FLAVONOID

1mcf bột hòe

I. Chiết xuất: 30ml cồn 96o ( or 90o)
1. Cho vào bình nón:

2. Lọc qua bông → thu dịch chiết to 5 phút

II. Định tính

1. Phản ứng với vòng γ −¿ pyron: cyaniding ( đặc hiệu)

2ml dd Khi thấy sủi bọt, nhỏ từ từ HCl đđ vào thành

Bột Mg ( hạt bắp) ( làm trong tủ hút)

KL: MÀU ĐỎ
 Nếu Phản ứng nhạy chỉ cần nhỏ 3-5 γ là xuất hiện phản ứng
 Nếu maxHCl đđ = 20γ thì ngưng không làm nữa → KL (-)

2. Phản ứng nhóm OH phenol ( tăng màu)

a.
2ml dd
TĂNG MÀU ( Có ống chứng)
Vài γ NaOH

to

b. .
2ml dd
↓ XANH ĐEN
Vài γ FeCl3

to
 c.
2ml dd ↓ VÀNG
Vài γ pb(CH3COO)2

to

 Phản ứng tăng màu chứng tỏ có nhóm OH phenol

 Có phản ứng Cyanidin & OH phenol → KL: có FLAVONOID
 Chỉ có phản ứng với nhóm OH phenol → KL: CHẮC CHẮN LÀ COUMARIN

III. Tính chất & định tính:

→ Các dẫn chất flavon có màu vàng rất nhạt có khi không màu (trường hợp các
nhóm OH đã methyl hoá), flavonol vàng nhạt đến vàng, chalcon và auron vàng
đậm đến đỏ cam. Các chất thuôc nhóm isoflavon, flavanon, isoflavanon,
flavanonol, leuco-anthocyanidin, flavan-3-ol do không có nối đôi liên hiệp giữa
vòng B với nhóm carbonyl nên không màu.

→ Các dẫn chất anthocyanidin thì màu thay đổi tuỳ theo pH của môi trường.
Tuy nhiên khi các flavonoid ở trong các bộ phận của cây thì còn phụ thuộc vào
hỗn hợp với các sắc tố khác.

→ Độ tan không giống nhau, thường flavonoid glycosid và flavonoid sulfat là

những hợp chất phân cực nên không tan hoặc ít tan trong dung môi hữu cơ, tan
được trong nước tốt nhất là cồn nườc. Các aglycon flavonoid thì tan được trong
dung môi hữu cơ, không tan trong nước. Các dẫn chất flavonoid có nhóm 7-
hydroxy thường dễ tan trong dung dịch kiềm loãng.

IV. Một số phản ứng định tính (chủ yếu với nhóm euflavonoid)

- Tác dụng của FeCl3: Tùy theo nhóm flavonoid và tùy theo số lượng vị trí
nhóm OH trong phân tử mà cho màu lục, xanh, nâu.

- Tác dụng của kiềm. Nếu hơ một tổ chức thực vật như cánh hoa, nhát cắt của
gỗ hoặc tờ giấy thấm có nhỏ dịch chiết trên miệng lọ ammoniac thì có màu vàng
tăng lên tùy theo nồng độ flavonoid và tùy theo nhóm flavonoid. Flavon và
flavonol cho màu vàng sáng, anthocyanidin cho màu xanh dương. Chalcon và
auron có thể cho màu đỏ da cam. Một số nhóm khác như flavan-3-ol,
flavanon, isoflavon màu không thay đổi. Tuy nhiên nếu thực hiện trong ống
nghiệm với dung dịch alkali thì một số dẫn chất flavan-3-ol lại cho màu vì dễ bị
oxy hoá, còn flavanon dễ bị isomer hoá thành chalcon nên nếu để một lúc lại cho
màu vàng đậm đến đỏ.

- Tác dụng của NaOH đậm đặc và đun nóng (phân hủy kiềm). Đun flavonoid
với dung dịch KOH 30% thì sẽ mở vòng C rồi dẫn đến tạo thành dẫn chất acid
thơm và dẫn chất phenol. Tùy theo nhóm thế và vị trí thế vào vòng A và B mà
có các dẫn chất acid thơm và phenol khác nhau. Có thể xác định các dẫn chất
này bằng phương pháp sắc ký đối chiếu với chất mẫu, kết quả thu được dùng để
góp phần biện luận cấu trúc. Ví dụ khi phân huỷ chất Chrysin thì thu được
phloroglucin, acid benzoic.

- Tác dụng của H2SO4 đậm đặc:

Acid H2SO4 khi nhỏ lên các dẫn chất flavon, flavonol thì cho màu vàng đậm.
Đối với chalcon và auron cho màu đỏ, đỏ thắm, đỏ tươi. Flavanon cho màu đỏ
cam rồi đỏ thắm, có thể do chuyển flavanon thành chalcon.

- Phản ứng cyanidin (Phản ứng Shinoda hay Willstater).

Đây là phản ứng khử hay được sử dụng nhất để tìm sự có mặt của các dẫn chất
nhóm flavonoid. Dung dịch flavonoid trong ethanol, thêm bột Mg rồi nhỏ từ từ
HCl đậm đặc. Sau 1 đến 2 phút sẽ có màu đỏ cam, đỏ thẩm hoặc đỏ tươi với các
dẫn chất flavon, flavonol, flavanonol, flavanon. Màu sắc đôi khi có thể bị thay
đổi tùy theo loại, số lượng, vị trí nhóm thế ví dụ các dẫn chất methoxy flavon
(Tangeretin, Nobiletin) thì âm tính. Để phân biệt giữa flavonoid glycosid và
aglycon của chúng, Bryant đem lắc dung dịch có màu với octanol, nếu màu ở
lớp dưới lên hết ở lớp octanol, chất thử là aglycon, nếu lớp octanol không màu,
chất thử là glycosid. Cũng cần lưu ý rằng các dẫn chất xanthon ví
dụ mangiferin (có trong lá xoài) cũng dương tính với thuốc thử cyanidin.

- Tác dụng của chì acetat trung tính hoặc kiềm.

Phản ứng thực hiện trên giấy thấm. Nhiều dẫn chất flavonoid tạo thành muối
hoặc phức có màu khi nhỏ thêm dung dịch chì acetat trung tính hoặc kiềm. Màu
phụ thuộc vào các dẫn chất flavonoid.

→ Nếu tiến hành trong ống nghiệm, chì acetat kièm cho tủa màu với hầu hết các
flavonoid phenol còn chì acetat trung tính tạo tủa với những dẫn chất có nhóm
o.dihydroxyphenol.

- Phản ứng ghép đôi với muối diazoni.

→ Các dẫn chất flavonoid có nhóm OH ở vị trí 7 có thể phản ứng với muối
diazoni để tạo thành chất màu azoic vàng cam đến đỏ.