentriran je i serijski razrijeđen u otopini za hemolizu, a mješavine
su podvrgnute elektroforezi postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u instrumentu CAPILLARYS 3.
Za testove je ustanovljeno da su linearni unutar cijelog ispitivanog raspona od 1,8 do 21,2 g/dL ukupnog hemoglobina, a koncentracija ukupnog
hemoglobina u uzorku nije utjecala na postotke frakcije Hb E.
NAPOMENA: Rezultati u nastavku dobiveni su u 1 ispitivanju unutrašnje točnosti. Analizirani krvni uzorci pribavljeni su iz 10 laboratorija u Francuskoj,
Belgiji, Tajlandu i na Novom Zelandu. Svi su uzorci bili jednako obrađivani primjenom obiju tehnika te uz pridržavanje istih smjernica u odnosu na
integritet uzoraka.
Razine hemoglobinskih frakcija izmjerene su u 153 krvna uzorka, uključujući 64 uzorka s varijantama hemoglobina, elektroforetskim razdvajanjem
postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) na instrumentu CAPILLARYS 3 te tehnikom komercijalno dostupne kapilarne elektroforeze za analizu
hemoglobina (referencija).
Vrijednosti hemoglobinskih frakcija izmjerene na oba načina analizirane su statističkim postupkom linearne regresije. Osjetljivost i specifičnost
postupka CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u usporedbi s referentnim postupkom izračunate su preporučenom metodom (Wendling, 1986). Rezultati linearne
regresijske analize tablično su prikazani u nastavku (y = postupak CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) na instrumentu CAPILLARYS 3):
Normalni hemoglobini
Varijante hemoglobina
Ovo ispitivanje pokazalo je savršenu korelaciju između 2 postupka analize kako bi se kvantitativno odredilo Hb A, Hb A2, Hb F, Hb S, Hb C, Hb D i
Hb E.
Za detekciju varijanti hemoglobina, dobiveni rezultati pokazuju potpunu korelaciju između 2 postupka analize uz 100,0 % osjetljivost i 100,0 %
specifičnost postupka CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) u usporedbi s referentnim postupkom.
Svi abnormalni hemoglobini ili abnormalne razine normalnih hemoglobina detektirani postupkom CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) provedenom na
instrumentu CAPILLARYS 3, bili su u skladu s referentnim postupkom. Nije opažen slučaj lažno pozitivnih nalaza, tj. detekcije abnormalne vrpce ili
abnormalne razine normalne vrpce ako takva abnormalnost nije postojala.
- 156 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
- 157 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
BIBLIOGRAPHIE / BIBLIOGRAPHY
1. J. Bardakdjian-Michau, J.-L. Dhondt, R. Ducrocq, F. Galactéros, A. Guyard, F.-X. Huchet, A. Lahary, D. Lena-Russo, P. Maboudou, M.-L. North,
C. Prehu, A.-M. Soummer, M. Verschelde, H. Wajcman (2003) Bonnes pratiques de l’étude de l’hémoglobine. Ann. Biol. Clin., 61, 401-409.
2. V.F. Fairbanks, ed. (1980) Hemoglobinopathies and thalassemia: Laboratory methods and case studies. Brian C. Decker, New York.
3. F. Galacteros (1986) Thalassémie, drépanocytose et autres hémoglobinopathies. Techniques et Biologie, 3, 174-178.
4. JM Hempe, JN Granger and RD Craver (1997) Capillary isoelectric focusing of hemoglobin variants. Electrophoresis, 18, 1785-1795.
5. T.H.J. Huisman and J.H.P. Jonxis (1977) The hemoglobinopathies: techniques of identification. Marcel Dekker, New York.
6. Jellum E et al. Diagnostic applications of chromatography and capillary electrophoresis. J. Chromatogr. B, 689, 155-164 (1997).
7. Joutovsky A, Hadzi-Nesic J and Nardi MA (2004) HPLC retention time as a diagnostic tool for hemoglobin variants and hemoglobinopathies : a
study of 60 000 samples in a clinical diagnostic laboratories. Clin. Chem., 50, 10, 1736-1747.
8. J.S. Krauss, P.A. Drew, M.H. Jonah, M. Trinh, S. Shell, L. Black and C.R. Baisden (1986) Densitometry and microchromatography compared for
determination of the hemoglobin C and A2 proportions in hemoglobin C and hemoglobin SC disease and in hemoglobin C trait. Clin. Chem. 32,
5, 860-863.
9. Landers JP. Clinical Capillary Electrophoresis. Clin. Chem., 41, 495-509 (1995).
10. C. Livingstone (1986) The hemoglobinopathies. Edit. London.-
11. M. Maier-Redelsberger, R. Girot (1989) Diagnostic biologique des maladies de l’hémoglobine. Feuillets de biologie, 170.
12. Oda RP et al. Capillary electrophoresis as a clinical tool for the analysis of protein in serum and other body fluids. Electrophoresis, 18, 1715-
1723 (1997).
13. R.G. Schneider (1978) Methods for detection of hemoglobin variants and hemoglobinopathies in the routine clinical laboratory. CRC Crit. Rev.
Clin. Lab. Sci. 9, 243-271.
14. L. Vovan, D. Lara-Russo, A. Orsini (1985) Diagnostic biologique des hémoglobinoses. Ann. Pédiat. 32, 9, 780-789.
15. http://globin.cse.psu.edu/hbvar/menu.html : Hbvar : A Database of Human Hemoglobin Variants and Thalassemias.
16. http://www.isns-neoscreening.org/agenda.htm.
17. F Boemer, O Ketelslegers, JM Minon, V Bours, R Schoops (2008) Newborn screening for sickle cell disease using tandem mass spectrometry.
Clin. Chem., 54, 12, 2036-2041.
18. Lubin BH, Witkowska HE, Kleman K (1991) Laboratory diagnosis of hemoglobinopathies. Clin. Biochem., 24, 363-374.
19. B Gulbis, B Fontaine, F Vertongen, F Cotton (2003) The place of capillary electrophoresis techniques in screening for haemoglobinopathies.
Ann. Clin. Biochem., 40, 659-662.
20. Aguilar-Martinez P et al (2010) Arbres décisionnels pour le diagnostic et la caractérisation moléculaire des hémoglobinopathies. Ann. Biol. Clin.,
68 (4) : 455-464.
21. Wendling A. Procédures de diagnostic ou de dépistage : Justification et validité d’un test de diagnostic ou de dépistage-sensibilité-spécificité.
Impact-Internat, 1986 ; Sept : 93-97.
22. L. Guis, A. Chaumier, V. Le Gall, S. Havrez (Février 2013) Intégration du Capillarys 2 Flex Piercing (Sebia) dans un laboratoire de biologie
médicale spécialisée. Revue Francophone des Laboratoires, 449, 47 – 56.
23. I. Agouti, F. Merono, N. Bonello-Palot, C. Badens (2013) Analytical evaluation of the Capillarys 2 Flex piercing for routine haemoglobinopathies
diagnosis. Int. Jnl. Lab. Hem. 35, 217 – 221.
24. S. Altinier, M. Varagnolo, M. Zaninotto, M. Plebani. (2012) Identification and quantification of hemoglobins in whole blood: the analytical and
organizational aspects of Capillarys 2 Flex Piercing compared with agarose electrophoresis and HPLC methods. Clin. Chem. Lab. Med. DOI
10.1515/cclm-2012-0061.
25. M. Angastiniotis, J.L. Vives Corrons, E.S. Soteriades, A. Eleftheriou (2013) The Impact of Migrations on the Health Services for Rare Diseases
in Europe: The Example of Haemoglobin Disorders. The Scientific World Journal Volume 2013, Article ID 727905, 10 pages.
26. Nicole Borbely, Lorraine Phelan, Richard Szydlo, et al. (2012) Capillary zone electrophoresis for haemoglobinopathy diagnosis. J. Clin. Pathol.,
doi: 10.1136/jclinpath-2012-200946.
27. F. Cotton et al. (2009) Evaluation of an automated capillary electrophoresis system in the screening for hemoglobinopathies. Clin. Lab., 55 :
217 – 221.
28. D. Greene, A.L. Pyle, J.S. Chang, C. Hoke, T. Lorey (2012) Comparison of Sebia Capillarys Flex capillary electrophoresis with the BioRad Variant
II high pressure liquid chromatography in the evaluation of hemoglobinopathies. Clin. Chim. Acta 413, 1232 – 1238.
29. T. Higgins, M. Mack, A. Khajuria (2009) Comparison of two methods for the quantification and identification of hemoglobin variants. Clin.
Biochem., 42, 701 – 705.
30. D.F. Keren et al (2008) Comparison of Sebia Capillarys capillary electrophoresis with the Primus High-Pressure Liquid Chromatography in the
evaluation of hemoglobinopathies. Am. J. Clin. Pathol., 130 : 824 – 831.
31. D.F. Keren et al (2012) Expression of hemoglobin variant migration by capillary electrophoresis relative to Hemoglobin A2 improves precision.
Am. J. Clin. Pathol.,137 : 660 – 664.
32. Can Liao, Jian-Ying Zhou, Xing-Mei Xie, Jian Li, Ru Li, and Dong-Zhi Li (2010). Detection of Hb constant spring by a capillary electrophoresis
method. Hemoglobin, 34 (2) : 175 – 178.
33. D.M. Mais et al (2009) The range of hemoglobin A2 in hemoglobin E heterozygotes as determined by capillary electrophoresis. Am. J. Clin.
Pathol.,132 : 34 – 38.
34. T. Munkongdee et al (2010) Quantitative analysis of Hb Bart’s in cord blood by capillary electrophoresis system. Ann. Hematol. DOI
10.1007/s00277-010-1137-4.
35. R. Paleari, B. Gulbis, F. Cotton, A. Mosca (2012) Interlaboratory comparison of current high-performance methods for HbA2. Int. Jnl. Lab. Hem.
34, 362 – 368.
36. S. Sangkitporn et al (2011) Multicenter validation of fully automated capillary electrophoresis method for diagnosis of thalassemias and
hemoglobinopathies in Thailand. Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health 42 (5), 1224 – 1232.
37. F. Wolff, F. Cotton, B. Gulbis (2012) Screening for haemoglobinopathies on cord blood : laboratory and clinical experience. J. Med. Screen., 19,
3, 116 - 122.
38. A.D. Stephens et al on behalf of the International Council for the Standardisation of Haematology (ICSH) (2012). ICSH recommendations for the
measurement of Haemoglobin F. Int. Jnl. Lab. Hem., 34, 14 – 20.
- 401 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
BIBLIOGRAPHIE / BIBLIOGRAPHY
39. A. Mosca, R. Paleari, D. Leone, G. Ivaldi (2009) The relevance of hemoglobin F measurement in the diagnosis of thalassemias and related
hemoglobinopathies. Clinical Biochemistry, 42, 1797–1801.
40. J. D. Hoyer, C. S. Penz, V. F. Fairbanks, C. A. Hanson and J.A. Katzmann (2002) Diagnostic Usefulness in the Distinction of Hereditary
Persistence of Fetal Hemoglobin (HPFH) and Hemoglobin S–HPFH From Other Conditions With Elevated Levels of Hemoglobin F. Am. J. Clin.
Pathol., 117 : 857 – 863.
41. P. Van Delft et al (2009) Evaluating five dedicated automatic devices for haemoglobinopathy diagnostics in multi-ethnic populations. Int. J. Lab.
Hematol., 31 (5) : 484 – 95.
42. Prevention and diagnosis of haemoglobinopathies. A short guide for health professionals and laboratory scientists. Thalassemia International
Federation (TIF) publication No. 21.
43. A.J. Marengo-Rowe (2007) The thalassemias and related disorders. Baylor University Medical Center Proceedings, 20, 27 - 31.
44. Sae-ung et al (2012). Phenotypic expression of hemoglobins A2, E and F in various hemoglobin E related disorders. Blood Cells, Molecules,
and Diseases, 48, 11–16.
45. A. Cao and R. Galanello (2010) Beta-thalassemia. Genetics in Medicine, 12 (2) : 61 – 76.
46. R.Z. Azma et al (2012) Co-inheritance of compound heterozygous Hb Constant Spring and a single – α3.7 gene deletion with heterozygous δβ
thalassaemia: A diagnostic challenge. Malaysian J. Pathol. ; 34(1) : 57 – 62.
47. C.L. Harteveld and D.R. Higgs (2010) α-thalassaemia. Orphanet Journal of Rare Diseases, 5, 13.
- 402 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
TABLEAU / TABLE
Hb Santa Ana (pic mineur), Hb Mizuho (pic mineur), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (pic mineur), variant de
Hb A2 "Savaria", variant de Hb A2 "Chad", variant de Hb A2 "Arya", variant de Hb A2 "Hasharon", variant de Hb A2 "Fort de France",
variant de Hb A2 "Ottawa", variant de Hb A2 "Shimonoseki", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 1), variant de Hb A2 "Matsue-Oki", variant
de Hb A2 "Reims", variant de Hb A2 "Mizushi", variant de Hb A2 "Stanleyville-II", variant de Hb A2 "O-Indonesia", variant de Hb A2
"San Antonio", variant de Hb A2 "G-Audhali", variant de Hb A2 "Handsworth", variant de Hb A2 "G-Philadelphia", variant de Hb A2
"Memphis", variant de Hb A2 "Q-Iran", variant de Hb A2 "G-Waimanalo", variant de Hb A2 "Russ" (alpha 2), variant de Hb A2 "Ube-4",
variant de Hb A2 "Q-India", variant de Hb A2 "Watts", variant de Hb A2 "Spanish Town", variant de Hb A2 "Montgomery", variant de
Hb A2 "G-Norfolk" (alpha 1), variant de Hb A2 "Inkster", variant de Hb A2 "G-Pest", variant de Hb A2 "Winnipeg", variant de Hb A2
"Queens", variant de Hb A2 "Etobicoke", variant de Hb A2 "Chapel Hill", variant de Hb A2 "Park Ridge", variant de Hb A2 "Q-Thailand",
variant de Hb A2 "Delfzicht"
Z1
Hb Santa Ana (minor peak), Hb Mizuho (minor peak), Hb delta A'2, Hb S-Oman, Hb T-Cambodia, Hb Poissy (minor peak), "Savaria"
Hb A2 variant, "Chad" Hb A2 variant, "Arya" Hb A2 variant, "Hasharon" Hb A2 variant, "Fort de France" Hb A2 variant, "Ottawa" Hb A2
variant, "Shimonoseki" Hb A2 variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 1), "Matsue-Oki" Hb A2 variant, "Reims" Hb A2 variant, "Mizushi" Hb
A2 variant, "Stanleyville-II" Hb A2 variant, "O-Indonesia" Hb A2 variant, "San Antonio" Hb A2 variant, "G-Audhali" Hb A2 variant,
"Handsworth" Hb A2 variant, "G-Philadelphia" Hb A2 variant, "Memphis" Hb A2 variant, "Q-Iran" Hb A2 variant, "G-Waimanalo" Hb A2
variant, "Russ" Hb A2 variant (alpha 2), "Ube-4" Hb A2 variant, "Q-India" Hb A2 variant, "Watts" Hb A2 variant, "Spanish Town" Hb A2
variant, "Montgomery" Hb A2 variant, "G-Norfolk" Hb A2 variant (alpha 1), "Inkster" Hb A2 variant, "G-Pest" Hb A2 variant, "Winnipeg"
Hb A2 variant, "Queens" Hb A2 variant, "Etobicoke" Hb A2 variant, "Chapel Hill" Hb A2 variant, "Park Ridge" Hb A2 variant,
"Q-Thailand" Hb A2 variant, "Delfzicht" Hb A2 variant
Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), variant de Hb A2 "Les Lilas",
variant de Hb A2 "Boumerdes", variant de Hb A2 "Dunn", variant de Hb A2 "Bassett", variant de Hb A2 "Tarrant", variant de Hb A2
"Sassari", variant de Hb A2 "St. Luke's", variant de Hb A2 "Verdun", variant de Hb A2 "Manitoba-I", variant de Hb A2 "Setif", variant de
Hb A2 "Sunshine Seth", variant de Hb A2 "Titusville", variant de Hb A2 "Swan River", variant de Hb A2 "Manitoba-II", variant de Hb A2
Z(C) "Val de Marne"
Hb C-Ziguinchor, Hb F-Hull, Hb F-Texas-I, Hb Constant Spring, Hb C, Hb C-Harlem (C-Georgetown), "Les Lilas" Hb A2 variant,
"Boumerdes" Hb A2 variant, "Dunn" Hb A2 variant, "Bassett" Hb A2 variant, "Tarrant" Hb A2 variant, "Sassari" Hb A2 variant, "St.
Luke's" Hb A2 variant, "Verdun" Hb A2 variant, "Manitoba-I" Hb A2 variant, "Setif" Hb A2 variant, "Sunshine Seth" Hb A2 variant,
"Titusville" Hb A2 variant, "Swan River" Hb A2 variant, "Manitoba-II" Hb A2 variant, "Val de Marne" Hb A2 variant
Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (cas anti-Lepore), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, variant de Hb A2
"Charolles", variant de Hb A2 "Roubaix", variant de Hb A2 "Dallas" *, variant de Hb A2 "Aztec" *, variant de Hb A2 "Boghé" *, variant
de Hb A2 "Bonn" *, variant de Hb A2 "Brugg" *, variant de Hb A2 "Buffalo" *, variant de Hb A2 "Chicago" *, variant de Hb A2 "Columbia
Missouri" *, variant de Hb A2 "Conakry" *, variant de Hb A2 "Fontainebleau" *, variant de Hb A2 "Frankfurt" *, variant de Hb A2
"Godavari" *, variant de Hb A2 "Gouda" *, variant de Hb A2 "Groene Hart" *, variant de Hb A2 "Hekinan" *, variant de Hb A2 "Kosovo"*,
variant de Hb A2 "Le Lamentin" *, variant de Hb A2 "Le Lamentin 2" *, variant de Hb A2 "Lisbon" *, variant de Hb A2 "Lyon-Bron" *,
variant de Hb A2 "M-Boston" *, variant de Hb A2 "Milledgeville" *, variant de Hb A2 "Mosella" *, variant de Hb A2 "Noko" *, variant de
Hb A2 "Owari" *, variant de Hb A2 "Ozieri" *, variant de Hb A2 "Riccarton" *, variant de Hb A2 "Rouen" *, variant de Hb A2 "Saclay" *,
variant de Hb A2 "Taybe" *, variant de Hb A2 "Toulon" *, variant de Hb A2 "Twin Peaks" *, variant de Hb A2 "Verona" *, variant de
Hb A2 "Westmead" *, variant de Hb A2 "Zoetermeer" *, variant de Hb A2 "Melusine" *, variant de Hb A2 "Jura", variant de Hb A2
"Nouakchott"
Z(A2)
Hb A2, Hb Chad (E-Keelung), Hb Hong Kong (anti-Lepore case), Hb O-Tibesti, Hb O-Arab, Hb E-Saskatoon, "Charolles" Hb A2
variant, "Roubaix" Hb A2 variant, "Dallas" Hb A2 variant *, "Aztec" Hb A2 variant *, "Boghé" Hb A2 variant *, "Bonn" Hb A2 variant *,
"Brugg" Hb A2 variant *, "Buffalo" Hb A2 variant *, "Chicago" Hb A2 variant *, "Columbia Missouri" Hb A2 variant *, "Conakry" Hb A2
variant *, "Fontainebleau" Hb A2 variant *, "Frankfurt" Hb A2 variant *, "Godavari" Hb A2 variant *, "Gouda" Hb A2 variant *, "Groene
Hart" Hb A2 variant *, "Hekinan" Hb A2 variant *, "Kosovo" Hb A2 variant *, "Le Lamentin" Hb A2 variant *, "Le Lamentin 2" Hb A2
variant *, "Lisbon" Hb A2 variant *, "Lyon-Bron" Hb A2 variant *, "M-Boston" Hb A2 variant *, "Milledgeville" Hb A2 variant *, "Mosella"
Hb A2 variant *, "Noko" Hb A2 variant *, "Owari" Hb A2 variant *, "Ozieri" Hb A2 variant *, "Riccarton" Hb A2 variant *, "Rouen" Hb A2
variant *, "Saclay" Hb A2 variant *, "Taybe" Hb A2 variant *, "Toulon" Hb A2 variant *, "Twin Peaks" Hb A2 variant *, "Verona" Hb A2
variant *, "Westmead" Hb A2 variant *, "Zoetermeer" Hb A2 variant *, "Melusine" Hb A2 variant *, "Jura" Hb A2 variant, "Nouakchott"
Hb A2 variant
Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb E, Hb M-Saskatoon (pic mineur), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (pic 3), variant de Hb A2 "M-Iwate", variant de
Hb A2 "Saint Claude", variant de Hb A2 "Jackson" (alpha 2), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 1), Hb C dégradée
Z(E)
Hb Seal Rock, Hb Köln (Ube-1), Hb Buenos Aires (minor peak), Hb E, Hb M-Saskatoon (minor peak), Hb G-Siriraj, Hb A2-Babinga,
Hb F-Moyen Orient, Hb Agenogi, Hb Sabine, Hb Santa Ana, Hb Savaria, Hb Djelfa (peak 3), "M-Iwate" Hb A2 variant, "Saint Claude"
Hb A2 variant, "Jackson" Hb A2 variant (alpha 2), "Wayne" Hb A2 variant (peak 1), denatured Hb C
- 403 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
TABLEAU / TABLE
Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, variant de Hb A2 "Tokoname", variant de Hb A2 "Pisa", variant de Hb A2 "Lombard", variant de
Hb A2 "Tatras", variant de Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thionville", variant de Hb A2 "Cemenelum", variant de
Hb A2 "J-Cape Town" (alpha 1), variant de Hb A2 "Nikaia", variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 1), variant de Hb A2 "Jackson"
(alpha 1), variant de Hb A2 "Hopkins-II" (alpha 2), variant de Hb A2 "Singapore", Hb O-Arab dégradée
Z(S)
Hb Arya, Hb Kenya (HPFH-7), Hb Hasharon (Sinai), Hb Dhofar (Yukuhashi), Hb Shimonoseki (Hikoshima), Hb O-Indonesia
(Buginese-X), Hb Machida, Hb Vexin, Hb Corbeil, Hb Ottawa (Siam), Hb Fort de France, Hb S, Hb Montgomery, Hb G-Copenhagen,
Hb S-Antilles, Hb Handsworth, Hb Poissy, Hb Hamadan, Hb Belfast, Hb Russ (alpha 1), Hb Russ (alpha 2), Hb Evanston, Hb
Stanleyville-II, Hb Cocody, Hb Reims, "Tokoname" Hb A2 variant, "Pisa" Hb A2 variant, "Lombard" Hb A2 variant, "Tatras" Hb A2
variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant (alpha 2), "Thionville" Hb A2 variant, "Cemenelum" Hb A2 variant, "J-Cape Town" Hb A2 variant
(alpha 1), "Nikaia" Hb A2 variant, "Hopkins-II" Hb A2 variant (alpha 1), "Jackson" Hb A2 variant (alpha 1), "Hopkins-II" Hb A2 variant
(alpha 2), "Singapore" Hb A2 variant, denatured Hb O-Arab
Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb Matsue-
Oki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (pic mineur), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb Lepore-
Baltimore, Hb Djelfa (pic 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, variant de Hb A2 "J-Sardegna", variant de Hb A2 "Suresnes", variant de Hb A2 "J-Meerut" (alpha 2), variant de Hb A2
"J-Broussais" (alpha 2), variant de Hb A2 "J-Rajappen", variant de Hb A2 "J-Anatolia", variant de Hb A2 "J-Oxford", variant de Hb A2
"J-Meerut" (alpha 1), variant de Hb A2 "Ube-2", variant de Hb A2 "J-Broussais" (alpha 1), variant de Hb A2 "J-Abidjan", variant de
Hb A2 "J-Toronto", variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 1), variant de Hb A2 "Mexico" (alpha 2), variant de Hb A2 "Thailand", variant de
Hb A2 "J-Tongariki", variant de Hb A2 "Neuilly-sur-Marne", variant de Hb A2 "J-Wenchang-Wuming", variant de Hb A2 "J-Paris-I"
(alpha 2), variant de Hb A2 "J-Habana", variant de Hb A2 "J-Paris-I" (alpha 1), variant de Hb A2 "Wayne" (pic 2), Hb E dégradée
Z(D)
Hb Memphis, Hb G-Audhali, Hb G-Szuhu (Gifu), Hb Leiden, Hb Beograd (D-Camperdown), Hb Muravera, Hb D-Bushman, Hb Matsue-
Oki, Hb D-Punjab (D-Los Angeles), Hb Osu Christiansborg, Hb Watts, Hb A2-Coburg, Hb G-Waimanalo (Aida), Hb Muskegon,
Hb D-Ibadan, Hb Buenos Aires (minor peak), Hb Q-India, Hb Lepore-BW, Hb Q-Iran, Hb Summer Hill, Hb G-Philadelphia, Hb D-Ouled
Rabah, Hb Yaizu, Hb Kenitra, Hb San Antonio, Hb Ferrara, Hb Lepore-Hollandia, Hb Quin-Hai, Hb Fort Worth, Hb Mizushi, Hb Lepore-
Baltimore, Hb Djelfa (peak 2), Hb Spanish Town, Hb Korle-Bu (G-Accra), Hb Köln (Ube-1), Hb G-Norfolk (alpha 1), Hb Maputo,
Hb Etobicoke, Hb D-Iran, Hb G-Taipei, Hb Caribbean, Hb Ube-4, Hb St. Luke's, Hb G-Coushatta (G-Saskatoon), Hb Winnipeg,
Hb Inkster, Hb Zürich, Hb G-Pest, Hb P-Galveston, Hb Queens (Ogi), Hb Aubenas, Hb Setif, Hb P-Nilotic, Hb Sunshine Seth,
Hb Titusville, "J-Sardegna" Hb A2 variant, "Suresnes" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Broussais" Hb A2 variant
(alpha 2), "J-Rajappen" Hb A2 variant, "J-Anatolia" Hb A2 variant, "J-Oxford" Hb A2 variant, "J-Meerut" Hb A2 variant (alpha 1),
"Ube-2" Hb A2 variant, "J-Broussais" Hb A2 variant (alpha 1), "J-Abidjan" Hb A2 variant, "J-Toronto" Hb A2 variant, "Mexico" Hb A2
variant (alpha 1), "Mexico" Hb A2 variant (alpha 2), "Thailand" Hb A2 variant, "J-Tongariki" Hb A2 variant, "Neuilly-sur-Marne" Hb A2
variant, "J-Wenchang-Wuming" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant (alpha 2), "J-Habana" Hb A2 variant, "J-Paris-I" Hb A2 variant
(alpha 1), "Wayne" Hb A2 variant (peak 2), denatured Hb E
Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, variant de Hb A2 "J-Rovigo", Hb S dégradée, Hb D-Punjab dégradée
Z(F)
Hb F, Hb Willamette, Hb Hoshida, Hb Languidic, Hb Sunnybrook, Hb Park Ridge, Hb Delfzicht, Hb Alabama, Hb Chapel Hill,
Hb Bunbury, Hb Tak, Hb Q-Thailand (G-Taichung), Hb Sabine, Hb Bassett, Hb Les Lilas, Hb Rampa, Hb G-Georgia, Hb Barcelona,
Hb G-San José, Hb Denmark Hill, Hb Pôrto Alegre, Hb Geldrop Santa Anna, Hb Ta-Li, Hb Richmond, Hb Abruzzo, Hb Verdun,
Hb Boumerdes, Hb Swan River, Hb Burke, Hb Tarrant, Hb Dunn, Hb Manitoba-I, Hb Manitoba-II, Hb Sassari, Hb Hazebrouck, Hb Port
Phillip, "J-Rovigo" Hb A2 variant, denatured Hb S, denatured Hb D-Punjab
Hb F acétylée, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - pic 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne
Z8
Acetylated Hb F, Hb Lansing, Hb Hinsdale, Hb Roanne, Hb Yakima, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 1), Hb Saint Mandé, Hb Alberta,
Hb Bruxelles, Hb Val de Marne (Footscray), Hb Kempsey, Hb Shelby (Leslie), Hb Atlanta, Hb Chemilly, Hb S-Clichy, Hb Sarrebourg,
Hb Charolles, Hb Ypsilanti (Ypsi - peak 2), Hb Rainier, Hb Athens-GA (Waco), Hb Debrousse, Hb Köln (Ube-1), Hb Aubagne
- 404 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
TABLEAU / TABLE
Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (pic
majeur) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr - pic majeur) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (pic 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (pic majeur) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Z(A)
Hb A, Hb Presbyterian, Hb Roubaix (Poland), Hb Silver Springs *, Hb El Escorial *, Hb Dallas *, Hb Olympia *, Hb Phnom Penh *,
Hb La Coruna *, Hb Uzes *, Hb Bougardirey-Mali *, Hb Saint Nazaire *, Hb Alzette *, Hb Antibes-Juan-Les-Pins *, Hb Arta (main
peak) *, Hb Austin *, Hb Aztec *, Hb Beirut *, Hb Bethesda *, Hb Boghé *, Hb Bonn *, Hb Brem-sur-Mer *, Hb Brest *, Hb Brigham *,
Hb Brisbane (Great Lakes) *, Hb Brugg *, Hb Buenos Aires (Bryn Mawr, major peak) *, Hb Buffalo (Reeuwijk) *, Hb Bushwick *,
Hb Chicago *, Hb City of Hope *, Hb Coimbra (Ingelheim) *, Hb Columbia Missouri *, Hb Conakry *, Hb Djelfa (peak 1) *,
Hb Fontainebleau *, Hb Frankfurt *, Hb Fukuoka *, Hb Godavari *, Hb Gorwihl (Hinchingbrooke) *, Hb Gouda *, Hb Grange Blanche *,
Hb Groene Hart (Bernalda) *, Hb Hamilton *, Hb Heathrow *, Hb Hekinan *, Hb Iraq-Halabja *, Hb Kosovo *, Hb La Desirade *, Hb Le
Lamentin *, Hb Le Lamentin 2 *, Hb Linköping (Meilahti) *, Hb Lisbon *, Hb Little Rock *, Hb Lulu Island *, Hb Lyon-Bron *,
Hb M-Boston (M-Osaka) *, Hb M-Saskatoon (main peak) *, Hb McKees Rocks *, Hb Malmö *, Hb Marseille (Long Island) *,
Hb Milledgeville *, Hb Minneapolis Laos *, Hb Mizuho *, Hb Mosella *, Hb Noko *, Hb Okayama *, Hb Owari *, Hb Ozieri *, Hb Perth
(Abraham Lincoln) *, Hb Potomac *, Hb Puttelange *, Hb Raleigh *, Hb Ravenscourt Park *, Hb Regina *, Hb Rhode Island
(Southwark) *, Hb Riccarton *, Hb Rouen (Ethiopia) *, Hb Saclay *, Hb St Joseph's *, Hb San Diego *, Hb Santa Juana (Serres) *,
Hb Savannah *, Hb Sydney *, Hb Taybe *, Hb Templeuve *, Hb Toulon *, Hb Twin Peaks *, Hb Ty Gard *, Hb Valletta *, Hb Verona *,
Hb Villejuif *, Hb Villeparisis *, Hb Volga (Drenthe) *, Hb Westmead *, Hb Wood *, Hb Yaounde (Mataro) *, Hb Zoetermeer *,
Hb M-Milwaukee-I *, Hb Melusine *, Hb Pitie-Salpetriere *, Hb Syracuse *, Hb Hounslow, Hb Fort Dodge, Hb Old Dominion (OD/BuT),
Hb Camperdown, Hb Duarte, Hb Jura (Bamako)
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (pic 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Z10
Hb Créteil, Hb Nouakchott, Hb Wayne (peak 1), Hb M-Iwate (M-Kankakee), Hb Camden (Tokuchi), Hb Hope
Hb A dégradée, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (pic X-Asn), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, variant de
Hb A2 "I (I-Texas)"
Z11
Denatured Hb A, Hb Vaasa, Hb Tacoma, Hb Providence (X-Asn peak), Hb Shepherds Bush, Hb Cook, Hb Corsica, Hb Pisa,
Hb K-Woolwich, Hb Lombard, Hb J-Guantanamo, Hb Andrew Minneapolis, Hb J-Cape Town (alpha 1), Hb Kaohsiung (New York),
Hb Fannin-Lubbock I, Hb Saint Claude, Hb Thionville, Hb Jackson (alpha 2), Hb J-Cape Town (alpha 2), Hb Strasbourg, Hb Osler
(Fort Gordon), Hb Pierre-Bénite, Hb J-Auckland, Hb Nancy, Hb Himeji, Hb Singapore, Hb Jackson (alpha 1), Hb Tatras, "I (I-Texas)" Hb
A2 variant
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (pic 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria (J-Bari),
Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (pic X-Asp), Hb Suresnes, Hb J-Broussais (Tagawa-I -
alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia, Hb J-Broussais (Tagawa-
I - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken), Hb J-Meinung (J-Bangkok),
Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu), Hb Mexico (J-Paris-II -
alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1), Hb J-Paris-I (J-Aljezur -
alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 2),
Hb K-Ibadan
Z12
Hb Bart, Hb Nikaia, Hb Cemenelum, Hb Tokoname, Hb J-Cubujuqui, Hb Wayne (peak 2), Hb Hopkins-II (alpha 1), Hb J-Calabria
(J-Bari), Hb J-Camagüey, Hb J-Tongariki, Hb J-Meerut (J-Birmingham - alpha 1), Hb Hopkins-II (alpha 2), Hb Zaïre, Hb J-Meerut
(J-Birmingham - alpha 2), Hb Trollhättan, Hb Pyrgos (Mizunami), Hb Providence (X-Asp peak), Hb Suresnes, Hb J-Broussais
(Tagawa-I - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 2), Hb Grady (Dakar - alpha 1), Hb Hikari, Hb J-Rajappen, Hb J-Anatolia,
Hb J-Broussais (Tagawa-I - alpha 1), Hb J-Chicago, Hb J-Sardegna, Hb J-Cordoba, Hb J-Toronto, Hb J-Oxford (I-Interlaken),
Hb J-Meinung (J-Bangkok), Hb Ube-2, Hb Hofu, Hb J-Cambridge (Rambam), Hb J-Abidjan, Hb Ulm, Hb J-Iran, Hb Riyadh (Karatsu),
Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 2), Hb Neuilly-sur-Marne, Hb Pontoise (J-Pontoise), Hb Ankara, Hb Mexico (J-Paris-II - alpha 1),
Hb J-Paris-I (J-Aljezur - alpha 1), Hb Thailand, Hb J-Habana, Hb J-Baltimore (N-New Haven), Hb J-Wenchang-Wuming, Hb J-Paris-I
(J-Aljezur - alpha 2), Hb K-Ibadan
- 405 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
TABLEAU / TABLE
Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (pic mineur), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)
Z13
Hb J-Europa, Hb N-Baltimore (Hopkins-I), Hb J-Rovigo, Hb Arta (minor peak), Hb J-Norfolk (Kagoshima), Hb J-Kaohsiung (J-Honolulu)
Hb N-Seattle
Z14
Hb N-Seattle
Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek
Z15
Hb H, Hb I-Toulouse, Hb Sudbury, Hb Kurosaki (alpha 1), Poly A (A->G); AATAAA->AATAAG of the alpha2 gene alpha-Thal-2,
Hb Kurosaki (alpha 2), Hb F-Emirates, Hb N-Timone, Hb I (I-Texas, I-Philadelphia), Hb Shaare Zedek
- 406 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 1 Figure 2
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A Hb A
Hb A2
Hb A2
Figure 3 Figure 4
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb C Hb A
Hb A
Hb S
Hb A22 Hb A2
Hb F
- 407 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 5 Figure 6
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb F Hb F
Hb A
Hb A
Hb A2 Hb Bart's
Figure 7 Figure 8
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A Hb A
Hb F
Hb A2 Hb H Hb A2
- 408 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 9 Figure 10
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb D-Punjab Hb A
Hb A
Hb A2 Hb
Hb A2 delta A'2
Figure 11 Figure 12
Hb E Hb C
Hb S
Hb F
Hb A2
Hb A2
Hb F
Sang avec variant homozygote Hb E et fraction Hb F élevée Sang avec variants hétérozygotes Hb S et Hb C
Blood sample with homozygote Hb E variant and elevated Hb F Blood sample with Hb S & Hb C heterozygote variants
- 409 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 13 Figure 14
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb S Hb A
Hb A
Hb F dégradée
Hb A2 degraded Hb A2
Hb F
Sang avec variant homozygote Hb S (et Hb F) Sang avec Hb A dégradée (Hb A3) et Hb F faible
Blood sample with Hb S homozygote variant (and Hb F) Blood sample with degraded Hb A (Hb A3) and faint Hb F
Figure 15
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A
Hb Lepore-BW
Hb F Hb A2
- 410 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 16
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A Hb A
Hb A2 Hb A2
Hb A2
Hb C zone
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300
Figure 17
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1 Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A Hb A
Hb A2 Hb A2
Hb F Hb C zone Hb F Hb C zone
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300
Hb Constant Spring
Analyse du sang total Analyse des globules rouges correspondants
Whole blood analysis Analysis of corresponding red blood cells
- 411 -
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E) - 2018/12
SCHÉMAS / FIGURES
CAPI 3 HEMOGLOBIN(E)
PROFILS ÉLECTROPHORÉTIQUES - ELECTROPHORETIC PATTERNS
Figure 18
Z15 Z14 Z13 Z12 Z11 Z10 Z(A) Z8 Z(F) Z(D) Z(S) Z(E) Z(A2) Z(C) Z1
Hb A
- 412 -
Benelux SCS / Comm. V
Jan Olieslagerslaan, 41
1800 Vilvoorde
Belgique / België
Tél. : 32 (0)2 702 64 64
Fax : 32 (0)2 702 64 60
e-mail : sebia.benelux@sebia.be
Brasil.
Rua Barão do Triunfo, 73, Cj 74
CEP 04602-000
São Paulo
Brasil
Tel. : 55 11 3849 0148
Fax : 55 11 3841 9816
e-mail : sebia@sebia.com.br
GmbH
Münsterfeldallee, 6
36041 Fulda
Deutschland
Tel. : 49 (0)661 3 30 81
Fax : 49 (0)661 3 18 81
e-mail : sebia@sebia.de
Hispania S.A.
C/Sicilia, n° 394
08025 Barcelona
España
Tel. : 34 93 208 15 52
Fax : 34 93 458 55 86
e-mail : sebia@sebia.es
Inc.
400-1705 Corporate Drive
Norcross, GA 30093
U.S.A.
Tel. : 1 770 446 - 3707
Fax : 1 770 446 - 8511
e-mail : info@sebia-usa.com
Italia S.r.l.
Via Antonio Meucci, 15/A
50012 Bagno a Ripoli (FI)
Italia
Tel. : 39 055 24851
Fax : 39 055 0982083
e-mail : info@sebia.it
Swiss GmbH
Verenastrasse, 4b
CH-8832 Wollerau
Switzerland
Tel. : 41 44 787 88 10
Fax : 41 44 787 88 19
e-mail : contact.ch@sebia.com
UK Ltd
River Court, The Meadows Business Park
Station Approach, Blackwater
Camberley, Surrey, GU17 9AB
United Kingdom
Tel. : 44 (0)1276 600636
Fax : 44 (0)1276 38827
e-mail : sales@sebia.co.uk
CP 8010 Lisses - 91008 EVRY Cedex - France Fax : 00 86 (21) 6361 2011
e-mail : sebia@sebia.cn
Tél. : 33 (0)1 69 89 80 80 - e-mail : sebia@sebia.com