ISOLASI BAKTERI PENGHASIL SELULOSA DARI TANAH

GAMBUT RIAU, BUAH JERUK DAN BUAH ANGGUR: APLIKASI

DALAM INDUSTRI SERAT TEKSTIL

Asido Silitonga1), Delita Zul2)

1)
Mahasiswa Program S1 Biologi
2)
Bidang Mikrobiologi Jurusan Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Kampus Bina Widya Pekanbaru, 28293, Indonesia
asidosilitonga05@gmail.com

ABSTRACT

Efforts to obtain plant cellulose require energy and can damage the environment,
so an alternative source of cellulose that can be renewed with a more efficient result is
bacterial cellulose. For this reason, this study aims to obtain bacterial isolates that have the
potential to produce cellulose pellicles which can be applied in the textile fiber industry.
The sample was grown on hestrin-schramm medium and incubated. The cellulose mat
formed was then gradually diluted and inoculated into the glucose ethanol and yeast extract
medium. The isolates that produced the clear zone were then purified on glucose ethanol
and yeast extract medium to measure the Z/K ratio. Then the production is carried out using
a modified production medium with the addition of coconut water. The cellulose pellicle
formed was then purified and the dry weight and moisture content were calculated. At the
time of isolation, only grape and orange samples could produce cellulose mats, while peat
soil samples were unable to form cellulose mats and cellulose pellicles. At the time of
selection, 8 isolates were obtained from grapes and 5 isolates from citrus fruits that
produced clear zones. However, at the time of production, only A8 isolates from grapes
were able to produce cellulose pellicles. The resulting cellulose pellicle is thick, dense and
white in color.

Keywords : Hestrin-schramm medium, glucose ethanol and yeast extract medium,

cellulose pellicle, cellulose, clear zone

1
 ABSTRAK

Upaya untuk memperoleh selulosa tanaman sangat membutuhkan energi dan dapat
merusak lingkungan, sehingga diperlukan alternatif sumber selulosa yang dapat
diperbaharui dengan hasil yang lebih efisien yaitu selulosa bakteri. Untuk itu penelitian ini
bertujuan mendapatkan isolat bakteri yang berpotensi dalam menghasilkan pelikel selulosa
yang dapat diapikasikan di bidang industri serat tekstil. Metode yang digunakan adalah
sampel ditumbuhkan pada medium hestrin-schramm dan diinkubasi. Tikar selulosa yang
terbentuk kemudian dilakukan pengenceran bertahap dan diinokulasi ke dalam medium
glucose ethanol dan yeast extract. Isolat yang menghasilkan zona bening kemudian
dimurnikan pada medium glucose ethanol dan yeast extract untuk diukur rasio Z/K.
Kemudian dilakukan produksi menggunakan medium produksi yang dimodifikasi dengan
penambahan air kelapa. Pelikel selulosa yang terbentuk kemudian dipurifikasi dan dihitung
berat kering serta kadar airnya. Pada saat isolasi hanya sampel anggur dan jeruk yang dapat
menghasilkan tikar selulosa sedangkan sampel tanah gambut tidak dapat membentuk tikar
selulosa dan pelikel selulosa. Pada saat seleksi dari buah anggur didapatkan 8 isolat dan
dari buah jeruk 5 isolat yang menghasilkan zona bening. Namun pada saat produksi hanya
isolat A8 yang berasal dari buah anggur yang mampu menghasilkan pelikel selulosa.
Pelikel selulosa yang dihasilkan tebal, padat dan bewarna putih.
Keywords : Medium hestrin-schramm, medium glucose ethanol dan yeast extract, pelikel
selulosa, selulosa, zona bening

2
PENDAHULUAN
Selulosa merupakan salah satu
polimer yang tersedia melimpah di alam
(Kontturi 2005). Sejauh ini telah
dihasilkan sekitar 100 milyar ton selulosa
per tahun yang diekstrak dari tanaman
(Fessenden dan Fessenden 1982). Salah
satu aplikasi kegunaan selulosa adalah
bidang industri serat tekstil. Serat tekstil
merupakan serat yang digunakan untuk
pembuatan benang, tali dan kain. Untuk
memenuhi kebutuhan serat tekstil,
perusahaaan-perusahaan tekstil Indonesia
memperoleh bahan baku selulosa dengan
cara mengekstrak selulosa dari tanaman.
Hal ini menyebabkan deplesi dalam
sumber daya hutan yang menimbulkan
banyak masalah lingkungan.
Oleh karena itu, sangat penting
untuk mencari alternatif lain pengganti
selulosa dari tanaman. Salah satu
pendekatan untuk mengurangi produksi
selulosa dari tanaman adalah produksi
selulosa menggunakan sistem mikroba
mengisolasi 10 isolat penghasil selulosa
dari buah-buahan dan satu isolat
diantaranya yaitu isolat F6 asal buah apel
mampu menghasilkan selulosa dalam
jumlah banyak. Penelitian Singh et al.
(2017) berhasil mengisolasi 34 isolat dari
anggur busuk dan salah satu isolat
Gluconacetobacter xylinus berpotensi
menghasilkan selulosa dalam jumlah
melimpah.
Selulosa untuk diaplikasikan ke
dunia industri harus memiliki kriteria
tertentu, baik di bidang industri pulp dan
kertas, insulator panas bangunan, mesin
yaitu bakteri (Jahan et al. 2012). Selulosa
yang dihasilkan oleh bakteri disebut
sebagai bacterial cellulose (BC) atau
selulosa baktreri. Selulosa bakteri
merupakan polimer ekstraseluler yang
dieksresikan oleh bakteri ke luar sel
ketika ditumbuhkan pada media yang
mengandung glukosa. Menurut Singh et
al. (2017) beberapa bakteri yang dapat
menghasilkan selulosa adalah spesies dari
bakteri gram negatif yaitu Pseudomonas,
Salmonella, Agrobacterium, Azotobacter,
Rhizobium, Sarcina, Gluconacetobacter
(Aydin dan Nuran 2009),
Komagateibacter hansenii (Lima et al.
2017) dan Gluconacetobacter xylinus
(Singh et al. 2017).
Menurut Neera et al. (2014) ada
enam isolat bakteri penghasil selulosa
yang berhasil diisolasi dari buah-buahan
(apel, pisang, mangga, jeruk dan
semangka) dan teh kombucha (minuman
fermentasi). Jahan et al. (2012) berhasil
dan yang terutama untuk industri serat
tekstil. Kriteria selulosa untuk aplikasi
pada industri serat tekstil harus memiliki
panjang serat dan kekuatan tarik yang
tinggi (Novarini dan Mochammad 2015).
Berdasarkan kriteria tersebut, selulosa
bakteri memiliki keunggulan yang sesuai
yaitu tingkat kemurnian yang tinggi,
kristalinitas yang tinggi, sifat mekanik
yang sangat baik dan kapasitas menahan
air yang tinggi, kekuatan tarik tinggi,
mudah terurai, nontoksik dan
nonalergenik (Suryanto 2017).
3
METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat
Penelitian dilakukan pada bulan
Oktober 2019 sampai dengan Agustus
2020 di Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas
Riau.
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah timbangan analitik,
tabung reaksi (Pyrex), autoklaf (Model
25X-2), mikropipet, blue tip atau yellow
tip, cawan petri, jarum ose, beaker glass,
microwave (Samsung), rak tabung reaksi,
oven sterilisasi (Cosmos), lampu spiritus,
hot plate magnetic stirrer, jangka sorong,
sprayer, dryglasky, erlenmeyer dan vortex
(Fision; Whirli Mixer), shaker inkubator,
botol selai, pH meter, oven inkubator dan
soil tester.
Bahan-bahan yang digunakan
dalam penelitian ini adalah tali plastik,
plastik sampel zip lock, alumunium foil,
NaCl 0,85%, spiritus, akuades, larutan
NaOH, larutan HCl, alkohol 70%,
spiritus, glukosa, ekstrak yeast, etanol
absolut, CaCO3, agar bacto, pepton,
Na2HPO4, asam sitrat monohidrat, air
kelapa muda, asam asetat, buah jeruk
Taluk Kuantan, buah anggur Aceh dan
tanah gambut Riau.
Pengambilan Sampel Tanah Gambut,
Buah Jeruk dan Buah Anggur
Sampel tanah gambut disampling
dari Cagar Biosfer Giam Siak Kecil Bukit
Batu, Provinsi Riau. Sampel tanah
gambut diambil di dari 4 lokasi yang
berbeda, yaitu: sampel tanah gambut yang
ditanami kelapa sawit terdiri dari 2 jenis
kelapa sawit yaitu berumur tua (9-10
tahun) dan yang paling tua (15 tahun),
tanah gambut yang ditanami karet
berumur 5-6 tahun dan tanah gambut
yang ditanami buah-buahan (rambutan,
nenas, jambu, mangga, dan lain-lain).
Tanah gambut diambil dengan cara
menentukan tempat yang sesuai,
kemudian diambil dari 5 titik yang
berbeda secukupnya dan dikompositkan
dan dilakukan hingga 3 kali ulangan.
Sampel tanah gambut yang sudah diambil
dibawa ke laboratorium. Sampel buah
jeruk dan anggur diambil dari pedagang
yang berjualan di sekitar Jl. Tuanku
Tambusai. Berdasarkan informasi dari
pedagang buah jeruk diambil dari kebun
jeruk yang ada di Taluk Kuantan dan
buah anggur dikirim dari Aceh.
Pembuatan Garam Fisiologis
Sebanyak 0,85 g NaCl dilarutkan
dalam 100 ml akuades, sehingga
menghasilkan larutan garam fisiologis
0,85% dan disterilisasi menggunakan
autoklaf dengan suhu 121oC, tekanan 15
psi dan waktu 15-20 menit.
Pembuatan Medium
Medium Hestrin-Schramm (HS)
Medium HS dengan komposisi
sebanyak 5 gr pepton, 5 gr ekstrak yeast,
2,7 gr Na2HPO4, 2 gr asam sitrat
monohidrat, 20 gr glukosa, 2 gr asam
asetat dan 50 ml etanol dilarutkan ke
dalam 1000 ml Aquades menggunakan
erlenmeyer dengan pH medium 6,5 dan
dipanaskan menggunakan microwave
serta disterilisasi menggunakan autoklaf
dengan suhu 121oC, tekanan 15 psi dan
waktu 15-20 menit (Singh et al. 2017).
4
Medium Glucose Ethanol and Yeast
Extract (GEY)
Medium GEY dengan komposisi
sebanyak 50 ml etanol, 3 gr CaCO3, 20 gr
glukosa, 10 gr ekstrak yeast dan 20 gr
agar dilarutkan ke dalam 1000 ml
akuades menggunakan erlenmeyer
dengan pH medium 6,5 dan dipanaskan
menggunakan microwave dan disterilisasi
menggunakan autoklaf dengan suhu
121oC, tekanan 15 psi dan waktu 15-20
menit (Singh et al. 2017).
Medium Produksi (Hestrin-Schramm +
Air Kelapa Muda)
Medium HS dengan komposisi
500 ml ditambah dengan air kelapa muda
sebanyak 500 ml, sehingga perbandingan
medium produksi adalah 1:1. Selanjutnya
dimasukkan secara merata ke dalam botol
selai sebanyak 100 ml dan disterilisasi
menggunakan autoklaf dengan suhu
121oC, tekanan 15 psi dan waktu 15-20
menit.
Isolasi Bakteri Penghasil Selulosa
Tanah gambut ditimbang
sebanyak 1 gr menggunakan alumunium
foil pada timbangan analitik. Selanjutnya
bagian dalam buah jeruk dan buah anggur
diambil menggunakan skalpel steril.
Tanah, buah jeruk dan buah anggur yang
sudah ditimbang dan diambil masing-
masing diinokulasi ke dalam 100 ml
medium HS cair yang ada di botol selai
dengan tiga kali ulangan dan diinkubasi
selama 5-7 hari pada suhu ruang dalam
kondisi statis hingga biang atau tikar
pelikel selulosa terbentuk (Singh et al.
2017). Semua sampel dilakukan uji
isolasi dengan tiga kali ulangan. Total
sampel yang diuji dari tanah gambut
adalah 36, buah jeruk 9 dan buah anggur
9.
Seleksi Bakteri Penghasil Selulosa
Biang atau tikar selulosa yang
terbentuk pada medium HS diencerkan
hingga pengenceran 10 -4 menggunakan
garam fisiologis. Sebanyak 0,1 ml dari
pengenceran 10-4 diinokulasikan pada
medium GEY agar secara spread plate.
Selanjutnya, diinkubasi pada suhu
ruangan selama 48 jam pada suhu ruang.
Isolat bakteri yang positif menghasilkan
selulosa ditandai dengan terbentuknya
zona bening disekitar koloni. Isolat yang
menghasilkan zona bening kemudian
dimurnikan dengan cara masing-masing
ditumbuhkan pada media GEY dengan
cara ditotol dan diinkubasi selama 48 jam.
Zona bening yang terbentuk diamati dan
diukur diameternya menggunakan jangka
sorong (Singh et al. 2017). Semua isolat
yang menghasilkan zona bening
disubkultur pada media GEY miring.
Rumus untuk meghitung rasio diameter
zona bening dengan diameter koloni
adalah:
Rasio =
𝑍
=
𝐷𝑖𝑎𝑚𝑒𝑡𝑒𝑟 𝑧𝑜𝑛𝑎 𝑏𝑒𝑛𝑖𝑛𝑔 (𝑐𝑚)
𝐾 𝐷𝑖𝑎𝑚𝑒𝑡𝑒𝑟 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 (𝑐𝑚)
Keterangan:
Z= Diameter zona bening
K= Diameter koloni
Produksi dan Purifikasi Selulosa dari
Isolat Terpilih
Pembuatan Starter
Isolat bakteri yang sudah
disubkultur diambil menggunakan jarum
ose bulat, 1 ose bakteri diinokulasi pada
tabung reaksi yang berisi 3 ml medium
HS dan diinkubasi dalam shaker
5
inkubator pada suhu 28oC selama 18 jam menghitung jumlah produksi selulosa
dengan kecepatan 150 rpm. menggunakan rumus:
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔 (𝑔𝑟)
Produksi Selulosa = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 (𝑚𝑙)
Produksi Selulosa
Sebanyak 2 ml (2%) starter
diinokulasi kedalam medium produksi. Analisis Data
Kultur produksi diinkubasi selama 5-7 Data hasil isolasi, seleksi dan
hari pada suhu ruang secara statis. penentuan berat kering dan kadar air
Produksi selulosa ditandai dengan pelikel selulosa dianalisis secara
terbentuknya pelikel pada permukaan atas deskriptif.
medium. Perlakuan diulang sebanyak 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
kali (Singh et al. 2017).
Isolasi Bakteri Penghasil Selulosa pada
Purifikasi Selulosa Medium HS
Pelikel selulosa yang terbentuk Hasil isolasi pada lima puluh
dari masing-masing sumber isolat empat sampel menunjukkan tidak semua
kemudian dicuci menggunakan etanol dan sampel yang diuji berhasil membentuk
akuades, lalu dipanaskan di atas hot plate pelikel selulosa, tetapi berbentuk tikar
magnetic stirrer selama 40 menit dengan selulosa yang berada di atas permukaan
akuades untuk menghilangkan residu gula medium. Semua sampel buah anggur dan
dan dicuci kembali menggunakan larutan jeruk berhasil membentuk tikar selulosa
NaOH selama 20 menit. Kemudian dan semua sampel tanah gambut tidak
dinetralkan kembali dengan akuades. berhasil membentuk tikar selulosa. Hasil
Penentuan Kadar Air Pelikel Selulosa isolasi berupa tikar selulosa yang
Pelikel selulosa yang sudah murni terbentuk dinyatakan sebagai kandidat
kemudian diukur berat basahnya bakteri selulosa dan dilakukan uji seleksi.
menggunakan timbangan analitik. Sampel tanah gambut tidak dapat
Kemudian pelikel dikeringkan menghasilkan tikar selulosa disebabkan
menggunakan oven inkubator dengan tidak terdapat isolat bakteri yang
suhu 1050C hingga berat pelikel konstan berpotensi menghasilkan pelikel selulosa,
(Widiyaningrum et al. 2017). Untuk sedangkan sampel buah anggur dan jeruk
menghitung kadar air pelikel selulosa menghasilkan tikar selulosa karena
menggunakan rumus: terdapat isolat yang diduga berpotensi
menghasilkan pelikel selulosa sehingga
Kadar air (%) =
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ (𝑔𝑟)−𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔 (𝑔𝑟)
x 100% dilakukan uji seleksi. Tikar selulosa
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ (𝑔𝑟)
adalah lembaran tipis yang gagal
membentuk pelikel selulosa yang berada
Penentuan Produksi Selulosa di atas permukaan medium.
Pelikel selulosa yang didapat Tikar selulosa terbentuk karena
kemudian dilakukan penentuan produksi adanya proses fermentasi yang dihasilkan
selulosa (Awang et al. 2018). Untuk oleh bakteri penghasil selulosa, sub unit
selulosa akan berikatan dengan sub unit
selulosa lain untuk membentuk tikar

6
selulosa. Tikar selulosa tersebut akan
terapung di permukaan medium agar
oksigen dapat berdifusi ke dalam
medium. Tujuan pembentukan tikar
selulosa ini adalah melindungi bakteri
dari sinar ultraviolet, predator dan
kompetitor (Iguchi et al. 2000).
Proses pembentukan selulosa
bakteri diawali dengan ±10.000 monomer
glukosa yang diikat dengan ikatan
glukosida β-1,4. Setiap monomer glukosa
memiliki tiga gugus hidroksi (-OH).
Sebanyak 36 molekul selulosa terikat
bersama-sama oleh ikatan hidrogen
membentuk seberkas fibril elementer.
Fibril elementer bergabung membentuk
mikrofibril, kemudian mikrofibril
bergabung membentuk fibril dan akhirnya
membentuk serat-serat selulosa (Sanjaya
2001).
Seleksi Bakteri Penghasil Selulosa pada
Medium GEY
Pada tahap seleksi didapatkan
koloni bakteri yang menghasilkan zona
bening di sekeliling koloni. Pada tahap
seleksi awal, sebanyak delapan isolat
yang diisolasi dari buah anggur dan lima
isolat yang diisolasi dari buah jeruk
berhasil membentuk zona bening. Tiga
belas isolat yang menghasilkan zona
bening tersebut, kemudian disubkultur
ulang ke medium GEY untuk diukur zona
bening yang terbentuk. Tabel 1
menyajikan rasio Z/K dari masing-masing
isolat.

Tabel 1. Rasio Z/K 13 isolat yang berhasil diseleksi

Isolat Rasio Z/K
A1 2,56
A2 6
A3 4,1
A4 4,31
A5 2,03
A6 2,83
A7 2,38
A8 2,11
JTK 1 3,8
JTK2 5,92
JTK3 5,63
JTK4 6,99
JTK 5 5,33
Keterangan: A (Anggur), JTK (Jeruk Taluk Kuantan)

Rasio Z/K tertinggi yang bening yang berbeda-beda. Zona bening

dihasilkan isolat yang berasal dari buah terbentuk akibat dari proses pemecahan
anggur adalah 6, sedangkan yang terkecil molekul glukosa yang telah dilakukan
adalah 2,03. Sedangkan untuk isolat yang oleh bakteri akibat dari proses
berasal dari buah jeruk, rasio Z/K terbesar metabolisme sel bakteri secara
adalah 6,99 dan yang terkecil adalah 3,8. ekstraseluler. Adanya perbedaan ukuran
Zona bening yang dihasilkan bakteri yang zona bening yang berbeda-beda yang
berhasil diisolasi memiliki ukuran zona dihasilkan oleh masing-masing isolat

7
menunjukkan adanya keberagaman tiga isolat yang menghasilkan zona
spesies bakteri yang telah diisolasi. Zona bening terbesar kemudian dilakukan uji
bening yang terbentuk berkorelasi positif produksi pelikel selulosa. Gambar 1
dengan kemampuan isolat dalam menunjukan zona bening yang terbentuk
memproduksi suatu senyawa. Untuk itu dari isolat anggur dan jeruk.

a b

Zona bening

Koloni

Gambar 1. Rasio Z/K tertinggi: (a) isolat A3, (b) isolat JTK 5

Produksi Selulosa Bakteri Secara Statis pelikel selulosa seperti yang disajikan
Menggunakan Medium Produksi pada Gambar 2 dan isolat lainnya hanya
Hasil produksi menunjukkan membentuk tikar selulosa.
hanya isolat A8 yang berhasil membentuk

Pelikel selulosa

Gambar 2. Pelikel selulosa isolat A8 pada medium HS ditambah air kelapa muda inkubasi
selama tujuh hari

8
 Pelikel selulosa yang terbentuk
yang dihasilkan isolat A8 menunjukkan
karakteristik morfologi pelikel selulosa
yaitu tebal dan bewarna putih serta
kenyal. Menurut Esa et al. (2014) pelikel
selulosa terbentuk karena adanya aktivitas
bakteri dan biasanya pelikel tersebut
diproduksi oleh kelompok bakteri asam
asetat dalam medium sintetik maupun
non sintetik melalui proses fermentasi.
Menurut Suwannapinunt et al. (2007)
selulosa yang dihasilkan dengan
menggunakan metode fermentasi statis
berbentuk lembaran selulosa yang tebal
Menurut Krystynowicz et al. (2002) pada
kultur statis akan terbentuk lembaran
selulosa bertekstur seperti gelatin di
permukaan media biakan cair yang di
dalamnya terdapat sel-sel bakteri yang
terperangkap dalam jaringan serat
selulosa. Menurut Zhou et al. (2007),
pada saat produksi selulosa menggunakan
metode kultur statis, pelikel selulosa yang
dihasilkan yaitu selulosa I alpha, dimana
selulosa I alpha merupakan kualitas
selulosa yang paling tinggi (murni).
Isolat yang tidak dapat
menghasilkan pelikel selulosa, dilakukan
uji produksi berulang kali dengan
berbagai ukuran pH medium produksi,
jumlah medium produksi, hingga
mencoba dengan berbagai pH akan tetapi
tetap tidak berhasil memicu pembentukan
pelikel selulosa.
Medium produksi yang digunakan
dalam penelitian ini adalah medium HS
yang dimodifikasi dengan air kelapa.
Medium HS merupakan medium produksi
yang mengandung nutrisi yang dapat
memicu pertumbuhan sel bakteri yang
dapat menghasilkan selulosa. Dimana
komposisi dari medium ini adalah
glukosa sebagai sumber karbon, pepton
sebagai sumber nitrogen, yeast ekstrak
sebagai sumber nitrogen, Na2HPO4
sebagai larutan penyangga, asam sitrat
dan asam asetat sebagai pengatur pH,
etanol sebagai pelarut bahan serta
akuades sebagai pelarut dan sumber
mineral bagi bakteri. Sedangkan nutrisi
yang terkandung dalam air kelapa adalah
gula sukrosa 1,28%, sumber mineral yang
beragam antara lain Mg2+ 3,54 gr/l
(Pracaya 1982), serta adanya faktor
pendukung pertumbuhan merupakan
senyawa yang mampu meningkatkan
pertumbuhan bakteri penghasil pelikel
selulosa.
Adanya sukrosa dalam air kelapa
akan dimanfaatkan oleh bakteri sebagai
sumber energi, maupun sumber karbon
untuk membentuk senyawa metabolit
diantaranya adalah selulosa. Sedangkan
adanya mineral dalam substrat akan
membantu meningkatkan aktifitas enzim
kinase dalam metabolisme di dalam sel
bakteri untuk menghasilkan material
selulosa bakteri (Lapuz et al. 1967).
Purifikasi Selulosa Bakteri
Pelikel selulosa yang didapatkan
dari isolat A8 kemudian dipurifikasi.
Purifkasi menggunakan etanol bertujuan
untuk menghilangkan sisa medium
maupun koloni bakteri yang lengket pada
pelikel selulosa, sedangkan pencucian
menggunakan akuades steril bertujuan
untuk membilas dan menetralkan kembali
pelikel selulosa. Tujuan dipanaskan diatas
hot plate magnetic stirrer selama 40
menit menggunakan akuades adalah
untuk menghilangkan residu gula dan
asam, sedangkan dicuci menggunakan
larutan basa NaOH selama 20 menit
berfungsi untuk menaikkan pH pelikel
karena kandungan asam yang sudah
9
keluar dari pelikel, selanjutnya
dinetralkan kembali menggunakan
akuades steril.
a b
Gambar 3. Pelikel selulosa: (a) berat basah, (b) berat kering
Kadar air pelikel selulosa
merupakan persentase air yang
terperangkap dalam selulosa, dimana
kemampuan bakteri dalam mengkonversi
gula dengan baik menjadi selulosa
menyebabkan air pada media fermentasi
berkurang karena selama pembentukan
lapisan pelikel selulosa, rongga-rongga
yang terdapat dalam pelikel selulosa akan
terisi oleh air sehingga selulosa menjadi
tebal dan mengandung air (Chawla et al.
2009). Menurut Widyaningrum et al.
(2017) kualitas pelikel selulosa dikatakan
baik apabila mengandung kadar air lebih
dari 85%. Pelikel selulosa yang
dihasilkan isolat A8 berkualitas baik,
karena memiliki kadar air sebesar 92%.
Penentuan Produksi Selulosa
Produksi selulosa yang diperoleh
dari isolat A8 adalah sebanyak 3,6 gr/L.
Menurut Sarkono (2010) berhasil
Penentuan Kadar Air Pelikel Selulosa
Berat basah yang didapatkan
sebelum pelikel dikeringkan adalah 4,52
gr. Berat kering yang didapatkan adalah
0,36 gr (Gambar 3). Sehingga kadar air
pelikel selulosa adalah 92%.
mengisolasi strain bakteri asam asetat dari
cairan fermentasi nata dan buah tropis.
Salah satu isolat yang berpotensi
menghasilkan selulosa adalah isolat
SLK1 yang diisolasi dari buah salak dan
menghasilkan produksi selulosa sebesar
2,99 g/L. Sedangkan Korusumi et al.
(2009) berhasil mengisolasi isolat yang
berpotensi dalam menghasilkan selulosa,
dimana sampel yang digunakan adalah jus
buah. Produksi selulosa tertinggi berasal
dari jus jeruk dengan produksi selulosa
sebesar 6,9±0,2 %. Menurut Kongruang
(2008) isolat A. xylinum TISTR 998, A.
xylinum TISTR 893, A. xylinum TISTR
975 berhasil memproduksi selulosa
sebesar 520 g/L, 576,66 gr/L, 546,66 gr/L
menggunakan medium jus nenas dan
berhasil memproduksi selulosa sebesar
553,33 g/L, 453,33 gr/L, 243,33 gr/L
menggunakan medium air kelapa.
10
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh
maka dapat disimpulkan bahwa dari 54
sampel yang diuji, tidak ada kultur yang
berhasil membentuk pelikel selulosa.
Akan tetapi, kultur sampel dari buah
anggur dan jeruk hanya membentuk tikar
selulosa. Terdapat 13 isolat yang berhasil
diseleksi dari buah anggur dan buah jeruk
dan diduga berpotensi dalam
menghasilkan pelikel selulosa. Kisaran
rasio Z/K yang didapatkan dari isolat
anggur adalah 2,03-6 dan isolat jeruk
adalah 3,8-6,99. Pelikel selulosa yang
dihasilkan dari isolat A8 mempunyai
tekstur kenyal, tebal dan bewarna putih.
Produksi selulosa dari isolat A8 adalah
3,6 gr/L dan kadar air 92%.
SARAN
Perlu dilakukan penelitian
kembali tentang identifikasi spesies
bakteri isolat A8, serta dilakukan
karakterisasi pelikel selulosa yang
dihasilkan isolat tersebut seperti berat
kering selulosa, rendemen pelikel
selulosa, morfologi struktur selulosa dan
uji kekuatan tarik pelikel selulosa.
DAFTAR PUSTAKA
Aydin YA, Nuran DA. 2009. Isolation of
Cellulose Producing Bacteria
from Wastes of Vinegar
Fermentation. Proceedings of the
World Congress on Engineering
and Computer Science 1:20-22.
Awang AN, Azura A, Mohamad H,
Mahamad M, Dzun NJ. 2018.
Isolation and Identification of
Bacteria-producing Cellulose
from Topical Fruit for Halal
Capsule Application. Advanced
Science Engineering Information
Technology 8(4-2): 1591-1596.
Chawla PR, Bajaj IB, Survase SA,
Singhal RS. 2009. Microbial
Cellulose: Fermentative
Production and Applications.
Food Technology and
Biotechnology 47(2): 107-124.
Esa F, Tasirin ST, Rahman NA. 2014.
Overviev of Bacterial Cellulose
Production and Aplication.
Agriculture and Agricultural
Science Procedia 2: 113-119.
Fessenden RJ, Fessenden JS. 1982. Kimia
Organik. Penerbit Erlangga.
Jakarta.
Iguchi M, Yamanaka S, Budhiono A.
2000. Bacterial cellulose a
masterpiece of nature ’ s arts.
Journal of Mater Science 35:
261–270.
Jahan F, Vinod K, Garima R, Saxena RK.
2012. Produksi Mikroba Selulosa
Oleh Bakteri Yang Diisolasi Dari
Buah. Appl Biochem Biotechnol
167: 1157-1171.
Kongruang S. 2008. Bakteri Selulosa
Produksi oleh Acetobacter
xylinum Regangan dari Limbah
Produk Pertanian. Appl. Biochem,
Biotechnol 148: 245-256.
Kontturi EJ. 2005. Chemistry of
Cellulose: from Natural Fibres to
Model Surfaces Proefschrif
11
 Technische. Universiteit
Eindhoven. Finland.
Korusumi A, Sasaki C, Yamashita Y,
Nakamura Y. 2009. Utilization of
various fruit juices for production
of bacterial cellulose by
Gluconacetobacter xylinus NBRC
13693. Carbohydrate Polymers
76: 333-335.
Krystynowicz AW, Czaja W, Romanovic
D, Brown RM. 2002. Factors
Affecting the Yield and Properties
of Bacterial Cellulose. Journal of
Industrial Microbiology and
Biotechnology 29: 189-195.
Lapuz MM, Gallardo EG, Palo. 1967.
The Nata Otrganism-cultural
requirements, Characteristics and
Identify. The Philippine Journal
of Science 96(2): 91-107
Lima HLS, Nascimento ES, Andrade FK,
Brigida AIS, Borges MF, Cassales
AR, Muniz CR, Souza Filho
MdeSM, Morais JPS, Rosa MdeF.
2017. Bacterial Cellulose
Production By Komagataeibacter
hansenii ATCC 23769 Using Sisal
Juice - An Agroindustry Waste.
Brazillian Journal of Chemical
Engineering 34(3):671-680.
Neera, Karna VR, Harsh VB. Produksi
Selulosa oleh Gluconacetobacter
pada Sampel Buah dan Teh
Kombuca. Appl Biochem
Biotechnol 176:1162-1173.
Novarini E, Mochammad DS. 2015.
Potensi Serat Rami (Boehmeria
nivea) Sebagai Bahan Baku
Industri Tekstil Dan Produk
Tekstil Dan Tekstil Teknik.
Jurnal Ilmiah Arena Tekstil 30(2).
Pracaya. 1982. Bertanam Tebu. Penebar
Swadaya. Jakarta.
Sarkono. 2010. Seleksi dan Identifikasi
Strain Bakteri Gluconacetobacter
berkemampuan unggul dalam
menghasilkan Selulosa dari
Cairan Sisa Fermentasi Nata De
Coco. Laporan Akhir Hibah
Penelitian Disertasi Doktor,
Lembaga Penelitian dan
Pengabdian Masyarakat UGM.
Yogyakarta.
Singh O, Parmjit SP, Harish KC. 2017.
Isolation and Characterization of
Cellulose Producing Bacterial
Isolate from Rotten Grapes.
Biosciences Biotechnology
Research Asia 14(1):373-380.
Suryanto H. 2017. Analisis Struktur Serat
Selulosa Dari Bakteri. Prosiding
3: 2476-9983.
Suwannapinunt N, Burakorn J,
Thaenthanee S. 2007. Effect of
Culture (BC) Production from A.
xylinum TISTR976 and Physical
Properties of BC Parchment
Paper. Suranaree Journal of
Science and Technology 14(4):
357-365.
Sanjaya. 2001. Pengaruh Anhidrasetat
terhadap Struktur Molekuler Kayu
12
 dalam Stabilisasi Dimensi Kayu
Pinus merkusii. JMS 6(1): 21-32.
Widyaningrum P, Dewi M, Bambang P.
2017. Evaluasi Sifat Fisik Nata de
coco dengan Ekstrak Kecambah
sebagai Sumber Nitrogen. ISBN
978-602-61599-6-0.
Zhou L, Sun L, Wu DPQH, Yang JZ,
Yang SL. 2007. Influence of
culture mode on bacterial
cellulose production and its
structure and property. Wei Sheng
Wu Xue Bao 47: 7-914.
13
14