‫‪E1‬‬ ‫الكود‪:‬‬

‫‪V1‬‬ ‫اإلصدار‪:‬‬
‫‪2013- 10-10‬‬
‫‪2015- 10-10‬‬
‫نافذ من تاريخ‪:‬‬
‫يُسحب في تاريخ‪:‬‬
‫المختبر الوطني للصحة العمومية‬
‫‪3‬‬ ‫الصفحات‪:‬‬
‫توقيع المجيز‪:‬‬

‫‪ -1‬جهاز اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي ‪TRP89‬‬

‫‪ -2‬األهداف والنطاق‬
‫يوضح هذا البروتوكول كيفية إجراء اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي باستخدام نُظم ‪ TRP89‬للكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل‪.‬‬
‫وينطبق هذا اإلجراء التشغيلي الموحد على جميع الموظفين المستخدمين لهذا الجهاز‪.‬‬

‫‪ -3‬الصيغ المقتضبة والتعاريف‬

‫لالطالع على الصيغ المقتضبة والتعاريف والمصطلحات يُرجى الرجوع إلى الفصل ‪" 1‬عام" من دليل الجودة‪.‬‬

‫نظام ‪ TRP89‬للكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي‬ ‫‪TRP‬‬

‫دورة العتبة‬ ‫دع‬
‫م م مدير المختبر‬
‫أخصائي تكنولوجيا المختبرات‬ ‫أ ت مخ‬
‫درجة حرارة الغرفة‬ ‫دحغ‬
‫درجة حرارة الذوبان‬ ‫دحذ‬
‫موظف شؤون المعدات‬ ‫م ش مع‬

‫‪ -4‬المهام والمسؤوليات والمساءلة‬

‫لالطالع على التفويضات العامة يُرجى الرجوع إلى مصفوفة التفويض‪.‬‬
‫مسؤول‬ ‫مفوض‬‫َّ‬ ‫المهمة‬
‫مم‬ ‫أ ت مخ‬ ‫ً‬
‫تشغيل الجهاز وفقا للفصل ‪" 8‬التشغيل"‬
‫م ش مع‬ ‫أ ت مخ‪ /‬خبير‬ ‫طرق حل المشكالت األساسية‬
‫السالمة‬
‫البيولوجية‬
‫الخارجي‬
‫مم‬ ‫م ش مع‬ ‫االتصال بالمورد بشأن األخطاء (بعد التشاور مع مدير المختبر)‬
‫مم‬ ‫أ ت مخ‬ ‫تحديث جدول التشغيل‬
‫مم‬ ‫م ش مع‬ ‫تحديث السجل "أجهزة التحليل الجيني‪ /‬تفاعل البوليميراز المتسلسل"‬

‫‪ -5‬وصف المعدة‬
‫إن نظام الكشف ‪ ™TRP89‬هو نظام مكون من ست قنوات الختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي‪ .‬ويشمل هيكالً لتدوير الحرارة‬
‫‪ ،X1090‬ووحدة للتفاعل البصري ‪ ،TRP89‬وبرنامجا ً لتحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل‪ .‬انظر الدليل لالطالع على المزيد من المعلومات‪.‬‬

‫‪ -6‬السالمة والبيئة‬
‫انظر تعليمات السالمة العامة في دليل السالمة البيولوجية‪.‬‬

‫‪ -7‬اإلجراء الخاص ببدء التشغيل (المعايرة والضوابط) والصيانة‬

‫‪ 1-7‬المعايرة‬
‫يختبر الجهاز نفسه بنفسه قبل بدء القياس (انظر الدليل‪)http://www.TRP89.com) ،‬‬

‫‪1‬‬
 ‫‪E1‬‬ ‫الكود‪:‬‬
‫‪V1‬‬ ‫اإلصدار‪:‬‬
‫‪2013- 10-10‬‬
‫‪2015- 10-10‬‬
‫نافذ من تاريخ‪:‬‬
‫يُسحب في تاريخ‪:‬‬
‫المختبر الوطني للصحة العمومية‬
‫‪3‬‬ ‫الصفحات‪:‬‬
‫توقيع المجيز‪:‬‬

‫‪ 2 -7‬الصيانة‬
‫ال تلزم خدمة الجهاز على أساس منتظم‪ .‬ويسجل موظف شؤون المعدات جميع العيوب واإلجراءات المتخذة حيالها في السجل‪.‬‬

‫‪ -8‬التشغيل‬
‫‪ -1‬أدخل توقيعك في الوقت المرغوب في جدول التشغيل الخاص بجهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي ‪( TRP 1 + 2‬ومنظم التتابع)‬
‫بإضافة ‪ TRP 1‬أو ‪ 2‬واسمك‪.‬‬
‫‪ -2‬شغل الحاسوب (إذا كان غير ُمشغل) وأدخل اسم المستخدم (‪ )RtPCR‬وكلمة المرور‪.‬‬
‫‪ -3‬شغل جهاز ‪ TRP‬رقم ‪ 1‬أو ‪ .2‬إذا ظهرت عبارة "‪( "under remote control‬خاضع للتحكم عن بُعد) على الجهاز يعني ذلك أن الجهاز متصل‬
‫بالحاسوب‪.‬‬
‫‪ -4‬اذهب إلى "‪( "Start‬البدء)‪( "Specific systems" ،‬نُظم محددة)‪ ،‬وانقر على "‪( "PCR Analysis 2.0‬برنامج تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل‬
‫‪)2.0‬‬
‫‪ -5‬في النافذة الخاصة بمساعد بدء التشغيل (‪ ،)Startup wizard‬اختر "‪( "Create a new run‬إنشاء دورة جديدة) ثم انقر على "‪( "OK‬موافق)‪.‬‬
‫‪ -6‬إذا كان برنامج تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل ‪ 2.0‬قد ُوضع بالفعل موضع التشغيل اختر "‪( "file‬ملف)‪( "new" ،‬جديد)‪( "run" ،‬تشغيل)‬
‫تحت عالمة التبويب‪ .‬ستظهر نافذة "‪( "Run Setup‬تشغيل برنامج اإلعداد)‪ ،‬انقر على "‪( "open lid‬رفع الغطاء) أو ارفع الغطاء يدويا ً باستخدام‬
‫زر الفتح في جهاز ‪ TRP 1‬أو ‪ ،2‬ثم ضع اللوح أو الشرائط في االتجاه الصحيح داخل الجهاز‪ ،‬ثم انقر "‪( "close lid‬وضع الغطاء) (بواسطة‬
‫الحاسوب أو يدوياً)‪.‬‬
‫‪ -7‬انقر على "‪ ،"Protocol‬ثم انقر على "‪ "Select Existing‬الختيار أحد البروتوكوالت القائمة‪.‬‬
‫‪ -8‬وإلنشاء بروتوكول جديد انظر الدليل‪.‬‬
‫‪ -9‬في نافذة "‪ "select protocol‬اختر البروتوكول‪ ،‬ستُفتح نافذة "‪( "admin‬إدارة)‪ ،‬انقر بعد ذلك على المجلد المالئم‪ :‬إذا كان أحد جهازي ‪TRP‬‬
‫يعمل بالفعل اختر "‪( "Desktop‬سطح المكتب)‪ ،‬واختر "‪( "Shortcut admin‬إدارة المفاتيح المختصرة) ثم اختر المجلد المالئم‪.‬‬
‫سيظهر البروتوكول التالي‪:‬‬
‫‪ 95,0 :1‬درجة مئوية لمدة ‪،10:00‬‬
‫‪ 95,0 :2‬درجة مئوية لمدة ‪،0:10‬‬
‫‪ 54,0 :3‬درجة مئوية لمدة ‪،0:05‬‬
‫‪ 72,0 :4‬درجة مئوية لمدة ‪ ،0:15‬قراءة اللوح‬
‫‪ :5‬اذهب إلى ‪ 39 ،2‬مرة أخرى‬
‫‪ 95,0 :6‬درجة مئوية لمدة ‪،2:00‬‬
‫‪ 20,0 :7‬درجة مئوية لمدة ‪،1:00‬‬
‫‪ :8‬منحنى الذوبان ‪ 70‬إلى ‪ 95‬درجة مئوية‪ :‬زيادة ‪ 0,5‬درجة مئوية لمدة ‪( "Plate Read" ،0:10‬قراءة اللوح)‪( "End" ،‬إنهاء)‪.‬‬
‫* حجم العينة ‪ 25‬ميكرولتر‪ ،‬مدة الدورة ‪ 1:35:00‬تقريباً‪.‬‬
‫‪ -10‬انقر "‪( "next‬التالي)‪ .‬انقر على الخيار الصحيح في "‪( "express load‬تحديد الحمولة) تحت عالمة التبويب "‪( "plate tab‬اللوح) (مثل " ‪Quick‬‬
‫"‪ 96 Plate‬عينا ً جميع القنوات أو "‪96 "Quick Plate‬عينا ً ‪ SYBR‬فقط)‪ ،‬انقر على "‪( "edit‬تحرير) إلضافة الفلوروفورات أو إزالتها‪ ،‬وتغيير‬
‫حجم العينة‪ ،‬وإضافة المحددات (فلوروفور واحد لكل قناة) أو انقر "‪( "Select Existing‬اختر القائم) الختيار أحد نماذج األلواح المثبتة‪.‬‬
‫‪ -11‬انقر "‪( "next‬التالي)‪ .‬وفي عالمة التبويب "‪( "Start Run‬ابدأ الدورة) اختر الجهاز‪ TRP1 :‬أو ‪.TRP2‬‬
‫‪ -12‬انقر على "‪( "start run‬بدء الدورة) أسفل النافذة‪.‬‬
‫‪ -13‬ستظهر اآلن نافذة "‪( "Save optical data file‬حفظ ملف البيانات البصرية)‪ .‬اختر الملف المالئم لحفظ البيانات‪.‬‬
‫‪ -14‬سيبدأ الجهاز في العمل تلقائياً‪.‬‬
‫‪ -15‬بعد انتهاء ا لجهاز من إجراء االختبار‪ ،‬ارفع الغطاء وارفع اللوح أو الشرائط ثم ضع الغطاء‪ ،‬تخلص من اللوح أو الشرائط في الحاوية الزرقاء ذات‬
‫الغطاء األسود الموجودة بالقرب من الجهاز بموجب الوثيقة ‪" P09‬التخلص من النفايات"‪.‬‬
‫‪ -16‬اترك الجهاز والحاسوب في وضع التشغيل‪ .‬أغلق ملف تحليل البيانات فقط‪.‬‬

‫‪2‬‬
 ‫‪E1‬‬ ‫الكود‪:‬‬
‫‪V1‬‬ ‫اإلصدار‪:‬‬
‫‪2013- 10-10‬‬
‫‪2015- 10-10‬‬
‫نافذ من تاريخ‪:‬‬
‫يُسحب في تاريخ‪:‬‬
‫المختبر الوطني للصحة العمومية‬
‫‪3‬‬ ‫الصفحات‪:‬‬
‫توقيع المجيز‪:‬‬

‫‪ -9‬حل المشكالت‬
‫انظر الدليل لالطالع على المزيد من المعلومات إذا واجهتك مشكلة‪ ،‬أو ارجع إلى الشخص المسؤول عن الجهاز و‪ /‬أو موظف شؤون المعدات‪ .‬وعند‬
‫الضرورة اتصل بالمورد (بعد مشاورة أخصائي التحاليل الجينية في المستشفى‪ /‬مدير المختبر)‪ .‬أخطر موظف شؤون المعدات بجميع المشكالت‪،‬‬
‫وسينبغي عليه تسجيل اإلجراءات المتخذة في سجل "أجهزة التحليل الجيني‪ /‬تفاعل البوليميراز المتسلسل"‪.‬‬

‫‪ -10‬الوثائق ذات الصلة‬

‫الفصل ‪" 1‬عام" من دليل الجودة‬ ‫•‬
‫الوثيقة ‪" P09‬التخلص من النفايات"‬ ‫•‬
‫جدول تشغيل جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي ‪( TRP 1 + 2‬ومنظم التتابع)‪ ،‬الموجود بالقرب من الجهاز‬ ‫•‬
‫نُظم ‪ TRP89‬للكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي كتيب التعليمات‪ .‬موجود على شبكة اإلنترنت‪:‬‬ ‫•‬
‫‪ http://www.TRP89.com‬وفي الدليل الورقي الموجود بالقرب من الجهاز في الغرفة ألف ‪.3‬‬
‫سجل "أجهزة التحليل الجيني‪ /‬تفاعل البوليميراز المتسلسل" الغرفة ألف ‪3‬‬ ‫•‬
‫دليل السالمة البيولوجية في الغرفة باء ‪( 3‬مكتب موظف السالمة البيولوجية)‪ ،‬وباء ‪( 2‬أمين السر)‪ ،‬وباء ‪( 1‬مدير المختبر)‪ ،‬وألف ‪( 4‬غرفة‬ ‫•‬
‫الوزن)‪.‬‬

‫‪ -11‬االستمارات ذات الصلة‬

‫الوثيقة ‪ A12‬االستمارة ‪" 01‬صحيفة عمل جهاز تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي ‪"SYBR Green‬‬ ‫•‬
‫الوثيقة ‪ P43‬االستمارة ‪" 01‬التوجيه األولي للموظفين"‬ ‫•‬

‫‪ -12‬المراجع‬
‫ال ينطبق‬

‫‪ -13‬المرفقات‬
‫الملحق ‪ 1‬للفصل ‪ 2‬من دليل الجودة "مصفوفة التفويض"‬ ‫•‬

‫‪3‬‬