Download as docx, pdf, or txt
Download as docx, pdf, or txt
You are on page 1of 44

Značaj mikroskopa u savremenom svetu.

Mikroskop
Mikroskop je jedinstveni uređaj dizajniran za povećanje mikroslika i mjerenje veličine
objekata ili strukturnih formacija koje se vide kroz sočivo. Ovaj razvoj je nevjerovatan, a
značaj pronalaska mikroskopa je izuzetno velik, jer bez njega neke oblasti moderne
nauke ne bi postojale. A odavde detaljnije.

Mikroskop je uređaj sličan teleskopu koji se koristi u potpuno različite svrhe. Uz pomoć
njega moguće je ispitati strukturu objekata koji su nevidljivi oku. Omogućuje vam
određivanje morfoloških parametara mikroformacija, kao i procjenu njihove
volumetrijske lokacije. Stoga je čak teško i zamisliti koliko je bio važan pronalazak
mikroskopa i kako je njegov izgled utjecao na razvoj nauke.

Istorija mikroskopa i optike

Danas je teško odgovoriti ko je prvi izumeo mikroskop. Vjerovatno će se o ovom pitanju


raspravljati jednako kao o stvaranju samostrela. Međutim, za razliku od oružja, izum
mikroskopa se zaista dogodio u Evropi. A ko tačno još nije poznato. Vjerovatnoća da je
uređaj bio pionir Hans Jansen, holandski proizvođač naočara, prilično je velika. Njegov
sin Zachary Jansen objavio je 1590. da su on i njegov otac konstruirali mikroskop.

Ali već 1609. godine pojavio se drugi mehanizam, koji je stvorio Galileo Galilei. Nazvao
ga je occhiolino i predstavio ga javnosti Académie Nacional dei Lincei. Znak na pečatu
pape Urbana III je dokaz da se mikroskop već tada mogao koristiti. Vjeruje se da je to
modifikacija mikroskopske slike. Svetlosni mikroskop Galilea Galileija (kompozit)
sastojao se od jednog konveksnog i jednog konkavnog sočiva.

Unapređenje i implementacija u praksi

Već 10 godina nakon Galilejevog izuma, Cornelius Drebbel stvara kompozitni mikroskop
sa dva konveksna sočiva. I kasnije, odnosno pred kraj, Christian Huygens je razvio sistem
okulara s dva sočiva. I danas su u proizvodnji, iako im nedostaje vidno polje. Ali, što je
još važnije, uz pomoć takvog mikroskopa 1665. godine sprovedeno je istraživanje na rezu
hrasta pluta, gdje je naučnik vidio takozvano saće. Rezultat eksperimenta je uvođenje
koncepta "ćelije".

Drugi otac mikroskopa - Anthony van Leeuwenhoek - samo ga je ponovo izumio, ali je
uspio privući pažnju biologa na uređaj. I nakon toga je postalo jasno koliko je pronalazak
mikroskopa važan za nauku, jer je omogućio razvoj mikrobiologije. Vjerovatno je
spomenuti uređaj značajno ubrzao razvoj prirodnih nauka, jer dok čovjek nije vidio
mikrobe, vjerovao je da bolesti potiču od nečistoće. A u nauci su vladali koncepti
alhemije i vitalističke teorije o postojanju živog i spontanom nastanku života.

Levengukov mikroskop

Pronalazak mikroskopa je jedinstven događaj u nauci srednjeg vijeka, jer je zahvaljujući


uređaju bilo moguće pronaći mnogo novih tema za naučnu raspravu. Štaviše, mnoge
teorije su propale zahvaljujući mikroskopiji. I to je velika zasluga Anthonyja van
Leeuwenhoeka. Uspio je poboljšati mikroskop tako da mu je omogućio da vidi ćelije do
detalja. A ako to pitanje razmotrimo u ovom kontekstu, onda je Leeuwenhoek zaista otac
ove vrste mikroskopa.

Struktura uređaja
Sama svjetlost je bila ploča sa sočivom koja je mogla umnožavati objekte koji se
razmatraju. Ova ploča sočiva je imala stativ. Kroz njega je postavljena na horizontalni
sto. Usmjeravajući sočivo prema svjetlosti i stavljajući proučavani materijal između njega
i plamena svijeće, bilo je moguće uočiti da je prvi materijal koji je Anthony van
Leeuwenhoek ispitao bio plak. U njemu je naučnik vidio mnoga stvorenja koja još nije
mogao imenovati.

Jedinstvenost mikroskopa Levenguk je upečatljiva. Kompozitni modeli dostupni u to


vrijeme nisu davali visok kvalitet slike. Štaviše, prisustvo dva sočiva samo je pogoršalo
nedostatke. Stoga je bilo potrebno više od 150 godina da kompozitni mikroskopi, koje su
prvobitno razvili Galileo i Drebbel, proizvedu isti kvalitet slike kao i Levengukov uređaj.
Sam Anthony van Leeuwenhoek se još uvijek ne smatra ocem mikroskopa, ali je s
pravom priznati majstor mikroskopije prirodnih materijala i ćelija.

Izum i unapređenje sočiva

Sam koncept sočiva je već postojao u starom Rimu i Grčkoj. Na primjer, u Grčkoj je uz
pomoć konveksnih čaša bilo moguće zapaliti vatru. A u Rimu su odavno uočena svojstva
staklenih posuda napunjenih vodom. Omogućili su uvećanje slika, iako ne mnogo puta.
Dalji razvoj sočiva je nepoznat, iako je očigledno da napredak nije mogao stati.

Poznato je da je u 16. veku upotreba naočara ušla u praksu u Veneciji. To potvrđuju


činjenice o dostupnosti mašina za mljevenje stakla koje su omogućile dobivanje sočiva.
Bilo je i crteža optičkih uređaja, koji su bili ogledala i sočiva. Autorstvo ovih radova
pripada Leonardu da Vinčiju. Ali čak i ranije ljudi su radili sa povećalom: Roger Bacon
je 1268. godine iznio ideju stvaranja teleskopa. Kasnije je implementiran.

Očigledno, autorstvo objektiva nije pripadalo nikome. Ali to se promatralo sve do


trenutka kada je Karl Friedrich Zeiss preuzeo optiku. Godine 1847. počeo je proizvoditi
mikroskope. Tada je njegova kompanija postala lider u razvoju optičkih naočara. Postoji
do danas, ostajući glavni u industriji. Sa njom sarađuju sve kompanije koje se bave
proizvodnjom foto i video kamera, optičkih nišana, daljinomera, teleskopa i drugih
uređaja.
Poboljšanje mikroskopije

Istorija pronalaska mikroskopa je upečatljiva kada se detaljno prouči. Ali ništa manje
zanimljiva je povijest daljnjeg poboljšanja mikroskopije. Počeli su da se pojavljuju novi,
a naučna misao koja ih je stvorila tonula je sve dublje i dublje. Sada je cilj naučnika bio
ne samo proučavanje mikroba, već i razmatranje manjih komponenti. Oni su molekuli i
atomi. Već u 19. veku bilo ih je moguće proučavati pomoću rendgenske strukturne
analize. Ali nauka je tražila više.

Dakle, već 1863. godine istraživač Henry Clifton Sorby razvio je polarizacijski
mikroskop za proučavanje meteorita. A 1863. Ernst Abbe je razvio teoriju mikroskopa.
Uspješno ga je usvojio Carl Zeiss. Kao rezultat toga, njegova kompanija se razvila u
priznatog lidera u industriji optičkih uređaja.

Ali ubrzo je došla 1931. - vrijeme stvaranja elektronskog mikroskopa. To je postao novi
tip aparata koji vam omogućava da vidite mnogo više od svjetlosti. U njemu za prijenos
nisu korišteni fotoni i nepolarizirana svjetlost, već elektroni - čestice mnogo manje od
najjednostavnijih jona. Upravo je pronalazak elektronskog mikroskopa omogućio razvoj
histologije. Sada su naučnici stekli potpuno poverenje da su njihovi sudovi o ćeliji i
njenim organelama zaista tačni. Međutim, tek 1986. godine tvorac elektronskog
mikroskopa Ernst Ruska dobio je Nobelovu nagradu. Štaviše, već 1938. James Hillier je
gradio transmisioni elektronski mikroskop.
Najnoviji tipovi mikroskopa

Nauka se, nakon uspjeha mnogih naučnika, sve brže razvijala. Stoga je cilj, diktiran
novom stvarnošću, bila potreba za razvojem visoko osjetljivog mikroskopa. A već 1936.
godine Erwin Müller je proizveo uređaj za emitovanje polja. A 1951. godine proizveden
je još jedan uređaj - poljski ionski mikroskop. Njegova važnost je izuzetna jer je
omogućila naučnicima da prvi put vide atome. I pored toga, 1955. Jerzy Nomarski razvija
teorijske osnove diferencijalne interferentne kontrastne mikroskopije.
Poboljšanje najnovijih mikroskopa

Pronalazak mikroskopa još nije uspješan, jer u principu nije teško natjerati ione ili fotone
da prođu kroz biološke medije, a zatim ispitati rezultirajuću sliku. Ali pitanje poboljšanja
kvaliteta mikroskopije bilo je zaista važno. I nakon ovih zaključaka, naučnici su kreirali
analizator mase koji je preletio, koji je nazvan skenirajući jonski mikroskop.

Ovaj uređaj je omogućio skeniranje jednog atoma i dobijanje podataka o


trodimenzionalnoj strukturi molekula. Zajedno sa ovom metodom, značajno je ubrzao
proces identifikacije mnogih supstanci koje se nalaze u prirodi. A već 1981. uveden je
skenirajući tunelski mikroskop, a 1986. - atomski mikroskop. 1988. je godina izuma
skenirajućeg elektrohemijskog tunelskog mikroskopa. A najnovija i najkorisnija je sonda
Kelvinove sile. Razvijen je 1991. godine.

Procjena globalnog značaja pronalaska mikroskopa


Od 1665. godine, kada se Leeuwenhoek bavi obradom stakla i mikroskopom, industrija je
rasla i postajala sve složenija. A kada se pitamo koliko je bio važan izum mikroskopa,
vrijedi razmotriti glavna dostignuća mikroskopije. Dakle, ova metoda je omogućila
ispitivanje ćelije, što je poslužilo kao još jedan poticaj za razvoj biologije. Tada je uređaj
omogućio da se vide organele ćelije, što je omogućilo formiranje pravilnosti stanične
strukture.

Tada je mikroskop omogućio da se vide molekuli i atomi, a kasnije su naučnici mogli da


skeniraju njihovu površinu. Štaviše, čak se i elektronski oblaci atoma mogu vidjeti kroz
mikroskop. Budući da se elektroni kreću brzinom svjetlosti oko jezgre, potpuno je
nemoguće razmotriti ovu česticu. Uprkos tome, treba shvatiti koliko je bio važan
pronalazak mikroskopa. Omogućio je da se vidi nešto novo što se okom ne vidi. Ovo je
nevjerovatan svijet, čije je proučavanje čovjeka približilo modernim dostignućima fizike,
hemije i medicine. I vredi celog rada.
Pošaljite svoj dobar rad u bazu znanja je jednostavno. Koristite obrazac ispod

Studenti, postdiplomci, mladi naučnici koji koriste bazu znanja u svom studiranju i radu
biće vam veoma zahvalni.

Objavljeno na http://www.allbest.ru/

Sažetak na temu:

Savremene metode mikroskopskog istraživanja

Završio student

2. kurs 12 grupa

Shchukina Serafima Sergeevna

Uvod

1. Vrste mikroskopije

1.1 Svetlosna mikroskopija

1.2 Faznokontrastna mikroskopija

1.3 Interferencijalna mikroskopija

1.4 Polarizujuća mikroskopija

1.5 Luminiscencijska mikroskopija

1.6 Ultraljubičasta mikroskopija


1.7 Infracrvena mikroskopija

1.8 Stereoskopska mikroskopija

1.9 Elektronska mikroskopija

2. Neke vrste modernih mikroskopa

2.1 Istorijska pozadina

2.2 Glavne komponente mikroskopa

2.3 Vrste mikroskopa

Zaključak

Spisak korišćene literature

Uvod

Mikroskopske metode istraživanja su metode proučavanja različitih objekata pomoću


mikroskopa. U biologiji i medicini, ove metode omogućavaju proučavanje strukture
mikroskopskih objekata čije su dimenzije izvan razlučivosti ljudskog oka. Svetlosna i
elektronska mikroskopija čine osnovu mikroskopskih istraživačkih metoda (MMI). U
praktičnoj i naučnoj delatnosti doktori različitih specijalnosti - virolozi, mikrobiolozi,
citolozi, morfologi, hematolozi itd., pored konvencionalne svetlosne mikroskopije,
koriste fazni kontrast, interferenciju, luminiscenciju, polarizacionu, stereoskopsku,
ultraljubičastu, infracrvenu mikroskopiju. Ove metode se zasnivaju na različitim
svojstvima svjetlosti. U elektronskoj mikroskopiji, slika predmeta proučavanja pojavljuje
se zbog usmjerenog strujanja elektrona.

polarizujuća ultraljubičasta mikroskopija

1. Vrste mikroskopije
1.1 Svetlosna mikroskopija

Za svjetlosnu mikroskopiju i druge M.m.i bazirane na njoj. Pored razlučive moći


mikroskopa, od presudnog su značaja karakter i usmerenost svetlosnog snopa, kao i
karakteristike proučavanog objekta koji može biti providan i neproziran. U zavisnosti od
svojstava objekta, fizička svojstva svetlosti se menjaju - njena boja i sjaj, povezani sa
talasnom dužinom i amplitudom, fazom, ravninom i smerom širenja talasa. Na korišćenju
ovih svojstava svetlosti su izgrađeni različiti M. m. I. Za svjetlosnu mikroskopiju,
biološki objekti se obično boje kako bi se otkrila određena njihova svojstva ( pirinač. 1 ).
U tom slučaju tkiva moraju biti fiksirana, jer se bojenjem otkrivaju određene strukture
samo ubijenih ćelija. U živoj ćeliji, boja je izolirana u citoplazmi u obliku vakuole i ne
boji njenu strukturu. Međutim, živi biološki objekti mogu se proučavati i u svjetlosnom
mikroskopu pomoću metode vitalne mikroskopije. U ovom slučaju koristi se kondenzator
tamnog polja koji je ugrađen u mikroskop.

Rice. 1. Mikrolijek miokarda u slučaju iznenadne smrti od akutne koronarne


insuficijencije: Lee bojenje otkriva kontrakturne kontrakcije miofibrila (crvena područja);
Ch250.

1.2 Mikroskopija faznog kontrasta

Mikroskopija faznog kontrasta se također koristi za proučavanje živih i neobojenih


bioloških objekata. Zasnovan je na difrakciji snopa svjetlosti, ovisno o karakteristikama
objekta zračenja. Ovo menja dužinu i fazu svetlosnog talasa. Objektiv specijalnog fazno-
kontrastnog mikroskopa sadrži prozirnu faznu ploču. Živi mikroskopski objekti ili fiksni,
ali neobojeni mikroorganizmi i ćelije, zbog svoje prozirnosti, praktički ne mijenjaju
amplitudu i boju svjetlosnog snopa koji prolazi kroz njih, uzrokujući samo fazni pomak
njegovog vala. Međutim, nakon prolaska kroz predmet koji se proučava, svjetlosni zraci
se odbijaju od poluprozirne fazne ploče. Kao rezultat, javlja se razlika u talasnoj dužini
između zraka koje prolaze kroz objekat i zraka svetlosne pozadine. Ako je ta razlika
najmanje 1/4 valne duljine, tada se pojavljuje vizualni efekat u kojem je tamni objekt
jasno vidljiv na svijetloj pozadini, ili obrnuto, ovisno o karakteristikama fazne ploče.

1.3 Interferencijalna mikroskopija

Interferentna mikroskopija rješava iste probleme kao i fazni kontrast. Ali ako potonje
omogućuje promatranje samo kontura predmeta proučavanja, onda je uz pomoć
interferentne mikroskopije moguće proučavati detalje prozirnog objekta i izvršiti njihovu
kvantitativnu analizu. To se postiže bifurkacijom svjetlosnog snopa u mikroskopu: jedna
od zraka prolazi kroz česticu promatranog objekta, a druga prolazi kroz nju. U okularu
mikroskopa, oba snopa su povezana i interferiraju jedan s drugim. Rezultirajuća fazna
razlika može se izmjeriti određivanjem so. mnogo različitih ćelijskih struktura.
Uzastopno merenje fazne razlike svetlosti sa poznatim indeksima prelamanja omogućava
određivanje debljine živih objekata i nefiksiranih tkiva, koncentracije vode i suve
materije u njima, sadržaja proteina itd. Na osnovu podataka interferentne mikroskopije
posredno se može suditi o permeabilnosti membrana, aktivnosti enzima, metabolizmu
istraživačkih objekata.

1.4 Polarizujuća mikroskopija

Polarizirajuća mikroskopija vam omogućava da proučavate objekte proučavanja u svjetlu


formiranom od dva snopa polarizirana u međusobno okomitim ravninama, odnosno u
polariziranoj svjetlosti. Za to se koriste filmski polaroidi ili Nicolas prizme, koje se
postavljaju u mikroskop između izvora svjetlosti i preparata. Polarizacija se mijenja kada
svjetlosni zraci prolaze (ili se reflektiraju) kroz različite strukturne komponente ćelija i
tkiva, čija su svojstva nehomogena. U takozvanim izotropnim strukturama brzina širenja
polarizirane svjetlosti ne ovisi o ravni polarizacije; u anizotropnim strukturama brzina
njenog širenja se mijenja ovisno o smjeru svjetlosti duž longitudinalne ili talasne
svjetlosti u normi. .

Rice. 2a). Mikropreparacija miokarda u polarizu poprečne ose objekta.

Ako je indeks loma svjetlosti duž strukture veći nego u poprečnom smjeru, javlja se
pozitivni dvolom, sa suprotnim odnosom - negativni dvolom. Mnogi biološki objekti
imaju strogu molekularnu orijentaciju, anizotropni su i imaju pozitivan dvolom svjetlosti.
Takva svojstva imaju miofibrili, cilije trepljastog epitela, neurofibrili, kolagena vlakna
itd. sl. 2 Polarizujuća mikroskopija je jedna od histoloških metoda istraživanja, metoda
mikrobiološke dijagnostike, koristi se u citološkim studijama itd. U ovom slučaju u
polariziranom svjetlu možete proučavati obojene i neobojene i nefiksirane, tzv. preseci
tkiva.

Rice. 2b). Mikropreparacija miokarda u polariziranom svjetlu u slučaju iznenadne smrti


od akutne koronarne insuficijencije - otkrivaju se područja u kojima nema karakteristične
poprečne pruge kardiomiocita; H400.

1.5 Luminescentna mikroskopija
Luminiscencijska mikroskopija se široko koristi. Zasnovan je na svojstvu određenih
supstanci da daju sjaj - luminescenciju u UV zracima ili u plavo-ljubičastom dijelu
spektra. Mnoge biološke supstance, kao što su jednostavni proteini, koenzimi, neki
vitamini i lekovi, imaju svoju (primarnu) luminescenciju. Druge tvari počinju svijetliti
tek kada im se dodaju posebne boje - fluorohromi (sekundarna luminiscencija).
Fluorohromi mogu biti difuzno raspoređeni u ćeliji, ili selektivno boje pojedinačne
ćelijske strukture ili određene hemijske spojeve biološkog objekta. Ovo je osnova za
upotrebu luminiscentne mikroskopije u citološkim i histohemijskim studijama. Uz pomoć
imunofluorescencije u luminiscencijskom mikroskopu otkrivaju se virusni antigeni i
njihova koncentracija u stanicama, identifikuju se virusi, antigeni i antitijela, hormoni,
razni metabolički produkti itd. pirinač. 3 ). S tim u vezi, fluorescentna mikroskopija se
koristi u laboratorijskoj dijagnostici infekcija kao što su herpes, zaušnjaci, virusni
hepatitis, influenca i dr., koristi se u ekspresnoj dijagnostici respiratornih virusnih
infekcija, pregledom otisaka sa nosne sluznice pacijenata, te u diferencijalna dijagnoza
raznih infekcija. U patomorfologiji, pomoću luminiscentne mikroskopije, maligni tumori
se prepoznaju u histološkim i citološkim preparatima, određuju se područja ishemije
srčanog mišića u ranim fazama infarkta miokarda, amiloid se otkriva u biopsijama tkiva.

Rice. 3. Mikropreparacija peritonealnog makrofaga u ćelijskoj kulturi, fluorescentna


mikroskopija.

1.6 Ultraljubičasta mikroskopija

Ultraljubičasta mikroskopija se zasniva na sposobnosti određenih supstanci koje čine žive


ćelije, mikroorganizme ili fiksna, ali ne obojena, prozirna u vidljivoj svetlosti tkiva, da
apsorbuju UV zračenje određene talasne dužine (400-250 nm). Ovo svojstvo poseduju
jedinjenja velike molekularne težine, kao što su nukleinske kiseline, proteini, aromatske
kiseline (tirozin, triptofan, metilalanin), purinske i piramidinske baze itd. slučaj
proučavanja živih objekata, njihovih promjena u procesu života.

1.7 Infracrvena mikroskopija

Infracrvena mikroskopija vam omogućava da proučavate objekte neprozirne za vidljivu


svjetlost i UV zračenje apsorbirajući svjetlost talasne dužine od 750-1200 nm njihovim
strukturama. Za infracrvenu mikroskopiju nije potrebna nikakva preliminarna hemikalija.
prerada droga. Ova vrsta M. od m i. najčešće se koristi u zoologiji, antropologiji i drugim
granama biologije. U medicini se infracrvena mikroskopija koristi uglavnom u
neuromorfologiji i oftalmologiji.
1.8 Stereoskopska mikroskopija

Za proučavanje volumetrijskih objekata koristi se stereoskopska mikroskopija. Dizajn


stereoskopskih mikroskopa omogućava vam da vidite predmet proučavanja desnim i
lijevim okom pod različitim uglovima. Istražite neprozirne objekte uz relativno malo
povećanje (do 120 puta). Stereoskopska mikroskopija se koristi u mikrohirurgiji, u
patomorfologiji u specijalnom proučavanju biopsijskog, hirurškog i sekcijske građe, u
forenzičkim laboratorijskim istraživanjima.

1.9 Elektronska mikroskopija

Elektronska mikroskopija se koristi za proučavanje strukture ćelija, tkiva


mikroorganizama i virusa na subćelijskom i makromolekularnom nivou. Ovaj M. m.
And. dozvoljeno da se pređe na kvalitativno novi nivo proučavanja materije. Našao je
široku primenu u morfologiji, mikrobiologiji, virologiji, biohemiji, onkologiji, genetici,
imunologiji. Naglo povećanje rezolucije elektronskog mikroskopa osigurava tok
elektrona koji prolaze u vakuumu kroz elektromagnetna polja koja stvaraju
elektromagnetna sočiva. Elektroni mogu proći kroz strukture objekta koji se proučava
(transmisiona elektronska mikroskopija) ili se od njih reflektirati (skenirajuća elektronska
mikroskopija), skretajući se pod različitim uglovima, što rezultira slikom na
luminiscentnom ekranu mikroskopa. U transmisijskoj (transmisionoj) elektronskoj
mikroskopiji, planarna slika struktura ( pirinač. 4 ), dok skenirate - volumetrijski
( pirinač. 5 ). Kombinacija elektronske mikroskopije s drugim metodama, na primjer, s
radioautografijom, histohemijskim, imunološkim istraživačkim metodama, omogućava
izvođenje elektron-radio autografskih, elektronsko-histokemijskih, elektronsko-
imunoloških studija.

Rice. 4. Difrakcija elektrona kardiomiocita, dobijena transmisijskom (transmisionom)


elektronskom mikroskopijom: supćelijske strukture su jasno vidljive; H22000.

Elektronska mikroskopija zahtijeva posebnu pripremu istraživačkih objekata, posebno


hemijsku ili fizičku fiksaciju tkiva i mikroorganizama. Nakon fiksacije, materijal za
biopsiju i sekcijski materijal se dehidriraju, sipaju u epoksidne smole i režu staklenim ili
dijamantskim noževima na posebnim ultratomima, koji omogućavaju dobivanje
ultratankih presjeka tkiva debljine 30-50 nm. Kontrastiraju se, a zatim se ispituju pod
elektronskim mikroskopom. U skenirajućem (rasterskom) elektronskom mikroskopu
proučava se površina različitih objekata raspršivanjem elektronski gustih supstanci na
njih u vakuumskoj komori, a tzv. replike koje prate konture uzorka.
Rice. 5. Difrakcija elektrona leukocita i bakterije koju on fagocitira, dobijena
skenirajućim elektronskim mikroskopom; H20000.

2. Neke vrste modernih mikroskopa

Fazni kontrastni mikroskop(anoptralni mikroskop) koristi se za proučavanje prozirnih


objekata koji nisu vidljivi u svijetlom polju i koji se ne mogu bojiti zbog pojave
anomalija u uzorcima koji se proučavaju.

Interferentni mikroskop omogućava proučavanje objekata s niskim indeksom


prelamanja svjetlosti i izuzetno male debljine.

Ultraljubičasto i infracrveno mikroskopi dizajnirani su za proučavanje objekata u


ultraljubičastom ili infracrvenom području svjetlosnog spektra. Opremljeni su
fluorescentnim ekranom, na kome se formira slika preparata za ispitivanje, kamerom sa
fotografskim materijalom osetljivim na ova zračenja ili pretvaračem slike za formiranje
slike na ekranu osciloskopa. Talasna dužina ultraljubičastog dijela spektra je 400-250 nm,
stoga se u ultraljubičastom mikroskopu može dobiti veća rezolucija nego u svjetlosnom,
gdje se osvjetljenje vrši zračenjem vidljive svjetlosti talasne dužine 700-400 nm. .
Prednost ovog M. je i to što objekti nevidljivi u običnom svetlosnom mikroskopu postaju
vidljivi, jer apsorbuju UV zračenje. U infracrvenom mikroskopu, objekti se posmatraju
na ekranu elektronsko-optičkog pretvarača ili fotografišu. Infracrvena mikroskopija se
koristi za proučavanje unutrašnje strukture neprozirnih objekata.

Polarizirajući mikroskop omogućava vam da identifikujete nehomogenosti


(anizotropiju) strukture kada proučavate strukturu tkiva i formacija u tijelu u
polariziranom svjetlu. Osvetljenje preparata u polarizacionom mikroskopu vrši se kroz
polarizatorsku ploču, koja obezbeđuje prolaz svetlosti u određenoj ravni prostiranja
talasa. Kada se polarizirana svjetlost, u interakciji sa strukturama, mijenja, strukture su
oštro kontrastne, što se široko koristi u biomedicinskim istraživanjima u proučavanju
krvnih preparata, histoloških preparata, tankih rezova zuba, kostiju itd.

Fluorescentni mikroskop(ML-2, ML-3) je dizajniran za proučavanje luminiscentnih


objekata, što se postiže osvjetljavanjem potonjih UV zračenjem. Posmatranjem ili
fotografisanjem preparata u svetlu njihove vidljive pobuđene fluorescencije (tj. u
reflektovanoj svetlosti) može se suditi o strukturi ispitivanog uzorka, koji se koristi u
histohemijskim, histološkim, mikrobiološkim i imunološkim studijama. Direktno bojenje
luminiscentnim bojama omogućava jasnije identificiranje takvih ćelijskih struktura koje
je teško vidjeti u svjetlosnom mikroskopu.
Rentgenski mikroskop koristi se za proučavanje objekata u rendgenskom zračenju,
stoga su takvi mikroskopi opremljeni mikrofokusnim izvorom rendgenskog zračenja,
rendgenskom slikom u pretvarač vidljive slike - elektronsko-optičkim pretvaračem koji
formira vidljivu sliku na osciloskopu cijevi ili na fotografskom filmu. Rentgenski
mikroskopi imaju linearnu rezoluciju do 0,1 mikrona, što omogućava proučavanje finih
struktura žive materije.

Elektronski mikroskop namijenjeno proučavanju ultrafinih struktura, koje se ne mogu


razlikovati u svjetlosnim mikroskopima. Za razliku od svjetlosti, u elektronskom
mikroskopu rezolucija je određena ne samo fenomenima difrakcije, već i raznim
aberacijama elektronskih sočiva, koje je praktično nemoguće ispraviti. Ciljanje
mikroskopa se uglavnom vrši dijafragmom, zbog upotrebe malih otvora elektronskih
zraka.

2.1 Istorijska pozadina

Svojstvo sistema dva sočiva da daju uvećane slike objekata bilo je poznato još u 16.
veku. u Holandiji i sjevernoj Italiji majstorima za naočale. Postoje podaci da je oko 1590.
godine uređaj tipa M. napravio Z. Jansen (Holandija). Brzo širenje M. i njihovo
usavršavanje, uglavnom od strane zanatlija-optičara, počelo je 1609-10, kada je G.
Galileo, proučavajući teleskop koji je konstruirao (vidi Teleskop), koristio i njega kao M.,
mijenjajući udaljenost između sočivo i okular. Prvi sjajni uspjesi u korištenju M. u
naučnim istraživanjima vezani su za imena R. Hookea (oko 1665; on je posebno utvrdio
da životinjska i biljna tkiva imaju ćelijsku strukturu) i posebno A. Levenguka, koji je
otkrio mikroorganizme uz M.-ovu pomoć (1673-- 77). Početkom 18. vijeka. Metode su se
pojavile u Rusiji: ovdje je L. Euler (1762; Dioptrika, 1770--71) razvio metode za
izračunavanje optičkih jedinica instrumenta.Godine 1827. JB Amici je prvi koristio
imerziono sočivo u mikroskopiji. Godine 1850. engleski optičar G. Sorby stvorio je prvi
M. za promatranje objekata u polariziranom svjetlu.

Široki razvoj metoda mikroskopskog istraživanja i usavršavanje različitih tipova M. u


drugoj polovini 19. i 20. vijeka. Naučnu aktivnost E. Abbea, koji je razvio (1872--73)
klasičnu teoriju formiranja slika nesvjetlećih objekata u Moskvi, u velikoj mjeri je
promovirao engleski naučnik J. Sirks, koji je postavio temelje interferencijskoj
mikroskopiji. 1893. godine. Godine 1903. Austr. istraživači R. Sigmondi i G. Zidentopf
stvorili su tzv. ultramikroskop. Godine 1935. F. Zernike je predložio metod faznog
kontrasta za posmatranje prozirnih objekata koji blago raspršuju svjetlost u M. Veliki
doprinos teoriji i praksi mikroskopije dao je Sov. naučnici - L. I. Mandelstam, D. S.
Rozhdestvensky, A. A. Lebedev, V. P. Linnik.
2.2 Glavne komponente mikroskopa

Kod većine tipova M. (osim obrnutih, vidi dolje), uređaj za pričvršćivanje objektiva
nalazi se iznad pozornice na kojoj je preparat fiksiran, a kondenzator je instaliran ispod
pozornice. Svaki M. ima cijev (cijev) u koju su ugrađeni okulari; Mehanizmi za grubo i
precizno fokusiranje (koje se vrši promjenom relativnih položaja uzorka, objektiva i
okulara) također su obavezni dodatak M. Svi ovi sklopovi su montirani na stativ ili M
tijelo.

Vrsta kondenzatora koji se koristi zavisi od izbora metode posmatranja. Kondenzatori


svijetlog polja i kondenzatori faznog kontrasta ili kontrasta interferencije su vrlo različiti
sistemi sa dva ili tri sočiva. Za kondenzatore svijetlog polja, numerički otvor može doseći
1,4; uključuju dijafragmu sa otvorom irisa, koja se ponekad može pomaknuti u stranu
kako bi se dobilo koso osvjetljenje preparata. Kondenzatori faznog kontrasta opremljeni
su prstenastim dijafragmama. Kondenzatori tamnog polja su složeni sistemi sočiva i
ogledala. Posebnu grupu čine epikondenzatori, koji su neophodni za posmatranje
metodom tamnog polja u reflektovanoj svetlosti sistema prstenastih sočiva i ogledala
postavljenih oko objektiva. U UV mikroskopiji se koriste specijalna ogledala i
kondenzatori sočiva koji su providni za ultraljubičaste zrake.

Objektivi u većini modernih mikroskopa su zamjenjivi i biraju se ovisno o specifičnim


uvjetima posmatranja. Često se nekoliko objektiva montira u jednu rotirajuću (tzv.
okretnu) glavu; zamena sočiva se u ovom slučaju vrši jednostavnim okretanjem glave.
Prema stepenu korekcije hromatskih aberacija (vidi. Hromatska aberacija), mikro sočiva
se razlikuju ahromate i apohromate (vidi. akromat). Prvi su najjednostavniji po strukturi;
hromatska aberacija kod njih se koriguje za samo dve talasne dužine, a slika ostaje blago
zatamnjena kada se objekat osvetli belom svetlošću. U apohromatima, ova aberacija se
koriguje za tri talasne dužine, i oni daju bezbojne slike. Ravan slike u akromatima i
apohromatima je donekle zakrivljena (vidi Zakrivljenost polja). Akomodacija oka i
mogućnost sagledavanja čitavog vidnog polja refokusiranjem M. delimično kompenzuju
ovaj nedostatak u vizuelnom posmatranju, ali ima snažan uticaj na mikrofotografiju –
ekstremne oblasti slike su van fokusa. Stoga se široko koriste mikro sočiva s dodatnom
korekcijom zakrivljenosti polja - planahromati i planapohromati. U kombinaciji sa
konvencionalnim sočivima koriste se posebni projekcijski sistemi - gomali, koji se
ubacuju umjesto okulara i ispravljaju zakrivljenost površine slike (neprikladni su za
vizualno posmatranje).

Osim toga, mikro sočiva se razlikuju: a) po spektralnim karakteristikama - za sočiva za


vidljivi dio spektra i za UV i IR mikroskopiju (sočivo ili ogledalo); b) po dužini cijevi za
koju su dizajnirani (u zavisnosti od izvedbe sočiva) - za sočiva za cijev od 160 mm, za
cijev od 190 mm i za tzv. “Dužina cijevi je beskonačna” (potonje stvaraju sliku “u
beskonačnosti” i koriste se u kombinaciji s dodatnim - takozvanim cijevnim sočivom koje
pretvara sliku u fokalnu ravan okulara); c) medijumom između objektiva i preparata - za
suvo i potapanje; d) prema metodi posmatranja - za obični, fazni kontrast, interferenciju
itd.; e) prema vrsti preparata - za preparate sa i bez pokrovnog staka. Poseban tip
predstavljaju epio sočiva (kombinacija konvencionalnog sočiva s epikondenzatorom).
Raznolikost sočiva uzrokovana je različitim mikroskopskim metodama posmatranja i
mikroskopskim dizajnom, kao i razlikama u zahtjevima za ispravljanje aberacija u
različitim radnim uvjetima. Stoga se svaki objektiv može koristiti samo u uvjetima za
koje je dizajniran. Na primjer, sočivo dizajnirano za cijev od 160 mm ne može se koristiti
u objektivu s dužinom cijevi od 190 mm; sa sočivom za stakalce sa pokrovnim
stakalcem, stakalce bez pokrovnog stakala se ne mogu posmatrati. Posebno je važno
pridržavati se projektnih uvjeta pri radu sa suhim sočivima velikih otvora blende (A>
0,6), koji su vrlo osjetljivi na sva odstupanja od norme. Debljina poklopca za ova sočiva
treba da bude 0,17 mm. Imerziono sočivo se može koristiti samo sa uranjanjem za koje je
dizajnirano.

Tip okulara koji se koristi za ovu metodu posmatranja određen je izborom sočiva M.
kompenzacioni okulari, dizajnirani tako da njihova zaostala hromatska aberacija ima
drugačiji predznak od predznaka objektiva, što poboljšava kvalitet slike. Osim toga,
postoje posebni fotografski okulari i okulari za projekciju koji projektuju sliku na platno
ili fotografsku ploču (ovo uključuje i gore spomenute gomale). Posebnu grupu čine
kvarcni okulari, providni za UV zrake.

Različite pripadnosti M. omogućavaju poboljšanje uslova posmatranja i širenje


mogućnosti istraživanja. Iluminatori raznih tipova su dizajnirani da stvore najbolje uslove
osvetljenja; okularni mikrometri (vidi Okularni mikrometar) se koriste za mjerenje
veličine objekata; binokularne cijevi omogućavaju promatranje lijeka istovremeno s dva
oka; mikrofoto prilozi i mikrofotografske instalacije se koriste za mikrofotografiju;
mašine za crtanje omogućavaju skiciranje slika. Za kvantitativne studije koriste se
posebni uređaji (na primjer, mikrospektrofotometrijske mlaznice).

2.3 Vrste mikroskopa

Dizajn M., njegova oprema i karakteristike glavnih jedinica određuju se ili područjem
primjene, opsegom problema i prirodom objekata za koje se namjerava proučavati, ili
metodom posmatranja (metode ) za koji je dizajniran, ili oboje. Sve je to dovelo do
stvaranja različitih tipova specijalizovanih M., koji omogućavaju proučavanje strogo
određenih klasa objekata (ili čak samo nekih njihovih određenih svojstava) sa velikom
preciznošću. S druge strane, postoje tzv. univerzalni M., uz pomoć kojeg je moguće
promatrati različite objekte raznim metodama.

Biološke M. su među najrasprostranjenijim. Koriste se za botanička, histološka,


citološka, mikrobiološka, medicinska istraživanja, kao i u oblastima koje nisu direktno
vezane za biologiju - za posmatranje prozirnih objekata u hemiji, fizici itd. Postoji mnogo
modela biološke M., koji se razlikuju po dizajn i dodatni dodaci koji značajno proširuju
raspon predmeta koji se proučavaju. Ovi dodaci uključuju: izmjenjive propusne i
reflektirane svjetlosne iluminatore; zamjenjivi kondenzatori za rad na metodama svijetlog
i tamnog polja; Uređaji za fazni kontrast; mikrometri okulara; prilozi za mikrofoto; setovi
svjetlosnih filtera i polarizacijskih uređaja koji omogućavaju korištenje tehnike
luminiscencije i polarizacijske mikroskopije u običnoj (nespecijaliziranoj) mikroskopiji.
U pomoćnoj opremi za biološku M., posebno važnu ulogu igra mikroskopska tehnologija
(vidi. Mikroskopska oprema), namijenjena za pripremu preparata i izvođenje različitih
operacija s njima, uključujući i direktno u procesu promatranja (vidi. Mikromanipulator,
mikrotom).

Mikroskopi za biološka istraživanja opremljeni su skupom izmjenjivih objektiva za


različite uslove i metode posmatranja i vrste preparata, uključujući epio objektive za
reflektovanu svjetlost i često objektive s faznim kontrastom. Set objektiva odgovara
kompletu okulara za vizuelno posmatranje i mikrofotografiju. Obično takvi M. imaju
binokularne cijevi za promatranje s dva oka.

Pored M. opšte namene, u biologiji se široko koriste različiti M. specijalizovani za


metodu posmatranja (vidi dole).

Obrnuti M. Smjer putanje zraka koje prolaze odozgo prema dolje kroz sočivo mijenja se
sistemom ogledala, a one ulaze u oko posmatrača, kao i obično, odozdo prema gore
( pirinač. osam). M. ovog tipa namijenjeni su za proučavanje glomaznih objekata koje je
teško ili nemoguće postaviti na scenu konvencionalnog M. U biologiji se uz pomoć
takvih M. proučavaju kulture tkiva u hranljivoj podlozi koje se postavljaju. u
termostatskoj komori za održavanje određene temperature. Obrnuti mikroorganizmi se
koriste i za proučavanje hemijskih reakcija, određivanje tačaka topljenja materijala iu
drugim slučajevima kada je za izvođenje posmatranih procesa potrebna glomazna
pomoćna oprema. Za mikrofotografiju i mikroskopsku fotografiju, invertni mikroskopi su
opremljeni posebnim uređajima i kamerama.

Šema obrnute munje je posebno pogodna za posmatranje struktura različitih površina u


reflektovanoj svjetlosti. Zbog toga se koristi u većini metalografskih metalografa.U njima
se uzorak (tanki presek metala, legure ili minerala) postavlja na sto uglačanom površinom
nadole, dok ostatak može imati proizvoljan oblik i ne zahtijeva nikakvu obradu. Postoje i
metalografski metalni radovi, u kojima se predmet postavlja odozdo, pričvršćujući ga na
posebnu ploču; međusobni položaj čvorova u takvom M. je isti kao i kod običnog
(neinvertovanog) M. Proučavana površina je često prethodno urezana, zbog čega se zrna
njene strukture oštro razlikuju jedno od drugog. Kod ove vrste svjetlosti može se koristiti
metoda svijetlog polja sa direktnim i kosim osvjetljenjem, metoda tamnog polja i
posmatranje u polariziranom svjetlu. Kada radite u svijetlom polju, sočivo služi i kao
kondenzator. Zrcalni parabolični epikondenzatori se koriste za osvjetljenje tamnog polja.
Uvođenje posebnog pomoćnog uređaja omogućava izvođenje faznog kontrasta u
metalografskim mikroskopima sa konvencionalnim sočivom ( pirinač. devet).

Luminescentni mikroskopi su opremljeni setom izmjenjivih svjetlosnih filtera, odabirom


kojih je moguće odabrati dio spektra u zračenju iluminatora koji pobuđuje luminiscenciju
određenog objekta koji se proučava. Odabire se i svjetlosni filter koji od objekta propušta
samo luminescentno svjetlo. Sjaj mnogih objekata pobuđuju UV zraci ili kratkotalasni
dio vidljivog spektra; prema tome, izvori svjetlosti u luminiscentnim izvorima svjetlosti
su živine lampe ultravisokog pritiska, koje daju upravo takvo (i vrlo jako) zračenje (vidi
izvori svjetlosti s pražnjenjem u plinu). Pored specijalnih modela luminiscentnih M.,
postoje luminiscentni uređaji koji se koriste u kombinaciji sa konvencionalnim M.; sadrže
iluminator sa živinom lampom, set svjetlosnih filtera itd. neproziran otvor za
osvjetljavanje preparata odozgo.

Ultraljubičasti i infracrveni mikroskopi se koriste za istraživanje u područjima spektra


koja su nevidljiva oku. Njihove osnovne optičke šeme su slične onima kod
konvencionalnih mikroskopa.Zbog velike složenosti ispravljanja aberacija u UV i IR
područjima, kondenzator i sočivo u takvim mikroskopima često su sistemi zrcalnih leća u
kojima je hromatska aberacija značajno smanjena ili potpuno odsutan. Leće su
napravljene od materijala koji su providni za UV (kvarc, fluorit) ili IR (silicijum,
germanijum, fluorit, litijum fluorid) zračenje. Ultraljubičasti i infracrveni mikroskopi
opremljeni su kamerama u kojima se snima nevidljiva slika; vizuelno posmatranje kroz
okular u običnom (vidljivom) svetlu služi, kada je to moguće, samo za prethodno
fokusiranje i orijentaciju objekta u vidnom polju M. Ovi mikroskopi po pravilu imaju
elektronsko-optičke pretvarače koji nevidljivu sliku pretvaraju u jedan vidljiv.

Polarizacijski mikroskopi su dizajnirani da proučavaju (uz pomoć optičkih


kompenzatora) promjene u polarizaciji svjetlosti koja prolazi kroz objekt ili se od njega
odbija, što otvara mogućnost kvantitativnog ili polukvantitativnog određivanja različitih
karakteristika optički aktivnih objekata. Čvorovi takvog M. obično su napravljeni na
način da se olakšaju tačna mjerenja: okulari su snabdjeveni križem, mikrometarskom
skalom ili mrežom; rotirajući stepen - sa goniometrijskim točkićem za mjerenje ugla
rotacije; često je Fedorovljev sto pričvršćen na pozornicu (vidi Fedorovljev sto), što
omogućava proizvoljno rotiranje i naginjanje uzorka kako bi se pronašle kristalografske i
kristalno-optičke ose. Polarizirajuća sočiva su posebno odabrana tako da u njihovim
sočivima nema unutrašnjih naprezanja koja dovode do depolarizacije svjetlosti.
Mikroskop ovog tipa obično ima pomoćno sočivo koje se može uključiti i isključiti (tzv.
Bertrand sočivo), koje se koristi za posmatranja u prolaznoj svjetlosti; omogućava
razmatranje interferentnih figura (vidi Kristalnu optiku) formiranih od svjetlosti u zadnjoj
fokalnoj ravni objektiva nakon prolaska kroz kristal koji se proučava.

Uz pomoć interferencije M., prozirni objekti se posmatraju metodom interferentnog


kontrasta; mnogi od njih su strukturno slični konvencionalnim mikroskopima, razlikuju
se samo po prisutnosti posebnog kondenzatora, objektiva i mjerne jedinice. Ako se
promatranje provodi u polariziranom svjetlu, tada su takvi M. opremljeni polarizatorom i
analizatorom. Ovi mikroskopi se prema području primjene (uglavnom biološkim
istraživanjima) mogu svrstati u specijalizirane biološke mikroorganizme.U
interferometrijske mikroorganizme često spadaju mikrointerferometri, posebna vrsta
mikrointerferometara, koji se koriste za proučavanje mikroreljefa površina obrađenih
metalnih dijelova.

Stereo mikroskopi. Binokularne cijevi koje se koriste u konvencionalnoj mikroskopiji, uz


svu pogodnost promatranja s dva oka, ne daju stereoskopski efekat: u ovom slučaju isti
zraci padaju u oba oka pod istim uglovima, samo podijeljeni na dva snopa sistemom
prizmi. Stereomikroskopi, koji pružaju zaista trodimenzionalnu percepciju mikro-objekta,
zapravo su dva mikroskopa, napravljena u obliku jedne strukture tako da desno i lijevo
oko promatraju predmet iz različitih uglova ( pirinač. deset). Ovakvi mikroskopi se
najčešće koriste tamo gdje je potrebno izvršiti bilo kakve operacije na objektu tokom
posmatranja (biološka istraživanja, hirurške operacije na krvnim sudovima, mozgu, oku -
Mikrurgija, sklapanje minijaturnih uređaja, poput tranzistora), - stereoskopska percepcija
olakšava ove operacije. Uključivanje prizmi u njegovu optičku šemu, koje igraju ulogu
okretnih sistema (vidi Sistem okretanja), takođe služi da se lakše orijentiše u vidnom
polju mikroskopa; slika u takvom M. je direktna, a ne obrnuta. Dakle, kakav je obično
ugao između optičkih osa objektiva u stereomikroskopima? 12 °, njihov numerički otvor
u pravilu ne prelazi 0,12. Dakle, korisno povećanje takvog M. nije više od 120.

Uporedna sočiva se sastoje od dva konstruktivno kombinovana konvencionalna


mikroskopa sa jednim okularnim sistemom. Posmatrač vidi u dvije polovice vidnog polja
takvog M. sliku dvaju predmeta odjednom, što omogućava njihovo direktno upoređivanje
u boji, strukturi i rasporedu elemenata i drugim karakteristikama. Komparacije se široko
koriste u procjeni kvaliteta površinske obrade, određivanju stepena (poređenje sa
referentnim uzorkom) itd. Specijalni mikroskopi ove vrste se koriste u kriminologiji,
posebno za identifikaciju oružja iz kojeg se ispaljuje metak koji se ispituje.
U televiziji M., koja radi po shemi mikroprojekcije, slika preparata se pretvara u niz
električnih signala, koji zatim ovu sliku u uvećanoj skali reprodukuju na ekranu katodne
cijevi (vidi Katodna cijev ) (kineskop). U takvim mikroskopima moguće je, na čisto
elektronski način, promjenom parametara električnog kola kroz koje signali prolaze,
promijeniti kontrast slike i regulirati njenu svjetlinu. Električno pojačani signali
omogućavaju projekciju slike na veliki ekran, dok konvencionalna mikroprojekcija
zahtijeva izuzetno jako osvjetljenje, često štetno za mikroskopske objekte. Velika
prednost televizijskih monitora je što se mogu koristiti za daljinsko proučavanje objekata
čija je blizina opasna za posmatrača (na primjer, radioaktivna).

U mnogim istraživanjima potrebno je prebrojati mikroskopske čestice (npr. bakterije u


kolonijama, aerosoli, čestice u koloidnim otopinama, krvna zrnca, itd.), kako bi se
odredile površine koje zauzimaju zrna iste vrste u tankim dijelovima legure. , i za
proizvodnju drugih sličnih mjerenja. Transformacija slike u televizijskim aparatima u niz
električnih signala (impulsa) omogućila je konstruisanje automatskih brojača
mikročestica, koji ih registruju po broju impulsa.

Svrha mjerenja M. je precizno mjerenje linearnih i ugaonih dimenzija objekata (često


nimalo malih). Mogu se podijeliti u dvije vrste prema metodi mjerenja. M. M. 1. tipa
koriste se samo u slučajevima kada izmjerena udaljenost ne prelazi linearne dimenzije
vidnog polja M. U takvim M. direktno (pomoću skale ili mikrometra s vijčanim okularom
(vidi Okularni mikrometar)), ne meri se sam objekat, već njegova slika u fokalnoj ravni
okulara, pa se tek onda, prema poznatom uvećanju objektiva, računa izmerena udaljenost
do objekta. Često se u ovim M. slike objekata upoređuju sa uzornim profilima nanesenim
na ploče izmjenjivih glava okulara. U mjerenju M. Od druge vrste, pozornica sa
predmetom i tijelo M. mogu se pomicati jedno u odnosu na drugo uz pomoć preciznih
mehanizama (češće - pozornica u odnosu na tijelo); mjerenjem ovog kretanja
mikrometričkim zavrtnjem ili skalom čvrsto pričvršćenom za pozornicu, utvrđuje se
razmak između posmatranih elemenata objekta. Postoje mjerni M., kod kojih se mjerenje
vrši samo u jednom smjeru (jednokoordinatni M.). Mnogo češći su M. sa pomacima
pozornice u dva okomita pravca (granice pomaka do 200X500 mm); M., u kojem su
mjerenja (i, posljedično, relativni pomaci stola i tijela M.), moguća u tri smjera, koji
odgovaraju trima osi pravokutnih koordinata, koriste se za posebne svrhe. Na nekim M.
moguće je izvršiti mjerenja u polarnim koordinatama; za to je pozornica napravljena
rotirajuća i opremljena skalom i noniusom za brojanje uglova rotacije. U najpreciznijim
mjernim instrumentima druge vrste koriste se staklene vage, a očitavanja na njima se vrše
pomoću pomoćnog (tzv. brojilačkog) mikroskopa (vidi dolje). Tačnost mjerenja kod tipa
2 m je mnogo veća nego kod tipa 1 m. U najboljim modelima, tačnost linearnih merenja
je obično reda 0,001 mm, tačnost mernih uglova je reda veličine 1". Merna brojila tipa 2
se široko koriste u industriji (posebno u mašinstvu) za merenje i kontrolirati dimenzije
mašinskih dijelova, alata itd.
U uređajima za posebno precizna mjerenja (na primjer, geodetska, astronomska itd.),
očitavanja na linearnim skalama i podijeljenim krugovima goniometrijskih instrumenata
vrše se pomoću posebnih instrumenata za brojanje - mjerila skale i mjernih mikrometara.
Prvi imaju pomoćnu staklenu vagu. Njegova slika je jednaka posmatranom intervalu
između podjela glavne skale (ili kruga) podešavanjem povećanja sočiva M. Preciznost
očitavanja (reda 0,0001 mm) je još veća kod magnetnih mikrometara, u čiji je okular
postavljen navojni ili spiralni mikrometar. Uvećanje sočiva je podešeno tako da kretanje
niti između slika linija izmjerene skale odgovara cijelom broju okretaja (ili pola okretaja)
mikrometarskog vijka.

Osim gore opisanih, postoji značajan broj čak i uže specijaliziranih vrsta mikroskopije, na
primjer, mikrometar za brojanje i analizu tragova elementarnih čestica i fragmenata
nuklearne fisije u nuklearnim fotografskim emulzijama (vidi Nuklearna fotografska
emulzija), visokotemperaturni mikrometar za proučavanje objekata zagrijanih do
temperatura reda 2000°C, kontakt M. za ispitivanje površina živih organa životinja i ljudi
(leća u njima je pritisnuta blizu površine koja se proučava, a M. je fokusiran posebnim
ugrađenim sistemom).

Zaključak

Šta možemo očekivati od sutrašnje mikroskopije? Na koje zadatke možete računati? Prije
svega, širi se na sve više novih objekata. Postizanje atomske rezolucije je nesumnjivo
najveće dostignuće naučne i tehničke misli. Međutim, ne zaboravimo da se ovo
postignuće proteže samo na ograničen broj objekata, koji su, osim toga, smješteni u vrlo
specifične, neobične i vrlo utjecajne uvjete. Stoga je potrebno težiti proširenju atomske
rezolucije na širok raspon objekata.

Vremenom se može očekivati da će druge naelektrisane čestice biti privučene "da rade" u
mikroskopima. Jasno je, međutim, da tome treba prethoditi traženje i razvoj moćnih
izvora takvih čestica; osim toga, stvaranje nove vrste mikroskopa će biti determinisano
pojavom specifičnih naučnih problema, čijem rešavanju će upravo te nove čestice dati
odlučujući doprinos.

Poboljšaće se mikroskopska proučavanja dinamičkih procesa, tj. koji se javljaju direktno


u mikroskopu ili u instalacijama povezanim s njim. Ovi procesi uključuju ispitivanje
uzoraka pod mikroskopom (zagrijavanje, rastezanje, itd.) direktno tokom analize njihove
mikrostrukture. Ovdje će uspjeh biti zaslužan, prije svega, zbog razvoja tehnologije
velike brzine fotografije i povećanja vremenske rezolucije detektora (ekrana)
mikroskopa, kao i upotrebe moćnih modernih računara.
Spisak korišćene literature

1. Mala medicinska enciklopedija. - M.: Medicinska enciklopedija. 1991-96

2. Prva pomoć. - M.: Velika ruska enciklopedija. 1994 godina

3. Enciklopedijski rječnik medicinskih pojmova. - M .: Sovjetska enciklopedija. - 1982-


1984

4.http: //dic.academic.ru/

5.http: //ru.wikipedia.org/

6.www.golkom.ru

7.www.avicenna.ru

8.www.bionet.nsc.ru

Objavljeno na Allbest.ru

...

Slični dokumenti

Karakteristike laboratorijske dijagnostike virusnih infekcija pomoću elektronske


mikroskopije. Priprema dijelova zahvaćenog tkiva za pregled. Opis metode
imunoelektronske mikroskopije. Imunološke metode istraživanja, opis analize.

seminarski rad, dodan 30.08.2009

Enalapril: osnovna svojstva i mehanizam pripreme. Infracrvena spektroskopija kao


metoda za identifikaciju enalaprila. Metode ispitivanja čistoće ove ljekovite tvari.
Farmakodinamika, farmakokinetika, upotreba i nuspojave enalaprila.
sažetak dodan 13.11.2012

Metode istraživanja mozga: elektroencefalografske, neurološke, radiološke i


ultrazvučne. Savremene metode snimanja: kompjuterizovana tomografija,
magnetna rezonanca, ventrikuloskopija, stereoskopska biopsija.

prezentacija dodata 04.05.2015

Pojam antropometrije, njeni znaci, metode i razvoj kao nauke, principi


antropometrijskog istraživanja. Ljudska konstitucija i tipovi. Glavne vrste
proporcija tijela. Genetski uslovi somatske konstitucije. Ljudska tipologija prema
E. Kretschmeru.

prezentacija dodata 30.05.2012

Zahtjevi za materijal za šavove. Klasifikacija šavova. Vrste hirurških igala.


Čvorovi u hirurgiji. Intradermalni šavovi Halstead i Halstead-Zolton. Aponeuroza
šavova. Jednoredni, dvoredni i troredni šavovi. Glavne vrste vaskularnih šavova.

prezentacija dodata 20.12.2014

Karakteristike vrste Origanum vulgare L. Stepen hemijske proučavanja origana i


njegovih biološki aktivnih jedinjenja. Zahtjevi regulatornih dokumenata za
sirovine. Mikroskopske metode istraživanja. Kvalitativne reakcije na kumarine.

seminarski rad dodan 05.11.2014

Suština i posebnosti statističkog istraživanja, zahtjevi za njim, metode i tehnike


koje se koriste. Interpretacija i evaluacija dobijenih rezultata. Vrste zapažanja i
principi njihove implementacije. Klasifikacija anketa i analiza njihove efikasnosti.

prezentacija dodata 18.12.2014

Pojam zarazne bolesti i infektivnog procesa. Glavni znakovi, oblici i izvori


zaraznih bolesti. Vrste patogena. Periodi zarazne bolesti kod ljudi. Mikrobiološke
metode istraživanja. Metode bojenja mrlja.
prezentacija dodata 25.12.2011

Prirodne metode kontracepcije. Metoda laktacione amenoreje kao vid


kontracepcije. Savremeni spermicidi, njihove prednosti i princip djelovanja.
Barijerne metode: kondomi. Hormonska kontracepcija. Mehanizam djelovanja
oralnih kontraceptiva.

prezentacija dodata 17.10.2016

Šok je nespecifični fazni klinički sindrom koji karakteriše opšte teško stanje
organizma: patološka klasifikacija, stadijumi, vrste i karakteristike hemodinamike.
Standardno praćenje šoka, liječenje, indikacije za operaciju.

MIKROSKOP

IZVJEŠTAJ učenika 6. razreda iz biologije

Čovjek je dugo vremena živio okružen nevidljivim stvorenjima, koristio proizvode svoje
životne aktivnosti (na primjer, kada je pekao kruh od kiselog tijesta, pravio vino i ocat),
patio kada bi ta stvorenja izazivala bolesti ili kvarila zalihe hrane, ali je ne sumnjam u
njihovo prisustvo... Nisam sumnjao jer nisam vidio, a nisam vidio jer su veličine ovih
mikro stvorenja mnogo niže od granice vidljivosti za koju je ljudsko oko sposobno.
Poznato je da osoba sa normalnim vidom na optimalnoj udaljenosti (25-30 cm) može
razlikovati predmet veličine 0,07-0,08 mm u obliku tačke. Čovjek ne može primijetiti
manje predmete. To je određeno strukturnim karakteristikama njegovog organa vida.

Otprilike u isto vrijeme, kada je počelo istraživanje svemira uz pomoć teleskopa, prvi
pokušaji da se uz pomoć sočiva otkriju tajne mikrosvijeta. Dakle, tokom arheoloških
iskopavanja u Drevnom Babilonu pronađena su bikonveksna sočiva - najjednostavniji
optički instrumenti. Sočiva su napravljena od polirane planine kristal. Možemo
pretpostaviti da je njihovim izumom čovjek napravio prvi korak na putu ka
mikrokosmosu.

Najlakši način da uvećate sliku malog objekta je da ga posmatrate pomoću lupe. Povećalo
se naziva sabirna leća s malom žižnom daljinom (obično ne većom od 10 cm) umetnutom
u dršku.
Kreator teleskopa Galileo v 1610 godine otkrio da u veoma izduženom stanju njegov
teleskop može uvelike uvećati male objekte. Može se uzeti u obzir izumitelj
mikroskopa koji se sastoji od pozitivnih i negativnih sočiva.
Savršeniji instrument za posmatranje mikroskopskih objekata je jednostavan mikroskop...
Ne zna se tačno kada su se ovi uređaji pojavili. Na samom početku 17. stoljeća nekoliko
ovih mikroskopa izradio je majstor naočala Zachariah Jansen iz Middelburga.

U eseju A. Kirchera pušten u 1646 godine, sadrži opis najjednostavniji


mikroskop imenovan od njega staklo od buva... Sastojao se od lupe ugrađene u bakarnu
podlogu, na koju je bio pričvršćen stočić za predmete, koji je služio za smještaj
predmetnog predmeta; ispod se nalazilo ravno ili konkavno ogledalo koje je odbijalo
sunčeve zrake na predmet i tako ga obasjavalo odozdo. Lupa je pomoću zavrtnja
pomerana do pozornice sve dok slika nije postala jasna i jasna.

Prva izvanredna otkrića su napravljeni samo sa jednostavnim mikroskopom... Sredinom


17. vijeka holandski prirodnjak postigao je briljantan uspjeh Anthony Van
Leeuwenhoek... Tokom godina, Leeuwenhoek je poboljšao proizvodnju sićušnih
(ponekad manje od 1 mm u prečniku) bikonveksnih sočiva, koje je napravio od male
staklene kuglice, koja je zauzvrat dobijena topljenjem staklene šipke u plamenu. Zatim je
ova staklena kugla mljevena na primitivnoj mašini za mljevenje. Leeuwenhoek je tokom
svog života napravio najmanje 400 takvih mikroskopa. Jedan od njih, koji se čuva u
univerzitetskom muzeju u Utrechtu, daje više od 300 puta uvećanje, što je bio veliki
uspjeh za 17. vijek.

Početkom 17. stoljeća pojavio se složeni mikroskopi sastavljena od dva sočiva. Izumitelj


ovako složenog mikroskopa nije točno poznat, ali mnoge činjenice govore da je to bio
Holanđanin. Cornelius Drebel, koji je živeo u Londonu i bio u službi engleskog kralja
Džejmsa I. U složenom mikroskopu nalazio se dvije čaše: jedno - sočivo - okrenuto
prema objektu, drugo - okular - okrenuto prema oku posmatrača. U prvim mikroskopima
kao objektiv je služilo bikonveksno staklo koje je davalo pravu, uvećanu, ali inverznu
sliku. Ova slika je ispitivana uz pomoć okulara, koji je tako igrao ulogu lupe, ali je samo
ta lupa služila za uvećanje ne samog predmeta, već njegove slike.

V 1663 godine mikroskop Drebel bio poboljšano engleski fizičar Robert Hooke, koji je


u njega uveo treće sočivo, koje je dobilo ime kolektiva. Ova vrsta mikroskopa je stekla
veliku popularnost, a većina mikroskopa kasnog 17. - prve polovine 8. veka izgrađena je
po njegovoj shemi.

Mikroskopski uređaj
Mikroskop je optički instrument dizajniran za proučavanje uvećanih slika mikro objekata
koji su nevidljivi golim okom.

Glavni dijelovi svjetlosnog mikroskopa (slika 1) su objektiv i okular, zatvoreni u


cilindrično tijelo - cijev. Većina modela za biološka istraživanja dolazi s tri sočiva s
različitim žarišnim daljinama i okretnim mehanizmom dizajniranim da ih brzo mijenja -
kupolom, koji se često naziva kupolom. Cijev se nalazi na vrhu masivnog stativa koji
uključuje držač cijevi. Nešto ispod objektiva (ili kupole sa višestrukim ciljevima) nalazi
se pozornica na kojoj su postavljeni stakalci sa probnim uzorcima. Oštrina se podešava
pomoću zavrtnja za grubo i fino podešavanje, što vam omogućava da promijenite položaj
pozornice u odnosu na sočivo.

Da bi ispitivani uzorak imao dovoljnu svjetlost za udobno posmatranje, mikroskopi su


opremljeni sa još dvije optičke jedinice (slika 2) - iluminatorom i kondenzatorom.
Iluminator stvara tok svjetlosti koji obasjava ispitni uzorak. U klasičnim svjetlosnim
mikroskopima, dizajn iluminatora (ugrađenog ili eksternog) pretpostavlja niskonaponsku
lampu sa debelim žarnom niti, koja skuplja sočivo i dijafragmu, čime se mijenja promjer
svjetlosne mrlje na uzorku. Kondenzator, koji je sabirno sočivo, dizajniran je da fokusira
zrake iluminatora na uzorak. Kondenzator ima i iris dijafragmu (polje i otvor blende),
pomoću koje se kontroliše intenzitet svetlosti.

Prilikom rada sa objektima koji propuštaju svjetlost (tečnosti, tanki dijelovi biljaka itd.),
oni se osvjetljavaju propuštenom svjetlošću - iluminator i kondenzator se nalaze ispod
pozornice. Neprozirne uzorke treba osvijetliti s prednje strane. Za to se iluminator
postavlja iznad bine, a njegovi zraci se kroz sočivo usmjeravaju na objekt uz pomoć
prozirnog ogledala.

Iluminator može biti pasivan, aktivan (lampa) ili oboje. Najjednostavniji mikroskopi
nemaju lampe za osvjetljavanje uzoraka. Ispod stola imaju dvostrano ogledalo čija je
jedna strana ravna, a druga konkavna. Na dnevnom svjetlu, ako je mikroskop pored
prozora, možete dobiti prilično dobro osvjetljenje pomoću konkavnog ogledala. Ako je
mikroskop u mračnoj prostoriji, za osvjetljenje se koriste ravno ogledalo i vanjski
iluminator.
Uvećanje mikroskopa jednako je proizvodu povećanja objektiva i okulara. Uz povećanje
okulara od 10 i uvećanje objektiva od 40, ukupan faktor povećanja je 400. Tipično,
komplet istraživačkog mikroskopa uključuje objektive sa uvećanjima od 4 do 100.
Tipičan set mikroskopskih objektiva za amaterska i obrazovna istraživanja (x 4, x10 i x
40) omogućava povećanje sa 40 na 400.

Rezolucija je još jedna važna karakteristika mikroskopa, koja određuje njegovu kvalitetu
i jasnoću slike koju formira. Što je veća rezolucija, finiji detalji se mogu vidjeti pri
velikom uvećanju. U vezi sa rezolucijom, govori se o "korisnom" i "beskorisnom"
uvećanju. „Korisno“ je količina uvećanja koja maksimizira detalje slike. Dalje uvećanje
(„beskorisno“) nije podržano rezolucijom mikroskopa i ne otkriva nove detalje, ali može
negativno uticati na jasnoću i kontrast slike. Dakle, granica korisnog uvećanja
svjetlosnog mikroskopa nije ograničena ukupnim faktorom povećanja objektiva i okulara
– može se po želji učiniti proizvoljno velikim – već kvalitetom optičkih komponenti
mikroskopa, tj. rezolucijom.

Mikroskop uključuje tri glavna funkcionalna dijela:

1. Rasvjetni dio
Dizajniran za stvaranje svjetlosnog toka koji vam omogućava da osvijetlite objekt na
takav način da naredni dijelovi mikroskopa obavljaju svoje funkcije izuzetno precizno.
Svjetleći dio mikroskopa za prolaznu svjetlost nalazi se iza predmeta ispod sočiva kod
pravih mikroskopa, a ispred objekta iznad sočiva kod invertiranih.
Rasvjetni dio uključuje izvor svjetlosti (lampa i električno napajanje) i optičko-mehanički
sistem (kolektor, kondenzator, polje i podesivi otvor blende / iris dijafragme).

2. Reproducirajući dio
Dizajniran da reproducira objekat u ravnini slike sa kvalitetom slike i uvećanjem
potrebnim za istraživanje (tj., da napravi sliku koja reproducira objekat što je preciznije i
sa svim detaljima sa rezolucijom, uvećanjem, kontrastom i prikazom boja prikladnim za
mikroskopska optika).
Dio za reprodukciju pruža prvu fazu uvećanja i nalazi se iza objekta na ravni slike
mikroskopa. Dio za reprodukciju uključuje sočivo i srednji optički sistem.
Savremeni mikroskopi najnovije generacije baziraju se na optičkim sistemima objektiva,
korigovanih do beskonačnosti.
Ovo dodatno zahteva upotrebu takozvanih cevnih sistema, koji paralelni svetlosni
snopovi koji izlaze iz objektiva „skupljaju” u ravni slike mikroskopa.

3. Vizuelizirajući dio
Dizajniran za dobijanje stvarne slike objekta na mrežnjači, fotografskom filmu ili ploči,
na televizijskom ili kompjuterskom monitoru sa dodatnim uvećanjem (druga faza
uvećanja).

Dio za vizualizaciju nalazi se između ravni slike sočiva i očiju posmatrača (kamera,
kamera).
Dio za snimanje uključuje monokularni, binokularni ili trinokularni vizuelni dodatak sa
sistemom za posmatranje (okulari koji rade kao lupa).
Osim toga, ovaj dio uključuje dodatne sisteme za uvećanje (velikoprodaja/promjena
sistema uvećanja); prilozi za projekcije, uključujući priloge za diskusiju za dva ili više
posmatrača; Strojevi za crtanje; sistemi za analizu i dokumentovanje slika sa
odgovarajućim elementima (foto kanal).

Prvi mikroskopisti druga polovina 17. veka - fizičar R. Hooke, anatom M. Malpighi,


botaničar N. Gru, optičar amater A. Leeuwenhoek i drugi, uz pomoć mikroskopa, opisali
su građu kože, slezine, krvi, mišića, sjemene tekućine itd. Svaka studija je u suštini bila
otkriće, koji se nije dobro slagao sa metafizičkim pogledom na prirodu, koji je evoluirao
tokom stoljeća. Nasumična priroda otkrića, nesavršenost mikroskopa, metafizički pogled
na svet nisu dozvolili 100 godina (od sredine 17. veka do sredine 18. veka) da se naprave
značajni koraci napred u razumevanju obrazaca strukture životinja i biljaka, iako su
činjeni pokušaji generalizacije (teorija "vlaknaste" i "granularne" strukture organizama,
itd.).

Otkriće ćelijske strukture dogodilo se u vrijeme ljudskog razvoja, kada je


eksperimentalna fizika počela tvrditi da je nazivaju gospodaricom svih nauka. U Londonu
je stvoreno društvo najvećih naučnika koji su se fokusirali na poboljšanje svijeta na
specifičnim fizičkim zakonima. Na sastancima članova zajednice nije bilo političke
debate, raspravljalo se samo o raznim eksperimentima i dijelilo istraživanja iz fizike i
mehanike. Vremena su tada bila užurbana, a naučnici veoma tajnoviti. Nova zajednica je
počela da se naziva "koledž nevidljivih". Prvi koji je stajao na početku stvaranja društva
bio je Robert Boyle - veliki Hukov mentor. Fakultet je proizveo potrebnu naučnu
literaturu. Autor jedne od knjiga je bio Robert Hooke, koji je takođe bio deo ove tajne
naučne zajednice. Hooke je već tih godina bio poznat kao izumitelj zanimljivih uređaja
koji su omogućili velika otkrića. Jedan od ovih uređaja je bio mikroskop.

Jedan od prvih kreatora mikroskopa bio je Zacharius Jansen koji ga je stvorio 1595. Ideja
izuma bila je da se dva sočiva (konveksna) montiraju unutar posebne cijevi sa cijevi koja
se može uvući za fokusiranje slike. Ovaj uređaj je mogao povećati objekte koji se
proučavaju 3-10 puta. Robert Hooke je poboljšao ovaj proizvod, koji je odigrao veliku
ulogu u predstojećem otvaranju.
Robert Hooke je dugo vremena kroz stvoreni mikroskop promatrao razne male primjerke,
a jednom je za pregled uzeo običan čep iz posude. Nakon što je ispitao tanak dio ove
plute, naučnik je bio iznenađen složenošću strukture supstance. Vidio je zanimljiv uzorak
mnogih ćelija, iznenađujuće sličan saću. Budući da je pluta biljni proizvod, Hooke je
počeo proučavati dijelove stabljika biljaka pod mikroskopom. Slična slika se ponavljala
posvuda - skup saća. Kroz mikroskop su bili vidljivi mnogi redovi ćelija koje su bile
odvojene tankim zidovima. Robert Hooke je nazvao ove ćelije ćelije... Nakon toga je
formirana čitava nauka o ćelijama, koja se zove citologija. Citologija uključuje
proučavanje strukture ćelija i njihove vitalne aktivnosti. Ova nauka se koristi u mnogim
oblastima, uključujući medicinu, industriju.

Sa imenom M. Malpighi Ovaj eminentni biolog i liječnik povezan je s važnim periodom


mikroskopskih proučavanja anatomije životinja i biljaka.
Izum i poboljšanje mikroskopa omogućili su naučnicima da otkriju
svijet izuzetno malih stvorenja, potpuno drugačijih od njih
koji su vidljivi golim okom. Dobivši mikroskop, Malpighi je napravio niz važnih
bioloških otkrića. U početku je razmišljao
sve sto je doslo pri ruci:

 insekti,
 lagane žabe,
 krvna zrnca,
 kapilarne žile,
 koža,
 jetra,
 slezena
 biljnih tkiva.
U proučavanju ovih predmeta postigao je takvo savršenstvo da je postao
jedan od tvoraca mikroskopske anatomije. Malpighi je prvi koristio
mikroskop za proučavanje cirkulacije krvi.

Koristeći 180-struko uvećanje, Malpighi je došao do otkrića u teoriji cirkulacije krvi: dok
je pod mikroskopom pregledao uzorak žabljeg pluća, uočio je mjehuriće zraka okružene
filmom i male krvne žile, vidio razgranatu mrežu kapilarnih žila. povezujući arterije sa
venama (1661). Tokom sljedećih šest godina, Malpighi je napravio zapažanja koja je
opisao u naučnim radovima koji su mu donijeli slavu velikog naučnika. Malpigijevi
izvještaji o građi mozga, jezika, mrežnice, živaca, slezene, jetre, kože i o razvoju embrija
u kokošijem jajetu, kao i o anatomskoj građi biljaka, svjedoče o vrlo pažljivim
zapažanjima.
Neeimia Gru(1641 - 1712). engleski botaničar i ljekar, mikroskopista,

osnivač biljne anatomije. Glavni radovi su posvećeni pitanjima strukture i spola biljaka.
Uz M. Malpighija bio je osnivač

anatomija biljke. Prvo opisano:

 stomati,
 radijalni raspored ksilema u korijenu,
 morfologija vaskularnog tkiva u obliku guste formacije u središtu stabljike mlade
biljke,
 proces formiranja šupljeg cilindra u starim stabljikama.
Uveo je pojam "komparativna anatomija", uveo pojmove "tkiva" i "parenhima" u
botaniku. Proučavajući građu cvijeća, došao sam do zaključka da su oni organi oplodnje
u biljkama.

Levenguk Anthony(24.10.1632 - 26.08.1723), holandski prirodnjak. Radio je u jednoj


manufakturnoj radnji u Amsterdamu. Vrativši se u Delft, provodio je svoje slobodno
vrijeme bruseći sočiva. Ukupno je Leeuwenhoek napravio oko 250 sočiva tokom svog
života, postigavši povećanje od 300 puta i u tome dostigavši veliko savršenstvo. Leće
koje je napravio, koje je umetnuo u metalne držače sa pričvršćenom iglom za postavljanje
predmeta posmatranja, davale su uvećanje od 150-300 puta. Uz pomoć takvih
"mikroskopa" Leeuwenhoek je prvi put uočio i skicirao:

 sperma (1677),
 bakterije (1683),
 eritrociti,
 protozoa,
 pojedinačne biljne i životinjske ćelije,
 jaja i embrioni,
 mišićno tkivo
 mnogi drugi dijelovi i organi više od 200 vrsta biljaka i životinja.
Prvi put opisana partenogeneza kod lisnih uši (1695-1700).

Levenguk je zauzeo stav preformizma, tvrdeći da je formirani embrion već sadržan u


"životinji" (spermatozoidi). Negirana mogućnost spontanog generisanja. Svoja zapažanja
je opisao u pismima (ukupno do 300), koja je uglavnom slao Kraljevskom društvu u
Londonu. Prateći kretanje krvi kroz kapilare, pokazao je da kapilare povezuju arterije i
vene. Prvi je promatrao eritrocite i otkrio da kod ptica, riba i žaba imaju ovalni oblik, a
kod ljudi i drugih sisara diskoidni. Otkriven i opisan rotifer i niz drugih malih
slatkovodnih organizama.

Upotreba akromatskog mikroskopa u naučnim istraživanjima je bila novina impuls za


razvoj histologije... Početkom XIX veka. napravljena je prva slika jezgara biljnih
ćelija. J. Purkinje(1825-1827) opisao jezgro u jajetu kokoši, a zatim i jezgro u ćelijama
različitih životinjskih tkiva. Kasnije je uveo koncept "protoplazme" (citoplazme) stanica,
karakterizirao oblik nervnih stanica, strukturu žlijezda itd.

R. Brown je zaključio da je jezgro neizostavan dio biljne ćelije. Tako se postepeno počeo
gomilati materijal o mikroskopskoj organizaciji životinja i biljaka i strukturi "ćelija"
(cellula), koju je prvi vidio R. Hooke.

Stvaranje ćelijske teorije imalo je ogroman progresivni uticaj na razvoj biologije i


medicine. Sredinom XIX veka. započeo je period brzog razvoja deskriptivne histologije.
Na osnovu ćelijske teorije proučavan je sastav različitih organa i tkiva, njihov razvoj, što
je već tada omogućilo da se u osnovnim crtama stvori mikroskopska anatomija i da se
razjasni klasifikacija tkiva uzimajući u obzir njihovu mikroskopsku strukturu (A. Kölliker
i drugi).

 Istorija nastanka mikroskopa


Govorite šta želite, ali mikroskop je jedan od najvažnijih alata naučnika, jedno od
njihovih glavnih oružja u razumijevanju svijeta oko sebe. Kako se pojavio prvi
mikroskop, kakva je povijest mikroskopa od srednjeg vijeka do danas, kakva je struktura
mikroskopa i pravila za rad s njim, odgovore na sva ova pitanja naći ćete u našem članku.
Pa počnimo.

Istorija nastanka mikroskopa

Iako su arheolozi tokom iskopavanja drevnog Babilona pronašli prva povećala, na osnovu
kojih zapravo radi svjetlosni mikroskop, ipak su se prvi mikroskopi pojavili u srednjem
vijeku. Zanimljivo je da među istoričarima ne postoji konsenzus o tome ko je prvi izumeo
mikroskop. Kandidati za ovu uglednu ulogu su poznati naučnici i pronalazači kao što su
Galileo Galilei, Christian Huygens, Robert Hooke i Antonia van Leeuwenhoek.
Vrijedi spomenuti i talijanskog ljekara G. Frakostora, koji je još 1538. godine prvi
predložio kombinovanje više sočiva kako bi se dobio veći efekat uvećanja. To još nije
bilo stvaranje mikroskopa, ali je bilo preteča njegovog nastanka.
A 1590. godine izvjesni Hans Jasen, holandski majstor naočala, objavio je da je njegov
sin Zachary Jasen izumio prvi mikroskop, za ljude srednjeg vijeka takav izum bio je
sličan malom čudu. Međutim, brojni istoričari postavljaju pitanje da li je Zakhari Yasen
pravi izumitelj mikroskopa. Činjenica je da u njegovoj biografiji ima mnogo mračnih
tačaka, uključujući i mrlje na njegovoj reputaciji, jer su savremenici optuživali Zachariju
za krivotvorenje i krađu tuđe intelektualne svojine. Šta god da je bilo, ali da sa sigurnošću
znamo da li je Zakhary Yasen bio izumitelj mikroskopa ili ne, mi, nažalost, ne možemo.
Ali reputacija Galilea Galileija u tom pogledu je besprijekorna. Ovu osobu poznajemo,
prije svega, kao velikog astronoma, naučnika, proganjanog od strane Katoličke crkve
zbog vjerovanja da se Zemlja okreće oko sebe, a ne obrnuto. Među važnim Galileovim
izumima je i prvi teleskop, uz pomoć kojeg je naučnik svojim očima prodro u kosmičke
sfere. Ali njegova sfera interesovanja nije bila ograničena samo na zvijezde i planete, jer
je mikroskop u suštini isti teleskop, već upravo suprotno. A ako se uz pomoć povećala
mogu promatrati udaljene planete, zašto onda ne okrenuti njihovu moć u drugom smjeru -
proučavati ono što nam je „pod nosom“. “Zašto ne”, vjerojatno je pomislio Galileo i tako
je 1609. široj javnosti u Accademia dei Licei predstavio svoj prvi kompozitni mikroskop,
koji se sastojao od konveksnih i konkavnih povećala.
Antički mikroskopi.
Kasnije, 10 godina kasnije, holandski pronalazač Cornelius Drebbel poboljšao je Galileov
mikroskop dodavanjem još jednog konveksnog sočiva. Ali pravu revoluciju u razvoju
mikroskopa napravio je Christian Huygens, holandski fizičar, mehaničar i astronom.
Tako je bio prvi koji je stvorio mikroskop sa sistemom okulara sa dva sočiva, koji su bili
ahromatski regulisani. Vrijedi napomenuti da se Huygensovi okulari i danas koriste.
No, poznati engleski pronalazač i naučnik Robert Hooke zauvijek je ušao u povijest
nauke, ne samo kao tvorac vlastitog originalnog mikroskopa, već i kao osoba koja je uz
njegovu pomoć došla do velikog naučnog otkrića. On je prvi vidio kroz mikroskop
organsku ćeliju i sugerirao da se svi živi organizmi sastoje od stanica, ovih najmanjih
jedinica žive tvari. Robert Hooke je rezultate svojih zapažanja objavio u svom temeljnom
djelu - Mikrografija.
Objavljena 1665. od strane Kraljevskog društva iz Londona, ova knjiga je odmah postala
naučni bestseler tog vremena i napravila pravu senzaciju u naučnoj zajednici. Zaista,
sadržavao je gravure sa slikom vaški, muva i biljnih ćelija uvećane kroz mikroskop. U
stvari, ovaj rad je bio nevjerovatan opis mogućnosti mikroskopa.
Zanimljiva činjenica: Robert Hooke je uzeo termin "ćelija" jer su ga biljne ćelije
omeđene zidovima podsjećale na monaške ćelije.
Ovako je izgledao mikroskop Robeta Hookea, slika iz Micrographia.
A posljednji izvanredni naučnik koji je doprinio razvoju mikroskopa bio je Holanđanin
Anthony van Leeuwenhoek. Inspiriran radom Roberta Hookea Micrographia,
Leeuwenhoek je kreirao vlastiti mikroskop. Levengukov mikroskop, iako je imao samo
jedno sočivo, bio je izuzetno jak, pa je nivo detalja i uvećanja njegovog mikroskopa bio
najbolji u to vrijeme. Promatrajući divlje životinje kroz mikroskop, Leeuwenhoek je
napravio mnoga važna naučna otkrića u biologiji: prvi je vidio eritrocite, opisao bakterije,
kvasac, skicirao spermatozoide i strukturu očiju insekata, otkrio i opisao mnoge njihove
oblike. Levengukov rad dao je ogroman poticaj razvoju biologije, pomogao je privlačenju
pažnje biologa na mikroskop, učinio ga sastavnim dijelom bioloških istraživanja, čak i
danas. Ovo je, uopšteno govoreći, istorija otkrića mikroskopa.

Vrste mikroskopa

Nadalje, s razvojem nauke i tehnologije, počeli su se pojavljivati sve sofisticiraniji


svjetlosni mikroskopi, prvi svjetlosni mikroskop koji radi na bazi povećala zamijenjen je
elektronskim mikroskopom, a zatim laserskim mikroskopom, rendgenskim
mikroskopom, koji daju višestruko bolji efekat uvećanja i detalja. Kako ovi mikroskopi
rade? Više o tome kasnije.

Elektronski mikroskop

Istorija razvoja elektronskog mikroskopa počela je 1931. godine, kada je izvesni R.


Rudenberg dobio patent za prvi transmisioni elektronski mikroskop. Zatim, 40-ih godina
prošlog stoljeća, pojavljuju se skenirajući elektronski mikroskopi, koji su svoje tehničko
savršenstvo dostigli već 60-ih godina prošlog stoljeća. Oni su formirali sliku objekta zbog
sekvencijalnog kretanja elektronske sonde malog preseka preko objekta.
Kako radi elektronski mikroskop? U središtu njegovog rada je usmjereni snop elektrona
koji se ubrzava u električnom polju i prikazuje sliku na posebnim magnetnim sočivima,
ovaj snop elektrona je mnogo manji od valne dužine vidljive svjetlosti. Sve to omogućava
povećanje snage elektronskog mikroskopa i njegove rezolucije za 1000-10.000 puta u
odnosu na tradicionalni svjetlosni mikroskop. Ovo je glavna prednost elektronskog
mikroskopa.
Ovako izgleda savremeni elektronski mikroskop.

Laserski mikroskop

Laserski mikroskop je poboljšana verzija elektronskog mikroskopa, njegov rad se zasniva


na laserskom snopu koji omogućava naučnikovom pogledu da posmatra živa tkiva na još
većoj dubini.

Rentgenski mikroskop
Rendgenski mikroskopi se koriste za ispitivanje vrlo malih objekata dimenzija koje su
uporedive sa dimenzijama rendgenskog talasa. Njihov rad se zasniva na
elektromagnetnom zračenju sa talasnom dužinom od 0,01 do 1 nanometar.

Mikroskopski uređaj

Dizajn mikroskopa ovisi o njegovoj vrsti, naravno, elektronski mikroskop će se po svojoj


strukturi razlikovati od svjetlosnog optičkog mikroskopa ili od rendgenskog mikroskopa.
U ovom članku ćemo razmotriti strukturu konvencionalnog modernog optičkog
mikroskopa, koji je najpopularniji i među amaterima i profesionalcima, jer se mogu
koristiti za rješavanje mnogih jednostavnih istraživačkih problema.
Dakle, prije svega, u mikroskopu možete razlikovati optičke i mehaničke dijelove.
Optički dio uključuje:
 Okular je dio mikroskopa koji je direktno povezan s očima posmatrača. U samim
prvim mikroskopima sastojao se od jednog sočiva; dizajn okulara u modernim
mikroskopima, naravno, nešto je složeniji.
 Objektiv je praktično najvažniji dio mikroskopa, jer je objektiv taj koji daje glavno
povećanje.
 Iluminator - odgovoran za protok svjetlosti na objekt koji se proučava.
 Otvor blende - podešava jačinu svjetlosnog toka koji ulazi u predmet koji se
proučava.
Mehanički dio mikroskopa sastoji se od važnih dijelova kao što su:
 Cev, to je cijev koja sadrži okular. Cijev mora biti čvrsta i ne deformirana, inače
će optička svojstva mikroskopa patiti.
 Baza, obezbeđuje stabilnost mikroskopa tokom rada. Na njemu je pričvršćena
cijev, držač kondenzatora, gumbi za fokusiranje i drugi dijelovi mikroskopa.
 Okretna glava - koristi se za brzu promjenu objektiva, nema je u jeftinim
modelima mikroskopa.
 Predmetna tabela je mjesto na kojem se postavlja istraženi predmet ili predmeti.
A ovdje slika prikazuje detaljniju strukturu mikroskopa.

Pravila za rad sa mikroskopom


 Potrebno je raditi sa mikroskopom dok sedite;
 Prije rada, mikroskop se mora provjeriti i obrisati mekom krpom od prašine;
 Postavite mikroskop ispred sebe malo lijevo;
 Vrijedi započeti posao s malim povećanjem;
 Postavite osvjetljenje u vidno polje mikroskopa pomoću električnog svjetla ili
ogledala. Gledajući jednim okom kroz okular i pomoću ogledala sa konkavnom
stranom, usmjerite svjetlost iz prozora u sočivo, a zatim osvijetlite vidno polje što
je više moguće i ravnomjernije. Ako je mikroskop opremljen iluminatorom,
spojite mikroskop na izvor napajanja, uključite lampu i postavite potrebnu
svjetlinu izgaranja;
 Postavite mikropreparat na pozornicu tako da predmet proučavanja bude ispod
objektiva. Gledajući sa strane, spuštajte sočivo pomoću makro zavrtnja sve dok
razmak između donjeg sočiva objektiva i mikropreparacije ne postane 4-5 mm;
 Pomerajući uzorak rukom, pronađite pravo mesto, postavite ga u centar vidnog
polja mikroskopa;
 Da biste proučavali objekat pri velikom povećanju, prvo morate postaviti odabrano
područje u centar vidnog polja mikroskopa pri malom uvećanju. Zatim promijenite
cilj na 40x okretanjem revolvera tako da bude u radnom položaju. Postignite dobru
sliku objekta pomoću mikrometarskog zavrtnja. Na kutiji mikrometarskog
mehanizma nalaze se dvije crtice, a na zavrtnju mikrometra nalazi se tačka koja
uvijek treba biti između linija. Ako pređe njihove granice, mora se vratiti u
normalan položaj. Ako se ovo pravilo ne poštuje, mikrometarski vijak može
prestati raditi;
 Po završetku rada sa velikim uvećanjem, podesite malo uvećanje, podignite
sočivo, uklonite uzorak sa radnog stola, obrišite sve delove mikroskopa čistom
salvetom, pokrijte plastičnom vrećicom i stavite u ormarić.

You might also like