中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 42(1):181－192（2009） －181－

黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病
媒蚊幼蟲活性

鄭森松1 古惠菁2 陳品昇2 陳盈如3 黃旌集4

陳維鈞5 張上鎮6

（收件日期：民國 97 年 7 月 3 日、接受日期：民國 97 年 10 月 15 日）

【摘要】本研究係評估黑心柳杉材部、枝條、樹皮及葉子精油及其成分對埃及斑蚊和白
線斑蚊二種幼蟲的抑制活性。試驗結果得知，葉子精油對埃及斑蚊幼蟲和白線斑蚊幼蟲
的抑制效果最好，其半數致死濃度（LC50）分別為 59.6μg/mL 和 42.7μg/mL。進一步
利用 GC-MS 分析柳杉葉子精油成分，發現β-Elemol（20.48%）和 16-Kaurene （20.23%）
二個化合物為其最主要成分。另外，比較葉子精油 11 種化合物對 2 種病媒蚊幼蟲毒殺
之效果，證實α-Terpinene 對埃及斑蚊幼蟲之抑制效果最好（LC50＝14.7μg/mL）；至
於抑制白線斑蚊幼蟲之效果，則以 Limonene 最好（LC50＝15.0μg/mL）。綜合上述結
果得知，柳杉葉子精油及其成分具有潛力做為天然的殺蚊子幼蟲藥劑。

【關鍵詞】 埃及斑蚊、白線斑蚊、柳杉、精油、氣相層析－質譜儀、葉子、抗病媒蚊幼
蟲活性。

MOSQUITO LARVICIDAL ACTIVITY OF LEAF ESSENTIAL

OIL AND ITS CONSTITUENTS FROM BLACK
HEARTWOOD-TYPE CRYPTOMERIA JAPONICA
1 2 2 3
Sen-Sung Cheng Hui-Jing Gu Pin-Sheng Chen Ying-Ju Chen
4 5 2
Chin-Gi Huang Wei-June Chen Shang-Tzen Chang

（Received: July 3, 2008; Accepted: October 15, 2008）

1 國立台灣大學生物資源暨農學院實驗林管理處助理研究員。
Assistant Research Fellow, Experimental Forest, National Taiwan University.
2 國立台灣大學森林環境暨資源學研究所研究生。
Graduate Students and Professor, Corresponding Author, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University.
3 林業試驗所森林化學組研究助理。
Research Assistant, Division of Forest Chemistry, Taiwan Forestry Research Institute.
4 國立台灣大學昆蟲系博士後研究員。
Postdoctoral Fellow, Department of Entomology, National Taiwan University.
5 長庚大學基礎醫學研究所教授。
Professor, Graduate Institute of Basic Medical Science, Chang Gung University.
6 國立台灣大學森林環境暨資源學研究所教授，通訊作者。
Professor, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University. Corresponding Author.
－182－ 黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病媒蚊幼蟲活性

【Abstract】In this study larvicidal effects of wood, twig, bark and leaf essential oils from
black heartwood-type Cryptomeria japonica D. Don and their constituents against 2 mosquito
species, Aedes aegypti and Aedes albopictus, were studied. Results from the larvicidal tests
demonstrated that leaf essential oil from C. japonica exhibited the most effectiveness against
both A. aegypti and A. albopictus larvae at 24 h with an LC50 value of 59.6 μg/mL and 42.7
μg/mL, respectively. From the results of GC-MS analyses, β-elemol (20.48%) and 16-kaurene
(20.23%) were the dominant constituents of leaf essential oil. In addition, the eleven pure
constituents from C. japonica leaf essential oil were also tested individually against the two
mosquito larvae. Among these pure constituents, α-terpinene (LC50 = 14.7 μg/mL) exhibits
the best larvicidal effect against A. aegypti and limonene (LC50 = 15.0 μg/mL) shows an ex-
cellent inhibitory action against A. albopictus larvae. These results revealed that the leaf es-
sential oil and its effective constituents might be considered as a potent source for the produc-
tion of fine natural larvicides.
【Key words】 Aedes aegypti, Aedes albopictus, Cryptomeria japonica, Essential oil,
GC-MS, Leaf, Mosquito larvicidal activity

時稱之“斑砂”，1942-1943 年間，臺灣曾
I、前言
發生歷年來規模最大的一次流行，當時約

台灣位處高溫多濕的亞熱帶，適合病 有總人口的百分之八十受到波及。1981

媒昆蟲孳生繁殖。在這些病媒昆蟲中，以 年，屏東縣琉球鄉又發生多起登革熱傳染

蚊子對於人類的危害最為嚴重，從酷寒的 病例（謝維銓等，1982），除 1990 年外，

極地到赤熱的非洲，幾乎都有牠們的蹤 南部地區持續發生登革熱疫情迄今（周玲

影。蚊子會傳播多種重要疾病，如登革熱、 等，1997；張念台，1999；徐爾烈、蘇俞

瘧疾、黃熱病、日本腦炎……等，因而造 丞，1999）。根據南部地區登革熱疫情的

成全世界人類嚴重的疾病及死亡。台灣早 調查結果顯示，白線斑蚊的分布區域，雖

期曾有瘧疾、血絲蟲病及日本腦炎的大流 有境外移入的病例，但並未發生登革熱疫

行，其後由於 DDT 的廣泛使用，以及政府 情的蔓延；而本土性病例流行區域則多屬

的各項積極防治措施，因此在 1965 年被世 於埃及斑蚊分布區，顯示台灣地區登革熱

界衛生組織宣布為瘧疾完全根除區；而因 疫情的預防與控制應特別注意埃及斑蚊的

有海喘散及日本腦炎疫苗的使用，亦控制 監測與撲滅（張念台，1999）。

了血絲蟲病及日本腦炎的大流行。近年 病媒蚊防治的方法很多，其中最重要
來，台灣經由蚊蟲傳播的主要疾病首推登 且最有效的方法即是使用環境衛生用藥，
革熱，在日本據臺時期，一般民眾稱登革 但這些種類繁多的環境衛生用藥多為高毒
熱為“天狗熱”，乃係由“Dengue”一字 性之合成殺蟲劑，長期使用後，除了會對
的日語發音轉化成台語而來，登革熱的病 吾人健康及環境品質造成嚴重傷害之外，
媒主要為埃及斑蚊（Aedes aegypti）及白線 亦易發生病媒蚊產生抗藥性而失去殺蟲劑
斑蚊（Aedes albopictus）。早在西元 1870 之效用，故國外已有許多學者進行天然殺
年，臺灣就已經有登革熱流行的記載，當 蟲劑的研究與開發（Ioset et al., 2000a;
中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 42(1):181－192（2009）
2000b; Ho et al., 2003; Araujo et al.,
2003）。例如 Siddiqui 等人（2000）由印
度苦楝（Azadirachta indica）葉部的甲醇抽
出物得到 2 種具抗病媒蚊活性的三萜類化
合物（Triterpenoids），對第四齡期埃及斑
蚊幼蟲的 LC50 分別為 21 μg/mL 與 83
μg/mL。另外，薊罌粟種子石油醚抽出物也
有不錯的抗病媒蚊幼蟲活性，對於室內培
養與戶外採集之埃及斑蚊幼蟲的 LC50 值分
別 為 17.4 μg/mL 和 13.6
（Sakthivadivel and Thilagavathy, 2003）。
Dharmagadda 等 人 （ 2005 ） 萃 取 孔 雀 草
（Tagetes patula）精油，並對埃及斑蚊、
熱帶家蚊（Culex quinquefaciatus）及瘧蚊
（Anopheles stephensi）三種幼蟲進行抗病
媒蚊幼蟲活性評估，結果顯示孔雀草精油
對埃及斑蚊幼蟲的毒殺效果最強，其 LC50
和 LC90 值 分 別 為 13.6 μg/mL 和 37.9
μg/mL，其次對瘧蚊幼蟲的 LC50 和 LC90 值
分別為 12.1 μg/mL 和 57.6 μg/mL，而對熱
帶家蚊幼蟲的毒殺效果稍弱，其 LC50 和
LC90 值分別為 22.3 μg/mL 和 71.9 μg/mL。
但國內相關的研究報告較少，直至近年才
由本研究室開始進行這方面的研究，目前
發現肖楠葉子精油具有很好的抗病媒蚊幼
蟲活性，對於埃及斑蚊幼蟲之半數致死濃
度為 47.3 μg/mL，而且肖楠葉子精油成分
中 Limonene 對埃及斑蚊幼蟲的半數致死
濃度僅為 9.5 μg/mL，顯示 Limonene 頗具
潛力成為天然的抗病媒蚊活性成分（張惠
婷等，2003）。另外，Cheng 等人（2004）
也曾探討不同化學品系土肉桂葉子精油之
抗病媒蚊活性，結果顯示桂皮醛型和桂皮
醛-桂皮乙酸酯型土肉桂葉子精油二者均
具有極佳的抗埃及斑蚊幼蟲活性。至於土
－183－
肉桂葉子精油成分的抗埃及斑蚊幼蟲活性
則以桂皮醛（Cinnamaldehyde）、桂皮乙酸
酯（Cinnamyl acetate）、丁香酚（Eugenol）
及茴香醚（Anethole）4 種化合物為最強，
這 4 種化合物之半數致死濃度（LC50）分
別為 29 μg/mL、33 μg/mL、33 μg/mL 及 42
μg/mL（Cheng et al., 2004）。
本研究乃萃取黑心柳杉材部、枝條、
樹皮及葉子 4 部位精油，並評估 4 部位精
μg/mL 油及其成分對埃及斑蚊和白線斑蚊 2 種病
媒蚊幼蟲的抑制活性，期能尋得供作天然
殺病媒蚊幼蟲劑的較理想成分。
II、材料與方法
(I) 試驗材料
1. 柳杉
本試驗所使用之試材為黑心柳杉
（Cryptomeria japonica D. Don），2005 年
2 月伐採自國立台灣大學實驗林溪頭營林
區第 3 林班，地號 51-28，樹齡為 43 年，
伐採後的試材分為材部、樹皮、枝條及葉
子等 4 部位。其中，葉子採取後立即進行
精油萃取，而材部、枝條和樹皮 3 部位則
先氣乾，利用刨花機和打片機製成刨片或
木屑後，再萃取精油。
2. 病媒蚊幼蟲
本試驗所使用的病媒蚊種類，主要是
以傳播登革熱病毒為主的蚊子，包括第四
齡期埃及斑蚊幼蟲（A. aegypti larvae）及白
線斑蚊幼蟲（A. albopictus larvae），這些
病媒蚊均由長庚大學基礎醫學研究所公共
衛生暨寄生蟲學科陳維鈞教授研究室所提
供。
－184－ 黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病媒蚊幼蟲活性

(II) 試驗方法 N + n 之 n-Alkanes 之留滯時間。

1. 精油萃取 t'R(x)：為未知化合物 X 之修正留滯時間。

本研究利用傳統的水蒸餾法萃取精 3. 抗病媒蚊幼蟲活性
油，將約 200 g 的柳杉 4 部位試材分別裝入 精油的抗病媒蚊活性係以抗病媒蚊幼
圓底燒瓶中，加入 1000 mL 的蒸餾水，萃 蟲試驗進行評估，使用病媒蚊之種類為埃
取時間為 6 h。另外，取部分試樣測其含水 及斑蚊和白線斑蚊第四齡期幼蟲（4th Instar
率，並計算 4 部位精油之收率，每組試樣 mosquito larvae），試驗方法為將精油或抽
重複 4 次。 出成分以 DMSO 溶解後，加入 25 mL 之蒸
2. 精油成分鑑定 餾水中，配製成不同樣品濃度（精油濃度

柳杉精油成分之分析係利用 Thermo 為 400、200、100、50、25 μg/mL；純化合

公司之 Trace GC Ultra 氣相層析儀配合 物濃度為 100、50、25、12.5、6.25 μg/mL），

PoLaris Q MSD 質譜儀進行鑑定。首先，將 每一樣品瓶各置入 10 隻第四齡期埃及斑蚊

各部位精油以乙酸乙酯稀釋（1%）及過濾 或白線斑蚊幼蟲，將含有精油或抽出成分

後注入氣相層析儀中，所使用之分離管柱 及病媒蚊幼蟲之樣品瓶放置於室溫環境

為 DB-5MS（Crossbond 5% phenyl methyl- 中，記錄病媒蚊幼蟲於 24 h 後的死亡數

polysiloxane），長度為 30 m，內徑為 0.25 目，並計算致死率，再由不同濃度之精油

mm，膜厚為 0.25 μm，載送氣體氦氣的流 成分對病媒蚊幼蟲致死率之關係式，求得

速為 1 mL/min，分流比（Splitting ratio）為 各精油成分的半數致死濃度（Median lethal

1:60，注射孔溫度為 270℃，離子化電壓為 concentration 50%, LC50），以及病媒蚊幼

70 eV，質譜範圍（Mass range）m/z 為 50-650 蟲致死率為 90%時所需之精油濃度數值

a.m.u. 。 柳 杉 精 油 所 使 用 的 起 始 溫 度 為 （LC90）（Taylor et al., 1998），試驗重複

50℃，持溫 2 min 後，以 5℃/min 的升溫速 數為 4。同時以商業殺蚊子幼蟲劑陶斯松

度 至 250℃ 。 成 分 鑑 定 上 使 用 National （Chlorpyrifos）作為對照組（使用濃度為

Institute of Standards and Technology 6.25、3.125、1.56、0.78、0.39 μg/mL）。

（NIST）V. 2.0 和 Wiley 7.0 資料庫的質譜 4. 統計分析

比 對 ， 並 使 用 標 準 品 進 行 共 注 射 （ Co- 利用 SAS 系統中席夫（Scheffe）統計
injection）確定之。此外，也使用 Kovats 方法，檢驗柳杉 4 部位精油和抽出成分之
indices （KI）進行比對（Adams, 2001）， 抗病媒蚊幼蟲活性差異是否顯著，分析所
KI 值的計算公式如下所示： 使用之信賴區間為 95%。
Log t ′R ( x ) − Log t ′R ( N )
KI = 100 N + 100 n
Log t ′R ( N + n ) − Log t ′R ( N ) III、結果與討論
t'R(N)和 t'R(N+n)：為碳數 N 及 N + n 之同質系
(I) 黑心柳杉 4 部位精油之含量
的 n-Alkanes 修正留滯時間，但未知化
合物 X 之留滯時間必須介於碳數 N 及 利用水蒸餾法萃取新鮮黑心柳杉材
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部、枝條、樹皮及葉子 4 部位精油之收率 及 枝 條 精 油 之 致 死 率 分 別 為 100.0% 、

分別為 7.59 mL/kg （0.38%）、2.14 mL/kg 100.0%、47.5%及 80%；當使用濃度降為
（0.05%）、1.58 mL/kg （0.03%）及 18.85 100 μg/mL 時，葉子精油仍可以完全殺死白
mL/kg （1.42%），由此結果顯示，黑心柳 線斑蚊幼蟲，由此結果顯示葉子精油對白
杉葉子精油的收率最高，而樹皮精油的收 線斑蚊幼蟲也有很強的抑制效能。
率最低。Cheng 等人（2005）先前曾分析 另外，為了求得柳杉各部位精油對埃
紅心柳杉各部位精油的收率，結果顯示葉 及斑蚊幼蟲和白線斑蚊幼蟲之半數致死濃
子精油的收率最高（27.38 mL/kg），此結 度（LC50）及病媒蚊幼蟲致死率為 90%時
果與我們所得的結果類似。另外，張上鎮 所需之濃度數值（LC90），因此將不同濃
等人（2000）和張惠婷等人（2003）分別 度之各部位精油對埃及斑蚊幼蟲和白線斑
分析台灣杉和台灣肖楠葉子精油之收率為 蚊幼蟲的致死率予以迴歸分析，其結果如
0.7 mL/kg 和 3.4 mL/kg。由此可知，柳杉 表 1 所示。由表 1 可看出各部位精油對埃
葉子精油的含量的確比其它樹種高很多， 及斑蚊幼蟲試驗 24 h 後的 LC50 值之高低依
實值得我們重視並善加利用。 序為樹皮＞枝條＞材部＞葉子，表示葉子

(II) 柳杉各部位精油之抗病媒蚊幼蟲活性 精油抑制埃及斑蚊幼蟲之效果最佳，LC50

為了評估柳杉各部位精油之抗病媒蚊
幼蟲活性，所使用的病媒蚊種類為埃及斑
蚊和白線斑蚊幼蟲。經 24 h 抗病媒蚊幼蟲
試驗後，不同濃度之柳杉各部位精油對埃
及斑蚊幼蟲的致死率如圖 1 所示，使用濃
度為 400 μg/mL 時，材部、葉子、樹皮及
枝條精油可以全部殺死埃及斑蚊幼蟲；使
用濃度為 200 μg/mL 時，葉子及材部精油
可百分之百的殺死埃及斑蚊幼蟲，而樹皮 圖 1 柳杉 4 部位精油於不同濃度下對埃
及枝條精油對埃及斑蚊幼蟲的致死率則分 及斑蚊幼蟲經 24 h 試驗後之致死率
別為 22.5%和 75.0%；當使用濃度降至 100 Fig. 1 Mosquito larvicidal activity of essen-
tial oils extracted from four plant parts
μg/mL 時，葉子精油對埃及斑蚊幼蟲的致
of Cryptomeria japonica at different
死率仍可維持在 97.5%，由此顯示葉子精 concentrations against fourth instar
油對埃及斑蚊幼蟲的抑制效能最好，其次 larvae of Aedes aegypti after 24 h test.
為材部和枝條精油，而樹皮精油則最差。 Each experiment was performed four
times and the data averaged (n = 4).
圖 2 為柳杉各部位精油對白線斑蚊幼蟲的
Numbers followed by different letters
致死率，使用濃度為 400 μg/mL 時，4 部位 (a-f) are significantly different at the
精油均可以全部殺死白線斑蚊幼蟲；使用 level of P < 0.05 according to the
濃度為 200 μg/mL 時，材部、葉子、樹皮 Scheffe’s test
－186－ 黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病媒蚊幼蟲活性

圖 2 柳杉 4 部位精油於不同濃度下對白
線斑蚊幼蟲經 24 h 試驗後之致死率
Fig. 2 Mosquito larvicidal activity of essen-
tial oils extracted from four plant parts
of Cryptomeria japonica at different
concentrations against fourth instar
larvae of Aedes albopictus after 24 h
test. Each experiment was performed
four times and the data averaged (n =
4). Numbers followed by different
letters (a-h) are significantly different
at the level of P < 0.05 according to
the Scheffe’s test
評估，結果顯示孔雀草精油對埃及斑蚊幼
蟲的毒殺效果最強，其 LC50 和 LC90 值分別
為 13.6 μg/mL 和 37.9 μg/mL。Cheng 等人
（2004）和劉如芸（2006）曾評估不同化
學品系土肉桂葉子精油之抗病媒蚊幼蟲活
性，其結果發現，使用濃度為 100 μg/mL
時，桂皮醛型和桂皮醛-桂皮乙酸酯型土肉
桂葉子精油經過 24 h 試驗後，對埃及斑蚊
和白線斑蚊幼蟲二者的致死率均可達到
100%；桂皮醛型土肉桂葉子精油的 LC50
（LC90）值分別為 36.2 μg/mL（LC90＝78.9
μg/mL ） 和 40.8 μg/mL （ LC90 ＝ 81.7
μg/mL），而桂皮醛－桂皮乙酸酯型土肉桂
葉子精油的 LC50 值分別為 43.3 μg/mL
（LC90＝87.3 μg/mL）和 46.5 μg/mL（LC90
＝83.3 μg/mL）。此外，張惠婷等人（2003）
萃取台灣肖楠葉子精油，並對埃及斑蚊幼
蟲進行試驗，結果發現，經 48 h 試驗後，
使用濃度為 100 μg/mL 時，葉子精油對埃

值僅為 59.6 μg/mL，其次為材部精油（LC50 及斑蚊幼蟲之致死率可達到 100%，其 LC50

＝89.6 μg/mL），此 2 種精油的 LC90 值分別 值為 47.3 μg/mL。綜合以上結果顯示，柳

為 130.2 μg/mL 與 199.0 μg/mL。至於對白 杉葉子精油具有良好的抗病媒蚊幼蟲活

線斑蚊幼蟲的 LC50 值之高低依序為樹皮 性，低濃度的葉子精油即可抑制病媒蚊幼

（212.2 μg/mL）＞枝條（114.0 μg/mL）＞ 蟲的生長。

材部（68.8 μg/mL）＞葉子（42.7 μg/mL）， (III) 柳杉葉子精油成分分析

而 LC90 值 分 別 為 365.0 μg/mL 、 324.5
為了瞭解柳杉葉子精油成分，乃利用
μg/mL、168.2 μg/mL 與 80.4 μg/mL，由此
GC-MS 分析鑑定其成分，表 2 為柳杉葉子
可知抗白線斑蚊幼蟲活性亦以葉子精油為
精油之組成分種類與相對含量。由表 2 得
最好。由以上結果可知，葉子精油對埃及
知，葉子精油成分共鑑定、比對出 35 個化
斑蚊和白線斑蚊幼蟲有很好的毒殺效果。
合物，其總含量為 96.26%，依精油組成分
根據 Dharmagadda 等人（2005）萃取孔雀 來看，這 35 個化合物均屬於萜類化合物，
草（T. patula）精油，並對埃及斑蚊、熱帶 可以區分為五大類，包括 14 個單萜類碳氫
家 蚊 （ C. quinquefaciatus ） 及 瘧 蚊 （ A. 化合物（24.32%）、7 個單萜類含氧化合
stephensi）三種幼蟲進行抗病媒蚊幼蟲活性 物（8.68%）、4 個倍半萜類碳氫化合物
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表1 柳杉 4 部位精油對埃及斑蚊幼蟲和白線斑蚊幼蟲經 24 h 試驗後之有效致死濃度
（μg/mL）
Table 1 Lethal concentrations (LC, μg/mL) of essential oils extracted from four plant parts of
Cryptomeria japonica against fourth instar larvae of Aedes aegypti and Aedes albopictus
after 24 h test
Parts LC50 LC90
A. aegypti A. albopictus A. aegypti A. albopictus
Wood 89.6 68.8 199.0 168.2
Twig 202.2 114.0 336.9 324.5
Bark 248.0 212.2 393.8 365.0
Leaf 59.6 42.7 130.2 80.4
Chlorpyrifos* 1.1 1.1 2.4 2.3
* Positive control

（ 0.84% ） 、 7 個 倍 半 萜 類 含 氧 化 合 物 或生育地不同所造成。
（40.31%）以及 3 個二萜類碳氫化合物
(IV) 柳杉葉子精油成分之抗病媒蚊幼蟲活
（22.11%）。若依葉子精油成分含量高低
性
來 看 ， 依 序 為 β-Elemol （ 20.48% ） 、
由上述結果得知，柳杉葉子精油具有
16-Kaurene （ 20.23% ） 、 γ-Eudesmol
良好的抗病媒蚊幼蟲活性，因此將葉子精
（7.34%）、(-)-Terpinen-4-ol（6.64%）、
油（68 g）利用管柱層析及高效能液相層析
α-Eudesmol（6.20%）、3-Carene（6.06%）、
之方式，分離得到 β-Elemol、β-Eudesmol
Sabinene（5.34%）、β-Eudesmol（4.53%）、
和 16-Kaurene 3 個化合物，並利用 GC-MS
α-Pinene（2.96%）、Limonene（2.85%）、
分析鑑定葉子精油之成分，得知葉子精油
γ-Terpinene （ 2.06% ） 、 Isophyllocladene
另包含 8 個主要化合物（α-Terpinene、
（1.46%）、Cubenol（1.33%）、α-Terpinene
γ-Terpinene、(-)-Terpinen-4-ol、3-Carene、
（ 1.31% ） 、 Terpinolene （ 1.18% ） 以 及
α-Pinene 、 Terpinolene 、 Limonene 和
β-Myrcene（1.13%）等 35 個化合物。在這
β-Myrcene），共計 11 個化合物（圖 3）進
35 個化合物中，以倍半萜類含氧化合物
行埃及斑蚊與白線斑蚊之抗病媒蚊幼蟲試
β-Elemol（20.48%）和二萜類碳氫化合物
驗。
16- Kaurene（20.23%）二個化合物為最主
要成分，此結果與李春來和林秀彥（1986） 以商業殺蚊子幼蟲劑陶斯松作為對照

及 Wang 等人（2006）所分析的柳杉葉子 組，抗病媒蚊幼蟲試驗結果如表 3 所示。

精油成分相同，但與 Shieh 等人（1981）所 由表 3 的結果得知，經 24 h 試驗後，

(-)-Terpinen-4-ol、β-Eudesmol 和 β-Elemol 3
分析之日本柳杉葉子精油成分有所差異，
種化合物對埃及斑蚊幼蟲並不具有毒殺效
其主要成分則是以 β-Eudesmol（14.67%）、
果，其 LC50 值均大於 100 μg/mL。至於其
α- Eudesmol（14.67%）和 Elemol（11.62%）
餘 8 種化合物之 LC50 值之高低順序依序為
三個化合物為主，推測可能是品系、樹齡
－188－ 黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病媒蚊幼蟲活性

表 2 柳杉葉部精油成分與含量
Table 2 Constituents and contents of leaf essential oil from Cryptomeria japonica
Relative contents Identification
Compounds RT a KI b
(%) methodc
Monterpene hydrocarbons (%) 24.32
α-Thujene 6.98 929 0.52 MS, KI
α-Pinene 7.17 937 2.96 MS, KI, ST
α-Fenchene 7.53 950 0.19 MS, KI
Camphene 7.57 952 0.38 MS, KI, ST
Sabinene 8.28 976 5.34 MS, KI, ST
β-Pinene 8.36 979 0.15 MS, KI, ST
β-Myrcene 8.77 992 1.13 MS, KI, ST
α-Phellandrene 9.15 1005 0.07 MS, KI, ST
3-Carene 9.32 1011 6.06 MS, KI, ST
α-Terpinene 9.51 1018 1.31 MS, KI, ST
p-Cymene 9.74 1027 0.12 MS, KI, ST
Limonene 9.86 1031 2.85 MS, KI, ST
γ-Terpinene 10.76 1062 2.06 MS, KI, ST
Terpinolene 11.63 1090 1.18 MS, KI, ST
Oxygenated monoterpenes (%) 8.68
Linalool 11.95 1099 0.25 MS, KI, ST
4-Thujanol 12.59 1123 0.19 MS
(-)-Terpinen-4-ol 14.23 1180 6.64 MS, KI, ST
α-Terpineol 14.61 1192 0.40 MS, KI, ST
trans-Piperitol 15.09 1209 0.08 MS, KI
Bornyl acetate 17.29 1288 0.84 MS, KI, ST
α-Terpinyl acetate 18.97 1352 0.28 MS, KI, ST
Sesquiterpene hydrocarbons (%) 0.84
β-Elemene 20.14 1396 0.15 MS, KI
α-Muurolene 22.90 1504 0.08 MS, KI
γ-Cadinene 23.21 1517 0.06 MS, KI
δ-Cadinene 23.40 1525 0.55 MS, KI
Oxygenated sesquiterpenes (%) 40.31
β-Elemol 24.11 1555 20.48 MS, KI, ST
E-Nerolidol 24.28 1562 0.22 MS, KI ,ST
γ-Eudesmol 26.00 1637 7.34 MS, KI, ST
Cubenol 26.24 1648 1.33 MS, KI
β-Eudesmol 26.46 1658 4.53 MS, KI, ST
α-Eudesmol 26.52 1660 6.20 MS, KI
Guaiol-1(10)-en-11-ol 26.78 1672 0.21 MS
Diterpene hydrocarbons (%) 22.11
Bifloratriene 32.21 1932 0.42 MS, KI
Isophyllocladene 32.93 1970 1.46 MS, KI
16-Kaurene 34.31 2044 20.23 MS, KI, ST
Identified components (%) 96.26
a
Retention time (min)
b
Kovats index relative to n-alkanes (C9-C24) on a DB-5MS column
c
Identification based on comparison of the mass spectrum, Kovats index on a DB-5MS column in reference
(Adams, 2001) and co-injection with authentic compounds
中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 42(1):181－192（2009） －189－

圖 3 柳杉葉子精油中 11 種成分之化學結構
Fig. 3 Chemical structures of eleven constituents in Cryptomeria japonica leaf essential oil

α-Pinene（79.1 μg/mL）＞16-Kaurene（57.0 於 100 μg/mL。至於其他 8 種化合物 LC50

μg/mL）＞β-Myrcene（35.8 μg/mL）＞
Terpinolene（32.1 μg/mL）＞γ-Terpinene
（26.8 μg/mL）＞3-Carene（25.3 μg/mL）
＞Limonene（19.4 μg/mL）＞α-Terpinene
（14.7 μg/mL)，顯示 α-Terpinene 的抑制效
果最好，其次則為 Limonene。另外，11 種
成分對白線斑蚊幼蟲的 LC50 和 LC90 值如表
3 所示，經 24 h 試驗後，(-)-Terpinen-4-ol、
β-Eudesmol 和 β-Elemol 3 種化合物對白線
斑蚊幼蟲也不具毒殺效果，其 LC50 值均大
值之高低順序為 α-Pinene（74.0 μg/mL）＞
16-Kaurene（56.5 μg/mL）＞β-Myrcene（27.0
μg/mL）＞α-Terpinene（25.2 μg/mL）＞
3-Carene（24.1 μg/mL）＞γ-Terpinene（22.8
μg/mL）＞Terpinolene（22.0 μg/mL）＞
Limonene（15.0 μg/mL)，結果顯示 Limonene
對白線斑紋幼蟲的抑制效果最好，其次為
Terpinolene。若將 Limonene、γ-Terpinene、
Terpinolene、β-Myrcene、3-Carene、
α-Terpinene 6 種化合物之 LC50 值與柳杉葉
－190－ 黑心柳杉造林木葉子精油及其成分之抗病媒蚊幼蟲活性

表3 柳杉葉子精油中 11 種成分對埃及斑蚊幼蟲和白線斑蚊幼蟲經 24 h 試驗後之 LC50 和

LC90 值（μg/mL）
Table 3 LC50 and LC90 values (μg/mL) of eleven constituents of leaf essential oil from Cryp-
tomeria japonica against Aedes aegypti larvae and Aedes albopictus larvae after 24 h test
A. aegypti A. albopictus
Compounds
LC50 LC90 LC50 LC90
α-Pinene 79.1 >100.0 74.0 >100.0
3-Carene 25.3 69.4 24.1 62.3
β-Myrcene 35.8 > 100.0 27.0 75.4
Limonene 19.4 50.4 15.0 34.0
α-Terpinene 14.7 39.5 25.2 53.2
γ-Terpinene 26.8 68.7 22.8 57.4
(-)-Terpinen-4-ol > 100.0 > 100.0 > 100.0 > 100.0
Terpinolene 32.1 83.6 22.0 55.5
β-Eudesmol > 100.0 > 100.0 > 100.0 > 100.0
β-Elemol > 100.0 > 100.0 > 100.0 > 100.0
16-Kaurene 57.0 95.0 56.5 92.5
Chlorpyrifos* 1.3 3.4 1.1 2.3
*
Positive control

子精油的結果（表1）相比，可以發現 6 種 分，如能善加利用與開發，將可使林產利
碳氫化合物對二種病媒蚊幼蟲在試驗 24 h 用領域更加寬廣，並提高森林的經濟效
後的 LC50 值都比柳杉葉子精油好，顯示柳 益。因此，本試驗萃取柳杉各部位精油，
杉葉子精油抗病媒蚊幼蟲活性可能由此 6 評估精油及其成分對 2 種病媒蚊幼蟲的抑
種碳氫化合物加成作用所造成的。根據張 制活性。試驗結果顯示，比較 4 部位精油
惠婷等人（2003）證實肖楠葉子精油中 對病媒蚊幼蟲之抑制活性，以葉子精油對
α-Pinene、β-Myrcene、β-Caryophyllene 與 埃及斑蚊幼蟲和白線斑蚊幼蟲的抑制效果
Limonene 對埃及斑蚊幼蟲有很好的抑制效 最好，其半數致死濃度（LC50）分別為 59.6
果，其中，以 Limonene 的抗病媒蚊幼蟲活 μg/mL 和 42.7 μg/mL，其次為材部精油，
性最高，LC50 值僅為 9.5 μg/mL。綜合以上 其 LC50 值 分 別 為 89.6 μg/mL 和 68.8
結果得知，柳杉葉子精油中萜類碳氫化合 μg/mL。進一步利用 GC-MS 分析柳杉葉子
物對二種病媒蚊幼蟲的毒殺效果較萜類含 精油的成分，共分析、鑑定出 35 種化合物，
氧化合物好，顯示柳杉葉子精油具有不錯 其 中 以 倍 半 萜 類 含 氧 化 合 物 β-Elemol
的抗病媒蚊幼蟲之活性是由這些萜類碳氫 （ 20.48% ） 和 二 萜 類 碳 氫 化 合 物 16-
化合物所造成的。 Kaurene（20.23%）二個化合物為最主要成
分 。 比 較 葉 子 精 油 中 的 α-Terpinene 、

IV、結論 γ-Terpinene、(-)-Terpinen-4-ol、3-Carene、
α-Pinene 、 16-Kaurene 、 Terpinolene 、
林木精油具有許多高生物活性之成 Limonene、β-Myrcene、β-Eudesmol 和 β-
中華林學季刊 (Quarterly Journal of Chinese Forestry) 42(1):181－192（2009） －191－

Elemol 等 11 種化合物對 2 種病媒蚊幼蟲毒 保護署。台北。pp. 5-7。

殺之效果，證實 α-Terpinene 對埃及斑蚊幼 徐爾烈、蘇俞丞（1999）台灣北部地區登
蟲 之 抑 制 效 果 最 好 （ LC50 值 為 14.7 革熱病媒蚊防治。第十一屆病媒防治技
μg/mL），其次為 Limonene（LC50 值為 19.4 術研討會論文集。行政院環境保護署。
μg/mL）；至於抑制白線斑蚊幼蟲之效果， 台北。pp. 57-68。
則 以 Limonene 最 好 （ LC50 值 為 15.0 張念台（1999）台灣南部地區登革熱病媒
μg/mL），其次是 Terpinolene（LC50 值為 蚊防治。第十一屆病媒防治技術研討會
22.0 μg/mL），顯示柳杉葉子精油具有不錯 論文集。行政院環境保護署。台北。pp.
的抗病媒蚊幼蟲之活性是由這些萜類碳氫 85-98。
化合物所造成的。 張上鎮、吳季玲、王升陽（2000）台灣杉

本試驗結果證實柳杉葉子精油及其成 木材的抗腐朽菌成分與活性。台灣林

分具有不錯的抗病媒蚊幼蟲活性，若能將 業。26：13-17。

這些精油或成分予以開發利用，不但符合 張惠婷、鄭森松、張上鎮、蘇裕昌、蔡坤

環境保護，也能延長木材的使用年限及確 憲、陳維鈞（2003）台灣肖楠葉部精油

保林產品之功能，更可在森林永續經營與 及其成分之抗病媒蚊活性。中華林學季

資源保育的原則下，開發柳杉林木之利用 刊。36：73-79。

潛能，提升柳杉之經濟價值。 劉如芸（2006）六種化學品系土肉桂葉子
精油抗細菌、腐朽菌、病媒蚊幼蟲及室
塵蟎活性。國立臺灣大學森林環境暨資
V、致謝
源學研究所碩士論文。79 頁。
本研究承蒙農委會林務局提供研究經 謝維銓、陳明豐、林桂堂、許書刀、馬肇
費（95 農科-12.2.2-務-e1），國立台灣大學 義、吳世勳（1982）1981 年在屏東縣琉
生物資源暨農學院實驗林管理處提供試 球鄉流行的登革熱之研究。台灣醫誌。
材，在此致上十二萬分的謝意。 81：1388-1395。
Adams, R. P. (2001) Identification of

VI、引用文獻 essential oil components by gas chroma-

tography/quadrupole mass spectroscopy.
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周玲、吳盈昌、樂怡雲、黃耀雄、王啟輝、 and chemical composition of volatile oils
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