Procedimientos came de la hess | amen en fresco otacon ‘Conservcin de as hoes Fotis ce inion permanente | Tincon de fois de hes Ting de hematoiina fri Abnllanradorestuorecenes Procedimsntos epcils par examen dea bees el suck, Busqueda de ecolice de tenia en as haces Cultivo foal de larvas de nemanodo ‘Clevo de Harada-Moet Caltiv iniaado en pape de lero inclin Clevo en placa de apst Galevo en carbon vegetal Recupericiin de lars de neratnts Trica del embudo de Beetmann Aisarieno del suelo Examen de eos liquids de apiracin, (Ginna adhesive ara pil perianal Examen del spore Moestras de inestina delgado Moestas de intestino grasso Muesta de etm Moestras de ganglion Hnfticos, la dea ybazo Moestas de tlerasetneas Morstasdeliqudo cefalorraquideo Muestas del aparatorogent Mocstas de bigado¥ pula Maceras de todo ocular Examen de la sangre Preparcio dels fro de sangre Tincén de los fois de sangre Tincén de Ges, Hematonlina de Delf Examen de les foi de sangre estes motieadas Capa sorguecida de eucios Coneiacion wile Microbematocrte Fel Knot lsc de membrana CClkvo de pardsitoe e nculacion en animales Cave en placa de aga pra ame CCulkv in vio de emotlagelados Medio le Novy, MacNetly Nicll Medio de agar sangre USAMRU para lish Media se Sehneder para Drosoph. CCukivo de heros de nematadon Calvo de evr de trematede y cestodos Nenodiagstico Preparacdin dele pacisitos par su esti Métodos de celaacon Soci fisioliea x de formol stortiguads Solecién deformed amortgnnds CConservacién deeaidads grandes de heces (Concern de cantdades grandes de Rees “Mansi emporarissllados con cle para wis “Métal cl enbrcoberos dae para moras en End Emudio de los huevor Etude ls nea ijador de alcoho y cris Fiador de alco, forma y Kido acticoghcial Monaj en gelatin gceriada Agente lariat con lastotenat ‘Medio de Hoyer studio de ns ematedos Acetocarmin de Schacider sedia de lor sera Montaje en medio de Eupara xia de ros onginsmos Areiipados Moliscon Madison en el dignéstic de pacisios diagnosticosAdlas de Parasitologia Humana | objetivo principal de este texto es proporcionar material ilustrativo para contribuir al reco- nnocimiento y el diagnéstico de las infecciones parasitariass ademas, como Ia identific de parasitos en las heces, la orina, la sangre y los tejidos depend del uso de métodos de diag: néstico apropiados, se aporcan detalles acerca de los procedimientos utilizados con mayor frecuencia. En particulas, se hace hincapié en las nuevas téenicas de tincién que a tar los parssitos oportunistas recientemente descubiertos, los microsporidios, Cryptosporidium, Cyclospora y otros que tienen importancia como causantes de enfermedad en el ser humano, (En el manual de téenicas, Pardsitos: Guia de procedimientos de laboratorio e identificacion, se explican los procedimientos de diagndstico habituales mas antiguos) an a detec: Examen de las heces Recoleccién y manipulacién de la muestra Las heces deben recolectarse en recipientes limpios de boca ancha, no contaminados con orina, agua o tierra. Muchos laboratorios utilizan frascos o sistemas de recolecci6n individuales, pre- parados ya con distintos fjadores (por ei formal al 10%, PVA, SAF) que sustituyen a otros reci- pientes. Las muestras recogidas después de la administracién de bario o de laxantes oleosos no suelen ser adecuadas para el estudio parasitoldgico, ya que no se pueden detectar parasitos en las hoces hasta una semana después 0 mas. Por otea parte, no se deben tomar antibisticos duran: te la semana previa a la recolecci6n de las muestras, porque alteran la flora intestinal, Las muestras de heces liquidas o diarreicas se deben examinar en el curso de los 30 minutos de su emisin y no del momento en que llegan al laboratorio, que puede ser muy posterios, para detectar trofozoitos de protozoos méviles; si esto no fuera posible, se colocaré inmediatamente tuna parte de fa muestra en un medio de conservacién adecuado para su estudio posterior con tinci6n permanente. Las heces semisolidas (blandas) pueden contener trofozoitos y quistes, y deben ser examinadas dentro de la hora de su emision. Las heces formadas pueden mantenerse 1 temperatura ambiente durante varias horas, pero deben ser examinadas en el mismo dia, $i no se puede examinar la muestra en el momento indicado, se colocard una parte en un conserva dor adecuado y se refrigerard el resto (3 a 5°C) hasta el momento del examen directo. No se deben colocar las muestras de heces en estufa de incubacién. Para mejorar el diagnéstico de algunas parasitosis (p. ej. amebiasis, giardiasis, microsporidiasis, estrongiloidiasis) puede ser necesario examinar miltiples muestras recolectadas durante un periodo de 7 a 10 dias. Procesamiento de la muestra Hay diversas opciones para el examen de muestras de heces, segiin la capacidad del laborato: rio, el tiempo y la informacién que se desea obtener. Se puede examinar la muestra en fresco 0 después de un procedimiento de conservacién. booksmedicos.org Examen en fresco El examen en fresco en solucién fisioldgica (NaCl al 0,85%) es més til para detectar trofozot tos maviles de amebas y flagelados en muestras liquidas, pero se debe examinar la muestra den- tro de los 30 minutos de la toma. Si bien pueden encontrarse quistes de protozoos, y huevos y larvas de helmintos en estos preparados, el éxito de la deteccién esté relacionado en general con Ia intensidad de la infecci6n. La preparacién en fresco con yodo ¢s itl sobre todo para colo- rear el glacdgeno y visualizar los miicleos en quistes de protozoos. Muchos laboratorios han eli- minado el examen en fresco, sobre todo de heces formadas, y preficren procedimientos de con- centracién o preparaciones con tincién permanente de heces 416Procedimientos diagné Solucién yodada de D'Antoni 1. solver 1,0 9 de yoduro de potasio (KD y 1.5 9 de cristal de yodo en 100 mL de agua destiads 2. Debe quedar un exceso de crstales de yodo en el fondo 3, Far a soliton madre en recilentes de vero marton con tapa para su almacenarent, Nore La solucén tine una duracién aproximada de 1 afc: si desaparecen los crstales de yodo del fando del frasco se debe preparar una solucion nueva. Colocar la solucién madre en un frasco ‘uentagotas marrén y utilizar directamente sin diluir para realizar preparaciones en fresco con yodo. Procedimientos de concentracién El uso de procedimientos de concentracién para el examen de las heces asegura la deteccién de microorganismos, incluso en pequefla cantidad, que no se podrian describir en el examen direc to ocon tincién permanente. Se han descrito muchos procedimientos de concentracidn, que puc- den ser agrupados en dos categorfas: floracién o sedimentacién. La sedimentacién se logra por centrifugacion 0 por gravedad, Los procedimientos de sedimen tacién se utilizan con mayor free 2 en laboratorios de diagnéstico, porque el sediment en sreneral contiene todos los pardsitos de la muestra. La desventaja mas importante de estas tée nicas es que el examen del sedimento suele estar dificultado por la presencia de una cantidad excesiva de detritos que pueden enmascarar a los parisitos. La sedimentacién tiene la ventaja de que puede utilizarse tanto con heces recién emiticlas coma con muesteas conservadas. En el examen ¢s necesario diluir 1 6 2 gotas del sedimento en 1 0 2 goras de solucisn fisiologica al 0,85% para reducir la densidad de las particulas y facilitar la visualizacién de los parasitos. ‘Cuando se hacen los preparados del sedimento a menudo es stil diluit uno de ellos eon solucién yorlada para facilicar la detecciéin de quistes de protozoos. Fl principio bisico del procedimiento de flocacién es que en soluciones con alta densidad rela- tiva los parasitos se desprenden de las part culas fecales; los preparados resultantes que van a ser examinados estin relativamente libres de particulas fecales y los pardsitos se observan con mis facilidad. Los quistes de protozoos y la mayor parte de los huevos de nematodos flotan con estos procedimientoss pero, seatin la solucién empleada, los huevos mas pesados de trematodos y de muchos cestodos no flotan y pasan inadvertidos en el examen de la capa superficial. Si se utiliza la flotacién como el método de concentracién habitual en el laboratorio, se debe exami- nar tanto la capa superficial como el sedimento en busca de parisitos. Procedimientos de sedimentaci6n. En los diltimos aitos se ha dejado de utilizar y alm: en el laboratorio por su condicién de material inflamable y explosivo, y ha sido reemplazado por el acetato de etilo como solvente en uno de los métodos de sedimentacién mas utilizados. El método de sedimentacién con formol y acetato de etilo es muy robs que el acetato de et efectivo, y se com lo es tan eficaz. como el éter para la recuperacién de parasites. Técnica de sedimentacién con Ruscrnos formol-acetato de etilo 0 formol y éter Formal al 10x para muestras recién emitidas Soluciénfisioldgica al 0,85% Acetato de etilo 0 ster 1. Emulsionar 1,0 a 1,5 g de heces recién emitidas en 10 ml. de formol al 10% dentro de un frasco adecuado 0 un vaso de papel no parafinado. Dejar reposar durante 30 minutos o mas para lograr la fijacion adecuada. Sila muestra fecal es muy liquida © acuosa, utilizar 5 a 6 mL de material 2. Filtrar la suspensin a través de dos canas de gasa himeda y volcar en un tubo de centrifuga 417