Informe 1. Fermentacion

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Universidad del Quindío

RESEARCH ARTICLE Open Access

Transformation of plant by-products


into ethanol by saccharomyces
cerevisiae.
1Carlos Felipe Mejía Gómez; 1Rut Venturini Molina; 1María Isabel Martínez Bejarano; 1Sebastián López Luna

Abstract: Conventional ethanol production processes involve a pretreatment step in which the sugar from the raw
material is separated and fed as a substrate to the fermentation. In this research, it is proposed to evaluate and
understand in a simple way the fermentation process in food by-products such as potato peel (Solanum phureja),
mandarin (Citrus nobilis) and banana (Musa paradisiaca) by yeast (saccharomyces cerevisiae), the microorganism
used . The behavior of the yeast peels was qualitatively observed, in addition to using sucrose in some of the
extracts. Sucrose-containing extracts have a stronger odor; characteristic of this process, while the rest had a less
intense odor, since in some cases there was a color change as well as the loss of carbon dioxide over time was
decreasing.
Background: Fermentation is an oxidation process carried out by microorganisms on some organic compounds
[1], transforming complex molecules into simpler ones, where there is a release of energy. Conventional ethanol
production processes involve a pretreatment step in which the sugar from the raw material is separated and fed as
a substrate to the fermenter where it is converted into ethanol [2].
Methods: Four fermentations were carried out using the same fermenting microorganism (saccharomyces
cerevisiae). But, changing the substrate. Which were potato, tangerine and banana peels; The control of the 10%
yeast solution used was also followed.
Results: The results were based on a qualitative basis, where in the fermentation process carried out with potato,
mandarin and banana peels, the production of ethanol could be observed by the smell that each container gave off.
In addition to that, in the fermentation with the potato skins that the sucrose was added, it presented an
inconvenience, since a fungus was formed outside the process, this could be due to the fact that the jar where the
process was carried out was not properly cleaned, Likewise, it is hypothesized that when the bottle is opened to
allow the gas to escape, the container has not been completely closed and, therefore, some component that causes
the production of this fungus was incorporated.
Conclusions: It is possible to take advantage of organic materials to carry out the fermentation processes. In
addition to that, it must also be taken into account that the materials used must be properly sterilized so as not to
have pathogenic organisms during the fermentation process. Therefore, fermentation must contain processes with
high quality standards, for its possible use.
Date of registration: 10-09-2020
Keywords: Fermentation, saccharomyces cerevisiae, saccharose, ethanol.

,
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Antecedentes azúcares simples [5]. Ocurren en cuatro


grupos principales:
Estrictamente hablando, la fermentación es el ● bacterias
proceso de degradación anaeróbica o ● virus
fragmentación de compuestos orgánicos por ● hongos, incluyendo levaduras y
procesos metabólicos de microorganismos. actinomyces
Sin embargo, los procesos de fermentación ● protozoos y algas.
pueden ser considerados, una relación con los Los procesos de producción de etanol
cambios químicos de un sustrato logrados por convencionales implican un paso de
microorganismos seleccionados o extractos pretratamiento en el que el azúcar de la
de microorganismos, para producir un materia prima se separa y se alimenta como
producto útil. Estos procesos sustrato al fermentador donde se convierte en
microbiológicos son llevados a cabo en etanol. Estos procesos se basan en técnicas
condiciones anaeróbicas (en ausencia de tradicionales de elaboración de cerveza y
aire), aeróbicos (respiratorios) y condiciones utilizan cepas de Saccharomyces
enzimáticas (a través de extractos) [3]. cerevisiae porque dan un alto rendimiento de
Históricamente, los microbios de un tipo u etanol, una alta productividad y su capacidad
otro han sido utilizados por el hombre para soportar altas concentraciones de etanol
durante siglos para la preparación de una mantiene bajos los costos de destilación. En
variedad de alimentos y bebidas. Cada el proceso de producción de etanol
producto de fermentaciones probablemente convencional. es decir, las partes que
surgió de lo que era originalmente un contienen almidón). Dado que estas partes
descubrimiento accidental, por ejemplo, uvas representan solo una pequeña porción de la
o jugo de uva fermentado en almacenamiento masa total de la planta, se genera una cantidad
o crecimiento de moho en cuajada (sólidos de significativa de residuos de fibra [2].
leche) [4]. La clasificación de procesos unitarios
proporciona un catálogo rápido de las
El análisis de los muchos procesos de
fermentación industrial muestra que son actividades químicas y las capacidades de los
microorganismos para el bioquímico. Más
reacciones comunes tanto desde un punto de
vista químico como físico. Los procesos de importante aún, ofrece un enfoque lógico
fermentación pueden clasificarse según los para un examen de los mecanismos de
mecanismos de reacción involucrados en la reacción de fermentación [5].
conversión de las materias primas en
productos; estos incluyen reducciones, Métodos
oxidaciones simples y complejas,
conversiones de sustrato, transformaciones, Se realizaron 4 fermentaciones utilizando el
hidroxilaciones, polimerizaciones, mismo microorganismo fermentador
biosíntesis complejas y formación de células (saccharomyces cerevisiae). Pero,
[5]. cambiando el sustrato, los cuales fueron
Los microorganismos son químicamente cáscaras de papa (Solanum phureja)
similares a las células vegetales y animales mandarina (Citrus nobilis) y banano; también
superiores; realizan muchas de las mismas se siguió el control de la solución de levadura
reacciones bioquímicas. Generalmente, los al 10 % utilizada.
microorganismos existen como células Preparación de la solución de levadura
individuales y tienen requerimientos de (saccharomyces cerevisiae) al 10 %:
nutrientes mucho más simples que las formas
Se pesó 10 g de levadura, se adicionaron a un
de vida superiores. Sus requisitos para el
recipiente de vidrio transparente,
crecimiento generalmente se limitan al aire,
posteriormente se vertieron 100 mL de agua
dióxido de carbono y sales inorgánicas o
de grifo, se agitó para homogenizar.
sales inorgánicas suplementadas con
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Fermentación con cáscara de papa: fermentaciones.


se calentó aproximadamente 250 mL de agua
de grifo, posteriormente se adicionaron 5 Resultados
gramos de cáscaras de papa, previamente
lavadas; se dejaron cocinar durante 10 min a Los resultados son basados en forma
fuego medio. Una vez pasado el tiempo se cualitativa.
retiró y se dejó enfriar a temperatura
ambiente. Se tomó una alícuota de 30 mL del
extracto y se vertió a un recipiente de vidrio
transparente, luego se adicionaron 5 mL de la
solución de levadura al 10 %. Este
procedimiento se realizó por duplicado, pero
adicionando 1 gramo de azúcar al recipiente
2.
Fermentación con cáscara de banano:
se calentó aproximadamente 250 mL de agua
de grifo, posteriormente se adicionaron 3
gramos de cáscaras de banano, previamente
lavadas; se dejaron cocinar durante 10 min a
fuego medio. Una vez pasado el tiempo se
retiró y se dejó enfriar a temperatura Figura 1: solución de levadura al 10 %
ambiente. Se tomó una alícuota de 30 mL del inicial.
extracto y se vertió a un recipiente de vidrio
oscuro, luego se adicionaron 5 mL de la En la figura 1, se puede observar la solución
solución de levadura al 10 %. Este de levadura previamente preparada, que tomó
procedimiento se realizó por duplicado, pero una coloración blanco pálido con un olor
al recipiente 2 se le adiciono 1 gramo de característico.
azúcar.
Fermentación con cáscara de mandarina:
se calentó aproximadamente 250 mL de agua
de grifo, posteriormente se adicionaron 4
gramos de cáscaras de mandarina,
previamente lavadas; se dejaron cocinar
durante 10 min a fuego medio. Una vez
pasado el tiempo se retiró y se dejó enfriar a
temperatura ambiente. Se tomó una alícuota
de 30 mL del extracto y se vertió a un
recipiente de vidrio oscuro, luego se
adicionaron 5 mL de la solución de levadura
al 10 %. Este procedimiento se realizó por
duplicado durante 48 horas. Este
Figura 2: solución de levadura después
procedimiento se realizó por duplicado, pero
de 48 horas.
adicionando 1 gramo de azúcar al recipiente
2. En la figura 2, se observa la solución de
levadura después de 48 horas, durante el
Fermentación de la solución de levadura al 10
seguimiento cronológico, cada tres horas se
%:
liberaba la presión del recipiente, donde se
Se realizó el mismo seguimiento cronológico observaba la liberación de bastante gas.
durante 48 horas, al igual que las anteriores Posiblemente gas en forma de dióxido de
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carbono (CO2). También, se puede observar papa sin azúcar.


que la solución cambió su coloración a un En la figura 3b, se observa el recipiente de la
rosa claro con un olor característico un poco fermentación de cáscara de papa sin azúcar,
a etanol. el extracto presentaba una coloración blanca
con turbidez. El primer seguimiento se
realizó a las 12 horas, destapando el frasco
para la expulsión de los gases, se apreció
también un olor desagradable. Al paso de los
días, se disminuyó la cantidad de gas
proveniente del proceso, asimismo, se
intensificó el color y el olor era más tenue que
el extracto que contenía azúcar.

Figura 3a: fermentación de la cáscara de


Figura 4: hongo producido durante la
papa con azúcar.
fermentación de la cáscara de papa con
En la figura 3a, se observa el recipiente de azúcar.
la fermentación de cáscara de papa con
azúcar. El extracto obtenido era de color En la figura 4, se observa el crecimiento de
blanco y presentaba una turbidez. El primer un hongo en el recipiente que contenía la
seguimiento se realizó a las 12 horas, fermentación de cáscara de papa con azúcar,
destapando el frasco para la expulsión de los esto puede deberse a que el frasco no estaba
gases, se apreció también un olor completamente aseado, es decir, contenía una
desagradable. Al paso de los días, se sustancia ajena al proceso de fermentación.
disminuyó la cantidad de gas proveniente También, se cree que al destapar el recipiente
del proceso, asimismo, se intensificó el para expulsar el gas, no haya quedado cerrado
color y el olor. completamente, permitiendo entonces la
entrada de algún componente ajeno al
proceso.

Figura 3b: fermentación de la cáscara de


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Figura 5: fermentación de la cáscara de


banano con azúcar.
En la figura 5, se observa el recipiente de la
fermentación de la cáscara de banano con
azúcar, el extracto obtenido era de una
coloración blanca con turbidez con un olor
característico del banano. Durante el
seguimiento cada tres horas se libera la
presión del recipiente, donde en cada
liberación, era menos el gas producido.
Además, se pudo observar que la coloración
final cambio a un blanco más intenso y con
un olor desagradable con un poco de olor a Figura 7: fermentación de la cáscara de
etanol. mandarina con azúcar.
En la figura 7, se observa el recipiente de la
fermentación de la cáscara de mandarina con
azúcar, el extracto obtenido era de una
coloración amarilla clara con un olor
característico del de este cítrico. Durante el
seguimiento cada tres horas se libera la
presión del recipiente, donde en cada
liberación, era menos el gas producido.
Además, se pudo observar que la coloración
final cambio a un blanco intenso y turbio; con
un olor a etanol fuerte.

Figura 6: fermentación de la cáscara de


banano sin azúcar.

En la figura 6, se observa el recipiente de la


fermentación de la cáscara de banano sin
azúcar, el extracto obtenido era de una
coloración blanca con turbidez con un olor
característico del banano. Durante el
seguimiento cada tres horas se libera la
presión del recipiente, donde en cada Figura 8: fermentación de la cáscara de
liberación, el gas producido era muy poco. mandarina sin azúcar.
Además, se pudo observar que la coloración
final cambio a un blanco más intenso y con En la figura 8, se observa el recipiente de la
un olor muy parecido al inicial, pero se fermentación de la cáscara de mandarina sin
alcanza a distinguir un olor a etanol leve. azúcar, el extracto obtenido era de una
coloración amarilla clara con un olor
característico del de este cítrico. Durante el
seguimiento cada tres horas se libera la
presión del recipiente, donde en cada
liberación, era muy poco el gas producido.
Además, se pudo observar que la coloración
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final cambió a un blanco claro y turbio; con causante de la producción de este hongo.
un olor característico entre el cítrico y
etanol.
Conclusiones
Discusión
Es posible aprovechar los residuos vegetales
Si bien en el seguimiento cronológico que se como las cáscaras de papa, banano y
realizó a las diferentes fermentaciones; la mandarina, para realizar una fermentación.
producción de etanol o liberación de dióxido Sin embargo, este proceso debe ser
de carbono, no fue tan pronunciada, esto se optimizado con el fin de aumentar la
debe a varios aspectos o factores a seguir. eficiencia. Por otra parte, la higiene y
Las cáscaras de residuos vegetales utilizadas desinfección de los materiales es un factor
en este trabajo, se componen principalmente muy importante cuando se quiere realizar una
de celulosa, hemicelulosa y lignina [6][7]. fermentación de alta calidad, ya que los
siendo la celulosa y la hemicelulosa, los microrganismos se encuentran en todas
sustratos que la saccharomyces cerevisiae partes y muchos de ellos puede inferir en los
puede asimilar con más facilidad. Sin resultados.
embargo, estos componentes deben ser
hidrolizados para que la levadura pueda Cuestionario
llevar a cabo más fácilmente el proceso de
fermentación. Otro aspecto, es el porcentaje
de estos componentes que pueda tener la a. ¿Sólo las levaduras se utilizan para el
materia prima como tal y en qué estado se proceso de fermentación?
encuentra la materia prima, es decir, si estaba R/:
en su etapa de madurez o en otra, ya que esto Muchos de los seres vivos poseen la cualidad
influye en la cantidad de sustrato que se de realizar fermentación. Sin embargo, los
pueda liberar en el extracto. más conocidos que realizan fermentaciones
Por otro lado, durante la obtención del son los microorganismos, ya que estos son
extracto, dependiendo de cómo se obtuvo, en seres descomponedores, que adquieren su
este caso, se realizó cocinando por unos 10 energía a partir de sustancias orgánicas o
minutos las cáscaras, este factor puede inorgánicas en ausencia de oxígeno. Por otro
incurrir en la cantidad de sustrato libre en el lado. En las células animales ocurren
extracto, ya que tal vez se debió dejar por más muchas reacciones bioquímicas importantes
tiempo. y ellas también pueden presentar
Ahora, con la fermentación en las diferentes fermentaciones cuando hay ausencia de
materias primas utilizadas, se pudo oxígeno. Como es el caso de los eritrocitos
evidenciar que la mejor fue a la que se le que carecen de mitocondrias son obligados a
adiciono azúcar, esto, debido a que como el hacer fermentación. Otro caso partículas es
azúcar solo se compone de sacarosa, este la fermentación láctica que se da en el tejido
compuesto es más fácil de asimilar por la muscular cuando la demanda de oxígeno no
levadura. es suficiente para el metabolismo aerobio
El hongo producido en la fermentación de [8].
cáscara de papa con azúcar, es ajeno al
proceso, pues su formación pudo deberse a
que el frasco en donde se realizó el proceso Tabla 1: diferentes fermentaciones según su
no estaba debidamente aseado, asimismo, se microorganismo.
plantea la hipótesis que, al abrir el frasco para
permitir el escape del gas, el recipiente no
haya quedado completamente cerrado y, por
ende, se incorporó algún componente
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Fase de enfriamiento y maduración. A


b. ¿Cuáles son los factores que debería medida que se reduce la actividad
tener en cuenta para realizar un proceso microbiana se pierde más calor del sistema
fermentativo? ¿Por qué? del que se genera. El material se enfría,
R/: llegando a la estabilización del mismo o
Los factores físico-químicos que se deben maduración.
tener en cuenta en un proceso fermentativo
son el pH, el oxígeno y la temperatura; d. ¿Todos los subproductos de origen
debido a que cada tipo de microorganismo vegetal podrían emplearse como sustrato
difiere de sus condiciones de desarrollo para para la fermentación? Razone su
su productividad. respuesta.
R/:
c. ¿Podría llevarse a cabo el proceso En la actualidad existen muchos métodos y
fermentativo en presencia de oxígeno? formas de aprovechamiento de los
Explique de manera detallada. subproductos de origen vegetal y la
R/: fermentación es uno de ellos. De esta manera
todo subproducto se puede utilizar como
La fermentación aeróbica consiste en la sustrato para la fermentación. Sin embargo,
asimilación de la materia orgánica por parte aquí juega un papel muy importante y es el
de microorganismos en presencia de oxígeno rendimiento, es decir, que tan eficaz es la
y nutrientes. conversión de sustrato a producto; debido a
que en algunos subproductos quedan poca
cantidad de sustancias orgánicas o fuente de
alimentación que los microorganismos
necesitan para realizar una fermentación de
alta calidad [9].

e. ¿El compostaje se considera una


Este proceso de fermentación aeróbica de la fermentación?
materia orgánica se produce en tres fases R/:
secuenciales desde las primeras El compostaje se considera una fermentación,
descomposiciones microbianas de la materia es un proceso que se da en presencia de
orgánica hasta la estabilización del producto oxígeno, es decir, que realiza una
con la producción de H20 y CO2. fermentación aeróbica, donde sucede una
transformación de materiales
Fase mesófila. Esta fase se caracteriza por
orgánicos contenidos en los residuos por
una reacción de síntesis o de asimilación,
medio de la actividad de los microorganismos
consistente en la asimilación de elementos en un 95% y en la fase final intervienen
nutritivos, de materia orgánica, a los algunos macroorganismos. Por lo tanto, se
microorganismos, utilizando una parte de los puede considerar que el compostaje es una
compuestos orgánicos como fuente de
asociación de varios seres vivos con el fin de
energía y otra para formar nueva masa de brindar un producto necesario para las
microorganismos. plantas, ya que este se utiliza como abono
natural [10]. .
Fase termófila. En esta segunda fase se
producen reacciones de autooxidación de los Agradecimientos
microorganismos cuando comienza a faltar Gracias a los docentes Clara María Mejía
la materia orgánica usada como alimento en Doria y Jorge Mario Londoño Caicedo,
la fase mesófila. En su desarrollo se liberan orientadores de la asignatura de
los nutrientes usados previamente en la microbiología, por compartir su conocimiento
síntesis de nuevas células. y estar pendientes de este trabajo.
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[6] OLSSON L. y Hahn-Hiigerdal B.


Contribuciones de los autores Fermentation of lignocellulosic
hydrolysates for ethanol production.
Disponibilidad de datos y materiales Enzyme and Microbial Technology
Los materiales utilizados fueron de propiedad 18:312-331, 1996
de los autores. Que la mayoría de personas
poseen en sus hogares. [6] Choi IS, Kim J, Wi SG, Kim KH, Bae
H. Bioethanol production from mandarin
(Citrus unshiu) peel was-te using
Consentimiento para la publicación popping pretreatment. Aplied energy.
No aplica. 2013; 102, 204-10
Conflicto de interés
Los autores declaran que no tienen intereses en [7] Tortora, Gerard J.; Funke, Berdell R.;
competencia. Case, Christine L. (30 de junio de 2007).
Introducción a la microbiología. Ed.
Recibido: 10 de septiembre; 2020 Médica Panamericana. ISBN 978-950-06-
0740-7. Consultado el 26 de agosto de
Referencias 2020.

[1] Hernández A, Alfaro I, Arrieta R. Las


fermentaciones. En: Alicia Hernández. [8] Proyecto Biosfera. (n.d.). Retrieved
Microbiología industrial. UNED; 2003. p. August 26, 2020, from
37-39. http://recursostic.educacion.es/ciencias/bi
osfera/web/alumno/2bachillerato/biotec/c
[2] ontenidos8.htm
MNeves, T. Kimura, N. Shimizu, M. Nak
ajimaEstado del arte y tendencias futuras
de la producción de bioetanol, bioquímica [9] Fermentación en estado sólido: una
dinámica Proceso Dyn Biochem Biotech alternativa biotecnológica para el
Mol Biol , 1 ( 1 ) ( 2007 ) , pp. 1 – 14 aprovechamiento de desechos
agroindustriales. Revista tecno científica
[3] Fermentation Advances, D. Perlman, URU – Universidad Rafael Urdaneta,
editor, Academic Press, New York, 1969 Facultad de Ingeniería. José R. Ferrer,
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[4] Annual Reports on Fermentation 2014.
Processes, D. Perlman, editor, Academic
Press, New York. Volume 1 issued in [10] El Compostaje de los Residuos. (n.d.).
1977, of a continuing series. Retrieved August 26, 2020, from
https://www.ceupe.com/blog/compostaje-
[5] Atkinson, B. y Mavituna, F., Manual de residuos.html
ingeniería bioquímica y biotecnología,
The Nature Press, Nueva York, 1983.

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