Quy trình xác định LD50, LC50

Chất thử nghiệm được sử dụng với liều lượng chia thành nhiều mức độ cho một số
nhóm động vật thí nghiệm
Hai loài động vật thử nghiệm được lựa chọn - một loài gặm nhấm và một loài không
gặm nhấm vì các loài khác nhau có phản ứng khác nhau đới với các tác nhân độc hại.
Sử dụng ít nhất 5 loài ở mỗi mức liều. Tất cả chúng đều cùng giới và được nhốt riêng
lẻ.
Các chất độc được sử dụng trong các thử nghiệm độc tính phải tinh khiết như khi
được sử dụng cho con người, tan trong dung môi thích hợp nếu cần thiết.
Động vật phải nhịn đói tối thiểu 5h trước khi thử nghiệm để có sự tương tác và chuyển
hóa giữa thức ăn và thuốc. Thời gian theo dõi thử nghiệm: Ít nhất 24h sau khi dùng
thuốc.
Thực hiện với ít nhất 3-4 mức liều lượng với nồng độ thích hợp để quan sát được tác
động của chất độc đối với các nhóm động vật thử nghiệm. Nồng độ liều dùng phụ
thuộc vào kích thước của nhóm động vật thử nghiệm. Đối với loài gặm nhấm, không
được vượt quá 1ml /100g, tối đa là 50ml /kg trọng lượng cơ thể.
Theo dõi tình trạng của các nhóm động vật trong thời gian thí nghiệm, ghi lại số lượng
con sống và chết của mỗi nhóm kể từ khi sử dụng thuốc.
Giá trị LD50 phụ thuộc vào liều lượng sử dụng. Thông thường giá trị này sẽ tăng theo
trình tự sau: tĩnh mạch – bụng - da - miệng. Dữ liệu thu được phải đủ để tạo ra đường
cong đáp ứng LD50.
Có nhiều phương pháp để xác định LD50, LC50 như: phương pháp Karber, Reed –
Muench, Miller-Tainer, Lord, phương pháp liều cố định,…Dưới đây trình bày cách
xác định LD50 theo phương pháp Karber:
- Nồng độ mỗi liều phải tăng dần theo tỷ lệ.
- Đáp ứng phải thỏa mãn hàm phân phối Gauss một cách gần đúng.
- Giá trị LD50 được xác định theo công thức:

LD 50=Df −
∑ ab
n
- Trong đó:
+ Df: Liều tối thiểu làm chết tất cả thú vật.(mg chất độc/kg trọng lượng)
+ a: Chỉ số trung bình của số thú vật chết ở 2 liều kế tiếp.
+ b: Hiệu số liều giữa 2 liều kế tiếp.
Tài liệu tham khảo:
Journal Chemical and Pharmaceutical research https://www.jocpr.com/