Obsrewacje mikroskopowe

1. Rodzaje mikroskopów

- Mikroskopy optyczne (świetlne)

a)Mikroskop fluorescencyjny

- Mikroskopy elektronowe

a)Transmijsyjny mikroskop elektronowy ( TEM)

b)Skaningowy mikroskop eletrenowy(SEM)

2. Mikroskopy optyczne

W mikroskopach optycznych do uzyskania obrazu wykorzystuje sie

światło . Przechodzi ono prze obserowany obiekt oraz układ szklanych
soczewek , które je załamują. Pozwalają na obserwowanie tak małych
obiektów jak pojedyncza komórka bakterii lub niektóre organelle
komórki eukariotycznej. Szczególnym rodzajem barwników są barwniki
fluorescencyjne. Oświetlane są światłem o określonej długości fali.

Zasada działania mikroskopu optycznego

Aby uzyskać obraz w mikroskopie optycznym, wiązkę światła kieruje się

na preparat

za pomocą soczewek kondensora. Po przejściu światła przez preparat

jego obraz

zostaje powiększony przez soczewki obiektywu i okularu, a następnie

zogniskowany
w oku obserwatora.

Jakie cechy ma obraz spod mikroskopu optycznego?

-pozorny

- powiększony

- odwrócony

3. Mikroskopy elektronowe

a)

TEM- w mikroskopie tym elektrony przenkiają prze bardzo cienki

preparat. Materiał barwi się związkami metali ciężkich np. uranu ,
ołowiu , co pozwala na zwiększenie kontrastu struktur komórki .

SEM- w tym mikroskopie elektrony bombardują powierzchnię preparatu

. Preparat pokrywa się cienką warstwą metalu np. złota . Wiązka
elektronów uderza w powierzchnię preparatu , co powoduje wybicie
elektronów z jonów metalu. Zliczenie rozproszonych elektronów
pozwala na otrzymanie trójwymiarowego obrazu.

4. Powiększenie , zdolnośc rozdzielcza

Powiękzenie - jest stosunkiem rozmiaru obrazu obiektu do jego

rzeczywistej wielkości.

powiększenie = powiększenie okularu * powiększenie obiektywu

Zdolność rozdzielcza - to zdolnośc mikroskopu do uwidaczniania

szczegółów. Jest to najmniejsza odległośc między dwoma punktami , w
której są one widoczne jako dwa oddzielne punkty.

5. Jednostki długości
1m=100cm=1000mm

1mm=1000um= 10-3m

1um=1000nm=10-6m

1nm=1000um=10-9m

Jeśli mikroskop optyczny powiększa obraz 1000-krotnie oznacza to, że

obiekt, który na obrazie uzyskanym pod mikroskopem ma wielkość 1
cm, w rzeczywistości mierzy 1000-razy mniej czyli 0,001 cm, co
odpowiada 0,01 mm lub 10um.

6. Budowa mikroskopu optycznego

Elementy układu mechenaicznego mikroskopu:

-Tubus utrzymuje we właściym położeniu soczewki mikroskopu

- Rewolwer umożliwia zmianę obiektywu , a tym samym wielkości

powiększenia .

- Śruba makrometryczna podnosi lu opuzcza stolik względem

obiektywu. Służy do odnalezienia obrazu pod najmniejszym
powiększeniem.

- Śruba mikrometryczna podnosi lub opuszcza stolik względem

obiektywu. Służy do ustawienia ostrości obrazu.

Elementy układu optycznego mikroskopu:

Okular zawiera soczewkę dzięki ,której uzyskuje się powiększenie obrazu

oraz umożliwia obserwację

Obiektyw zawiera soczewkę , dzięki której uzyskuje powiększenie

obrazu
Kondensor skupia wiązkę światła

Źródło światła zapewnia oświetlenie preparatu

7. Etapy przeprowadzania obserwacji mikroskopowej

1. Wyczyść części optyczne mikroskopu.

2. Ustaw obiektyw o najmniejszym powiększeniu.

3. Włącz źródło światła.

4. Umieść preparat na stoliku.

5. Za pomocą śruby makrometrycznej zbliż obiektyw do preparatu.

6. Za pomocą śruby mikrometrycznej ustaw ostrość obrazu.

7. Aby obejrzeć preparat pod większym powiększeniem, zmień

obiektyw, a następnie ustaw

ostrość obrazu za pomocą śruby mikrometrycznej.

8. Udokumentuj obserwację – wykonaj rysunek lub zrób zdjęcie.

9. Po zakończeniu obserwacji ustaw ponownie nad stolikiem obiektyw o

najmniejszym

powiększeniu, wyłącz źródło światła i usuń preparat ze stolika.

8. Etapy przygotowywania świeżego preparatu mikroskopowego

1. Wyczyść szkiełko podstawowe.

2. Na szkiełko podstawowe nanieś kroplę wody.

3. Umieść obiekt obserwacji w kropli wody.

5. Wyczyść szkiełko nakrywkowe.

6. Przykryj kroplę wody szkiełkiem nakrywkowym.