仪器分析 教材与参考书

Instrumental Analysis 一、教材：

1 以课件内容为准
 任课教师：童爱军
2 刘密新等，《仪器分析》（第2版），清华大学出版社，2002
 电 话：87682 (o), 82759(lab)
 地 点：理科楼D317室 二、参考书
 tongaj@mail.tsinghua.edu.cn 1 Douglas A. Skoog et al., Principles of Instrumental Analysis, 6th
edition, Thomson Brooks , 2007
2 武汉大学主编，《分析化学》下册 ，第五版，高等教育出版社, 2007
 助 教：丁怡文 3 李克安主编，分析化学教程，北京大学出版社，2005
 电 话：82759 (lab)
 地 点：理科楼D316室
 dyw18@mails.tsinghua.edu.cn
1 2

教学安排
周次
1
日期
2月24日 绪论
内容
学习要求
2 3月3日 紫外-可见吸收光谱（UV-vis）p96-137
3 3月10日 紫外-可见吸收光谱（UV-vis） 1.课堂要求
4 3月17日 红外光谱法（IR）p138-169  手机静音，不拨打接听电话，不查看手机；
5 3月24日 红外光谱法（IR）
2.作业要求
6 3月31日 拉曼光谱法（Ramann）p370-377
 作业布置后下一周上课时交
7 4月7日 气相色谱法（GC）p217-256
8 4月14日 气相色谱法（GC） 3. 小测验
9 4月21日 高效液相色谱法（HPLC） p257-298  5次，随堂进行（线上同学由网络学堂按时提交解答）
10 4月28日 核磁共振波谱法（NMR） p170-216
 4. 考核方式与成绩评定
11 5月5日 五一放假
 作业：20%
12 5月12日 核磁共振波谱法（NMR）  小测验：80%
13 5月19日 核磁共振波谱法（NMR）  小论文加分：最高10分（上限加至100分）
14 5月26日 质谱法（MS） p299-347
15 6月2日 质谱法（MS）
3
16 6月9日 质谱法（MS） 4

绪论 1 概述
1 概述 “仪器分析”课程概况
2 化学分析和仪器分析 “仪器分析”是化学相关学科的专业基础课，是生命
科学、材料科学和环境科学研究的基础，是测量物质
3 方法分类 成分（组成）、含量、结构、表面和界面等物理化学
4 性能指标 特性的理论和实验方法。
5 学习方法 课程目标
6 应用 培养分析仪器的熟练应用者和创新型研究人才：
7 在化学研究中的地位 掌握常用仪器分析方法的原理和应用，熟悉仪器结构
具备选择适宜仪器分析方法的能力
8 本章作业 学习创新型思维模式
国家重大科研仪器研制项目（自由申请）
2020年直接费用平均资助强度：709.9万元/项
5 6

1
1 概述：应用领域 1 概述：方法特点
在化学、化工、材料、环境、能源、医药食品、商检、 • 检测灵敏度高；
运动医学、刑侦等多方面具有重要地位；
• 线性范围宽；
生产生活：环境质量监控（污染实时监测）、生活产品
质量监控（农残、食品添加剂检测、水产品新鲜度）、 • 分析速度快；
体育兴奋剂检测、法庭化学（DNA技术，物证）
 化学：新化合物的结构表征、分子层次的分析方法 • 需要的样品量少；

 生命科学：活体检测，疾病诊断，DNA测序，药物的 • 可进行自动化分析；
有效成分、结构及构效关系
• 是一种相对分析，一般需要标样；
 环境科学：环境检测、污染物分析
• 仪器贵，消耗大，维护成本高。
 材料科学：新材料的结构与性能
 空间科学：军事和航天探测、智能化仪器研究 7 8

1 概述 2 化学分析和仪器分析
化学： 发现、创造新物质，探求物质的本质 什么是“分析化学”
化学是物理学，生物学，矿物学，地球，天文研究的方法
“分析化学”是获取物质的化学信息，研究物质的组成、
含量、结构及状态的科学。
如何获取物质的“化学信息”
化学与如下科学结合，采用其方法和手段获取物质的
“质”和“量”的资料，从而得到相关化学信息：
• 数学
• 物理学
• 生物学
• 医学
分析化学是化学研究的眼睛
• 计算机科学
9 10

1 概述 取样是获取化学信息的第一步
Preface of “Principles of Instrumental Analysis”
Garbage in, garbage out!
Physical scientists, biological scientists, and engineers have
an impressive array of powerful and elegant tools for 20 m
gathering qualitative and quantitative information about 10 cm
10 cm

the composition and structure of matter. Students of A 66%

chemistry, biochemistry, physics, geology, health-related
sciences, engineering, and environmental sciences must B 14%
develop an understanding of these tools and how they are C 20%
used to solve analytical problems.
Radom heterogeneous material Segregated heterogeneous material

11 12

2
 2 化学分析和仪器分析 2 化学分析和仪器分析
“仪器分析”是分析化学的重要部分
化学分析与仪器分析方法比较
仪器分析 重量法
定量分析 化学分析：常量组分分析（>1%），准确度高（Er=0.1-0.2%）。
分析化学 化学分析 容量法
依据化学反应，使用玻璃仪器。
定性分析 酸碱、配位、氧化还原
沉淀、电位滴定
仪器分析：微量组分分析（<1%），灵敏度高，Er=1-5%。
“仪器分析”是以物质的物理或物理化学性质为基础的一类 依据物理或物理化学性质，使用特殊仪器。
分析方法，其特征是以仪器作为分析测量的主要手段。
由于这类方法依据了物质的物理或物理化学性质，因此，
亦曾被称作物理或物理化学分析法。
13 14

3 方法分类 3 方法分类 按原理、方法分类

按被分析物质含量划分：
常量成分分析（>1%）
光(波)谱 电化学分析法
微量成分分析（1%-10-6） 色谱分析法
痕量成分分析（< 10-6） ppm, ppb, ppt 分析法
超痕量成分分析（ 10-9）
按取样量划分： 仪器分析
常量样品分析（>10mg, >1mL）
微量样品分析（0.1-10mg, 0.01-1mL）
超微量样品分析（<0.1mg, <0.01mL）
质谱分析法 热分析法
按被分析物质的状态划分： 分析仪器
成分分析 表面与界面分析 联用技术
价态分析 微区分析
结构分析 剥层分析
15 16

分类 特征性质 仪器分析方法
辐射的发射 原子发射光谱、原子荧光光谱、X射线荧光光谱、分子荧光光谱、

辐射的吸收
分子磷光光谱、化学发光、电子能谱、俄歇电子能谱
原子吸收光谱、紫外－可见吸收光谱、红外光谱、X射线吸收光谱、
4 性能指标
光
分 核磁共振波谱、电子自旋共振波谱、光声光谱
析 辐射的散射 拉曼光谱、比浊法、散射浊度法 仪器分析的主要性能指标
法 辐射的折射 折射法、干涉法
辐射的衍射 X射线衍射、电子衍射
1. 准确度 Accuracy
辐射的转动 旋光色散法、圆二色性法、偏振法
电位 电位法 2. 精密度 Precision
电化学 电荷 库仑法 3. 灵敏度 Sensitivity
分析法 电流 安培法、极谱法
电阻 电导法
4. 检测限 Limit of Detection
5. 线性范围 Linear Range
色谱法 分离 气相色谱、液相色谱、电泳
6. 选择性 Selectivity
质-荷比 质谱法
反应速率 动力学法
其它仪器
热性质 热重量和滴定法、差示扫描量热法、差热分析法、热导法
分析方法
放射活性 活化和同位素稀释法 17 18
质量 石英晶体微天平

3
4 性能指标 4 性能指标
仪器分析的主要性能指标 仪器分析的主要性能指标
1. 准确度 Accuracy 2. 精密度 Precision
测定值与真值相符合的程度 精密度表示平行测定结果互相靠近的程度。
一般用相对标准偏差（变动系数）表示。
绝对误差（absolute error）

相对误差（relative error）

公认真值：原子量、纯物质中各元素的理论含量、
标样的标准值等
19 20

准确度与精密度的关系 准确度 精密度

4 性能指标
仪器分析的主要性能指标
3. 灵敏度，工作曲线的线性范围及检测限

真值
21 22

4 性能指标 5 学习方法
仪器分析的主要性能指标 仪器分析的学习方法
3. 灵敏度，工作曲线的线性范围及检测限 • 掌握方法的基本概念和原理，以及方法可提供的信息
• 了解仪器的结构，方框图
工作曲线
信号 • 了解仪器的关键部件的特性

• 掌握影响分析结果的关键因素

噪声
• 掌握分析步骤和数据处理方法

浓度 • 掌握仪器的应用

23 24

4
 分析方法的选择 分析方法的选择

现代仪器分析方法发展迅速，应用互相交叉，解决分析 对方法的要求：
问题首先要正确选择合适的分析方法，前提是需要对分析方法 Key Factors
及分析对象有一个完整的了解。 1)准确度(accuracy)：测定平均值与真值的误差(系统误差)
对样品了解： 2)重现性(reproducibility) 、精密度(precision) ：测定值与平均
① 准确度、精确度要求； 值的偏差(偶然误差)
② 可用样品量； 3) 灵敏度(sensitivity) 和检测限(detection limit)
③ 待测物浓度范围； 4) 选择性(selectivity)： 共存杂质不干扰测定，只分析某类目标
化合物
④ 可能的干扰因素；
5) 特异性(specificity) ：共存杂质不干扰测定，只分析特定化合
⑤ 样品基体的物化性质。
物(如酶反应)

25 26

6 应用 DNA水凝胶3D打印

• 水凝胶因其高含水量和类似于细胞外基质的特点，
是三维组织打印和人工器官制备的首选基材
环境科学 • 水凝胶材料需要同时满足活细胞三维打印所要求的
细胞相容性、力学强度、通透性、快速成型等苛刻
材料科学 条件
• DNA水凝胶能够同时满足多项活细胞3D打印的需求：
能源科学 速度快，可以达到秒级成型；条件温和，过程完全
在生理条件下完成，不涉及化学反应以及能够对细
现代仪器分析的 生命科学 胞造成伤害的外界刺激；强度、通透性好，打印出
应用学科领域 来的产品最终尺寸可以达到厘米级别以上的尺度，
信息科学 不变形和软化，还能够保证细胞生长所需营养物质
的输送；此材料还具有非常好的触变性和自修复性
能，在细胞生长的同时可以不断改变自身的结构，
空间科学 能够在保证对细胞提供足够支撑的情况下不限制其
扩增；更重要的是，此凝胶材料可以根据需要迅速
纳米科学 分解不残留，为将来3D打印器官的活体移植创造了
条件。
……
Angew. Chem. Int. Ed. 2015, 54, 3957 –3961

27 28

Nature Biotechnology volume 29, pages 352–356 (2011)

http://tech.sina.com.cn/d/2011-02-10/07365163030.shtml
FAM-NP41 ( lysinamide-FAM )
钱永健
7 在化学研究中的地位
例： （1）STM (Scanning Tunnel Microscope)
IBM某研究所，1986年诺贝尔物理学奖
可研究物质表面的原子结构及形貌。
可在纳米尺度探测表面。
赖氨酰胺
FAM-NP41标记人神经的荧光照片
(A,喉返神经；B,FAM-NP41标记下患者全喉切除术时的邻近肌肉； 分辨率高：横向0.1 nm，纵向0.01 nm
C,D,人神经的横纵截面显微镜照片 )

（2）CE (Capillary Electrophoresis)

FAM
完成了人类基因组计划，实现人类基因测序
binds preferentially to nerves
拉开了后基因时代序幕

（3）DNA双螺旋结构的确证
Cy5-NP41 ( cysteinamide-Cy5 )
Cy5-NP41 ( lysinamide-Cy5 )
从生物组织、DNA、双螺旋结构，到遗传机理
半胱氨酰胺 Cy5 的阐明，仪器分析起了关键作用
Cy5-NP41标记的 Thy1-YFP 转基因小鼠坐骨神经 30
29

5
 核酸双螺旋结构
Nucleobases in Single Strand DNA and RNA

DNA Adenine(腺嘌呤) RNA Adenine(腺嘌呤)

Cytosine（胞嘧啶）
Cytosine（胞嘧啶）

Guanine(鸟嘌呤) Guanine(鸟嘌呤)

5’ 5’

Uracil(尿嘧啶)
Thymine(胸腺嘧啶)

X-光衍射技术
3’ 3’
B DNA A RNA Z DNA 31 32

Structure of B-DNA DNA replication

・Complimentary DNA strands make the right-handed
helical duplex which shows chirality.
・B-DNA is a biologically most common form and has
10 base pairs per turn.

Minor
groove
1 nm

3.4nm

Major
groove
・Bases stacked 1/3 nm apart
・Sugar/phosphate backbones The two strands (blue) separate and two new strands (pink)
are outside (hydrophilic). are synthesized, each with a sequence complementary to
0.34 nm
one of the original strands. The result is two double-helical
33 34
molecules, each identical to the original DNA.

7 在化学研究中的地位
含合成生物功能产物（蛋白质、RNA） 2002年度诺贝尔化学奖
必需信息的DNA分子片段称为基因

J.B.Fenn, K. Wuthrich, Koiichi Tanaka（田中耕一）

• 基因信息储存于DNA四个脱氧核苷酸
的线性序列中 生物大分子的结构解析及其方法研究
• DNA双螺旋是其复制和修复的模板
• 储存有基因DNA的蛋白质中的线性氨
基酸序列产生蛋白质的特征三维结构 学术贡献： MALDI-MS
• 对某些大分子有特殊亲和力的大分子 Matrix Assisted Laser Desporption Ionization –
相互间形成超分子自组装聚集体
Mass Spectrometry(介质支撑激光解吸离子化质谱)
一个基因就是编码一些基因最终产物的
基本序列所需的DNA，这些最终产物
之前的方法：LD: laser desorption
The linear sequence of deoxyribonucleotides in the DNA (the gene) that
encodes the protein hexokinase is first transcribed into a ribonucleic acid 就像一条多肽链或是一个具有结构和催 样品分子直接吸收激光，热稳定性差的蛋白质在离子化
(RNA) molecule with the complementary ribonucleotide sequence. The RNA 化功能的RNA（tRNA（转移RNA， 时分解。故不适用于热稳定性差的蛋白质分析
sequence (messenger RNA) is then translated into the linear protein chain of
hexokinase, which folds into its native three-dimensional shape, most likely transfer RNA）和rRNA（核糖体RNA，
aided by molecular chaperones. Once in its native form, hexokinase acquires its ribosomal RNA））。 35
catalytic activity: it can catalyze the phosphorylation of glucose, using ATP as
the phosphoryl group donor. 36

6
 MALDI-MS的原理
获 Nobel 奖的冠醚的发现过程 1
将样品分子均匀分散在大量
激光吸收率高的试剂中，以
脉冲激光照射样品表面。

样品分子不直接气化离子化，介质试剂
气化时样品分子被带入气相，与离子化
的试剂之间产生质子、电子的授受而离
子化

37 38

获 Nobel 奖的冠醚的发现过程 3
获 Nobel 奖的冠醚的发现过程 2

39 40

获 Nobel 奖的冠醚的发现过程 4
7 在化学研究中的地位
冠醚的发现 主客体化学 超分子化学

C. J. Pedersen: J. Am. Chem. Soc., 89, 7017(1967)

冠醚化学

D. J. Cram: Science, 183, 803(1974)

主客体化学

J. M. Lehn: Pure Appl. Chem., 50, 871(1978)

超分子化学

41 42

7
其它超分子举例 分子机器设计和合成
• 使分子的运动具有可控性
• 分子机器很有可能在新材料、传感器以及储能系统的
研发中得到应用

Rotaxanes:

JACS,2006,7
有四个“轮子”的分子在金属表面移动。也许将来医生会
注入你体内这样的小机器人帮你找到癌细胞以治疗癌症

左起：索维奇（法国配位化学家）、斯托达特（英国合成
分子化学家）、费林加（荷兰合成有机化学家）

斯托达特创建的分子梭可以以受控的方式沿一个轴移动。
1. 环状分子组装到分子轴上；2. 环状分子闭合，不再从
JACS,2006,2 轴上脱落；3. 当加热时，环状分子在轴的富电子区域跳动

43 44

8 本章作业

1） 目前仪器分析按原理、方法怎样分类，本课程
将学习哪些内容？

2） 查阅并简述顺磁共振波谱分析、旋光色散法、
圆二色法、热分析法（热重量分析、差热分析、
示差扫描量热分析）的基本原理和适用分析对象。

3） 仪器分析的主要性能指标有哪些，各自的定义
和评价标准是什么？

4 ）结合同学本系的科研状况，你认为哪些仪器分
析内容是要重点掌握的？
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