Professional Documents
Culture Documents
2022-Chương 4- Tuần 6-7
2022-Chương 4- Tuần 6-7
KHỐI PHỔ
Giới thiệu về khối phổ
Định nghĩa
• Phương pháp phân tích để đo khối lượng phân tử hoặc nguyên tử của mẫu
Giới thiệu về khối phổ
• Các hợp chất khác nhau có thể được xác định duy nhất bằng khối lượng của
chúng
• Khái niệm MS lần đầu tiên được đưa vào thực tế bởi Francis Aston, một
nhà vật lý làm việc tại Cambridge, Anh vào năm 1919
• Những năm 1920 - Máy phân tích khối lượng vùng từ tính và ion hóa tác
động điện tử được giới thiệu
Lịch sử về khối phổ
• 1948-52 - Giới thiệu máy phân tích khối lượng Time of Flight (TOF)
• Bộ lọc ion tứ cực được giới thiệu bởi Wolfgang Paul, cũng là người phát
minh ra bẫy ion vào năm 1983 (đoạt giải Nobel năm 1989)
• Khối phổ hiện nay là một trong những CÔNG CỤ PHÂN TÍCH MẠNH NHẤT
TRONG HÓA HỌC
máy phân tích khối Bộ lọc ion tứ cực khối phổ song song
lượng Time of Flight (Tandem mass
(TOF) (Quadrupole ion trap) spectrometry)
Nguyên tắc của khối phổ
• Đặt nguyên tử hoặc phân tử tích điện trong từ trường hoặc đặt nó vào điện
trường và đo tốc độ hoặc bán kính cong (như dòng điện) của nó so với tỷ lệ
khối lượng trên điện tích (máy phân tích khối lượng)
• Chiều rộng của đỉnh cho biết độ phân giải của thiết bị MS
MW = 28 MW = 28
Nếu chúng ta có độ phân giải 5000 cho một máy khối phổ, chúng ta có thể tách
m/z 49.995 khỏi m/z 50.005, hoặc tách m/z 99.990 khỏi m/z 100.010, hoặc tách
m/z 999.990 khỏi m/z 1000.100 hoặc m/z 9999 khỏi m/z 10010 ( tất cả xuống
một thung lũng 10% giữa hai đỉnh).
Độ phân giải
Các thành phần cơ bản của thiết bị phân tích
• nguồn ion;
• phương pháp phân tích các chùm ion theo khối lượng của chúng tỷ lệ với
điện tích;
• các đầu dò có khả năng đo hoặc ghi lại dòng điện của chùm tia.
Thành phần cơ bản của thiết bị phân tích
Các phương pháp ion hóa khác nhau
Ion hóa hóa học (CI) và Bắn phá nguyên tử nhanh, các loài có trọng lượng phân tử
cao (FAB - Softer)
• Sản phẩm phân ly mang điện của sự phân mảnh ion. Một ion như vậy
có thể phân mảnh thêm để tạo ra các phân tử hoặc nguyên tử mang
điện khác có khối lượng công thức thấp hơn liên tiếp.
• Một điện tử bị loại bỏ để tạo thành ion phân tử tích điện đơn, M+·
• M+· mang năng lượng bên trong dư thừa và có xu hướng phân mảnh
• Mang lại phổ tái tạo nhưng giới hạn MW < 1 kDa
• Hiệu suất ion hóa cao; năng lượng điện tử ~ 20-70 eV; áp suất < 10-5 Torr
Điện tử tác động nguồn ion hóa (EI)
Ion hóa hóa học (CI)
Định nghĩa
• Sự ion hóa electron dẫn đến sự phân mảnh của ion phân tử, điều này đôi khi ngăn cản
sự phát hiện của nó
Chế độ ion âm
• Chuyển proton
• Bắt giữ điện tử
Ion hóa hóa học (CI)
Khử hấp thụ ion hóa
• Vật liệu cần phân tích được trộn với một môi trường bảo vệ hóa học không bay hơi
được gọi là chất nền
• Nó bị bắn phá trong chân không với chùm nguyên tử năng lượng cao (4 - 10 keV).
• Kỹ thuật ion hóa mềm giữ cho phân tử quan tâm hoàn toàn nguyên vẹn
• Làm cho nó có thể phân tích các phân tử lớn thông qua các máy phân tích khối
lượng rẻ tiền như tứ cực, bẫy ion và TOF
Ion hóa dạng tia điện
• Chịu được muối và thành phần không bay hơi • Bị ảnh hưởng mạnh bởi muối và chất tẩy rửa
• yêu cầu 10 µL của 1 pmol/ µL mẫu • yêu cầu < 1 pmol vật liệu, 10-100 µL / phút
ES-MS của Protein
Các bộ phận thiết bị phân tích khối phổ
Các máy phân tích khối lượng khác nhau
Độ phân giải cao nhất, khối lượng chính xác, đắt tiền
Các máy phân tích khối lượng khác nhau
Máy phân tích khối lượng từ tính
TOF drift
region
Giải hấp phụ
của chất nền
Máy phân tích thời gian bay (TOF)
Phương pháp FT
cho phép xác định
đồng thời nhiều khối
lượng ion (hiệu quả)