Central Luzon Doctors’ Hospital Educational Institution

Romulo Highway, San Pablo, Tarlac City

Medical Technology Department
Academic Year 2021 – 2022

TIONGCO, Mhary Joyce J. Clinical Parasitology (Lab)

BSMT 2B Activity # 3

1. DRAW AND EXPLAIN THE DIFFERENCE BETWEEN ENTAMOEBA HISTOLYTICA VS

ENTAMOEBA COLI.

DIFFERENCE ENTAMOEBA HISTOLYTICA ENTAMOEBA COLI

Ang Entamoeba histolytica ay ang pathogenic agent ng amebic dysentery, isang kondisyon na
nailalarawan sa pamamaga ng bituka at ulceration ng colon, habang ang Entamoeba coli ay isang
non-pathogenic species ng genus Entamoeba na sumasaklaw sa gastrointestinal tract ng mga tao at
iba pang mammalian species.

Laki ng Trophozoite 10-30 μm ang diameter 20-40 μm ang diameter

pseudopodia na parang mga daliri walang prominenteng

Pseudopodia
(finger-like) pseudopodia

matamlay (sluggishly) na
Mobility aktibong gumagalaw
gumagalaw
medyo sagana sa amoebic
Abundancy in Stools hindi sagana sa dumi
dysentery
Ang ectoplasm ay hindi
Ang ectoplasm ay kitang-kita sa E.
Ectoplasm prominenteng sa E. coli
histolytica trophozoites.
trophozoite.

Ang endoplasm ng E. histolytica Ang endoplasm ng E. coli ay

Endoplasm trophozoites ay pinong butil-butil napupuno ng bacteria, yeast, at
na naglalaman ng RBCs. iba pang microorganism.

Ang mga vacuoles ng trophozoites Ang E. coli ay may maraming mga

Vacuoles ng E. histolytica ay kakaunti, at vacuole na may mga bitak at
spherical. bitak.

Ang nucleus ng trophozoites ng E. Ang nucleus ng trophozoites ng E.

Nucleus
histolytica ay maliit at hindi coli ay malaki at natatangi.
malinaw.

ENTAMOEBA HISTOLYTICA

ENTAMOEBA COLI
2. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE NEGLERIA FOWLERI.
Ang Naegleria fowleri ay nagdudulot ng primary amebic meningoencephalitis (PAM), isang
malubhang impeksyon sa utak at pamamaga. Sa pamamagitan ng pagtukoy sa mga sumusunod sa
laboratoryo, ang impeksyon ng PAM o Naegleria fowleri ay maaaring masuri:
 Ang pagkakaroon ng mga organismo ng Naegleria fowleri sa cerebrospinal fluid (CSF),
biopsy, o mga specimen ng tissue;
 Nucleic acid ng Naegleria fowleri na matatagpuan sa CSF, biopsy, o tissue specimens;
 Ang antigen mula sa Naegleria fowleri na matatagpuan sa mga specimen ng CSF, biopsy, o
tissue.

Pagdating sa pagkakakilanlan ng mga parasito, ang mga pagsusuri sa polymerase chain

reaction (PCR) ay palaging itinuturing na pamantayang ginto o gold standard. Ang complete
DNA ay kadalasang nakahiwalay sa mga cell na nakita sa mga sample (hal., CSF, tissue ng
utak), at ginagawa ang PCR assay gamit ang mga primer na partikular sa Naegleria species.
Ang pamamaraang ito ay nagbibigay ng sensitibo at tiyak na proseso ng pagkakakilanlan;
bilang isang resulta, ang iba't ibang mga primer set ay idinisenyo para sa pagkilala sa N.
fowleri sa setting ng laboratoryo. Ang TaqMan real-time PCR assay ay isang anyo ng PCR na
malawakang ginagamit upang suriin ang mga klinikal na sample na kinuha mula sa mga
pasyente ng PAM at isa sa mga pinakakaraniwang ginagamit na uri ng PCR. Posibleng
matukoy ang nag-iisang amoeba sa mga sample ng pasyente gamit ang diskarteng ito dahil
ang proseso ng pagtitiklop ay maaaring makagawa ng daan-daang kopya ng naka-target na
DNA sa bawat amoeba.

3. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE ACATHAMOEBA SPP.

Ang paglitaw ng mga trophozoites at cyst sa mga stained smears ng biopsy sample (brain tissue,
skin, cornea) o ng corneal scrapings ay maaaring gamitin upang makita ang impeksyon ng
Acanthamoeba. Ang mga histological na seksyon at mga sample ng kapaligiran ay nabahiran ng
lactophenol blue, acridine orange, silver, at calcofluor white para ma-diagnose ang acanthamoebiasis
(i.e. pelleted contact lens case contents). Ang mga sample ng CSF mula sa mga pasyente na may
granulomatous amebic encephalitis ay bihirang naglalaman ng mga trophozoites o cyst. Gamit ang
Page’s Saline at Escherichia coli overlay, maaaring lumaki ang Acanthamoeba mula sa mga klinikal
at pangkalikasan na sample sa laboratoryo.

Ang paggamit ng confocal microscopy o ang kultura ng causative organism, at ang pagkilala sa
organismo gamit ang direktang immunofluorescent antibody, ay maaari ding maging epektibo.
Nagiging mas karaniwan na makita ang paggamit ng mga pamamaraan na nakabatay sa PCR
(konventional at real-time na PCR) para sa pagtuklas at pagtukoy ng mga impeksiyon na nabubuhay
nang libre sa amebic sa mga klinikal na sample na nakasaad sa itaas.

4. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE BALANTIDIUM COLI

Ang Balantidium coli ay isang malaking ciliated protozoan na maaaring makahawa sa mga tao. Ito
ang tanging ciliate na makakagawa nito. Ang mga baboy ay ang pangunahing reservoir host para sa
impeksyong ito. Karamihan sa mga kaso ay asymptomatic. Ang mga sintomas ay maaaring biglaan o
paulit-ulit, ngunit palaging kasama sa mga ito ang pananakit ng tiyan.

1) Kapag isinusulat ang paglalarawan ng pagsusuri na ginawa, dapat mong isama ang mga
pinaghihinalaang pathogen.
2) Mangyaring magsama ng notation sa requisition kung ang pasyente ay may Eosinophilia, HIV,
immunocompromised, dumaranas ng malubhang sakit o na-admit sa intensive care unit, o kung
ang pasyente ay nagkaroon na ng parasite.
3) Tukuyin ang bansa at rehiyon ng pasyente, gayundin kung ang pasyente ay isang bagong
imigrante, isang refugee, o isang pabalik na manlalakbay.
4) Mangolekta ng sample sa bawat isa sa puting top at yellow top (SAF) vial ng Parasitology Kit at
ilagay ito sa naaangkop na lalagyan. Sundin ang mga pamamaraan sa pagkolekta sa pahina ng
 pagtuturo na kasama sa Parasitology Kit upang matiyak ang tamang koleksyon.
5) Ang bawat vial ay dapat maglaman ng isang ispesimen araw-araw sa loob ng dalawa hanggang
tatlong araw. Magbibigay ito ng kabuuang anim (6) na specimen.

Ang mga sample ng Balantidium coli ay sinusuri sa ilalim ng mikroskopyo pagkatapos maihanda sa
pamamagitan ng proseso ng Formalin/Ethyl-acetate, na kinabibilangan ng paggawa ng smear at
concentrate pagkatapos ng centrifugation. Ang diskarte sa konsentrasyon ay kapaki-pakinabang para
sa pag-detect ng maliliit na bilang ng mga organismo sa isang partikular na lugar.

Ang isang permanenteng stained smear ay ginagamit para sa pagkilala sa mga trophozoites, cyst, at
iba pang mga organismo, pati na rin para sa pagkumpirma ng mga species. Ito ay ginawa at
binabasa mula sa isang concentrate. Ang protozoa sa bituka ay nakikilala at nakumpirma gamit ang
Hematoxylin stain na may iron.

5. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE THE FOLLOWING

PARASITE.
a. Trichomonas vaginalis
Ang Trichomoniasis ay sanhi ng isang parasitic protozoa na tinatawag na Trichomonas
vaginalis, na siyang pinakakaraniwang impeksiyon na nakukuha sa pakikipagtalik sa mundo,
na may higit sa 170 milyong kaso bawat taon. Dahil sa kumplikadong pagpapakita ng sakit at
kahirapan sa pag-diagnose nito, maaaring mahirap itong ma-diagnose sa simula. Ito ay
madalas na nakikita sa random (sariwang) sample ng ihi para sa parehong kasarian,
gayundin sa prostatic at urethral discharge sa mga lalaki at vaginal, cervical, at urethral
discharge sa mga babae. Ang pagkultura ay ang pamantayang ginto (gold standard), at ang
pinakamadalas na ginagamit na media ay modified Diamond medium at Feinberg-Whittington
medium; Kasama sa mga alternatibong medium ang McCoy cell lines at Lash Cysteine
hydrolyzate serum media, bukod sa iba pa.

b. Trichomonas hominis
Ang Pentatrichomonas hominis ay matatagpuan sa cecum at colon ng iba't ibang hayop,
kabilang ang daga, hamster, aso, pusa, guinea pig, ground squirrel, at maraming species ng
nonhuman primates, gayundin sa colon ng tao. Ang Pentatrichomonas hominis ay itinuturing
na nonpathogenic. Ang mga trophozoites na matatagpuan sa mga specimen ng dumi ay
maaaring isang senyales ng kontaminasyon ng fecal sa mga pinagmumulan ng pagkain o
tubig, ngunit hindi nila inaalis ang posibilidad ng iba pang mga parasito na sakit sa mga tao.
Ang pagkakaroon ng mga trophozoites sa mga specimen ng dumi ay nakakatulong upang
makilala ang Pentatrichomonas hominis. Ang mga direktang wet mount, na nagpapakita ng
katangian ng mabilis na paggalaw ng mga organismo, ay ang pinaka-epektibong paraan ng
pagtukoy ng kanilang pagkakakilanlan. Ang mga organismo na ito ay maaari ding makita sa
mga permanenteng stained smear, kahit na ang kanilang mga affinity para sa mantsa ay
pabagu-bago, at dahil sa kanilang maliit na sukat, sila ay madalas na hindi nakuha.

c. Trichomonas tenax
Tanging ang flagellated vegetative stage ng T. tenax ang matatagpuan sa oral cavity ng mga
tao, at ito ay lumalaki sa haba na 5–16 microns. Ang proseso ng reproduction ay nagagawa
sa pamamagitan ng paulit-ulit na longitudinal binary fission. Nabubuhay sila sa bakterya, na
sinisipsip nila sa pamamagitan ng proseso ng phagocytosis. Gayunpaman, kumakain sila ng
malaking halaga ng glycogen mula sa mga natirang pagkain sa ngipin, na nakakapinsala sa
kanila. Ang mga pag-scrape sa bibig ay ang pinakamadalas na ginagamit na ispesimen para
sa pagsusuri ng Trichomonas tenax trophozoite. Ang mikroskopikong pagsusuri sa tonsillar
at pyorrheal pockets ng mga pasyenteng dumaranas ng T. tenax infection ay kadalasang
nagpapakita ng mga katangian ng trophozoites ng organismo. Sa pagitan ng mga ngipin at
sa kahabaan ng gingival border ng gilagid ay ang mga pangunahing lokasyon ng bibig kung
saan maaaring matagpuan ang organismo na ito at posibleng makahawa sa pasyente. Ang
T. tenax ay maaari ding linangin sa angkop na midyum kung ang mga kondisyon ay
natutugunan.
6. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE DIENTAMOEBA FRAGILIS
Ang Dientamoeba fragilis ay hindi isang ameba, ngunit sa halip ay isang bituka na flagellate na
pinaka malapit na nauugnay sa mga trichomonad. Halos lahat ng mga specimen ng D. fragilis mula
sa mga tao ay kinabibilangan lamang ng mga trophozoites, na siyang tanging anyo ng pathogen.
Gayunpaman, ang paglitaw ng mga putative cyst at precyst form sa mga klinikal na specimen ay
bihirang naidokumento, at ang posibilidad para sa paghahatid ng mga form na ito ay ginagalugad na
ngayon. Ang iba pang mga elemento ng D. fragilis transmission at pathogenicity, tulad ng paraan ng
transmission at pathogenicity nito, ay halos hindi natukoy.

Sa karamihan ng mga kaso, ang D. fragilis trophozoites ay matatagpuan sa mga specimen ng dumi
na nabahiran ng trichrome o katulad na patuloy na mantsa, na nagpapahiwatig ng impeksiyon. Kung
ang mga diskarte sa konsentrasyon ng dumi ay ginagamit, ang yugto ng trophozoite ng parasito ay
karaniwang hindi nakikita. Dahil ang Dientamoeba fragilis trophozoites ay namumutla at ang kanilang
nuclei ay kahawig ng sa Endolimax nana o Entamoeba hartmanni, madali silang balewalain o maling
matukoy dahil dito.

7. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE CHYLOMASTIX MESNELI

Ang Chylomastix mesnili ay isang nonpathogenic flagellate na madalas na matatagpuan sa
gastrointestinal tract ng tao bilang isang commensal organism. Walang katibayan na nagpapahiwatig
na ang Chylomastix mesnili ay nauugnay sa anumang sakit. Sa mga specimen ng dumi na
naglalaman ng mga cyst o trophozoites, mayroong higit pang mga parasite na impeksiyon na
maaaring naroroon, ngunit hindi nito isinasantabi ang mga ito bilang mga posibilidad. Ang mga cyst
at/o trophozoites sa mga sample ng dumi, kapwa sa concentrated wet mounts at sa mga
pangmatagalang stained smear, ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng Chylomastix mesnili, isang
parasite na nagdudulot ng diarrhea (hal., trichrome).

8. WHAT IS THE SPECIMEN AND PROCEDURE USED TO DIAGNOSE GIARDIA LAMBLIA

Ang mga giardia lamblia cyst ay maaaring hugis-itlog o spheroid, na may diameter na nasa pagitan
ng 8 at 19 μm (na may average na 10-14 μm). Habang lumalaki ang mga cyst, naglalaman ang mga
ito ng apat na nuclei at dalawa kapag wala pa sa gulang. Ang mga wet mount na nabahiran ng iodine
at mga smears na nabahiran ng trichrome ng parehong materyal ay nagpapakita ng mga istrukturang
nuklear at mga fibril. Mula sa asymptomatic carrying hanggang sa matinding pagtatae at malnutrisyon
sa matinding mga pagkakataon, mayroong malawak na pagkakaiba-iba ng mga sintomas. Maaaring
tumagal ang Giardiasis mula isa hanggang tatlong linggo kasunod ng panahon ng pagpapapisa ng
itlog ng isa hanggang labing-apat na araw (sa karaniwan, pitong araw). Kasama sa mga sintomas
ang pagtatae at pananakit ng tiyan gayundin ang pagdurugo, pagduduwal, at pagsusuka. Habang
lumalaki ang sakit at nagpapatuloy ang mga sintomas, maaari itong humantong sa malnutrisyon at
panghihina. Maaaring gamitin ang cryopreservation at mga pamamaraan ng konsentrasyon upang
matukoy ang parehong mga cyst at trophozoites sa dumi ng isang taong may Giardia. Ang mga cyst
ay mas madalas na nakikita sa wet mount preparations kaysa sa permanent mount preparations, na
ang dating ay mas karaniwan (i.e. trichrome). Ang isang mas malaking sukat ng sample ay hindi out
of the question. Bukod sa Enterotest at duodenal biopsy, ang mga trophozoites ay maaaring
matagpuan sa mga sample ng bituka ng likido (hal., Enterotest). Ang enzyme immunoassays at
immunofluorescence ay dalawang paraan para sa pagtukoy ng mga impeksyon na maaaring gamitin
bilang karagdagan sa mga karaniwang pamamaraan.

DIRECT IMMUNOFLUORESCENCE ASSAY (DFA)

Ang direct immunofluorescence assay (DFA) ay magagamit para sa pag-diagnose ng mga
impeksyon sa Giardia duodenalis. Ang dumi ay natuburan ng fluorescently marked antibodies. Ang
mga Giardia cyst ay lumilitaw bilang berde, maliwanag na mga ovoid na bagay kapag nakita sa ilalim
ng fluorescent microscope. Ang pagsusulit na ito ay naglalaman ng mga antibodies para sa
Cryptosporidium at ang parehong mga sakit ay maaaring masuri nang sabay-sabay.