‫ביה"ס למדעי הבריאות והחיים ‪ -‬החוגים לביוטכנולוגיה ומדעי המעבדה הרפואית‬

‫מעבדה בכימיה אורגנית‬

‫ניסוי בנושא‪ :‬מיצוי בשתי פאזות נוזליות‬

‫דוח מסכם – מיצוי קפאין מעלי תה‬

‫‪ .1‬רשום מה היא מטרת הניסוי‪ 5( .‬נקודות)‬

‫מטרת הניסוי היא מיצוי קפאין מעלי תה‬

‫‪ .2‬תאר בקצרה את העיקרון של ‪ .liquid-liquid extraction‬מהו הפרמטר ‪ KD‬ומה הוא מייצג‪ .‬מהי המראה‬
‫ולמה היא משמשת? באילו מקרים ניתן לנצל את היכולת של חומר לעבור המראה? (‪ 15‬נקודות)‬

‫‪ liquid-liquid extraction‬היא שיטה להפרדת תרכובות המתבססת על המסיסות היחסית שלהם בשני נוזלים‬
‫שונים‪.‬‬

‫‪ KD‬הוא מקדם חלוקה של חומרים שאינם מתערבבים אחד עם השני‪ .‬הוא גודל קבוע ותלוי בשיעור התפתחות‬
‫החומר בנוזלים ובטמפרטורה‪.‬‬

‫המראה או סובלימציה היא שיטה לניקוי מוצקים אשר בלחץ אטמוספרי עוברים ישירות מהפאזה‬
‫המוצקה לפאזה הגזית‪ .‬ניתן לנצל את היכולת של חומר לעבור המראה כדי לנקות חומרים מחומרים‬
‫שמסוגלים להמראה וליצור גבישים נקיים בשיטה הנקראת סובלימציה‪.‬‬

‫‪1‬‬
 ‫‪ .3‬תאר את מהלך הניסוי‪ 15( .‬נקודות)‬

‫‪ .1‬בתוך ארלנמייר של ‪ 50‬מל הוסף ‪ 20‬מל מים חמים ‪ +‬שתי שקיות תה‪ .‬כסה בעזרת זכוכית שעון והרתח ‪15‬‬
‫דקות‪ 15( .‬דקות הרתחה)‬

‫‪ .2‬להעביר לאחר ‪ 15‬דקות את התמיסה לשתי מבחנות צנטרפוגה ולקרר‪ .‬לאחר הקירור מוסיפים ‪ 2‬מל מים‬
‫חמים לתיונים ומחלקים לשתי מבחנות‪.‬‬

‫‪ . 3‬מוספים לכל אחת ממבחנות הצטרפוגה כחצי גרם סודיום קרבונת ומערבבים‪.‬‬

‫‪ .4‬מוסיפים שלוש מל של דיכלורמתאן (‪ )DCM‬לכל מבחנה ומערבבים היטב לפחות דקה‪ .‬מעברים לצנטרפוגה‪.‬‬

‫‪.5‬מפרידים את הפאזה התחתונה מכל מבחנה ומעבירים אותה למבחנה רגילה‬

‫‪ .6‬חוזרים שוב על שלבים ‪ 4‬ו‪5‬‬

‫‪ . 7‬מייבשים את הפאזה האורגנית על ידי סודיום סולפט עד שהגרגירים צפים במבחנה‬

‫‪ .8‬מרחיקים את המדיום האורגני ממלח היבוש על ידי שפייה‪.‬‬

‫‪ .9‬למדוד במדיוק מסה של ארלנמייר של ‪ 25‬מל עד ‪ 4‬ספרות אחרי הנקודהלאחר מכן מנדפים ומקבלים מוצק‬

‫‪ .10‬מודדים את מסת הכל עם מסת הקפאין הגולמי‪.‬‬

‫‪2‬‬
‫‪ . 4‬קבע את כמות הקפאין שהפקת בתהליך המיצוי וחשב את ריכוז הקפאין בעלי התה (כל שקיק תה מכיל ‪1gr‬‬
‫של עלים)‪ .‬הצג את כמות הקפאין שאספת בתהליך הסובלימציה‪ .‬האם הכמות זהה לזו שהתקבלה לאחר נידוף‬
‫ה‪ ?DCM-‬מה הסיבות לכך? (‪ 30‬נקודות)‬

‫‪3‬‬
 ‫‪ . 5‬בריאקציה מסוימת המבוצעת בקטליזה בסיסית השתמשו בקפאין‪,‬תיאוברומין וקסאנתן‪ .‬כאשר בדקו את‬
‫תוצאות הריאקציה מצאו שקסאנתן הגיב ונתן תוצאות טובות‪ ,‬תיאוברומין הגיב חלקית ונותרה ממנו כמות קטנה‬
‫שלא הגיבה וקפאין לא הגיב כלל‪ .‬הסבר מדוע‪ 10( .‬נקודות)‬

‫‪ .6‬בתהליך המיצוי של קפאין הנעשה בדומה לזה שבצעתם במעבדה נלקחו שתי דוגמאות מהקפאין שמוצה‬
‫לצורך קביעת דרגת ניקיון באמצעות ‪ .HPLC‬אחת לאחר נידוף של הממס האורגני והשניה לאחר נידוף‬
‫וסובלימציה‪ .‬במקרה של הדוגמה הראשונה התקבל ספקטרום עם מספר פיקים בעוד שבדוגמה השנייה‬
‫התקבל ספקטרום בעל פיק יחיד‪ .‬הסבר את התוצאות‪ 10( .‬נקודות)‬

‫‪4‬‬
 ‫‪ .7‬העזר בספרות על מנת לרשום את נוסחת המבנה של ‪ Pheophytin a‬ו‪ 10( Pheophytin b -‬נקודות)‬

‫‪ . 7‬מדוע קפאין בעל מסיסות גבוהה במים ניטרליים? באיזו סביבה תהיה מסיסותו טובה יותר‪ ,‬חומצית‪ ,‬בסיסית‬
‫או ניטרלית? הסבר (‪ 5‬נקודות)‬

‫‪ . 8‬במהלך הסובלימציה של הקפאין חשוב לשמור על המערכת תחת לחץ נמוך מאוד לאורך כל התהליך‪ .‬מה‬
‫הסיבה לכך? (‪ 5‬נקודות)‬

‫‪ . 9‬מדוע החזרה על תהליך המיצוי עם כמות קטנה של פאזה אורגנית מספר פעמים עדיפה על פני מיצוי יחיד‬
‫עם כמות גדולה יותר? (‪ 5‬נקודות)‬

‫‪5‬‬