1.

abstract
Hội chứng Cornelia de Lange (CdLS) là một bệnh di truyền bẩm sinh hiếm gặp gây ra
các kiểu hình bất thường trên khuôn mặt, một số khiếm khuyết trong các cơ quan và
bộ phận cơ thể, và rối loạn tâm thần hoặc các đặc điểm rối loạn trí tuệ. Nguyên nhân
chính của CdLS đã được báo cáo là do các biến thể của gen phức hợp gắn kết, trong
đó các đột biến ở gen NIPBL được ước tính chiếm tới 80%. Nghiên cứu của chúng tôi
bao gồm ba bệnh nhân Việt Nam có kiểu hình CdLS điển hình. Giải trình tự toàn bộ
exome cho thấy hai đột biến dị hợp tử đã biết c.6697G> A (p.Val 2233 Met) và
c.2602C> T (p.Arg868X), và một đột biến dị hợp tử mới c4504 lG (p.Val1502fsX87)
trong gen NIPBL của ba người bệnh. Trong phân tích silico về các đột biến được xác
định đã dự đoán các tác động gây hại và cắt ngắn có thể có trên protein NIPBL. Các
phân tích di truyền trong gia đình bệnh nhân cho thấy rằng tất cả các đột biến là
không có biến đổi. Kết quả của chúng tôi giúp chẩn đoán xác định bệnh nhân mắc
CdLS và mở rộng phổ đột biến gen NIPBL. Những phát hiện này cũng xác nhận giải
trình tự toàn bộ exome là một công cụ hiệu quả để sàng lọc di truyền của CdLS.
2. introduction
Hội chứng Cornelia de Lange (CdLS; OMIM # 122470, 300590, 3000882,
610759 và 614701) là một rối loạn di truyền bẩm sinh ảnh hưởng đến cả tinh
thần và thể chất của bệnh nhân [1,2]. Việc chẩn đoán các trường hợp CdLS chủ
yếu dựa vào các dị tật vùng sọ bao gồm viêm bao hoạt dịch hoặc lông mày
rậm; mũi ngắn, sống mũi lõm hoặc đầu mũi hếch; philtrum dài hoặc mịn; môi
trên mỏng màu đỏ son hoặc khóe miệng bị lõm xuống [3,4]. Kiểu hình CdLS
hồng y không mặt bao gồm thoát vị hoành ở tay hoặc thừa và bẩm sinh [3].
CdLS nhẹ hoặc không cổ điển có thể thiếu một số đặc điểm CdLS trung tâm ở
mặt và ngoài mặt và biểu hiện một số đặc điểm gợi ý như chậm phát triển toàn
cầu hoặc khuyết tật trí tuệ, chậm phát triển trước khi sinh (<2 SD), chậm phát
triển sau sinh (< 2 SD), tật đầu nhỏ (trước hoặc sau phẫu thuật), bàn tay hoặc
bàn chân nhỏ, ngón thứ năm ngắn và rậm lông phụ thuộc vào độ lớn của
trường hợp [3,5–7]. Tỷ lệ lưu hành CdLS dao động từ 1 / 10.000 đến 1 / 30.000
trẻ đẻ sống [8].
Khi công nghệ phân tử tiến bộ, căn nguyên chính của CdLS đã được làm sáng tỏ là
các biến thể trong gen mã hóa các tiểu đơn vị gắn kết (SMC1A, SMC3 và RAD21) và
các chất điều hòa (NIPBL và HDAC8) [1,7,9,10]. Cohesin là một phức hợp protein
 cần thiết cho sự phân ly của nhiễm sắc thể trong các tế bào đang phân chia, cơ chế
sửa chữa DNA và các quy định của gen [11,12]. Gần 70–80% các trường hợp CdLS
có liên quan đến các đột biến trong gen NIPBL [3,13]. Gen NIPBL mã hóa cho
delangin, một ortholog của protein Scc2 trong Drosophila, cùng với protein Scc4, quy
định việc tải vòng gắn kết lên chất nhiễm sắc [1,11]. Các biến thể được xác định khác
liên quan đến CdLS xảy ra ở các gen SMC1A, HDAC8, SMC3 và RAD21 với tần số
ít hơn 5% [10]. Rad21 là một Schizosaccharomyces pombe ortholog của Scc1, một
protein quan trọng trong quá trình sửa chữa tổn thương DNA [11]. Các gen SMC1A,
SMC3 và RAD21 mã hóa các protein tiểu đơn vị gắn kết tạo thành một cấu trúc giống
như vòng với các chức năng cuốn lấy chromatid. Protein HDAC8 loại bỏ SMC3 để
điều chỉnh sự giải phóng các chất kết dính từ các chromatid chị em [14]. Các đột biến
ở gen NIPBL, RAD21 và SMC3 thường được báo cáo là trội trên NST thường trong
khi các đột biến ở gen HDAC8 và SMC1A được di truyền theo cách liên kết X [15].
Bên cạnh các đột biến liên quan đến chất kết dính, các biến thể trong gen ANKRD11
đã được trình bày trong các trường hợp kiểu hình CdLS không cổ điển trùng lặp với
hội chứng KBG và kiểu hình hội chứng giống Coffin-Siris [16]. Sự xóa và các biến
thể trong gen BRD4 đã được báo cáo ở những bệnh nhân CdLS không điển hình [17].
Ngoài ra, các biến thể trong gen EP300, AFF4, NAA10 và TAF6 đã được xác định ở
những bệnh nhân có các đặc điểm trùng lặp với CdLS [3].
Trong nghiên cứu này, chúng tôi thực hiện giải trình tự toàn bộ exome ở 3 bệnh nhân
Việt Nam mắc CdLS. Ba đột biến ở gen NIPBL, bao gồm hai đột biến dị hợp tử đã
biết c.6697G> A (p.Val 2233 Met) và c.2602C> T (p.Arg868X), và một đột biến dị
hợp tử mới c4504 lG (p.Val1502fsX87) đã được được đánh giá là nguyên nhân tiềm
ẩn của CdLS ở ba bệnh nhân. Giải trình tự Sanger ở cha mẹ của họ cho thấy các đột
biến là de novo ở các bệnh nhân.

3. presentation
- Nghiên cứu này được thực hiện theo Tuyên bố của Helsinki và đề cương đã được phê
duyệt bởi Ủy ban Đạo đức của Viện Nghiên cứu Hệ gen (Số 18 / QĐ-NCHG ngày 22
tháng 3 năm 2018, Hội đồng xét duyệt Viện Nghiên cứu Hệ gen, Hà Nội , Việt Nam).
Ba bệnh nhân được đưa vào nghiên cứu này. Đơn đồng ý bằng văn bản được thông
báo đã nhận được từ cha mẹ của họ. Tất cả bệnh nhân ( mã CDL1, CDL2, và CDL3)
và cha mẹ của họ đã được kiểm tra tại Bệnh viện Nhi Trung ương Việt Nam.
- Bệnh nhân CDL1 là con đầu lòng của một ông bố bà mẹ Việt Nam không chính
thống. Bé chào đời sau 38 tuần tuổi thai bằng phương pháp sinh thường với cân nặng
lúc sinh là 2,5 kg (−3 SD). Lúc 3 tháng tuổi, bé bị nôn trớ kéo dài, chậm phát triển và
rối loạn tăng động / giảm chú ý. Anh ấy có thể đi lại khi 16 tháng tuổi. Anh ấy được
giới thiệu đến phòng khám di truyền do chậm phát triển. Lúc 18 tháng tuổi, bệnh nhân
có cân nặng 7,8 kg (−3 SD), cao 73 cm (−3 SD), chu vi vòng đầu 43 cm (<−2 SD), và
thương số phát triển là 60%. Anh ta có khuôn mặt đa dạng với lông mày hợp nhất,
lông mày mọc ngược, lông mi dài, môi trên mỏng màu đỏ son, khóe miệng xẹp
xuống, lông mày dài, chân tóc phía trước thấp, tai cụp thấp và vòm miệng cao (Hình 1
(a1)). Anh ta bị rậm lông, cụt một phần ngón chân thứ hai và thứ ba bên trái, cụt ngón
thứ năm, hạn chế duỗi khuỷu tay và bàn tay và bàn chân nhỏ (Hình 1 (a2, a3)). Chụp
cộng hưởng từ não cho thấy quá trình myelin bị chậm trễ. Ông có chức năng gan và
thận bình thường.
- Bệnh nhân CDL2 là con đầu lòng của một cặp cha mẹ Việt Nam không chính chủ. Bé
chào đời sau 36 tuần tuổi thai bằng phương pháp sinh thường với cân nặng lúc sinh là
1,7kg. Anh ta được chuyển đến phòng khám di truyền khi mới hai tuổi rưỡi do chậm
phát triển tâm thần vận động và co giật nhưng không sốt. Anh ta được chẩn đoán mắc
chứng động kinh và được điều trị bằng depakin và keppra. Cân nặng và chiều cao của
anh lần lượt là 8 kg và 80 cm. Chu vi vòng đầu của anh ấy là 49,5 cm (+0,69 SD).
Anh ta có các đặc điểm trên khuôn mặt biến dạng, bao gồm lông mày cong, cong, mũi
ngắn với sống mũi lõm, cánh mũi dài, môi trên mỏng màu đỏ son và khóe miệng hếch
xuống (Hình 1 (b1)). Anh ta được đánh dấu bằng ngón tay thứ năm ngắn của bàn tay
phải, và bàn tay và bàn chân nhỏ (Hình 1 (b2, b3)). Anh ta có thể lăn lộn nhưng
không thể ngồi hoặc nói chuyện. Dương vật của anh ta dài 2 cm với những sợi dây
kéo dài. Tinh hoàn trái của anh ấy ở bìu trái và không có tinh hoàn phải ở bìu phải.
Figure 1. Các dấu hiệu lâm sàng của bệnh nhân Cornelia de Lange.
+ (a1) Khuôn mặt đa dạng của bệnh nhân CDL1 với lông mày hợp nhất, lông mi dài,
môi trên mỏng màu đỏ son, khóe miệng cụp xuống, chân tóc trước thấp và tai cụp
xuống. Bệnh nhân CDL1 có biểu hiện nhỏ bàn tay (a2) và bàn chân (a3) ​với các ngón
thứ năm bị cụt và một phần ngón chân trái và ngón chân thứ ba. (b1)
+ Ảnh chụp của bệnh nhân CDL2 cho thấy lông mày cong, lông mi dài, mũi ngắn với
sống mũi lõm và đầu mũi hếch, cánh mũi dài, môi trên mỏng màu đỏ son, và khóe
miệng hếch xuống. (b2) Ngón thứ năm ngắn của bàn tay phải của bệnh nhân CDL2.
(b3) Bàn chân nhỏ của bệnh nhân CDL2. (c1)
+ Bệnh nhân 3 biểu hiện lông mày cong, lông mi dài, mũi ngắn với sống mũi lõm và
đầu mũi hếch, đầu mũi, cánh mũi dài, môi trên mỏng màu đỏ son và khóe miệng hếch
xuống. (c2) Nếp gấp xuất hiện trên tay trái của bệnh nhân CDL3. (c3) Ngón thứ năm
cong trên bàn tay phải của bệnh nhân CDL3 của bệnh nhân. Mắt của tất cả bệnh nhân
đều bị che do sự riêng tư.
- Bệnh nhân CDL3 được sinh đủ tháng sau một ca sinh thường. Anh ta đã được đánh
giá về sự chậm phát triển tâm thần và vận động. Lúc 17 tháng tuổi, chiều cao của
cháu là 67 cm (−5,3 SD), cân nặng là 5,9 kg (≤3 SD) và chu vi vòng đầu là 38 cm (−7
SD). Anh ta có một khuôn mặt đa dạng (lông mày cong, cong, mũi ngắn với sống mũi
lõm, cánh mũi dài và môi trên mỏng màu đỏ son với khóe miệng hướng xuống) (Hình
1 (c1)), gần như ngón tay thứ năm trở đi. tay phải và nếp gấp lòng bàn tay bất thường
ở tay trái (Hình 1 (c2, c3)). Bé có thể lăn lộn khi 15 tháng tuổi nhưng không thể ngồi
được.

- Tất cả các bậc cha mẹ trong ba trường hợp đều hoàn toàn khỏe mạnh và không có tiền
sử dương tính về bất kỳ dị tật nào trong gia đình tương ứng của họ. Điểm lâm sàng
của từng bệnh nhân được đưa ra theo các hướng dẫn được đề xuất trong tuyên bố
đồng thuận quốc tế đầu tiên của CdLS [3].
- Áp dụng các hướng dẫn được đề xuất trong tuyên bố đồng thuận quốc tế đầu tiên của
CdLS [3], ba bệnh nhân CLD1, CDL2 và CDL3 của chúng tôi nhận được số điểm lâm
sàng lần lượt là 12, 12 và 13 (Bảng 1). Cả ba bệnh nhân đều được phân loại là CdLS
cổ điển vì điểm lâm sàng lớn hơn 11.
Bảng 1. Điểm lâm sàng dựa trên biểu hiện lâm sàng của ba bệnh nhân CdLS Việt Nam
và phân tích di truyền phân tử.

CDL1 CDL2 CDL3

Điểm lâm sàng dựa trên trình bày lâm sàng
Các tính năng chính (mỗi tính năng 2 điểm nếu có)
+ Synophrys 2 2 2
+ Mũi ngắn, sống mũi lõm hoặc đầu mũi hếch
0 2 2
+ Philtrum dài hoặc mịn 2 2 2
+ Môi trên mỏng màu đỏ son hoặc Khóe miệng hếch xuống
2 2 2
+ Tay hoặc nếp gấp 0 0 0
+ Thoát vị hoành bẩm sinh 0 0 0
Các đặc điểm gợi ý (mỗi điểm 1 điểm nếu có)
+ Sự chậm phát triển toàn cầu hoặc khuyết tật trí tuệ
1 1 1
+ Chậm phát triển trước khi sinh (<2 SD)
0 0 0
+ Chậm phát triển sau sinh (<2 SD) 1 1 1

+ Đầu nhỏ (giải phẫu trước hoặc hậu phẫu)

1 0 1
+ Bàn tay hoặc bàn chân nhỏ 1 1 1
+ Ngón thứ năm ngắn 1 1 1
+ Rậm lông 1 0 0
Tổng điểm lâm sàng 12 12 13
Phân tích di truyền phân tử
Gene NIPBL NIPBL NIPBL
Exon 39/47 21/47 10/47
c.DNA đột biến c.6697G> A c.4504delG c.2602C> T
Sự thay đổi protein p.Val2233Met p.Val1502TyrfsX87 p.Arg868X
SIFT 0,002 _ 0
PolyPhen-2 0,999 _ 0,988
Zygosity HET HET HET
Hiệu ứng missense frameshift stopgained
Cơ sở dữ liệu ClinVar VCV000644755.1 _ VCV000096337.2 dbSNP
_ noveel rs398124466

- Ba đột biến ở exon 10, exon 21 và exon 39 của gen NIPBL được phát hiện ở ba bệnh
nhân CdLS bằng cách giải trình tự exome toàn bộ và được xác minh bằng giải trình tự
Sanger (Hình 2). Không có đột biến nào được phát hiện trong cơ sở dữ liệu nội bộ của
44 bệnh nhân không mắc CdLS.

Figure 2. Bản đồ của ba đột biến được xác định đối với gen NIPBL. (a) Ký hiệu nhiễm
sắc thể số 5 bộ gen của con người được xây dựng bởi Genome Decoration Page. Gen
NIBPL nằm ở vị trí 13,2 trên nhánh ngắn của nhiễm sắc thể số 5. ​Đồ thị exon – intron
của gen NIPBL. Trong số 47 exon của NIPBL, ba exon chứa các đột biến được xác
định của bệnh nhân CDL1, CDL2 và CDL3 đã được chỉ ra bằng các mũi tên. Thang
đo thể hiện độ dài 10 kb. (b – d) Đột biến ở NIPBL trong ba họ CdLS. Mỗi gia đình
có một trường hợp CdLS liên quan. Các bảng sắc ký đồ cho thấy đột biến dị hợp tử ở
bệnh nhân và trình tự bình thường ở bố mẹ bình thường về mặt lâm sàng. Sự thay đổi
của nucleotide và axit amin (màu đỏ) được trình bày trên nucleotit và axit amin bình
thường (màu đen). Các đột biến bao gồm sự thay đổi valine (Val) thành methionine
(Met) tại codon 2233 (Individual II: 1, họ CDL1) (b); mất đoạn một bazơ, c.4504delG
của exon 25 (Cá thể II: 1, họ CDL2) dẫn đến kết thúc sớm protein sau 87 axit amin hạ
nguồn (c); và c.2602C> T (p.Arg868X) (Cá thể II: 1, họ CDL3) —một sự thay đổi
của arginine (Arg) để dừng codon tại codon 868 dẫn đến sự kết thúc sớm của protein
(d).
- Ở bệnh nhân CDL1, một đột biến lệch bội dị hợp tử c.6697G> A đã được phát hiện
(Bảng 1). Đột biến này nằm ở exon 39 của gen NIPBL và liên quan đến sự thay đổi từ
valine thành methionine ở dư lượng 2233 (p.Val 2233 Met) trên protein delangin
(Hình 2a, b). Sự đột biến trước đây báo cáo trong cơ sở dữ liệu ClinVar (ID:
VCV000644755.1 ) và một báo cáo trước đó [18]. Val 2233 được bảo tồn rối loạn như
 động kinh. (Hình 3b). Với mức phân loại không dung nạp từ điểm dung nạp (SIFT) là
0,002 và cần được kết hợp với kết quả xét nghiệm phân tử đa hình kiểu hình phiên
bản 2 (PolyPhen-2) điểm 0,999, đột biến được dự đoán là có hại (Bảng 1).

Figure 3. Trong nghiên cứu silico của protein NIPBL. (a) Sơ đồ minh họa protein
NIPBL. Các miền chính được chỉ ra, bao gồm miền tương tác MAU, miền giàu
glutamine, được dự đoán lặp lại undecapeptide, tín hiệu bản địa hóa hạt nhân, miền
tương tác HDAC1 và 3 miền. Vùng HEAT chứa năm miền: H1 (17671805), H2
(1,843–1881), H3 (1945–1984), H4 (2227–2267) và H5 (2313–2351). Protein NIPBL
có sáu đồng dạng, bao gồm A (exon 1 –47), B (exon 1–46), ∆E10 (xóa exon 10 trên
đồng dạng A), ∆E12 (xóa exon 12 trên đồng dạng A), ∆E3334 (xóa exon 33 và 34
trên isoform A), và B '(xóa exon 45 trên đồng dạng B). Vùng được bảo tồn cao nằm
từ cận 1150 đến cận 2650. (b) Sự bảo tồn của axit amin bị thay đổi theo từng đột biến
ở các loài khác nhau. Sự sắp xếp của trình tự protein NIPBL của con người (đột biến),
người, tinh tinh (Pan troglodytes), khỉ rhesus (Macaca mulatta), chuột nhà (Mus
musculus), và ếch có móng vuốt phương Tây (Xenopus Tropicalis). Các chất dư
giống hệt nhau được biểu thị bằng dấu (*) bên dưới. musculus). Vị trí của các thay
đổi axit amin được biểu thị bằng đường viền màu đỏ.
- Bệnh nhân CDL2 mang đột biến mất đoạn G đơn dị hợp tử mới (c.4504delG) ở exon
21 của NIPBL gen (Bảng 1 và Hình 2a, c). Đột biến thay thế valine ở gốc 1502 bằng
tyrosine(p.Val1502TyrfsX87), dẫn đến sự dịch chuyển khung làm cắt ngắn đoạn
protein 87 aa.
- Trong trường hợp bệnh nhân CDL3, một đột biến dị hợp tử c.2602C> T (p.Arg868X)
đã được phát hiện ở exon 10 của gen NIPBL (Bảng 1 và Hình 2a). Việc thay thế
arginine bằng codon dừng dẫn đến sự kết thúc sớm của protein NIPBL ở dư lượng
868 (Hình 2d). Sự thay thế này đã tìm thấy trong cơ sở dữ liệu ClinVar (ID:
VCV000096337.2) như một đột biến gây bệnh và trong cơ sở dữ liệu dbSNP (ID:
rs398124466) [19].
- Tất cả các đột biến được phát hiện là không có vì chúng không có ở bố mẹ (Hình 2b –
d).
4. Discussion
- Nghiên cứu của chúng tôi bao gồm ba bệnh nhân Việt Nam mắc CdLS. Do sự đa dạng
của các biểu hiện lâm sàng CdLS, Kline et al. đã đề xuất một hệ thống tính điểm đánh
 giá một trường hợp là CdLS cổ điển nếu bệnh nhân có ít nhất ba đặc điểm cơ bản và
đạt được tổng điểm lâm sàng bằng hoặc hơn 11 [3]. Tất cả các bệnh nhân của chúng
tôi đều có ít nhất ba đặc điểm CdLS cơ bản như bao hàm, lông mi dài, lông mi dài, và
môi trên mỏng màu đỏ son với khóe miệng hếch xuống (Bảng 1). Biểu hiện lâm sàng
và điểm số lâm sàng của họ gợi ý một CdLS cổ điển.
- Trong số 11 gen liên quan đến CdLS, chúng tôi chỉ tìm thấy CdLS tiềm ẩn gây đột
biến gen NIPBL ở ba bệnh nhân. Gen NIPBL nằm ở vị trí 13,2 trong nhánh ngắn của
nhiễm sắc thể số 5 (Hình 2a). Protein Delangin được mã hóa bởi NIPBL là một
ortholog của protein Scc2 trong Drosophila [1,11] và bao gồm 47 exon được dự đoán
để tạo ra sáu đồng dạng (Hình 3a) [20]. Các đột biến NIPBL được báo cáo là nguyên
nhân gây bệnh trong khoảng 70–80% các trường hợp CdLS [3,13]. Ba đột biến
NIPBL dị hợp tử de novo đã được xác định ở bệnh nhân của chúng tôi, phù hợp với
các nghiên cứu trước đây, trong đó 99% các trường hợp CdLS liên quan đến NIPBL
là do đột biến gây bệnh dị hợp tử de novo autosomal [1,9,21].
- Đột biến sai lệch c.6697G> A ở bệnh nhân CDL1 thay thế valine thành methionine ở
dư lượng 2233. Đột biến c.6697G> A nằm trong vùng H4 của lặp lại HEAT
(Huntingtin, yếu tố kéo dài 3 (EF3), protein photphat 2A (PP2A), và vùng nấm men
kinase TOR1) [22] thuộc vùng được bảo tồn cao của gen qua quá trình tiến hóa (Hình
3a). Trong nấm men, Chao et al. đề xuất rằng các đột biến trong vùng HEAT-lặp lại
dẫn đến tương tác bộ nạp gắn kết không hiệu quả, có khả năng do tương tác
Scc1-Scc2 bị suy giảm (ở người, tương tác RAD21-NIPBL) [23]. Sự hiện diện của
một đột biến nằm trong vùng HEAT-lặp lại của NIPBL đã được báo cáo ở những bệnh
nhân CdLS bị cắt bỏ chi [9,24]. Phù hợp với các nghiên cứu trước đó, bệnh nhân
CDL1 của chúng tôi cũng có một số khuyết tật ở chi như cụt ngón tay thứ năm, cụt
một phần ngón chân thứ hai và thứ ba bên trái, bàn tay và bàn chân nhỏ với khả năng
duỗi khuỷu tay hạn chế.
- Ở bệnh nhân CDL2, đột biến mất đoạn c.4504delG ở exon 21 của gen NIPBL gây ra
hiện tượng lệch khung làm cắt ngắn protein 87 axit amin ở hạ nguồn với codon dừng
ở đoạn còn lại 1588. Đột biến này chưa được báo cáo trong các ấn phẩm trước đây.
Theo hiểu biết tốt nhất của chúng tôi, chỉ có ba đột biến đã được báo cáo ở exon 21,
bao gồm một đột biến khảm soma vô nghĩa c.4543G> T (p.Glu1515X) [25], một sự
thay thế nucleotide đơn de novo c.4422G4T (p.Arg1474Ser) có thể là sai sót hoặc ảnh
hưởng đến vị trí ghép nối của người hiến tặng [18] và đột biến chuyển khung de novo
 c.4556_4560del cắt ngắn protein một axit amin ở hạ nguồn [26]. Đột biến c.4504delG
(p.Val1502TyrfsX87) là đột biến thứ tư ở exon 21 của gen NIPBL.
- Trong trường hợp của bệnh nhân CDL3, đột biến tăng dừng c.2602C> T ở exon 10
gây ra codon dừng sớm ở axit amin 868. Exon 10 lớn hơn khoảng 8 lần so với kích
thước exon trung bình ở NIPBL [26], có được biết là có chứa nhiều đột biến nhất
trong toàn bộ gen NIPBL, bao gồm hai đột biến sai, mười một vô nghĩa, hai mươi bốn
đột biến mất đoạn và mười hai đột biến chèn [27]. Các kiểu hình liên quan đến các
đột biến được báo cáo chưa được công bố chi tiết, tuy nhiên mối tương quan giữa
kiểu hình-kiểu gen đã được dự đoán và kiểu hình của các đột biến của chúng tôi được
bao gồm với xu hướng đã được báo cáo.
- Các đột biến dừng tăng, nối và chuyển khung thường dẫn đến mất các alen mất chức
năng trong NIPBL do xóa các phần của protein trụ [26]. Protein delangin bị đột biến
do dịch chuyển khung đột biến c.4504delG trong trường hợp CDL2 của bệnh nhân sẽ
loại trừ một phần lớn trình tự axit amin bao gồm các vùng lặp lại HEAT và các vùng
tương tác HDAC1 và 3 [28]. Ở bệnh nhân 3, đột biến dừng khuếch đại có thể dẫn đến
thiếu tín hiệu khu trú nhân, bộ phận điều chỉnh sự vận chuyển của protein vào nhân
(Hình 3a). Các kiểu hình nhẹ thường biểu hiện ở những bệnh nhân bị mất một hoặc
một vài exon ngoại trừ vùng tương tác HDAC1 và 3 (gốc 1838–2000) [27]. Việc xóa
các vùng tương tác HDAC1 và 3 thường dẫn đến kiểu hình CdLS nghiêm trọng hơn
do sự suy yếu của tương tác giữa delangin và các protein khác [28]. Phù hợp với tất
cả các báo cáo đã đề cập, chúng tôi nhận thấy sự chậm phát triển nghiêm trọng hơn
chẳng hạn như cân nặng dưới −3,5 SD và −5,3 SD ở bệnh nhân CDL2 và CDL3
tương ứng so với sự chậm phát triển nhẹ hơn với cân nặng dưới −3 SD ở bệnh nhân
CDL1. Một số lượng lớn hơn các tính năng CdLS cơ bản cũng được ghi lại ở bệnh
nhân CDL2 (4 tính năng) và CDL3 (4 tính năng) so với bệnh nhân CDL1 (3 tính
năng). Điều thú vị là trong khi bệnh nhân CDL2 và CDL3 đều có đột biến mất chức
năng, thì kiểu hình CdLS cơ bản ở bệnh nhân CDL2 nhẹ hơn một chút. Tuy nhiên,
kiểu hình tổng thể của CDL2 nghiêm trọng hơn CDL3 do mức độ trục trặc hệ thống
lớn hơn như chậm phát triển tâm thần, bệnh tim bẩm sinh, micropenis, dương vật bất
thường và rối loạn thần kinh đáng chú ý như động kinh. Theo cách này, các tiêu chí
điểm lâm sàng được đề xuất bởi Kline et al. [3] không liên quan đến mức độ nghiêm
trọng của bệnh và cần được kết hợp với kết quả xét nghiệm phân tử để đưa ra chẩn
 đoán toàn diện về các trường hợp CdLS. Tất cả các dữ kiện trên cho thấy tác dụng
gây bệnh tiềm tàng của các đột biến đã được xác định ở bệnh nhân của chúng tôi.
5. Conclusionss
- Nghiên cứu này mô tả toàn bộ trình tự exome đầu tiên của bệnh nhân Việt Nam mắc
CdLS. Giải trình tự toàn bộ exome là một công cụ hiệu quả để chẩn đoán di truyền
CdLS. Các đột biến trong gen NIPBL được phát hiện trong nghiên cứu này có thể có
lợi cho việc nghiên cứu sâu hơn về CdLS ở người dân Việt Nam cũng như hỗ trợ việc
xét nghiệm lâm sàng và chẩn đoán CdLS trong cả xét nghiệm sàng lọc trước sinh và
sau sinh. Ngoài ra, kết quả của chúng tôi chắc chắn ủng hộ kết luận rằng đột biến
NIPBL là nguyên nhân chính của CdLS, như đã tìm thấy trong các nghiên cứu trước
đây.
- Đóng góp của tác giả: Khái niệm hóa, N.-L.N., H.H.N., và C.D.V .; Phương pháp
luận, D.C.T. và N.-L.N .; Phần mềm, D.C.T. và N.V.T .; Chẩn đoán, C.D.V. và
C.T.B.N .; Quản lý và viết dữ liệu — chuẩn bị bản thảo ban đầu, D.C.T và C.T.B.N .;
Viết — đánh giá và chỉnh sửa, N.-L.N. và H.H.N. Tất cả các tác giả đã đọc và duyệt
bản thảo cuối cùng.
- Kinh phí: Nghiên cứu này do Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam (VAST) tài trợ
(số KHCBSS.02 / 18-20).
- Lời cảm ơn: Nhóm tác giả cảm ơn tất cả gia đình và bệnh nhân đã tham gia nghiên
cứu này.
- Xung đột lợi ích: Các tác giả tuyên bố không có xung đột lợi ích. Các nhà tài trợ
không có vai trò gì trong việc thiết kế nghiên cứu; trong việc thu thập, phân tích hoặc
giải thích dữ liệu; trong việc viết bản thảo, hoặc trong quyết định công bố kết quả.

Người giới thiệu

1. Krantz, I.D .; McCallum, J .; DeScipio, C.; Kaur, M.; Gillis, L.A .; Yaeger, D.;
Jukofsky, L .; Wasserman, N.; Bottani, A.; Morris, C.A .; et al. Hội chứng Cornelia de
 Lange là do đột biến ở NIPBL, tương đồng ở người của Drosophila melanogaster
Nipped-B. Nat. Genet. 2004, 36, 631–635. [CrossRef] [PubMed]
2. Jackson, L.; Kline, A.D .; Barr, M.A .; Hội chứng Koch, S. de Lange: Một đánh giá
lâm sàng của 310 cá nhân. Là. J. Med. Genet. Năm 1993, 47, 940–946. [CrossRef]
[PubMed]
3. Kline, A.D .; Moss, J.F .; Selicorni, A.; Bisgaard, A.-M.; Deardorff, M.A .; Gillett,
P.M .; Ishman, S.L .; Kerr, L.M .; Levin, A.V .; Mulder, P.A .; et al. Chẩn đoán và
quản lý hội chứng Cornelia de Lange: tuyên bố đồng thuận quốc tế đầu tiên. Nat. Rev.
Genet. 2018, 19, 649–666. [CrossRef]
4. Dowsett, L.; Porras, A.R .; Kruszka, P.; Davis, B. .; Hu, T.; Em yêu, E.; Badoe, E.;
Thong, M.-K.; Leon, E.; Girisha, K.M .; et al. Hội chứng Cornelia de Lange ở các
quần thể đa dạng. Là. J. Med. Genet. A 2019, 179, 150–158. [CrossRef]
5. Ireland, M.; Donnai, D.; Bỏng, hội chứng J. Brachmann-de Lange. Xác định kiểu hình
lâm sàng. Là. J. Med. Genet. Năm 1993, 47, 959–964. [CrossRef]
6. Allanson, J.E .; Hennekam, R.C .; Ireland, hội chứng M. De Lange: so sánh chủ quan
và khách quan giữa kiểu hình cổ điển và nhẹ. J. Med. Genet. 1997, 34, 645–650.
[CrossRef]
7. Deardorff, M.A .; Kaur, M.; Yaeger, D.; Rampuria, A.; Korolev, S.; Bánh, J.;
Gil-Rodríguez, C.; Arnedo, M.; Loeys, B.; Kline, A.D .; et al. Các đột biến trong các
thành viên phức hợp gắn kết SMC3 và SMC1A gây ra một biến thể nhẹ của hội
chứng giác mạc de Lange với chủ yếu là chậm phát triển trí tuệ. Là. J. Hum. Genet.
2007, 80, 485–494. [CrossRef]
8. Kline, A.D .; Grados, M.; Nhà tài trợ, P.; Levy, H.P .; Blagowidow,
N.; Schoedel, C.; Rampolla, J .; Clemens, D.K .; Krantz, tôi; Kimball, A.; et al. Lịch sử
tự nhiên của lão hóa trong hội chứng Cornelia de Lange. Là. J. Med. Genet. C 2007,
145C, 248–260. [CrossRef]
9. Tonkin, E.T; Wang, T.-J.; Lisgo, S .; Bamshad, M.J .; Strachan, T. NIPBL, mã hóa sự
tương đồng của protein liên kết chromatid chị em loại Scc2 của nấm và ruồi
Nipped-B, bị đột biến trong hội chứng Cornelia de Lange. Nat. Genet. 2004, 36,
636–641. [CrossRef]
10. Musio, A.; Selicorni, A.; Focarelli, M.L .; Gervasini, C.; Milani, D.; Russo, S.;
Vezzoni, P.; Larizza, L. Hội chứng Cornelia de Lange liên kết X do đột biến
SMC1L1. Nat. Genet. 2006, 38, 528–530. [CrossRef] 11. Peters, J.-M.; Tedeschi, A.;
 Schmitz, J. Phức hợp chất kết dính và vai trò của nó trong sinh học nhiễm sắc thể.
Genes Dev. 2008, 22, 3089–3114. [CrossRef] [PubMed]
12. Dorsett, D.; Krantz, I.D. Về nguyên nhân phân tử của hội chứng Cornelia de Lange.
Ann. N. Y. Acad. Khoa học. 2009, 1151, 22–37. [CrossRef] [PubMed]
Medicina 2020, 56, 76 9 của 9
13. Ramos, F.J .; Puisac, B.; Baquero-Montoya, C.; Gil-Rodríguez, M.C .; Bueno, tôi;
Deardorff, M.A .; Hennekam, R.C .; Kaiser, F.J .; Krantz, I.D .; Musio, A.; et al. Thẻ
gen tiện ích lâm sàng cho: hội chứng Cornelia de Lange. Eur. J. Hum. Genet. 2015,
23, 1431. [CrossRef]
14. Deardorff, M.A .; Bando, M.; Nakato, R .; Watrin, E.; Itoh, T.; Minamino, M.;
Saitoh, K .; Komata, M.; Katou, Y .; Clark, D.; et al. Đột biến HDAC8 trong Hội
chứng Cornelia de Lange ảnh hưởng đến chu trình acetyl hóa chất kết dính. Nature
2012, 489, 313–317. [CrossRef]
15. Kline, A.D .; Krantz, I.D .; Sommer, A.; Kliewer, M.; Jackson, L.G .; FitzPatrick,
D.R .; Levin, A.V .; Hội chứng Selicorni, A. Cornelia de Lange: Đánh giá lâm sàng,
hệ thống chẩn đoán và cho điểm, và hướng dẫn dự đoán. Là. J. Med. Genet. A 2007,
143A, 1287–1296. [CrossRef] [PubMed]
16. Miyatake, S.; Okamoto, N. .; Stark, Z .; Nabetani, M.; Tsurusaki, Y. Nakashima, M.;
Miyake, N. .; Mizuguchi, T.; Ohtake, A.; Saitsu, H.; et al. Các biến thể ANKRD11
gây ra các đặc điểm lâm sàng khác nhau liên quan đến hội chứng KBG và hội chứng
giống Coffin-Siris. J. Hum. Genet. 2017, 62, 741–746. [CrossRef] [PubMed]
17. Olley, G.; Ansari, M.; Tiếng Bengani, H.; Grimes, G.R .; Rhodes, J .; von
Kriegsheim, A. .; Blatnik, A. .; Stewart, F.J .; Wakeling, E.; Carroll, N.; et al. BRD4
tương tác với NIPBL và BRD4 bị đột biến trong hội chứng giống Cornelia de Lange.
Nat. Genet. 2018, 50, 329–332. [CrossRef]
18. Oliveira, J.; Dias, C.; Người làm lại, E.; Costa, E.; Silva, J .; Lima, M.R .; den
Dunnen, J.T .; Santos, R. Phát triển cơ sở dữ liệu cụ thể về vị trí NIPBL Sử dụng
LOVD: Từ đột biến mới lạ đến tương quan kiểu gen-kiểu hình trong hội chứng
Cornelia de Lange. Hừ! Thịt cừu. 2010, 31, 1216–1222. [CrossRef]
19. Bettini, L.R .; Locatelli, L.; Mariani, M.; Cianci, P.; Giussani, C.; Canonico, F.;
Cereda, A.; Russo, S.; Gervasini, C.; Biondi, A.; et al. Dị dạng cột sống cổ trong hội
chứng giác mạc: một báo cáo của ba bệnh nhân. Là. J. Med. Genet. A 2014, 164A,
1520–1524. [CrossRef]
20. Teresa-Rodrigo, M.E .; Ơ kìa, J .; Puisac, B.; Dalski, A.; Gil-Rodríguez, M.C .;
Braunholz, D.; Baquero, C.; Hernández-Marcos, M.; De Karam, J.C .; Ciero, M.; et
al. Đặc điểm chức năng của các biến thể mối nối sinh lý NIPBL và tám đột biến nối ở
bệnh nhân mắc hội chứng Cornelia de Lange. Int. J. Mol. Khoa học. 2014, 15,
10350–10364. [CrossRef]
21. Deardorff, M.A .; Buổi trưa, S.E .; Krantz, I.D. Hội chứng Cornelia de Lange; Đại
học Washington: Seattle, DC, Hoa Kỳ, 2016.
22. Hội chứng Strachan, T. Cornelia de Lange và mối liên hệ giữa chức năng nhiễm sắc
thể, sửa chữa DNA và quy định gen phát triển. Curr. Opin. Genet. Nhà phát triển.
2005, 15, 258–264. [CrossRef] [PubMed] 23. Chao, W.C.H .; Murayama, Y .; Muñoz,
S.; Jones, A.W .; Wade, B.O .; Purkiss, A.G .; Hu, X.-W .; Borg, A. .; Snijders, A.P .;
Uhlmann, F.; et al. Cấu tạo của bộ nạp chất kết dính Scc2. Nat. Commun. 2017, 8,
13952. [CrossRef] [PubMed]
24. Schoumans, J.; Wincent, J .; Barbaro, M.; Djureinovic, T.; Maguire, P.; Forsberg, L.;
Staaf, J .; Thuresson, A.C .; Borg, A. .; Nordgren, A. .; et al. Phân tích đột biến toàn
diện của một nhóm thuần tập bệnh nhân hội chứng Cornelia de Lange Thụy Điển.
Eur. J. Hum. Genet. 2007, 15, 143–149. [CrossRef] [PubMed]
25. Huisman, S.A .; Redeker, E.J.W .; Maas, S.M .; Mannens, M.M .; Hennekam,
R.C.M. Tỷ lệ khảm cao ở những người mắc hội chứng Cornelia de Lange. J. Med.
Genet. 2013, 50, 339–344. [CrossRef] 26. Gillis, L.A .; McCallum, J .; Kaur, M.;
DeScipio, C.; Yaeger, D.; Mariani, A. .; Kline, A.D .; Li, H.; Devoto, M.; Jackson,
L.G .; et al. Phân tích đột biến NIPBL ở 120 cá nhân mắc hội chứng Cornelia de
Lange và đánh giá tương quan kiểu gen-kiểu hình. Là. J. Med. Genet. 2004, 75,
610–623. [CrossRef] 27. Mannini, L .; Cucco, F.; Quarantotti, V .; Krantz, I.D .;
Musio, A. Phổ đột biến và tương quan kiểu gen – kiểu hình trong hội chứng Cornelia
de Lange. Hừ! Thịt cừu. 2013, 34, 1589–1596. [CrossRef] 28. Jahnke, P.; Xu, W .;
Wülling, M.; Albrecht, M.; Gabriel, H.; Gillessen-Kaesbach, G.; Kaiser, F.J. The Co
Yếu tố tải hesin NIPBL tuyển dụng các deacetylase histone để làm trung gian cho các
biến đổi nhiễm sắc cục bộ.