PENGARUH SUHU TERHADAP STABILITAS KIMIA LARUTAN AMOKSISILIN

1. Persamaan kurva baku amoksisilin dalam dapar sitrat pH= 5,0 pada panjang gelombang
maks 242 nm

Kadar (bpj) Absorbansi a=0.04672968491

5 0.07
Kurva Baku Amoksisilin
b=0.01706500829
10 0.194 r= 0.993643412
1.8
1.6 25 0.502
f(x) = 0.02 x + 0.05 r²= 0.9873272303
1.450 R² = 0.99 1.017 y= a+bx
1.2100 1.693 2. Hasil pengamatan
Absorbansi

y=0.0467+0.0171x
1
0.8 absorbansi larutan
0.6 amoksisilin 50,0 bpj
0.4 dalam dapar sitrat
0.2
pH= 5,0 pada berbagai
0
0 20 40 60 80 100 120 suhu dan waktu
Kadar (bpj)

Suhu Waktu (n) Absorbansi Ct (bpj) log Ct 1/Ct

25 ° C 0 1.015 56.74010223 1.753890114 0.017624219
(Avy)  15 1.005 56.15410779 1.749381531 0.017808136
  30 0.987 55.0993178 1.741146222 0.018149045
  45 0.855 47.36419117 1.675450125 0.021112996
  60 0.781 43.02783231 1.633749467 0.023240771
           
30 ° C 0 1.013 56.62290334 1.752992134 0.017660698
(Nabiila)  15 0.972 54.22032614 1.734162126 0.018443268
  30 0.854 47.30559173 1.674912479 0.02113915
  45 0.751 41.26984898 1.61563288 0.024230765
  60 0.665 36.23029679 1.559071892 0.027601209
           
40° C 0 1.011 56.50570446 1.752092294 0.017697328
(Hasbi)  15 0.887 49.23937338 1.692312517 0.020308951
  30 0.763 41.97304231 1.622970449 0.023824816
  45 0.645 35.0583079 1.544790951 0.028523909
  60 0.51 27.14738295 1.433727969 0.036835963
           
50° C 0 1.01 56.44710501 1.751641673 0.0177157
(Kerin)  15 0.745 40.91825232 1.611917076 0.024438971
  30 0.633 34.35511458 1.535991401 0.029107747
  45 0.521 27.79197683 1.443919439 0.035981607
  60 0.433 22.63522575 1.35478483 0.044178928
           
60° C 0 0.996 55.62671279 1.745283396 0.017976975
(Arelia)  15 0.679 37.05068901 1.568796289 0.026990051
  30 0.521 27.79197683 1.443919439 0.035981607
  45 0.455 23.92441352 1.3788413 0.041798308
   60 0.301 14.90009912 1.173189157 0.067113647

Waktu
(menit) Ct 25 Ct 30 Ct 40 Ct 50 Ct 60
56.7401022 56.6229033 56.5057044
0 3 4 6 56.44710501 55.62671279
56.1541077 54.2203261 49.2393733
15 9 4 8 40.91825232 37.05068901
47.3055917 41.9730423
30 55.0993178 3 1 34.35511458 27.79197683
47.3641911 41.2698489
45 7 8 35.0583079 27.79197683 23.92441352
43.0278323 36.2302967 27.1473829
60 1 9 5 22.63522575 14.90009912

Waktu (menit) log Ct 25 log Ct 30 log Ct 40 log Ct 50 log Ct 60

1.75389011
0 1.75299213 1.752092294 1.751642 1.7452834
4
1.74938153
15 1.73416213 1.692312517 1.611917 1.56879629
1

1.74114622
30 1.67491248 1.622970449 1.535991 1.44391944
2
1.67545012
45 1.61563288 1.544790951 1.443919 1.3788413
5

1.63374946
60 1.55907189 1.433727969 1.354785 1.17318916
7

Waktu (menit) 1/Ct 25 1/Ct 30 1/Ct 40 1/Ct 50 1/Ct 60

0 0.017624 0.017661 0.017697 0.017716 0.017977

15 0.017808 0.018443 0.020309 0.024439 0.02699

30 0.018149 0.021139 0.023825 0.029108 0.035982

45 0.021113 0.024231 0.028524 0.035982 0.041798

60 0.023241 0.027601 0.036836 0.044179 0.067114

 ORDE NOL

Kurva t vs Ct 25 ° C
60
f(x) = − 0.24 x + 58.92
50 R² = 0.87

40
Ct 25°c (bpj)

30

20

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)

Kurva t vs Ct 30° C
60
f(x) = − 0.36 x + 57.88
50 R² = 0.98

40
Ct 30°c (bpj)

30

20

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)

Kurva t vs Ct 40
60
f(x) = − 0.49 x + 56.56
50 R² = 1

40
Ct 40°c (bpj)

30

20

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva Kurva
t vs Ct t60
vs Ct 50
60 60

50
f(x) =50 f(x)x =+ −50.77
− 0.63 0.54 x + 52.58
R² = 0.93 R² = 0.94
40 40
Ct 60°c (bpj)

Ct 50°c (bpj)

30
30
20
20
10
10
0
0 0 10 20 30 40 50 60 70
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
Waktu (menit)
ORDE
SATU Kurva t vs log Ct 25
1.8

f(x) = − 0 x + 1.77
1.75 R² = 0.86

1.7
log Ct 25

1.65

1.6

1.55
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva t vs log Ct 30° C
1.8

1.75 f(x) = − 0 x + 1.77

R² = 0.98
1.7
Log Ct 30° C

1.65

1.6

1.55

1.5

1.45
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)

Kurva t vs log Ct 40
2
1.8
1.6 f(x) = − 0.01 x + 1.77
R² = 0.98
1.4
1.2
log Ct 40

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)

Kurva t vs log Ct 50
2
1.8
1.6 f(x) = − 0.01 x + 1.73
R² = 0.99
1.4
1.2
log Ct 50

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva t vs log Ct 60
2
1.8
1.6 f(x) = − 0.01 x + 1.73
R² = 0.98
1.4
1.2
log Ct 60

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (Menit)

ORDE
DUA Kurva t vs 1/Ct 25
0.03

f(x) = 0 x + 0.02
0.02 R² = 0.85

0.02
1/Ct 25

0.01

0.01

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu ( menit)

Kurva t vs 1/ Ct 30° C
0.03

0.03 f(x) = 0 x + 0.02

R² = 0.96
0.02
1/Ct 30° C

0.02

0.01

0.01

0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva t vs 1/ Ct 40
0.04
0.04
f(x) = 0 x + 0.02
0.03 R² = 0.95
0.03
1/Ct 40

0.02
0.02
0.01
0.01
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva t vs 1/Ct 50
0.05
0.05
0.04 f(x) = 0 x + 0.02
R² = 0.99
0.04
0.03
1/Ct 50

0.03
0.02
0.02
0.01
0.01
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
 Kurva t vs 1/Ct 60
0.08
0.07
0.06
f(x) = 0 x + 0.02
0.05 R² = 0.92
1/ct 60

0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)

PENGOLAHAN DATA
a. Perhitungan tetapan laju peruraian amoksisilin pada pH=5,0 pada tiap suhu berdasarkan
Reaksi ORDE SATU
Rumus reaksi orde satu:

Log Ct = Log Co – ( 2,303 x t)

b = −𝑘 2,303
k = - (b x 2,303)

  25° C 30° C 40° C 50° C 60° C

intercept
(a) 1.7736 1.7686 1.766 1.732 1.8623
slope (b) -0.0021 -0.0034 -0.0052 -0.0064 -0.0089
0.00483 0.007830 0.01197 0.01473 0.02049
K (/menit) 6 2 6 9 7

Suhu Tetapan laju peruraian terhitung (/menit)

25° C 0.0048363
30° C 0.0078302
pH 5,0
40° C 0.0119756
50° C 0.0147392
60° C 0.0204967
b. Penentuan orde reaksi dengan metode regresi (grafik) Hitung harga koefisien korelasi r2

Orde r² 25° C r² 30° C r² 40° C r² 50° C r² 60° C r² rata rata

0 0.8697 0.9836 0.9996 0.9449 0.9328 0.94612
1 0.8621 0.9766 0.9848 0.989 0.9763 0.95776
2 0.8535 0.9633 0.9469 0.9918 0.9211 0.93532

Kesimpulannya adalah orde satu karena nilai r² rata rata yang paling mendekati 1

c. Berdasarkan hasil perhitungan, buatlah kurva 1/T vs log K. Kemudian hitunglah dengan
metode regresi, tentukan intercept dan slope.
Lalu hitung harga A dan Ea nya
log K
T (°C) T (K) 1/T (1/K) K (1/menit) (1/menit)
25 298 0.003356 0.00484000 -2.3151546
30 303 0.003300 0.00783020 -2.1062271
40 313 0.003195 0.01197560 -1.9217027
50 323 0.003096 0.01474000 -1.8315025
60 333 0.003003 0.02049670 -1.6883161

Kurva1/T vs log K
0.00
0.0030 0.0030 0.0031 0.0031 0.0032 0.0032 0.0033 0.0033 0.0034 0.0034

-0.50
log K (1/menit)

-1.00

-1.50
f(x) = − 1649.64 x + 3.29
-2.00 R² = 0.95

-2.50
1/T (1/K)

Intercept (a) 3.2897

Slope (b) -1649.6

Ea
7548.670226
(kal/mol)
A 1948.49816
Persamaan regresi:
y = -1649.6x + 3,2897
r2 = 0,9523
Ea 1
Log K ¿ log A− ×
2,303 R T
 Log A = 3,2897
A = 1948.49816
−Ea
 = - 1649.6
2,303 R
Ea = - (-1649.6 x 2,303 x 1,987)
Ea = 7548.670226 kal/mol
d. Berdasarkan harga Ea tersebut, hitunglah batas kadaluwarsa suhu ruang untuk kadar
minimum 90%. Bandingkan hasilnya berdasarkan metode grafik
Temp log K
Temp (K) 1/ T (1/K) K (/menit) t1/2 (minggu) t90 (minggu)
(°C) (1/menit)
0.00567713 122.068527 18.5620785
25 298 0.003355705 -2.24587047
9 1 7
0.00700608 98.9139754 15.0411332
30 303 0.00330033 -2.154524422
8 8 7
0.01045712 66.2705804 10.0772881
40 313 0.003194888 -1.98058754
9 6 4
45.5149403 6.92112797
50 323 0.003095975 -1.817420743 0.01522577
2 8
0.02167435 31.9732650 4.86194330
60 333 0.003003003 -1.664053754
8 9 8

Pada suhu 25°C:

Ea 1
 Log K ¿ log A− ×
2,303 R T
7548.670226 1
= log 1948.49816 - ( × )
2,303 x 1.987 298
= 3.2897 – 5.53557047
= -2.24587047

K = 0.005677139/ minggu
 t1/2 = 0.693 x K
t1/2 25°C = 0.693 x 0.005677139
= 122.0685271

1 2.303
 t90 = Log ( )×
0.9 K
1 2.303
= Log ( )×
0.9 0.005677139

= 18.56207857
t1/2= half life, waktu paruh eliminasi
t90= shelf time, waktu kadaluarsa
PEMBAHASAN

4. Berdasarkan hasil percobaan diatas, berapakah orde peruraian amoksisilin, berikan

penjelasan!
Jawab:
Secara teoritis, amoksisilin termasuk orde 1 (orde peruraian). Karena kurva 1/T vs Log K
berupa garis linier (Lurus). Pada hasil praktikum kami juga didapatkan Orde 1 untuk
peruraian amoksisilin namun dari kurva 1/T vs Log K menunjukkan tidak tepat lurus atau
belum akurat yang ditunjukkan pada Harga R kuadrat tidak sama dengan 1. Hal ini dapat
terjadi dikarenakan
a. Perlakuan tidak kuantitatif
b. Terkontaminasi bahan lain
c. Perhitungan yang kurang presisi
d. Amoksisilin tidak stabil, mengalami peruraian jika didiamkan terlalu lama

5. Mengapa pada percobaan uji stabilitas dipercepat perlu ditetapkan orde reaksi
peruraiannya?
Jawab:
Pada percobaan uji stabilitas dipercepat, perlu ditetapkan dulu orde reaksi peruraiannya.
Tujuannya agar dapat menentukan harga K yang kemudian dibuat kurva log K terhadap
1/T. grafik ini dapat diektrapolasi untuk memperoleh harga K pada suhu kamar, sehingga
dapat dipakai untuk menghitung batas kadaluwarsa obat.

6. Hal-hal apakah yang harus diperhatikan pada percobaan di atas agar dapat dijamin laju
peruraiannya tunggal?
Jawab:
Hal-hal yang perlu diperhatikan agar laju peruraian tunggal adalah:
a. pH = menggunakan dapar untuk mempertahankan pH
b. Katalis = untuk mempercepat reaksi (digunakan enzim yang bisa mengoksidasi
amoksisilin)
c. Suhu = berpengaruh pada laju peruraian obat
d. Konsistensi = bentuk sediaan dapat mempengaruhi harga A
e. Konstanta laju reaksi (k) = untuk menentukan waktu paruh dan batas kadaluwarsa
f. Energi aktivasi (Ea) bahan obat
7. Mengapa harga Ea perlu ditentukan dalam percobaan di atas?
Jawab:
Energi aktivasi = energi minimal untuk mengubah reaktan jadi produk. Harga Ea perlu
ditentukan dalam percobaan ini, karena metode uji stabilitas dipercepat hanya berlaku jika
peruraian merupakan fenomena termal dengan Ea sekitar 10-30 kkal/mol, sehingga dapat
diperkirakan stabilitas obat pada suhu kamar.
Ea < 10 laju terlalu cepat
Ea > 30 laju terlalu lambat

KESIMPULAN
 Bila harga K tetap/slope adalah +1/-1 maka laju peruraian dikatalisa oleh asam basa
spesifik.
 Bila harga K beda/slope adalah +1/-1 maka laju peruraian dikatalisa oleh asam basa
umum.
 Makin kecil harga K maka pH makin stabil.
 Orde peruraian amoksisilin secara teoritis adalah orde 1.
 Amoksisilin dalam bentuk larutan stabilitasnya kecil sehingga larutan memiliki batas
kadaluwarsa yang kecil.
 Semakin tinggi suhu maka laju degradasi semakin besar.
 Semakin lama waktu pendiaman maka laju degradasi semakin besar.

SARAN
 Saat praktikum diusahakan bekerja dengan seteliti dan sekuantitatif mungkin.
 Suhu pada waterbath dicek dengan termometer agar suhu sesuai dengan suhu yang
diinginkan.
 Membuat tabel pengolahan data digunakan rumus pada excel agar lebih rapi dan
tertata dan meminimalisir kesalahan menghitung.

Pustaka:
1. Patrick J Sinko. Martin Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 6th edition,
page 318-353
2. Patrick J Sinko. Martin Farmasi Fisika dan Ilmu Farmasetika. Edisi 5. EGC. Hal
503-504
3. Sahoo NK, Sahu M, Algarsamy V,.Srividya B and Sahoo CK. 2016..Validation of
Assay Indicating Method Development of Amoxicillin in Bulk and One of Its
Marketed Dosage Form by RP-HPLC. Ann Chromatogr Sep Tech. 2(1): 1014