Dossier scientifique

Interférences et pièges en immuno-analyse

Bruno Baudin1,2,*, Antoine Pilon2,3
1 Laboratoire de Biochimie, Hôpitaux Universitaires Est-Parisien, site Armand Trousseau, 26 avenue du docteur Arnold Netter, 75012 Paris
2 INSERM UMR 1193, UFR Pharmacie, 5 Rue Jean-Baptiste Clément, Châtenay-Malabry 92296 Cedex
3 Laboratoire de Biochimie-Hormonologie, Hôpitaux Universitaires Est-Parisien, site Saint-Antoine, 184 rue du faubourg Saint-Antoine,
75571 Paris cedex
*Auteur correspondant : bruno.baudin@aphp.fr (B. Baudin).

RÉSUMÉ
Les interférences sont très nombreuses dans les méthodes d’immuno-analyse ; elles sont source d’erreurs par défaut ou
par excès parfois au détriment de la qualité des soins au patient, en particulier concernant les hormones, les marqueurs
cardiaques et les marqueurs tumoraux. La réaction croisée résulte d’un défaut de spécificité des anticorps (AC) de la
trousse et de la présence de cross-réactants ; elle concerne surtout des dosages hormonaux dans des situations bien
connues. La principale cause d’interférence reste la présence d’anticorps dans le sérum du patient, essentiellement des
auto-AC et des AC hétérophiles ; il est important de les mettre en évidence et de lever l’interférence. Les nouvelles
trousses seraient moins sensibles à ce type d’interférences. L’interférence par excès d’antigène doit être anticipée par
des tests de dilution et l’adaptation des méthodes. Il existe d’autres types d’interférences, comme par des protéines
endogènes (albumine, protéines de transport, complément immunologique) et bien sûr l’effet matrice, ou la présence
de biotine dans l’échantillon. Malgré les progrès réalisés en immuno-analyse, il restera toujours des causes d’interfé-
rence et il peut en apparaître de nouvelles. Le biologiste doit rester vigilant et formé sur ces méthodes d’analyse et les
principales causes d’interférence.

ABSTRACT
Interference and pitfalls in immuno-assays.
Interferences are frequent in immuno-assays; they are the cause of errors with default or excess, sometimes to
the detriment of the quality of medical care, in particular for hormones, cardiac markers and tumor markers.
Cross-reaction can come from a low specificity of the antibodies and from the presence of cross-reacting pro-
ducts, mostly for hormone assays in well-known situations. The main cause of interference remains the presence
of antibodies in patient serum, such as auto-antibodies and heterophilic antibodies. It is particularly important to
detect them and to remove the interference. New kits should be less sensitive to this type of interference. The
interference with antigen excess or “hook effect” must be anticipated with dilution testing and the adaptation of
the methods. Other types of interferences or pitfalls concern endogen proteins, such as specific binding-proteins,
albumin, or immunological complement, also matrix effect or the presence of
biotin in the sample. In spite of recent progress in immuno-assays, it will always
remain some causes for interference and some others can appear. The biologist
MOTS CLÉS
has to be vigilant and trained on these methods of analysis and on the main
◗ auto-anticorps
causes for interfering.
◗ effet crochet
◗ immuno-analyse
◗ interférences
◗ réaction croisée Liste des abréviations

KEY WORDS AC : anticorps TnIc : troponine I cardiaque

AG : antigène TnTc : troponine T cardiaque
◗ auto-antibody HAAA : Human Anti-Animal Antibodies
CR : cross-réactant
◗ cross-reaction HAMA : Human Anti-Mouse Antibodies
hCG : human Chorionic Gonadotrophin
◗ hook effect TSH : Thyroid-Stimulating Hormone AFP : Alpha-Foeto-Protéine
◗ immuno-assays PTH : parathormone PSA : 7YVZ[H[L:WtJPÄX\L(U[PNuUL
PRL : prolactine CA125 : Carbohydrate Antigène 125
◗ interferences
Tg : thyroglobuline

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60 REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES • N° 510 • MARS 2019

 Dossier scientifique
Difficultés d’interprétation, pièges diagnostiques
Introduction
Les interférences et les pièges sont très nombreux
dans les méthodes d’immuno-analyse ; ils sont sources
d’erreurs par défaut ou par excès parfois au détri-
ment de la qualité des soins au patient, en particulier
concernant les hormones, les marqueurs cardiaques et
les marqueurs tumoraux. Malgré les progrès réalisés en
immuno-analyse, il restera toujours des causes d’interfé-
rence et il peut en apparaître de nouvelles. Le biologiste
médical doit rester vigilant et formé sur ces méthodes
d’analyse et les causes d’interférence (tableau I).
La réaction croisée
Elle est due à un défaut de spécificité de l’anticorps
(AC), essentiellement l’AC de capture pour les
méthodes non compétitives, et à l’existence de cross-
réactants (CR) de structure identique ou apparentée
(un épitope en commun au minimum).
Dans les dosages compétitifs
Ces interférences sont plus fréquentes dans les dosages
compétitifs que dans les méthodes non compétitives,
car ils utilisent un seul AC et en défaut. L’interférence
est quasiment toujours positive car le CR déplace
l’antigène (AG) marqué. Si l’on prend l’exemple du
dosage des stéroïdes, ces interférences peuvent avoir
différentes origines : physiologique (grossesse, période
néonatale), pathologiques (présence d’un bloc enzyma-
tique, insuffisance rénale), thérapeutique (corticothéra-
pie, œstrogénothérapie) ou diagnostique (épreuve dyna-
mique avec la métopirone). Il a également été décrit des
interférences provenant du manipulateur (traitement
cutané contenant de la testostérone) [1].
Dans les dosages non
compétitifs (sandwiches)
L’interférence peut être due à la neutralisation d’un des
AC (de capture ou traceur). Ces interférences sont plus
rares, du fait de la reconnaissance de deux épitopes
Tableau I. Principales causes d’interférences et pièges en immuno-analyse.
Types
Réaction croisée Présence de co-réactants, mauvaise spécificité des anticorps
Interférence par des anticorps (AC)
Interférence par des protéines de liaison Albumine, pré-albumine, protéines de liaison spécifiques des hormones
Effet matrice
Effet crochet
par des AC monoclonaux en large excès. Quelques
exemples, plutôt anciens peuvent cependant être cités :
◗ biais par défaut (pseudo-effet crochet), ex : hCG
(human Chorionic Gonadotrophin) élevée sur dosage de
TSH (Thyroid-Stimulating Hormone), ou sandwiches sur-
numéraires parce que l’AC reconnaît deux épitopes ;
◗ biais par excès : reconnaissance de fragments de
la parathormone (PTH) lors du dosage de la PTH
« intacte ».
Stratégie de couplage
pour le dosage d’haptènes
Elle est un problème majeur pour le dosage des sté-
roïdes ; en effet, l’AC doit être dirigé contre un épi-
tope éloigné de la zone de couplage de l’haptène sur la
protéine porteuse. Des interférences sont prévisibles
entre épitopes proches du site, ex : la testostérone sur
le dosage de 5-hydroxy-testotérone ou de progesté-
rone. Parfois la réaction est choisie, ex : les AC anti-
digoxine reconnaissent les métabolites qui sont plus
ou moins actifs, les AC anti-aldostérone reconnaissent
aussi les métabolites hydrogénés [2].
La réaction croisée
peut être évaluée
Pour les dosages compétitifs, on peut utiliser la méthode
d’Abraham, qui étudie le déplacement de la courbe
d’étalonnage par le CR, méthode simple qui permet de
comparer les AC de trousses commerciales différentes.
En revanche, les courbes sont rarement parallèles et le
déplacement par le CR est rarement total. Cette étude
peut sembler longue et fastidieuse si on doit étudier de
nombreux CR. Notons que ce que l’on étudie in vitro
ne représente peut-être pas ce qui se passe in vivo. Pour
les dosages non compétitifs, il s’agit de croisement avec
un ou les deux AC du sandwich, on mesure l’analyte
avec le CR, ou dans un sandwich séquentiel si le CR est
reconnu par l’AC traceur. En pratique, les trousses com-
mercialisées utilisent le plus souvent des AC différents.
En cas de suspicion d’une interférence, il est conseillé
de réaliser le dosage en utilisant une autre méthode [2].
Causes
AC anti-analytes, anti-réactifs ou anti-protéines animales
Hémolyse, lipémie, ictère, biotine
Excès d’antigène par rapport à l’anticorps
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Interférences Dosages compétitifs

Dans ce cas, l’AC interférant lie le traceur, ce qui dimi-
dues aux anticorps nue le traceur lié sur l’AC réactif du dosage. Ceci
entraîne alors une surestimation de l’analyte dosé. Les
Anticorps anti-analytes cas les plus fréquents sont retrouvés dans les dosages
d’hormones thyroïdiennes (anti-triiodothyronine ou T3
Des AC anti-analytes peuvent être présents dans le
et anti-thyroxine ou T4).
sérum de patients présentant des pathologies auto-
immunes (AC anti-thyroglobuline dans les pathologies
thyroïdiennes ou anti-insuline dans le diabète) [3, 4], ou Anticorps hétérophiles
au cours de certains traitements (AC anticorps anti- Le sérum de certains individus peut contenir des AC
insuline chez des patients traités à l’insuline). D’autres anti-idiotypes ou anti-isotypes (IgG ou IgM) dirigés
AC peuvent être retrouvés sans que l’étiologie en soit contre des Ig animales, dits AC hétérophiles et pou-
connue, l’exemple le plus courant étant celui de vant réagir avec les AC utilisés pour le dosage
la prolactine (PRL) donnant un complexe [7]. Ces AC sont formés lors du contact
AC/PRL nommé macro-prolactine. de l’homme avec des animaux, par
En fonction des dosages, ces inter- 10 % de exposition accidentelle (éleveurs
férences dues aux AC anti-analytes la population d’animaux…), iatrogène (traite-
peuvent conduire à des résultats ment par des protéines recombi-
sur ou sous-estimés [5].
générale et 25 %
nantes ou AC monoclonaux), ou
des patients atteints au cours de certaines patholo-
Dosages non compétitifs d’un cancer différencié gies. On peut citer l’exemple du
L’interférence des AC anti-thy- facteur rhumatoïde dans ce type
roglobuline dans le dosage de la de la thyroïde ont des d’interférence. Il s’agit d’auto-AC
thyroglobuline (Tg) est un pro- anticorps anti-Tg IgM, IgA ou IgG anti-Fc des IgG,
blème important. En effet, 10 % qui est fréquent chez les patients
de la population générale et 25 % dans leur sérum atteints de polyarthrite rhumatoïde
des patients atteints d’un cancer diffé- et chez près de 5 % des individus sains.
rencié de la thyroïde ont des AC anti-Tg Le plus souvent sa présence conduit à
dans leur sérum. Cette présence conduit à des dosages faussement augmentés. Quand
une sous-estimation de la Tg, le complexe Tg/anti-Tg ils proviennent d’une immunisation contre des pro-
n’étant en général que partiellement reconnu par le téines d’une espèce donnée, on parle d’AC anti-animal
couple d’AC du dosage. Toutes les trousses de dosage (ou HAAA pour «Human Anti-Animal Antibodies»).
étant plus ou moins sensibles à la présence d’AC anti- C’est le cas, par exemple, d’AC anti-souris ou HAMA
Tg, le dosage de ces AC doit toujours être réalisé en («Human Anti-Mouse Antibodies»). Ils peuvent provenir
parallèle d’un dosage de Tg et le résultat utilisé pour de beaucoup d’autres animaux à cause de la grande
l’interprétation du résultat. diversification actuelle des protéines recombinantes,
L’un des exemples les plus connus d’interférence est comme de leur mode de production et avec une uti-
celui de la macro-prolactine (macro-PRL) dû à la for- lisation exponentielle. Ces HAAA sont en général de
mation d’un complexe, généralement, immunoglobuline forte affinité et peuvent interférer dans de nombreux
G/prolactine (IgG/PRL) [6]. Cette forme est considé- dosages (marqueurs cardiaques, marqueurs tumoraux,
rée comme inactive du fait de sa faible biodisponibilité hormones thyroïdiennes…) compétitifs ou non com-
due à l’importante masse moléculaire du complexe pétitifs [2,5]. Ces interférences peuvent être positives
et peut s’accumuler en raison de sa plus faible clai- ou négatives en fonction de la spécificité de l’anticorps
rance. La présence de ces complexes, reconnus par les (figure 1B).
AC du dosage, conduit à une fausse élévation de la
concentration de PRL et donc à un risque de diagnostic
erroné d’une hyperprolactinémie. Des études ont mon- Dosages non compétitifs
tré qu’environ 25 % des hyperprolactinémies seraient Ce sont les dosages les plus sensibles à ce type d’inter-
dues à une macroprolactinémie. En cas de suspicion férence. Si l’AC interférent est capable d’interagir avec
d’une macroprolactinémie, il est important de pouvoir les deux AC utilisés pour le dosage, il prend la place de
séparer la PRL monomérique du complexe IgG/PRL. l’analyte et entraîne donc une surestimation du résul-
Pour cela, l’échantillon peut être analysé par chroma- tat. De très nombreux dosages sont sensibles à cette
tographie d’exclusion stérique ou après précipitation interférence (TSH, Tg, hCG, FSH, LH, PTH…). Inverse-
par le polyéthylène glycol (PEG 6000), permettant la ment, si l’AC interférent ne reconnait qu’un seul AC
séparation du complexe IgG/PRL, peu soluble dans le du dosage, il empêche la formation du complexe entre
PEG, de la PRL soluble [2, 5]. l’analyte et les deux anticorps et conduit à un résultat
faussement abaissé.

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Difficultés d’interprétation, pièges diagnostiques

Figure 1. Deux cas de pièges en immuno-analyse par la présence d’anticorps interférant.

© B. Baudin
A B

A. Dans un dosage d’insuline par une méthode sandwich, déplacement de l’insuline liée sur un auto-anticorps par fixation de l’insuline liée aux
AC de la trousse de dosage (AC de capture et AC de révélation) ; la présence d’auto-AC anti-insuline donnera un résultat par défaut.
B. Interférence par des AC humains anti-Ig animales dans un dosage de type compétitif ; la présence de ces AC anti-idiotype donnera un résultat par excès.

Dosages compétitifs l’électrocardiogramme (ECG) ne présente pas d’ano-

Cette interférence est plus rare. Elle peut conduire à
une surestimation de l’analyte dosé lorsque l’AC interfé-
rent se fixe sur le traceur. Quelques cas ont été décrits
concernant les dosages d’hormones thyroïdiennes (T3,
T4) ou de stéroïdes (testostérone) (figure 1A).
Identification et minimisation de
l’interférence
Les fournisseurs de réactifs utilisent désormais différentes
stratégies pour éliminer ou minimiser ces interférences :
ajout de traces de sérum animal de la même espèce que
celle utilisée pour produire les AC réactifs, ajout d’Ig ani-
males dirigées contre les Ig humaines. L’utilisation d’AC
chimériques ou humanisés, ou de fragments d’AC (Fab)
permet également de limiter les interférences de ce type.
Ces stratégies suffisent le plus souvent à éviter ces inter-
férences. Cependant, dans le cas où une interférence sub-
siste, il est possible d’utiliser des réactifs bloquant les AC
hétérophiles, disponibles chez certains fournisseurs.
Anticorps anti-réactifs
L’interférence due à des anticorps dirigés contre cer-
tains réactifs utilisés pour le dosage a également été
décrite. Il peut s’agir d’AC anti-avidine ou straptavidine,
lorsque la technique de dosage utilise une interaction
de la biotine avec l’avidine ou la streptavidine [8].
Quelques exemples sur les dosages
de troponine I cardiaque (TnIc)
◗ cas n° 1
Une dame âgée de 78 ans, ayant déjà présenté des
douleurs cardiaques, est admise au service d’urgences
pour crise douloureuse accompagnée de dyspnée ;
malies ; la TnIc dosée au laboratoire revient très posi-
tive, comme pendant 26 jours après l’hospitalisation
pour surveillance et investigations supplémentaires
(TnIc de 1 à 10 μg/L, N < 0,05 μg/L), puis 19 μg/L pen-
dant deux mois sans autres appels cliniques ou élec-
triques. Les résultats ont été obtenus de trois appa-
reils : RXL-Dimension©, Triage-Biosite© et Stratus CS©,
mais le dosage de la troponine T cardiaque (TnTc)
revient négatif. En absence de contexte électrique
et sans autre appel clinique qu’au premier jour aux
Urgences, ce faux positif de TnIc est évident. Des AC
interférant ont été recherchés : le facteur rhumatoïde
était négatif, la recherche d’AC hétérophiles n’a pas
été fructueuse, par contre la précipitation au sulfate
d’ammonium tout comme celle avec un AC anti-IgG
ont isolé un immun-complexe, confirmé par électro-
phorèse sur agarose à 1,5 %, avec une masse molécu-
laire d’environ 500 kDa [9].
◗ cas n° 2
Une jeune fille de 18 ans consulte aux urgences pour
douleur épigastrique ; l’ECG est normal, la TnIc est éle-
vée sur Stratus CS© (0,7 μg/L, N < 0,05 μg/L) et nor-
male sur Access II© (< 0,05 μg/L). Une interférence est
évoquée ; l’emploi de réactifs bloqueurs d’AC hétéro-
philes lève l’interférence ; l’hypothèse formulée pour
expliquer ce faux positif est de considérer que l’AC
hétérophile (HAMA) simule la TnIc formant des com-
plexes supplémentaires en mode sandwich [10]. Les
macro-complexes semblent fréquents sur des immuno-
analyses en méthode sandwich [11].
◗ cas n° 3
Cas d’un autre faux positif sur la TnIc dosée sur
RXL-Dimension © et Immulite ©, non caractérisé par
l’emploi des réactifs bloqueurs ; en revanche, l’hypo-

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Dossier scientifique
Figure 2. Formation de sandwiches
surnuméraires par des AC anti-isotypes,
© B. Baudin
Situation possible lorsque les deux réactifs de la trousse proviennent
de la même espèce (par exemple deux AC monoclonaux de souris) ;
la présence de ces AC anti-isotypes, dits HAMA dans le cas d’AC de
souris, donnera un résultat par excès.
Figure 3. Courbe de précipitation du
complexe antigène (AG)/anticorps (AC)
dite courbe d’immuno-précipitation
de Heidelberger.
© B. Baudin
Zone I : excès relatif en AC par rapport à l’AG. Les épitopes de
l’AG sont saturés par les paratopes de l’AC. L’immun-complexe
(IC) est de faible taille et précipite peu, principe utilisé dans les
méthodes d’immuno-analyses par immuno-turbidimétrie ou immuno-
néphélémétrie.
Zone II : zone d’équivalence. La proportion en épitopes et en
paratopes est optimale pour former un réseau. L’IC est de grande
taille et précipite, principe utilisé dans les méthodes d’immuno-
analyses par immuno-précipitation.
Zone III : excès relatif en AG par rapport à l’AC. Les paratopes de
l’AC sont saturés par les épitopes de l’AG. L’IC est de faible taille et
précipite peu, phénomène retrouvé dans l’effet crochet.
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thèse d’une interférence par une IgM a été formulée
devant la concentration plasmatique élevée des IgM,
la précipitation d’un immun-complexe au PEG et sa
neutralisation au dithiothréitol (réactif réducteur).
Notons que le test de Waaler-Rose était positif, mais
pour la même raison ce test était peut-être fausse-
ment positif [12].
Conduite à tenir devant
une suspicion d’interférence
La suspicion d’interférence peut venir du clinicien ou
du biologiste (voire du technicien). Voici la conduite à
suivre devant une telle suspicion :
◗ Un dialogue clinico-biologique doit s’engager ; de
bonnes relations préalables et la définition d’une ligne
de conduite commune sont de bon aloi pour favoriser
ces échanges.
◗ Le biologiste doit vérifier le résultat sur un autre
appareil, si possible utilisant un autre anticorps dans
une autre méthode, et peut-être avec un autre prin-
cipe d’immuno-analyse. Il faut bien-sûr avoir pris soin
de conserver des échantillons. Si l’on ne possède pas
plusieurs appareils (ce qui est plutôt fréquent), il faut
s’adresser à des collègues qui possèdent d’autres
types d’analyseurs.
◗ Le biologiste doit tenter d’identifier la cause de l’inter-
férence ; les kits de dosages sont maintenant fournis
avec des réactifs bloqueurs ; il ne faut pas hésiter à
s’en servir. Si le résultat de ce premier test est néga-
tif, cela ne veut pas dire qu’il n’y a pas d’interférence.
Il faut continuer les investigations, en collaboration
avec des collègues et les fabricants des kits. Dans le
cas où la méthode ou le lot de réactifs est suspecté
d’interférences multiples, une signalisation à l’ANSM
doit être faite.
Ces principes de contrôle des interférences doivent
s’appliquer à l’ensemble des méthodes d’immuno-ana-
lyse, certaines, par leur configuration analytique avec
double ou triple anticorps, avec ou sans sandwich, étant
plus susceptibles aux interférences que d’autres.
Interférences par excès
d’antigène ou « effet crochet »
L’effet crochet ou «hook effect» est rencontré dans les
méthodes en sandwich en une étape et des dosages
avec de larges excès d’analytes [13], par exemple pour
les marqueurs tumoraux tels que l’AFP (Alpha-Foeto-
Protéine), hCG, PSA (Prostate Spécifique Antigène),
CA125 (Carbohydrate Antigène 125), et les hormones
polypeptidiques, ACTH, FSH, PRL, ferritine… Il corres-
pond à la situation d’excès d’antigène dans la courbe
de précipitation de Heidelberger (l’immun-complexe
 Dossier scientifique
Difficultés d’interprétation, pièges diagnostiques

se redissout dans les conditions où le réseau tridimen- utilise un tube avec séparateur ou non. Le pH et
sionnel ne peut pas se former) et conduit à une très la force ionique, la concentration en protéines du
forte sous-estimation du résultat (figure 3). On peut milieu tiennent aussi une grande importance dans la
le mettre en évidence en testant plusieurs dilutions du réaction antigène-anticorps. La majorité des immuno-
sérum, le résultat non dilué étant largement inférieur dosages est réalisée sur sérum et ces dosages sont
au résultat du tube dilué, voire très dilué. On limite cet peu affectés par l’hémolyse, la lipidémie ou l’ictère,
effet en réalisant des sandwiches en plusieurs étapes, à la différence de nombreuses autres méthodes de
dans des schémas séquentiels associant des lavages, dosage. Cependant, une hémolyse importante (libéra-
ce qui complique l’automatisation ; on va aussi dimi- tion de protéases) peut avoir des effets très marqués
nuer la prise d’essai et réaliser une pré-dilution, mais pour des analytes très sensibles à la protéolyse, tels
cela diminue la limite de détection. Bien sûr tout cela que l’insuline [15], l’ACTH, la PTH, le glucagon ou
dépend de la qualité des AC, surtout des AC monoclo- la calcitonine et entraîner une sous-estimation des
naux, qui doivent être très affins pour augmenter résultats. Les immuno-dosages sont également peu
la linéarité. Il est conseillé de redoser les sensibles à la lipidémie, à l’exception de la
échantillons lorsque le résultat est dans thyroxine libre, qui peut être sous- ou
une zone à risque (points extrêmes sur-estimée en présence d’acides gras
de la courbe d’étalonnage), donc à Les valeurs libres. Au cours de l’accréditation, le
définir [2, 5]. usuelles des SH FORM 43 demande de préciser
la matrice, la validation sera diffé-
hormones sont rente selon qu’il s’agit de plasma,
Autres types différentes entre plasma de sérum, d’urine, ou encore de
liquide céphalo-rachidien, et
d’interférences et sérum et selon que donc autant de dossiers à rem-
Par des protéines l’on utilise un tube plir que de milieux biologiques
différents. Pour les urines, on doit
de liaison avec séparateur préciser le type d’inhibiteurs de la
Elles peuvent posée problème pour ou non protéolyse utilisé (ex : aprotinine). La
les analytes présent dans le sérum biotine endogène ou exogène interfère
sous forme libre et liée à une protéine sur les dosages avec amplification avidine
de transport (hormones stéroïdes, hormones (ou streptavidine)/biotine, dosages amplifiés
thyroïdiennes, vitamine D…). Les analytes à doser se devenus très courants, tout comme les supplémen-
répartissent entre la fraction libre (forme active) et tations nutritionnelles en biotine (vitamine B8), dont
la fraction liée à la protéine porteuse (albumine, pré- celle des associations multi-vitaminiques. Dans ce
albumine, protéines de liaison spécifiques des hor- dossier scientifique, un article est réservé à ce sujet
mones). Il est plus fréquent de réaliser le dosage des devenu très important [2,5].
fractions libres (formes actives), comme les T3L et
T4L. Dans ce cas, il est nécessaire de maintenir in vitro
les conditions in vivo, pour éviter de déplacer l’analyte
et d’obtenir des résultats faussement augmentés ou
Conclusion
diminués. Il est également important de connaître les
Il existe de nombreuses causes d’interférence en
sources d’interférence, comme la présence d’acides
gras libres qui déplacent la T4 de sa protéine de liaison, immuno-analyse, certaines dues à la présence d’anticorps
la TBG (Thyroxin Binding Globulin) [14]. Le dosage des interférant ou de cross réactants, d’autres à la présence
formes totales nécessite, quant à lui, un déplacement de composants du milieu biologique, ou encore parce qu’il
total de la forme liée, ainsi que d’empêcher la fixation y a trop d’antigène à doser. Au laboratoire de biologie
du traceur sur les protéines de liaison (extraction médicale, on doit savoir prévenir les interférences, les
par un solvant, dénaturation de la protéine de trans- reconnaître et prévoir une démarche à suivre en cas de
port ou ajout d’un compétiteur qui déplace l’analyte, suspicion d’interférence. La norme ISO EN NF 15189
sans être reconnu par l’AC du dosage). Ces dosages demande de signaler les différents niveaux d’interférence
peuvent être rendus difficiles par les variations impor- possible et les difficultés d’interprétation prévisibles. Le
tantes de la concentration de ces protéines de liaison dialogue clinico-biologique est particulièrement important
[2,5].
dans ce contexte ; la détection d’une interférence peut
être l’occasion de nouer ou renouer ce dialogue. QQ
Effet matrice
On sait que les valeurs usuelles des hormones sont Liens d’intérêts : l'auteur déclare ne pas avoir de liens
différentes entre plasma et sérum et selon que l’on d'intérêts.

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES • N° 510 • MARS 2019 65

Dossier scientifique
Points à retenir
◗tLes causes d’interférences et les pièges en immuno-
analyse ont des origines multiples.
◗tLa réaction croisée est liée à la mauvaise spécificité
des anticorps.
◗tLes interférences dues à la présence d’anticorps
anti-analytes ou anti-protéines animales sont les
pièges les plus fréquents en immuno-analyse et on
doit savoir les détecter.
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66 REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES • N° 510 • MARS 2019
◗tL’effet matrice est très prégnant en immuno-analyse ;
le choix du tube de prélèvement et les conditions
de prélèvement conditionnent beaucoup d’examens
utilisant les anticorps.
◗tL’effet crochet est prévisible et doit faire l’objet
d’une adaptation de la méthode d’analyse.
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