BS7 Biotechnologie

Oorzaken polyploïdie
- Fout bij mitose/meiose van een cel
- Colchine toevoegen aan cellen
o Bij mitose: microtubili afgebroken → chromatiden splitsen zich, maar cel deelt zich niet

Voorbeelden van klonen: uit organisme genetisch identieke nakomelingen door ong. voortplanting
- Bij planten: stekken en weefselkweek
- Bij dieren: embryosplitsing → klompje cellen uit bevruchte eicel gesplitst en in baarmoeder geplaatst
- Celkerntransplantatie → gunstige eigenschappen doorgeven aan nakomelingen
- Stamceltherapie → embryo kweken genetisch identiek aan patiënt. Hieruit stamcellen halen en verder
kweken. Er ontstaat een nieuw weefsel die kan worden geïmplanteerd in de patiënt (bv voor genezing)

Recombinant-DNA-techniek: nucleotidevolgorde van DNA in organisme gewijzigd door DNA in te brengen dat
afkomstig is van een ander individu
- Cisgenese: zelfde soort
- Transgenese: andere soort

1. Restrictie-enzymen knipt de geïsoleerde plasmiden open

2. Restrictie-enzym knipt gen eruit
3. DNA-ligase plakt het gen in de plasmide

Gebruikte plasmiden bevatten een marker → checken of recombinant-DNA is opgenomen door bacterie
- Vaak resistent tegen bepaald antibioticum → in voedingsbodem met antibioticum kweken

Bacteriën delen → kloon van bacteriën met recombinant-DNA-plasmide

Geneitsche modificatie met virussen

1. Kopie mRNA (alleen benodigde info) → mRNA uit cellen geïsoleerd die veel van het eiwit maken
2. Reverse-transcriptase gaat langs mRNA-keten en vormt een enkelstrengs DNA-keten
3. DNA-polymerase maakt langs de enkelstrengsketen een complementaire keten
4. cDNA is gevormd met het gewenste gen
5. cDNA kan in plasmide van bacterie/virus worden gebracht

Antisense-DNA
1. kopie van DNA met gen dat code bevat voor ziekteverwekkende eiwit
2. gekopieerde DNA in orgaan brengen dat ziekteverwekkende eiwit produceert
3. langs originele en gekopieerde gen transcriptie → RNA = complementair
4. RNA met elkaar in aanraking op de weg naar de ribosomen → dubbelstrengs RNA → geen translatie

Functie bepalen van gen dmv embryonale stamcellen gen permanent uitschakelen
1. Gen eruit gehaald waarvan je de functie wil weten
2. Een stukje ertussenuit de gen knippen → gen uitgeschakeld
3. Vrijgekomen plaats nieuw gen ingebouwd die resistentie biedt tegen bepaalde antibioticum
4. Knock-outgenen inbrengen in embryonale stamcel dmv membraan poreus te maken (elek. Impuls)
5. Overbrengen naar voedingsbodem met antibioticum → alleen cellen met knock-outgen overleven
6. Stamcellen inbrengen in embryo

Gedeelte van embryocellen bevat knock-outgen → geboren organismen met cellen met knock-out en org. gen
- Deze de hele tijd kruisen = organismen met alleen cellen met knock-out gen
- Als dus de organismen andere eigenschappen hebben dan normaal → dan is dat het functie