Nhóm 1

1.Huỳnh Trần Khánh A – 1711542954

2. Ing Phạm An Bình - 1800000188
3. Phan Qúi Châu – 1711545895
4. Ngô Tấn Đạt – 1911548042
5. Nguyễn Thành Đạt - 1911548819
 Thế nào là phân lập?

- Phân lập là khâu quan trọng trong quá trình nuôi cấy vi khuẩn. Mục đích của
phương pháp phân lập là tách riêng các vi khuẩn từ quần thể ban đầu tạo thành các
dòng vi khuẩn thuần khiết (clon) được gọi là khuẩn lạc. Khi vi khuẩn tăng trưởng
và phát triển trên bề mặt môi trường rắn sẽ tạo ra những khuẩn lạc.

 Cho biết phân lập sau đã đạt yêu cầu hay chưa? Nếu
chưa cần điều chỉnh gì?
- Kỹ thuật phân lập này chưa đạt yêu cầu. Tại vì các đường cấy (đường phân lập) khoảng cách
quá gần nhau chưa đúng kỹ thuật 5 điểm và chưa tận dụng hết diện tích đĩa thạch. Trong đĩa
thạch trên không có đường zig-zag.
- Cách điều chỉnh: khi phân lập các đường cấy phải tách rời nhau, đường zig-zag phải kéo hết
đĩa thạch.
 Đây là kỹ thuật gì? Viết diễn giải các bước cho kỹ thuật này?

 Kỹ thuật cấy vi khuẩn

A: Đốt que cấy trên đèn cồn đến khi nóng đỏ
B: Mở nắp ống nghiệm và nên để gần đèn cồn
C: Hơ miệng ống nghiệm trên đèn cồn
D: Dùng que cấy vừa đốt để lấy vi khuẩn bên trong ống nghiệm
E: Hơ lại miệng ống nghiệm
 Giả định vi khuẩn phân lập được là E. coli, theo các em phản ứng sinh
hóa (KIA, lactose, glucose, manitol, MR, VP, indol, citrat, ure) của vi
khuẩn này sẽ cho kết quả âm/dương như thế nào. Hãy tìm hình minh
họa các phản ứng sinh?

 KIA: vàng-dương tính

 Sử dụng đường Lac, Glu, Mannitol: Vàng-dương tính
 MR: đỏ-dương tính
 VP: vàng-âm tính
 Indol: đỏ-dương tính
 Citrat: xanh lá-âm tính
 Urease: vàng cam-âm tính
 Hình minh họa cho các phản ứng :
 Quy trình định danh Shigella
spp

 Từ mẫu bệnh phẩm cần làm gì?

Cấy phân: Nên lấy phân tươi chỗ có chất nhầy trong thời
kỳ đầu và chưa sử dụng kháng sinh.
Tiếp theo là phân lập và cấy trên môi trường MC,SS,BSA để quan sát.
Cuối cùng là quan sát bằng kính hiển vi và làm phản ứng sinh hóa

 Các bước tiến hành

- Phân lập
- Đặc điểm đại thể
- Đặt điểm vi thể
- Đặc điểm sinh hóa
- Định danh vi khuẩn
* Phân lập :
- Nguyên tắc
+ Trải hỗn hợp vi khẩn trên môi trường với mật độ
giảm dần
+ Tế bào vi khuẩn tách rời thành từng tế bào riêng rẽ
+ Ủ 37oC/24h,1 tế bào rời rạc sẽ phát triển thành một khóm vi khuẩn thuần chủng.

* Đặc điểm đại thể :

- Cấy vi khuẩn lên môi trường MC thấy xuất hiện khóm không màu ta có thể
xác định có vi khuẩn này gây bệnh chuyên biệt.

- Cấy vi khuẩn lên môi trường SS thấy xuất hiện khóm không màu ta
có thể xác định vi khuẩn này có thể là shigella hoặc salmonella

- Cấy vi khuẩn lên môi trường chọn lọc BSA thì cho ra màu xanh rêu
=>chứng minh không có vi khuẩn Salmonella => có vi khuẩn shigella
* Đặc điểm vi thể :
- Vi khuẩn gram âm-bắt màu hồng
- Là trực khuẩn nhỏ, phân bố riêng lẽ,
không có tiêm mao, không di động,
không sinh bào tử, không có nang
,là một vi khuẩn kị khí

* Đặc điểm sinh hóa :

- KIA:Glu(+),Lac(-),Gas(-),H2S(-) - Urease(-):

- Indole(-) - MR(+): đỏ

- Citrate(-):Xanh lá
Xin cám ơn Cô và các bạn
đã lắng nghe