Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) 2017; 2 (2): 1 – 10

ISSN : 2442-8744 (electronic)

http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/Galenika/index
DOI : 10.22487/j24428744.

UJI ANTIBAKTERI FRAKSI TERPENOID DAN STEROID EKSTRAK LARUT N-

HEKSAN DARI KARANG LUNAK Sarcophyton Sp ASAL KEPULAUAN TOGEAN

ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF TERPENOID AND STEROID FRACTIONS OF N-

HEXANE SOLUBLE EXTRACT OF SOFT CORAL Sarcophyton Sp FROM TOGEAN
ISLANDS

Zulfikar Ikram Thalib1, M. Sulaiman Zubair2 dan Arsa Wahyu Nugrahani1*

1
Jurusan Farmasi,Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia, 90245
Article Info:
ABSTRACT
Received:
in revised form:
Accepted: Sarcophyton sp. is one of the soft corals which produce secondary
Available Online:
metabolites including steroids and terpenoids. This study aims to
Keywords: identify the presence of steroid and terpenoid compounds in the
Write fraction of N-hexane soluble extract from Sarcophyton sp., and to
English
Result identify the inhibitory activity of the fractions on Escherichia coli and
Mention Staphylococcus aureus bacteria. Identification of compound in the
Times New Roman
soft coral was conducted by TLC method using Lieberman-Burchard
Corresponding Author: spraying reagent. The results indicated a pink color denoting the
Zulfikar Ikram Thalib presence of terpenoids, namely in fraction 2, fraction 3, fraction 4,
Jurusan Farmasi, FMIPA,
Universitas Tadulako fraction 5, and fraction 6; and a greenish-blue color denoting the
Palu, 94118, Palu, presence of steroids, namely in fraction 1 and fraction 2. The
Indonesia antibacterial testing was conducted by agar diffusion method using
Mobile :
Email: ikramzulfikar@yahoo.com paper disk with a sample concentration of 0.25%. Strong-categorized
fraction on Staphylococcus aureus bacteria was only fraction 2 (10.39
mm); meanwhile medium-categorized fractions on Escherichia Coli
bacteria were fraction 1 (9.12 mm), fraction 2 (9.16 mm), fraction 3
(8.14 mm), fraction 4 (8.25 mm), fraction 5 (9.13 mm), and fraction 6
(9.12 mm).
Keywords: Fraction, steroid, terpenoid, Sarcophyton sp., antibacterial

Copyright © 2019 JFG-UNTAD

This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.

How to cite (APA 6th Style):

Ayu Dinawati Putri., et al. (2019). Uji Anibakteri Fraksi Terpenoid dan Steroid Ekstrak Larut N-Heksan Dari Karang Lunak
Sarcophyton sp. Asal Kepulauan Togean. Jurnal Farmasi Galenika : Galenika Journal of Pharmacy, 3 (1), 1-9.
doi:10.22487/j24428744.2017.v3.i1.8133

1
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

ABSTRAK

Sarcophyton sp. merupakan salah satu karang lunak yang menghasilkan metabolit sekunder diantaranya steroid
dan terpenoid. Penelitian ini bertujuan mengidentifikasi adanya senyawa steroid dan terpenoid pada fraksi ekstrak
larut N-heksan dari karang lunak Sarcophyton sp. dan mengetahui besarnya daya hambat fraksi terhadap bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Identifikasi senyawa pada karang lunak dilakukan dengan metode
KLT dengan menyemprotkan pereaksi Lieberman-Burchard. Hasil yang diperoleh terdapat warna merah muda
yang menandakan adanya terpenoid yaitu fraksi 2, fraksi 3, fraksi 4, fraksi 5, dan fraksi 6. Dan warna biru
kehijauan yang menandakan adanya steroid yaitu fraksi 1, dan fraksi 2. Pengujian antibakteri dilakukan dengan
metode difusi agar menggunakan paper disk dengan konsentrasi sampel 0,25%. Fraksi yang berkategori kuat
hanya pada bakteri Staphylococcus aureus yaitu fraksi 2 (10,39 mm). Sedangkan pada bakteri Escherichia Coli
yaitu fraksi 1 (9,12 mm), fraksi 2 (9,16 mm), fraksi 3 (8,14 mm), fraksi 4 (8,25 mm), fraksi 5 (9,13 mm), fraksi 6
(9,12 mm) dapat di kategorikan sedang.
Kata Kunci : fraksi, steroid, terpenoid, Sarcophyton sp., antibakteri.

PENDAHULUAN dunia dan merupakan salah satu sumber

Latar Belakang karang yang ada didunia saat ini

(Suharsono, 2008).
Indonesia adalah negara kepulauan terbesar
di dunia dimana dua pertiganya merupakan Teluk Tomini adalah teluk terbesar di

wilayah kelautan sehingga indonesia Indonesia dengan luas kurang lebih 6 juta

memiliki sumber daya hayati laut yang luas. hektar dengan potensi sumber daya alam

Bahan hayati laut di Indonesia yang sangat yang melimpah. Dimana aset sumber daya

melimpah dapat memberikan kontribusi pesisir dan laut teluk tomini berupa terumbu

dalam kebutuhan pangan maupun karang dan merupakan bagian dari segitiga

kesehatan. Salah satu bahan hayati yang terumbu karang dunia. Teluk ini meliputi

melimpah di Indonesia adalah terumbu Provinsi Sulawesi Tengah, Gorontalo, dan

karang yang tersebar mulai dari sabang Sulawesi Utara. Selain itu, terdapat sekitar

sampai Jayapura termasuk daerah sekitar 90 pulau di Teluk Tomini, salah satunya

Sulawesi, Maluku, Sorong, NTB dan NTT adalah kepulauan Togean yang terdapat di

merupakan daerah yang sangat baik untuk Sulawesi Tengah (Tirtawinata, 2013).

pertumbuhan karang. Laut di sekitar Kelompok karang yang dapat memproduksi

Sulawesi, termasuk Teluk Tomini diyakini senyawa bioaktif adalah karang lunak yang

sebagai pusat keanekaragaman karang di mempunyai kemampuan sebagai

2
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

antibakteria, antikanker, antibakteri, Menentukan aktivitas antibakteri fraksi

antifouling dan lain-lain (Mayer, 2010). senyawa terpenoid dan steroid dari ekstrak
Senyawa atau substansi kimia tersebut N-heksan karang lunak Sarcophyton sp
merupakan hasil metabolit sekunder terhadap bakteri uji Escherichia coli dan
organisme hidup yang sering dikenal Staphylococcus aureus.
dengan natural product yang umumnya Manfaat Penelitian
berupa terpenoid (Murniasih, 2005). 1. Penelitian ini diharapkan dapat
memberikan informasi bahwa ekstrak N-
Beberapa senyawa bioaktif yang dihasilkan
heksan Sarcophyton sp memiliki potensi
oleh karang lunak antara lain berupa
sebagai antibakteri.
senyawa terpen, steroids, dan steroidal
2. Penelitian ini diharapkan menambah
glycoides Radhika (2006). Hasil penelitian
informasi ilmiah dan pengetahuan
yang dilakukan Badria et al. (1998) dan
terutama dalam bidang eksporasi dan
Sawant et al. (2006) menunjukkan bahwa
penemuan senyawa bioaktif dari bahan
senyawa kimia aktif yang terdapat pada
alam khususnya bahan alam yang berasal
karang lunak Sarcophyton sp Menunjukkan
dari laut serta dapat menjadi referensi
aktivitas sebagai antibakteri, antifungi,
bagi peneliti selanjutnya dalam membuat
antitumor, neorotoksik, dan anti-inflamatori
sediaan bahan alam.
yang bermanfaat bagi industri farmasi.
Batasan Penelitian
Berdasarkan hal-hal tersebut, peneliti
Peneliti melakukan penelitian sebatas
tertarik untuk melakukan uji antibakteri dari
ekstraksi simplisia karang lunak
fraksi terpenoid dan steroid dari ekstrak N-
menggunakan pelarut metanol. Selanjutnya
heksan (ekstrak non polar) karang lunak
dilakukan uji fitokimia yaitu uji steroid dan
Sarcophyton sp terhadap Staphylococcus
terpenoid. Selanjutnya dilakukan partisi,
aureus dan Escherichia coli.
lalu fraksinasi dan uji aktivitas antibakteri
Rumusan Masalah
dengan metode paper disk.
Apakah fraksi terpenoid dan steroid dari
METODE PENELITIAN
ekstrak N-heksan karang lunak
Ekstraksi Sampel
Sarcophyton sp mempunyai aktivitas
Ekstraksi karang diekstraksi menggunakan
antibakteri terhadap bakteri uji Escherichia
metode maserasi menggunakan pelarut
coli dan Staphylococcuc aureus ?
metanol, Setiap 1x24 jam dilakukan
Tujuan Penelitian
pengadukan sebanyak 3 kali. Setelah 3 hari,

3
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9
maserat disaring dan ditampung dalam
wadah. Residu awal dilakukan remaserasi
kembali sebanyak 2 kali dengan pelarut
yang sama dan baru. Ekstrak cair hasil
maserasi tersebut dengan perlakuan yang
sama digabungkan dan dipekatkan
menggunakan rotary evaporator pada suhu
540C.
Partisi Padat Cair
Ekstrak karang lunak Sarcophyton sp
sebanyak 20 gram dimasukkan kedalam
erlenmeyer yang telah berisi magnetik
stirer, kemudian dimasukkan pelarut n-
heksan sebanyak 30 ml, kemudian distirer
selama 15 menit, setelah itu dipisahkan
ekstrak ekstrak yang larut dengan n-heksan
dan yang tidak larut dengan n-heksan.
Kemudian ekstrak yang tidak larut n-heksan
diulangi perlakuannya seperti diatas sampai
pelarut n-heksan tidak berwarna lagi.
Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom
Vakum Cair (KVC)
Pemisahan Komponen Kimia
Sebanyak 2,78 gram ekstrak n-heksan
karaang lunak dikeringkan dengan silika gel
60 GF254 (Merck) dan diaduk sampai
menjadi serbuk kering, kemudian bagian
bawah sinterglass dimasukkan
saring, kemudian diisi dengan serbuk fase
diam silika gel 60 GF254 (Merck) sampai
mencapai ketinggian ± ½ dari tinggi
sinterglass, serbuk sampel ditaburkan di
atasnya dan permukaan serbuk ditutup lagi
dengan kertas saring. Pada ekstrak n-heksan
fraksinasi dilakukan dengan fase gerak dari
pelarut yang kurang polar sampai pelarut
yang lebih polar yaitu menggunakan eluen
n-heksan 100%, n-heksan : etil asetat ( 9:1,
8:2, 7:3, 6:4, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9 ), etil asetat
100%, etil asetat : methanol (9:1), dengan
volume eluen masing - masing 25 ml.
Kemudian ditotolkan pada lempeng KLT.
Kemudian dielusi dengan menggunakan
eluen yaitu : eluen heksan 100% dengan
totolan vial nomor 1-11, dengan eluen
heksan : etil asetat (9:1) dengan totolan vial
nomor 12-35, dengan eluen heksan : etil
asetat (7:3) dengan totolan vial nomor 18-
41, dengan eluen heksan : etil asetat (7:3)
dengan totolan vial nomor 42-63.
Identifikasi Terpenoid dan Steroid
Fraksi ekstrak larut N-heksan karang lunak
Sarcophyton sp ditotolkan pada plat KLT
dan dielusi dengan menggunakan eluen
heksan : etil asetat (7:3). Bercak yang
terelusi disemprot dengan pereaksi
Liebermann-Burchard. Uji positif steroid
ditandai dengan warna bercak biru
kehijauan. Uji terpenoid ditandai dengan
kertas warna bercak merah muda.
Uji Aktivitas Antibakteri
Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat–alat yang terbuat dari kaca disterilkan
dengan menggunakan oven pada suhu
4
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

1800C selama 2 jam. Alat – alat logam Setelah itu diamati kekeruhannya dan
disterilkan dengan cara dipijarkan dibandingkan dengan standar 0,5 Mc
menggunakan bunsen, sedangkan untuk Farland 1.
medium disterilkan dalam autoklaf pada Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode
suhu 1210C tekanan 2 atm selama 15 paperdisk
menit. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan
Pembuatan Medium didalam LAF (Laminar air flow) dengan
Perbandingan Jumlah Jumlah Nomor vial
Pembuatan medium Nutrient Agar (NA) Nomor eluen pelarut vial

dibuat dengan ditimbang sebanyak 1,12 I n-heksan 100% 25 ml 4 4 vial 1–4

kali
gram NA, kemudian dimasukkan dalam II n-heksan : etil 25 ml 4 6 vial 5 – 10
asetat (9:1) kali
erlemeyer lalu ditambahkan aquadest 40
III n-heksan : etil 25 ml 4 7 vial 11 – 17

ml dan tutup dengan kapas yang dililit asetat (8:2) kali

IV n-heksan : etil 25 ml 8 11 vial 18 – 28
dengan kasa dan aluminium foil. asetat (7:3) kali
V n-heksan : etil 25 ml 4 7 vial 29 – 35
Selanjutnya medium disterilkan dalam asetat (6:4) kali

autoklaf pada suhu 1210C tekanan 2 atm VI n-heksan : etil 25 ml 4 7 vial 36 – 42

asetat (4:6) kali
selama 15 menit. VII n-heksan : etil 25 ml 2 7 vial 43 – 49
asetat (3:7) kali
Peremajaan Bakteri VIII n-heksan : etil 25 ml 2 3 vial 50 – 52
asetat (2:8) kali
Bakteri diremajakan pada media agar
IX n-heksan : etil 25 ml 2 3 vial 53 – 55
miring didalam tabung reaksi dengan cara asetat (1:9) kali
X Etil asetat 100% 25 ml 2 4 vial 56 – 59
masing-masing bakteri uji kali
XI Etil astat : 25 ml 2 4 vial 60 – 63
(Staphylococcus aureus dan Escherichia metanol (9:1) kali

coli) diambil 1 ose digoreskan pada metode difusi agar dengan menggunakan
media agar miring secara zig – zag. proses cara paper disk. Pertama dibuat larutan stok
tersebut dikerjakan secara aseptik pada dengan konsentrasi 0,25% dengan
LAF (Laminar Air Flow). Kemudian melarutkan 2,5 mg fraksi kemudian
selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 0C dilarutkan dalam 1 ml pelarut DMSO.
selama 1x24 jam. Kemudian dibuat kontrol positif
Pembuatan Suspensi Bakteri Uji kloramfenikol 1% dengan cara ditimbang
Diambil sebanyak 1 ose bakteri uji yang 0,01 gram lalu dilautkan dalam 10 ml
telah di remajakan secara aseptik, kemudian DMSO. Kemudian kontrol negatif
dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang menggunakan pelarut DMSO. Medium NA
berisi 5 ml NaCl 0,9% kemudian di vortex.

5
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

steril sebanyak 20 ml dituangkan kedalam

cawan petri, dan dibiarkan memadat.
Selanjutnya digoresi medium dengan
suspensi bakteri uji secara merata dan hati- Gambar. 4.1. Hasil KLT dari vial nomor 1-11 yang di elusi
dengan eluen heksan 100%
hati. Selanjutnya diletakkan paper disk
diatas medium yang telah digores suspensi
bakteri uji, kemudian masukkan kontrol
negatif dan kontrol positif dan fraksi masin-
fraksi 2
masing Sebanyak 5 µl kedalam paper disk.
Kemudian diinkubasi selama 24 jam pada
suhu 370C. Kemudian diamati zona bening Gambar. 4.2. Hasil KLT dari vial nomor 12-35 yang di elusi
dengan eluen heksan : etil asetat (9:1)
yang terbentuk disekitar daerah paper disk
lalu diukur zona bening menggunakan
jangka sorong.
HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil partisi ekstrak karang lunak
Genus Sarcophyton
Tabel. 4.1. Hasil dari partisi ekstrak
fraksi 3 fraksi 4 fraksi 5
karang lunak genus Sarcophyton sp di Gambar. 4.3. Hasil KLT dari vial nomor 18-41 yang di elusi
dapat berat larut n-heksan seberat 2,78 dengan eluen heksan : etil asetat (7:3)

gram

Berat ekstrak
Karang Lunak
Genus
Berat ekstrak larut heksan (g)
Sarcophyton sp 2,78

2. Hasil fraksinasi ekstrak larut N-

Heksan karang lunak Sarcophyton sp
Tabel. 4.2. Hasil fraksinasi dengan fraksi 5 fraksi 6
metode kromatografi cair vakum Gambar. 4.4. Hasil KLT dari vial nomor 42-63 yang di elusi
dengan eluen heksan : etil assetat (7:3)

Tabel. 4.3. Hasil dari penyemprotan pereaksi H2SO4 yang

menggunakan plat silika GF254 yang memiliki profil yang sama
fraksi 1
kemudian disatukan, didapat 6 fraksi. Hasil dari penyatuan fraksi

6
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

Escherichia Staphylococcu
Bobot fraksi s aureus
Fraksi % rendamen coli
(mg) FI 9,12±0,02 9,46±0,56

FI 519,6 18,69 F II 9,16±0,05 10,39±0,02

F II 603,4 21,70 F III 8,14±0,03 8,79±0,57
F III 64,4 2,31
F IV 85,8 3,08 F IV 8,25±0,14 8,78±0,56
FV 36,4 1,30
F VI 32 1,15 FV 9,13±0,01 9,12±0,02
Persen recovery 1.341,6 48,23%
F VI 9,12±0,03 8,78±0,57
K+ 24,10±1,00 23,67±0,67
Ke enam fraksi diidentifikasi menggunakan
K- - -
plat silika GF254 kemudian dilihat
penampakan noda dibawah lampu UV 366

diameter zona hambat (mm)

12
dan 254, kemudian disemprotkan dengan 10
8
pereaksi Lieberman-burchard. 6
4
2
0
Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi
Steroid 1 2 3 4 5 6

Terpenoid

Gambar 4.5. Hasil penampakan fraksi dan penyemprotan pereaksi

Lieberman-burchard pada plat silika GF254 dengan eluen n-
heksan:etil asetat (7:3)
Grafik. 4.1. hasil pengujian antibakteri fraksi terpenoid dan steroid
3. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri ekstrak larut N-heksan dari karang lunak Sarcophyton sp
konsentrasi 0,25 % terhadap bakteri uji Escherichia coli
Ekstrak Heksan Karang Lunak
Genus Sarcophyton Terhadap Bakteri
diameter zona hambat (mm)

12
Escherichia coli dengan konsentrasi 10
8
0,25%
6
4
2
0
Tabel. 4.4. Hasil pengujian antibakteri ekstrak heksan karang lunak Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi Fraksi
1 2 3 4 5 6
Sarcophyton

Diameter zona hambat (mm) ±

fraksi
SD

7
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

Grafik. 4.2. hasil pengujian antibakteri fraksi terpenoid dan steroid bioaktif yang terdapat pada karang lunak
ekstrak larut N-heksan dari karang lunak Sarcophyton sp
konsentrasi 0,25 % terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus Sarcophyton sp. lebih mudah larut dalam
metanol.
Tahap ekstraksi dilakukan dengan
merendam simplisia karang lunak dalam
Pembahasan
pelarut metanol hingga seluruh simplisia
Tujuan penelitian ini untuk mengetahui
karang lunak terendam kemudian
adanya senyawa terpenoid dan steroid
dimaserasi selama 3 x 24 jam. Selama
ekstrak larut N-heksan dari karang lunak
proses perendaman dilakukan pengadukan
Sarcophyton sp. yang berpotensi sebagai
sebanyak tiga kali setiap 24 jam guna
antibakteri terhadap bakteri Escherichia
menghomogenkan dan mempercepat kontak
coli dan Staphylococcus aureus. Bahan
antara pelarut dan sampel.
utama yang digunakan dalam penelitian ini
Tahap selanjutnya yaitu tahap pemisahan
adalah karang lunak Sarcophyton sp. yang
yang terdiri penyaringan dan evaporasi.
diperoleh dari pulau togean yng termasuk
Tahap penyaringan yaitu memisahkan
dalam kawasan teluk tomini sulawesi
sampel karang lunak dari pelarutyang telah
tengah, dan telah diidentifikasi di UPT.
mengandung senyawa aktif. Untuk
Sumber Daya Hayati Sulawesi
memisahkan pelarut dari senyawa bioaktif
(HERBARIUM CELEBENSE).
yang terikat, maka dilakukan tahap
Sampel yang sudah kering kemudian di
evaporasi dengan suhu 370C. Penggunaan
ekstraksi menggunakan metode maserasi,
suhu evaporator yang tidak terlalu tinggi
keuntungan menggunakan metode maserasi
(30-40)0C bertujuan untuk mencegah
adalah tidak dipanaskan, sehingga bahan
terjadinya kerusakan senyawa bioaktif.
alam tidak menjadi terurai. Pelarut ekstraksi
Kemudian dilakukan pemisahan senyawa
dengan metode maserasi menggunakan
yang didasarkan pada tingkat kepolaran
metanol, karena metanol adalah pelarut
dengan cara partisi padat cair menggunakan
berbobot molekul rendah yang dapat
pelarut heksan, etil asetat, dan air. Proses
membentuk ikatan hidrogen sehingga dapat
partisi ini dilakukan secara berulang-ulang
larut dan bercampur dengan air hingga
dengan menggunakan pelarut yang sama
kelarutan yang tak terhingga (Romansyah,
hingga pelaut tersebut terpisah dengan
2011). Ikatan hidrogen lebih mudah
ekstrak, kemudian hasilnya di tampung dan
terbentuk pada pelarut metanol sehingga zat
di uapkan, untuk hasil dari ekstak air

8
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9
dilakukan proses freece drrying untuk
mengeringkan hasil dari ekstrak air yang
tidak bisa menguap pada suhu kamar 25 –
30 0C.
Setelah dipartisi selanjutnya Dilakukan
proses fraksinasi dengan metode
kromatografi vakum cair (KVC). tahap ini
digunakan ekstrak n-heksan hasil dai partisi,
prosses pegelusian menggunakan eluen dari
pelarut non polar ke pelarut polar yaitu n-
heksan 100%, n-heksan : etil asetat (9:1, 8:2,
7:3, 6:4, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9), etil asetat 100%,
etil asetat : methanol (9:1), yang dapat dilihat
pada tabel 4.1. Menurut Harbone (1987).
pemilihan eluen dimulai dari pelarut organik
yang tidak polar seperti heksan dan
peningkatan kepolaran dengan etil asetat atau
pelarut yang lebih polar lainnya. Kemudian
hasil
yang didapat ditampung divial dan
diuapkan, diperoleh 63 vial yang kemudian
ditotolkan pada plat KLT.
Penotolan pertama fraksi vial nomor 1-11
yang di elusi dengan eluen heksan 100%
(Gambar. 4.1), penotolan kedua fraksi vial
nomor 12-35 yang di elusi dengan eluen
heksan : etil asetat (9:1) (Gambar. 4.2),
penotolan ketiga fraksi vial nomor 18-41
yang di elusi dengan eluen heksan : etil
asetat (7:3) (Gambar. 4.3), penotolan
keempat fraksi vial nomor 42-63 yang di
elusi dengan eluen heksan : etil assetat (7:3)
9
(Gambar. 4.4). Setelah di elusi kemudian
diamati dibawah lampu UV 254 nm dan
366 nm, kemudian dilakukan penyemprotan
menggunakan pereaksi H2SO4 10%.
Digunakan pereaksi tersebut untuk
menyatukan fraksi yang memiliki profil
noda yang sama yang ditandai dengan spot
noda warna ungu muda, dan warna biru
pada plat lempeng KLT. Didapat 6 fraksi
yang memiliki persen recovery 48,23 %,
didapatkan hasil yang sedikit dikarenakan
pada pengerjaan penyatuan fraksi banyak
yang terbuang.
Kemudian ke 6 fraksi yang sudah disatukan
berdasarkan spot noda yang sama kemudian
dilakukan penotolan pada lempeng plat
KLT untuk mengetahui adanya senyawa
terpenoid dan steroid, yang di elusi dengan
eluen heksan : etil (7:3), kemudian diamati
dibawah lampu UV 254 nm dan 366 nm
serta disemprotkan dengan pereaksi
Lieberman-Burharrd. Dapat dillihat pada
(Gambar 4.5). Adanya senyawa steroid
ditandai dengan warna bercak biru
kehijauan. Adanya terpenoid ditunjukkan
oleh terbentuknya bercak berwarna merah
muda. Hasil pengamatan terlihat
penampakan warna biru kehijauan pada
fraksi 1 dan fraksi 2 yang bertanda adanya
senyawa steroid. Dan penampakan warna
merah muda pada fraksi 2, fraksi 3, fraksi 4,
fraksi 5, dan fraksi 6.
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9
Selanjutnya ke 6 fraksi tersebut kemudian
dilakukan pengujian antibakteri
bertujuan untuk melihat besarnya daya
hambat dari ke 6 fraksi terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli, dengan menggunakan metode paper
disk. Pengujian ini menggunakan satu
konsentrasi yaitu 0,25%, hal
dikarenakan hasil fraksi yang diperoleh
sedikit.
Pengujian pertama masing-masing fraksi
diencerkan dengan menggunakan pelarut
dimetilsulfoksida. Menurut Handayani dkk
(2009) DMSO merupakan salah satu pelarut
yang dapat melarutkan hampir semua
senyawa baik polar dan non polar. Bakteri
uji bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli dibuat dalam bentuk
suspensi bakteri yang tingkat kekeruhannya
disesuaikan dengan standar 0,5 Mc. Farland
1 untuk mengontrol jumlah koloni bakteri
uji melalui penyetaraan kekeruhan suspensi
bakteri uji jadi 1,5 x 108 CFU/ml. Dan
digunakan kontrol positif menggunakan
kloramfenikol untuk melihat
pengerjaan uji antibakteri baik atau tidak,
dan untuk melihat kebenaran zona hambat
yang terihat.
Suspensi bakteri yang sudah
kemudian digoreskan pada medium NA
yang telah memadat didalam cawan petri.
Kemudian masukkan paperdisk kedalam
medium NA yang telah digoresi bakteri uji
yang Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli. Selajutnya paper disk ditetesi dengan
fraksi yang telah diencerkan sebanyak 5 µl
untuk masing-masing paper disk yang
bertujuan memberikan kesetaraan volume.
Kemudian masing-masing cawan petri di
ini inkubasi pada suhu 370C selama 24 jam
yang merupakan suhu dan waktu optimum
bagi pertumbuhan bakteri Staphylococcus
aureus dan Escherichia coli (Djide, 2008).
Berdasarkan (Garfik. 4.1) hasil pengujian
aktivitas antibakteri fraksi terpenoid dan
steroid ekstrak n-heksan karang lunak
Sarcophyton sp pada bakteri Eschericia
coli didapat hasil zona hambat fraksi 1 yaitu
9,12 mm, fraksi 2 yaitu 9,16 mm, fraksi 3
yaitu 8,14 mm, fraksi 4 yaitu 8,25 mm,
fraksi 5 yaitu 9,13 mm, dan fraksi 6 yaitu
9,12 mm yang berarti zona hambatnya
berkategori sedang. Dari hasil identifikasi
menggunakan plat KLT pada fraksi 1 dan
fraksi 2 terdapat bercak noda biru kehijauan
yang bertanda adanya steroid, dan pada
apakah fraksi 2, fraksi 3, fraksi 4, fraksi 5, fraksi 6
terdapat bercak noda merah muda yang
menandakan bahwa adanya terpenoid, dapat
dilihat pada (Gambar 4.5). Namun pada
dibuat pengujian aktifitas antibakteri pada bakteri
uji Eschericia coli zona hambat berkategori
sedang.
10
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9
Pada pengujian terhadap bakteri
Staphylococcus aureus (Grafik. 4.2) fraksi
yang berpotensi terhadap aktivitas
antibakteri yaitu fraksi 2 dibandingkan
dengan fraksi 1, fraksi 3, fraksi 4, fraksi 5,
dan fraksi 6. Dari hasil pengujian diperoleh
fraksi 2 yaitu 10,39 mm. dilihat dari hasil
identifikasi menggunakan plat KLT pada
fraksi 2 terdapat bercak noda berwarna biru
kehijauan yang menandakan steroid dan
bercak noda merah muda yang menandakan
terpenoid. Steroid dan terpenoid memiliki
sifat sebagai antibakteri karena terdapat
gugus fungsi dengan karakteristik -CH3
yang mampu menghambat pertumbuhan
bakteri (sukadana, 2008).
Dari hasil pengamatan menunjukkan bahwa
pada fraksi 2 lebih berpotensi terhadap
bakteri Staphylococcus aureus. Zona
hambat fraksi 2 menunjukkan nilai dalam
kategori kuat. Menurut Davis dan Stout
(1971) daerah hambat sekitar 10-19 mm
termasuk dalam kategori kuat. Dilihat dari
zona hambat yang terbentuk, fraksi 2 lebih
aktif menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dibanding bakteri
Escherichia coli. Hal ini disebabkan karena
perbedaan struktur dinding sel bakteri,
karena struktur dinding sel bakteri
Staphylococcus aureus (bakteri gram
positif) relatif lebih sederhana sehingga
memudahkan senyawa antibakteri untuk
11
masuk ke dalam sel dan menemukan
sasaran untuk bekerja. Pada bakteri Gram
positif sebagian besar dinding selnya terdiri
dari lapisan peptidolikan dan asam terikat
sehingga mudah dilewati komponen ekstrak
(Rabekka,2016). Pada bakteri Eschericia
coli merupakan bakteri gram negatif yang
mempunyai sifat kurang rentang terhadap
antibiotik dan struktur dinding sel yang
lebih kompleks dan berlapis tiga, yaitu
lapisan luar berupa lipoprotein, lapisan
tengah berupa lipolisakarida dan lapisan
berupa peptidoglikan (Pelczar dan Chan,
1986).
Pada fraksi 2 setelah di identifikasi dengan
pereaksi Lieberman-Burchard pada plat
KLT terdapat bercak noda warna hijau
kebiruan dan merah muda. Positif terpenoid
yaitu memberikan warna merah muda dan
warna ungu muda (Gunawan, 2008).
Steroid ditandai warna biru kehijauan
setelah disemprot pereaksi Lieberman-
Burchard (Khasanah dkk,2012).
PENUTUP
1. Kesimplan
Fraksi terpenoid dan steroid larut N-heksan
dari karang lunak Sarcophyton sp
mempunyai aktifitas antibakteri yang kuat
dengan zona hambat yang besar terhadap
bakteri Staphylococcus aureus pada fraksi 2
yaitu 10,39 mm. sedangkan pada bakteri
Eschericia coli pada fraksi 1 yaitu 9,46;
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9
fraksi 3 yaitu 8,79; fraksi 4 yaitu 8,78;
fraksi 5 yaitu 9,12; dan fraksi 6 yaitu 8,78.
2. Saran
perlu dilakukan penelitian lebih lanjut
mengenai isolasi terhadap fraksi ekstrak N-
heksan dari karang lunak Sarcophyton sp
yang mengandung senyawa terpenoid dan
steroid yang berpotensi sebagai antibakteri.
DAFTAR PUSTAKA
Badria FA, Guirguis AN, Perovic S, Steffen
R, Muller WEG, Schroder HC. (1998).
Sarcophytolide: a new neuroprotective
compound from soft coral Sarcophyton
glaucum. Toxicology 131(3):133-143.
Davis, W., W., and Stouth, T., R. (1971).
Disc plate methods of microbiological
antibiotic assay. Microbiology.
Djide, N., Sartini. (2008). Analisis
Mikrobiologi Farmasi. Makassar. Fakultas
Farmasi Universitas Hasanuddin.
Gunawan, I, W, G., Gede. B., Sutrisnayanti.
N. L, (2008). Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Terpenoid yang Aktif Antibakteri
Pada Herba Meniran (Phyllanthus niruri
Linn), Jurusan Kimia FMIPA Universitas
Udayana, Bukit Jimbaran, ISSN 1907-9850.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia
Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Bandung: Penerbit ITB.
Khasanah nur, dkk, (2012). Uji Fitokimia
Kulit Buah (Rizophora mucronata),
Program Studi Pendidikan Kimia Jurusan
PMIPA FKIP UNS, Surakarta.
Mayer, Alejandro MS. et al. (2010).
Marine pharmacology in 2007–8: Marine
compounds with antibacterial,
anticoagulant, antifungal, anti-
inflammatory, antimalarial, antiprotozoal,
antituberculosis, and antiviral activities;
affecting the immune and nervous system,
12
and other miscellaneous mechanisms of
action. ElsevierInc. Part C, 1191-222.
Murnarsih, T., (2005). Potensi
Mikroorganisme Sebagai Sumber Bahan
Obat-obatan dari Laut yang Dapat
Dibudidayakan. Oseana, Volume XXIX,
Nomor 1 : 1-7. Puslitbang Oseanologi-LIPI.
Pelczar, M.J., and Chan, E.C.S. (1986).
Dasar – Dasar Mikrobiologi. Jakarta.
Universitas Indonesia Press.
Rabekka, A. L., Usma, P., Evy, R., (2015).
Uji Antibakteri Ekstrak Batang
Kecombrang (Nicolaia Speciosa Horan)
Terhadap Staphylococcus Aureus Dan
Escherichia Coli. Universitas Riau :
Fakultas Pertanian Universitas Riau.
Radika, P., (2006). Chemical Constituents
and Biological activities of The Soft Corals
Of Genus Cladiella, India, Andhra
University, Biocemical Sytematics and
Ecology (34). 781 -789.
Romansyah, Yudhi, (2011), Kandungan
Senyawa Bioaktif Antioksidan Karang
Lunak Sarcophyton sp. Alami dan
transplantasi di Perairan Pulau Pramuka
Kepulauan Seribu, Fakultas Perikanan dan
Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor,
Bogor.
Sawant S, Youssef D, Mayer A, Sylvester
P, Wall V, Arant M, El-Sayed K, (2006).
Anticancer And Anti - Inflamantory
Sulphur - Containing Semisynthetic
Derivatives Of Sarcophine, Chem, Pharm.
Bull, 54(8): 1119-1123.
Suharsono, (2008). Jenis – Jenis Karang di
Indonesia. Jakarta. LIPI Press.
Sukadana, I. M., Sri, R. S., Juliarti. (2008).
Aktivitas Antibakteri Senyawa Golongan
Triterpenoid Dari Biji Pepaya (Carica
Papaya L.).
Tirtawinata, W. (2013). Teluk Tomini
Sebuah Surga Yang Tenggelam. Diambil
dari Situs secara Online dengan Situs Web:
 Handayani et al./Jurnal Farmasi Galenika (Galenica Journal of Pharmacy) 2017; 3 (1): 1-9

http://Indonesiadivingschool.Wordpress.co
m/2013/04/13/teluk-tomini-sebuah-surga-
yang-tenggelam.

13