VOLUME 7 NOMOR 1 JUNI 2020 ISSN 2548 – 611X

JURNAL
BIOTEKNOLOGI & BIOSAINS INDONESIA

Homepage Jurnal: http://ejurnal.bppt.go.id/index.php/JBBI

PROFIL HEMATOLOGI TIKUS (Rattus norvegicus)

GALUR SPRAGUE-DAWLEY JANTAN UMUR 7 DAN 10 MINGGU

Hematology Profile of Sprague-Dawley Male Rats (Rattus norvegicus)

Aged 7 and 10 Weeks
Idah Rosidah*, Sri Ningsih, Tiya Novita Renggani, Kurnia Agustini, Julham Efendi
Pusat Teknologi Farmasi dan Medika, Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi,
PUSPIPTEK, Setu, Tangerang Selatan, Banten
*Email: idah.rosidah@bppt.go.id

ABSTRACT
Currently, the normal hematology profile has not been yet available for outbred rats in
Indonesia. Most of the researchers use the data of hematology profile from references outside
Indonesia in which the breeding environment is different. This study aimed to obtain a
hematology profile of Sprague-Dawley male rats aged 7 and 10 weeks. The animals were
obtained from the Laboratory of Animal Experiment, NADFC. Blood was drawn from the retro-
orbital sinus and then analyzed to obtain the hematology profile including erythrocytes,
hemoglobin, hematocrit, MCV, MCH, MCHC, leukocytes. Statistically significant differences
for erythrocytes, hemoglobin, MCV, MCHC, thrombocyte, and leukocytes parameters were
observed between rats aged 7 and 10 weeks. However, there were no statistically significant
differences observed on MCH, thrombocyte, and body weight parameters. Data presented
here would be useful as a reference for hematology research as well as in evaluating
alterations in blood parameters.

Keywords: erythrocyte, hematology, leukocyte, Sprague-Dawley, thrombocyte

ABSTRAK
Saat ini belum banyak tersedia informasi profil hematologi untuk hewan coba tikus yang
dikembangbiakkan di Indonesia. Kebanyakan peneliti menggunakan data profil hematologi
dari referensi luar Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan data hematologi tikus
jantan usia 7 dan 10 minggu. Hewan coba yang digunakan adalah tikus jantan galur Sprague-
Dawley yang diperoleh dari Laboratorium Hewan Percobaan-BPOM. Sebanyak 60 ekor tikus
jantan yang terdiri dari 30 ekor usia 7 minggu dan 30 ekor usia 10 minggu diambil darahnya
melalui sinus orbitalis. Selanjutnya, dianalisa jumlah sel eritrosit, hemoglobin, hematokrit,
MCV, MCH, MCHC, leukosit. Hasil analisis statistik menunjukkan terdapat perbedaan
signifikan antara tikus jantan usia 7 dan 10 minggu untuk parameter jumlah eritrosit,
hemoglobin, hematokrit, MCV, MCHC dan leukosit. Tetapi tidak terdapat perbedaan signifikan
untuk jumlah MCH, trombosit dan berat badan tikus. Data yang diperoleh dapat digunakan
sebagai referensi penelitian yang berhubungan erat dengan profil hematologi dan penyakit
kelainan darah lainnya.

Kata Kunci: eritrosit, hematologi, leukosit, Sprague-Dawley, trombosit

Received: 22 January 2020 Accepted: 03 May 2020 Published: 06 August 2020

136

PENDAHULUAN
Penggunaan hewan model (hewan coba)
sangat diperlukan dalam penelitian in vivo di
bidang biomedik. Hewan model berkontribusi
untuk memahami tentang fungsi gen, etiologi
dan mekanisme suatu penyakit, uji efektifitas
dan keamanan suatu obat atau bahan kimia.
Hewan model yang banyak digunakan untuk
penelitian antara lain tikus, mencit dan hewan
pengerat lainnya (Johnson 2012). Tikus
sebagai hewan model telah banyak digunakan
pada penelitian dikarenakan siklus hidupnya
pendek, biaya perawatan lebih murah, relatif
mudah perawatannya dan tersedia database
dalam menginterpretasikan data yang relevan
untuk manusia (Said dan Abiola 2014). Dari
75–100 juta per tahun hewan vertebrata yang
digunakan dalam penelitian, pendidikan dan
pengujian, hampir sekitar 33% diantaranya
adalah tikus (Baumans 2016). Tikus banyak
digunakan pada penelitian biomedik
diantaranya dalam bidang toksikologi,
gerontologi, kardiologi, kedokteran gigi,
imunologi, reproduksi, neurosains, dan
parasitologi (Andersen et al. 2016).
Tikus putih (Rattus novergicus) atau
dikenal juga dengan nama Norway Rat
merupakan hewan yang sering digunakan
untuk penelitian biomedik. Beberapa galur
tikus laboratorium yang umum digunakan
pada penelitian diantaranya Sprague-
Dawley, Wistar, Biobreeding, Long-Evans,
Zucker, Hairless, Royal College of Surgeons
dan Shaking Rat Kawasaki. Tikus Sprague-
Dawley merupakan galur yang banyak
digunakan dalam penelitian dengan
pertimbangan perkembangbiakannya yang
cepat, temperamennya yang tenang dan
relatif mudah penanganannya. Tikus
Sprague-Dawley dapat mencapai usia hingga
3,5 tahun, berat badan tikus dewasa berkisar
250–300 g untuk betina dan 450–520 g untuk
tikus jantan (Andreollo et al. 2012). Tikus
galur ini dikembangbiakan pertama kali oleh
Robert Worthington Dawley di Universitas
Wisconsin pada tahun 1925 dengan nama
dagang Sprague-Dawley®. Hingga saat ini,
perusahaan yang telah melakukan
pengembangbiakan tikus Sprague-Dawley
untuk tujuan penelitian dan komersial antara
lain adalah Charles River Laboratories,
Harlan Sprague Dawley Inc (sekarang Envigo
Inc), Taconic Biosciences dan The Jackson
Labs (Johnson 2012; Gileta et al. 2018).
J Bioteknol Biosains Indones – Vol 7 No 1 Thn 2020
Dalam penelitian laboratorium, tikus
sebagai hewan model harus memenuhi
persyaratan tertentu, antara lain memiliki
galur yang sama, jenis kelamin tertentu,
rentang usia tidak jauh berbeda, berat badan
merata, menunjukkan fisik yang sehat yang
dicirikan dengan mata cerah, aktivitas motorik
normal, bulu tidak berdiri dan harus
disesuaikan dengan tujuan penelitian,
misalnya untuk penelitian obat-obat hormonal
wanita maka digunakan tikus betina (BPOM
2014). Hewan model dalam penelitian
digunakan untuk memahami mekanisme
dasar suatu penyakit dan menemukan
metode untuk mencegah, mendiagnosis dan
mengobati suatu penyakit (Vandamme 2014).
Studi hematologi pada hewan dan manusia
penting dilakukan karena darah merupakan
sistem transportasi utama yang berfungsi
untuk mengedarkan substansi yang masuk
ke dalam tubuh dan yang dihasilkan tubuh
dari proses-proses metabolisme. Nilai
hematologi memberikan informasi penting
pada uji praklinis dan klinis suatu penelitian,
contohnya pada uji toksisitas obat atau
kandidat obat. Nilai hematologi juga berperan
untuk membantu menegakkan diagnosa,
menilai dan mengkarakterisasi suatu penyakit
(Ihedioha et al. 2004). Namun informasi
terkait profil hematologi normal tikus yang
dikembangbiakan secara lokal hingga saat ini
belum banyak ditemukan di Indonesia.
Umumnya penelitian yang dilakukan
menggunakan nilai profil hematologi
berdasarkan acuan dari referensi asing (Lillie
et al. 1996; Said dan Abiola 2014; Delwatta et
al. 2018). Pada hewan pengerat, variasi nilai
fisiologis antar galur dalam satu spesies
sangat tinggi, termasuk nilai hematologi.
Kisaran nilai hematologi normal bervariasi
pada individu jantan dan betina serta
perbedaan umur. Disamping itu, nilai
hematologi juga dipengaruhi oleh kondisi
geografis, seperti lokasi, iklim, suhu,
kelembaban, ketinggian, dan pencahayaan,
sehingga nilai hematologi bersifat spesifik
untuk suatu tempat, tidak dapat digeneralisir
(Fitria dan Sarto 2014). Pemeriksaan
hematologi sangat penting dilakukan untuk
menilai kesehatan awal hewan coba,
sehingga penelitian yang dilakukan
mendapatkan data yang valid. Selain itu,
hematologi dapat digunakan untuk menilai
keadaan penyakit yang terkait dengan
gangguan darah, penyakit menular, sistem
137
Profil Hematologi Tikus (Rattus norvegicus)... Rosidah et al.
kekebalan tubuh dan metabolisme
lipoprotein, regulasi glukosa, serta fungsi hati
dan ginjal (He et al. 2017). Berangkat dari
kondisi tersebut, maka studi ini bertujuan
untuk menyajikan gambaran hematologi
normal hewan tikus galur Sprague-Dawley
yang dikembangbiakkan di Indonesia pada
usia yang berbeda, yaitu 7 dan 10 minggu.
BAHAN DAN METODE
Tempat dan waktu penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium
Farmakologi dan Hewan, Pusat Teknologi
Farmasi dan Medika, Badan Pengkajian dan
Penerapan Teknologi (BPPT), LAPTIAB,
Kawasan PUSPIPTEK, Tangerang Selatan,
Banten. Waktu penelitian dimulai dari bulan
Maret–April 2018.
Bahan
Hewan coba dalam penelitian ini
diperoleh dari Laboratorium Hewan
Percobaan, Pusat Pengujian Obat dan
Makanan Nasional, Badan Pengawas Obat
dan Makanan (BPOM) yang beralamat di Jln.
Percetakan Negara No.29, Johar Baru,
Kec. Johar Baru, Kota Jakarta Pusat,
Daerah Khusus Ibukota Jakarta 10560 (S
6 11’ 18.49’’; E 106 51’ 32.659’’). Hewan
coba yang digunakan tikus putih jantan (Rattus
novergicus) galur Sprague-Dawley berusia 5
minggu pada saat tiba di Laboratorium
Farmakologi dan Hewan, kemudian tikus
dikondisikan dan dibesarkan hingga usia 7
dan 10 minggu (Gambar 1). Tikus mendapat
pakan normal yang dibeli dari perusahaan
Gambar 1. Tikus jantan galur Sprague-Dawley usia 10 minggu (sumber: dokumen pribadi)
138
pakan lokal dengan komposisi protein 21%,
lemak 4% dan serat 5% serta mendapat
minum berupa air mineral.
Metode
Hewan coba dikelompokkan secara
acak, dimana setiap kandang terdiri dari 3
ekor dan selanjutnya dipelihara pada kondisi
percobaan hingga waktu pengujian selesai.
Jumlah total hewan tikus yang digunakan
sebanyak 60 ekor tikus jantan. Kondisi ruang
pemeliharaan diatur sedemikian rupa dengan
temperatur ruang 20–26ºC, kelembaban 30–
70%, pencahayaan 12 jam terang dan 12 jam
gelap, serta memiliki aliran udara yang baik.
Hewan coba mendapatkan pakan dan minum
ad-libitum. Hewan yang sakit dengan ciri-ciri
mata keruh, bulu berdiri dan memperlihatkan
aktivitas motorik lemah tidak digunakan
dalam pengujian (NRC 2011). Penimbangan
berat badan tikus dilakukan dengan
menggunakan neraca digital (KERN®) dan
hasilnya dinyatakan dalam gram.
Pada saat hewan coba telah mencapai
usia 7 minggu, tikus yang telah dipuasakan
selama 8–10 jam sebelumnya (namun tetap
diberikan minum) dilakukan pengambilan
darah melalui sinus retro-orbitalis
menggunakan tabung kapiler hematokrit.
Darah ditampung ke dalam microtube yang
telah berisi heparin dengan konsentrasi 0,1%
(Parasuraman et al. 2010). Selanjutnya
microtube digoyang secara perlahan-lahan
dan segera dimasukkan ke dalam termos
pendingin agar darah tidak mengumpal.
Penentuan profil hematologi dilakukan
menggunakan alat Hematology Analyzer
5 cm

Sysmax XS-1000i yang menghasilkan
parameter berupa jumlah eritrosit, kadar
hemoglobin, hematokrit, Mean Corpuscular
Volume (MCV), Mean Corpuscular
Haemoglobin (MCH), Mean Corpuscular
Haemoglobin Concentration (MCHC), jumlah
total leukosit dan trombosit. Pada saat tikus
telah berusia 10 minggu, dilakukan proses
pengambilan darah dan pengukuran kadar
hematologi seperti yang dilakukan pada
minggu ke-7.
MCV atau volume eritrosit rata-rata
adalah indeks untuk menentukan ukuran sel
darah merah. Rumus untuk menghitung nilai
MCV (fL) adalah jumlah hematokrit (%) dibagi
jumlah eristrosit (sel µL–1). Indeks MCH atau
hemoglobin korpuskuler rata-rata merupakan
nilai yang mengindikasikan berat hemoglobin
rata-rata di dalam sel darah merah. Nilai MCH
(pg sel–1) ditentukan dengan cara jumlah
hemoglobin (g dL–1) dibagi jumlah eritrosit (sel
µL–1). Sedangkan indeks MCHC atau
konsentrasi hemoglobin eritrosit rata-rata
digunakan untuk mengukur hemoglobin rata-
rata dalam sel darah merah. MCHC (g dL–1)
dihitung dengan cara membagi jumlah
hemoglobin (g L–1) × 1000 dengan MCV (fL)
× jumlah eritrosit (sel µL–1).
Data yang diperoleh dari hasil
pengujian ditabulasi dan ditampilkan sebagai
nilai rata-rata ± standar deviasi. Data
dilakukan analisis secara statistik dengan
metode ANOVA untuk data parametrik dan
Kruskal-wallis untuk data non parametrik
dengan menggunakan program SPSS. Guna
melihat sejauh mana perbedaan antara
kelompok, analisis dilanjutkan dengan
metode LSD untuk data parametrik dan Mann
Whitney untuk data non parametrik. Adanya
perbedaan antar kelompok dinyatakan
dengan nilai signifikasi p<0,05 dan p<0,10.
Analisis statistik dilakukan pada tingkat
kepercayaan 95% dan 90% (Santosa 2018).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk
mengetahui profil/gambaran hematologi pada
tikus jantan galur Sprague-Dawley yang
dilakukan pada usia hewan 7 dan 10 minggu.
Pertimbangan pemilihan usia ini karena pada
umumnya pengujian farmakologi dilakukan
pada rentang usia tersebut. Usia tersebut
tergolong pada tikus antara pra-dewasa
sampai dewasa. Secara teknis akan sulit
J Bioteknol Biosains Indones – Vol 7 No 1 Thn 2020
mendapatkan sejumlah hewan uji dengan
usia yang sama karena adanya variasi
individu saat dilakukan breeding yang
menyebabkan kelahiran anak tikus tidak bisa
terjadi pada waktu yang sama. Penyebab lain
adalah keterbatasan fasilitas breeding
menyebabkan kemampuan untuk
menyediakan hewan tikus dalam jumlah yang
banyak pada usia yang sama sulit dilakukan.
Dengan dilakukannya evaluasi pada kedua
usia tersebut, akan diketahui gambaran
hematologi pada masing-masing usia dan
selanjutnya akan menjadi pertimbangan jika
terjawab ada beberapa parameter yang
berbeda secara signifikan.
Sebelum pengambilan darah, tikus
dipuasakan terlebih dahulu selama overnight
dan selanjutnya darah diambil dari sinus
retro-orbitalis. Pengambilan darah dilakukan
secara perlahan-lahan supaya tidak
menyakitkan hewan coba dan dijaga supaya
tidak terjadi gumpalan. Ke dalam microtube
ditambah larutan antikoagulan heparin 0,1%
dan digoyang perlahan-lahan untuk
mencegah lisis dan menggumpal. Mengingat
bahwa pengukuran hematologi merupakan
pengukuran seluler, maka adanya gumpalan
dapat mempengaruhi hasil, disamping juga
menyebabkan sumbatan pada mesin
pengukur. Pengukuran dilakukan
menggunakan alat secara otomatis dan
diperoleh hasil pengukuran jumlah eritrosit,
hemoglobin, hematokrit, MCV, MCH, MCHC,
leukosit dan trombosit. Hasil pengukuran
disajikan pada pada Tabel 1 dan Tabel 2.
Berdasarkan tabel tersebut, nilai hasil
pengukuran hematologi tidak banyak
bervariasi untuk semua parameter pada tikus
jantan usia 7 dan 10 minggu. Namun
berdasarkan hasil analisa statistik terhadap
ke-9 parameter uji tersebut menunjukkan ada
perbedaan secara signifikan beberapa
parameter uji antara tikus usia 7 dan 10
minggu. Perbedaan secara nyata ditemukan
pada 6 jenis parameter uji yaitu jumlah
eritrosit, hemoglobin, hematokrit, MCV,
MCHC dan leukosit (p<0,05 dan p<0,10).
Sementara jumlah MCH, trombosit dan berat
badan tidak berbeda signifikan pada kedua
usia pengukuran tersebut (p>0,05 dan p>0,10)
seperti yang disajikan pada Gambar 2.
Perbedaan nilai parameter tersebut
disebabkan karena profil hematologi
dipengaruhi oleh beberapa faktor. Penelitian
sebelumnya yang dilakukan oleh Fitria dan
139
Profil Hematologi Tikus (Rattus norvegicus)... Rosidah et al.

Tabel 1. Hematologi tikus jantan Sprague-Dawley usia 7 minggu

Tikus Jantan Sprague-Dawley Usia 7 Minggu (n=30 ekor)

Parameter Nilai Nilai Nilai Nilai
Rata-Rata ± SD Terendah Tertinggi Tengah (IQR)
Eritrosit (×106 sel µL–1) 7,93 ± 0,35 7,32 8,51 7,93 (0,50)
Hemoglobin (g dL–1) 14,99 ± 0,65 13,90 16,20 14,75 (0,95)
Hematokrit (%) 46,72 ± 1,93 43,70 51,70 46,60 (1,78)
MCV (fL) 58,84 ± 1,91 54,10 62,70 59,10 (2,68)
MCH (pg sel–1) 18,91 ± 0,60 17,70 20,10 18,80 (0,88)
MCHC (g dL–1) 32,13 ± 0,56 31,30 33,90 32,00 (0,77)
Leukosit (×103 sel µL–1) 11,26 ± 3,08 6,93 20,48 10,67 (3,83)
Trombosit(×104sel µL–1) 69,28 ± 17,74 31,60 97,60 73,25 (22,10)
Berat badan (g) 168,29 ± 7,79 155,20 180,80 170,60 (11,35)

Keterangan: SD = Standar Deviasi; MCV = Mean Corpuscular Volume; MCH = Mean Corpuscular Haemoglobin; MCHC
= Mean Corpuscular Haemoglobin Concentration; IQR = Interquartile range

Tabel 2. Hematologi tikus jantan Sprague-Dawley usia 10 minggu

Tikus Jantan Sprague-Dawley Usia 10 Minggu (n=30 ekor)

Parameter Nilai Nilai Nilai Nilai
Rata-Rata ± SD Terendah Tertinggi Tengah (IQR)
Eritrosit (×106 sel µL–1) 8,94 ± 0,46 7,80 9,91 8,94 (0,44)
Hemoglobin (g dL–1) 15,77 ± 0,78 14,50 18,20 15,75 (0,95)
Hematokrit (%) 45,36 ± 1,67 41,70 48,10 45,50 (2,43)
MCV (fL) 50,76 ± 9,40 48,00 55,60 51,10 (2,10)
MCH (pg sel–1) 17,67 ± 3,42 16,60 23,30 17,67(0,50)
MCHC (g dL–1) 34,78 ± 1,44 33,40 41,90 34,78 (0,58)
Leukosit (×103 sel µL–1) 6,61 ± 1,83 3,78 11,75 6,18 (1,77)
Trombosit(×104sel µL–1) 70,18 ± 19,31 17,80 94,00 74,00 (22,30)
Berat badan (g) 171,50 ± 23,78 129,30 247,10 169,60 (24,40)

Keterangan: SD = Standar Deviasi; MCV = Mean Corpuscular Volume; MCH = Mean Corpuscular Haemoglobin; MCHC
= Mean Corpuscular Haemoglobin Concentration; IQR = Interquartile range

Eritrosit Hemoglobin Hematokrit MCV MCH MCHC Leukosit Trombosit

(×106 sel µL–1) (g dL–1) (%) (fL) (pg sel–1) (g dL–1) (×103 sel µL–1) (×104 sel µL–1)

Gambar 2. Hematologi tikus Sprague-Dawley jantan usia 7 minggu dan 10 minggu

Sarto (2014) menunjukkan bahwa nilai
hematologi sangat bersifat spesifik dan tidak
dapat digeneralisir, dipengaruhi oleh kondisi
geografis, seperti lokasi, iklim, suhu,
kelembaban, ketinggian, dan pencahayaan.
Selanjutnya, peneliti lain menyatakan bahwa
gambaran hematologi tikus pada usia 8–12
minggu yang dikembangbiakkan secara lokal
menunjukkan hasil keseluruhan bersifat
fluktuatif, nilai yang diperoleh cenderung

140
 J Bioteknol Biosains Indones – Vol 7 No 1 Thn 2020

Tabel 3. Perbandingan hematologi tikus jantan Sprague-Dawley usia 7 minggu dan data dari literatur

Data Hematologi Tikus Jantan Sprague-Dawley

Parameter Data Penelitian Data Literatur* Data Literatur**
(7 minggu,n = 30) (3–7 minggu, n=141) (7–11 minggu, n=50)
Eritrosit (×106 sel µL–1) 7,93 ± 0,35 7,11± 0,35 8,09 ± 0,77
Hemoglobin (g dL–1) 14,99 ± 0,65 14,20 ± 0,30 16,00 ± 1,30
Hematokrit (%) 46,72 ± 1,93 42,15 ± 2,05 48,30 ± 3,40
MCV (fL) 58,84 ± 1,91 60,05 ± 2,05 59,65 ± 4,55
MCH (pg sel–1) 18,91 ± 0,60 20,05 ± 0,75 19,65 ± 1,05
MCHC (g dL–1) 32,13 ± 0,56 33,75 ± 1,25 32,85 ± 1,55
Leukosit (×103 sel µL–1) 11,26 ± 3,08 11,94 ± 3,75 13,49 ± 6,86
Trombosit(×104 sel µL–1) 69,28 ± 17,74 105,45 ± 15,55 124,85 ± 34,55

Keterangan: *Giknis dan Clifford (2006), **Car et al. (2006)

Tabel 4. Perbandingan data hematologi tikus jantan Sprague-Dawley usia 10 minggu dan data dari literatur

Data Hematologi Tikus Jantan Sprague-Dawley

Parameter Data Penelitian Data Literatur* Data Literature** Data Literatur***
(10 minggu, n = 30) (8–12 minggu, n=23) (8–12 minggu, n=549) (7–11 minggu, n=50)
Eritrosit (×106 sel µL–1) 8,94 ± 0,46 6,88 ± 0,77 7,98 ± 0,21 8,09 ± 0,77
Hemoglobin (g dL–1) 15,77 ± 0,78 13,7 ± 1,02 15,2 ± 0,80 16,00 ± 1,30
Hematokrit (%) 45,36 ± 1,67 38,15 ± 3,19 44,25 ± 3,05 48,30 ± 3,40
MCV (fL) 50,76 ± 9,40 55,62 ± 2,91 56,25 ± 3,25 59,65 ± 4,55
MCH (pg sel–1) 17,67 ± 3,42 19,98 ± 1,11 19,15 ± 0,85 19,65 ± 1,05
MCHC (g dL–1) 34,78 ± 1,44 35,93 ± 1,18 34,2 ± 1,50 32,85 ± 1,55
Leukosit (×103 sel µL–1) 6,61 ± 1,83 7,35 ± 1,78 12,05 ± 1,96 13,49 ± 6,86
Trombosit(×104 sel µL–1) 70,18 ± 19,31 101,78 ± 32,33 67,30 ± 29,4 124,85 ± 34,55

Keterangan: *tikus berasal dari breeding lokal (Kartika et al. 2014), ** dan *** tikus berasal dari breeding luar (Giknis
dan Clifford 2006; Car et al. 2006)

berbeda dari referensi walaupun hasil masih
dalam kisaran normal (Kartika et al. 2014).
Penelitian sejenis pada laboratorium di luar
negeri pada hewan coba tikus normal pada
berbagai usia juga telah banyak dilakukan
sebelumnya. Data menunjukkan bahwa
adanya perbedaan usia, galur dan jenis
pakan akan mempengaruhi gambaran
hematologi (Lillie et al.1996; Said dan Abiola
2014; Delwatta et al. 2018). Hasil penelitian
ini sejalan dengan hasil penelitian
sebelumnya yang melakukan pengukuran
hematologi pada tikus jantan, galur Sprague-
Dawley dengan usia yang hampir sama yang
dikembangbiakkan di Laboratorium Charles
River. Data pengukuran disajikan pada Tabel
3 dan Tabel 4 (Car et al. 2006; Giknis dan
Clifford 2006).
Profil hematologi merupakan
komponen penting untuk mengetahui kondisi
fisiologi hewan percobaan. Profil hematologi
dilakukan untuk mengevaluasi keadaan
darah dan komponen-komponennya. Pada
penelitian ini, pengamatan hematologi
dilakukan terhadap parameter profil eritrosit,
leukosit dan trombosit. Parameter profil
leukosit seharusnya dilakukan terhadap
parameter jumlah neutrofil, limfosit, monosit,
eosinofil, dan basofil. Namun, pada penelitian
ini data tidak dicantumkan. Berdasarkan
Tabel 3 dilihat bahwa hasil jumlah eritrosit,
hemoglobin, hematokrit, MCV, MCH, MCHC,
dan leukosit pada tikus usia 7 minggu secara
umum relatif sama dengan literatur (Car et al.
2006; Giknis dan Clifford 2006), tetapi jumlah
trombosit cenderung lebih rendah dan di
bawah kisaran normal. Pada Tabel 4 tampak
bahwa semua parameter pemeriksaan
hematologi tikus usia 10 minggu secara
umum relatif sama dengan nilai literatur (Car
et al. 2006; Giknis dan Clifford 2006; Kartika
et al. 2014).
Profil eritrosit dilakukan terhadap
parameter jumlah eritrosit, hemoglobin,
hematokrit, MCV, MCH dan MCHC. Eritrosit
(sel darah merah) tikus berbentuk bulat, tidak

141
Profil Hematologi Tikus (Rattus norvegicus)... Rosidah et al.
memiliki nukleus (anucleate), dilengkapi
dengan cekungan (bikonkaf) pada bagian
tengah, serta diameter sekitar 5,7–7,0 µm
(Smith dan Jarecki 2011). Eritrosit
mempunyai fungsi utama untuk mengangkut
hemoglobin, membawa oksigen dari paru–
paru ke jaringan. Selain itu, eritrosit banyak
mengandung enzim karbonat anhidrase yang
dapat meningkatkan reaksi antara karbon
dioksida dan air membentuk asam karbonat.
Meningkatnya laju reaksi ini akan membuat
air dalam darah mengangkut karbonat
membentuk ion bikarbonat dari jaringan ke
paru-paru (Boone et al. 2013). Jumlah
eritrosit pada tikus jantan usia 10 minggu
lebih tinggi dan berbeda signifikan (p<0,05
dan p<0,10) dibanding dengan usia 7 minggu.
Nilai ini sesuai dengan hasil penelitian yang
dilaporkan Wolford et al. (1987) serta Giknis
dan Clifford (2006). Jumlah eritrosit tikus
cenderung meningkat sejalan dengan
bertambahnya usia tikus dan kemudian
mengalami penurunan pada usia tertentu.
Menurut Wolford et al (1987), tikus usia 2–3
bulan adalah tikus yang memiliki jumlah
eritrosit tertinggi. Sedangkan menurut data
Giknis dan Clifford (2006), tikus usia 13–65
minggu merupakan tikus dengan nilai eritrosit
tertinggi. Peningkatan jumlah eritrosit ini
dipengaruhi oleh tingginya nilai hematokrit
dan hemoglobin pada darah tikus, namun
demikian alasan ini tidak dijelaskan secara
rinci dan hanya berdasarkan data (Giknis dan
Clifford 2006).
Hemoglobin merupakan suatu komplek
protein-porfirin yang mengandung zat besi.
Hemoglobin bagian terpenting pada eritrosit
karena hemoglobin mengisi hampir 32%
setelah air, karbohidrat dan lemak.
Hemoglobin merupakan protein yang
memiliki berat molekul sekitar 67.000 yang
terdiri dari empat kelompok heme dan satu
kelompok globin. Globin dibentuk oleh empat
ikatan polipeptida yang masing-masing terdiri
dari satu kelompok heme. Setiap kelompok
heme mengandung satu atom besi yang akan
berikatan dengan satu molekul oksigen
(Reece dan Rowe 2017). Hemoglobin
berperan penting untuk mengikat,
mengedarkan dan mengirim oksigen ke
jaringan tubuh (Thomas dan Lumb et al.
2012). Hasil pengukuran kadar hemoglobin
pada tikus usia 10 minggu lebih tinggi dan
berbeda signifikan dibanding dengan tikus
usia 7 minggu (p<0,05 dan p<0,10). Hasil
142
penelitian Giknis dan Clifford (2006)
melaporkan bahwa jumlah hemoglobin pada
tikus jantan meningkat seiring dengan
bertambahnya usia tikus 3–65 minggu. Jika
dibandingkan dengan data literatur pada
Tabel 3 dan 4, nilai hemoglobin tikus usia 7
dan 10 minggu masuk dalam rentang normal.
Nilai hemoglobin pada tikus sangat bervariasi
tergantung pada jenis kelamin, usia dan
kondisi kesehatan hewan coba (Smith dan
Jarecki 2011).
Persentase hematokrit adalah
perbandingan eritrosit terhadap volume
darah. Nilai hematokrit pada tikus jantan usia
7 minggu lebih tinggi dan berbeda signifikan
dengan tikus 10 minggu (p<0,05 dan p<0,10).
Hasil penelitian ini berlawanan dengan hasil
penelitian yang dilakukan Giknis dan Clifford
(2006) yang melaporkan bahwa nilai
hematokrit meningkat sejalan dengan
bertambahnya usia tikus 3–65 minggu. Pada
Tabel 3 dan 4 menunjukkan bahwa kedua
usia tikus tersebut memiliki nilai hematokrit
relatif sama dengan nilai kisaran normal (Car
et al. 2006; Giknis dan Clifford 2006; Kartika
et al. 2014).
Indeks eritrosit diukur terhadap
parameter MCV, MCH dan MCHC. Hasil
pengukuran nilai MCV dan MCHC terdapat
perbedaan yang signifikan pada tikus usia 7
dan 10 minggu. Namun, nilai MCH tidak
berbeda secara signifikan untuk tikus usia 7
dan 10 minggu (p>0,05 dan p>0,10).
Penambahan usia tikus dapat meningkatkan
jumlah eritrosit, sehingga dapat memicu
penurunan nilai MCV dan MCH. Nilai MCH
menunjukkan kemampuan sel darah merah
untuk mentransportasikan oksigen dari paru-
paru ke jaringan pada tikus tidak berbeda.
Nilai rata-rata indeks eritrosit pada tikus usia
7 dan 10 minggu cenderung lebih rendah
dibanding dengan literatur tetapi masuk
dalam rentang normal.
Leukosit atau sel darah putih
merupakan sel yang bertanggungjawab
terhadap sistem pertahanan tubuh. Leukosit
memiliki variasi yang luas pada perhitungan
jumlah sel total. Selain perhitungan jumlah
leukosit, diferensiasi butir darah putih yang
mencakup limfosit, netrofil, monosit, eosinofil
dan basofil memberikan indikasi terhadap
reaksi infeksi. Limfosit merupakan sel darah
putih yang terbanyak dalam darah tepi dan
relatif homogen pada subjek yang sehat.
Neutrofil merupakan sel leukosit yang paling

banyak setelah limfosit. Pada hewan sehat
jumlah monosit lebih rendah dan dapat
mencapai 6% dari diferensiasi. Basofil jarang
ditemukan atau tidak ada pada beberapa
galur tikus (Smith dan Jarecki 2011). Pada
penelitian ini pengukuran hanya dilakukan
pada jumlah total leukosit. Hasil pengukuran
menunjukkan jumlah leukosit tikus jantan usia
10 minggu lebih rendah dan berbeda
signifikan dibanding usia 7 minggu (p<0,05
dan p<0,10). Nilai ini sejalan dengan hasil
penelitian yang dilakukan oleh Giknis dan
Clifford (2006), dimana jumlah leukosit tikus
mengalami penurunan seiring bertambahnya
usia tikus. Menurut Wolford et al. (1987),
penurunan jumlah leukosit tikus mungkin
dikarenakan adanya penurunan jumlah
limfosit, peningkatan jumlah neutrofil dan
eosinofil.
Trombosit atau platelet merupakan sel
berbentuk bulat, oval hingga memanjang
dengan diameter berukuran 1–4 µm
(Lindstrom et al. 2015). Trombosit merupakan
garis pertahanan pertama dalam melawan
pendarahan, berkontribusi dalam proses
trombosis, inflamasi dan neoplasia (Holinstat
et al. 2017). Nilai normal trombosit tikus pada
perbedaan usia sangat bervariasi (Car et al.
2006; Giknis dan Clifford 2006; Kartika et al.
2014). Berdasarkan pada Tabel 3 dan Tabel
4, tikus usia 7 minggu memiliki nilai trombosit
lebih rendah dan tikus usia 10 minggu
memiliki nilai relatif sama dengan nilai normal
dari literatur (Car et al 2006; Giknis dan
Clifford 2006; Kartika et al. 2014). Namun,
secara statistik nilai trombosit pada kedua
usia tikus tersebut tidak berbeda nyata
(p>0,05 dan p>0,10). Adanya perbedaan
pada hasil uji dengan nilai literatur
merupakan hal yang wajar karena
berhubungan dengan prosedur dan teknik
pengambilan darah, pengaruh antikoagulan
dan kondisi penyimpanan sampel uji (Cora et
al. 2012; Kartika et al. 2014; Fitria et al. 2016).
Nilai profil hematologi dipengaruhi oleh
beberapa faktor diantaranya praanalitik dan
analitik. Faktor praanalitik diantaranya umur,
jenis kelamin, kebutuhan pakan, teknik
pemeliharaan, tingkat stress, penggunaan
antikoagulan, kecepatan sentriguasi dan
kondisi penyimpanan sampel. Sedangkan
yang mempengaruhi faktor analitik yaitu
metodologi yang digunakan, kualitas reagen,
stabilitas analit dan variabel biologi (Smith
dan Jarecki 2011).
J Bioteknol Biosains Indones – Vol 7 No 1 Thn 2020
Tikus dan hewan pengerat lainnya
memiliki bentuk dan morfologi sel darah
(eritrosit, leukosit dan hematokrit) lebih kecil
dibanding dengan sel darah manusia, namun
secara struktur dan fungsi memiliki
kesamaan. Tikus memiliki jumlah eritrosit,
leukosit dan trombosit lebih tinggi dibanding
dengan manusia (Bailly dan Duprat 1990).
Berdasarkan tingkat perkembangan, tikus
dibagi menjadi empat fase, yaitu neonatal
(usia tikus umur 0–2 minggu), menyapih (usia
tikus 3–4 minggu), pradewasa (usia tikus 5–8
minggu) dan dewasa (usia 9–14 minggu)
(Andreollo et al. 2012). Dengan demikian
nilai hematologi normal tidak dapat
ditentukan berdasarkan referensi secara
umum tetapi perlu memperhatikan umur tikus
dan sumber tempat penyedia tikus yang
digunakan.
KESIMPULAN
Hasil penelitian ini dapat disimpulkan
bahwa profil hematologi tikus jantan galur
Sprague-Dawley dari sumber lokal usia 7 dan
10 minggu menunjukkan perbedaan yang
signifikan untuk parameter eritrosit,
hemoglobin, hematokrit, MCV, MCHC dan
leukosit, tetapi tidak berbeda signifikan untuk
MCH dan trombosit. Hasil ini secara umum
relatif sama dengan nilai pada literatur,
meskipun nilai trombosit pada tikus usia 7
minggu lebih rendah dan berbeda dengan
literatur. Tikus pada kedua usia ini berada
dalam kondisi sehat sehingga dapat
digunakan sebagai hewan coba.
Tikus sebagai hewan model harus
memenuhi persyaratan diantaranya sehat,
asal dan galur yang digunakan harus jelas,
jenis kelamin tertentu, rentang usia tidak jauh
berbeda, berat badan merata untuk semua
kelompok dan harus disesuaikan dengan
tujuan penelitian, misalnya pada uji toksisitas
akut digunakan tikus usia 8–12 minggu
karena pada rentang usia tersebut banyak
proses perkembangan yang sedang
berlangsung, diantaranya perubahan fisiologi
dan reproduksi.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih
yang sebesar-besarnya kepada Pusat
Teknologi Farmasi dan Medika - BPPT yang
telah memfasilitasi penelitian ini. Terima
143
Profil Hematologi Tikus (Rattus norvegicus)... Rosidah et al.
kasih juga kepada semua pihak yang
mendukung hingga penelitian ini berjalan
dengan baik.
DAFTAR PUSTAKA
Andersen ML, e Costa RM, e Costa MFO
(2016) Rats. In: Andersen ML, Tufik S
(Eds). Rodent model as tools in ethical
biomedical research. Springer
International Pub Switzerland, pp 61–
64. doi: 10.1007/978-3-319-11578-8_7
Andreollo NA, Santos EF, Araújo MR, Lopes
LR (2012) Rat's age versus human's
age: what is the relationship? Arq Bras
Cir Dig. 25:49–51. doi:10.1590/s0102-
67202012000100011
Bailly Y, Duprat P (1990) Normal blood cell
values, rat. In: Jones TC, Ward JM, Mohr
U, Hunt RD (Eds). Hemopoietic system.
Monographs on pathology of laboratory
animals. Springer, Berlin, pp 27–38. doi:
10.1007/978-3-642-84110-1_3
Baumans V (2016) The aspects of the use of
rodents in experimental research. In:
Andersen ML, Tufik S (Eds). Rodent
model as tools in ethical biomedical
research. Springer International Pub
Switzerland, pp 7–12. doi:
10.1007/978-3-319-11578-8_2
Boone CD, Gill S, Habibzadegan A, Robert
McKenna (2013) Carbonic anhydrase:
An efficient enzyme with possible global
implications. Int J Chem Eng 2013:1–6.
ID 813931. doi: 10.1155/2013/813931
BPOM (2014) Peraturan Kepala Badan
Pengawas Obat dan Makanan Republik
Indonesia Nomor 7 tahun 2014 tentang
Pedoman uji toksisitas nonklinik secara
in vivo. Badan Pengawas Obat dan
Makanan Republik Indonesia, Jakarta
Car BD, Eng VM, Everds NE, Bounous DI
(2006) Clinical pathology of the rat. In:
Suckow M, Weisbroth S, Franklin C
(Eds). The laboratory rat. 2nd Edition.
American College of Laboratory, Animal
Medicine Series. Academic Press,
Elsever Inc, New York, pp 127–146. doi:
10.1016/B978-012074903-4/50008-X
Cora MC, King D, Betz LJ, Wilson R, Travlos
GS (2012) Artifactual changes in
Sprague-Dawley rat hematologic
parameters after storage of samples at
3ºC and 21ºC. J Am Assoc Lab Anim
Sci 51:616–621. PMID: 23312091
144
Delwatta SL, Gunatilake M, Baumans V,
Seneviratne MD, Dissanayaka MLB,
Batagoda SS, Udagedara AH, Walpola
PB (2018) Reference values for
selected hematological, biochemical
and physiological parameters of
Sprague-Dawley rats at the Animal
House, Faculty of Medicine, University
of Colombo, Sri Lanka. Anim Model Exp
Med 1:1–5. doi: 10.1002/ame2.12041
Fitria L, Sarto M (2014) Profil hematologi tikus
(Rattus norvegicus Berkenhout, 1769)
galur wistar jantan dan betina umur 4,
6, dan 8 minggu. Biogenesis 2:94–100.
doi: 10.24252/bio.v2i2.473
Fitria L, Illiy LL, Dewi IR (2016) Pengaruh
antikoagulan dan waktu penyimpanan
terhadap profil hematologis tikus
(Rattus norvegicus Berkenhout, 1769)
galur wistar. Biosfera 33:22–30. doi:
10.20884/1.mib.2016.33.1.321
Thomas C, Lumb AB (2012) Physiology of
haemoglobin. BJA Education 12:251–
256. doi: 10.1093/bjaceaccp/mks025
Giknis MLA, Clifford CB (2006) Clinical
laboratory parameters for Crl:CD(SD)
rats. Charles River Lab, Wilmington USA
Gileta AF, Fitzpatrick CJ, Chitre AS, St Pierre
CL, Joyce EV, Maguire RJ, McLeod
AM, Gonzales NM, Williams AE,
Morrow JD, Robinson TE, Flagel SB,
Palmer AA (2018) Genetic
characterization of outbred Sprague
Dawley rats and utility for genome-wide
association studies. BioRxiv 412924.
doi: 10.1101/412924
He Q, Su G, Liu K, Zhang F, Jiang Y, Gao J,
Liu L, Jiang Z, Jin M, Xie H (2017) Sex-
specific reference intervals of
hematologic and biochemical analytes
in Sprague-Dawley rats using the
nonparametric rank percentile method.
PLoS One 12:e0189837. doi:
10.1371/journal.pone.0189837
Holinstat M (2017) Normal platelet function.
Cancer metastasis reviews 36:195–
198. doi: 10.1007/s10555-017-9677-x
Ihedioha JI, Okafor C, Ihedioha TE (2004)
The haematological profile of the
Sprague-Dawley outbred albino rat in
Nsukka, Nigeria. Anim Res Int 1:125–
132. doi: 10.4314/ari.v1i2.40755
Johnson M (2012) Laboratory mice and rats.
Mater Methods 2012 2:113. doi:
10.13070/mm.en.2.113

Kartika D, Dewi FNA, Iskandriati D, Winoto I,
Permanawati, Narani A, Suhartin,
Budiarsa IN (2014) Nilai parameter
hematologi tikus Sprague Dawley dan
mencit Balb/C di Indonesia sebagai
referensi dalam penelitian biomedis.
HL-03, pp 109-111. Pros Konferensi Ilm
Vet Nas (KIVNAS) ke-13, 23–26
November 2014, Palembang
Lillie LE, Temple NJ, Florence LZ (1996)
Reference values for young normal
Sprague-Dawley rats: Weight gain,
hematology and clinical chemistry. Hum
Exp Toxicol 15:612–616. doi:
10.1177/096032719601500802
Lindstrom NM, Moore DM, Zimmerman K, Smith
SA (2015) Hematologic assessment in pet
rats, mice, hamsters, and gerbils: Blood
sample collection and blood cell
identification. Clin Lab Med 35:629–640.
doi: 10.1016/j.cll.2015.05.011
NRC (2011) Guide for the care and use of
laboratory animals, 8th Edition. National
Research Council, Institute for
Laboratory Animal Research. The
National Academies Press, Washington
DC. doi: 10.17226/12910
Parasuraman S, Raveendran R, Kesavan R
(2010) Blood sample collection in small
J Bioteknol Biosains Indones – Vol 7 No 1 Thn 2020
laboratory animals. J Pharmacol
Pharmacother 1:87–93.
doi:10.4103/0976-500X.72350
Reece WO, Rowe EW (2017) Functional
anatomy and physiology of domestic
animals, 5th Edition. Wiley Blackwell,
New York
Said NM, Abiola O (2014) Haematological
profile shows that inbred Sprague
Dawley rats have exceptional promise
for use in biomedical and
pharmacological studies. Asian J
Biomed Pharm Sci 4:33–37. doi:
10.15272/ajbps.v4i37.597
Smith C, Jarecki A (2011) Atlas of
comparative diagnostic and
experimental hematology. 2nd Edition.
Wiley-Blackwell, Hong Kong. doi:
10.1002/9781118785072
Vandamme TF (2014) Use of rodents as
models of human diseases. J Pharm
Bioallied Sci 6:2–9. doi: 10.4103/0975-
7406.124301
Wolford ST, Schroer RA, Gallo PP, Gohs FX,
Brodeck M, Falk HB, Ruhren R (1987)
Age-related changes in serum
chemistry and hematology values in
normal Sprague-Dawley rats. Toxicol
Sci 8:80–88. doi: 10.1093/toxsci/8.1.80
145