Jurnal Kimia Mulawarman Volume 8 Nomor 2, Mei 2011 ISSN1693-5616

Kimia F-MIPA Unmul

UJI FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KASAR

ETANOL, FRAKSI n-HEKSANA, ETIL ASETAT DAN METANOL
DARI BUAH LABU AIR (Lagenari siceraria (Molina) Standl)

PHYTOCHEMICAL AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF ETHANOL

EXTRACT, n-HEXSANE, ETHIL ACETAT AND METHANOL FRACTIONS
FROM THE GOURDS FRUIT (Lagenari siceraria (Molina) Standl)

Eva Marliana, Chairul Saleh

PS. Kimia F.MIPA Universitas Mulawarman
Jln. Barong Yongkok No. 4 Kampus Gn. Kelua Samarinda
Telp. 0541-749152

Abstract
Phytochemical test and Antibacterial Activity test in each fraction from the gourds fruit (Lagenari
siceraria (Molina) Standl) that came from Teluk Dalam, Tenggarong Seberang have been done. The
sample of leaves was extracted with ethanol and then consentrated by using rotary evaporator. The
ethanol crude extract were fractioned with n-hexane, Ethyl Acetat and Methanol. Based on the
phytochemical test on secondary metabolits of the gourds fruit (Lagenari siceraria (Molina)
Standl), it showed that ethanol crude extract contained flavonoid, saponin, steroid and phenol. n-
hexane fraction contained steroid, ethyl acetat fraction contained phenol. And methanol-water
fraction contained saponin, and phenol. Based on the Antibacterial Activity test using the paper disc
diffusion method (diameter 6 mm), the results of this test showed that the most active fraction is n-
Heksana with : of the Bacillus cereus bacteria at the concentration 1, 2, 4, 6, 8 and 10% (b/v) with
inhibition diameter 9.57, 9.88, 10.17, 12.18, 13 and 14.3 mm respectively so minimum inhibitory
concentration got 0-1%. The active respons toward Salmonella typhi bacteria at the concentration 1,
2, 4, 6, 8 and 10% (b/v) with inhibition diameter 7.50, 7.60, 8.20, 8.38, 8.87, and 9.8 mm so
minimum inhibitory concentration got 0-1%. The chloramfenikol antibiotics concentration 0.00386
M as a standar to inhibit the growth of Bacillus cereus and Salmonella typhi bacteria with the
inhibition diameter 12.58 mm and 15.06 mm respectively.

Keywords : Lagenari siceraria (Molina) Standl, phytochemical, and antibacterial activity

A. PENDAHULUAN Salah satu tumbuhan yang dapat digunakan

Sebagian besar penyakit infeksi yang merugikan bagi
manusia disebabkan oleh mikroorganisme, salah satunya
adalah bakteri Salmonella tiphy penyebab penyakit
infeksi akut yaitu demam tifoid atau thypus abdominalis
(Pelezar, 1988). Semakin banyaknya penderita penyakit
yang disebabkan oleh infeksi mikroorganisme ini maka
berbagai macam obat telah dibuat untuk menyembuhkan
suatu penyakit, baik dari bahan kimia ataupun bahan
alam. Obat dari bahan kimia menimbulkan berbagai efek
samping. Selain itu, harga obat-obatan tersebut juga
cukup mahal. Oleh sebab itu, obat-obatan dengan
menggunakan bahan alam merupakan alternatif pilihan
yang terbaik (Harjanti, 1992).
Secara umum, kegunaan tumbuhan obat
sebenarnya disebabkan oleh kandungan kimia yang
dimiliki. Namun, tidak seluruh kandungan kimia
diketahui secara lengkap karena pemeriksaan bahan
kimia dari suatu tanaman memerlukan biaya yang
mahal. Meskipun tidak secara rinci, tetapi pendekatan
farmakologi menghasilkan informasi kegunaan
tumbuhan obat (Hariana, 2006).
sebagai obat tradisional adalah Labu air (Lagenaria
siceraria (Molina) Standl). Tanaman labu air ini
tergolong mudah ditanam dan wilayah tanamnya
menyebar di berbagai belahan dunia, dari daerah
beriklim tropis sampai subtropis. Dataran tinggi berhawa
dingin maupun dataran rendah berhawa panas cocok
ditanami labu (Sastrapraja,1980).
Pengunaan kandungan ini bisa berasal dari buah
pada tanaman labu air (Lagenaria siceraria (Molina)
Standl) yang mengandung kalsium, zat besi, vitamin C
dan polifenol. Sifatnya yang mendinginkan, membuat
labu air baik sekali dikonsumsi bagi penderita demam
tinggi. Penderita demam bisa langsung mengonsumsi
rebusan buah labu atau meminum air perasan labu. Buah
labu air (Lagenaria siceraria (Molina) Standl)
mengandung saponin yang digunakan sebagai
antimikroba dalam bidang kesehatan dipakai sebagai
bahan baku untuk sintesis hormon steroid (Robinson,
1995).
Berdasarkan latar belakang tersebut, perlu
dilakukan penelitian untuk mengetahui jenis senyawa
metabolit sekunder, mengetahui fraksi mana yang paling

Kimia F-MIPA Unmul 63

Eva marliana
Kimia F-MIPA Unmul
aktif diantara fraksi n-heksana (non polar), fraksi etil
asetat (semi polar) dan fraksi metanol (polar) serta untuk
mengetahui besarnya aktivitas antibakteri pada buah
labu air (Lagenaria siceraria (Molina) Standl), maka
pada penelitian ini akan diuji aktivitas antibakterinya
terhadap bakteri Salmonella typhi yang mewakili Gram
negatif dan Bacillus cereus yang mewakili Gram positif.
B. METODOLOGI PENELITIAN
2.1. Alat
Alat-alat yang digunakan blender, beaker glass,
Erlenmeyer, pompa vakum, rotari evaporator, neraca
analitik, pipet volume, pipet tetes, corong, corong pisah,
tabung reaksi, pipet mikro 50 µl, batang pengaduk,
cawan petri, jarum ose, incubator, penggaris, autoclaf
Hiclave HV – 110, laminar flow, water shaker, hot plate,
magnetic stirrer dan gelas ukur.
2.2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian
ini adalah buah labu air (Lagenaria siceraria (Molina)
Standl), etanol, aquadest, etil asetat glasial, asam asetat
glacial, H2SO4 2M, H2SO4 pekat, Bi(NO3)2, HNO3
pekat, KI, NaCl, NaOH, FeCl3 1 %, HCl pekat, HCl 2N,
heksana, metanol, serbuk Mg, yeast extract, bacterial
peptone, agar bacteriologial, paper disk antibiotic
tetrasiklin, bakteri Salmonella tiphy, bakteri Bacillus
cereus, kertas saring whatman No. 1, alominium foil,
kapas, lidi, dan kain kasa.
2.3. Prosedur Penelitian
2.3.1. Persiapan Sampel
Bahan tumbuhan diperoleh dari salah satu
tanaman yang terdapat didaerah Teluk Dalam
Tenggarong Seberang. Buah labu air (Lagenaria
siceraria (Molina) Standl.) dipotong kecil-kecil,
dikering anginkan pada suhu ruang (tidak terkena sinar
matahari secara langsung) kemudian dihaluskan dengan
menggunakan blender.
2.3.2. Ekstraksi Senyawa Metabolit Sekunder
Sampel buah labu air (Lagenaria siceraria
(Molina) Standl.) yang telah halus dimaserasi dengan
menggunakan pelarut etanol. Ekstraksi dilakukan sampai
larutan ekstrak tidak berwarna lagi, dilanjutkan dengan
proses penyaringan. Setelah disaring, pelarut diuapkan
dengan rotari evaporator sehingga diperoleh ekstrak
etanol yang kemudian dilanjutkan dengan uji fitokimia
untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder yang
terkandung didalam ekstrak etanol buah labu air
(Lagenaria siceraria).
2.3.3. Fraksinasi
Ekstrak kasar etanol buah labu air (Lagenaria
siceraria (Molina) Standl) difraksinasi berdasarkan pada
perbedaan kepolaran pelarut-pelarut organik. Caranya
adalah sebagai berikut: ekstrak kasar etanol ditambahkan
metanol dan air dengan perbandingan 6:4 (v/v) (Lopes,
2000). Kemudian di fraksinasi dengan n-heksana di
dalam corong pisah, sehingga diperoleh 2 fraksi, yaitu
fraksi metanol-air dan fraksi n-heksana. Dilakukan
penambahan n-heksana secara berulang kali hingga
diperoleh fraksi n-heksana yang jernih. Fraksi n-heksana
64
dipekatkan dengan rotari evaporator dan disebut sebagai
ekstrak fraksi n-heksana.
Selanjutnya fraksi metanol-air difraksinasi
dengan penambahan etil asetat. Dilakukan penambahan
etil asetat secara berulang hingga diperoleh ekstrak etil
asetat yang jernih. Dari fraksinasi kedua ini diperoleh 2
fraksi, yaitu fraksi etil asetat dan fraksi metanol-air.
Kemudian kedua fraksi tersebut dipekatkan dengan
rotari evaporator dan hasilnya masing-masing disebut
sebagai ekstrak fraksi etil asetat dan ekstrak fraksi
metanol-air.
Pada ekstrak kasar etanol, fraksi n-heksana, fraksi
etil asetat dan fraksi metanol-air dilakukan uji fitokimia
untuk mengetahui jenis senyawa kimia metabolit
sekunder yang dikandung setiap fraksi dan ekstrak kasar.
Selanjutnya dilakukan uji antibakteri dengan metode
difusi agar.
2.3.4. Uji Fitokimia
a. Uji Alkaloid
Sebanyak 20 mg ekstrak kasar etanol dan
masing-masing fraksi buah labu air ditambahkan 10 ml
Amoniak dalam kloroform 0.05 N, lalu disaring kedalam
tabung reaksi. Filtrat ditambahkan dengan beberapa tetes
H2SO4 2 M dan dikocok sehingga terpisah dua lapisan.
Lapisan asam terdapat pada bagian atas dipipet ke dalam
tabung tabung reaksi lain, lalu ditambah pereaksi
dragendorff. Positif alkaloid ditunjukkan dengan
terbentuknya endapan warna jingga sampai merah coklat
(Culvenor & flitzgerald, 1963 dalam sutisna, 2000).
b. Uji Triterpenoid dan Steroid (Uji Lieberman
Buchard)
Sebanyak 20 mg ekstrak kasar etanol dan
masing-masing fraksi buah labu air ditambahkan CHCl3
lalu ditambah reagen Lieberman Buchard. Larutan
dikocok perlahan dan dibiarkan selama beberapa menit.
Steroid memberikan warna biru atau hijau dan untuk
Triterpenoid memberikan warna merah atau ungu
(Harborne, 1987).
c. Uji Flavonoid, Saponin dan Fenolik
Sebanyak 30 mg ekstrak kasar etanol dan
masing-masing fraksi buah labu air ditambahkan 10 ml
air panas dengan suhu ± 70ºC. Lalu dibagi pada 3 tabung
reaksi.
Tabung petama Uji Flavonoid ditambahkan
sedikit serbuk Mg dan 1 ml HCl pekat, kemudian
dikocok-kocok. Uji positif ditandai dengan terbentuknya
warna merah, jingga atau ungu (Robinson, 1995).
Tabung kedua Uji Saponin tabung dikocok
kuat-kuat, Ekstrak positif mengandung saponin jika
timbul busa dengan ketinggian 1-10 cm yang bertahan
selama 10 menit (Harborne, 1987).
Tabung ketiga Uji Fenolik ditambahkan
beberapa tetes FeCl3 1%. Uji positif ditunjukkan oleh
terbentuknya warna hijau, merah, ungu, biru atau hitam
pekat (Harborne, 1987).
2.3.5. Uji Aktifitas antibakteri
a. Pembuatan Media Agar (Media Luria Bertani
(LB) )
Ditimbang bahan-bahan yang digunakan untuk
pembuatan media LB, lalu dilarutkan dalam aquadest.
Kimia F-MIPA Unmul
 Jurnal Kimia Mulawarman Volume 8 Nomor 2, Mei 2011 ISSN1693-5616
Kimia F-MIPA Unmul

Larutan dihomogenkan kemudian dipanaskan dengan api
kecil hingga mendidih. Kemudian media dituang ke
tabung reaksi sebanyak 5 ml dan ditutup dengan kapas
lalu disterilkan dengan autoclaf Hiclave HV – 110 suhu
121°C selama 15 menit. Media yang telah steril
kemudian diletakkan miring agar terbentuk media
miring. Setelah media memadat, media disimpan di
lemari pendingin.
b. Regenerasi Bakteri
Sebelum dipakai dalam uji antibakteri, bakteri
yang akan dipakai setiap kali harus diregenerasi terlebih
dahulu. Hal yang pertama kali dilakukan adalah
membuat biakan agar miring, yaitu menggoreskan
biakan dari stok bakteri Salmenella typhi dan Bacillus
cereus masing-masing ke agar miring yang masih baru
kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam
dalam inkubator. Biakan tersebut merupakan aktivitas
awal dari stok bakteri yang telah disimpan pada suhu 4-
5°C.
c. Uji Aktivitas Antibakteri Dengan Metode Difusi
Kertas Cakram
Uji aktifitas antibakteri dengan menggunakan
bakteri Salmonella tiphy dan Bacillus cereus dilakukan
secara aseptik dengan metode difusi kertas cakram yang
mengacu pada Carson dan Riley dalam meidina, dkk.
(2005). Untuk uji antibakteri, dibuat cakram diameter 6
mm (Musa, 2008). Selanjutnya, kedalam suspensi
bakteri Salmonella typhi dan Bacillus cereus yang sudah
distandardisasi kekeruhannya, dicelupkan kapas lidi
steril, ditunggu sebentar agar cairan meresap kedalam
kapas. Kemudian lidi diangkat dan diperas dengan
menekankan lidi pada dinding tabung bagian dalam
sambil di putar-putar. Digores-goreskan kapas lidi pada
permukaan media LB hingga seluruh permukaan
tertutup rapat dengan goresan-goresan. Media LB
dibiarkan selama 5 - 15 menit agar suspensi bakteri
meresap kedalam agar-agar (Soemarno, 2000).
Diteteskan sebanyak 50 µl ekstrak dengan berbagai
konsentrasi pada cakram. Selanjutnya diinkubasi pada
temperatur 37 oC selama 18-24 jam. Ekstrak yang
digunakan dalam uji aktivitas antibakteri ini adalah
ekstrak yang dapat larut dalam aquades yaitu ekstrak
kasar etanol, Fraksi heksana, Fraksi etil asetat, dan fraksi
metanol.
d. Penentuan MIC (Minimum Inhibitory
Concentration)
Ekstrak buah labu air (Lagenaria siceraria)
dibuat dalam beberapa konsentrasi yaitu 0, 1, 2, 4, 6 dan
8% (b/v) pada masing-masing fraksi. Pelarut yang
digunakan adalah aquades. Tiap konsentrasi kemudian
diuji aktivitas antibakteri dan konsentrasi terendah dari
ekstrak yang masih dapat menghambat pertumbuhan
bakteri merupakan nilai MIC (Minimum Inhibitory
Concentration) (Geenwood, 1995).
C. HASIL PENELITIAN
Berdasarkan uji fitokimia terhadap ekstrak kasar
etanol, fraksi heksana, fraksi etil asetat dan metanol
buah labu air (Lagenaria siceraria (Molina) stand) untuk
mengetahui kandungan jenis senyawa metabolit
sekundernya, diperlihatkan pada Tabel 1 berikut ini.

Tabel 1. Hasil uji fitokimia dari ekstrak kasar dan masing-masing fraksi

Jenis Senyawa Jenis Ekstrak

Ekstrak Kasar Fraksi n- Fraksi Etil Fraksi Metanol
Etanol Heksana Asetat
_ _ _ _
Alkaloid
_ _
Saponin + +
_ _
Steroid + +
_ _ _ _
Triterpenoid
_ _ _ _
Flavonoid
_
Fenol + + +
Keterangan : + = Mengandung senyawa metabolit sekunder
_
= Tidak mengandung senyawa metabolit sekunder

Uji saponin yang dilakukan dengan
menggunakan metode pengocokan hingga timbil busa
setinggi 1-3 cm selama kurang lebih 15 menit,
menunjukkan hasil positif pada ekstrak kasar etanol dan
fraksi metanol. Saponin merupakan metabolit sekunder
yang mengandung gugus gula terutama glukosa,
galaktosa, xylosa, rhamnosa atau methilpentosa yang
berikatan dengan suatu aglikon hidrofobik (sapogenin)
berupa triterpenoid, steroid alkaloid. Sehingga saponin
bersifat polar dan dapat larut dalam pelarut air. Saponin
juga bersifat non polar karena memiliki gugus hidrofob
yaitu aglikon. Oleh sebab itulah dapat terbentuk busa
karena saponin terdispersi diantara senyawa polar dan
non polar (Suparjo, 2008).
Uji steroid dan triterpenoid yang menggunakan
metode Liebermann-bouchard. Ekstrak dilarutkan
dalam kloroform, kemudian ditambahkan pereaksi
Lieberman-burchard (asam asetat anhidrida-H2SO4
pekat) menunjukkan hasil positif steroid pada ekstrak
kasar etanol dan fraksi n-heksana dengan terbentuknya
warna biru setelah direaksikan pada pereaksi
Lieberman-burchard (asam asetat glasial- H2SO4 pekat).
Perbedaan warna larutan yang terbentuk antara steroid
dan triterpenoid disebabkan gugus yang dimiliki
keduanya berbeda pada atom C yang ke empat (Fahmi,

Kimia F-MIPA Unmul 65

 Eva marliana
Kimia F-MIPA Unmul
2000). Menurut Saleh, pada buletin of the Indonesian
society of natueral products chemistry.Vol 4 no.2,
dalam bidang farmakologi senyawa triterpenoid
berperan sebagai antitumor, antiinflamasi, dan
antimikrobial.
Pada uji fenol, ekstrak dilarutkan dalam air dan
direaksikan dengan FeCl3 1% memberikan hasil positif
pada ekstrak kasar etanol, fraksi etil asetat dan fraksi
metanol dengan menghasilkan warna hijau kehitaman.
Ciri khas fenolik adalah membentuk kompleks dengan
pewarnaan biru atau biru ungu dengan besi (III) klorida.
Kompleks yang terbentuk diduga berupa besi (III) heksa
fenolat, sehingga uji ini memberikan indikasi gugus OH
aromatik. Reaksi pembentukan warna dari besi (III)
klorida bereaksi dalam sampel. Yang berperan adalah ion
Fe3+ yang mengalami hibridisasi orbital d2sp3 dimana
berdasarkan hasil hibridisasi ini ion Fe3+ (4s03d5)
memiliki 6 orbital kosong yang dapat diisi oleh pendonor
pasangan elektron, dengan demikian maka dapat
diasumsikan bahwa pendonor elektron pada senyawaan
fenolik berasal dari elektron sunyi yang terdapat pada
senyawa fenolik, kemungkinan berasal dari pasangan
elektron sunyi pada atom oksigen (Sukarjo, 1992).
Senyawa fenolik mempunyai peranan penting dalam
transpor elektron pada fotosintesis, mempunyai aktivitas
sitokinin, pemacu pertumbuhan, fenol juga dapat
menyerap sinar UV, dan mempunyai aktivitas
antiinflamasi (Robinson, 1995).Senyawa antioksidan
alami tumbuhan umumnya adalah senyawa fenolik atau
polifenolik (Ardiansyah, 2007).
Pada uji aktivitas antibakteri digunakan bakteri
Salmonela typhi dan Bacillus cereus yang masing-
masing mewakili bakteri Gram negatif dan bakteri Gram
positif. Penggunaan kedua bakteri tersebut bertujuan
untuk mengetahui spektrum dari senyawa antibakteri
yang terdapat pada ekstrak etanol buah labu air, dimana
dikatakan berspektrum luas apabila dapat menghambat
Hasil Uji aktivitas antibakteri Ekstrak
Kasar Etanol
10
Daerah Daya Hambat (mm)
8
6
4
2
0 Salmonella
0%
Konsentrasi fraksi Ekstrak Kasar Etanol (%)
Gambar 1. Grafik aktivitas antibakteri pada ekstrak kasar etanol
Berdasarkan grafik pada Gambar 1 bahwa
zona bening ekstrak kasar etanol pada bakteri Bacillus
cereus menunjukkan diameter zona bening mulai dari
66
pertumbuhan bakteri Gram negatif dan Gram positif,
berspektrum sempit apabila hanya menghambat
pertumbuhan dari salah satu bakteri tersebut (Gram
negatif atau Gram positif aja) (Pelezar dan Chan, 1998).
Pada uji aktivitas antibakteri dilakukan secara
aseptik. Metode yang digunakan adalah metode difusi
cakram. Ekstrak kasar etanol dan masing-masing fraksi
buah labu air (Lagenaria siceraria (Molina) stand)
dengan variasi konsentrasi 1, 2, 4, 6, 8 dan 10 % (b/v)
dimasukkan sebanyak 50 µl pada media. Tujuannya
adalah untuk mengontakkan senyawa aktif dengan
media dan mikroba uji. Setelah diinkubasi akan muncul
daerah bening disekitar kertas cakram yang berbentuk
lingkaran. Diameter daerah bening merupakan daerah
inhibisi dari ekstrak sampel terhadap mikroba uji.
Hasil uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Salmonela typhi dan Bacillus cereus masing-masing
fraksi dan ekstrak kasar etanol dengan menggunakan
metode difusi cakram ditunjukkan pada gambar berikut
ini. Berdasarkan hasil penelitian uji aktivitas antibakteri
di atas menunjukkan bahwa ekstrak fraksi n-heksana
menunjukkan diameter zona bening paling tinggi
dibandingkan dengan ekstrak yang lainnya. Dengan
adanya zona bening yang dihasilkan pada bakteri gram
positif maupun bakteri gram negatif maka hal ini
menunjukkan bahwa ekstrak buah labu air dapat
menghambat pertumbuhan bakteri gram positif maupun
gram negatif sehingga dapat di katakan bahwa ekstrak
buah labu air memiliki spektrum yang luas dalam
menghambat pertumbuhan bakteri Ekstrak kasar etanol
dan fraksi-fraksi buah labu air. Ekstrak kasar etanol,
fraksi n-heksana, fraksi etil asetat dan fraksi metanol
pada konsetrasi 1% mulai terlihat adanya aktivitas
antibakteri sehingga konsentrasi minimum yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhi dan
bakteri Bacillus cereus terdapat pada konsentrasi 0-1%.
Bacillus cereus
5% 10% 15% typhi
konsentrasi 1, 2, 4, 8 dan 10% berturut-turut 6,21; 6,40;
6,58; 6,83; 7,13 dan 8,38 mm. Untuk bakteri
Salmonella typhi 6,20; 6,83; 7,25; 7,50; 7,52; 7,75mm.
Kimia F-MIPA Unmul
Jurnal Kimia Mulawarman Volume 8 Nomor 2, Mei 2011 ISSN1693-5616
Kimia F-MIPA Unmul

Hasil Uji aktivitas antibakteri fraksi n-

Heksana
20

Daerah Daya Hambat (mm)

15
10
5 Bacillus cereus
0 Salmonella typhi
0% 5% 10% 15%
Konsentrasi fraksi n-Heksana (%)

Gambar 2. Grafik aktivitas antibakteri pada n-Heksana

Pada Gambar 2 menunjukkan aktivitas bakteri Salmonela typhi menunjukkan diameter zona
antibakteri ekstrak fraksi n-Heksana terhadap bakteri bening 7,50; 7,60; 8,20; 8,38; 8,87; 9,8mm berturut .
Bacillus cereus dengan diameter zona bening 9,57;
9,88; 10,17; 12,18; 13; 14,3mm berturut-turut . Untuk

Hasil Uji aktivitas antibakteri fraksi Etil

Asetat
15
Daerah Daya Hambat

10
5 Bacillus cereus
(mm)

0 Salmonella typhi
0% 5% 10% 15%
Konsentrasi fraksi Etil Asetat (%)

Gambar 3. Grafik aktivitas antibakteri pada Etil Asetat

Ganbar 3 menunjukkan aktivitas antibakteri 9,32; 10,25mm berturut-turut. Untuk bakteri Salmonela
fraksi etil asetat untuk bakteri terhadap Bacillus cereus typhi menunjukkan diameter zona bening 6,20; 6,45;
dengan diameter zona bening 6,22; 7,26; 8,23; 8,50; 6,82; 7,52; 8,5; 8,82mm berturut-turut.

Hasil Uji aktivitas antibakteri fraksi

Metanol
Daerah Daya Hambat

10

5
(mm)

Bacillus cereus
0 Salmonella typhi
0% 5% 10% 15%
Konsentrasi fraksi Metanol (%)

Gambar 4. Grafik aktivitas antibakteri pada Metanol

Pada Gambar 4 menunjukkan aktivitas cereus dengan diameter zona bening 6,26; 6,47; 6,94;
antibakteri fraksi metanol terhadap bakteri Bacillus 7,4; 7,6; 8,5mm berturut-turut . Untuk bakteri Salmonela

Kimia F-MIPA Unmul 67

Eva marliana
Kimia F-MIPA Unmul
typhi menunjukkan diameter zona bening 6,45; 7,20;
7,25; 7,58; 8,16; 8,20 mm berturut-turut.
Dari hasil yang diperoleh pada uji aktivitas
antibakteri menunjukkan bahwa diameter zona bening
untuk bakteri Bacillus cereus yang mewakili bakteri
gram positif lebih besar bila dibandingkan bakteri
Salmonela typhi yang mewakili bakteri gram negatif.
Dinding sel bakteri gram negatif merupakan struktur
berlapis sedangkan bakteri gram positif mempunyai satu
lapis yang tebal. Dinding sel bakteri gram negatif lebih
kompleks dibandingkan bakteri gram positif. Perbedaan
utama adalah adanya lapisan membran luar yang
meliputi peptidoglikan. Kehadiran membran ini
menyebabkan dinding sel bakteri gram negatif terdapat
lapisan lipopolisakarida yang dapat berfungsi sebagai
penghalang masuknya beberapa macam substansi
termasuk antibiotik (Tjitrosono, 1986).
Davis Stout mengemukakan bahwa ketentuan
kekuatan antibakteri adalah sebagai berikut : daerah
hambatan sebesar 20 mm atau lebih berarti sangat kuat,
daerah hambatan 10-20 mm (kuat), 5-10 mm (sedang)
dan daerah hambatan 5 mm atau kurang berarti lemah
(Ardiansyah, 2005). Diameter zona bening yang
ditunjukkan pada ekstrak kasar etanol lebih kecil bila
dibandingkan dengan ekstrak fraksi n-Heksana, fraksi
Etil asetat, dan fraksi metanol. Hal ini menunjukkan
bahwa kekuatan antibakteri pada ekstrak kasar etanol
tergolong sedang, pada fraksi n-Heksana tergolong kuat,
pada fraksi etil asetat dan fraksi metanol tergolong
sedang.
Walaupun pada ekstrak kasar etanol,
mengandung senyawa metabolit sekunder yang lebih
banyak daripada ekstrak fraksi-fraksi yang lain namun
diameter zona bening yang dihasilkan lebih kecil
daripada ekstrak fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan
fraksi metanol. Hal ini mugkin disebabkan karena
adanya kerja yang tidak sinergis antara senyawa
metabolit sekunder dalam ekstrak kasar etanol dalam
peranannya sebagai antibakteri. Sedangkan pada ekstrak
fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi metanol,
kemungkinan disebabkan karena adanya kerja yang
sinergis antara senyawa metabolit sekunder sebagai anti
bakteri.
Adanya aktivitas antibakteri tersebut
kemungkinan disebabkan karena kerja dari senyawa-
senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak buah labu air (Lagenaria siceraria (Molina)
stand) seperti saponin, steroid dan fenol.
Tumbuhan yang mengandung saponin telah
digunakan sebagai racun ikan selama beratus-ratus
tahun. Saponin digunakan sebagai antimikroba dan pada
beberapa tahun terakhir, dalam bidang kesehatan
saponin menjadi sangat penting karena dapat diperoleh
dari tumbuhan dengan mudah dan dapat digunakan
sebagai bahan baku sintesis hormon steroid (Robinson,
1995).
Steroid merupakan senyawa yang paling
penting diantara senyawa yang aktif dari segi biologi.
Banyak steroid dengan gugus karbonil atau hidroksil
68
pada karbon 11 mempunyai aktivitas yang serupa. Salah
satu senyawa steroid yang digunakan sebagai bahan obat
dan zat antibakterial adalah β-sitosterol yang diisolasi
dari tanaman Trema orientalis yang dapat menghambat
partumbuhan bakteri Gram negatif (Fessenden dan
Fessenden, 1997).
Katekol dan pirogalol merupakan fenol
terhidroksilasi yang bersifat toksik terhadap
mikroorganisme. Katekol memiliki dua gugus hidroksil
dan pirogalol memiliki tiga. Sisi dan jumlah gugus
hidroksil pada kelompok senyawa fenol diduga memiliki
hubungan dengan toksisitas relatif mereka terhadap
mikroorganisme, dengan bukti bahwa hidroksilasi yang
meningkat menyebabkan toksisitas yang meningkat pula.
Mekanisme yang dianggap bertanggung jawab terhadap
toksisitas fenolik pada mikroorganisme meliputi
inhibitor enzim oleh senyawa teroksidasi, kemungkinan
melalui reaksi dengan gugus sulfhidril atau melalui
interaksi non-spesifik dengan protein (Naim, 2004).
Dalam uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol buah
labu air digunakan standar antibiotik kloramfenikol.
Kloramfenikol digunakan sebagai pembanding untuk
mengetahui kekuatan antibakteri dari ekstrak etanol buah
labu air. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya
diameter zona bening kloramfenikol terhadap aktivitas
bakteri Bacillus cereus sebesar 12.58 mm, sedangkan
pada bakteri Salmonella typhi diameter zona bening
yang terbentuk sebesar 16.08 mm.
Dari hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak kasar
etanol dan masing-masing fraksi buah labu air,
menunjukkan bahwa senyawa antibakteri yang
terkandung dalam ekstrak etanol dan masing-masing
buah labu air memiliki sifat spektrum luas. Artinya
ekstrak tersebut memiliki aktivitas antibakteri terhadap
bakteri Salmonella typhi (Gram negatif) dan Bacillus
cereus (Gram positif), seperti halnya dengan
kloramfenikol yang juga berspektrum luas dan sangat
spesifik terhadap bakteri Salmonella typhi (Hawley,
2003).
D. KESIMPULAN
Berdasarakan hasil penelitian yang telah
dilakukan maka dapat disimpulkan sebagai berikut :
4.1. Kandungan senyawa metabolit sekunder pada
ekstrak kasar etanol dari buah labu air (Lagenaria
siceraria (Molina) Standl.) adalah saponin, steroid
dan fenol. Ekstrak fraksi n-heksana mengandung
senyawa steroid. Ekstrak fraksi etil asetat
mengandung senyawa fenol. Ekstrak fraksi
metanol mengandung senyawa saponin dan fenol.
4.2. Berdasarkan hasil uji aktivitas dengan metode
difusi cakram pada ekstrak kasar etanol dan
masing-masing fraksi. fraksi n-heksana memiliki
daya hambat antibakteri paling aktif.
4.3. Konsentrasi minimum buah labu air (Lagenaria
siceraria (Molina) standl.) yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus cereus
dan Salmonella typhi dari ekstrak kasar etanol,
fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi
metanol yaitu antara 0-1%.
Kimia F-MIPA Unmul
Jurnal Kimia Mulawarman Volume 8 Nomor 2, Mei 2011 ISSN1693-5616
Kimia F-MIPA Unmul

DAFTAR PUSTAKA

1. Ardiansyah. 2007. 28 Januari 2009. Antioksidan dan Peranannya Bagi Kesehatan. Artikel Iptek.
http://ardiansyah.multiply.com/journal/item/14.
2. Fessenden, J.R., dan Fessenden, J.S. 1986. Kimia Organik Jilid 2. Jakarta: Erlangga.
3. Greenwood. 1995. Antibiotic Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial and Chemoterapy.
4. Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Bandung: Penerbit ITB.
5. Hariana, A. 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri Pertama. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya.
6. Harjanti, K. 1992. Uji daya antibakteri fraksi air dan etilasetat daun sembukan (Paederiafoetiada L.). Jurnal
Penelitian Tanaman Obat Dibeberapa Perguruan Tinggi Di Indonesia, No.306.
7. Hawley, L. 2003. Intisari Mikrobiologi dan Penyakit Infeksi. Jakarta: Hipokrates.
8. Naim, R.2004. Senyawa Antimikroba dari Tumbuhan. Kompas, Edisi Rabu, 15 September 2004.
http://www.kompas.com/kompas-cetak/0409/15/sorotan/1265264.htm.
9. Pelezar, M.J., S.Chan. 1998. Dasar-dasar Mikrobilogi 2. Jakarta : Penerbit UI-Press.
10. Robinson, T. 1995. Kandungan Kimia Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi. Bandung: Penerbit ITB.
11. Sastrapradja, S. 1980. Sayur-sayuran. Jakarta: Balai Pustaka.
12. Suparjo. 2008. Saponin: Peran dan Pengaruhnya Bagi Ternak dan Manusia. Laboratorium Mahakam Ternak
Fakultas Peternakan Universitas Jambi. Jatayu66@yahoo.com.
13. Sutisna, I. 2000. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Triterpenoid Lasnostana dari Kulit Kayu Danglo (Macarango
javanica Muell Arg). Skripsi jurusan Kimia FMIPA, Institut pertanian Bogor.
14. Tjitrosono, S . S. 1986. Botani Umum. Bandung : Penerbit : Angkasa.

Kimia F-MIPA Unmul 69