Professional Documents
Culture Documents
Mykologia
Mykologia
Mykologia
A. KURNATOWSKA
MYKOLOGIA
Redakcja
P. KURNATOWSKI
ALICJA KURNATOWSKA
MEDYCZNA PIOTR KURNATOWSKI
MYKOLOGIA
Różne czynniki biotyczne (priony, wirusy, bakterie, jących rozwojowi grzybicy. W ostatnich latach
MYKOLOGIA MEDYCZNA
grzyby, pasożyty) tworzą naturalną lub choro- obserwuje się wzrost częstości grzybic jednoogni-
botwórczą biotę organizmu człowieka. Kilkaset ga- skowych, wieloogniskowych i uogólnionych, co
tunków grzybów, występujących we wszystkich czę- związane jest ze zwiększającą się populacją osób
ściach biosfery, wykazuje potencjalne działanie podatnych na zakażenia.
MEDYCZNA
patogenne w stosunku do ludzi, którzy we wszyst- Podręcznik przygotowany przez nauczycieli
kich okresach ontogenezy, począwszy od rozwoju akademickich różnych specjalności, zajmujących
wewnątrzmacicznego, narażeni są na ich ekspo- się od wielu lat problemami mykologii medycz-
zycję. Rozwój nowoczesnych metod diagnostycz- nej u ludzi i zwierząt, adresowany jest zarówno
nych powoduje wykrywanie nowych patogenów, do studentów (kierunki medyczne i biologiczne),
a badanie mykobioty tylko jamy ustnej osób zdro- jak i do lekarzy medycyny i weterynarii różnych
wych, przeprowadzone metodami biologii mo- specjalności, a także innych pracowników służby
lekularnej, wykazało obecność 101 gatunków zdrowia (diagności laboratoryjni, pielęgniarki, ra-
należących do 85 (75 dających się hodować) ro- townicy medyczni, fizjoterapeuci). Publikacja
dzajów grzybów. Jednocześnie obserwuje się spełni swoje zadanie, jeżeli przyczyni się do po-
zmiany w prewalencji poszczególnych gatunków szerzenia wiedzy na temat chorób ludzi i zwie-
i pojawianie się szczepów opornych na antybio- rząt, których czynnikami etiologicznymi są grzyby,
tyki oraz chemioterapeutyki przeciwgrzybiczne wpłynie na ich zwiększoną częstość wykrywania,
o coraz większej aktywności enzymatycznej w sto- a tym samym zwalczania; uświadomi zagrożenia,
sunku do tkanek ludzkich. Możliwość ujawnienia jakie stanowią grzybice i wywoła dyskusję wśród
właściwości patogennych grzybów zależy m.in. od adresatów książki.
stanu żywiciela i występowania czynników sprzyja- Z przedmowy
www.edraurban.pl
MYKOLOGIA
MEDYCZNA
Redakcja
Alicja Kurnatowska
Piotr Kurnatowski
Ze względu na stały postęp w naukach medycznych lub odmienne nieraz opinie na temat leczenia i diagnozowania,
jak również możliwość wystąpienia błędu, prosimy, aby w trakcie podejmowania decyzji terapeutycznej uważnie
oceniać zamieszczone w książce informacje. Pomoże to zmniejszyć ryzyko wystąpienia błędu lekarskiego.
Redakcja naukowa
prof. zw. dr hab. n. med., em. Alicja Kurnatowska
prof. zw. dr hab. n. med. Piotr Kurnatowski
Recenzent
prof. zw. dr hab. n. med. Anna B. Macura
ISBN 978-83-65835-77-2
www.edraurban.pl
4. Badania diagnostyczne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
Alicja Kurnatowska, Katarzyna Khalid
4.1. Metody wykrywania grzybów w różnych materiałach biologicznych . . . . . . . . . . . . 26
4.2. Wybrane gotowe testy diagnostyczne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
4.3. Diagnostyka serologiczna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
4.4. Diagnostyka molekularna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
vi
vii
Stadium teleomorficzne
Nie jest znane.
Ryc. 6.1.1. Rhinosporidium seeberi: pęknięta zarodnia Ryc. 6.2.1. Absidia corymbifera: rozgałęzione sporan-
(sporangium) z zarodnikami (sporangiosporae), wysypują- giofory, sporangia z zarodnikami oraz po ich uwolnieniu;
cymi się do tkanek. od strzępki wegetatywnej oddzielają się odrębne ryzoidy.
71
72
Stadium anamorficzne
Sporangiofory proste, nierozgałęzione wyrastają
pojedynczo w różnych miejscach grzybni. Sporan-
gia kuliste, o średnicy 80–250 µm są oparte na ma-
czugowatej lub jajowatej kolumelli (do 150 µm
średnicy); może wytwarzać sporangiole. Zarodniki
sporangialne są biszkopcikowate lub kuliste, o wy-
miarach 6–12 × 3–8 µm (ryc. 6.2.3).
73
Na agarze Sabourauda (SGA) w 25°C (mak- Ryc. 6.3.27. Epidermophyton floccosum: makrokonidia
symalna temperatura wzrostu 32–34°C) tworzy na szczycie strzępki zarodnikotwórczej; dwa chlamydo-
kremowe lub żółte kolonie, o lekko pomarszczo- spory – szczytowy i boczny.
nej powierzchni. Na bulionie Sabourauda wzra-
sta w postaci pierścienia oraz w osadzie. Wzrost Stadium teleomorficzne
stymuluje biotyna, a niektórych szczepów piry- Nie jest znane.
doksyna i tiamina; komórki w hodowli znoszą ci-
śnienie 11–13% roztworów chlorku sodu.
Microsporum audouinii Gruby, 1943
98
Fot. 6.15. Epidermophyton floccosum. Po lewej: oliwkowe kolonie z widoczną białą grzybnią (objaw pleomorfizmu)
wrastające w agar na podłożu SGA po 14 dniach inkubacji w 27°C. Na środku: spód kolonii z poprzedniego zdjęcia.
Po prawej: obraz mikroskopowy z mikrohodowli szkiełkowej przedstawiający maczugowate makrokonidia na niezróżni-
cowanych konidioforach (gatunek w odróżnieniu od innych dermatofitów tworzy jeden rodzaj zarodników). Barwienie
błękitem anilinowym w laktofenolu; pow. 400×.
Stadium teleomorficzne
Nie jest znane.
Stadium anamorficzne
Grzybnia wielokomórkowa wytwarza wśród strzę-
pek zwykle twory spiralne, rzadziej rakietowate
i lichtarzowate lub grzebieniaste; bardzo liczne ma- Ryc. 6.3.29. Microsporum canis: mikrokonidia pojedyn-
krokonidia, o wymiarach 12–25 × 30–110 µm, z 6–12 cze lub w skupieniach na strzępce, makrokonidia.
99
Fot. 6.16. Microsporum canis. Po lewej: kolonie Microsporum canis na podłożu SGA po 14 dniach inkubacji w 27°C.
Na środku: spód kolonii z poprzedniego zdjęcia. Po prawej: obraz mikroskopowy z mikrohodowli szkiełkowej przedsta-
wiający wrzecionowate zarodniki (makrokonidia) o grubej i szorstkiej ścianie komórkowej. Barwienie błękitem anilino-
wym w laktofenolu; pow. 400×.
100
Fot. 6.17. Microsporum gypseum. Po lewej: brązowe kolonie Microsporum gypseum po 14 dniach inkubacji na pod-
łożu SGA w 27°C. Na środku: spód kolonii z poprzedniego zdjęcia. Po prawej: obraz mikroskopowy z mikrohodowli
szkiełkowej przedstawiający cienkościenne makrokonidia z zaokrąglonymi końcami. Cechy te pozwalają na odróżnienie
M. gypseum od M. canis. Preparat barwiony błękitem anilinowym w laktofenolu; pow. 400×.
Stadium teleomorficzne
Postać płciowa została opisana jako Arthroderma in- Ryc. 6.3.31. Microsporum nanum: na wspólnej strzępce
curvatum Stockdale, 1961 lub Arthroderma gypseum makrokonidia i mikrokonidia.
Stockdale, 1963.
Stadium teleomorficzne
Postać płciowa została opisana jako Arthroderma
Microsporum nanum Fuentes, 1956
obtusum (Dawson et Gentles, 1961), Weitzman, Mc-
Stadium anamorficzne Ginnis, Padhye et Ajello, 1986
Grzybnia wielokomórkowa wytwarza strzępki spi-
ralne i twory rakietowate oraz artrospory (artroko-
Microsporum vanbreuseghemii Georg, Ajello,
nidia) i chlamydospory interkalarne. Makrokonidia, Friedman et Brienkan, 1962
o wymiarach 4–7,5 × 12–16 µm, mają kształt owalny
lub gruszkowaty i 1–2 przegród; ściany z delikat- Stadium anamorficzne
nymi brodawkami. Mikrokonidia (2–3 µm) rzadko Grzybnia wielokomórkowa składa się ze strzępek
wytwarzają się w hodowlach (ryc. 6.3.31). silnie rozgałęziających się. Makrokonidia cylin-
Na powierzchni włosa mikrokonidia układa- dryczne lub przypominające wrzeciono, 4–15-prze-
ją się w mozaiki lub w łańcuszki. W zeskrobinach grodowe, grubościenne, o wymiarach 10 × 58–62 µm.
z naskórka liczne strzępki i mikrokonidia. Mikrokonidia gruszkowate lub jajowate, o wielko-
Na agarze Sabourauda (SGA) wzrasta (7–8 dni) ści 9–11 µm, siedzące lub na krótkich trzonkach.
w postaci kolonii białych, które stają się po pewnym Na powierzchni włosa mikrokonidia układają
czasie od strony pożywki ciemnożółte lub czerwono- się zwykle w łańcuszki.
brązowe; początkowo są puszyste, potem ziarniste, Na agarze Sabourauda (SGA) wzrasta (7–8 dni)
o silnie postrzępionym brzegu i wypukłym środku. w postaci kolonii białych, zmieniających się na
101
Stadium teleomorficzne
Postać płciowa jest opisana jako Arthroderma
grubyi Georg, Ajello, Friedman et Brienkan, 1962.
«««
Ryc. 6.3.32. Trichophyton interdigitale: twór guzowaty
w grzybni, strzępka zarodnikotwórcza, z licznymi mikro-
Grzyby z rodzaju Trichophyton wstępnie różni-
konidiami.
cuje się, tworząc grupy gatunków:
1. Kolonia biała lub kremowobiała → 2. płytkie wgłębienia, ułożone promieniście wokół
Kolonia innego koloru → 3. centrum; brzeg wznosi się i staje się falisty.
2. Kolonia mączysta lub puszysta; mikrokonidia
mniejsze niż 6 µm średnicy układają się na po- Stadium teleomorficzne
wierzchni lub wnikają do włosa – grupa Gypseum. Postać płciowa została opisana jako Arthroderma
Kolonia puszysta lub papierowata; mikrokonidia vanbreuseghemii Takushio, 1973.
różnokształtne większe niż 6 µm długości ukła-
dają się wewnątrz włosa – grupa Crateriforme.
Trichophyton mentagrophytes (Robin, 1853)
3. Kolonia różowa lub czerwona → 4. Blanchard, 1896
Kolonia innego koloru → 5.
4. Zarodniki mniejsze niż 6 µm średnicy – grupa Stadium anamorficzne
Rubrum. Grzybnia zbudowana ze strzępek wielokomórko-
Zarodniki większe niż 6 µm średnicy – grupa wych, wśród których wytwarzają się twory guzo-
Rosaceum. wate, spiralne i rakietowate, znacznie przeważa
5. Kolonia żółta, pomarańczowa, brązowa lub fio- swoją masą nad zarodnikami. Mikrokonidia okrągłe
letowa, o połysku i konsystencji wosku; zarodni- lub owalne, wielkości 2–4 µm, układają się w kłosy
ki różnej wielkości; układają się wewnątrz włosa i grona. Makrokonidia maczugowate lub wrzecio-
– grupa Faviforme. nowate 3–8-przegrodowe, o wymiarach 5–12 × 55–
72 µm (ryc. 6.3.33). Niektóre odmiany tego gatunku
wytwarzają chlamydospory (o średnicy 5–7 µm),
Grupa Gypseum
najczęściej wewnątrzstrzępkowe (interkalarne).
Trichophyton interdigitale Priestley, 1917 Różne rodzaje zarodników tworzą się w niewiel-
kich liczbach i pojawiają się w koloniach tylko okre-
Stadium anamorficzne sowo. Test ureazowy dodatni.
Grzybnia wielokomórkowa wytwarza two- Na włosach makrokonidia układają się w łań-
ry guzowate oraz bezpośrednio siedzące cuszki; często tworzą „mufki” okołowłosowe; rza-
na strzępkach mikrokonidia, kuliste lub kształtu dziej wnikają do włosa. W zeskrobinach naskórka
„spadającej łzy” (2–4 µm), a także maczugowate ma- mikrokonidia tworzą również układy łańcuszko-
krokonidia, 4–8-przegrodowe, o wymiarach 5–12 × 50– we. Test perforacji włosa in vitro dodatni.
–80 µm; nieliczne szczepy cechuje mała zdolność Na agarze Sabourauda (SGA) wzrasta w postaci
wykształcania zarodników (ryc. 6.3.32). Rozkłada kolonii różniących się wieloma cechami (fot. 6.18),
mocznik – test ureazowy dodatni, test perforacji których charakterystyczne zespoły pozwalają
włosa – in vitro dodatni;, nie ma zdolności asymi- na wyróżnienie w obrębie tego gatunku licznych
lacji sorbitolu. odmian:
Na agarze Sabourauda (SGA) wzrasta w tempe- 1. Kolonia mączysta; jakby posypana mąką → 2.
raturze 37°C w postaci białych, mączystych kolonii, Kolonia puszysta → 7.
w miarę starzenia się zmieniających kolor na lek- 2. Kolonia kremowobiała → 3.
ko różowy, fioletowy lub morelowy, pojawiają się Kolonia o zabarwieniu zmiennym → 6.
102
103
Stadium teleomorficzne
Postać płciowa została opisana jako Arthroderma
benhaminae Ajello et Chang, 1967.
Fot. 6.19. Trichophyton rubrum. Po lewej: kolonie Trichophyton rubrum po 14 dniach inkubacji na podłożu SGA w tem-
peraturze 27°C. Na środku: spód kolonii z ciemnoczerwonym barwnikiem. Po prawej: preparat mikroskopowy z mikro-
hodowli szkiełkowej; widoczne łezkowate mikrokonidia ułożone wzdłuż strzępki określane jako obraz „kłosa trawy”.
Niektóre szczepy tego gatunku mogą nie sporulować w standardowych warunkach hodowli. Barwienie błękitem anilino-
wym w laktofenolu; pow. 400×.
104
126
Fot. 6.33. Malassezia globosa. Po lewej: kolonie Malassezia globosa na zmodyfikowanym podłożu Dixona po 7 dniach
inkubacji w 32°C. Wokół kolonii widoczna precypitacja składników podłoża. Po prawej: preparat barwiony metodą Gra-
ma – widoczne pączkujące komórki drożdży. Pow. 1000×.
131
1
Ryc. 6.4.4. Malassezia pachydermatis: komórki wegeta- 2
tywne pączkujące.
Ryc. 6.4.5. Trichosporon cutaneum: 1) strzępka rozpa-
dająca się na artrospory, 2) blastospory, 3) blastospory
Na podłożu Sabourauda (SGA), z dodatkiem na szczycie strzępki.
wyciągu drożdżowego oraz Tweenu, w 30°C wzra-
sta powoli w postaci kolonii gładkich, matowych, rych, jasnobrązowych lub jasnozielonych, z wypu-
kremowych, o gładkim brzegu. kłym wzgórkowatym środkiem, o postrzępionym
brzegu; w miarę starzenia się kolonia staje się sucha
Stadium teleomorficzne i pofałdowana; maksymalna temperatura potrzeb-
Nie jest znane. na do wzrostu 29–41°C.
Na bulionie Sabourauda tworzy osad, grubo-
ziarnisty kożuch oraz powoduje zmętnienie całej
Trichosporon cutaneum (de Beurmann,
Gougerot et Vaucher, 1909) Ota, 1926 pożywki; może wzrastać w postaci białej lub kre-
mowej błonki, o różnej strukturze. Wzrost stymulu-
Stadium anamorficzne je tiamina, niektórych szczepów także biotyna.
Komórki wegetatywne jajowate, kuliste lub
eliptyczne, o wymiarach 3,5–14 × 3,3–7 µm, wytwa- Stadium teleomorficzne
rzają blastospory oraz strzępki prawdziwe, wśród Nie jest znane.
których spotyka się twory rakietowate i artrospo-
ry. W starych hodowlach (3 miesiące, w tempera-
Trichosporon fermentans Diddens et
turze 25°C) mogą wytwarzać się różnokształtne Lodder, 1942
komórki, o wielkości 9–26 × 7–9 µm, w których for-
muje się 1–6 zarodników. Zarodniki wewnętrzne Syn. Geotrichum fermentans (Diddens et
są kuliste, cylindryczne lub gruszkowate, od 1 do Lodder, 1942) von Arx, 1977
6 µm długości (ryc. 6.4.5).
Nie fermentuje cukrów; przyswaja węgiel z: GLU Stadium anamorficzne
(100%), GLY (46%), 2KG (98%), ARA (96%), XYL Komórki wegetatywne jajowate, kuliste lub
(100%), ADO (32%), XLT (35%), GAL (92%), INO eliptyczne, o wymiarach 3,9–17,5 µm, wytwarzają
(53%), SOR (26%), MDG (76%), NAG (96%), CEL strzępki prawdziwe, które rozpadają się na artro-
(96%), LAC (99%), MAL (93%), SAC (80%), TRE spory; na odgałęzieniach lub na szczycie strzępek
(76%), MLZ (63%), RAF (46%), IFE (100%), a także mogą tworzyć się skupienia zarodników (ryc. 6.4.6).
z rybozy, ramnozy, N-acetylo-D-glukozaminidazy, Fermentuje galaktozę i glukozę; asymiluje wę-
etanolu, meso-erytrytolu, rybitolu, D-mannitolu, gluci- giel z: galaktozy, celobiozy, D-ksylozy, rybitolu,
tolu, salicyny, kwasów DL-mlekowego, bursztynowe- myo-inozytolu, D-mannitolu oraz kwasów bursz-
go i cytrynowego. Nie wykorzystuje azotu z azotanu tynowego i cytrynowego. Nie wykorzystuje azotu
potasowego; nie rozkłada mocznika (test ureazowy z azotynu i azotanu potasowego. Rozkłada arbuty-
ujemny); większość szczepów rozkłada arbutynę; nę i mocznik (test urazowy dodatni); nie magazy-
gromadzi skrobię. nuje skrobi.
Na agarze Sabourauda (SGA) z dodatkiem wy- Na agarze Sabourauda (SGA, z wyciągiem droż-
ciągu drożdżowego w 25°C powoli wzrasta w po- dżowym) w 25–38°C tworzy kolonie białe lub kre-
staci kolonii gładkich, błyszczących lub matowych, mowe, puszyste, początkowo błyszczące, potem
lekko puszystych, kremowych, żółtych, jasnosza- matowe, o postrzępionym brzegu i różnej struk-
132
133
Stadium teleomorficzne
Nie jest znane.
Ryc. 6.4.8. Hormographiella aspergillata: konidiofory
i konidia.
Piśmiennictwo
Stadium teleomorficzne 1. De Hoog GS, Guarro J, Gene J, Figueras MJ: Atlas of clinical
Postać płciowa została opisana jako Coprinus ci- fungi. Centraalbureau voor Schimmelcultures, Utrecht,
Universitat Rovira I Virgili, Rens 2000.
nereus S.F. Gray, 1821, gatunek należący do Basi- 2. Dworecka-Kaszak B, Adamski Z: Zarażenia grzybami z rodza-
diomycota. Owocniki mają około 5 cm wysokości, ju Malassezia. Wyd. SGGW, Warszawa 2005.
są osadzone na delikatnym trzonku z szarobrązo- 3. Kreger-van Rij NJW (red.): The Yeasts, a taxonomic study.
Elsevier Sc. Pub. B. V., Amsterdam 1984.
wym kapeluszem, z czerwonoczarnym rewersem.
4. Krzyściak P, Skóra M, Macura AB: Atlas grzybów chorobo-
Zarodniki podstawkowe (basidiosporae) są ciemno- twórczych człowieka. MedPharm Polska, Wrocław 2011.
brązowe, elipsoidalne (9–12 × 6–7 µm). Obok pod- 5. Kurnatowska A: Przewodnik do ćwiczeń z mikologii lekarskiej.
stawek występują cystydy hymenialne. PZWL, Warszawa 1973.
6. Midgley G, Hay RJ, Clayton YM: Diagnosis in color medical
mycology. Mosby-Wolfe, London 1997.
7. Odds FC: Candida and candidiasis. Leicester University Press,
Hormographiella verticillata Guarro et al. 1992
Leicester 1988.
8. Richardson MD, Warnock DW: Fungal infection-diagnosis and
Stadium anamorficzne management. Blackwell Publising, Oxford 2003.
Strzępki bezbarwne, o szerokości 1,5–5,0 µm. Ko- 9. Freydiere A M, Guinet R, Boiron P: Yeast identification in
nidiofory słabo zróżnicowane, krótkie, proste, nie- the clinical microbiology laboratory: phenotypical methods.
Med. Mycol. 2001, 39, 9–33.
podzielone, z konidiotwórczymi odgałęzieniami,
10. Stringer JR, Beard CB, Miller RF, Wakefield AE: A new
rozszerzone na szczycie; każde z odgałęzień wy- name (Pneumocystis jiroveci) for Pneumocystis from humans.
twarza konidiotwórcze strzępki. Konidia są cy- Emerg. Infect. Dis. 2002, 8, 9, 91−96.
134
A. KURNATOWSKA
MYKOLOGIA
Redakcja
P. KURNATOWSKI
ALICJA KURNATOWSKA
MEDYCZNA PIOTR KURNATOWSKI
MYKOLOGIA
Różne czynniki biotyczne (priony, wirusy, bakterie, jących rozwojowi grzybicy. W ostatnich latach
MYKOLOGIA MEDYCZNA
grzyby, pasożyty) tworzą naturalną lub choro- obserwuje się wzrost częstości grzybic jednoogni-
botwórczą biotę organizmu człowieka. Kilkaset ga- skowych, wieloogniskowych i uogólnionych, co
tunków grzybów, występujących we wszystkich czę- związane jest ze zwiększającą się populacją osób
ściach biosfery, wykazuje potencjalne działanie podatnych na zakażenia.
MEDYCZNA
patogenne w stosunku do ludzi, którzy we wszyst- Podręcznik przygotowany przez nauczycieli
kich okresach ontogenezy, począwszy od rozwoju akademickich różnych specjalności, zajmujących
wewnątrzmacicznego, narażeni są na ich ekspo- się od wielu lat problemami mykologii medycz-
zycję. Rozwój nowoczesnych metod diagnostycz- nej u ludzi i zwierząt, adresowany jest zarówno
nych powoduje wykrywanie nowych patogenów, do studentów (kierunki medyczne i biologiczne),
a badanie mykobioty tylko jamy ustnej osób zdro- jak i do lekarzy medycyny i weterynarii różnych
wych, przeprowadzone metodami biologii mo- specjalności, a także innych pracowników służby
lekularnej, wykazało obecność 101 gatunków zdrowia (diagności laboratoryjni, pielęgniarki, ra-
należących do 85 (75 dających się hodować) ro- townicy medyczni, fizjoterapeuci). Publikacja
dzajów grzybów. Jednocześnie obserwuje się spełni swoje zadanie, jeżeli przyczyni się do po-
zmiany w prewalencji poszczególnych gatunków szerzenia wiedzy na temat chorób ludzi i zwie-
i pojawianie się szczepów opornych na antybio- rząt, których czynnikami etiologicznymi są grzyby,
tyki oraz chemioterapeutyki przeciwgrzybiczne wpłynie na ich zwiększoną częstość wykrywania,
o coraz większej aktywności enzymatycznej w sto- a tym samym zwalczania; uświadomi zagrożenia,
sunku do tkanek ludzkich. Możliwość ujawnienia jakie stanowią grzybice i wywoła dyskusję wśród
właściwości patogennych grzybów zależy m.in. od adresatów książki.
stanu żywiciela i występowania czynników sprzyja- Z przedmowy
www.edraurban.pl