LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA II

Materi :

LEMAK

Disusun Oleh :

David Jonathan Gleneagles Siahaan

Kelompok : 14-Selasa

Rekan Kerja : Adisty Adillah Putri

Malaika Putri Adinda
Zhafran Octa Yuandika

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2022
 LEMBAR PENGESAHAN
PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA II
UNIVERSITAS DIPONEGORO

Materi : Lemak
Kelompok : 14-Selasa
Anggota : 1. Adisty Adillah Putri NIM. 21030121140164
2. David Jonathan Gleneagles Siahaan NIM. 21030121140140
3. Malaika Putri Adinda NIM. 21030121130100
4. Zhafran Octa Yuandika NIM. 21030121140166

Semarang,
Mengetahui
Dosen Pengampu Asisten Pembimbing

Dr. Noer Abyor Handayani, S.T., M.T. Asep Ginanjar

NIP. 198601152010122004 NIM. 21030120130085
 I&kASAM
LLnch odal, Stnyau b (sanh g lidaklorel dalan oic buta
aeok do ah
Wlewt OCdanih don Yolat Seg tcue at- dua homfontn (lan lupwk dan3ldtol

kanec Sudoykon hing.k (oll unt.k trislbecda Yey fd, w Kanar Ltb.ir

LAnsh abvn.oh luc datat fade oha fojan diagen kasdungon Yos htelda
lintja andiSs hadee lnh Solu daa leya lkig d]Moba. Ualan onehsa
nh lhal Syes ditelebihan uik lua PeLauhan ilwon tahsi

Senbue d.Q-t diag n awtr.ke da, PuuWonan usUn4an Uahaksu miayah

honbalya Uakuh nisgah 9o(lag,ol.obtan)moc3atinPta.uskanbioditku
yaale h aon alt del Iolw Ytgotncalinaya) nyqanalili Jadec loel Deda
Kalog nNal, dUngan hqkad, Ondlisa boxlhlUh de nlaonalilii hadsc.aie daMadac

ah a gen oel Sy disooopn dalan lucelaainialdd, Melaynttas

Xat h n Stti sdaklenl oMe.calus sutingalaalrSwloovajgala
Uhuetnbojon dnlladisinbelia. {(oleduc dalar Yerlebuc. ini bpoit. da
1balnal 19 taStrauk lUnoh mashvaakanaleluhdtrade bxhlatudetilsi
Ual ulellg wlvgak Mlngsuaaha alatdeStileku kdacai Malcng Adh
donUi Mad« al» MoLognl
btedaha. Pacl.lan Yg ailelhuldam, didetabhon hadet Pehkis lin
loy mgcl SLlarll}/0 dkadectackilaya Ss btloro1so'/a.Vtrbda
nidiSstaLkanolud. behgrela Fuuter 9aib bdakadanyaPeclakuanferenJaman
wihtudiStlady da Casio Sanfd dsplntOauk.kwec Ifehtsol kalay
Mtt dde\ua Sul elac borho dan Madeç bt Gtilada Sulelar blis4
tcLadaaninj daeat kucid Ko(laa u ltsioga wsh tu Vey tngany
dn9alat Qobeharan. Kuhudinualuh Mador loh bil al Mdoy.hefoh
didu?akaon JubaSac 8 % dn Kador t shtlatr Suboleelas o. (eebtdamio,-
dsubk, olehusa halLingne[oh» ducs Peayinpanta 1de ehu Vtnlda
Secanta valcuktiMun in: adlel, dinuetaye S. G Mdn Minia cls ld
Itoool atwfv, Ve), Vadu Praktihwn Vatuh lobi, nh9tno de usa
ndanksiei Lha, ntnkéadiega.ha, f1v) ultak dhssahlakauk
lVe lainUnh tulQei he)loilai yey DPtinel ln Juku ltoevan diighdha
Jangai dlegon uku bor'C untuk h UmkkholMaa Y1olel Ytnla halon San tt
nyadia
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Lemak dan minyak merupakan zat makanan penting untuk menjaga
kesehatan tubuh manusia. Selain itu, lemak atau minyak juga merupakan
sumber energi yang lebih efektif dibandingkan dengan karbohidrat dan
protein. Satu gram minyak atau lemak dapat menghasilkan 9 kkal/gram,
sedangkan karbohidrat dan protein hanya menghasilkan 4 kkal/gram.
Minyak atau lemak, khususnya minyak nabati, mengandung asam-asam
lemak essensial seperti asam linoleat, lenolenat, dan arakidonat yang dapat
mencegah penyempitan pembuluh darah akibat penumpukan kolesterol.
Minyak dan lemak juga berfungsi sebagai sumber dan pelarut bagi vitamin-
vitamin A, D, E, dan K (Winarno, 1992).
Lemak atau minyak terdapat pada hampir semua jenis bahan pangan
dan masing-masing mempunyai kandungan yang berbeda-beda. Oleh
karena itu analisis kadar lemak suatu bahan pangan sangat penting
dilakukan agar kebutuhan kalori suatu bahan makanan bisa diperhitungan
dengan baik (Pargiyanti, 2019). Dalam percobaan kali ini, lemak yang
tersusun atas asam lemak dan gliserol akan dianalisa dengan proses
ekstraksi, destilasi, dan uji kadar air.
Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam analisa lemak, diantaranya luas
permukaan, waktu ekstraksi, temperatur, dan solvent yang digunakan.
Aplikasi ekstraksi lemak diantaranya pengambilan minyak atsiri,
menentukan kandungan lemak pada makanan dan minuman. Aplikasi kadar
air ditetapkan pada pembuatan gliserin, dimana air dapat mempengaruhi
kualitas dan keawetannya (Treyball, 1980).

1.2. Tujuan Praktikum

1. Mampu memahami susunan rangkaian alat dan proses pengoprasiannya
2. Menganalisis kadar lemak pada kacang merah dengan metode analisa
soxhlet.
3. Menganalisis kadar air dan kadar abu pada kacang merah.
1.3. Manfaat Praktikum
1. Praktikan mampu memahami rangkain alat dan proses pengoprasiannya.
2. Praktikan mampu menganalisis kadar lemak dan metode soxhlet.
3. Praktikan mampu menganalisis kadar air dan kadar abu.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

Lemak adalah senyawa organik yang tidak larut dalam air tetapi larut dalam
pelarut organik non polar. Lemak termasuk ester yang tersusun atas asam lemak
dan gliserol, dimana ketiga radikal hidroksil dari gliserol diganti dengan gugus
ester.
Istilah lemak (fat) biasanya digunakan untuk trigliserida yang berbentuk
padat atau lebih tepatnya semi padat pada suhu kamar, sedangkan istilah minyak
(oil) digunakan untuk trigliserida yang pada suhu kamar berbentuk cair.

2.1. Komponen-Komponen Lemak

a. Gliserol
Gliserol disebut juga dengan gliserin atau propantial 1, 2, 3 adalah
bermartabat tiga dan memiliki struktur seperti ditunjukkan oleh Gambar
2.1.

Gambar 2.1 Struktur gliserol

Sifat fisisnya yaitu berbentuk cairan kental, memiliki rasa manis, tidak
berwarna, dalam keadaan murni bersifat higroskopis, netral terhadap
lakmus. Tidak larut dalam benzene dan karbon disulfida.
b. Asam Lemak
Yaitu asam karboksilat yang rantainya lurus dan radikal
karboksilatnya terletak di ujung rantai.
Asam lemak penyusun utamanya adalah :
1. Asam stearat (C17H35COOH)
2. Asam oleat (C17H33COOH)
3. Asam linoleat (C17H34COOH)
2.2. Rumus Umum Lemak
Rumus umum lemak/trigliserida adalah CH2COOR-CHCOOR'-CH2-
COOR'', di mana R, R' dan R'' masing-masing adalah sebuah rantai alkil yang
panjang. Ketiga asam lemak RCOOH, R'COOH dan R''COOH bisa jadi
semuanya sama, semuanya berbeda ataupun hanya dua diantaranya yang
sama. Struktur trigliserida/lemak tersebut ditunjukkan oleh Gambar 2.2.

Gambar 2.2 Struktur lemak

Ada berbagai cara untuk mengambil minyak atau lemak dari tumbuh-
tumbuhan atau jaringan hewan. Cara tersebut antara lain :
• Cara Extraction (menggunakan solvent)
Ekstraksi dapat didefinisikan sebagai proses pemisahan satu ataupun
lebih bahan atau komponen dari suatu padatan atau cairan campuran
dengan menggunakan solvent/pelarut. Ekstraksi ini ditujukan untuk
menarik komponen tertentu yang terdapat dalam bahan (Permana dan
Robiah, 2018). Pada prinsipnya pemilihan pelarut adalah yang
sesuai/selektif dengan minyak yang akan dilarutkan (Estrada dkk., 2017).
Ada berbagai jenis solvent yang dapat digunakan sebagai bahan
pengekstrak lemak, diantaranya adalah n-hexana dan diethil eter.
• Cara Pressing (penekanakan)
Pengepresan atau penekanan merupakan proses untuk mengekstrak
komponen daribahan biologis. Komponen biologi yang terletak dalam
struktur sel-sel tumbuhan, sel tersebut dirusak agar mendapatkan
komponen yang diinginkan (Estrada dkk., 2017). Umumnya pengepresan
dibagi menjadi dua metode yaitu pengepresan hidrolik tanpa media
pemanas dan pengepresan berulir dengan proses pemanasan (Permana dan
Robiah, 2018).
2.3. Kegunaan Lemak
1. Untuk minyak goreng
Minyak goreng adalah minyak yang berasal dari lemak tumbuhan
atau hewan yang dimurnikan dan berbentuk cair dalam suhu kamar dan
biasanya digunakan untuk menggoreng makanan (Noriko dkk., 2012).
2. Untuk cat vernis
Vernis merupakan salah satu produk pelapis permukaan yang dapat
berfungsi baik sebagai pelindung maupun dekoratif. Vernis merupakan
campuran homogen satu jenis atau lebih (resin sintetik atau alami)
dengan lemak nabati atau minyak hewani, bahan pengering dan pelarut
(Hidayat dkk., 2019).
3. Untuk obat-obatan
Hidrolisis minyak dan lemak merupakan suatu proses industri yang
penting. Produk dari proses tersebut berupa asam lemak dan gliserol yang
merupakan bahan baku industri obat-obatan (Setyopratomo, 2012).
4. Untuk kosmetik
Minyak atau lemak memiliki kandungan oleokimia, yakni asam
lemak, yang dapat dimanfaatkan dalam industri kosmetik (Setyopratomo,
2012).
5. Untuk pembuatan margarin
Pembuatan margarin dilakukan dengan cara membuat emulsi antara
fase minyak dan fase air menggunakan pengemulsi. Tahapan prosesnya
meliputi formulasi lemak atau minyak, pencampuran fase minyak dengan
fase air, pendinginan untuk pembentukan plastisasi atau teksturisasi dan
tempering (Hasibuan dan Hardika, 2015).
6. Untuk pembuatan biodiesel
Biodiesel adalah bahan bakar alternatif untuk mesin diesel yang
dihasilkan dari reaksi transesterifikasi antara minyak nabati atau lemak
hewani yang mengandung trigliserida dengan alkohol seperti metanol
dan etanol. Reaksi transesterifikasi ini memerlukan katalis basa kuat
seperti natrium hidroksida atau kalium hidroksida sehingga
menghasilkan senyawa kimia baru yang disebut dengan metil ester
(Adhani dkk., 2016).
7. Untuk insektisida dan fungisida
Pestisida adalah bahan kimia yang digunakan untuk mengendalikan
perkembangan atau pertumbuhan dari hama penyakit dan gulma.
Pestisida secara umum digolongkan kepada jenis organisme yang akan
 dikendalikan seperti insektisida (serangga), herbisida (gulma) dan
fungisida (jamur). Bahan baku pembuatan pestisida adalah minyak dan
lemak nabati dengan kandungan aldrin dan dieldrin, chordane, DDT,
edrin, Heptachlor (Hasibuan, 2016).
8. Untuk pembuatan sabun dan deterjen
Bahan baku pembuatan sabun dan deterjen adalah lemak atau
minyak, alkali, serta bahan organik lainnya seperti pewangi, pewarna,
pengisi dan lain-lain. Lemak yang digunakan dalam pembuatan sabun
dan deterjen dapat berupa lemak nabati atau lemak hewan. Alkali yang
biasa digunakan adalah natrium hidroksida (Sutyasmi, 2011).
9. Untuk menyamak kulit
Minyak atau lemak dapat digunakan untuk peminyakan pada proses
penyamakan kulit, dimana lemak perlu disulfonasi terlebih dahulu agar
secara teknis mudah larut dalam air dan mudah terdifusi kedalam kulit
(Sutyasmi, 2011).

2.4. Hal-Hal yang Perlu Dipertahankan Pada Proses Ekstraksi

1. Temperatur : suhu menentukan, dapat diukur dari solvent yang
digunakan dan kelarutan lemak.
2. Luas permukaan : makin luas bidang sentuh, ekstraksi makin baik.
3. Solvent : jenis solvent akan berpengaruh pada jumlah
lemak yang terambil
4. Waktu ekstraksi : makin lama waktu ekstraksi makin banyak lemak
yang dihasilkan waktu kurang lebih 3 jam.

2.5. Metode Pengukuran Lemak

a. Metode Goldfish
Metode ekstraksi lemak dengan solvent ini berlangsung secara
kontinyu, solvent dari labu perebusan terus mengalir di atas sampel yang
ditahan di sebuah thimble keramik. Kandungan lemak diukur dengan
massa yang hilang dari sampel atau massa lemak yang keluar dari sampel.
Metode yang kontinyu ini, ekstraksi yang diberikan lebih cepat dan lebih
efisien dari pada metode ekstraksi semikontinu. Namun, hal tu bisa
menyebabkan penyaluran hasil ekstraksi tidak sempurna (Nielsen, 2010).
b. Metode Soxhlet
Metode ini adalah ekstraksi dengan solvent secara semikontinyu,
solvent akan terisi di tabung ekstraksi selama 5-10 menit dan secara
 menyeluruh mengelilingi sampel dan kemudian mengalir kembali ke labu
perebusan. Kandungan lemak diukur dengan kehilangan massa dari
sampel atau massa lemak keluar dari sampel. Metode ini memberikan efek
perendaman pada sampel dan tidak menyebabkan penyaluran. Namun,
metode ini membutuhkan waktu lebih lama dari pada metode kontinyu
(Nielsen, 2010).
c. Metode Mojonnier
Lemak diekstraksi dengan campuran etil eter dan petroleum eter
dalam labu Mojonnier, dan lemak yang diekstraksi dikeringkan sampai
berat konstan dan dinyatakan sebagai persen lemak oleh berat.
Uji Mojonnier adalah contoh dari metode ekstraksi solvent secara
diskontinu dan tidak memerlukan pembungan kadar air (moisture) dari
sampel. Hal itu bisa diterapkan untuk sampel cair dan padat. Jika
petroleum eter digunakan untuk memurnikan lemak yang diekstraksi,
metode ini sangat mirip dengan Roese-GottliebMethod (Metode AOAC
905.02) baik dalam prinsip dan praktik. Metode Mojonnier dikembangkan
dan diterapkan terutama untuk makanan olahan susu, namun berlaku untuk
makanan yang lain. (Nielsen, 2010).
d. Metode Babcock
Dalam metode Babcock, H2SO4 ditambahkan ke sejumlah susu yang
diketahui di botol Babcock. Asam sulfat mencerna protein, menghasilkan
panas, dan melepaskan lemak. Sentrifugasi dan penambahan air panas
mengisolasi lemak untuk hitungan pada bagian botol uji. Lemak diukur
secara volumetrik, namun hasilnya dinyatakan sebagai persen lemak
menurut beratnya. Metode ekstraksi ini tidak menggunakan solvent (S.S
Nielsen, 2010).
e. Metode Gerber
Prinsip metode Gerber mirip dengan metode Babcock, namun
menggunakan asam sulfat dan amil alkohol. Asam sulfat mencerna protein
dan karbohidrat, melepaskan lemak, dan mempertahankan lemak dalam
keadaan cair dengan menghasilkan panas. Metode ekstraksi ini tidak
menggunakan solvent (Nielsen, 2010).

2.6. Karakteristik Kacang Merah

Kacang merah (Phaseolus vulgaris L.), dinamai juga dengan red
kidney been karena kemiripan warna dan bentuk visualnya dengan ginjal
manusia (J Nie dkk, 2020). Kacang merah berasal dari Amerika Tengah dan
Selatan dan telah dianggap sebagai makanan kacang-kacangan yang penting
karena kandungannya yang tinggi protein (20% -25%) dan karbohidrat (50%
-60%), lemak sumber yang baik vitamin dan mineral seperti zat besi,
tembaga, vitamin K1, dan jumlah serat yang cukup banyak (15%–35%).
Karbohidrat utama dalam kacang merah adalah pati (25% -45% ). Pati telah
digunakan sebagai bahan makanan seperti saus, sup, gula-gula, sirup gula, es
krim, makanan ringan, mie, daging produk, dan sebagai alternatif lemak.
(Nakamura dkk, 2021)
Baru-baru ini, beberapa penelitian menemukan bahan aktif dari
kacang merah. Triasilgliserol (TAG) sekitar 2,72 % yang diperoleh dari
ekstrak heksana kacang merah yang menunjukkan aktivitas anti diabetes
melalui penghambatan -glukosidase. Ekstrak fenolik didalam kacang merah
juga menunjukkan antioksidan dan aktivitas anti-inflamasi dalam sel
makrofag. Namun, protein dan fitohemagglutinin merah yang ada pada
kacang merah telah dilaporkan memicu reaksi alergi di beberapa individu
(Nie dkk, 2020).
 BAB III
METODE PRAKTIKUM

3.1. Bahan dan Alat yang Digunakan

3.1.1. Bahan
1. Kacang merah 16 gram (basis kering 10 gram, basis basah 6 gram)
2. N-hexane 120 mL
3.1.2. Alat
1. Statif dan klem
2. Beaker glass
3. Corong
4. Cawan porselin
5. Oven
6. Gelas ukur
7. Timbangan
8. Pendingin balik

3.2. Gambar Rangkaian Alat

Ekstraksi lemak dalam praktikum ini menggunakan metode Soxhlet
dengan pelarut n-hexane. Rangkaian alat ekstraksi tersebut ditunjukkan oleh
Gambar 3.1.

Gambar 3.1 Rangkaian alat ekstraksi Soxhlet

 Keterangan :
1. Statif 7. Pipa aliran uap
2. Klem 8. Pipa aliran N-hexane
3. Pendingin balik 9. Labu alas bulat
4. Tabung soxhlet 10. Thermostat
5. Sampel dalam kertas 11. Heater
saring 12. Thermostat
6. Pipa aliran embun 13. Waterbath

Ekstrak lemak yang dihasilkan dari proses ekstraksi harus dipisahkan

dari pelarutnya menggunakan proses distilasi. Rangkaian alat distilasi
tersebut ditunjukkan oleh Gambar 3.2.

Gambar 3.2 Rangkaian alat destilasi

Keterangan :
1. Labu destilasi
2. Pendingin Liebig
3. Heater
4. Erlenmeyer
5. Tripot
6. Statif dan klem

3.3. Prosedur Percobaan

3.3.1. Ekstraksi lemak
1. Menghaluskan dan mengeringkan kacang merah sebanyak 10 gr.
2. Menyusun rangkaian alat seperti pada Gambar 3.1.
3. Memasukkan 120 ml N-hexane ke dalam labu alas bulat.
 4. Membungkus kacang merah dengan kertas saring dan ikat dengan
benang, kemudian memasukkannya ke dalam tabung soxhlet.
5. Melakukan proses ekstraksi selama 2 jam.
3.3.2. Destilasi untuk recovery solvent
1. Memindahkan N-hexane + lemak yang ada di labu alas bulat ke
dalam labu destilasi.
2. Menyusun rangkaian alat seperti Gambar 3.2.
3. Melakukan proses destilasi untuk menguapkan n-hexane.
4. Menghentikan proses destilasi saat tidak ada lagi n-hexane yang
menetes.
5. Menimbang cawan kering yang akan digunakan dalam keadaan
kosong.
6. Memindahkan lemak ke dalam cawan dan mengeringkannya di
dalam oven selama 15 menit.
7. Mendinginkan cawan berisi lemak di desikator dan ditimbang
hingga beratnya konstan.
8. Menghitung kadar lemak menggunakan persamaan 3.1.
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐿𝑒𝑚𝑎𝑘
% 𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝐿𝑒𝑚𝑎𝑘 = × 100% (3.1)
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑆𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐾𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔

3.3.3. Uji kadar air

1. Menimbang cawan kering yang akan digunakan dalam keadaan
kosong.
2. Meletakkan kacang merah sebesar 3 gram di atas cawan, kemudian
menimbang beratnya.
3. Memasukkan cawan berisi kacang merah ke dalam oven dengan
suhu 100oC selama 1,5 jam, lalu memastikan oven telah panas dan
siap untuk mengeringkan kacang merah.
4. Setelah selesai mengeringkan kacang merah, memasukkan cawan
berisi kacang merah ke dalam desikator, dinginkan sampai suhu
konstan hingga berat kacang merah dan cawan tetap.
5. Menghitung kadar air menggunakan persamaan 3.2.
(𝑤𝑡𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ+𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛)−(𝑤𝑡𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔+𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛)
% 𝐴𝑖𝑟 = (𝑤𝑡𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ+𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛)−(𝑤𝑡𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛)
× 100%

(3.2)
3.3.4. Uji kadar abu
1. Memanaskan cawan porselin terlebih dahulu di dalam oven,
kemudian mendinginkannya di dalam desikator hingga mencapai
suhu ruangan.
2. Selanjutnya, menimbang 3 gram kacang merah kemudian dibakar di
dalam cawan porselin sampai tidak berasap dan abukan dalam tanur
dengan suhu 550oC sampai kacang merah berubah menjadi abu atau
mencapai berat konstan.
3. Kemudian, mendinginkannya di dalam desikator hingga mencapai
suhu ruangan secara konstan dan menimbang kacang merah tersebut.
4. Menghitung kadar abu menggunakan persamaan 3.3.
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐴𝑏𝑢
% 𝐴𝑏𝑢 = × 100% (3.3)
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑆𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
 PASL DAN fCHaMAS AN
4.1. Aals kde ltnde fala KaCns Mo
dReloan Ond.skedc nk kely thte ddete lhan kadke han dh Skse
179%. Mal| kelw ltnoh )oy dide falkan deifrlo boan Kndion d badinhe, dljn
Kad lenak Malas ntel tads30,0al aluan.dia hskl kade lUnsh kalay
ntcdlkel dafal dikróuhkan Ped« label 41: lgs briku
Talel1.1.Hesl alky heder ltnskpudahalay De

bSdekKakltnch Jans dsktnu kan leie ivcaal alvn sal lL hutil

Jahaysed huoo.Diuoukan.kadurleskishkog nehlgbiesd ie dei lde
Klorbackih besde d,l.lka old biltela fchloc, aalucelain adslak
1.lilk Adag eplakun rddan.on

haa dilkokanurtadena)hknitly Ifelahkic. Einkko

nadia PCcadena, dsladoklarlhdulka ar in halulaha
Ihutuna edelth.k {ulslselaa { lrlala iu, oiknua kude

S.l SeFekbr S?cla oiMon dolen fo Sudkekd tmak

(arm KaCa h{foh dan l2oln-tekane.Kakho yag disuaaka, lada

lolakan lebieler di badisakon daadn KelletadMOllSqkin
eldtahsi ldnuk htovaiukka.kedelUnak osleik Lda, Oalb ca

3 w.xl pisLl
robe distles tda kela,sah ini dilika, U, ba ntnduatue lar-t
Sa talh de. lunck. Iclol amin; dilehkan olKfa dobode auf3) dima
Kado lnaknuskel fade lolo dkilk sle Sntat don as
aiyhat. anl Weklw tbtnbu.Uatuk hNalalai Kadorlenak Jos
 otlnunode o.b Sntd tals dsblase dilmda, dasenbdah do
dllas: dlahukon Selat« uhdinel Suhingsa he doc Lo yay
ttnuka, leh bthor dbuoskon dtosn atee kur: Li Mare dabede,)

1.2. Aos hedm hir ted. kolay Mecoh

fad lobuo ndlsi) Kodor a.c MaCang noe(oh didatolkn Mdurar Se Ur
8%.M.sl kodar ai c 9oy ddela[hon.deci: lte lsb MLaudiandibad ing ho,
dngos Modor aic MeCong nttal Pode iucnal a lva. (tebad.ngabaI Maar
ai, Molay ot.hlucdelut det.bt deniukun lad: Tall4.) Sulsahiht.

Kade lraklk_ cder ltekis

C35
CoCpia da, uly, la
diltrol dat LLhLikonia lkk Ksl 9uka, Sdtlor 63S a dor: lade Madec
efis Kalag.ntlo, yay dittealel. dai iUCel a(anJakai SultSor Lsusf
UeleladoLSsy3 D.te]. Hl kurdeb doat dbylolka, ollL balzaQ
oataco lgin
LoisMen Juk Vburiagn lada Sael lagusisdalan bhwolopakal
don woktu rktny
dolal.hlayihalkon tnutunnyMatlae air lada
hl.av(n kajor áii dkeeaskn olul laju_liguala.aie Sas
naingalyay diletae dbsa oigelSsl CAberdkus:) Ps da
fca Mtilkun Y dilokokn diunauaSohv yuloc l-C Slalkaatla
T0clLalofatlia den Lu}gelg) qtag9unakn Svke lJor t . btedawudka

ivnaha lala sact Prekkikvn deagn Ptc(oboa Ycog chleku ha.olh

locrulta da bus ?dle. Yerlgdaa Sukr io, leh Yag MlaJelolhan kadara r
Gloy merel Pod« l tautikwn tiLMelil dai fod, kadac aic caal ala
MalneJynMin bin99i uh {l19erin3anha lhe ukdar ac a urkadng
did.lum en Qul aMa Sqoakn Melit
.wan YAtin gon
LAUYring an oMo ntawa airins 0a, latn9& hsnt(Rfiadan.
tol
t elod aiLot dor, luçn, daf 4, Jtisisbtculknnda akl
CAls oMu)os1. dle Man lenbaluan terlut buka
nuasnsalkn.
Wk uindon enyu haly ruceh d cak tihoh Solena lhJ j
llha dila,dvg hadlnsa Ytrlo baon s olaku Man O|?% (ogeia
Luy eYeg dah oi lul»{ Wa, alot tX:k wanlyatok
 MpnsKinn Vrladad lana hahto ?tcingan rvay tlalk, Mador
Ktig KalGJnteh yag Ltnuhan (obt Mylul d.rifada ha0acat
Malay nh {ad<suend aloa,
SLolnbehdn
Lolet do rangon brdn oicalu tlthtrult-alolliat-
a
Souy uden aju dafol rsadi Selar« Pnbohotondol -3olol
AfotdjalelalMan dui adalli enbeli air abu Mabe nðioMs da
oldh uob adalan Yey udohac Sael
ndiaginan Woyden Ldtoaod,
l996- Vod ahti hunia Mainpay9unaha
dukMabo cUn tuuk
ucongi 9alal veha locdsocbkan nbali va a lulssanog!
Heleh delahohan lLagyelnga,) s UagMa Pads Yecloloan. oy
diuhuan.old. lorasliad, Luls, ata,)brKenuy Kne hlk
9ae Geslebr besoc Ma(tha-i dah hnelukMon dUihatar
uell ih dohelu Selsing9a Sanp tl kelay rnershlelkouwa
u e t kadst alc My berMa-dung lidalonvo_kalaytaafa
lulit. Luse. 0JA Matgoaikn.3elet Pnlehatandelal neytlelle.
Kadoc Plahtis ar kalej e.h a k nuMo lada lelh uat
dibog as Aadacaie uelg nor al,ivpnel olua

1.3 Aadi s kadarAs ld. haahth

Sdaler 2eo.Hal kadkcsb Jy didatal, ua, decPiclobaan kemudign
Lodiag ha Ogrgcn Med arabAeléy noerda ludasupaaleluan.lthlde
haslhader al. keloy necoh btcdal-t dagekdi taiukka for alab y13
Sul e4aeriMuk.
T 43 H4lonelii kalagalsl,elengred
Kde ltak Kadcc lo olikl
3,80
CCorogliad.S,L48)

ader orili Kalas ni.h Yag dituoleh di iyeaul olvon 19aka Stuva
ho9 eratia don lally) 0),Md lucsit dofet ohe«bhan Ole
betCala Felloc outoca lein
L.0Sa Malay ageh
dalon
Uaooa log herh Sony duneka L g i kntql
Nlobaon in. daf«lnlaP?-gec.hail oAkic 9any diNrelh da
 Kde ob feda Sah pol 9oy diandi'l A?alila Kaloq naloh oy
onaMan d. ln lrclob aus wwia bwa nota junld, nnu.rel Jy
BrMaydwny d alamayk aManl dh lanjoh dilead ir Mon n l h

Matol9or bechondung ddalan alog mp og)hmd

Eaulo neagalami r luy tlJa1 Sthinsg4, Mand inga
oe col d dalanaya klik bondeh dibadi ga, deyg bod
ay mdh huda CMacn 0uM,1al).
2.Ducat Vyinlnan
unk lana lths.nlenan kalongrit.h nchauedstaip
Jas ttthadu, d. dala.crajiallon Jutuin menaMet Kodaap

d\Mubidnganhbnjhikuor9esine Joy nerbuhhe

iag( aldhberldaonhidut,Mikoaryanidne ag biderdaln

dalan toled adag ta; Maroaeahtelbes aic li halog 2[

bole alu MuR Ualpla diiedshn beneetluckenbos biau luhingga
Miavalya dilgratoleh nihioargailMe has lgddht jay
hlngaabkan Madecabu.ade inel bnalds lulhaiai
Canukha dAkkolg):
iakefon
Valunllu enebancl he clela Sld,SaluGrhedac
onganga tig auJostiunolkn dolah told
nLueon delat becpe4urd Qada Medue sb vdaç hal.oy
hofeh Jag4ho dhdnoluI.{ada ULclobasan au Jang
hUneMan.aualcn SCo"C1 )U0 Gy lha, kuku o7 tnul9ylubardnya--
tiWnshahuhJanbeudanad eleh bg:"C Plnlohafn
Maya.Aan ecoudn yciadi idak Sgalucna)
hioya hada( ab Yozoldo{Mon al hensel lelil i'ysi
OAu1o1y)
 BAOV
PEMUTOP

. KeSprulan
Kadsc lik chbl Log tg Seldaell,}'o, dgun hdr bocbilaye
Subder 0,ioto.V.doe tron teS loL.. beSoe dog,ad koitu.hdl ini deul
dtl.bhan oleh btleata fehbediantecndas hdohadonsa trlovan
kadec 1s.«kSair halay tefe Sll.3,5., Sday he Mador hor blnye
Ssbtb1, o,k ader akhs lubi,kll day:hadar eib Mal in det
diselobkapleh Gtleoea Cakb d'a lotomnda el feyrsing mwak
e-geciag oni de Jolut Donlokafan

SLelo og'hkadnlrahl letik Lledai hde taabl.Hai laqot

dialbMenoltL GrltitaEakloc dia.tucnja) Uyiu Kalej mtah
detes: Plnyinlmd)u Yenloneo

.oonmimuetay SFatfh dn knie Coosga Pade ltalosolakst ladeVda

Pantiwn Uaton lebilylnd daniusa Nqablk behaya.
hnadingha Peub hlte.h daga hlasguaaha lolllain
akuh nlalalai hosilalu Sgd?bins
Ytnsclvon ikiskathm Jan {u dVaia u ku b0o CUa
n ial Mon leu P0oboksnanuh2el nvaial ahu
 DAFTAR PUSTAKA

Abasi, S., Mousavi, S.M., Mohebi, M., Kiani, S. (2009). Effect of Time and
Temperature On Moisture Content, Shrinkage, and Rehydration of Dried Onion.
Iranian Journal of Chemical Engineering. 6(3), 57-70.
Adhani, L., Aziz, I., Nurbayti, S., dan Oktaviana, C.O. (2016). Pembuatan Biodiesel
dengan Cara Adsorpsi dan Transesterifikasi dari Minyak Goreng Bekas. Jurnal
Penelitian dan Pengembangan Ilmu Kimia, 2(1), 71-80.
Cornelia, M., & Lessy, S. T. (2018). The Utilization of Edamame (Glycine max (L.)
Merr) And Red Bean (Phaseolus vulgaris) As A Functional Beverage. Acta
Chimica Asiana, 1(1), 11-16.
Day, R. A. dan Underwood, A. L. (2002). Analisa Kimia Kuantitatif (6th ed.).
Erlangga: Jakarta
Durant, J. (1959). Organic Chemistry (7th ed). London : Impression Longmans, Green
and Co.
Estrada, F., Gusmao, R., & Indraswati, N. (2017). Pengambilan Minyak Kemiri dengan
Cara Pengepresan dan Dilanjutkan Ekstrasi Cake Oil. Widya Teknik, 6(2), 121-
130.
Fieser, L., dan Fieser, M. (1956). Introduction to Organic Chemistry. Tokyo : Maruhen
Co Ltd.
Fieser, L., dan Fieser, M. (1956). Organic Chemistry. New York : Reinhold Publishing
Corporation.
Groggins, P.H. (1958). Unit Operation in Organic Synthetic (5th ed). New York : Mc
Graw Hill Book Company.
Hasibuan, H.A. (2016). Residu Pestisida pada Minyak Sawit dan Minyak Inti Sawit
terkait dengan Standar dan Keamanan Pangan. Warta Industri Hasil Pertanian,
33(02), 74-81.
Hasibuan, H.A., dan Hardika, A.P. (2015). Formulasi dan Pengolahan Margarin
Menggunakan Fraksi Minyak Sawit pada Skala Industri Kecil serta Aplikasinya
dalam Pembuatan Bolu Gulung. Agritech, 35(4), 377-386.
Herman, Rusli, R., Ilimu, E., Hamid, R., Haeruddin. (2011). Analisis kadar mineral
dalam abu buah nipa (Nypa fructicanx) Kaliwanggu Teluk Kendari Sulawesi
Tenggara. J Trop Pharm Chem, 1 (2), 108.
Hidayat, T., Sailah, I., Suryani, A., dan Sunarti, T.C. (2019). Formulasi Vernis Berbasis
Resin Fenolik dari Destilat Cairan Kulit Biji Mete.
Jacobs, M. (1958). The Chemical Analysis of Food and Food Product. New York : Van
Nostrand Company Inc.
Kara, N., & Baydar, H. (2013). Influence of distillation time and fractions on essential
oil content and composition of lavandin (Lavandula× intermedia Emeric ex
Loisel.). Res. Crop, 14, 1128-1134.
Kemerli-Kalbaran, T., & Ozdemir, M. (2019). Multi-response optimization of oil
extraction from pine nut (Pinus pinea L.) by response surface methodology:
Extraction efficiency, physicochemical properties and antioxidant
activity. LWT, 103, 34-43.
Liu, K. (2019). Effects of sample size, dry ashing temperature and duration on
determination of ash content in algae and other biomass. Algal research, 40, 1-4.
Morrison, R.T., dan Boyd, R.N. (1978). Organic Chemistry (3rd ed). New Delhi :
Prentice Hall of India Private Limited.
Nakamura, A., Ohboshi, H., Sakai, M., Nomura, K., Nishiyama, S., & Ashida, H.
(2021). Extraction of water-soluble polysaccharides from kidney beans and
examination of their protein dispersion and stabilization properties under acidic
conditions. Food Research International, 144, 110357.
Nie, J., Qin, X., & Li, Z. (2021). Revealing the anti-melanoma mechanism of n-BuOH
fraction from the red kidney bean coat extract based on network pharmacology
and transcriptomic approach. Food Research International, 140, 109880.
Nielsen, S. S. (2010). Food Analysis (4th ed). Corvals : Springer Science + Business
Media.
Noriko, N., Elfidasari, D., Perdana, A. T., Wulandari, N., dan Wijayanti, W. (2012).
Analisis Penggunaan dan Syarat Mutu Minyak Goreng pada Penjaja Makanan di
Food Court UAI. Jurnal Al-azhar Indonesia Seri Sains dan Teknologi, 1(3), 147-
154.
Pangastuti, H. A., Affandi, D. R., & Ishartani, D. (2013). Karakterisasi sifat fisik dan
kimia tepung kacang merah (Phaseolus vulgaris L.) dengan beberapa perlakuan
pendahuluan. Jurnal Teknosains Pangan, 2(1), 20-29.
Pargiyanti. (2019). Optimasi Waktu Ekstraksi Lemak dengan Metode Soxhlet
Menggunakan Perangkat Alat Mikro Soxhlet. Indonesian Journal of Laboratory,
1(2), 7.
Permana, S. H. A., & Robiah, R. (2018). Ekstraksi minyak atsiri dari kulit jeruk sebagai
bahan peluruhan styrofoam. Jurnal Distilasi, 3(2), 16-21.
Pramusita, N., Fitriana, I., Sani, Y. E., dan Haslina. (2019). Lama penyimpanan
terhadap kadar air, kadar abu, dan kadar serat kasar marshmallow semangka.
Jurnal Teknologi Hasil Pertanian. 6-7.
Setyopratomo, P. (2012). Produksi Asam Lemak dari Minyak Kelapa Sawit dengan
Proses Hidrolisis. Jurnal Teknik Kimia, 7(1), 26-31.
Sutyasmi, S. (2011). Kajian Pemanfaatan Lemak Fleshing Industri Penyamakan Kulit.
Majalah Kulit, Karet, dan Plastik, 27(1), 46-53.
Treybal, R.E. (1980). Mass Trnsfer Operation. Tokyo : Mc. Graw-Hill Kogakusha Ltd.
Winarno, F.G. (1992). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta : PT. Gramedia Pustaka Utama.
Woodman, A.C. (1941). Food Analysis. New York : Mc Graw Hill Book Company
Inc.
 LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA II

Materi :

LEMAK

NAMA : David Jonathan Gleneagles Siahaan NIM: 21030121140140

GROUP : 14-Selasa

REKAN KERJA : Adisty Adillah Putri

Malaika Putri Adinda
Zhafran Octa Yuandika

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2022
I. luu
henu heohoh, Sluna (nskain alot dn frod flnotersiamna
haonlais keda kneh t«da Kaley otehdn.otladt onulss Soxkt
.Ladmalis hdd aic dn hadru fd Kalaree

1.6.h Jey di9Jrakan

Lkileg otcel lgenCl ran bas baj.l1.faa bs kesig)
2 N-Hgxat l2n
.A Sey diek
k slo
. (oCony
. Cawe foc
. OW
. Cul Soauc
1Tinb-nga
8Pedindi lh

anaa 21.Keahain alt Ckstrck soallee

1.SE PilaalicG lnbua 12- The(noll
i.
dlicauet
isi belik N-ktkanl 1.rLL
4. Tab Soxt luel
Jangl delur MLs\cos oIkCodl
 Ktcasa
Ytdiei lidi9
hatr
Erltnc
5. Tc:ok

S.LceMacsa
3. Ewlra nk
Muylalushn dan nyui Kale ntch el mi.h bir
Miuy (oskaia al.l Sefek: 9amlrdl.

.hnlug Kel necd. dey m.kectS)oris danniihi dlate

Mnindahkn -HtXatt lnk y de dilhu old lulol

3.M) bka Pcodts desll di oak h tagu ?kn o-htkal

MtnincM. NC e ohs iwnea dolur wadaa kalon

Mahiadshke.lnah ky ddlen Glun dannilsenjliiolen
oV Sulnals hhit
digiakan (Wan beri ltokids: k-lar dedikal

KIKD
 .LhV Kede lunt ntasjunok tcSene4d
bttSante kras

1-hue&l. kloy merh uldor tarn dials (,ua kanutin

dlino brooy
.Mnuhn Cawe lrSi antul ke dalan bVe, dtnjn . lod'

1u Slglai ntyliesa kaly ntc-nd» kMa Lelia, neii

ey.ntre Ma dalar,dt>iMalocadiasinkn Jan{ai sol kasla

A:w Sbqu] bdaALwa)-({SantlMerid)xlo. o

hinnlk(ka Yeraly. Lg leli. lholu di delen oVe Mradi

Rioink idaler dikelar hielha htalelai uh (u onda

aWa scl urgai kda ecsadannbyahaka. dalan teulee

Soanlai kalay bLco h nLaisi ala nalalkon, tak
Knedia) tndisir Ma didalath daj:hakuthiclha nelafsi uLs
Va a Mapsken dan nlainla kaloy pz(eh.
korstlu
1 higlwo Kdec ltndk ntvnaha ferlemaa 23
6 A blcal Ab xles
berthand

lo
c Layn Mu Jury.
15(n
bok Gwan t Lun«ud
Bect Laat enak
D nlen1
1. U; oder Al WalyntCh
9an
BAcc (Awa oleng S(a
KIK)
 btctCaua unul heig fam
Dtc n ne Mu.
DAclCawantunel Mecioy
Uhalec Ab» g he c
R.tCaon Voluss 9 [ah

2119a
btCawa elMerio 491 tao
GOcawt snevllMeGs S.}S} 9can

NoutayLher u)
MENCETA Ho 1
ASUTEM

Vautd anthollhlald laen Asina.bec

M alo ollILoly0
RIKY)
 LEnbAR PEeHliToM AM
A. EWth. Luneh dn Dstlsuatoh Qelovery slucat
Dc.E Caw MSon.
brtlentLenn 3Aal940
hdoclcoh
DC Sangel e
lo g(an

.Ust kdor ir
bac Sanlal.bs.h
B&cL(aun Vdo-g Jyutyan
Air:w! ka tulLShtva-wtSall Mery tava

xloa o

Abo bycetAb /
berSahtd

CKIKY
 LEMBAR KUANTITAS REAGEN
LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA II
DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO

LEMBAR KUANTITAS REAGEN

MATERI : Lemak
HARI/TANGGAL : Selasa / 1 Maret 2022
KELOMPOK : 14 – Selasa
NAMA : 1. Adisty Adillah Putri NIM. 21030121140164
2. David Jonathan Gleneales Siahaan NIM. 21030121140140
3. Malaika Putri Adinda NIM. 21030121140100
4. Zhafran Octa Yuandika NIM. 21030121140166
ASISTEN : Asep Ginanjar

KUANTITAS REAGEN

NO. JENIS REAGEN KUANTITAS

1 Kacang Merah
Kadar lemak : basis kering 10 gram
Kadar air : basis basah 3 gram
Kadar abu : basis basah 3 gram

2 N-Hexane 120 mL

TUGAS TAMBAHAN :

1. Cari jurnal kadar lemak, kadar air, kadar abu pada kacang merah. Dikumpulkan saat acc data
2. Cari dan pelajari msds reagen
3. Tambahkan penjelasan untuk metode pressing dan ekstraksi (pada 2.2)
4. Cari karakteristik kacang merah (tambahkan di bab 2)

CATATAN : Semarang, 24 Februari 2022

ASISTEN
Suhu ekstraksi : 78℃

Waktu ekstraksi : 2 jam

Suhu destilasi : 84℃ (Asep Ginanjar)

NIM. 21030120130085
 REFERENSI

Distilasi, Vol. 3 No. 2, September 2018, Hal. 16-21 Surya Hayyu Andi Permana, Robiah

EKSTRAKSI MINYAK ATSIRI DARI KULIT JERUK SEBAGAI

BAHAN PELURUHAN STYROFOAM

Surya Hayyu Andy Permana, Robiah

Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik,
Universitas Muhammadiyah Palembang
superrobiah@gmail.com

Abstrak
Kulit jeruk sebgaian besar masyarakat Indonesia belum banyak yang memanfaatkannya, karena
belum tahu kegunaannya. Padahal didalam jeruk sunkist mengandung lemonen sebagai minyak
atsiri yang dapat digunakan sebagai bahan peluruh styrofoam. Pada penelitian ini minyak atsiri
diambil dengan proses ekstraksi menggunakan n-heksan sebagai solvent. Variabel yang diteliti
pengaruh solvent (10 s.d.30 ml) terhadap yield, dan pengaruh perbandingan minyak atsiri dan air
terhadap waktu peluruhan styrofoam. Hasil yang diperoleh lemonen kulit jeruk sunkist dihasilkan
meningkat dengan bertambahnya solvent yang digunakan, dan yield tertinggi pada volume solvent
30 ml sebanyak 3,07%. Peluruhan styrofoam memerlukan waktu 11,72 detik pada perbandingan
minyak atsiri dan air sebesar 25:75 persen untuk jenis papan, sedangkan styrofoam wadah mie
memerlukan waktu 79,45 detik.
Kata kunci :atsiri, limonen, jeruk sunkist

PENDAHULUAN
Styrofoam merupakan merek dagang dari perusahaan Dow Chemical Co. untuk polystyrenea
foam. Styrofoam dihasilkan dari campuran 90-95% polistirena dan 5-10% gas seperti n-butana
atau n-pentana. Data EPA (Environmental Protection Agency) limbah proses produksi
styrofoam ditetapkan sebagai salah satu limbah berbahaya terbesar di dunia. Bau yang
ditimbulkan dapat mengganggu pernafasan dan mengandung 57 zat berbahaya yang dilepaskan
ke udara, dan apabila dibuang ke laut secara langsung akan merusak kehidupan ekosistem laut
(Charles A, 2003). Untuk mengatasi hal tersebut sebelum dibuang ke alam harus diolah terlebih
dahulu untuk mencegah pencemaran. Cara yang dapat dilakukan dengan melarutkan polimer
styrofoam (polistirena) dalam lemonen dipecah menjadi manomernya yaitu stirena sehingga
dapat didegradasi oleh mikroorganisme. Selain itu limbah jeruk yang selama ini hanya dibuang
di tempat sampah dapat dimanfaatkan sehingga mempunyai nilai ekonomis dan dapat
menyelesaikan permasalahan sampah styrofoam. Pada penelitian ini lemonen diambil dengan
cara mengekstraksi minyak atsiri dari kulit jeruk Sunkist dengan menggunakan variable solvent
yang berupa n-hexane, dan variable konsentrasi antara minyak atsiri dan air untuk melihat
kemampuan lemonan dalam peluruhan styrofoam.
Minyak Atsiri
Minyak atsiri atau disebut juga minyak eterik adalah kelompok besar minyak nabati yang
berwujud cairan kental pada suhu ruang namun mudah menguap sehingga memberikan aroma
yang khas. Minyak atsiri merupakan senyawa yang umumnya berujud cairan yang dapat
diperoleh dari bagian tanaman, akar, kulit, batang, daun, buah, biji juga bunga. Minyak ini dapat
diambil melalui proses penyulingan (distilasi), ekstraksi dengan pelarut organik atau dengan
cara diperas (press). Selain kegunaan minyak atsiri sebagai bahan farmasi, kosmetik, “flavoring

16
Distilasi, Vol. 3 No. 2, September 2018, Hal. 16-21 Surya Hayyu Andi Permana, Robiah

agent” dalam bahan pangan atau minuman, parfum dan sebagai pencampur rokok kretek serta
kegunaan lain tergantung dari struktur senyawa penyusunnya. (Buchbaue G., 2010).
Limonen
Limonen adalah hidrokarbon dan diklasifikasikan dalam terpene siklik. Limonen bisa diperoleh
dari kulit jeruk, jintan, adas, dan seledri. Limonen, seperti monoterpene lain, dapat diperoleh
dari pohon tertentu. Secara kimiawi, kulit jeruk mengandung atsiri yang terdiri dari berbagai
komponen seperti terpen, sesquiterpen, aldehida, ester dan sterol 3 .Rincian komponen minyak
kulit jeruk adalah sebagai berikut: limonen (95%), mirsen (2%), noctanal (1%), pinece (0,4%),
linanool (0,3%), sabiene (0,2%), geranial (0,1%), neral (0,1%, dodecanal (0,1%), lain-lain
(0,5%) (Anonim, 2018). Sebagian besar minyak atsiri termasuk dalam golongan senyawa
organik terpena dan terpenoid yang bersifat larut dalam minyak/lipofil. Minyak dalam kulit
jeruk akan diekstrak dari kulit jeruk, pemisahan solvent didistilasi untuk mendapatkan
komponen tertentu. Hasil dari proses ini disebut food grade d-limonen yang kemurniannya 96
sampai 97% dan mempunyai aroma jeruk.
Styrofoam dalam kehidupan sehari-hari banyak digunakan sebagai tempat makanan, pelindung
pada kemasan alat elektronik. Syrofoam terdiri dari komponen Polystyrene (C 8 H 8)n yaitu
sebuah polimer dengan monomer stirena, sebuah hidrokarbon cair yang dibuat secara komersial
dari minyak bumi. Pada suhu ruangan, polistirena biasanya bersifat termoplastik padat, dapat
mencair pada suhu yang lebih tinggi. Stirena tergolong senyawa aromatik. Susunan kimiawi dari
polistiren adalah hidrokarbon rantai panjang dengan setiap karbon lain yang terhubung
ke kelompok fenil (nama yang diberikan kepada cincin aromatik benzena , ketika terikat untuk
substituen karbon kompleks), (Anonim, 2018).

Gambar 1. Struktur Polystirena

Dibalik semua keunggulan itu terdapat kerugian yang sangat merugikan bagi manusia dan alam
karena styrofoam adalah sampah yang sulit untuk diurai.
Proses Pengambilan Minyak Atsiri
Ekstraksi adalah pemisahan satu atau beberapa bahan dari suatu padatan atau cairan dengan
bantuan pelarut. Ekstraksi juga merupakan proses pemisahan satu atau lebih komponen dari
suatu campuran homogen menggunakan pelarut cair (solvent) sebagai separating agent.
Pemisahan terjadi atas dasar kemampuan larut yang berbeda darikomponen-komponen dalam
campuran. Tujuan ekstraksi adalah untuk menarik komponen kimia yang terdapat dalam bahan.
Ekstraksi ini didasarkan pada perpindahan massa komponen zat padat ke dalam pelarut dimana
perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka, kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut
(Geankoplis, C.J.,2003).

17
Distilasi, Vol. 3 No. 2, September 2018, Hal. 16-21 Surya Hayyu Andi Permana, Robiah

Destilasi adalah suatu metode pemisahan campuran yang didasarkan pada perbedaan tingkat
volatilitas (kemudahan suatu zat untuk menguap) pada suhu dan tekanan tertentu. Destilasi
merupakan poses fisika dan tidak terjadi adanya reaksi kimia selama proses berlangsung. Dasar
utama pemisahan dengan cara destilasi adalah perbedaan titik didih cairan pada tekanan
tertentu. Proses destilasi biasanya melibatkan suatu penguapan campuran dan diikuti dengan
proses pendinginan dan pengembunan (Treybal, R. E. (1981). Dalam penelitian ini hasil
distilasi dimasukan ke corong pemisah dan diekstraksi dengan metode ekstraksi cair-cair untuk
memisahkan komponen-komponen dalam suatu campuran antara dua fasa pelarut dengan
densitas berbeda yang tidak bercampur. Ekstraksi dilakukan dengan bantuan solvent n-hexane
untuk memudahkan dalam proses pemisahan minyak atsiri dan air, karena n-hexane bersifat
non-polar sedangkan air bersifat polar. Untuk mengisolasi minyak atsiri dilakukan proses
evaporasi/penguapan pada suhu 69 − 750 C untuk menguapkan n-hexane dalam keadaan cair
menjadi gas.
Pengepresan
Pengepresan terbagi atas dua metode umum yaitu : Hydraulic pressing (pengepresan hidrolik),
dimana bahan dipres dengan tekanan sekitar 2000 lb/inch2 tanpa menggunakan media pemanas,
sehingga metode ini sering juga disebut codl pressing. Expeller pressing (pengepresan berulir),
dimana untuk mengambil minyak atau lemak perlu dilakukan proses pemanasan atau tempering
terlebih dahulu pada suhu sekitar 11,5°C dan tekanan 15.000-2.0000 lb/inch2 (Anonim, 2018).

METODE PENELITIAN
Bahan yang akan digunakan limbah kulit jeruk sunkist, air, n-hexane, limbah Styrofoam bekas
wadah mie instan dan papan Styrofoam. Sedangkan peralatan yang digunakan berupa blender,
alat distilasi sederhana, neraca analitik, corong pemisah, hot plate, pipet volume, thermometer,
labu Erlenmeyer, dan gelas beaker.
Proses penelitian diawali membersihkan limbah kulit jeruk sunkist sebanyak 50 g lalu dipotong.
Selanjutnya diblender sampai halus. Bubur jeruk Sunkist dimasukkan dalam labu distilasi yang
telah diisi air sebanyak 250 ml. Campuran didistilasi pada suhu 100 oC selama 120 menit. Hasil
distilasi ditambahkan solvent di dalam corong pemisah dan diamkan selama 30 menit, solvent
divariasikan sebanyak 10 ml, 15ml, 20 ml, 25 ml dan 30 ml. Setelah 30 menit buka katup
secara perlahan untuk memisahkan air dari campuran n-hexane dan minyak atsiri. Lakukan
proses evaporasi pada campuran hasil extraksi dengan memanaskanya di hotplate sampai suhu
campuran sebesar 69 − 750 C untuk menguapkan n-hexane. Hasil dari evaporasi ditimbang
dan dilakukan analisa data untuk mengetahui persen yield yang didapat.

PEMBAHASAN
Prosentase hasil (yield) lemonen dituangkan dalam grafik dibawah ini, dengan variabel solvent
(n-heksan) sebanyak 10 – 30 ml. Berdasarkan data yang diperoleh maka waktu yang optimum
untuk mendistilasi kulit jeruk seberat 50 g yang ditambah air sebanyak 250 ml adalah selama
96 menit. Karena pada menit ke 120 terjadi penurunan hasil distilasi dari 19 ml pada saat 96
menit menjadi 16 ml pada saat 120 menit, seperti terlihat pada Gambar 1 dan 2.

18
Estrada: PENGAMBILAN MINYAK KEMIRI DENGAN CARA PENGEPRESAN DAN … 121

PENGAMBILAN MINYAK KEMIRI DENGAN CARA PENGEPRESAN

DAN DILANJUTKAN EKSTRAKSI CAKE OIL
Ferek Estrada1), Ruben Gusmao1), Mudjijati2), Nani Indraswati2)
E-mail: ferekestrada@yahoo.com

ABSTRAK
Biji kemiri memiliki kandungan minyak cukup tinggi yaitu sekitar 57–69 %. Hampir semua bagian dari
pohon kemiri yakni dari akar, batang, kulit dan daunnya memiliki banyak manfaat bagi kehidupan manusia antara
lain di bidang farmasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mempelajari pengaruh tekanan pengepresan dan suhu
terhadap yield pengepresan dan kualitas minyak. Selain itu juga dipelajari pengaruh rasio massa cake oil/volume
n-heksan terhadap yield minyak kemiri pada proses ekstraksi cake oil.
Metode penelitian; kulit biji kemiri dipecahkan secara manual, selanjutnya biji kemiri dijemur sampai
kering kemudian dipotong-potong sampai berukuran sekitar 1 mm. Setelah itu biji kemiri dianalisis sifat-sifat
fisisnya. Biji kemiri sebanyak 200 gram dipress pada suhu berkisar 30-70C dan tekanan berkisar 2000–6000 psi.
Kemudian cake oil yang memberikan yield terbesar ditimbang dan diekstraksi dengan pelarutn-heksan. Minyak
hasil ekstraksi tersebut dicampur dengan minyak hasil pengepresan.
Dari penelitian ini disimpulkan bahwa yield minyak meningkat dengan bertambahnya tekanan, sedangkan
kualitas minyak tidak dipengaruhi oleh tekanan. Yield minyak meningkat seiring dengan meningkatnya rasio
antara cake oil/volume n-heksan sampai batas tertentu, kemudian menurun pada proses ekstraksi. Yield minyak
terbesar dihasilkan pada pengepresan dengan tekanan 6000 psi dan suhu 30ºC serta ekstraksi cake oil dengan
rasio 25 g biji kemiri/100 ml solven.

Kata kunci: biji kemiri, minyak, pengepresan, ekstraksi

PENDAHULUAN Lichtnussbaum (German); Noisette, Noix, Noyer,

Pohon kemiri (Aleurites moluccana L.)
Noyer des Indes (French); Calumbàn, Noz da India
termasuk dalam famili Euphorbiaceae, yang
tersebar luas di daerah tropis dan dapat tumbuh (Portuguese); Lumbang Bato (Philippines);
pada ketinggian sekitar 0-700 meter di atas
Kekuna (Sri Lanka); Kyainthee (Burma);
permukaan air laut dengan curah hujan 640-4290
Kemiri (Indonesia)[1].
mm. Salah satu keunikan pohon kemiri adalah
pohon kemiri dapat tumbuh dan berkembang
dengan cepat pada berbagai macam tekstur Buah kemiri terdiri dari:
tanah, misalnya tanah liat, tanah basah, tanah 1. Kulit luar (outer bulk skin) yang merupakan
pasir dan tanah kapur. Hampir semua bagian dari bagian paling luar (berwarna hijau atau
pohon kemiri yakni akar, batang, kulit dan coklat tua waktu panen);
daunnya memiliki banyak manfaat bagi 2. Kulit biji kemiri berwarna coklat kehitaman
kehidupan manusia[1]. dan
Pohon kemiri dapat bertahan hidup selama 3. Bagian yang paling dalam merupakan biji
40-60 tahun, tiap tahun pohon kemiri dapat kemiri yang berwarna kuning pucat[2].
menghasilkan 80 kg biji kemiri per pohon.
Untuk mengambil kandungan minyak kemiri Bagian buah kemiri tersebut disajikan pada
secara optimal dari dalam bijinya, maka biji Gambar 1, 2 dan 3.
kemiri harus disimpan atau dijemur dalam
selang waktu tertentu sampai kering[1].
Pohon kemiri memiliki beberapa nama
lokal di beberapa tempat yang berbeda, yaitu
Candlenut, Candleberry, Varnish tree, Belgaum
walnut (England); Kukui nut (Hawai’i); Arbol
llrón, Nuez (Spanish); Kerzennussbaum,

1)
Mahasiswa di Fakultas Teknik Jurusan Teknik Kimia Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
2)
Staf Pengajar di Fakultas Teknik Jurusan Teknik Kimia Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
 WIDYA TEKNIK Vol. 6, No. 2, 2007 (121-130)

kemiri[5]. Komposisi asam lemak dalam minyak

kemiri disajikan pada Tabel 2[6]:

Tabel 2. Komposisi asam lemak dalam

minyak kemiri
No Komponen Massa (%)
1 Oleat 75,72
2 Palmitat 5,83
3 Linoleat 18,45
Gambar 1. Penampang buah kemiri [3]

Minyak kemiri merupakan semi drying oil,

Gambar 2. Kulit biji dan kulit luar buah
kemiri
berbentuk cair pada suhu kamar, berbentuk padat
pada suhu -15ºC dan lebih cepat mengering di
udara terbuka dibandingkan dengan linseed oil.
Oleh karena itu minyak kemiri dapat digunakan
sebagai minyak pengering dalam industri cat dan
pernis. Cake oil dari kemiri mengandung 46,2%
protein, 4,4% P2O5, dan 2,0% K2O serta
gliserida dari asam linolenat, asam oleat dan
asam linoleat[5].
Sifat kimiawi dan fisis dari minyak kemiri
menurut SNI 01-4462-1998 adalah sebagai
berikut[7]:

Tabel 3. Sifat kimia dan fisika minyak kemiri

menurut SNI 01-4462-1998
No Parameter Persyaratan
Gambar 3. Biji kemiri 1 FFA (%) 0,10-1,50
2 Bilangan Iodine 136-167
Biji kemiri tidak dapat langsung dimakan (g I2/100 g sampel)
mentah karena beracun, yang disebabkan oleh 3 Bilangan penyabunan 184-202
toxalbumin. Persenyawaaan toxalbumin dapat (mg KOH/g sampel)
dihilangkan dengan cara pemanasan dan dapat 4 Warna normal
5 Densitas(g/cm3) 0,9240-0,9290
dinetralkan dengan penambahan bumbu seperti
6 Indeks bias 1,4730-1,4790
garam, merica, dan terasi[4].
Komposisi biji kemiri (Aleurites
Molucanna) tiap 100 gram adalah sebagai Proses pengambilan minyak kemiri
berikut[5]: dilakukan dengan dua metode berikut:
1. Pengepresan;
Tabel 1. Komposisi biji kemiri tiap 100 gram 2. Ekstraksi.
No Komponen Massa (gram) Pengepresan umumnya dilakukan untuk
1 H2O 7 mengekstrak komponen-komponen dari bahan-
2 Protein 19 bahan biologis seperti tanaman. Komponen-
3 Lemak 60 komponen biologi tersebut terletak di dalam
4 Karbohidrat 8 struktur sel-sel tumbuhan, sehingga sel-sel
5 Abu 3 tersebut perlu dirusak agar dapat diambil
6 Ca 0,8 komponen yang diinginkan[8]. Salah satu cara
7 P 2 pengambilan minyak atau lemak terutama yang
8 Fe 0,02
9 Lain – lain 0,18
berasal dari biji-bijian pada tumbuh-tumbuhan
adalah dengan pengepresan mekanis. Cara ini
Nilai kalori yang terkandung dalam biji dilakukan untuk mengambil kandungan minyak
kemiri adalah sebesar 626 kal/100 gram biji yang kadarnya berkisar antara 30-70%.

122
Estrada: PENGAMBILAN MINYAK KEMIRI DENGAN CARA PENGEPRESAN DAN …
Dua cara umum dalam pengepresan
mekanis, yaitu:
1. Hydraulic pressing (pengepresan hidrolis),
di mana bahan dipress dengan tekanan
sekitar 2000 psi[4] tanpa menggunakan media
pemanas sehingga cara ini sering juga
disebut sebagai cold pressing[9];
2. Expeller pressing (pengepresan berulir) di
mana untuk mengambil minyak atau lemak
perlu dilakukan proses pemasakan atau
tempering terlebih dahulu pada suhu sekitar
115,5°C dan tekanan 15000– 20000 psi[4].
Banyaknya minyak atau lemak yang
diperoleh dari pengepresan mekanis tergantung
pada[8]:
 Ukuran partikel
Untuk biji yang berukuran relatif besar harus
dikecilkan agar mudah dibentuk menjadi
flake sehingga dapat mudah dipress dan
akhirnya meningkatkan yield minyak;
 Moisture content
Moisture content bahan berpengaruh secara
signifikan terhadap yield minyak hasil
pengepresan. Moisture content optimum
masing-masing bahan untuk mencapai yield
tinggi bervariasi, misalnya untuk biji bunga
matahari, moisture content optimum adalah
6%, kedelai berkisar 9,5-10% dan untuk
conophor nut berkisar 8-10%;
 Suhu dan waktu pemanasan
Suhu dan waktu pemanasan mempengaruhi
yield, karena dengan pemanasan ini dapat
memecah sel tumbuhan dan dapat juga
mengkoagulasi protein yang ada dalam biji,
sehingga viskositas minyak turun dan akan
mempercepat aliran minyak ke luar. Suhu
dan waktu pemanasan yang dibutuhkan
tergantung pada jenis biji tumbuhan,
misalnya pada biji kedelai pada suhu 650C.
Pada suhu yang tinggi dan waktu lama
mungkin akan memberi efek negatif pada
kualitas cake oil dan minyak hasil
pengepresan;
 Tekanan
Secara umum yield berbanding lurus dengan
akar tekanan yang digunakan dan akhirnya
konstan. Biji bunga matahari membutuhkan
tekanan ≥ 15 MPa. Untuk pengepresan yang
lama akan mengakibatkan kualitas minyak
turun, karena mempercepat terjadinya
ketengikan[10].
Ekstraksi padat–cair atau leaching
merupakan kontak antara fase padat dan fase cair
di mana solut berdifusi dari fase padat ke fase
cair, sehingga komponen-komponen solut dalam
padatan dapat dipisahkan. Kegunaan proses
leaching dalam industri antara lain untuk
memproduksi minyak kacang, minyak tumbuh-
tumbuhan dengan menggunakan pelarut organik
seperti acetone dan heksan[11]. Selain itu untuk
mengambil lemak hewan dapat dilakukan
dengan cara rendering yaitu menghancurkan
jaringan tubuh seperti lemak, tulang serta
jaringan internal lainnya melalui pemanasan
untuk menghilangkan kandungan airnya[12].
Ekstraksi dengan menggunakan pelarut
pada prinsipnya adalah melarutkan minyak
dalam bahan ke dalam pelarut organik yang
sesuai/selektif. Mekanisme yang terjadi pada
proses leaching adalah sebagai berikut:
 Perpindahan pelarut ke permukaan padatan;
 Pelarutberdifusi kedalam padatan;
 Solut larut ke dalam pelarut pelarut;
 Solut berdifusi melalui campuran pelarut
dan zat padat ke permukaan partikel;
 Perpindahan solut ke larutan bulk[11].
Waktu ekstraksi harus cukup agar pelarut dapat
melarutkan solut sampai mencapai
kesetimbangan[8].
Pada ekstraksi biji-bijian, efisiensi proses
leaching tergantung pada kontak antara pelarut
dan padatan yamg mengandung solut yang akan
dipisahkan. Kecepatan leaching menunjukkan
besarnya laju perpindahan solut dari satu fase ke
fase lain. Kecepatan leaching tergantung
pada[8]:
 Ukuran partikel
Kecepatan transfer massa berbanding lurus
dengan luas permukaan partikel partikel.
Oleh karena itu semakin kecil ukuran
partikel menyebabkan luas permukaan
partikel semakin besar, sehingga pelarut
yang berdifusi bertambah banyak;
 Jenis pelarut
Pelarut yang dipilih harus selektif untuk
pemisahan solut yang bersangkutan dan
viskositasnya rendah supaya lebih mudah
tersirkulasi;
 Suhu
Koefisien difusi dalam partikel akan naik
dengan kenaikan suhu, sehingga kecepatan
leaching bertambah;
123
 Food Research International 140 (2021) 109880

Contents lists available at ScienceDirect

Food Research International

journal homepage: www.elsevier.com/locate/foodres

Revealing the anti-melanoma mechanism of n-BuOH fraction from the red

kidney bean coat extract based on network pharmacology and
transcriptomic approach
Jiahui Nie a, b, Xuemei Qin a, Zhenyu Li a, *
a
Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, Shanxi University, No.92, Wucheng Road, Taiyuan 030006, Shanxi, People’s Republic of China
b
College of Chemistry and Chemical Engineering, Shanxi University, No.92, Wucheng Road, Taiyuan 030006, Shanxi, People’s Republic of China

A R T I C L E I N F O A B S T R A C T

Keywords: Red kidney bean coat (RKBC) extract contains bioactive compounds that are known to exhibit anti-melanoma
Red kidney bean coat activity in vitro. However, knowledge on antitumor component and mechanism of RKBC extract has not been
Mechanism fully clarified. Here, RKBC extract was portioned with different solvent sequentially, and based on the cell
Melanoma
viability assay, cell migration assay, AO/EB and Hoechst 33342 staining assay, and Annexin V-FITC/PI double
Apoptosis
Vacuolization
staining, n-BuOH (BU) fraction was identified as the most potent antitumor fraction. It exhibited potential anti-
Transcriptome melanoma activity via the induction of apoptosis and vacuolization in B16-F10 cells. Transcriptomic and
bioprocess-target network analysis revealed that BU fraction triggered apoptosis and vacuolization through
regulating PI3K-AKT-FOXO, MDM2-p53 pathway and increasing the expression of Bcl-xl. In addition, quercetin
might be served as one of the key anti-melanoma compounds in BU fraction through the similar mechanism.
Although the anti-melanoma activity and mechanism of BU fraction have not been elucidated completely, this
study effectively expands our understanding for the anti-melanoma activity of RKBC extract and provided the
basis for the further functional food research and development using red kidney bean, as well as a new possibility
for treating melanoma.

1. Introduction individuals (Kumar et al., 2013a, 2013b). Based on these previous

Red kidney bean (Phaseolus vulgaris L.), named for its visual resem­
blance in color and shape to the human kidney, is widely cultivated in
the world (Kumar et al., 2014). Red kidney bean is rich in proteins,
resistant starch, vitamins and trace metal elements. Moreover, it con­
tains numerous bioactive substances, which provide the great healthy
function to the human beings at low cost. However, the underlying
bioactive compounds and functional mechanisms of red kidney bean are
complicated, thus, systematic investigations are needed.
Recently, several studies have been carried out to mine the active
ingredients of red kidney beans. Triacylglycerols (TAGs), obtained from
the hexane extract of red kidney beans, were reported to exhibit anti­
diabetic activity via the inhibition of α-glucosidase (Sutedja et al.,
2020). The phenolic extracts of red kidney beans showed antioxidant
and anti-inflammatory activity in the macrophage cells (Garcia-Lafuente
et al., 2014). However, the proteins and phytohemagglutinins of red
kidney bean have been reported to trigger allergic reactions in some of
findings, the different components of red kidney beans seem to give rise
to apparently distinct biological function involved in health benefits or
toxic response. Therefore, continuous efforts are required to further
investigate the bioactive substances in the red kidney beans.
Melanoma is a frequently diagnosed skin cancer and is a neoplasm of
melanocytes, which is considered a serious health problem due to <5%
of 5 years survival rate. Malignant melanoma can develop in any tissue
involving melanocytes including the skin, eye, and mucosal epithelium
of the internal ear (Gokce et al., 2016). Thus, there is a growing demand
in drugs which show prospect to inhibit the melanoma. B16-F10 is a
murine melanoma cell line from a C57BL/6J mouse, and frequently used
as a cellular model to study anti-melanoma activity (Zhang et al., 2015;
Gokce et al., 2016; Kwak et al., 2017). Our previous study demonstrated
that, red kidney bean coat (RKBC) extract exhibited potential anti-
melanoma activity through various ways, including promoting
apoptosis and vacuolization, disrupting cell cycle distribution and cell
migration (Nie et al., 2019). The seed coat of red kidney beans is red,

* Corresponding author at: Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine of Shanxi University, No. 92 WuCheng Road, Taiyuan 030006, P. R. China.
E-mail address: lizhenyu@sxu.edu.cn (Z. Li).

https://doi.org/10.1016/j.foodres.2020.109880
Received 10 May 2020; Received in revised form 2 November 2020; Accepted 2 November 2020
Available online 10 November 2020
0963-9969/© 2020 Elsevier Ltd. All rights reserved.
 Food Research International 144 (2021) 110357

Contents lists available at ScienceDirect

Food Research International

journal homepage: www.elsevier.com/locate/foodres

Extraction of water-soluble polysaccharides from kidney beans and

examination of their protein dispersion and stabilization properties under
acidic conditions
Akihiro Nakamura a, b, *, Hitomi Ohboshi a, Madoka Sakai a, Kei Nomura a, Setsuko Nishiyama c,
Hiroko Ashida c
a
College of Agriculture, Ibaraki University, Chuo 3-21-1, Ami-machi, Inashiki-gun, Ibaraki 300-0393, Japan
b
United Graduate School of Agricultural Science, Tokyo University of Agriculture and Technology, 3-5-8 Fuchu, Tokyo 183-8509, Japan
c
Fuji Oil Holdings Inc., Tsukuba R&D Center, 4-3 Kinunodai, Tsukubamirai, Ibaraki 300-2497, Japan

A R T I C L E I N F O A B S T R A C T

Keywords: The extraction conditions of kidney bean water-soluble polysaccharides (SKPSs) from kidney bean fibers were
Kidney bean examined. The factors such as temperature, pH, and time were combined to derive the conditions for obtaining
Polysaccharide high yields of high molecular mass polysaccharides. The optimal extraction temperature, time, and pH were
Protein
120 ◦ C, 30 min, and 9, respectively. Under these conditions, the yield of SKPS (SKPS9) obtained was as high as
Beverage
26.4%. The weight average molecular mass of SKPS9 measured using size exclusion chromatography equipped
Stabilization
with a multi-angle laser light scattering detector was 2,530 kg/mole. The main constituent sugars of SKPS9 were
arabinose (67.2%) and galacturonic acid (15.6%). SKPS9 carbohydrate molecules observed using a scanning
probe microscope showed the mixed structures of a multi-branched structure, whose sugar chains extended
outward from the center to the periphery of the molecule, and a little-branched straight chain structure. SKPS9
had protein dispersing and stabilizing properties under acidic conditions. In the acidified milk system containing
3% non-fat milk solids, 0.4% SKPS9 was able to maintain a mono-modal distribution of fine protein particles in
pH level ranging from 3.8 to 4.4. This work suggests the potential for the creation of a value added ingredient
from kidney bean.

1. Introduction
The plant resources are considered to have less impact on the envi­
ronment as they grow by efficiently utilizing the water on the earth, and
the plants themselves fix carbon dioxide and generate oxygen (Kai et al.,
2019; Milledge, Thomson, Sauvetrem, Schroeder, & Harvey, 2019; Suni
et al., 2015). In addition to this background, the advanced use of plant
resources such as food and food resources is an extremely important
research subject in dealing with food shortages associated with the
growth of the world population. Legumes are attracting attention as food
resources as they have a good balance of nutritional components, such as
lipids, proteins, and carbohydrates. Among legumes, kidney beans
(Phaseolus vulgaris), originated in Central and South America, are
considered to be important food legumes because of their high content
of proteins (20%–25%) and carbohydrates (50%–60%), a good source of
vitamins and minerals such as iron, copper, Vitamin K1 (Rehman,
Salariya, & Zafar, 2001), and their appreciable amount of dietary fiber
(15%–35%) (Shi, Xue, Kakuda, Ilic, & Kim, 2007). The major carbohy­
drate in kidney beans is starch accounting for 25%–45% (Yoshida et al.,
2003). Starch has been used as food ingredients such as sauces, soups,
confectioneries, sugar syrups, ice creams, snack foods, noodles, meat
products, and fat alternatives (Copeland, Blazek, Salman, & Tang,
2009). As the production of starch and protein fractions as food in­
gredients increases, so is the creation of the fiber by-product. Therefore,
it is important to research means to improve the utilization of kidney
bean fiber to improve the circularity of entire kidney bean value chain.
Dietary fiber is basically composed of insoluble dietary fiber (IDF)
containing cellulose as a main component and water-soluble dietary
fiber (SDF) such as hemicellulose and pectin. Furuta et al. investigated
the extraction condition to obtain SDF (water-soluble soybean poly­
saccharide; SSPS) in high yield from soybean fiber and found that SSPS
could solubilize in hot water by heating at 120 ◦ C at pH 5 for 1.5 h

* Corresponding author at: College of Agriculture, Ibaraki University, Chuo 3-21-1, Ami-machi, Inashiki-gun, Ibaraki 300-0393, Japan.
E-mail address: akihiro.nakamura.daru@vc.ibaraki.ac.jp (A. Nakamura).

https://doi.org/10.1016/j.foodres.2021.110357
Received 30 November 2020; Received in revised form 12 March 2021; Accepted 26 March 2021
Available online 8 April 2021
0963-9969/© 2021 Elsevier Ltd. All rights reserved.
 ARTICLE IN PRESS
Acta. Chim. Asiana., 2018, 1 (1), 11 – 16 11

Utilization of Edamame (Glycine max (L.) Merr) And Red Bean (Phaseolus vulgaris) As A
Functional Beverage

Melanie Cornelia, Soraya Triesly Lessy

Department of Food Technology, Faculty of Science and Technology, Pelita Harapan University, UPH Tower, B
Building, Karawaci, Tangerang 15811 Indonesia
*Corresponding author. Email Addresses: melanie.cornelia@uph.edu

Received August 18, 2017; Accepted December 9, 2017

ABSTRACT

Indonesia had the big potency to produce red beans and edamame beans, but its utilization regarding functional food was
not optimal. This research was intended for development combining red and edamame beans to become a new functional
o
beverage product. The ratio of edamame milk to red bean milk (100:0, 75:25, and 50:50) and cooking temperature 90 C
has been selected based on SNI soymilk. During storage, a phase separation happened. Consequently, stabilizer should
be added to improve its stability. Three types of stabilizers were used,CMC 0.1 %, 0.2%, and 0.3 %, xanthan gum (XG),
o
and guar gum (GG) 0.025 %, 0.05 %, and 0.1 %, respectively. The best formulation was milk ratio 75:25 with 90 C and
addition of XG 0.05 %. The dietary fiber analysis for milk formulation was 4.46 % therefore it was categorized as a
functional beverage.

Keywords: dietary fiber, edamame, red bean, functional beverage, xanthan gum.

ABSTRAK

Produksi kacang merah dan kedelai Indonesia sangat potensial, namun pemanfaatannya sebagai pangan fungsional
masih kurang. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan kacang merah dan kedelai sebagai produk baru makanan
kemasan. Perbandingan antara susu kacang merah dan kedelai (100:0, 75:25, and 50:50) dan temperatur pemanasan 90
o
C telah dipilih berdasarkan SNI. Selama proses penyimpanan terjadi fasa pemisahan sehingga senyawa penstabil perlu
ditambahkan. Tiga tipe stabilizer yang digunakan adalah CMC 0.1 %, 0.2%, dan 0.3 %, xanthan gum (XG), dan guar gum
o
(GG) 0.025 %, 0.05 %, and 0.1 %. Formulasi susu terbaik diperoleh dengan perbandingan 75:25 pada suhu 90 C dan
penambahan XG 0.05 %. Analisis serat makanan formula susu menunjukkan 4,46 % sehingga dapat dikateogikan
sebagai pangan fungsional.

Kata kunci: serat makanan, kedelai, kacang merah, pangan fungsional, xanthan gum.

INTRODUCTION
Edamame beans (Glycine max L. Merr) and red beans
(Phaseolus vulgaris) were high in protein and food fiber.
Edamame beans contain high protein 10.0-10.9 grams or
equivalent to 22 % daily intake and food fiber contained
as much as 5.2-6.82 grams in 100 grams [1,2], which
meet the requirements of high-protein foods (foods with
protein exceeding 20 % of daily energy value) and
sources of dietary fiber (foods that exceed 3 grams per
100 grams). In addition, edamame nuts were also
contained many vitamins and minerals, such as iron,
calcium, potassium, phosphorus, magnesium, folate,
vitamins A, B1, B2, B3, C, E, and K [3]. Edamame in
Indonesia located in soybean barn, Jember (East Java)
were 42 % of national soybean production. People
consume 100 grams of legumes provide 20 % protein and
10 % dietary fiber per day [4]. Nowadays, red beans were
processed to be soup, and complement dessert, but
people tend not to consume red beans because of its
unpleasant smell. In addition, protein content of edamame
is higher than red bean. Therefore, this research studies
the possibility for functional food development by
combining red beans and edamame beans to create a
new functional beverage product. Soymilk was a water
extract of soybean, with or without permitted additive.
However, during storage, a phase separation occurred,
consequently, the stabilizer was often added to improve
its stability. In this research, the ratio of edamame milk to
red bean milk and cooking temperature with addition of
stabilizer has been observed.

DOI 10.29303/aca.v1i1.4 Melanie Cornelia et al

 ARTICLE IN PRESS
Acta. Chim. Asiana., 2018, 1 (1), 11 – 16 12

MATERIALS AND METHODS

The raw materials were used edamame bean, red

(2.9289±0.46921)d

(2.5367±0.41119)c

(2.4533±0.55705)b
bean, and drinking water. Chemical were used such as

(1.8911±0.16937)ab
H2 SO4, K2SO4, NaOH 50 % (w/v), NaOH 4N, boric acid,
H2O2, HCl 0,2N and hexane.The equipments were used
analytical balances, blender, stove, stainless steel pan,

(1.2456±0.17952)a
3.50
desiccator, thermometer, furnace, soxhlet apparatus, 3.00
viscometer, pH meter, and equipment for protein analysis

Protein Content(%)
2.50
(Kjeldahl).
2.00
Research Stages 1.50
This research was divided into two stages. Stage
1.00
1 began with the production of edamame milk (Fig. 1) and
red bean milk (Fig.2). Research stage 1 was aimed to 0.50
select three ratio of edamame milk (EM): red bean milk 0.00
(RBM) and one optimum cooking temperature that refer to 100:0 75:25 50:50 25:75 0:100
Ratio EM:RBM
soymilk quality standard (SNI 01-3830-1995) [5]. The
production of red bean milk based on modified procedure Figure 3. Ratio of EM : RBM versus protein content
from Sharma et al., [6], whereas the production Edamame

(2.5160±0.86522)b
Milk applied the modified procedure by Onourah et al., [7]

(2.1593±0.57996)a
dan Angraini & Yunianta [8.]

(1.9580±0.52981)a
Research stage 2 was done to determine the
most effective stabilizer to improve the stability of 3.50
Protein Content (%)

edamame and red bean milk functional beverage. Three 3.00

types of stabilizers (CMC, xanthan gum (XG), and guar 2.50
gum (GG)) were used independently to each ratio
2.00
selected. CMC were added by 0.1 %, 0.2 %, and 0.3 %,
while XG and GG 0.025 %, 0.05 %, and 0.1 %. These 1.50
selected formulations were analyzed for hedonic test and 1.00
dietary fiber. The beverage with the most preferred
0.50
formula was selected for proximate analysis and
observation of the shelf-life. Proximate Analysis of Raw 0.00
Material was depicted in Table 1 and Table 2. 70 80 90
Cooking temperature (oC)
Table 1. Proximate analysis of edamame bean Figure 4. Cooking temperature versus protein content.
Fresh Different superscript notation letter shows significant
Edamame Bean
Parameter Edamame difference (p<0.05)
[2]
Bean
Water (%) 71.35 65.68 ± 1.55 RESULT AND DISCUSSION
Protein(%) 12.95 11.80 ± 1.24
Fat(%) 5.20 3.53 ± 0.48 Effect of Ratio Edamame Milk (EM) to Red Bean Milk
(RBM) and Cooking Temperature toward protein
Ash(%) 1.27 1.80 ± 0.19 content
Carbohydrate(%) 10.50 17.20 ± 2.53 The result of statistical analysis showed that there
was a significant different (p < 0.05) on ratio EM to RBM
Table 2. Proximate analysis of red bean and cooking temperature towards protein content.
Red Bean Fresh Red However, there was not a significant different on
Parameter interaction between ratio EM to RBM and cooking
[2] Bean
Water (%) 66.94 56.61 ± 0.69 temperature.
8.67 The higher protein content obtained from 100 %
Protein(%) 10.15 ± 0.80
EM. This was due to the protein content of edamame
Fat(%) 0.50 1.93 ± 0.48 bean (11.80 %) was higher than red bean (10.15 %). Fig
Ash(%) 1.09 1.99 ± 0.24 4 showed that higher cooking temperature gave the
22.80 o
Carbohydrate(%) 29.33 ± 1.67 higher protein content. Cooking 90 C obtained the

DOI 10.29303/aca.v1i1.4 Melanie Cornelia et al

 ARTICLE IN PRESS
Acta. Chim. Asiana., 2018, 1 (1), 11 – 16 14

Effect Ratio Edamame Milk to Red Bean Milk and gave a significant effect toward the color preference of
Cooking Temperature to Viscosity of Edamame and the functional beverage. Based on the result obtained,
Red Bean Milk the beverage with ratio EM : RBM of 75:25 with XG
The statistical analysis result showed that the addition by 0.05% is determined as the most preferred
ratio EM to RBM and cooking temperature gave a formulation. The selection is also based on the objective
significant effect (p<0.05). There was a significant to utilization red bean regarding processed food or
difference on cooking temperature towards viscosity, functional food as an innovation in functional food
o
shown in Fig 9. The cooking temperature at 70 C development.
(67.120±6.3803) gives higher viscosity compared to
o
90 C (61.033±7.9289). This result was in accordance to Determination of the Preferred Formulation of
Shurtleff and Aoyagi [1] in which stated that if the Functional Beverage
cooking temperature increase, could decrease the Determination of the best formulation of
viscosity. functional beverage based on several parameters:
protein, dietary fiber, pH, total solids, and hedonic test.
Determination of Type and Concentration of From the research, the best formulation was ratio EM to
o
Stabilizer towards Stability of Edamame and Red RBM of 75:25 with 90 C as optimum cooking
Bean Milk temperature and XG added by 0.05 %. This formulation
Three types of stabilizers CMC, xanthan gum contain 4.46 % dietary fiber and is categorized as
(XG), and guar gum (GG)) were used independently to “source of dietary fiber” since the dietary fiber was more
three selected formulations from research stage 1. CMC then 3 % and adequate daily intake to 17.84 %.
were added by 0.1%, 0.2%, and 0.3%, while XG and GG According to CAC [10], “source of dietary fiber”
were added by 0.025%, 0.05%, and 0.1%. Finally, XG category means 3 grams per 100 ml and 10-19 % of
was selected to be used in formulation with different ratio daily intake. Table 8 showed the ratio between the EM
of edamame milk and red bean milk. Those are 100: 0, and RBM functional beverage in the research with the
75:25, and 50:50 with XG addition by 0.025% , 0.05%, soy milk quality standard (SNI 01-3830-1995). The
and 0.1%. XG provided good solubility over the purpose of these comparisons is to determine the RBM
temperature range freezing to near boiling with excellent and EM functional drink made whether compliance with
thermal stability [6]. This statement supported the the standards. The results of all formulations meet the
o
production of the beverage at 90 C as an optimum soy milk quality standard (SNI 01-3830-1995) on the
cooking temperature. total solids, protein content, and pH. The further analysis
for the preferred formulation is proximate analysis,
Determination of the Most Preferred Formulation by including water, protein, ash, fat, and carbohydrate
Hedonic Test content. The result of proximate analysis in Table 9
The beverages that had already stable were shows the results of the best proximate analysis
subjected to hedonic test. There are 5 different formulations. Protein levels and fat in the most preferred
parameters including color, aroma, taste, mouthfeel, and functional beverage in accordance with the soy milk
overall acceptance. 80 panelist were given by three quality requirements (SNI 01-3830-1995) stating that the
formulations with optimum stability. Those are EM:RBM minimum protein content 2 % and minimum fat content 1
100: 0; 75:25; and 50:50 with XG 0.025%, 0.05%, and % [5].
0.1%. According to the result, the different formulations
(65.456±4.1977)b

(67.120±6.3803)b

(63.160±7.2246)ab

(61.033±7.9289)a
(66.6890±5.5293)b

(67.9440±7.8056)b
(61.567±4.1869)ab

(57.200±9.7633)a

80
80 70
Viscosity (cps)

70 60
Viscosity (cps)

60 50
50 40
40
30 30
20 20
10 10
0 0
100:0
75:25 50:50 25:75 0:100 70 Cooking Temperature
80
Ratio EM:RBM (oC) 90
Figure 8. Ratio EM:RBM towards Viscosity (cps) Figure 9. Cooking Temp. towards Viscosity (cps)

DOI 10.29303/aca.v1i1.4 Melanie Cornelia et al

ISSN: 2302-0733 Jurnal Teknosains Pangan Vol 2 No 1 Januari 2013

Avaliable online at
www.ilmupangan.fp.uns.ac.id

Jurusan Teknologi Hasil Pertanian

Universitas Sebelas Maret

Jurnal Teknosains Pangan Vol 2 No 1 Januari 2013

KARAKTERISASI SIFAT FISIK DAN KIMIA TEPUNG KACANG MERAH

(Phaseolus vulgaris L.) DENGAN BEBERAPA PERLAKUAN PENDAHULUAN
PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES CHARACTERIZATION OF RED KIDNEY BEAN
(Phaseolus vulgaris L.) FLOUR BY SOME PROCESSING TREATMENT
Hesti Ayuningtyas Pangastuti*), Dian Rachmawanti Affandi*), Dwi Ishartani*)
*)
Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan Universitas Sebelas Maret Surakarta

Received 20 September 2012 accepted 7 November 2012 ; published online 2 January 2013

ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah mempelajari pengaruh kombinasi perlakuan terhadap sifat kimia, fisik, dan fungsional pada
tepung kacang merah. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap dengan taraf faktor tanpa perlakuan pendahuluan dengan
kulit (F1), perendaman 24 jam dengan kulit (F2), perebusan 90 menit dengan kulit (F3), tanpa perlakuan pendahuluan tanpa kulit
(F4), perendaman 24 jam tanpa kulit (F5), dan perebusan 90 menit tanpa kulit (F6). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi
perlakuan dapat mempengaruhi sifat kimia, fisik, dan fungsional pada tepung kacang merah secara signifikan (p<0,05). Dilihat dari
sifat kimia, perendaman 24 jam dan perebusan 90 menit baik dengan kulit maupun tanpa kulit meningkatkan kadar air, namun dapat
menurunkan kadar abu, protein, lemak, dan asam fitat dibandingkan dengan tepung tanpa perlakuan pendahuluan, sedangkan
pengupasan kulit dengan berbagai perlakuan pendahuluan meningkatkan kadar asam fitat, namun menurunkan kadar air dan lemak
pada tepung kacang merah. Dilihat dari sifat fisik, tepung kacang merah pada perendaman 24 jam dan perebusan 90 menit baik
dengan kulit maupun tanpa kulit meningkatkan densitas kamba, densitas padat, dan kelarutan, namun menurunkan kecerahan,
derajat putih, dan waktu basah, sedangkan pengupasan meningkatkan kecerahan, derajat putih, dan waktu basah, namun
menurunkan densitas kamba dan padat dengan berbagai perlakuan pendahuluan. Perebusan 90 menit tanpa kulit menurunkan serat
pangan tidak larut, serat pangan larut, dan total serat pangan tepung kacang merah.

Kata kunci: pengupasan, perebusan, perendaman, sifat fisik, sifat kimia, tepung kacang merah

ABSTRACT
The purpose of this research is to study the effect of some combination processing treatment on chemical, physical, and
functional properties of red kidney bean flour. This research using completely randomized design (CRD). Those factor level are
without pre-treatment and whole (F1), 24 hour-soaking and whole (F2), 90 minute-boiling and whole (F3), without pre-treatment
and dehulling (F4), 24 hour-soaking and dehulling (F5), and 90-minute boiling and dehulling (F6). The result showed that the
combination processing treatment affect the chemical, physical, and functional properties of red kidney bean flour significantly
(p<0,05). Based on the chemical properties, 24 hour-soaking and 90 minute-boiling treatment in all pre-dehulling treatment
increased the moisture content, but decreased the ash, protein, fat, and phytate acid content compared with raw flour while
dehulling treatment with all various pre-treatment increased the phytate acid, but reduced moisture and fat content of red kidney
bean. Based on physical properties, 24 hour-soaking and 90 minute-boiling treatment with all various pre-dehulling treatment
increased the bulk density, compacted density and solubility, but reduced lightness, whiteness, and wettability, while dehulling
treatment with all various pre-treatment increased the lightness, whiteness, wettability, but reduced bulk density and compacted
density of red kidney bean flour. Combination of 90 minute-boiling and dehulling reduced Insoluble Dietary Fiber, Soluble Dietary
Fiber, and Total Dietary Fiber on red kidney bean flour.
Keywords: boiling, chemical composition, dehulling, kidney bean flour, physical composition, red soaking.

20
ISSN: 2302-0733
pada asparagus bean juga menunjukkan penurunan
kadar abu pada saat perebusan dari 3,71 menjadi
2,92%. Adanya penurunan yang signifikan ini dapat
terjadi karena larutnya mineral ke dalam media
perendaman yang dipercepat dengan adanya
pemanasan. Adanya pengupasan kulit tidak terlalu
berpengaruh secara signifikan terhadap kadar abu
pada tepung kacang merah dengan kulit maupun
tanpa kulit. Semakin rendah kadar abu pada produk
tepung akan semakin baik, karena kadar abu akan
mempengaruhi tingkat kestabilan adonan tepung
(Bogasari, 2006).
Kadar lemak yang terlampau tinggi selain
menjadi pertimbangan pada faktor gizi, juga dinilai
kurang menguntungkan dalam proses penyimpanan
tepung karena dapat menyebabkan ketengikan
(Ambarsari dkk, 2009). Adanya perlakuan
pendahuluan berupa perendaman dan perebusan
dapat menurunkan kadar lemak secara signifikan.
Berdasarkan penelitian lain, diketahui bahwa
penurunan lemak pada perendaman terjadi pada moth
bean (Mankotia dan Modgil, 2003), sedangkan pada
perebusan terjadi pada kacang hijau (Mubarak, 2005)
dan kacang gude (Iorgyer et al., 2009). Adanya
perendaman dapat mengaktifkan aktivitas enzim
lipase yang dapat menghasilkan beberapa asam
lemak bebas rantai pendek yang mudah larut ke
dalam air pada media perendaman. Melalui hasil
penelitian, diketahui bahwa pada perlakuan
perebusan 90 menit dan tanpa perlakuan pendahuluan
terdapat beda nyata antara tepung dengan kulit dan
tanpa kulit. Dengan mengacu pada penelitian-
penelitian sebelumnya, diketahui bahwa pengupasan
kulit dapat menurunkan kadar lemak dari 5,49%
menjadi 5,03% pada koro pedang (Wanjekeche et al.,
2010).
Tepung dengan perlakuan pendahuluan berupa
perendaman dapat menurunkan kadar protein
walaupun tidak signifikan terhadap tepung tanpa
perlakuan pendahuluan. Hasil tersebut serupa dengan
penelitian Ertas (2011) yang menyebutkan bahwa
perendaman dapat menurunkan kadar protein.
Dibandingkan dengan perendaman, perlakuan
pendahuluan berupa perebusan 90 menit diketahui
lebih banyak menurunkan kandungan protein pada
tepung kacang merah baik dengan kulit maupun
dengan kulit. Hasil ini serupa dengan penelitian
Iorgyer et al. (2009) yang menunjukkan penurunan
10% kadar protein pada saat perebusan 60 menit pada
kacang gude. Penurunan kandungan protein tersebut
23
Jurnal Teknosains Pangan Vol 2 No 1 Januari 2013
disebabkan karena difusi substansi nitrogen yang
larut ke dalam air rendaman dan air rebusan.
Pengupasan kulit tidak berpengaruh signifikan
terhadap kadar protein pada tepung kacang merah
pada berbagai perlakuan pendahuluan.
Peningkatan kadar karbohidrat terjadi pada
perlakuan perendaman 24 jam dan perebusan 90
menit baik pada kacang merah dengan kulit maupun
tanpa kulit. Perlakuan pengupasan kulit tidak
berpengaruh signifikan pada tepung tanpa perlakuan
pendahuluan dan tepung dengan perendaman 24 jam,
namun berpengaruh signifikan pada tepung dengan
perebusan 90 menit.
Tabel 2 Kadar Asam Fitat Tepung Kacang Merah
dengan Kulit dan Tanpa Kulit pada
Berbagai Variasi Perlakuan Pendahuluan
Jenis Perlakuan Perlakuan Kadar Asam
Pendahuluan Pengupasan Fitat (mg/g bk)
Tanpa perlakuan Dengan kulit 18,78e ± 0,21
pendahuluan Tanpa kulit 29,93f ± 0,13
Perendaman 24 Dengan kulit 11,76c ± 0,19
jam Tanpa kulit 17,51d ± 0,58
Perebusan 90 Dengan kulit 3,59a ± 0,11
menit Tanpa kulit 9,61b ± 0,16
Keterangan :
*Angka merupakan rata-rata ± standar deviasi
*Huruf notasi yang berbeda menunjukkan adanya beda nyata
pada taraf signifikansi (α) 5%
Adanya perlakuan pendahuluan berupa
perendaman 24 jam dan perebusan diketahui dapat
menurunkan kandungan asam fitat yang secara alami
terkandung dalam kacang-kacangan. Adanya
penurunan ini terjadi karena asam fitat pada kacang-
kacangan kering pada umumnya terdapat dalam
bentuk garam larut air yang diduga merupakan
kalium fitat (Crean dan Haisman, 1963 dalam
Khattab dan Arntfield, 2009). Berdasarkan hasil
penelitian, tepung dengan perlakuan perebusan 90
menit memiliki kandungan asam fitat yang terendah.
Adanya reduksi ini dapat disebabkan karena ion-ion
fitat yang melepaskan diri ke dalam media
pemasakan, degradasi yang terjadi akibat panas, atau
terbentuknya kompleks tidak larut antara fitat dan
komponen lain, misalnya protein dan mineral. Kadar
asam fitat meningkat dengan adanya pengupasan
kulit. Asam fitat terakumulasi pada kotiledon kacang-
kacangan sebagai salah satu penyusun protein (Ejigui
et al., 2005).
 LWT - Food Science and Technology 103 (2019) 34–43

Contents lists available at ScienceDirect

LWT - Food Science and Technology

journal homepage: www.elsevier.com/locate/lwt

Multi-response optimization of oil extraction from pine nut (Pinus pinea L.) T
by response surface methodology: Extraction efficiency, physicochemical
properties and antioxidant activity
Tansel Kemerli-Kalbaran, Murat Ozdemir∗
Department of Chemical Engineering, Gebze Technical University, 41400, Gebze, Kocaeli, Turkey

A R T I C LE I N FO A B S T R A C T

Keywords: Effects of solvent extraction conditions on the extraction efficiency, physicochemical properties and antioxidant
Solvent extraction activity of pine nut oil were investigated and optimized by using three level Box-Behnken design (BBD).
Box-Behnken design Temperature (25–65 °C), time (10–60 min) and solvent/sample (S/S) ratio (5–20 mL g−1) were chosen as the
Tree nut oil independent variables while the dependent variables were extraction efficiency, yellowness index (YI), peroxide
Extraction efficiency
value (PV), p-anisidine value (p-AnV), totox value (TV), DPPH-hydrophilic fraction (DPPH-HF), DPPH-lipophilic
Oil quality
fraction (DPPH-LF) and DPPH-oil to obtain pine nut oil with high oil yield, and desirable physicochemical
properties and antioxidant activity. N-hexane was found to be the most effective solvent for the extraction.
Extraction efficiency, physicochemical properties and antioxidant activity of pine nut oil were highly affected by
temperature, time and S/S ratio. Desirability function approach was used to determine optimum conditions. The
optimum conditions for the production of pine nut oil with solvent extraction were attained at the extraction
temperature of 39.3 °C, extraction time of 33.4 min and S/S ratio of 10.8:1 (mL g−1). At optimum conditions, the
predicted values for the extraction efficiency, YI, PV, p-AnV, TV, DPPH-HF, DPPH-LF and DPPH-oil yielded
80.03%, 59.89, 1.05 meq peroxide kg−1 oil, 0.92, 3.02, 8.60%, 65.07% and 73.35%, respectively.

1. Introduction composition of pine nuts depends on variety, geographical region and

In recent years, consumers have been demanding more about con-
suming healthy and nutrient foods to prevent their health and wellness
(Martínez et al., 2012). Epidemiological and scientific studies have
shown a remarkable relationship between diet and disease (Chen,
Zhang, Gu, & Yang, 2016). Tree nuts and their oil contain several
bioactive and health promoting constituents such as unsaturated fatty
acids, phytosterols, tocols, antioxidants etc. that help prevent cardio-
vascular diseases, other chronic diseases including type-2 diabetes,
cancer, high blood pressure, Alzheimer and neurodegenerative diseases
(Alasalvar & Shahidi, 2008; Chen et al., 2016; Rosales-Martínez,
Arellano-Cárdenas, Dorantes-Álvarez, García-Ochoa, & López-Cortez,
2014). Recently, scientists have suggested that tree nut oil consumption
is a healthier choice than consuming of whole tree nuts because tree nut
oils supply unsaturated lipids and/or other oil soluble components in-
stead of dietary carbohydrates (Miraliakbari & Shahidi, 2008).
Stone pine nut (Pinus pinea L.) is one of the most important tree nuts
widely planted throughout the Mediterranean region especially in
Spain, Portugal, Italy, Greece, Tunisia and Turkey. The chemical
climatic factors (Evaristo, Batista, Correia, Correia, & Costa, 2010;
Nergiz & Dönmez, 2004). The demand of pine nuts and pine nut oils has
been growing in the worldwide market due to their rich fatty acid
composition. The most abundant fatty acid in pine nut is linoleic acid
which is one of the polyunsaturated fatty acids (PUFA) representing
47.6% of the total fatty acid content, and the second most abundant
fatty acid is oleic acid (38.6%) which is one of the monounsaturated
fatty acids (MUFA) (Nergiz & Dönmez, 2004). High amount of PUFA
makes pine nut having much more salutary effect in regard to most
nuts. Pine nuts are consumed as nutrient and flavoring ingredient in
traditional dishes such as Italian pesto sauce and Turkish halva whereas
pine nut oil is used as gourmet oil in salads due to its unique sensory
characteristics. Besides culinary usage, pine nut oil is used in cosmetic
and beauty sectors to reduce skin diseases, baldness, and fragility of
nails and hair (Evaristo et al., 2010; Wang et al., 2011).
Conventionally, mechanical extraction and solvent extraction have
been used for extracting oil from oleaginous seeds in commercial pro-
duction. Mechanical extraction yields high quality oil, but less oil is
extracted when compared with the solvent extraction (Pradhan, Meda,

∗
Corresponding author.
E-mail address: ozdemirm@gtu.edu.tr (M. Ozdemir).

https://doi.org/10.1016/j.lwt.2018.12.067
Received 11 June 2018; Received in revised form 24 December 2018; Accepted 26 December 2018
Available online 27 December 2018
0023-6438/ © 2018 Elsevier Ltd. All rights reserved.
T. Kemerli-Kalbaran, M. Ozdemir LWT - Food Science and Technology 103 (2019) 34–43

Table 4
Regression coefficient of the second-degree polynomials for response parameters for solvent extracted pine nut oil under different extraction conditions of tem-
perature, time and solvent/sample ratio.
Coefficients Responses

Extraction efficiency YI PV p-AnV TV DPPH-HF DPPH-LF DPPH-oil

β0 83.12 60.63 1.35 1.03 3.73 8.40 63.36 71.32

Linear β1 1.34** 1.66* 0.64*** 0.22*** 1.50*** −0.14 −4.58*** −4.02***
β2 3.80*** 3.03** 0.61*** 0.22*** 1.44*** −0.019 −0.81 0.34
β3 9.61*** −6.50*** 0.66*** 0.21*** 1.53*** −1.37*** −7.54*** −10.40***
Quadratic β11 −0.006 −8.34*** 0.52*** 0.089** 1.14*** −0.053 −5.22*** −2.48***
β22 −0.14 −6.27*** 0.12 0.25*** 0.48** −0.34* −4.04** −4.55***
β33 −5.70*** −6.86*** 0.16* 0.0036 0.33* −1.62*** −7.26*** −11.58***
Interaction β12 0.0068 −8.13*** 0.011 −0.062* −0.040 −0.59** −5.12*** −4.38***
β13 0.039 −4.56** 0.19* 0.099** 0.47** −0.72** −6.46*** −7.86***
β23 0.62 −3.23** 0.39*** 0.076** 0.85*** −0.53** −2.76* −3.44***

Significance level: ***p ≤ 0.001, **p ≤ 0.01 and *p ≤ 0.05.

the value of a t-statistic calculated by dividing the corresponding esti-
mated effect by its standard error. The sign of the bar (corresponding to
yellow (+) or blue (−)) indicates that the factor is an increasing or
decreasing effect on the corresponding response. The regression coef-
ficients of the second-degree polynomial models for all the responses
are presented in Table 4.
3.2.1. Effect of solvent extraction conditions on extraction efficiency and
color
The extraction efficiency of pine nut oil ranged from 65.12 to
90.68% depending on the solvent extraction conditions (Table 2). The
maximum extraction efficiency corresponded to extraction of pine nut
oil at 45 °C for 60 min with S/S ratio of 20:1 mL g−1. The Standardized
Pareto chart (Fig. 2a) revealed that the most significant factor on ex-
traction efficiency was S/S ratio followed by quadratic effect of S/S
ratio, time and temperature in descending order. Accordingly, all the
other factors and their interaction effects were not significant
(p > 0.05) on the extraction efficiency in the studied range. The 3D
surface plots for three independent variables were generated by keeping
the one independent variable at the middle value (Fig. 3a–c). The ex-
traction efficiency increased by increasing the temperature and time
(Fig. 3a). The extraction efficiency increased simultaneously with in-
creasing the S/S ratio and temperature (Fig. 3b) or time (Fig. 3c), but
the effect of S/S ratio on the extraction efficiency was higher than the
effect of temperature and time resulting in increased concavity. In other
words, higher S/S ratios resulted in the development of greater con-
centration gradient in diffusion. More pronounced effect of higher S/S
ratios on extraction efficiency of different nuts and seeds was also re-
ported by Barizão, Boeing, Martins, Visentainer, and Almeida (2015),
Senrayan and Venkatachalam (2018) and Zhang et al. (2009).
Color is an important quality parameter for the extracted oils. As
shown in the Pareto chart (Fig. 2b), YI of pine nut oil was significantly
(p ≤ 0.05) influenced by all the factors, and their quadratic and inter-
action effects. As the extraction temperature and time increased, the YI
increased (Fig. 3d). The interaction of temperature and time had a more
pronounced effect on the YI than the interactions of temperature and
time with the S/S ratio (Fig. 3e and f). The decrease in YI can be ex-
plained with the loss of thermolabile pigments mainly carotenoids ne-
gatively affected by high extraction temperatures, times and solvent
concentrations (Borges et al., 2015).
3.2.2. Effect of solvent extraction conditions on oxidation
Autoxidation is one of the spontaneous processes which causes
oxidation of lipids resulting in rancid taste in oils. Many factors such as
the presence of catalysts, heat, radiation, presence of metal ions and
degree of unsaturation are responsible for lipids to get oxidized. During
the early stages of autoxidation, the primary products namely
hydroperoxides are formed, and the peroxide value (PV) is usually used
as an indicator (an oxidative index) of oxidation at the early stage. PV
value of pine nut oil samples ranged from 0.80 to 3.65 meq peroxide
kg−1 oil depending on the extraction conditions (Table 2). These results
indicated that pine nut oils obtained at all the extraction conditions
were very stable in which oils with PV < 20 are very stable and re-
garded as very good quality (Pike & O'Keefe, 2017). As illustrated in
Fig. 2c, all the linear effects, quadratic effects and interaction effects of
all the factors had a positive effect on PV. The PV of pine nut oil in-
creased with increasing the temperature, time and S/S ratio during the
extraction which caused oxidation of pine nut oil (Fig. 4a–c). The
lowest PV (0.80 meq peroxide kg−1 oil) was obtained at 25 °C for
35 min with S/S ratio of 5:1 mL g−1.
The secondary stage of lipid oxidation occurs when the hydroper-
oxides decompose to form various secondary oxidation products in-
cluding aldehydes, ketones, organic acids and hydrocarbons etc. These
scission products give oils a rancid smell and off odor. The p-anisidine
value (p-AnV) is used as an indicator of secondary oxidation products of
lipid oxidation by measuring aldehydes. Oils with p-AnV less than 10
are regarded as good quality oils (Rossel, 1994; Tadesse, Reta, &
Beyero, 2017). The pine oils obtained under all extraction conditions
can be considered as good quality oils because p-AnV of pine nut oil
samples ranged from 0.80 to 1.78 (Table 2). The lowest p-AnV (0.80)
was obtained at 25 °C for 35 min with S/S ratio of 5:1 mL g−1. All the
terms were important on p-AnV except the quadratic effect of S/S ratio
(Table 3). All the terms had a positive effect on p-AnV except the in-
teraction of temperature and time which has a negative effect on p-AnV
(Fig. 2d). Temperature, time, S/S ratio and quadratic terms of time had
the highest positive effect (p ≤ 0.001) on the p-AnV (Table 4). The p-
AnV of pine nut oil increased with increasing the temperature, time and
S/S ratio during the extraction (Fig. 4d–f).
In the literature, when the oil extraction was carried out at high
temperatures and prolonged times, peroxides tend to decompose to
secondary oxidation products; thus, low peroxide values were observed
(Hernández-Santos et al., 2016; Samaram et al., 2015). In our study,
this was not the case because pine nut oil samples during extraction
were not subjected to excessive conditions of temperature, time and S/S
ratios. Therefore, totox values (TV) were calculated to provide a better
estimation of the progressive oxidative deterioration of extracted pine
nut oil. TV is a measure of the total oxidation including hydroperoxides
and their breakdown products. The TV takes into account the past
history of an oil (using the p-AnV) as well as its present state of the oil
(using PV). Therefore, TV is much more effective index for determining
oxidation than either PV or p-AnV alone. Although there is no official
standard defining a limit for TV to decide the quality of oil, German
society for fat sciences recommended TV should be less than 20 for
refined and virgin vegetable oils (Matthäus, 2010). The TV of pine nut

39
Res. on Crops 14 (4) : 1128-1134 (2013)
Printed in India

Influence of distillation time and fractions on essential oil

content and composition of lavandin (Lavandula ×
intermedia Emeric ex Lois)
NIMET KARA* AND HASAN BAYDAR
Department of Field Crops
Faculty of Agriculture
Suleyman Demirel University, Isparta, Turkey
*(e-mail : nimetkara@sdu.edu.tr)

(Received : June 2013)

ABSTRACT

The present study was conducted with the aim to investigate the effects of nine
distillation times (DT 5, 10, 20, 40, 80, 120, 160, 180 and 240 min) and 11 distillation
fractions (DF 0-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-60, 60-80 and 80-
100 min) on essential oil content and composition of lavandin (Lavandula x intermedia
var. Super A). Essential oil was obtained by hydro distillation method. Composition of
essential oil was identified with GC/MS. Lavandin essential oil content increased with
length of the DT and reached maximum at 180 min (2.00%) DT. Fifty per cent of the total
essential oil was obtained at the initial DT (5 min). Linalool, linalyl acetate, borneol, 1,8
cineole and camphor were determined as the main components in lavandin essential oils.
The concentration of borneol and 1,8 cineole (2.00 and 4.8%, respectively), linalool (53.50%),
camphor (2.00%) and linalyl acetate (41.50%) was high at the 0-5, 5-10, 15-20 and 30-35
min, respectively, and decreased with increasing DT. In these distillation fractions, the
highest essential oil content of lavandin ranged from 1.05, 0.41, 0.21 and 0.067%,
respectively. As a result, distillation time may be shortened to obtain high linalool and
linalyl acetate content. Also, the essential oil which is produced in early minutes, having
camphor at high contents is removed and the oil produced after 20th min having camphor
at lower contents is used especially in perfumery.

Key words : Distillation time, essential oil composition, lavandin

INTRODUCTION linalool, linalyl acetate and camphor content

Lavandula, a precious essential oil
plant, which is cultivated around the world, is
a significant perfume, cosmetic and
pharmaceutical plant because of the high
content and the quality of its essential oil
(Guenther, 1952). Quality of lavender and
lavandin essential oil is measured with linalool
and linalyl acetate and camphor content. While
essential oils of such low camphor content are
used in perfumes and cosmetic industrials,
essential oils which are higher in camphor are
used in insect repellants and other non-
cosmetic products (Cavanagh and Wilkinson,
2002). In addition, the scent of essential oil
deteriorates as the camphor content increases
(Adam, 2006). According to quality standards
of lavender essential oil composition as
determined by the International Organization
for Standardization (Anonymous, 2002),
should be between 25.0-38.0, 25.0-45.0 and
0-0.5%, respectively. Most researchers stated
that the essential oil composition of essential
oil plants varied depending on the genotype of
the plant (Marotti et al., 1989; Munoz-Bertomeu
et al., 2007), agronomic practices (Atalay, 2008),
ecological conditions (Orhan, 2007) growth
stage on the date of collection (Arabaci and
Ceylan, 1990), parts of the plant, drying
conditions and extraction technology (Pinto et
al., 2007) and boiling range (Chemat et al.,
2006). Zheljazkov and Astatkie (2012) stated
that the essential oil composition of these
plants was significant, affected by distillation
time.
Distillation time, pH, temperature and
the distillation device used cause variations in
essential oil compounds and therefore,
hydrolysis of esters may accelerate and
isomerizations, rasemizations, oxidations and
 Composition and essential oil content in lavandin
similar reactions may occur. Long term heat
application during distillation causes variation
in substances with low polarity. Long term
boiling could possibly cause the medium acidic
and sabinene, sabinene hydrate, α-pinene
compounds to be converted into terpinene-4-
ol, terpinene, terpinolene and α-terpineol
(Anonymous, 2012). The time period in which
the especially preferred compounds in a plant’s
essential oil composition tend to increase or
decrease can be determined through distillation
time. Thus, essential oil quality of medicinal
and aromatic plants having an economic
significance can be raised and consequently,
waste of source and energy arising from
unnecessarily long distillation time can be
prevented (Cannon et al., 2013).
This study was conducted to determine
the distillation range in which linalool and
linalyl acetate compounds influencing essential
oil quality of lavandin are present at high
content, while camphor compound is present
at lower content to produce higher quality
essential oil.
MATERIALS AND METHODS
The material used in the study was
fresh stem flowers collected during their
blooming period in 2012 from the ‘Super’
lavandin variety belonging to the species of
Lavandula x intermedia Emeric ex Lois grown
in fields of Suleyman Demirel University’s
Agricultural Research and Application Area.
The experiment was laid out in a randomized
plots design with five replications. One hundred
g fresh stem flower samples in 1.5 l water were
extracted by hydro-distillation using Clevenger
apparatus, according to the standard procedure
described in European Pharmacopoeia for
determining the oil content (v/w%). Fresh stem
flowers of lavandin were distilled with nine
different distillation time periods (5, 10, 20, 40,
80, 120, 160, 180 and 240 min) and 11 different
fraction intervals ( 0-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-
25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-60, 60-80 and 80-
100 min) and essential oil content was
calculated in percentages (w/v) by measuring
the oil amount collected in the measurable
segment. A different distillation was carried out
for each distillation time period to find
distillation time. However, because there was
no increase in essential oil content after 180th
min, the procedure was terminated at the next
1129
distillation time : the 240th min. In the case of
the fractional distillation, all of the specified
distillation times were conducted from the same
sample within intervals of five minutes;
however, the time period was extended because
any essential oil was not collected in the
measurable segment after the 40th min and
the procedures were conducted within time
intervals of 20 min. Because the essential oil
could not be produced after the 100th min,
distillation was terminated. The essential oil
samples were stored at +4 0C until the basic
essential oil compounds were determined.
GC-MS (Gas Chromatography-Mass
Spectrometry) analysis of the oil samples was
performed on QP5050 GC-MS equipped with a
Quadrapole detector. GC/MS analysis was
employed under the following conditions :
capillary column, CP-Wax 52 CB (50 m x 0.32
mm; film thickness=0.25 µm); oven
temperature program (60 0C increased to 2200C
at a rate of 2oC/min and then kept at 2200C
for 10 min); total run time 60 min; injector
temperature, 2400C; detector temperatures,
2500C and carrier gas, helium at a flow rate of
20 ml/min. Identification of constituents was
carried out with the help of retention times of
standard substances by composition of mass
spectra with the data given in the NIST library
(Stein, 1990). After lavandin products were
obtained according to the methods explained
above, they were stored at 40C until GC-MS
analyses. 1 µl of essential oil diluted with n-
hexane was injected into the GC-MS system.
All the data were analyzed with analysis
of variance (ANOVA) using the SAS Statistical
Package Program. Means were compared using
the LSD (Least Significant Difference) test.
RESULTS AND DISCUSSION
Distillation Time
Effect of distillation time on essential
oil content of fresh stem flower was found
statistically significant at a level of P=0.01. The
highest essential oil content of fresh stem flower
was obtained as 2.00% at 180th and 240th
taking place in the same group, while the lowest
one was determined at 5th (1.00%) (Table 1).
Fifty per cent of lavandin essential oils were
obtained in the first 5 min of the distillation
period; this increased by 21% at the 10th min
and the increase in essential oil content
1130 Kara and Baydar

Table 1. Effect of different distillation times on essential oil content and composition of lavandin

Distillation times Essential oil Essential oil components (%)

(min) content (%)
Linalool Linalyl acetate Borneol 1,8 cineole Camphor

5 1.00±0.08d 50.29±3.28a 27.51±1.98bc 1.5 1.3±0.08b 1.2±0.08b

10 1.42±0.11c 49.27±4.05a 28.20±2.14b 1.4 1.3±0.07b 1.3±0.09b
20 1.58±0.14bc 45.45±3.89b 31.27±2.11a 1.4 1.2±0.06b 1.3±0.10b
40 1.75±0.12abc 45.42±4.02b 28.26±3.01b 1.4 1.2±0.08b 1.2±0.04b
80 1.83±0.16ab 42.77±3.64c 29.17±1.16b 1.3 1.4±0.09b 1.4±0.11b
120 1.97±0.13ab 43.35±2.78c 24.64±1.18d 1.2 1.5±0.10b 1.4±0.08b
160 1.98±0.16ab 43.96±5.14c 26.43±2.01c 1.3 1.3±0.05b 1.9±0.12a
180 2.00±0.17a 45.43±4.89b 28.20±0.89bc 1.2 1.2±0.07b 1.3±0.04b
240 2.00±0.13a 43.49±2.21c 31.06±2.16a 1.2 2.1±0.12a 1.2±0.08b
C. V. (%) 9.98 8.24 6.42 5.25 3.28 4.14
LSD (%) 0.409 1.190 1.140 - 0.238 0.214
P value 0.001 0.004 0.028 0.184 0.043 0.038

Table 2. Effect of distillation fractions on essential oil content (%) and composition (%) of lavandin

RT Components Control Distillation fractions (min)

(0-100)
0-5 5-10 10-15 15-20 20-25 25-30 30- 35 35-40 40-60 60-80 80-100

8.1 α-pinene - - - - - - - 0.13 0.11 0.13 - -

13.9 β-myrcene 0.71 0.29 0.24 0.37 0.43 0.73 0.65 0.92 0.23 1.10 0.96 0.90
16.1 D-Limonene 0.59 - 0.19 - 1.10 0.26 0.40 0.54 0.60 0.71 0.66 0.55
16.7 1,8-Cineole 1.30 4.80 1.20 1.20 - 1.10 1.10 1.10 2.70 1.10 1.10 1.10
17.9 β-Ocimene 0.59 0.36 0.29 0.21 - - - 0.15 - 1.80 0.29 0.90
18.9 γ-terpinene 0.93 0.78 0.40 0.39 - 0.17 - 0.11 - 1.10 0.24 0.44
19.3 3-Octanone 0.57 0.65 0.48 0.44 0.19 - 0.27 0.21 0.26 0.16 0.21 0.16
20.2 Hexyl actetate 0.54 0.75 0.59 0.70 0.56 0.52 0.56 0.50 0.58 0.36 0.40 0.24
29.2 Hexyl butanoate 0.53 0.84 0.66 0.80 1.10 1.10 1.10 1.10 1.10 2.10 1.20 1.20
36.6 Camphor 2.00 1.50 1.50 1.30 2.00 0.98 0.94 0.55 0.36 0.26 0.36 0.26
37.6 Linalool 40.35 51.37 53.50 45.84 37.93 32.99 30.68 28.50 25.59 19.85 21.72 18.23
38.3 Linayl acetate 30.40 28.26 23.66 28.93 34.13 38.25 40.81 41.50 37.97 36.43 34.90 34.42
41.4 Neryl acetate 1.20 1.10 1.10 1.20 1.30 1.30 1.30 1.30 1.30 5.10 1.40 1.20
41.6 Trans caryoph. - - - - - - - - - 0.71 0.18 0.87
45.0 Farnesene - - - - - - - - - 0.29 0.27 0.54
45.9 Lavandulol - - - 0.21 - - - - - - - -
47.4 α-Terpineol 1.40 0.82 1.20 1.30 1.40 5.70 1.40 1.40 5.00 - 1.40 -
47.8 Borneol 1.30 2.00 1.20 1.20 1.10 1.10 0.85 0.55 0.43 - 0.21 -
50.7 Geranyl acetate 1.10 0.70 1.10 2.10 1.30 1.30 4.70 1.40 1.60 7.90 1.70 2.40
53.0 Cuminal 0.59 - 0.26 0.59 0.98 0.93 0.70 0.79 0.85 1.10 0.83 1.80
55.9 Geraniol 1.20 0.31 1.10 2.70 1.20 3.00 1.20 1.20 1.20 1.40 1.20 1.70
64.6 Caryophy. ox. - - - - 0.21 - 0.38 0.31 0.50 - 0.85 -
73.7 Cadinol - - - - - - - - 1.40 - - -
75.6 Bisabolol 1.30 0.34 0.83 1.10 1.10 1.10 1.20 1.20 1.50 2.00 1.80 1.90
76.5 α-Eudesmol - - 0.21 0.24 0.21 0.09 - - - - - -
77.4 Zingiberene 0.17 - - - - - - - - - 0.21 -
Essential oil content 1.94 1.05a 0.41b 0.21c 0.067d 0.050d 0.025d 0.025d 0.025d 0.025d 0.025d 0.025d
C. V. (%) : 13.93, LSD : 0.081, P value : 0.001.
Iranian Journal of Chemical Engineering
Vol. 6, No. 3 (Summer), 2009, IAChE

Effect of Time and Temperature on Moisture Content, Shrinkage,

and Rehydration of Dried Onion

S. Abasi1, S. M. Mousavi1∗, M. Mohebi2 and S. Kiani1

D
1- Department of Chemical Engineering, Engineering Faculty, Ferdowsi University of Mashhad, Iran.
2- Department of Food Science and Technology, Agricultural Faculty, Ferdowsi University of Mashhad,
Iran. SI
Abstract
In this paper, the experimental data of the onion drying process by a batch cabinet
dryer is investigated. Obtained experimental data including moisture content,
of
shrinkage, and rehydration via random factorial scheme are analyzed. Comparison of
data average is carried out with the help of the multi amplitude test of Duncan.
Statistical analysis of experimental data shows that time, temperature, and their
combined effect have a reasonable impact on the moisture content and rehydration
value of dried samples. However, a combined effect of time and temperature on the
ive

shrinkage value is not meaningful (P>0.05). The results also show that increasing time
and temperature leads to a decrease in the moisture content of the samples, but it
increases the value of rehydration and the shrinkage of samples.

Keywords: Drying,Onion, Moisture content, Rehydration, Shrinkage

ch

1- Introduction Producing dried products such as pistachio,

Ar

Nowadays, the amount of agricultural waste
is estimated to be about 30-35%, part of
which is due to lack of relevant industries.
One of the most important methods for food
maintenance is drying or the dehydration
process. In addition to the conservational
effect on the product, drying reduces its
weight and volume significantly and
therefore decreases its transportation and
storage costs.
grapes, barberries, and saffron and many
others are still common with traditional
methods. Problems concerned with these
methods are the long drying time, chance of
microbial contamination of foods due to
moisture, the undesirable quality of final
products, an so on. By applying industrial
drying methods, not only is food quality
preserved, but also production time decreases
considerably.

∗ Corresponding author: mmousavi@um.ac.ir

57
www.SID.ir
 Abasi, Mousavi, Mohebi, Kiani

after and before drying, respectively.
One of the common methods for measuring
the samples volume is sample submergence
in a solvent. Thus, in choosing the solvent it
should be kept in mind that the chosen
solvent must be organic, does not react with
the sample components, and has a lower
density than the sample, so that the sample is
fully submerged. Considering what is
mentioned above, toluene or heptane are
appropriate solvents for measuring the
were analyzed via random factorial scheme.
Comparison of the data average was carried
out with the help of the multi amplitude test
of Duncan. The Mstatc-Ver ½ Software was
used for this purpose. The time and
temperature combined effects on the
moisture content, shrinkage, and rehydration
of the samples were modelled using the
surface-response fitting method. The Minitab
Release 11.12 Software was used for surface-
response fitting.

D
samples volume. Using a solvent such as
toluene, the sample superficial volume is 3- Results and discussion
3.1- Drying kinetics and moisture content
given by equation (4):
SI
Analysis of the experimental data shows that
M t+s − M f − M onion drying occurs only in the falling rate
V = Vf − (4) zone. Drying rate can be defined as moisture
ρs
content on dry basis in unit of time. Drying
of
rate decreases with time in four experimental
Where V f is the beaker volume, M t + s is
temperatures, a result of the decrease in
total mass of (the beaker, sample, and moisture content as time passes (Fig. 1). An
toluene), M f is mass of the beaker, M is increase in operational temperature in a
ive

mass of the sample, and ρ s is the toluene certain time, leads to a decrease in the
density. moisture content of the samples since the
The obtained experimental data including evaporation rate increases with increasing
temperature (Fig. 2).
ch

moisture content, shrinkage, and rehydration

Ar

0.35
60 C
0.3 70 C
Drying rate(kg H2o/kg

0.25 80 C
dry solid.min)

0.2 90 C

0.15
0.1
0.05
0
0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360 390
Time(min)
Time (min)

Figure 1. Influence of air temperature on the drying rate of samples in different times

60 Iranian Journal of Chemical Engineering, Vol. 6, No. 3

www.SID.ir
 ANALISIS KADAR MINERAL DALAM ABU BUAH NIPA (NYPA FRUCTICANS)
KALIWANGGU TELUK KENDARI SULAWESI TENGGARA

Herman1), Rolan Rusli1), Edi Ilimu2), Rimba Hamid2), Haeruddin2)

Kelompok Bidang Ilmu Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Mulawarman, Samarinda)1
e-mail : rolan@farmasi.unmul.ac.id
Program Studi Pendidikan Kimia, FKIP, Universitas Haluoleo, Kendari, Sultra)2

ABSTRACT

Research about Levels of ash analysis in Nipa Fruit (Nypa fructicans) Kaliwanggu Kendari
Gulf South East Sulawesi have been done. Research carried out by gravimetric method and
AAS. The ash content of old nipa fruit at a temperature 450°C dan 550°C obtained amounted
to 1.01% and 0.89%. while the young nipa fruits obtained ash content of 0.88% and 0.86%
at450°C dan 550°C. Mineral content of old nipa fruit which had become ash at a temperature
of 450°C obtained at 1.3769 ppm, 7.9167 ppm, 3.7876 ppm, 9.2365 ppm, respectively for Fe,
Mg, K, and Na. On the other hand, at a temperature of 550°C obtained at 1.1153 ppm, 8.0127
ppm, 3.7990 ppm and 9.3634 ppm, respectively for Fe, Mg, K, and Na. On young fruit nipah
obtained concentration of 0.8769 ppm, 7.9939 ppm, 3.8260 ppm, 9.4041 ppm, respectively for
Fe, Mg, K, and Na at ash temperature 450°C. Meanwhile, at a ash temperature of 550°C
obtained concentration of 0.9230 ppm, 7.9738 ppm, 3.7468 ppm and 9.3861 ppm, respectively
for Fe, Mg, K, and Na. The water content obtained from the old and young nipa flesh fruit
obtained at 41.86% and 33.49%, respectively.

Key words: Level of mineral analysis, Nypa fructicans, Gravimetric, AAS

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian dengan judul “Analisis Kadar dalam Abu Buah Nipa (Nypa
fructicans)” Kaliwanggu Teluk Kendari Sulawesi Tenggara. Penelitian dilakukan dengan
metode gravimetri dan AAS. Kadar abu buah nipa tua pada suhu 450°C dan 550°C diperoleh
sebesar 1,01% dan 0,89%, sedangkan pada buah nipa muda diperoleh kadar abu sebesar
0,88% dan 0,86% berurut-turut untuk suhu 450°C dan 550°C. Kadar mineral buah nipa tua
yang diabukan pada suhu 450°C diperoleh sebesar 1,3769 ppm, 7,9167 ppm, 3,7876 ppm,
9,2365 ppm, berturut-turut untuk Fe, Mg, K, dan Na. Sedangkan pada suhu 550°C diperoleh
sebesar 1,1153 ppm, 8,0127 ppm, 3,7990 ppm, dan 9,3634 ppm, berturut-turut untuk Fe, Mg,
K, dan Na. Pada buah nipa muda diperoleh kadar sebesar 0,8769 ppm, 7,9939 ppm, 3,8260
ppm, 9,4041 ppm, berturut-turut untuk Fe, Mg, K, dan Na pada suhu pengabuan 450°C.
Sedangkan pada suhu pengabuan 550°C diperoleh kadar sebesar 0,9230 ppm, 7,9738 ppm,
3,7468 ppm, dan 9,3861 ppm, berturut-turut untuk Fe, Mg, K, dan Na. Adapun kadar air yang
diperoleh dari daging buah nipa tua dan muda diperoleh sebesar 41,86% dan 33,49%.

Kata kunci: Analisis kadar mineral, Nypa fructicans, Gravimetri, AAS

J. Trop. Pharm. Chem. 2011. Vol 1. No. 2. 104

Analisis Kadar Mineral Dalam Abu Buah Nipa (Nypa Fructicans) Kaliwanggu Teluk Kendari Sulawesi Tenggara
pangan dalam tungku pengabuan (furnace)
dengan memvariasikan suhu pemanasan
sampai mendapatkan abu yang berwarna
putih. Penetapan bobot abu dihitung
berdasarkan gravimetri [6].
Data hasil analisis kadar abu buah nipa
muda pada suhu 450°C sebesar 1,01%
sedangkan suhu 550°C sebesar 0,89 %.
Kadar abu yang terkandung didalam
sampel nipa tua juga mengalami penurunan
yakni 0,88% pada suhu 450°C menjadi
0,86% pada suhu 550°C. Penurunan kadar
abu ini disebabkan oleh berkurangnya
mineral yang terdegradasi oleh pengaruh
suhu dalam sampel buah nipa. Hal ini
sebagaimana yang diungkapkan Winarno
[8], pada suhu pengabuan yang rendah,
panas yang diterima oleh bahan hanya
dapat mengabukan sebagian mineral yang
ada di permukaan, sehingga penurunan
kadar abu bahan relatif kecil. Sedangkan
pada suhu pengeringan yang lebih tinggi
dengan waktu yang lebih lama, panas yang
diterima oleh bahan selain digunakan untuk
mengabukan mineral pada permukaan
bahan, juga dapat mengabukan mineral
yang terikat di dalam bahan. Dari tabel 8
diperoleh bahwa kadar abu nipa tua lebih
tinggi dibandingkan dengan nipa muda, hal
ini disebabkan pada nipa tua volume
daging buah yang terbentuk sudah
mengalami proses pengerasan dan
memiliki jumlah mineral yang lebih
banyak.
Berdasarkan Tabel 2 terlihat bahwa
konsentrasi logam besi (Fe) pada sampel
buah nipa tua yang dianalisis dengan AAS
pada suhu 450°C adalah 1,3769 ppm.
Sedangkan pada suhu 550°C konsentrasi
Logam Fe menjadi lebih rendah yaitu
sebesar 1,1153 ppm.
Hal ini disebabkan karena logam besi
mempunyai titik didih yang hampir sama
dengan 450°C atau berkisar antara 400-
J. Trop. Pharm. Chem. 2011. Vol 1. No. 2.
500°C, sehingga kadar besi atau
konsentrasi besi yang didapatkan dengan
hasil analisis pada suhu tersebut akan
semakin tinggi konsentrasinya.
Sedangkan pada suhu di atas 500°C, ini
akan menyebabkan besi yang terkandung
dalam sampel buah nipa sebagian akan
menguap yang diakibatkan oleh suhu yang
terlampau tinggi sehingga besi yang
diperoleh akan sangat sedikit.
Pada sampel buah nipa muda pada suhu
450°C, konsentrasi besinya adalah sebesar
0,8769 ppm. Sedangkan pada suhu 550°C,
konsentrasinya sebesar 0,9230 ppm. Selain
itu, Sediaoetama [9] menyatakan bahwa
abu dalam bahan makanan adalah sisa
pembakaran sempurna dari suatu bahan
makanan yang menggambarkan banyaknya
mineral yang tidak terbakar menjadi zat
yang dapat menguap. Berdasarkan pada
pernyataan tersebut maka kadar besi pada
buah nipa tua pada suhu 450°C memiliki
kadar yang tinggi sedangkan pada suhu
550°C kadarnya rendah karena pada suhu
550°C tersebut, ion besinya sudah
menguap sehingga kadar besi dari buah
nipa tua pada suhu 550°C tersebut lebih
kecil dari kadar besi pada suhu 450°C.
Untuk konsentrasi logam Magnesium (Mg)
pada sampel buah nipa tua pada suhu
450°C adalah 7,9167 ppm dan pada suhu
550oC sebesar 8,0127 ppm. Sedangkan
sampel buah nipa muda pada suhu 450°C,
konsentrasi magnesiumnya sebesar 7,9939
ppm dan pada suhu 550°C, sebesar 7,9738
ppm.
Hal ini diakibatkan magnesium yang
terdapat pada tumbuhan yang muda
maupun yang tua kadarnya tidak jauh
berbeda, atau dengan kata lain kadar
magnesium yang ada dalam tumbuhan
tidak mengalami oksidasi ataupun reaksi
dengan zat-zat lain yang ada di luar
108
 LAMA PENYIMPANAN TERHADAP KADAR AIR, KADAR ABU, DAN KADAR
SERAT KASAR MARSHMALLOW SEMANGKA

Storage Time On Water Content, Ash Content, and Crude Fiber Content Of
WatermelonMarshmallow

Niken Pramusita1*), Ika Fitriana2.Elly Yuliarti Sani2, Haslina2

1
Mahasiswa Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang
2,3
Staff Pengajar Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang
Jl. Soekarno-Hatta Tlogosari Semarang-50196

ABSTRAK
Penggunaan buah semangka kuning sebagai bahan pengisi pada marshmallow
merupakan langkan diversifikasi pangan untuk memperpanjang umur simpan buah semangka
kuning. Ketika disimpan kadar air produk pangan menjadi meningkat karena menyerap
kelembapan udara yang ada disekitar bahan sehingga produk permen dapat ditumbuhi
kapang atau khamir serta mikroorganisme lain yang dapat mempengaruhi komposisi kimia
dari marshmallow. Oleh karena itu pada penelitian ini akan diamati pengaruh lama
penyimpanan terhadap kadar air, kadar abu, dan kadar serat kasar marshmallow.
Penelitian dilakukan di Laboratoriun Rekayasa Pangan, Laboratorium Kimia dan
Biokimia Pangan, dan Laboratorium Organoleptik, Fakultas Teknologi Pertanian Universitas
Semarang pada bulan Februari 2019. Penelitian ini menggunakan rancangan percobaan RAK
(Rancangan Acak Kelompok) untuk parameter kadar air, kadar abu, dan kadar serat kasar,5
perlakuan 4 kali ulangan. Perlakuan ysng ditetapkan adalah sebagai berikut P1=
Penyimpanan 2 hari; P2= Penyimpanan 4 hari; P3= Penyimpanan 6 hati; P4= Penyimpanan
8 hari; P5= Penyimpanan 10 hari.
Penelitian menunjukkan bahwa perlakuan penyimpanan berpengaruh nyata (p<0.05)
terhadap kadar air, kadar abu, dan kadar serat kasar permen marshmallow. Perlakuan P2
(lama simpan 4 hari) dipilih sebagai perlakuan terbaik karena masih menghasilkan kadar air,
abu dan serat kasar yang tinggi setelah dsimpan pada suhu ruang dengan kadar air
22.0289%, kadar abu 0.0784%, dan kadar serat kasar 1.0920%

Kata Kunci : Semangka, marshmallow, lama simpan

1
Tabel 1.Hasil Analisis Penelitian
Perlakuan Kadar Air (%) Kadar Abu (%) Kadar Serat Kasar
(%)
P1 17.8287a ± 0.15 0.6958cd ± 0.012 0.9807c± 0.01
P2 22.0289b ± 0.006 0.7084d ± 0.006 1.0920d ± 0.07
P3 23.4936c ± 0.47 0.6902c ± 0.006 0.9640c ± 0.01
P4 25.9430d ± 0.09 0.6493b ± 0.009 0.8873b ± 0.02
P5 27.2593e ± 0.69 0.6211a ± 0.008 0.8203a ± 0.01
Keterangan:Angkayang ditandai superskrip yang tidak sama pada kolom menunjukkan
perbedaanyangnyata(P<0.05)

mengikat air berkurang, selain itu suhu

tinggi juga melemahkan daya ikat gula pasir
dan gula pada sirup jagung terhadap air.
Kedua hal ini membuat kadar air bebas
dalam marshmallow menjadi bertambah
sehingga kadar air permen masrshmallow
meningkat.

Kadar Air
Kadar air yang dihasilkan
marshmallow adalah 17.8287% – 27.2593%.
Meningkatnya kadar air dengan semakin
lamanya waktu penyimpanan diduga karena
bahan yang disimpan akan menyerap uap air
dari udara sampai tekanan uap air dalam
bahan sama dengan tekanan uap air udara
ruang penyimpanan (Syarief dan Halid,
1992). Semakin lama marshmallow
disimpan semakin besar tekanan uap air
“diterima” marshmallow dari lingkungan,
kelembapan udara disekitar produk akan
meningkat seiring dengan berjalannya hari.
Hal ini membuat uap air dari luar produk
masuk ke dalam produk, sehingga kadar air
meningkat dari hari ke hari.
Lebih lanjut menurutSyarief dan Halid
(1992), semakin lama penyimpanan,
memmbuat suhu lingkungan menjadi tinggi.
Suhu tinggi akan menyebabkan denaturasi
atau rusaknya molekul protein yang
terkandung dalam semangka dan gelatin
sehingga kemampuan protein dalam
Kadar Abu
Kadar abu yang dihasilkan
marshmallow adalah 0.6958% -
0.7084%.Meningkatnya kadar abu dari P1
ke P2 diduga karena mikroba yang ada lama
penyimpanan 2 – 4 hari masih dalam proses
fase lag atau fase adaptasi. Hal ini dapat
disebabkan karena aktivitas air pada
marshmallow belum mencukupi untuk
dijadikan tempat berkembang biak, yang
menyebabkan penyerapan mineral masih
sedikit, sehingga kadar abu terukur masih
tinggi. Hal ini sesuai dengan pernyataan
Dwijojoseputro (2005) yang menyatakan
bahwa pada fase lag (adaptasi) mikroba
masih kekurangan nutrisi untuk tumbuh atau
keadaan lingkungan belum sesuai untuk
tumbuh.
Penurunan kadar abu berkorelasi
negatif dengan kadar air. Semakin
meningkat kadar air semakin menurun kadar
abu. Hal ini karena dengan semakin
meningkatnya kadar air, semakin meningkat
pula aktivitas air marshmallow.
Meningkattnya aktivitas air pada umumnya
akan diikuti oleh tumbuhnya mikroba baik

6
bakteri maupun kapang. Untuk dapat
tumbuh dan berkembang mikroba
membutuhkan nutrisi seperti karbohidrat dan
mineral, sehingga semakin lama
penyimpanan kandungan mineral berkurang.
Lebih lanjut Putri dkk (2017) menyatakan
bahwa mikroba membutuhkan mineral untuk
mempertahankan hidup

Kadar Serat Kasar

Kadar serat kasar marshmallow
adalah 0.8203% - 1.0920%.Semakin lama
penyimpanan kadarr serat kasar cenderung
semakin meningkat. Hal ini diduga karena
serat kasar yang sebagian besar adalah
selulosa dan lignin, telah diuraikan oleh
mikroba untuk memenuhi nutrien sebagai
syarat untuk berkembang biak. Menurut
Putri dkk (2003), untuk memenuhi
kebutuhan nutriennya mikroba akan
melakukan biodegradasi bahan organik.
Menurut Putri dkk (2003) lagi, faktor
faktor lain yang memungkinkan mikroba
untuk tumbuh juga harus memenuhi
persyaratan lingkungan yang sesuai seperti
aktivitas air serta bahan organik lain seperti
mineral. Hal ini sesuai dengan hasil
penelitian ini dimana kaadar air (yang
menentukan aktivitas air) dan kadar abu
(yang menyatakan kandungan bahan organik
pada bahan).
PENUTUP
Kesimpulan
Kesimpulam dari penelitian ini adalah
Perlakuan penyimpanan berpengaruh nyata
(p<0.05) terhadap kadar air, kadar abu, dan
kadar serat kasar permen marshmallow.
Perlakuan P2 (lama simpan 4 hari) dipilih
sebagai perlakuan terbaik karena masih
menghasilkan kadar air, abu dan serat kasar
yang tinggi setelah dsimpan pada suhu
ruang.
Saran
Dengan diketahuinnya daya simpan
marshmallow diharapkan marshmallow
dapat dikomersialkan dikemudian hari

7
 Algal Research 40 (2019) 101486

Contents lists available at ScienceDirect

Algal Research
journal homepage: www.elsevier.com/locate/algal

Effects of sample size, dry ashing temperature and duration on T

determination of ash content in algae and other biomass
Keshun Liu
Grain Chemistry and Utilization Laboratory, National Small Grains and Potato Germplasm Research Unit, United States Department of Agriculture, Agricultural Research
Service (USDA-ARS), 1691 S. 2700 W., Aberdeen, ID 83210, USA

A R T I C LE I N FO A B S T R A C T

Keywords: Many reported methods on ash analysis by dry ashing vary greatly in ashing conditions, making results in-
Dry ashing comparable. The present study investigated effects of sample size (1, 4 g), ashing temperature (550, 600 °C) and
Ash content duration (6, 16 h) on ash measurement of 13 algae and 4 non-algae (grains, soymeal, forage) samples under a
Biomass factorial model. Results show that for most biomass both temperature and duration affected ash measurement
Algae
significantly (p < .05). Ashing at 600 °C for 6 h or 550 °C overnight (about 16 h) gave values similar to ashing at
Analytical method
600 °C overnight, but ashing 6 h at 550 °C produced higher ash content than other combinations. Furthermore,
for algae having higher ash content, sample size was also a determining factor when ashing at lower temperature
(550 °C) and/or shorter duration (6 h), but the effect could be alleviated by ashing at 600 °C overnight. For
comparable results, a standardized method of ashing 1 to 4 g samples at 600 °C overnight is proposed for all types
of biomass.

1. Introduction
Ash content or total ash represents the amount of total minerals
present in a biomass. It is an important quality parameter. Many la-
boratories routinely conduct ash measurement as a part of biomass
analysis for nutritional or compositional evaluation. In recent years,
algae have gained attention due to their high production efficiency and
versatile uses as animal feed, fertilizer, human food, and alternative
feedstock for biofuel production [1–3]. Yet, algae are well known for
their high levels and high variation in ash content [4–8]. Since high ash
content in most algae diminishes their inclusion levels for food and feed
[9] and poses major operational problems in biomass combustion sys-
tems for energy conversion [10,11], research has been conducted to
remove ash from algae [8,11]. In eliminating variability in ash content,
as with herbaceous biomass [12], algae are oftentimes assessed for ash-
free dry weight. Therefore, an accurate and reliable measurement of ash
content is critical in documenting quality of a biomass, whether it is a
food, feed, industrial material, or renewable fuel feedstock.
The ash content in algae and other biomass is commonly measured
gravimetrically by burning samples in a muffle furnace at a high tem-
perature for a specified duration. The process is known as dry oxidation
or dry ashing. However, there has been large variation in ashing tem-
perature and duration, as well as sample size (load), among reports for
determining ash content in various biological materials. For non-algae
biomass (such as food, feed and others), most researchers follow
standard methods, but the methods themselves vary with individual
products. For example, for measuring ash content in cereals, pulses and
by-products, AOAC International has an official method 923.03 [13],
which is the same as ISO 2171 [14]. This method calls for igniting 3–5 g
sample at 550 °C for 12–18 h. For animal feedstuffs, AOAC method
942.05 is usually used, which features heating a 2 g sample at 600 °C for
2 h [13]. For hard and soft woods, herbaceous materials, agricultural
residues, wastepaper, and solid fractions upon processing, ASTM
Standard Method E1755-01 [15] specifies burning 0.5 to 1.0 g samples
at 575 ± 25 °C for a minimum of 3 h or until all the carbon is elimi-
nated. Sluiter et al. [16] later modified the ASTM method by heating
0.5–2.0 g samples at 575 ± 25 °C for 24 ± 6 h. To determine ash
content in algae, since there is no standard method available, dry
ashing conditions vary considerably more among reports, with tem-
peratures ranging 450–815 °C, durations 1–70 h, and sample size from
80 mg to several g, with most reports making no mention of sample size
[4–8,11,17–22]. Because of the large variation in these factors, results
among reports are difficult to compare. For ash analysis, it appears that
most researchers are concerned only with ashing temperature and ne-
glect the effect of ashing duration and sample size. Yet, it is hypothe-
sized that although ashing temperature is an important factor, it is the
combination of sample size, ashing temperature and duration that leads
to incomplete or complete combustion. It is further hypothesized that
low ashing temperature, short duration and large sample size can each
lead to incomplete combustion, which in turn results in a higher ash

E-mail address: Keshun.Liu@ars.usda.gov.

https://doi.org/10.1016/j.algal.2019.101486
Received 16 November 2018; Received in revised form 27 March 2019; Accepted 29 March 2019
Available online 17 April 2019
2211-9264/ Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY license (http://creativecommons.org/licenses/BY/4.0/).
K. Liu
observations also indicate that longer duration at a lower ashing tem-
perature had the same effect as shorter duration at a higher ashing
temperature in bringing combustion to completion, supporting the
proposed hypotheses in the present study.
There was a differential response between algae and non-algae
sample groups toward the three treatment factors and their combina-
tions (Table 1). Specifically, for algae samples with higher ash contents,
there were not only strong effects of ashing temperature, ashing dura-
tion, and their combinations, but also a significant effect of sample size
(Table 2). Yet, for non-algae samples and algae samples with lower ash
content, sample size had no effect. These observations can be explained
by the difference in ash composition between algae and non-algae
samples and among algae samples. In the author's lab, ash from algae
and other materials was recently characterized [7]. In general, ash in
biomass can be divided into wet acid digestible ash and wet acid in-
digestible ash (WAIA). Being likely siliceous in nature, WAIA is an
important contributor of algae ash since its content in algae positively
correlates with total ash content. Upon microscopic examination, it was
found that WAIA from algae consists of three siliceous materials: non-
diatom cellular structures, diatom cell walls, and sandy particles, while
WAIA from grains and forage mostly consists of non-diatom cellular
structures [7]. The previous study concluded that high ash content of
algae results mostly from contamination of diatoms and/or sandy par-
ticles of geologic origin. Relating to the present study, algae samples
with higher ash content could produce ash with higher amounts of si-
liceous materials. During dry ashing, the ash produced on the top of a
sample crucible could be heavy, form a natural and temporary cover for
the remaining sample, and thus prevent the later from complete com-
bustion. The protective effect of ash with higher amounts of silica could
become more pronounced when a larger sample size was used for dry
ashing. Fortunately, it could easily be abolished by ashing at a higher
temperature for longer duration (such as 600 °C overnight, Table 2).
Ash content is typically measured as a part of proximate analysis for
algae and other biological samples. Although almost all reports on ash
measurement use a muffle furnace, there is great variation in tem-
perature and duration used for dry ashing. Pnakovic [23] compared two
ashing conditions, 550 °C × 6 h and 815 °C × 6 h, in measuring ash
content in wood samples of three tree species (10 g each) and found
that on average the 550 °C × 6 h method gave 32% higher values than
the 815 °C × 6 h method. The author pointed out the need for having
certain standards for determining the ash content in wood material. The
cited study also implies that, for biological materials, ashing at 815 °C
can be too high to avoid measurable loss of some elements due to vo-
latilization and decomposition. Xiao et al. [24] compared 2 h dry ashing
at 500, 600 and 815 °C for non-algae biomass (rice straw, pine sawdust,
tree leaf) and concluded that 600 °C is the optimal temperature. How-
ever, they did not look at the effect of ashing duration. Although the
present study showed that for non-algae samples ashing at 550 °C
overnight or at 600 °C for 6 h gave similar ash content (Table 2), it is not
clear if ashing at 600 °C for 2 h is enough. For non-algae biomass,
Sluiter et al. [16] specified ashing 0.5–2.0 g at 575 ± 25 °C for
24 ± 6 h. For algae biomass, van Wychen and Laurens [20] specified
the same ashing temperature and duration ranges as Sluiter et al. [16]
but with a lower sample size (100 mg). The two methods were all de-
veloped at National Renewable Energy Laboratory, U.S. Dept. of En-
ergy. Golden, CO, as Laboratory Analytical Procedures (LAP). Based on
results of the present study, the ashing condition and duration specified
in LAP for non-algae biomass [16] and algae biomass [20] are mostly
acceptable for complete combustion of organic matter but without
measurable loss of volatiles and decomposition of inorganic com-
pounds. Yet, for algae with very high ash content, a possible combi-
nation of ashing condition by the lowest end of temperature and
duration ranges in LAP [20] (i.e., 550 °C for 18 h) may present a slight
concern for incomplete combustion. Still, many other researchers used
different ashing conditions for their studies with algae. Examples in-
clude 450 °C for 3 h [18], 450 °C for 24 h [6], 500 °C for 4 h [17], 530 °C
4
Algal Research 40 (2019) 101486
for 18 h [5], 550 °C for 3 h [11], 550 °C for 5 h [21], 550 °C for 70 h [4],
600 °C for 5 h [22], 600 °C for 16 h [7], and 815 °C for 1 h [19]. Based
on the finding of the present study, some of these conditions might be
inadequate for complete combustion of certain samples.
The present study demonstrated a good and reasonable prospect of
achieving the goal: to provide a standardized method for measuring ash
content in all biomass. As shown in Table 2, for most biomass (algae
and non-algae), overnight heating at either 550 °C or 600 °C would be
suitable. Yet, ashing at 550 °C overnight or at 600 °C for 6 h was found
insufficient to remove all organic matter from algae samples having
high ash content. This was particularly true when sample size was
larger (such as 4 g). Fortunately, Table 2 also shows that ashing at
600 °C overnight not only eliminated the effect of sample size on ash
measurement for algae samples with high ash content, but also gave ash
content that did not differ significantly from those obtained by ashing at
550 °C overnight or at 600 °C for 6 h, for algae samples with low ash
content and non-algae samples. Therefore, the ashing condition of
600 °C overnight is recommended for ash determination in all types of
biological samples. With regard to the effect of the sample size on dry
ashing, in general, using a sample size larger than 4 g can overload
crucibles when samples are very light (such as dry forage powder),
while using a sample size smaller than 1 g can enlarge analytical errors
for samples having ash content as low as 2%. Since the present study
shows that dry ashing 1 or 4 g samples at 600 °C overnight gave the
same ash content even for algae with high ash content (Table 2), 1 to
4 g sample load is recommended. However, there is an exception: using
sample sizes smaller than 1 g for dry ashing may become necessary
when availability of a biomass is rather limited. One example would be
for small-scale laboratory cultures, where biomass is typically collected
or concentrated by filtration with ash-free glass fiber filters (4, 17, 18).
For all above considerations, a standard method of ashing 1–4 g bio-
mass samples at 600 °C for 16 h (overnight) was thus proposed and
described in the Materials and methods section.
5. Conclusions
The present study is the first to document that the interaction of
ashing temperature and duration, rather than the temperature alone,
influences ash measurement. It is also the first to show that, for algae
samples with high ash content, sample size can be another determining
factor. Therefore, when using dry ashing for ash analysis, one needs to
choose a proper combination of ashing temperature, ashing time and
sample size. Ashing 1–4 g samples at 600 °C overnight is proposed as a
standard method and, thus, recommended for measuring ash content in
all biomass (algae and non-algae biomass).
Acknowledgements
The author expresses appreciation to Mike Woolman, biological
science technician of U.S. Department of Agriculture, Agricultural
Research Service (USDA-ARS), for his assistance in conducting the ex-
periments, Rick Barrows, Ph.D., retired research fish physiologist of
USDA-ARS, and other individuals for helping and providing algae
samples.
This work was solely supported by the United States Federal
Government appropriated fund for the project “Integrating the
Development of New Feed Ingredients and Functionality and Genetic
Improvement to Enhance Sustainable Production of Rainbow Trout”
(No. 2050-21310-005-00-D), U.S. Department of Agriculture,
Agricultural Research Service, Washington DC, USA.
Declaration of authors' contributions to the work
The author made substantial contributions to the conception and
design of the study, acquisition of data, interpretation of data, drafting
and developing the manuscript for submission. Before its submission,
 LEMBAR ASISTENSI
DIPERIKSA
KETERANGAN TANDA TANGAN
NO TANGGAL
1. 04/03/2022 Pengumpulan P0
2. 13/03/2022 Pengembalian dan perbaikan P0
3. 15/03/2022 Pengumpulan P1
4. 24/03/2022 Pengembalian P1, perbaikan P1, dan
pengumpulan P2