000-Handout (Print) Ve NMR - Saigon 17-5-2014 A

1. Trình bày được các nguyên lý chính của phổ NMR.
2. Khai thác được các thông tin cấu trúc từ các dữ liệu
phổ học, chủ yếu là từ các kỹ thuật phổ NMR.
3. Trình bày được các dữ liệu NMR trong một văn bản
khoa học để xác nhận cấu trúc của chất nghiên cứu.
4. So sánh được cấu trúc của 1 hợp chất với các cấu trúc
đã được công bố trong các TLTK.
5. Xác định được cấu trúc vài flavonoid đơn giản nhờ các
kỹ thuật phổ NMR khác nhau.
2
• Đây không phải là 1 giáo trình.
Mà chỉ là một số thông tin chuyên môn được sưu tập,
hệ thống lại, tóm tắt lại về 1 phần lãnh vực liên quan.
• Mục đích chính
Tham khảo dùm bạn để giúp bạn đỡ mất thời gian.
Nhớ sử dụng các TLTK (đính kèm, free) để tự nâng cao.
5
• NMR là một lãnh vực đầy thách thức, cần một cơ sở
vững vàng về vật lý-lý thuyết & toán học cao cấp.
• Do tự tìm hiểu lý thuyết, quá ít thực hành, tài liệu này
chỉ là 1 bản thảo sơ sài, đến với các bạn với hy vọng
các bạn sẽ tự update dần dần... để các khóa sinh viên
đàn em có được 1 tài liệu ngày càng tốt hơn.
6
- Xác định cấu trúc hóa học ???
- Cách mô tả một cấu trúc hóa học
bằng các thông số lý - hóa
bằng dữ liệu phổ UV, IR, MS
bằng dữ liệu phổ NMR
8
M = 180
C6H12O6 khác C9H8O4
(Ω = 1) (Ω = 6)
Mannose Aspirin
Glucose
Galactose
 Acid caffeic
Δ’-coumarin
… … ... … … ...
OH
CH2OH
HO COOH HO COOH OH
O
HO
HO OH OCOCH3 HO O O
9
Flavonoid glycosid. C21H20O10 = 432 (Ω = 12)
(270 + 162) (286 + 146)
(222 + 48) aglycon = 270 Glucosyl Rhamnosyl aglycon = 286

(Flavon + 3.OH) (m/z 162) (m/z 146) (Flavon + 4.OH) (222 + 64)
Flavon = 222
* cách gắn 3.OH

120 x 3 cách gắn gluc. 210 cách gắn 4.OH x 4 cách gắn rham.
360 cấu trúc 1200 cấu trúc 840 cấu trúc
n=10 vị trí gắn -OH n! 10!

N= = = 120 cas
k=3 nhóm -OH (n-k!).k! (7!).3! 10
strychnin (C21H22N2O2 = 334)
O O
Phân lập: 1818 (P.J. Pelletier & J.B. Caventou)
128 năm sau !!!
Cấu trúc: 1946 (R. Robinson, Nobel 1947)
Tổng hợp: 1954 (R. Woodward, Nobel 1965)

11
(L.V. Thoi, Ng. Ng. Suong) (Roy & Mukerji, 1958)
OH H
H N
(1970) OH
(A) O O
O
MeNH
O
O H N
(1982) HO
OH O H
(B) O
O MeNH
(Qui Khuong Huu, 1959)

(C47H51NO14 = 853)
1856 : Taxine thô (H. Lucas)
1956 : Taxine gồm ≥ 3 alk #
1967 : tách Taxol tinh khiết
chỉ 4 năm sau !!!
1971 : cấu trúc Taxol.
1988 : bán tổng hợp.
1993 : tổng hợp toàn phần
13
M u tinh khiết
X-Ray NMR NMR IR, UV NMR HR-MS
C u c 3D Mảnh cấu trúc Nhóm chức CxHyOzNt
Σ toàn phần
Mô hình 3D C’.trúc giả định
NMR dữ liệu khác Loại suy So sánh
UV, IR, MS, 2D-NMR TLTK

C u cm i C’.trúc kết luận C u c
14
Hiện nay, bằng các phần mềm chuyên dụng, có thể giải
1 cấu trúc phức tạp (MW >1000 – 3000 Da) rất nhanh,
rất ít đồng phân, độ tương hợp # 100%.
một chút bất tiện: kèm theo máy đo phổ NMR
Search
http://nmrwiki.org>NMR>software
15
Hợp chất (compound, CxHyOzNt ≠ đơn chất Na, Fe, N2 …)
tùy yêu cầu về sự chính xác, có thể được mô tả bằng:
- công thức phân tử (nguyên, thô) C6H11NO3
- công thức khai triển (nhóm chức…) HO-C6H10-NO2
- cấu trúc hóa học (phẳng, 3-D, mô hình phân tử…)
Xác định cấu trúc → mô tả 1 cấu trúc 2-D, 3-D duy nhất,
loại bỏ các dạng đồng phân không phù hợp.
16
1. Bằng dữ liệu phổ UV, IR, MS...
2. Bằng dữ liệu phổ nhiễu xạ đơn tinh thể tia X
3. Bằng dữ liệu phổ NMR (NMR data)
- các giá trị H

- các giá trị C
- các giá trị X (N, P, O...)
- các tương tác quan sát được
17
Flavanonol có 2 C* (C-2 & C-3) sẽ có 4 đồng phân
(2S, 3S) + (2S, 3R)
(2R, 3S) + (2R, 3R)
4' OH
HO 7 O R 1' 3'
2 OH
3
H
2R, 3S 5 4 OH 2R, 3R
OH O H
H2 H2
HO HO
7 8 1' 7 8 1'
9 2 9 2
6 O 6 O
4' 4'
10 4
H3 5 10 4 OH
5
HO OH HO OH
3 3' 3 3'
O O OH
OH
OH
H3
18
• Thường dùng nhất: CxHyNzOt, MW + các giá trị H & C của
từng vị trí cùng (mức độ) tương tác với các hạt nhân lân cận.
• Rất nên có thêm công thức 3 chiều (ax, eq; R, S; cis, trans...)
• Nếu được, nên mô tả thêm bằng các thông số khác như
dạng tinh thể, màu sắc, điểm chảy, độ tan, Rf SKLM, năng suất
quay cực, phổ UV, IR, MS...
19
Liệt kê trong *.doc
20
Liệt kê trong bảng
21
Liệt kê bảng + so TLTK
(kèm hình đồ họa)
22
Ngoài các mô tả cảm quan, hằng số lý – hóa, phổ UV,
IR, MS... một hợp chất gọi là “được xác định cấu trúc” khi:
• xác định được công thức 2-D, 3-D
• xác định được giá trị H & C X của từng vị trí
• xác định được các tương tác 2-D chính
Các dữ liệu này có được nhờ vào:
• phân tích trực tiếp hoặc
• so sánh với các TLTK đáng tin cậy.
10―8 10―7 10―6 10―5 10―4 10―3 10―2 10―1 1 cm 10 cm 102 103 (cm) λ ăng d n
Å 1 nm 1 μm 1 mm 1m
ng radio (RF)
tia γ tia X UV vis h ng ng i (IR) vi ng (microwave)
E = hν ăng d n
108 107 106 105 104 103 102 10 1 cm―1 10―1 10―2 10―3 t ns νg md n
λ λ
vis
400 nm 500 600 700 750 nm

E lớn E giảm dần E rất thấp
tia γ tia X UV IR MW ng ad (RF)
EUV > EIR >> ERF (ENMR)
các điện tử  các hạt nhân

(1H, 13C...)
các nhóm chức

(-OH, C=O, C-O...)
25
• Là các ph. pháp dùng một bức xạ điện từ có năng lượng E
tác động vào 1 hệ thống vật chất, sau đó ghi nhận lại
năng lượng mà hệ thống này phản hồi dưới 1 dạng thích hợp
• Dưới tác động của BXĐT này, vật chất từ trạng thái E0
(E thấp) → trạng thái kích thích E* (E cao).
• Vật chất ở trạng thái E* này kém bền,
có khuynh hướng trở lại trạng thái có E thấp.
26
• Khi trở lại trạng thái E thấp, vật chất giải phóng (trả lại)
năng lượng ΔE dưới dạng bức xạ có tần số  thỏa:
ΔE = (E1 – E0) = h = hc / λ
(hằng số Planck h = 6,63 . 10−34 J.s)
• Bức xạ có tần số  này được phát hiện,

khuếch đại, ghi lại → Phổ hấp thụ f ()
27
• Ở các máy FT, hàng loạt bức xạ E được phát đồng thời
sẽ cho ra 1 loạt tín hiệu dạng FID chồng chất lên nhau.
• Các FID này được ghi theo hàm f (thời gian, biên độ).
• Nhờ phần mềm biến đổi Fourier (FT), các tín hiệu FID
này sẽ được tách ra, biến đổi thành các tín hiệu f().
• Tập hợp các tín hiệu f() này chính là phổ hấp thụ.
Ví dụ phổ kế FT-IR, FT-NMR
Vấn đề ở đây là làm sao chọn được 1 BXĐT có E phù hợp,
“cộng hưởng” được với các dao động của hệ thống này.
28
BXĐT vùng → phổ cộng hưởng còn gọi là
UV UV (quang) phổ UV
IR IR phổ (FT)-IR
RF RF phổ (FT)-NMR
• BXĐT vùng RF (có E và  rất thấp) có thể “cộng hưởng”
với dao động của các “hạt nhân N có từ tính”
→ phổ ộng hưởng ủa h nhân N.
• Do BXĐT này phải cộng hưởng được với 1 từ trường Bo

→ phổ ộng hưởng ừ ủa h nhân (NMR).
29
EUV
các điện tử p, 
(nối đôi, nối đôi liên hợp...)
Phổ UV (lmax, nm)
EIR
các nhóm chức
(-OH, -O-C, O=C<...)
-1
Phổ IR (, cm )
ERF
các hạt nhân có từ tính
trong 1 từ trường mạnh
Phổ NMR (, ppm)
phát tuần tự 3 xung RF, ghi lại tuần tự 3 tín hiệu phổ
tạo ra 3 tín hiệu FID riêng 3 tín hiệu f() hay f()
a
Phổ NMR
100 Hz a
b
b
a
100 Hz c
150 Hz b
c
150 Hz
200 Hz c
200 Hz 200 150 100 Hz
các tín hiệu đơn
các tín hiệu phức
thời gian tần số tăng dần

3 xung RF phát đồng thời, tổ hợp của 3 tín hiệu phổ
tạo ra 3 tín hiệu FID riêng 3 FID f(sec) f() hay f()
 = 1/100 sec Phổ NMR
b
mix
c a
 = 1/200 sec
FT
mix
200 150 100 Hz

 = 1/150 sec
tần số tăng dần
2.1. Hạt nhân trong phổ NMR 2.7. Sự ghép - Hằng số ghép
2.2. Từ trường B trong phổ NMR 2.8. M u đo phổ NMR
2.3. Xung RF trong phổ NMR 2.9. Dung môi đo phổ NMR
2.4. Hạt nhân trong hệ [B // RF] 2.10. Tín hiệu tạp / phổ NMR
2.5. Sự chắn & giảm chắn 2.11. Các loại máy đo phổ NMR
2.6. Độ dời hóa học 2.12. Các kỹ thuật đo phổ NMR
Là 1 phương pháp quang phổ hấp thụ
• đối tượng sử dụng năng lượng: các hạt nhân có từ tính
• yêu cầu của các hạt nhân: được đặt / từ trường mạnh Bo
• yêu cầu về năng lượng E: E thuộc vùng RF (cực thấp)

và cộng hưởng được với Bo
35
Kế qu :
• thu được nhiều dạng phổ + số liệu phổ (spectral data)
của các hạt nhân (C, H, O, N...) trong m u.
• → xác định cấu trúc hóa học của chất khảo sát
Phổ NMR òn nh ều ứng dụng

• MRI (Nuclear Magnetic Resonance Imaging)
• Cơ học chất rắn, chất lỏng...
36
• Nhiều thông tin, chính xác, tin cậy, phân biệt được
• Bắt buộc phải có khi công bố về cấu trúc
• Là một nội dung chính khi viết & đọc TLTK.
• Có thể tiếp cận được
• Sẽ phát triển mạnh ở nước ta
37
R
C O
M O
220 250 300 330 nm
# chromophore → # dạng phổ UV

(phổ UV không phân biệt rõ C vs M)
38
Cùng là Flavonol 3-O-rhamnosid, chỉ khác số nhóm -OH / vòng B
(sự khác biệt trên phổ UV thì không rõ)
4' OH 4' OH
B 3' B 3'
HO 7 O HO 7 O
OH
5
3 O Rhamnosyl 5
3 O Rhamnosyl
OH O OH O
afzelin quercitrin
(344 & 266 nm) (350 & 256 nm)
(sự khác biệt trên phổ IR thì không rõ)
afzelin quercitrin
Phổ 13C-NMR (DMSO-d6, 125 MHz) của afzelin vs quercitrin
DMSO
afzelin = kaempferol-3-O-L-rha





quercitrin = quercetin-3-O-L-rha 
DMSO
41
Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) của afzelin vs quercitrin
afzelin = kaempferol-3-O--L-rha
 
3'
4'
B OH


OH
3' 

4'
B OH
quercitrin = quercetin-3-O--L-rha
42
• Để thông tin về cấu trúc, phổ NMR hữu hiệu hơn so với
- các mô tả bằng phản ứng màu, bằng hằng số vật lý
(dạng tinh thể, màu, mùi, mp, bp, độ tan...)
- các mô tả giá trị Rf (SKLM), Rt (HPLC, GC)
- các mô tả bằng phổ UV, IR
- các mô tả trên phổ khối, ngay cả HR-MS
• NMR có thể phân biệt được nhiều cấu hình, dạng đồng phân
(R/S; cis/trans; ipso/o/m/p; /; vị trí; -COOR/COOH/-CHO...)
• Nếu kết hợp với các phổ khác (nhất là HR-MS): kết quả (+)
A
Z
44
2.1.1. Các hạt nhân đồng vị
2.1.2. Hạt nhân cho/không cho tín hiệu phổ NMR
2.1.3. Tỉ số từ hồi chuyển
2.1.4. Độ nhạy (tương đối & phát hiện) của hạt nhân
2.1.5. Số scan (NS) và độ sạch của tín hiệu (S/N)
Hạt nhân % đồng vị  (MHz/T)  (MHz)
2H 0,015 6,536 61,4
1
1H
1 99,985 42,576 400,0*
13C 1,108 10,705 100,6
6
14N 99,63 3,075 28,9

7
19F 100,0 40,059 376,5

9
31P 100,0 17,235 162,1

15
So với hạt nhân 13C, thì hạt nhân 1H có

• tỉ lệ đồng vị: gấp ~ 90 lần.
• tỉ số từ hồi chuyển : gấp ~ 4 lần.
• tần số cộng hưởng : gấp ~ 4 lần.
B
B
địa từ trường
B
B B B B B B
B
B
B
B B B B B B B B
B
B
B
ngoại từ trường

ë
 
RF RF
DE FID
Bo Bo Bo
 
ë ë
hạt nhân sẽ cộng hưởng hạt nhân đã di chuyển hạt nhân đã cộng hưởng
với xung RF với xung RF
thời gian hồi phục
• thay đổi tùy hạt nhân: của 13C (chậm) >> của 1H (nhanh)
• & tùy tình trạng của hạt nhân (CIV > CH > CH2 > CH3).
càng chậm hồi phục (CIV), tín hiệu sẽ càng khó thấy (thấp)
A B
13C
ec
0,5 s
MA
ec
5s
1H
MB
6kinh
Thời gian hồi phục càng nhỏ → càng mau lặp lại giao động
→ được scan càng nhiều lần → tín hiệu càng rõ (S/N tăng)
→ thời gian đo phổ càng ngắn (phổ 1H-NMR: vài giây)
49
Tỉ ừ h huyển γ (gyromagnetic ratio)
- γ của một hạt nhân A là mức độ đáp ứng đặc trưng
của A với từ trường B. Với 1 hạt nhân A thì γA = const.
- Hạt nhân dễ đáp ứng với B sẽ có γ lớn (1H, γH lớn nhất)
- Hạt nhân kém đáp ứng với B sẽ có γ nhỏ (γC, γN…).
- γA của hạt nhân A có thể diễn tả dưới 2 kiểu đơn vị
(106 rad/s.Tesla) hoặc (MHz/Tesla)
- γA quyết định độ nhạy & vùng cộng hưởng của hạt nhân A
50
γ của hạt nhân → 1H 13C 14N 31P
đ.vị (106 rad/s.T): 267,513 67,262 19,331 108,291
đơn vị (MHz/T): 42,576 10,705 3,077 17,235
Rất lưu ý: (γH/γC) ≈ 4
- với Bo: 1H đáp ứng hơn (nhậy hơn) 13C ≈ 4 lần.

- với RF: 1H cộng hưởng với xung có E ≈ 4 lần so với 13C.
(tần số cộng hưởng ν của 1H gấp ≈ 4 lần so với 13C).

Đó là lý do tại sao ta ghi:
Phổ 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) của strychnin
nhưng phải ghi:
Phổ 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) của strychnin

a. Độ nh y uyệ đ RX ủa mộ h nhân
Một hạt nhân X đơn độc có tỉ số từ hồi chuyển γ thì
sự hiện diện của nó trong không gian 3 chiều (x, y, z)
được coi là độ nhạy tuyệt đối RX của hạt nhân này.
Độ nhạy tuyệt đối RX phụ thuộc theo I & γ:
RX = I.(I+1).γ3
53
b. Độ nh y ương đ ủa mộ h nhân
có thể diễn đạt bằng 2 cách:
b1. RH = độ nhạy tương đối của một hạt nhân đơn độc
so với hạt nhân 1H là RH = (RX / RH)
Ví dụ: Với hạt nhân đơn độc 13C, thì:

RH = (RC / RH), vì 13C và 1H đều có I = 1/2 nên
RH = (γC / γH)3 = (10,705 / 42,576)3 = 0,0159.
13C có độ nhạy tương đối là RH = 0,0159 = 1,59%.
(13C chỉ nhạy bằng 1,59%  1/64 so với 1H)
54
b2. srel = độ nhạy tương đối để phát hiện
= độ nhạy phát hiện của X so với hạt nhân 1H.
Vì đồng vị 13C # 1,108%; 1H # 99,98% (k = 90 lần)

nên so với 1H, hạt nhân 13C có độ nhạy phát hiện là:
srel = RH.(1,108/99,98) ~ (1/64)  (1/90) ~ 1/5760
Trong cùng một điều kiện khảo sát,

hạt nhân 1H “nhạy” hơn 13C ≈ 5760 lần
55
13 1
giả sử đã có sẵn hạt nhân 13C
Độ nhạy tương đối của 13C so với 1H:

srel = (γC / γH)3 ≈ (1/4)3 ≈ (1/64)
giả sử phải đi tìm hạt nhân 13C
Độ nhạy phát hiện của 13C so với 1H:

(1/64) × (1/90) ≈ (1/5760)
(γC / γH) = (10,705 / 42,576) = 0,2514 (25%)
13C “đáp ứng với từ trường” chỉ bằng 1/4 so với 1H.
13C và 1H sẽ cộng hưởng với các RF có tần số νo khác nhau.
* cùng ở Bo= 7,05 Tesla; tần số cộng hưởng νo = γ.Bo của:
- 1H là νo = 42,576 (MHz/T)×7,05 T  300 MHz
- 13C là νo = 10,705 (MHz/T)×7,05 T  75 MHz (1/4 lần)
* cùng ở Bo= 11,75 T; tần số cộng hưởng νo = γ.Bo của:
- 1H là νo = 42,576 (MHz/T)×11,75 T  500 MHz
- 13C là νo = 10,705 (MHz/T)×11,75 T  125 MHz (1/4 lần)

57

I IV V VI VII
H C N O F
2.20 2.55 3.04 3.44 3.98
Li Si P S Cl
0.98 1.90 2.19 2.58 3.16
Si H C N O
1.9 2.2 2.6 3.0 3.5
–Si → CH3: H & C / Me bị chắn (shielded, upfield,  qua phải)

–C  CH3 : H & C / Me không bị chắn
–O  CH3: H & C / Me được giảm chắn (deshielded, downfield)
58
-OMe -NMe CH-Me Si-Me (TMS)
60 40 c ppm 20 0.0
C 2.5 C 2.5 C 2.5 2.5 C
O 3.5 N 3.0 C 2.5 1.8 Si
59
n
p p n p
n
hạt nhân 1H1 hạt nhân 2H1 hạt nhân 3H1

(99,98%) (0,016%) (rất ít)
13C 1H 15N 31P

6 1 7 15
(1.10%) (99.98%) (0.04%) (100%)

12C 2H 14N
6 1 7
(98.9%) (0.016%) (99.6%)

Trong hạt nhân của 1 đồng vị ANZ:
• Mỗi proton, neutron lẻ cặp (p*), (n*) có số spin = 1/2.
• Tổng các số spin này là spin của hạt nhân N (I = k.1/2).
AN
Z (p*) (n*) k=(p+n)* I  (MHz/T)
1H 1 0 1 1/2 42.576
13C 0 1 1 1/2 10.705
31P 1 0 1 1/2 17.235
19F 1 0 1 1/2 40.052
2H 1 1 2 1 6.536
14N 1 1 2 1 3.077
12C, 16O 0 0 0 0 ̶ 61
A
Z
hạt nhân cho tín hiệu NMR không cho tín hiệu
(A và Z không cùng chẵn) (A và Z cùng chẵn)
(I = 1) (I = 1/2) (I = 0)
13C (1.10%) 12C (98.9%)
6 6
2H (0.011%) 1H (99.99%)
1 1
14N (99.63%) 15N (0.37%) 32S (94.93%)

7 7 16
19F (100%) 34S (04.29%)

9 16
31P (100%) 16O (99.76%)

15 8
17O (0.04%) 18O (0.20%)

8 8
/ Bo
vô hướng có định hướng
Kh h nhân N pn=I hì
N hể p n he (2I + 1) hư ng
Với I = 1/2; hạt nhân có thể xoay (spin) theo 2 hướng
(trên dưới) và tạo từ trường dạng hình cầu đồng dạng
(dễ tính toán, dễ nghiên cứu hơn)
® ®
64
Bo Bo
Bi
Beff Beff
Có 3 “dạng” từ trường chính liên quan đến việc nghiên cứu NMR:
• ngoại từ trường Bo (do nam châm cung cấp, ổn định)
• nội từ trường Bi (do điện tử xoay & tạo ra, ngược chiều Bo)
• từ trường hiệu dụng Beff (thực tế còn tác dụng lên hạt nhân)
Beff = (Bo – Bi) = Bo (1 – σ)
σ = hằng số chắn; thay đổi tùy loại & tùy vị trí của hạt nhân
• Cường độ của ngoại từ trường Bo
• Cách tạo ra ngoại từ trường
- bằng nam châm vĩnh cửu
- bằng nam châm siêu d n
• Sự cộng hưởng giữa Bo // xung RF
• Sự ổn định & đồng nhất của Bo
66
Máy đo phổ NMR có từ trường Bo mạnh gấp
- hàng ngàn lần nam châm thông thường
- vài trăm ngàn lần từ trường bề mặt trái đất
sóng bề mặt nam châm máy MRI máy NMR

não người trái đất thường y khoa 500 MHz
10−9 G 0,5 G 0,12 kG 1 -70 kG 117,5 kG

50 μT ≈ 12 mT ≈ 12 T
1 Tesla (T) = 10 kG = 104 gauss (G).
67
A. Từ trường do nam châm điện
• Cường độ thường < 2,35 Tesla (# RF 100 MHz).
• Do tỏa nhiệt: từ trường không ổn định.
• Hiện ít sử dụng / máy đo phổ NMR.
B. Từ trường do nam châm siêu d n (superconducting)

• tạo bởi 1 hệ nam châm siêu d n (điện trở ≈ 0).
• làm lạnh bởi hệ kép (N2 lỏng + He lỏng)
• cường độ rất mạnh (đã có máy 1 GHz # 23,5 T)
• từ trường cực kỳ ổn định (ΔBo << 0,1 phần triệu)
68
* Ngoại từ trường (Bo) do máy cung cấp
* Nội từ trường (Bi, từ trường cảm ứng, ngược chiều Bo)
do lớp điện tử bên ngoài hạt nhân xoay và tạo thành.
* Từ trường Bi thì tỉ lệ thuận với Bo và thay đổi tùy theo
mật độ (dày đặc / loãng) của đám mây điện tử này.
* Mật độ điện tử  khả năng chắn của đám mây điện tử
được biểu thị bằng đại lượng σ, với Bi = σ.Bo
* Ngoại từ trường thực sự còn tác động vào hạt nhân = Beff:
Beff = (Bo – Bi) = Bo – σ.Bo = Bo (1 – σ)

Hạt nhân N (có I = 1/2) khi ở trong ngoại từ trường Bo sẽ
a. phân bố lại dân số Nα & Nβ theo ph. trình Boltzmann
(Nβ / N) = e –(DE/kT)
(hằng số k = 1,381.10−23 J/K; T: nhiệt độ tuyệt đối)
Ví dụ ở Bo= 5,87 Tesla, T=298 K;

2 trạng thái (-) của 1H có:
ΔE = (γh/2).Bo = 1,66  10−25 J

và (Nβ/N) = 0,99996 ~ 1
Hạt nhân N (có I = 1/2) khi ở trong ngoại từ trường Bo sẽ
b. tạo ra 1 nội từ trường cảm ứng Bi

• có cường độ Bi = σ.Bo (σ : hằng số chắn)
• gần tâm hạt nhân: Bi ngược chiều Bo
• làm giảm Bo → Beff = (Bo – Bi) = Bo (1 − σ)
từ trường cảm ứng

Bo Bi Bo
H3C−OOC−CH−CH2−CH3
−
OH
Vì mỗi hạt nhân ở 1 môi trường khác nhau (khác σ)

→ chịu tác động của một từ trường Beff khác nhau
→ có 1 giao động riêng, cho 1 tín hiệu FID có  riêng
 = (γ/2) . Bo(1−σ)
Phổ (spectrum)
Vì chỉ chịu tác dụng của 1 ngoại từ trường Bo duy nhất;
nếu không có sự giảm chắn tại chỗ (Bi), thì các hạt nhân
• (H-1, H-2, H-n...) đều cho cùng 1 tín hiệu trên 1H-NMR
• (C-1, C-2, C-n...) đều cho cùng 1 tín hiệu trên 13C-NMR
Phổ NMR không còn thú vị nữa.
73
Vì các hạt nhân này ở các môi trường khác nhau
→ σ khác nhau → Bo (1 – σ) = Beff khác nhau
→ các hạt nhân bị chắn / giảm chắn khác nhau
→ các hạt nhân cho tín hiệu ở các tần số khác nhau
→ các H khác nhau hoặc các C (ppm) khác nhau
T ổ hợp á ín h ệu khá nhau (Phổ NMR)
74
4 C cùng ở trong 1 từ trường Bo như nhau
HOOC CHOH CH2 CH3
nhưng 4 C có 4 độ giảm chắn σ khác nhau
nên 4 C ở 4 mức từ trường Beff khác nhau
sẽ cộng hưởng với 4 mức E khác nhau
để cho ra 4 FID có  khác nhau
biến thành 4 tín hiệu (phổ) có  khác nhau

75
với 1H (có γ = 42,576 MHz/T)
νH (MHz) 100 200 300 400 500 600 MHz
Bo (Tesla) 2,35 4,70 7,05 9,40 11,75 14,10
νC (MHz) 25 50 75 100 125 150 MHz
với 13C (có γ = 10,705 MHz/T)
Một máy NMR có Bo = 11,75 T sẽ cộng hưởng với:

• 13C ở vùng tần số RF ~ (125  Δν) MHz.
• 1H ở vùng tần số RF ~ (500  Δν) MHz.
→ Máy NMR 500 MHz (gọi theo vo của 1H)

76
Nếu Bo không ổn định hoặc không đồng nhất thì
dù ΔBo rất nhỏ → sai số Δ cũng sẽ lớn.
→ tần số cộng hưởng  của tín hiệu thu được sẽ thay đổi nhiều
vì  = (γ/2).Bo → (Δ/) = (ΔBo/Bo) → Δ = .(ΔBo/Bo)
nếu ΔBo = (10−6 Tesla) (ví dụ: 2,350000 - 2,350001 Tesla)

• ở máy 100 MHz (2,35 Tesla):
Δ = (100.106) × (10-6 / 2,35) = 42,5 Hz = 0,425 ppm
• ở máy 500 MHz (11,75 Tesla):
Δ = (500.106) × (10-5 / 11,75) = 42,5 Hz = 0,085 ppm
77
• Lưu ý: Sai số ΔBo thường do m u không đồng thể
(bad shimming, hòa tan không hết, lợn cợn, đục...)
broad, overlapped shaped
ΔBo lớn → Δ lớn ΔBo nhỏ → Δ nhỏ

2.3.1. Cường độ của xung RF
2.3.2. Thời lượng phát xung RF
2.3.3. Cách phát xung (rời + liên tiếp hay loạt xung)
2.3.4. Trình tự xung (chuỗi xung, pulse sequence)
2.3.5. Vai trò, ảnh hưởng của tần số xung RF
79

.h .B 
DE = h. = o = .Bo  = k.Bo
2 2
80
Máy FT-NMR có Bo cực mạnh (> 10 Tesla)
thì ΔE cũng chỉ < 1 cal/mol (<<< UV, IR)
ΔE của vùng: UV: 105 - 107 cal/mol

IR: 103 - 104 cal/mol
RF: < 1 cal/mol (cực thấp).
1 cal = 4,184 J # 4.10-3 kJ.

81
Có thể tạo sự cộng hưởng
(duy trì tương quan o = Bo.γ/2)
bằng 3 cách
1. cố định tần số RF, thay đổi dần từng từ trường Bo
(quét trường, continuous wave = CW-NMR)
2. cố định từ trường Bo, thay đổi dần từng tần số RF
(quét xung, continuous wave = CW-NMR)
3. cố định từ trường Bo, dùng 1 loạt xung RF đồng thời.
(Fourier Transform, FT-NMR)
82
Nếu thời lượng phát xung RF là t, thì các xung phát ra
sẽ là 1 giải tần số xung quanh n hủ F này.
từ (F + 1/t) Hz → (F – 1/t) Hz.
(1/t được gọi là bandwidth of pulsed RF)
Nếu t rất bé → (1/t) rất lớn, giải tần số RF quét m u
sẽ rất rộng → đủ để kích thích mọi hạt nhân trong m u.
83
Thời lượng phát xung (pulse duration) ngắn (1−100 μs)
sẽ tạo được 1 giải tần số (frequency range) rộng đủ
để tác động đến mọi hạt nhân (có I ≠ 0) trong m u.
Thời lượng phát xung dài (1 msec−1 sec) chỉ tạo được
1 giải tần số hẹp, không đủ tác động đến mọi hạt nhân
(có I ≠ 0) trong m u.
Máy 500 MHz: 13C cần band rộng 30 KHz; 1H cần band 7 KHz.
10 μs
10 KHz
50 μs
10 KHz
100 μs
10 KHz
200 μs
Máy 500 MHz: 13C cần band rộng 30 KHz; 1H cần band 7 KHz.
Có 2 cách phát xung RF (tần số  Hz)
* Phát liên tiếp từng xung rời (continuous wave, CW-NMR)

ví dụ - mỗi giây phát 1 xung có tần số nhất định  Hz
- hai xung liên tiếp có Δ = 1 Hz (# tốc độ 1 Hz / s)
* Phát chớp nhoáng hàng loạt xung có  thay đổi (FT-NMR)
Cùng 1 thời điểm, phát chớp nhoáng (<< 1 sec) hàng loạt xung.
Bề rộng của băng xung (PW) được tính sao cho mọi hạt nhân
(có thời gian hồi phục khác nhau) đều cộng hưởng được với 1
xung nào đó.
Với máy 500 MHz, PW đối với hạt nhân 13C và 1H thì khác nhau:
13C: PW # 240 ppm x 125 MHz = 30000 Hz
1H: PW # 14 ppm x 500 MHz = 7000 Hz
Dùng tuần tự từng tần số để quét (trong khi Bo cố định)
Tốc độ quét (scan) thường ≤ 2 Hz/sec
Khuyết điểm chính:
1. chậm (ví dụ đo 1H-NMR từ 0 − 12 ppm, máy 100 MHz):
scan 12 ppm # 1200 Hz # 600 sec = 10 phút
cần đến ≈ 10 phút cho 1 lần scan đủ 12 ppm (NS = 1)
2. khó tăng S/N
S/N tăng k lần, số scan (NS, thời gian) tăng k2 lần !
nếu S/N tăng 10 lần, thời gian tốn 100 lần (1000 phút)
87
Dùng đồng thời hàng loạt tần số để quét (Bo cố định)
Tốc độ quét (scan) thường << 1 Hz/sec
Ưu điểm chính:
1. nhanh (ví dụ đo 1H-NMR từ 0 − 12 ppm, máy 500 MHz):
scan 12 ppm < 1 sec (NS = 1); < 16 sec (NS = 16)
2. dễ tăng S/N
S/N tăng k lần, số scan (NS, thời gian) tăng k2 lần !
88
Với máy 300 MHz, để đo phổ 1H-NMR (bề rộng phổ # 15 ppm =
4500 Hz), cần phải quét m u bằng các xung RF có tần số (Hz)
thay đổi dần dần; ví dụ ở tốc độ 1 Hz/sec (Δ = 1 Hz).
- Ở máy CW-NMR 300 MHz, nếu quét từng xung với tốc độ 1
Hz/s → cần 4500 sec cho 1 lần quét đủ 4500 Hz (NS = 1).
→ 36000 s (10 giờ) cho 8 lần quét đủ 4500 Hz (NS = 8).
Lưu ý: mất 10 giờ để đo 1 phổ có độ phân giải thấp (1 Hz)
- Ở máy FT-NMR 300 MHz, với độ phân giải này (Δ = 1 Hz),
cần < 1 sec cho 1 lần quét 1 loạt xung 4500 Hz (NS = 1).
→ cần < 8 sec cho NS =8 (nhanh gấp > 4500 lần !)
Phổ 1H-NMR, PW ~ 15 ppm / máy 300 MHz → PW ~ 4500 Hz.
• CW-NMR: ṽ = 1 Hz/sec → 4500 sec (NS 1) → 10 giờ (NS 8)
• FT-NMR : → < 1 sec (NS 1) → < 8 sec (NS 8)
4500 Hz 3750 3000 2250 1500 750 0 Hz
CW
FT
iS
S/N = √NS = k√NS = k’ √t S/N = k.[C m u]
iN
S/N
[C]
8 16 32 64 NS = 128
8 16 32 NS = 64 NS = 128
Để S/N tăng n lần, có thể:

muốn S/N tăng 10 lần,
• tăng nồng độ m u n lần, or
th.gian lâu gấp 100 lần
• tăng NS (thời gian t) n2 lần.
Phổ 13C-NMR Phổ 1H-NMR
128, 256, 512, 1024... 8, 16, 32, 64...
Đồng vị 13C # 1.1%; còn đồng vị 1H # 99.98% !

92
Số scan (NS) quá nhỏ: tín hiệu chưa chuẩn.
Phổ 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, NS = 1) của zerumbon
NS = 1
doublet triplet
saukinh-2012
1H-NMR (pyridin-d5, 500 MHz, NS = 16)
Phổ 1H-NMR, chỉ cần NS = 16; tỉ lệ S/N đã rất lớn (đường nền mịn)
94
Phổ 13C-NMR, NS lớn nhưng S/N v n kém
CDCl3
NS=256
S/N bé
DMSO-d6
NS=1024
S/N 
B1 B2 B3
D
RF-3 A
RF-2
RF-1
DE-1 DE-2 DE-3

B
DE-1
DE-2
DE-3 A
B1 B2 B3 D
96
A¯ A¯
B¯ B¯
ΔE ΔEA = hνA ΔE ΔEB = hνB
¯ ¯
B B
¯ ¯
A A
BX BA BX BB
97
A¯
ΔE
B¯
nhiều xung RF
ΔEB = hνB ΔEA = hνA
được phát đồng loạt
¯
B
¯
Bo A
chỉ có một số xung cộng hưởng được

với các hạt nhân A, B... của hệ thống
98
Cùng với thuật toán FT, lý thuyết về pulse sequence chính là
phần tinh hoa của phổ tương tác đa chiều (2D-, 3D-NMR).
Đây cũng là phần dễ... nản nhất, vì nó được xây dựng trên 1
nền tảng toán học cao cấp (cơ học sóng, lượng giác, đa tích
phân, hàm số ảo...).
Không thể nghiên cứu sâu về NMR

nếu không nắm vững các vấn đề này (kmn!)
Tuy nhiên, không nắm vững các vấn đề này thì v n có thể...
tạm sử dụng phổ NMR để giải cấu trúc được.
99
Quyết định loại phổ sẽ ghi được (13C-CPD hay DEPT, COSY...)
tự tham khảo, bảo trọng !!!
Một tài liệu cần thiết (online):

(Hans J. Reich, 2013)
Structure Determination Using Spectroscopic Methods
http://www.chem.wisc.edu/areas/reich/chem605/index.htm
100
2.4.1. Ảnh hưởng của từ trường với hạt nhân
2.4.2. Ảnh hưởng của xung RF với hạt nhân
Trên một hạt nhân,
• một xung RF chỉ cộng hưởng được với 1 từ trường duy nhất.
• một từ trường chỉ cộng hưởng được với 1 xung RF duy nhất.
RF2  ( ̶ ½)
RF1
γ.h
E ΔE = Bo
2
 (+½)
0
B1 B2 Bo
xung RF1 xung RF2 102

B1 B2 B3 B4
D
D4
RF-3
D3 A
RF-2 A4
D2
RF-1 D1 A3
A2
A1 DE-1 DE-1 DE-2 DE-3
B
0
A1
A2
D1 A3
DE-1
DE-2 D2
A4
D3
DE-3 A
D4
B1 B2 B3 B4 D
103
undulatin
500 MHz
60 MHz
104
Phổ 13C-CPD (CDCl3, 200 vs 100 MHz) của Strychnin
(1,7 mg/ml; đều ở NS 1024; thời gian đo: 40 phút)
NS 1024
200 MHz
100 MHz NS 1024
(S/N) trên ~ 10 lần (S/N) dưới

105
100 MHz: same s/n: 4000 min!
o
νo = (γ/2).Bo
Với 1H (γ = 42,576 MHz/T)
νH (MHz) 100 200 300 400 500 600 MHz
Bo (Tesla) 2,35 4,70 7,05 9,40 11,75 14,10 Tesla
νC (MHz) 25 50 75 100 125 150 MHz
Với 13C (γ = 10,705 MHz/T)
106
500 MHz 400 300 200 100 0 MHz
500 470.4 MHz 202.4 125.7 50.7 MHz
1 19 31 13 15
H F P C N
1H ≈ 500.000.000 Hz → 500.007.000 Hz
(Δv = 7.000 Hz # 14 ppm)
13C ≈ 125.700.000 Hz → 125.730.000 Hz

(Δv = 30.000 Hz # 240 ppm)
500 MHz 400 300 200 100 0 MHz
kênh 1H kênh 13
C
500.000.000 − 500.007.000 Hz 125.700.000 − 125.730.000 Hz

1 ppm = 500 Hz 1 ppm ~ 125 Hz
14 ppm = 7.000 Hz 240 ppm ~ 30.000 Hz
• Tín hiệu của 1H và 13C được phát hiện trên 2 kênh riêng biệt.
(các xung thuộc kênh 1H không thể cộng hưởng với hạt nhân 13C)
• Trên máy 500 MHz, tần số cộng hưởng tối đa của 13C cũng chỉ vào
khoảng 125.730.000 Hz (không thể lọt vào kênh của 1H!)
108
1. Khi chỉ có nội từ trường: Hạt nhân hỗn độn, vô hướng
2. Khi có ngoại từ trường Bo đủ mạnh:
Hạt nhân (I = 1/2) sẽ định hướng  hoặc β (N > Nβ)
3. Khi phát xung RF có E = h thích hợp:
DN sẽ hấp thu năng lượng E = h, d.chuyển lên mức β.
4. Khi ngắt xung RF đột ngột:
DN sẽ trở về mức  và giải phóng năng lượng (E = h)
dưới dạng 1 giao động tắt dần theo thời gian (FID)
5. Phát hiện, khuếch đại và ghi lại FID → tín hiệu phổ.
109

Bo
trạng thái -spin, E cao
hấp thu ΔE giải phóng ΔE FID tín hiệu phổ NMR
trạng thái -spin, E thấp

110
Bo Bo
Bi
Beff Beff
Beff = (Bo – Bi) = Bo (1 – σ)
Bi càng nhỏ → Beff càng lớn → tần số cộng hưởng  càng lớn
→  (ppm) càng lớn (= càng qua trái, downfield)
deshielded normal shielded
loãng hơn bình thường dày đặc hơn
L A D
Bb Bo Ba Bo Bc
Bi thấp Bi cao
(downfield) Ba (upfield)
112
-OMe -NMe CH-Me Si-Me (TMS)
60 40 c ppm 20 0.0
C C C C
O N C Si
113
vùng tăng chắn
R HO OMe
vùng vùng vùng vùng
giảm C O giảm giảm HO CH3 giảm
chắn chắn chắn chắn
H 9 – 10 ppm H H H
H 7 – 8 ppm
vùng tăng chắn vùng giảm chắn
R H
vùng vùng vùng vùng
giảm giảm tăng R C C H tăng
C C
chắn chắn chắn chắn
H 5 – 7 ppm H H H 2 – 3 ppm
vùng tăng chắn vùng giảm chắn
• Khi 1H ở vùng giảm chắn (+): giá trị H sẽ tăng

• Khi 1H ở vùng tăng chắn ( ̶ ): giá trị H sẽ giảm
Dọc trục là vùng giảm chắn (H tăng)
̶ H
+
H ̶
̶ OH+ 
H
H
+ H ̶
̶ H
H ̶
Heq > Hax
116
117
Proton Br – CH2 – CH2 – CH3
H (ppm) 3.30 1.69 1.25
Hợp chất CHCl3 CH2Cl2 CH3Cl CH4
H (ppm) 7.27 5.30 3.05 0.23
CH3X CH3F CH3OH CH3Cl CH3Br CH3I CH4 (CH3)4Si
X= F O Cl Br I H Si
X 4.0 3.5 3.1 2.9 2.6 2.1 1.8
δH (ppm) 4.26 3.40 3.05 2.68 2.16 0.23 0 ppm

Khái niệm: là 1 đại lượng đặc trưng cho vị trí của tín hiệu
• UV, IR: λmax (nm), ṽ (cm-1)
• TLC, LC, GC: Rf, Rt (min)...
• NMR:  (Hz) hay  (ppm)
Độ dời hóa học khi tính bằng  (Hz) có nhiều bất tiện:
• thay đổi theo tần số làm việc của máy
• rất khó thống nhất với độ chính xác cao
• rất khó công bố & tham khảo, so sánh
Cần được biểu diễn độc lập với tần số làm việc của máy.
Định nghĩa độ dời hóa học theo thang  (ppm)
( của peak) − ( của chuẩn) (Hz)

 (ppm) =
( làm việc của máy) (MHz)
Độ dời hóa học của hạt nhân 1H, 13C là H , C (ppm)
Chuẩn thông dụng trong NMR là tetramethylsilan (TMS)
Me
• 4 C chỉ cho 1 tín hiệu mạnh duy nhất.
Me Si Me
• 12 H cũng cho 1 tín hiệu mạnh duy nhất.
Me
Tín hiệu  của chuẩn được chỉnh =  làm việc của máy
• hạt nhân 13C trong chuẩn TMS có C = 0,000 ppm
• hạt nhân 1H trong chuẩn TMS có H = 0,000 ppm
Tín hiệu H của 1H (còn sót) trong dung môi DMSO-d6 :
H = 1.000 Hz (máy 400 MHz)
H = 1.250 Hz (máy 500 MHz)
H = 1.500 Hz (máy 600 MHz)
H sẽ phức tạp khi tần số làm việc là 400.001.240 Hz!
• Do đã được “chia cho tần số làm việc”

nên H độc lập với tần số làm việc của máy.
• Khi đó, 1H (còn sót) trong DMSO-d6 có H  2,50 ppm
(bất kể đo bằng máy bao nhiêu MHz)
121
• Δ (Hz) thay đổi theo  làm việc của máy đo.
• X (ppm) không thay đổi theo  làm việc của máy đo.
800 Hz 400 Hz 0 Hz
Δν
máy
100 MHz
8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0 ppm
1600 Hz 800 Hz 0 Hz
Δν
máy
200 MHz
8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0 ppm
2400 Hz 1200 Hz 0 Hz
Δν
máy
300 MHz
8.0 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0 ppm

122
Lưu ý: (Tần số làm việc của máy) ≠ (Tần số máy)
* T n máy ( n h ế kế ủa máy)

Được tạo ra sao cho phù hợp với từ trường Bo cố định của máy.
(máy có B = 11,75 Tesla sẽ có tần số máy là 500 MHz)
* T n làm v ệ ủa máy gọi theo  cộng hưởng với 1H
Là vùng tần số cộng hưởng được với hạt nhân đang khảo sát
Với máy “500 MHz”: thì tần số cộng hưởng
• với 1H trong chuẩn TMS là 500.001.000 Hz * đo đến ~H 20 ppm
• với 13C trong chuẩn TMS là 125.700.000 Hz * đo đến ~C 240 ppm
• với 1H # 500 MHz (vùng 500.001.000 đến 500.011.000 Hz)
• với 13C # 125 MHz (vùng 125.700.000 đến 125.730.000 Hz)
123
Hạt nhân 1H và 13C có 2 vùng cộng hưởng khác hẳn nhau.
Nói nhóm –CH3 có C 10 ppm không có nghĩa là xung RF này
cho cộng hưởng với proton nào đó có H 10 ppm trên phổ 1H.
Ví dụ: khi đo trên “máy NMR 500 MHz”...
Phổ 13C (125 MHz) Phổ 1H (500 MHz)

C/CH3: 125.772.300 Hz H/X: 500.006.600 Hz
C/TMS: 125.771.050 Hz H/TMS: 500.001.600 Hz
Δ = 1.250 Hz Δ = 5.000 Hz
C = (1250/125) = 10 ppm H = (5000/500) = 10 ppm 124
X sẽ deshielded () khi mật độ è quanh X bị giảm đi.
(giảm chắn, Bi giảm, Beff tăng, o tăng;  tăng, downfield)
Ví dụ: C aromatic, C nối đôi, C gắn O, N, S (O.N.S > C)
X sẽ shielded (→) khi mật độ điện tử quanh X tăng lên.
(bị chắn, Bi tăng, Beff giảm, o giảm;  giảm, upfield)
Ví dụ: C gắn Si (C > Si, điện tử bị hút về phía C)
125
• Khi giá trị  tăng (qua trái) : deshielded (cũ: downfield)
• Khi giá trị  giảm (qua phải): shielded (cũ: upfield)
a b c d e f gh
ppm
downfield so với d upfield so với d

* Ngoài thang  ppm, xưa còn dùng thang  = (10 − ) ppm
* Ngoài Tetra Methyl Silan (TMS), đôi khi còn dùng các chuẩn:
• DSS-d6 = (2,2-Dimethyl-2-Silapentan)-5-Sulfonat−d6
• TSP-d4 = sodium 3-Trimethyl Silyl Propionat−d4
* DSS, TSP thường được dùng khi dung môi đo là nước (D2O)
13
Vì 13C-NMR thường được giải ghép với 1H; nên không còn
tương tác 13C – 1H; chỉ còn thấy tương tác 13C – D (2H).
Mà 2H (có I = 1) chỉ chiếm 0.02% trong m u, nên cũng ko
thấy được các tương tác C-D trên phổ 13C-NMR của m u.
Ví dụ: Khi d.môi đo là [99.98% CDCl3 + 0.02% CHCl3].

Ta chỉ thấy tương tác [13C–D] của CDCl3 / d.môi đo.
Số đỉnh của C/CD1Cl3=(2n.I + 1)=(2.1.1 + 1)= 3 (triplet)

triplet này có dạng (1:1:1) [với 1H: triplet dạng (1:2:1)]
129
13
Quy ắ m = (2.I.n + 1)
• Khi I = 1/2 → m = (n + 1); đã khảo sát, xem ở trên.

• Khi I = 1 → m = (2n + 1); n là số D gắn vào Carbon
Như vậy, trên phổ 13C-NMR, số đỉnh của CDn sẽ là:
CDCl3 : (n = 1) → m = 3 (77.0 ppm)

CD2Cl2 : (n = 2) → m = 5 (53.8 ppm)
O=S(CD3)2 : (n = 3) → m = 7 (39.5 ppm)
130
13
2H = D có I = 1; một 13C ghép với n.D sẽ có

số phân đỉnh là m = (2.n.I+1) = (2n + 1) đỉnh.
n (2nI + 1) tỉ lệ cường độ ví dụ
0 1 1 
1 3 1 1 1 CDCl3
2 5 1 2 3 2 1 CDCl2
3 7 1 3 6 7 6 3 1 DMSO-d6
Khi ghép với n.D (có I = 1), cường độ các phân đỉnh
của tín hiệu 13C không còn tuân theo “tam giác Pascal” 131
1
Tùy theo số lượng các H lân cận với Ha, Ha sẽ có dạng:
* đỉnh đơn (s, singlet) * đỉnh ba (t, triplet)

* đỉnh đôi (d, doublet) * đỉnh bốn (q, quartet)
* ngoài ra còn dd, ddd, dddd, dt, dq, tq, multiplet (m)
Đây là sự phân đỉnh (splitting).
Độ bội (multiciple) của các đỉnh = số đỉnh (1, 2, 3, 4…)
Nếu ở gần n “1H tương đương” (1H có I = 1/2)

một tín hiệu sẽ bị chẻ thành (2.I.n + 1) = (n + 1) đỉnh
132
1
a. về số đỉnh: tuân theo luật (n + 1)
số đỉnh = (số H* lân cận + 1)
b. về cường độ: khi I = 1/2: theo luật “Tam giác Pascal”
* doublet: (1 : 1)
* triplet: (1 : 2 : 1) với hạt nhân có I = 1/2
* quartet: (1 : 3 : 3 : 1)
c. về khoảng cách giữa các đỉnh = hằng số ghép J
J = ΔH × tần số đo

(Hz) (ppm) (MHz)
s
6,97 s 6,74 s
H5 H4
HO H3
H-5 H-8
HO O O H-3
H8
H-4
7,84 dd (9,5 Hz) 6,15 dd (9,5 Hz)

H8
HO O
7
H6
H5 O
2.0 Hz
8.5 Hz
→ H-6
2.0 Hz
2.0 Hz → H-8
8.5 Hz → H-5
O O
Ha Hb
d (2.0 Hz) d (8.5 Hz)
HO Hc
dd (8.5, 2.0)
B
138
2 doublet sát nhau → chồng nhau → tạo dd (triplet-like)
139
1 proton methin (>CH-) và 2 nhóm -Me có cùng J =7.0 Hz
(ở 500 MHz, từng cặp tín hiệu kế cận đều có ΔH = 0.014 ppm)
(doublet)
Me
(septet)
CH COOR
Me
140
>CH–CH3 CH3–CH2− >CH–CH3
H H H
1 1 1 2 1 1 3 3 1
1 spin → 2 kiểu 2 spin → 22 = 4 kiểu 3 spin → 23 = 8 kiểu

(2 mức E) (3 mức năng lượng) (4 mức năng lượng)
doublet triplet quartet 141

(dt) doublet of triplets (q) quartet
vài dạng dd (doublet of doublets)
 
 
 
E max E min
 
homotopic enantiotopic diastereotopic
Ha
CH2 CH3
H Hb
O Me C Ha Me C C Me
CH2 CH3 Cl Br Ha
(H) (E) (D)
2 CH2 cho 1 tín hiệu Ha, Hb

2 CH3 cho 1 tín hiệu cho 2 tín hiệu
2H cho 1 tín hiệu khác nhau
145
3 2 1
CH3 – CH2 – CH2 – NO2
2 methylen này thì khác nhau
1. [2 H /1-CH2] thì tương đương; cho 1 tín hiệu

và tín hiệu này là triplet (vì gần 2 H* của CH2)
2. [2 H /2-CH2] thì tương đương; cho 1 tín hiệu (tq)
(vì gần 2 H* của CH2 và 3 H* của CH3) *
3. [3 H /CH3] thì tương đương; cho 1 tín hiệu triplet
(vì gần 2H tương đương của 2-CH2)
146
• khi các H-n tương đương
proton ghép với → dạng

a b 3 × Ha 2 × Hb triplet (J)
CH3 CH2 OH
2 × Hb 3 × Ha quartet (J)
• khi các H-n không tương đương
H- ghép với H- → dạng

H 1a 1a 1e, 2a dd
H 3a 1e
O
1 H 1e 1a, 2a dd
3 2 OH
HO 2a 1a, 1e, 3a m*
H 2a
3a 2a d
147
Hc Hb Ha
C C C
Jba Jba
Jbc Jbc Jbc


c b a
148
Sự hành dd ủa H / me a n y en
Me Cl
CH CH c
b d
Me CHCl2
Hc ghép Hb → Hcb và Hbc

Hcb ghép tiếp Hd → Hcbd và Hdcb (d)
Hbc ghép tiếp Hd → Hbcd và Hdbc (d)
Kế qu : H là dd 149

NO2 – CH2 – CH2 – CH3
(c) (b) (a)
• Nếu đo ở 100-300 MHz [máy thấy proton (c) # (a)]

2H/(b) ghép với 5 proton “tương đương”
2H/(b) sẽ cho m = (5 + 1) = 6 đỉnh.
• Nếu đo ở 500-600 MHz [máy thấy proton (c) ≠ (a)]

2H/(b) ↔ 2H/c → (2 + 1) đỉnh,
rồi ↔ 3H/a → (2 + 1) x (3 + 1) đỉnh
2H/(b) sẽ cho m = 12 đỉnh (dạng qt)
150
1H-NMR, 100-300 MHz
NO2 (b)
(c) CH2 – CH2 – CH3 (a) (a)
(c) triplet sextet triplet
4.5 4.2 ppm 2.2 2.0 ppm 1.2 1.0 ppm
151
H H
H Me H Me
4 6 H 4 6 H
5 5
2 2
3 1 H 3 1 OAc
equatorial
iPro iPro
OAc H axial
H-6eq H-6ax H-2ax
H-1eq 3 Hz 4 Hz 4 Hz
H-1ax 4.5 Hz 11 Hz 11 Hz
152
OH OH Hax
Hax H H
1 1 1
Hax H H
Heq Heq HO
6
O O OH O 6
OH
5 5 6 5
Me Heq HO HO
3 2 2 2 3
HO 3 OH
OH HO OH HO
4 4
OH Hax 4 Hax
Hax H H
-L-rhamnose -D-glucose -D-glucose

(3Jeq-eq = 1 – 2 Hz) (3Jeq-ax = 1 – 3 Hz) (3Jax-ax = 7 – 9 Hz)
Jaa Jae Jee
153
Ethyl butanoat C6H12O2 (CDCl3, 400 MHz)
(c) (b) (a)

(e) (a)
CH2 CH2 CH3
O C (d) (e)
O CH2 CH3
(d)
-OCH2- (c) -CH2- (b) -CH2- Me Me

Phổ 1H-NMR (CDCl3, 300 MHz) của CH3-CH2-OH
-CH3
-CH2
-OH
Phổ 1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz) của CH3-CH2-OH
ghép với -CH2 ghép với -CH3 (tạo q), rồi ghép với -CH2
(tạo triplet) ghép tiếp với -OH (tạo dq) (tạo triplet)
CH3 − CH2− OH
ghép với -CH3 (tạo q) 4 đỉnh
ghép tiếp với -OH (tạo dq) 8 đỉnh

H-1eq: ddd H-1ax: ddd ~ dt
(all J = 3-4 Hz) (J = 4.5, 11.0, 11.0 Hz)
Me
H
5 H d
4 6
3 2 H t
1
OAc
iPro dt
H
H-1eq H-1ax
158
Tình trạng ghép của proton (multiplet, J)
dd, 9 & 2 Hz d, 9 Hz
H
5'
H 4' OH
d, 2 Hz H 6'
8 3'
HO 9 O 2
7
1' OH
2'
4 H d, 2 Hz
d, 2 Hz H 6 10 3 H
5
OH O
singlet
159
A. Khái niệm
Hằng số ghép = hằng số tương tác spin-spin (J, nJ)
là khoảng cách (= Hz) của các tín hiệu có tương tác
B. Tính chất chính

• 2 hạt nhân tương đương thì J = 0 (peak trùng nhau)
• 2 hạt nhân quá xa nhau thì không ghép (J = 0)
• từng cặp hạt nhân sẽ có J ≠ tùy mức độ tương tác.
• biết được J → môi trường hóa học của hạt nhân
• một số hạt nhân không cho tương tác: O, N
160
Tùy tính chất của các H lân cận với Ha, Ha sẽ có dạng:
- khe phân đỉnh hẹp (ΔH nhỏ → J nhỏ)
- khe phân đỉnh ộng (ΔH lớn → J lớn)
Độ rộng của khe phân đỉnh được gọi là hằng số ghép J.
(coupling constant; tính bằng Hertz).
Jab = Ha– Hb (ppm) x tần số đo (MHz) = n (Hz)
J qua 1, 2, 3, 4 nối được ký hiệu là 1J, 2J, 3J, 4J (Italic)
161
• giữa các H “tương đương” R-CH3
• ghép với hạt nhân có I = 0 1H-12C
• ghép X có % đồng vị quá thấp 1H-15N
• ghép quá xa 5J (H, X)

• hạt nhân* biến đổi quá nhanh H3C-*O-H
• th.gian lưu (lifetime) quá nhỏ 35Cl, 79Br,
81Br, 127I
162
Hệ thống 2J
HH (Hz)
HC(sp3)-H -12 − -15
HC(sp2)-H -0.5 − -3
HC(sp3)-CH(sp3) 2−9
HC(sp3)-CH(sp2) 4 − 10
HC(sp2)-CH(sp2) 6 − 18
HC(sp3)-CHO 1−3
HC(sp2)-CHO 2−4
HC(sp3)-C(sp3)-CH(sp3) 0
HC(sp3)-C(sp2)-CH(sp2) 0−3
HC(sp)-C(sp)-CH(sp3) 2−3
J = 7.0 Hz
1.165 1.151 ppm ΔH = 0.014 ppm

× 500 MHz
J = 7.0 Hz
(3 số cuối chia 2)
1.2 1.1 ppm
Ví dụ: Đo ở 500 MHz; H-7 cho d 1.165 và 1.151 ppm
thì J = (0.014 ppm x 500 MHz) = 7.0 Hz
164
dt q dd dd
J1
J1 J1
J2 J2
1 2 1
Các proton ghép đôi thì có cùng hằng số ghép J.
(độ rộng của các “khe” thì bằng nhau)
H-3 Me-3
(J = 8 Hz) (J = 8 Hz)
H
Me
3
2
HO O O
166
Ha COOH Ha Hb
trans
cis
HO Hb
HO COOH
14 Hz 14 Hz 8 Hz 8 Hz
Ha Hb Ha Hb
167
* Cả Hx, Ha và Hb đều là dd nhưng thể hiện khác nhau:
Hx Ha • Hx: dd (18; 11 Hz); do Jtrans và Jcis

C C • Ha: dd (11; 2 Hz); do Jcis và Jgem
Cl Ph Hb • Hb: dd (18; 2 Hz); do Jtrans và Jgem
Hx Ha Hb
+ Hb 18 Hz + Hx 11 Hz + Hx 18 Hz
+ Ha + Hb + Ha
11 Hz 2 Hz
168
Hb R2
Jab = 16 Hz
R1 Ha
• Cùng là 16 Hz (Jab trans), but

- máy 100 MHz trải rộng hơn.
- máy 500 MHz sắc gọn hơn.
máy 100 MHz 500 MHz (độ rộng peak giảm 5 lần)
• Giá trị của J thì độc lập với tần số (của máy) đo.
• Dạng của J lại thay đổi theo tần số (của máy) đo.
Máy càng mạnh → J càng gọn, ít overlapped (phân giải tốt hơn)
169
overlapped
200 MHz
500 MHz
170
singlet
5.0 Hz 5.5 4.5 7.0 Hz 5.5 4.0 6.0 Hz
ppm 4.4
5.4 5.2 5.0 4.8 4.6
Trích đoạn phổ 1H-NMR (DMSO-d6 , 500 MHz, NS=32)

vùng H-rutinosyl của 2 mg Linarin (MW = 592.55)
171
3
HH H H H
φ
H φ
H
o o o o
φ=0 φ = 60 φ = 90 φ = 180
3
J = (7 – 11 Hz) (2 – 5 Hz) (0 – 2 Hz) (8 – 15 Hz)
• Hàm Karplus 3J
HH = Jo . cos2φ – K
HB
φ ~ (0 – 90o) → Jo = 10; K = 0
φ
C C
φ ~ (90 – 180o) → Jo = 14; K = 0
HA
• Hàm Bothner-By 3J
HH = 7 – cosφ + 5.cos2φ
172
16 16 Hz
HH
H
HH
Karplus
12 12
8 8
H o
φ=0
o
φ = 180 o
φ=0
4 Bothner-By 4
0 0
180o 120 o
90o o
60 0o
H φ = 90o → 3JHH min
o
173
φ = 90
(15 Hz) (10 Hz) (2 Hz)
(8 Hz) (2 Hz)
( 7 Hz) (2 Hz)
(0 Hz) (≈ 1 Hz)
174
H H
H H
O H O H O O
H H
(1-2 Hz) (2-3 Hz) (2-3 Hz) (7-9 Hz)

H H
H H
H H
H H
N N H O H O
H H
H H H
H
7.5 Hz 5.5 Hz 2.0 Hz 3.5 Hz
175
CMR AQ
9 Hz H
9 Hz H H 9.5 Hz 5' OH O OH
H OH
H 5 4
3 H H 6' H H
6
2 Hz 8
HO O
2'
OH
HO 8
O O HO Me
H
H H 6 OH 2 Hz H O H
OH O 2 Hz 1 Hz
FLAV
9 Hz H H 10 Hz 9 Hz H
H OH H H OH
D
O O O O
OH OH
D
H
10 Hz H OH O OH O
9 Hz H 9 Hz H
5' H 2 Hz H 5'
H 6' OH H 6' OH
O O D O
O
OH OH
H D
2 Hz
H OH O OH O 176
JC-H ít thông dụng, ít quan trọng so với JH-H
Trị số JC-H rất lớn, thay đổi tùy sự lai ghép spn (sp3, sp2, sp)
Nói chung, JC-H ~ 500/(n+1) Hz (~ 125, 167, 250 Hz, tùy loại)
sp3 (dự đoán 125 Hz) sp2 (dự đoán 167 Hz) sp (dự đoán 250 Hz)
H-Me 125.0 H2C=CH2 156.2 H-CC-H 249
H-CH2-Me 124.9 H2C=C=CH2 168.2 H-CC-Ph 248
H-CH-Me2 119.4 Ph-H 159.0 H-CC-F 275
H-C-Me3 114.2 H-CN 269
H-CH2-NH2 133.0 H-CN-H 320

1J (Hz)
CH
Aliphatic >C−H 125 - 135
Aliphatic XC−H (X = O, N, S) 135 - 155
Alken =C−H 155 - 170
Alkyn C−H 240 - 250
Aromatic Ar-C−H 155 - 165

- lượng m u thay đổi tùy loại phổ cần đo (phổ 13C cần m u
> phổ 1H...), tùy MW (MW lớn cần nhiều m u > MW nhỏ).
- nồng độ m u cao sẽ làm tăng tỉ lệ Signal / Noise (S/N)
giảm thời gian & chi phí đo (nhớ Vmax ≈ 0,6 ml).
- nói chung P m u nên # 10 mg (với MW ~ 500 Da)
dù với 1 – 2 mg, tăng NS v n đo được (lâu !!!).
- m u phải trong suốt, đồng nhất, không tủa, không đục
- thông dụng : tube 0.5 x 18 cm; chiều cao cột d. dịch m u
(kiểm tra = depth gauge): h # 4.5-5 cm (V ≈ 0,6 ml).
179
khe đọc
của máy
# 5 cm
thông dụng
(0,5 x 20 cm) thả vào máy
OK
khe khe
đọc đọc
của của
máy máy
181
khe
đọc
~ 5 cm
của
máy
• Độ tinh khiết của m u (P) nên ≥ 95%
(dù đôi khi P < 90% v n có thể giải phổ được).
• M u cần được loại bỏ nước & mọi dung môi liên quan
(vết dung môi tạp)
183
MeO
HO COOH
acid vanillic
các tín hiệu tạp DMSO
185
1
1.000 0.950
Tạp Tạp
0.276 0.391
1
3
1.00 1.02 1.01 1.01 1.02 1.02 2.99
CHCl3
1
1.00 1.00 1.01 1.01 2.00 2.08 1.02 1.02

1
1.02 1.01 1.02 1.00 1.00
1.00 0.93 0.98 2.01

Thường dùng các dung môi đã deuterium-hóa >99%
1H%: chỉ còn rất ít, hoặc không có.
• aceton (CH3)2CO → (CD3)2CO (aceton-d6)
• DMSO (CH3)2SO → (CD3)2SO (DMSO-d6)
• chloroform CHCl3 → CDCl3 (chloroform-d)
• methanol CH3OH → CD3OD (methanol-d4)
• benzen C6 H 6 → C6D6 (benzen-d6)
• pyridin C5H5N → C5D5N (pyridin-d5)
• CCl4 CCl4 → CCl4 (tetraclorid...)
dung môi H (ppm) C (ppm) H H2O (ppm)
* CDCl3 7.27 [1] 77.0 [3] 1.56
* DMSO-d6 2.50 [5]/[1] 39.5 [7] 3.33
* MeOD-d4 3.31 [5]/[1] 49.0 [7] 4.87
* Pyridin-d5 8.71, 7.55, 7.19 149.2, 135.5, 123.5 4.90
Aceton-d6 2.05 206.5 và 29.8 2.75
ACN-d3 1.93 118.2 và 1.3
Benzen-d6 7.16 128.0 [3] 0.40
D2O 4.63 4.78 191

• Dựa vào độ tan: dễ tan / CHCl3 → đo trong CDCl3
• Theo TLTK: cùng dung môi → dễ so sánh.
• Tính kinh tế: (Pyridin, DMSO) >> (MeOD, CDCl3)
• Tính chuyên biệt, phổ biến
- Ginsenosids : Pyridin-d5
- Flavonoids : DMSO-d6
- Alk; AQ... : CDCl3
Chú ý:
• Tín hiệu -OH hiện rõ / DMSO, CDCl3 và biến mất / MeOD
• Tín hiệu dung môi đôi khi che lấp tín hiệu của m u đo.
192
• Đồng vị 1H (cho tín hiệu NMR) ≈ 99.98% / tự nhiên
→ các dung môi giàu 1H sẽ cho tín hiệu quá lớn trên phổ,
cản trở tín hiệu của các 1H / m u.
• Đồng vị 13C (cho tín hiệu NMR) ≈ 1.1% trong tự nhiên
nên mức độ cản trở << so với H (khỏi quan tâm).
• Dung môi đo NMR là các dung môi giàu 2H, rất ít 1H.
Vì vậy tín hiệu của dung môi (do 1H) sẽ nhỏ vừa đủ.
• Vài d.môi thông dụng: CDCl3, DMSO-d6, MeOD, -d5
193
• Trên C-NMR: cho các tín hiệu rất mạnh, tập trung thành:
- 1 nhóm (CDCl3, DMSO-d6, MeOD…)
- vài nhóm (pyridin-d5 có 3 nhóm…)
• Trên H-NMR: cho 1 (hay vài) tín hiệu có hình dạng
rất giống các tín hiệu của m u đo (tránh nhầm l n).
Giá trị C H của các d. môi được ghi / mọi TLTK về NMR.
Nếu có dùng chuẩn nội TMS sẽ thấy các tín hiệu ở vùng
trường cao nhất trên phổ (C 0,00 và H 0,000 ppm).
194
1H-NMR đo ở 400 MHz
Tần số máy = 400 MHz
13C-NMR đo ở 100 MHz
Dung môi máy 400 MHz  (ppm) máy 600 MHz
H = 1.000 Hz H 2,50 H = 1.500 Hz

DMSO-d6
C = 3.950 Hz C 39,5 C = 5.925 Hz
H = 2.908 Hz H 7,27 H = 4.360 Hz
CDCl3
C = 7.700 Hz C 77,0 C = 11.550 Hz
C H không phụ huộ và n ( ủa máy) đ

195
Dung môi Thành phần  ppm [m] Tín hiệu [m] = (2n + 1)
CDCl3 (chính) C 77.0 [3] C ghép với D1 (n = 1)

CDCl3
CHCl3 (vết) H 7.27 [1] H ko ghép với D (n = 0)
CD3OD (chính) C 49.0 [7] C ghép với D3 (n = 3)

MeOH-d4
CHD2OD (vết) H 3.31 [5]* H ghép với D2 (n = 2)
(CD3)2SO (chính) C 39.5 [7] C ghép với D3 (n = 3)

DMSO-d6
(CHD2)2SO (vết) H 2.50 [5]* H ghép với D2 (n = 2)
196
Một hạt nhân X ghép với n hạt nhân D (I = 1) sẽ cho
tín hiệu có m = (2n.I + 1) = (2n + 1) phân đỉnh / mũi.
Cường độ tương đối các phân đỉnh / mũi:
[3] → (1 : 1 : 1) [7] → (1 : 3 : 6 : 7 : 3 : 6 : 1)
[5] → (1 : 2 : 3 : 2 : 1) khác Δ-Pascal của I = 1/2 !
Thực tế, DMSO-d6 & MeOD thường cho s trên phổ 1H-NMR
197
dung môi H C (ppm) dễ chồng tín hiệu với nhóm
H 2.50 [5]* >CH2 / triterpen, steroid

DMSO-d6
C 39.5 [7] -OMe, -OAc
H 3.31 [5]* -OMe, -OAc

MeOH-d4
C 49.0 [7] -OMe, -OAc
H 7.27 [1] -H thơm

CDCl3
C 77.0 [3] >CH-OH / glycosid
7.19, 7.55, 8.71 -H thơm

Pyridin-d5
123.5, 135.5, 149.2 –CH= (thơm, olefin)
13
vì 2H = D có I = 1 nên m = (2n.I + 1) = (2n + 1) đỉnh
(n = 1); CDCl3
ΔC ~ 0.254 ppm
1 1 1 JC-D ~ 32 Hz
1 2 3 2 1
(n = 2); CD2Cl2; JC-D ~ 29 Hz
(n = 3); (CD3)2SO
ΔC ~ 0.167 ppm
1 3 6 7 6 3 1
JC-D ~ 21 Hz
DMSO-d6 / phổ 13C-NMR
DMSO 39.5 [7]
CD3
D ~ 0.167 ppm ~ 21 Hz
O S
CD3
(m = 2.n.I + 1 = 2.3.1 + 1 = 7)
200
DMSO-d6 / phổ 1H-NMR
OMe H2 O
2.50 ppm
(CHD2)2SO
-OH -OH
2J = 1.85 Hz quá nhỏ:

(HD)
pentet nhìn như 1 singlet!
201
CDCl3 / phổ 13C-NMR
77.318
77.065 D ~ 0.253 ppm ~ 32 Hz
76.811
CDCl3
202
CDCl3 / phổ 1H-NMR
7.27 s (CHCl3 not CDCl3) TMS
203
Pyridin-d5 / phổ 13C-NMR
pyridin-d5
204
Pyridin-d5 / phổ 1H-NMR
H2 O
pyridin-d5
205
• H của nước thì thay đổi tùy loại dung môi đo.
• dung môi càng phân cực: H2O càng lớn (downfield)
• cường độ tín hiệu thường rất lớn.
D.môi → C6D6 aceton CDCl3 DMSO MeOD D2O pyridin
H of H2O 0.4 2.75 1.56 3.33 4.83 4.75 4.9
rất thông dụng; cần nhớ

• Là các tín hiệu do vết dung môi còn sót lại trong m u đo.
• Xuất xứ: Do sử dụng khi phân lập, tinh chế, kết tinh m u,
bảo quản m u, rửa tube (aceton)...
• Ảnh hưởng: Gây nhiễu → sai lầm khi giải cấu trúc.
• Các dung môi hay gặp: nước, EtOH, MeOH cùng các dung
môi kém phân cực thông dụng khác (n-hexan, Et2O, Bz,
CHCl3, DCM, aceton, EtOAc, AcOH, ForOH, grease…)
Tham khảo: J. Org. Chem., 1997, 62, 7512-7515

207
dung H (ppm) của dung môi tạp khi đo với dung môi
môi aceton-d6 CDCl3 DMSO-d6 MeOD D2 O
tạp (2.05) (7.27) (2.50) (3.31) (4.79)
aceton 2.09 2.17 2.09 2.15 2.22
n-hexan 0.88 0.88 0.86 0.90 −
benzen 7.36 7.36 7.37 7.33 −
1.97 2.05 1.99 2.01 2.07

EtOAc 4.05 4.12 4.03 4.09 4.14
1.20 1.26 1.17 1.24 1.24
(Trích từ: J. Org. Chem., 1997, 62, 7512-7515)

208
dung H (ppm) của dung môi tạp khi đo với dung môi
môi
aceton-d6 CDCl3 DMSO-d6 MeOD D2 O
tạp
(2.05) (7.27) (2.50) (3.31) (4.79)
nước 2.75 1.56 3.33 4.87 ~ 4.75
3.31 3.49 3.16 3.34 3.34

MeOH
3.12 1.09 4.01
1.12 1.25 1.06 1.19 1.17

EtOH 3.57 3.72 3.44 3.60 3.66
3.39 1.32 4.63
Tham khảo thêm J. Org. Chem., 1997, 62, 7512-7515.
209
1
dung môi H (ppm) của vết dung môi tạp khi đo trong
tạp ¯ CDCl3 DMSO-d6 pyridin-d5 D2 O
acid acetic 2.13 s 1.95 s 2.13 s 2.16 s
aceton 2.17 s 2.12 s 2.00 s 2.22 s
acetonitril 1.98 s 2.09 s 1.85 s 2.05 s
benzen 7.37 s 7.40 s 7.33 s 7.44 s
c-hexan 1.43 s 1.42 s 1.38 s 1.40 s
CHCl3 7.27 s 8.35 s 8.41 s
CH2Cl2 5.30 s 5.79 s 5.62 s
210
2
dung môi H (ppm) của dung môi tạp khi đo với dung môi
tạp ¯ CDCl3 DMSO-d6 pyridin-d5 D2O
Et2O 3.48 q 3.42 q 3.38 q 3.27 q
1.28 brs 1.28 brs 1.20 brs 1.22 brs

EP
0.90 t 0.89 t 0.86 t 0.89 t
DMSO 2.62 s 2.52 s 2.49 s 2.70 s
3.72 q 3.49 q 3.86 q 3.39 q

EtOH
1.24 t 1.09 t 1.29 t 1.24 t
4.12 q 4.08 q 4.06 q 4.14 q

EtOAc 2.04 s 2.02 s 1.94 s 2.08 s
1.25 t 1.21 t 1.10 t 1.23 t
MeOH 3.48 s 3.20 s 3.57 s 3.35 s

E.1. Máy CW-NMR (C n nu u Wave)
• dạng quét xung RF
• dạng quét từ trường
E.2. Máy FT-NMR (F u e T an f m)
212
6-Kinh 2000
213
ống đựng m u
kênh Helium lỏng
kênh Nitơ lỏng
buồng chân không
He He
buồng Helium lỏng
N2 N2
buồng Nitơ lỏng
N S nam châm siêu d n
bộ phát xung

và nhận xung
máy tính
214
nguồn điện
N2 Bo
He
Bộ phá RF Bộ hu RF
Bo
Computer
Phổ NMR 215

cường độ
cuộn phát RF thời lượng
chuỗi xung
I=? loại (siêu d n...)

Hạt
γ=? ngoại từ trường cường độ Bo
nhân
σ=? sự ổn định
cuộn thu RF
Xử lý
tín hiệu RF Phổ đ
217
5.2 m; 12 tấn, 11 triệu euro
218
1-D NMR 2-D homo (H/H, C/C) 2-D hetero (H/C, H/X)
1. 13C-CPD * 6. COSY * 4. HSQC *
2. 13C-DEPT * 7. NOESY * 5. HMBC *
3. 1H-NMR * 0. ROESY 0. HETCOR
0. TOCSY 0. HMQC
0. INADEQUATE 0. XXX
Còn rất nhiều (hàng trăm) kỹ thuật khác nữa.

Mỗi kỹ thuật lại có nhiều “kiểu” khác nhau
(DEPT 45, 90, 135; COSY 90, 45, DQF...)
219
- Khác UV, IR; phổ NMR có rất nhiều kỹ thuật khác nhau.
- Mỗi kỹ thuật cung cấp các nhóm thông tin khác nhau.
- Tổ hợp các thông tin này = NMR spectral data sẽ cho
biết n% về thông tin cấu trúc hóa học của m u.
Có 2 nhóm kỹ thuật chính

• Phổ 1 chiều (1-D NMR spectra)
• Phổ 2 chiều (2-D NMR spectra) FT-NMR only!
221
Khác biệt căn bản giữa các kỹ thuật này do nhiều yếu tố:
• cách phát xung (thời lượng & thời điểm phát xung,
nhịp phát xung, góc phát xung...)
• cách xử lý (khử, pha trộn...) xung
• cách (kênh, channel) phát hiện (13C hay 1H)
222
1-D NMR 2-D homo (H/H, C/C) 2-D hetero (H/C, H/X)
1. 13C-CPD * 6. COSY * 4. HSQC *
2. 13C-DEPT * 7. NOESY * 5. HMBC *
3. 1H-NMR * 0. ROESY 0. HETCOR
0. TOCSY 0. HMQC
0. INADEQUATE 0. XXX
Còn rất nhiều (hàng trăm) kỹ thuật khác nữa.

Mỗi kỹ thuật lại có nhiều “kiểu” khác nhau
(DEPT 45, 90, 135; COSY 90, 45, DQF...)
223
* Ưu tiên khai thác:
• 1H-NMR, 13C-CPD, DEPT (90, 135)
• HSQC (& HMQC), HMBC
• 1H-1H COSY (& TOCSY), NOESY (& ROESY)
* quan trọng nhưng ít dùng:

• 13C-13C INADEQUATE
224
1
• 13C% ≈ 1,1% (p ≈ 10-2); IC = IH = (1/2). ¯

• Khó gặp đồng thời n hạt nhân 13C (p ≈ 10-2n)
• 12C% ≈ 98,9% nhưng có I = 0 (ko cho phổ NMR)
• γC ≈ 1/4 γH. Tần số cộng hưởng ≈ 1/4 so với 1H
• Độ nhạy tuyệt đối kém 1H ≈ 64 lần (≈ 1,56%).
• Độ nhạy phát hiện kém 1H ≈ 5760 lần *.
2
• vùng cộng hưởng rộng (~ 5 lần so với 1H) ít bị chồng
Trên máy 500 MHz (11,75 Tesla):
- 1H đo ≈ 14 ppm ≈ (14 x 500 Hz) ≈ 7.000 Hz
- 13C đo ≈ 240 ppm ≈ (240 x 125 Hz) ≈ 30.000 Hz
• vùng cộng hưởng ≠ vùng của 1H (≠ kênh phát hiện)
• Thời gian hồi phục lâu (nhiều m u, NS lớn, đo lâu,
S/N nhỏ, ít đo phổ 2-D 13C−13C, tín hiệu không tỉ lệ...)
• Hằng số ghép nJC-H ít được khai thác như nJH-H.
226
• (1H% ≈ 99.98%) nhưng (13C% ≈ 1,1%)
→ khó thấy tương tác [13C−13C]
• (IC = IH = 1/2) và (γC = 1/4.γH) →
- o of 13C = 1/4. o of 1H.
- quan sát 1H & 13C trên 2 kênh (channel) riêng.
- độ nhạy tuyệt đối của 13C kém 1H ≈ 64 lần.
- độ nhạy phát hiện của 13C kém 1H ≈ 5760 lần.
• Thời gian hồi phục: của 13C > 5 sec; của 1H < 5 sec
S/N of 13C << S/N of 1H
• Hệ quả chung:
- đo lâu hơn: 13C: # 256 scan; 1H: 8 scan (4 s/scan)
- nồng độ m u 13C >> 1H.
227
1.0. Các kỹ thuật chính
• không giải ghép (ít dùng)
• BBD, CPD (thông dụng)
1.1. Hình thức trình bày

1.2. Các thông tin khai thác
• số lượng* carbon trong cấu trúc

• loại carbon (CHn, spn, C−C / C−X)
- Broad-Band Decoupling (BBD): giải ghép proton băng rộng

- Composite Pulse Decoupling (CPD): #
CPD : giải (xóa) ghép đa xung = C {H} =
BBD : giải ghép proton băng rộng
không giải ghép H: s d t q
loại carbon: CIV CH CH2 CH3
CPD (= BBD): đều là singlet! đều là singlet!
229
• Thường được giải ghép với mọi proton (CPD = BBD)
nên mỗi C cho 1 vạch, không phân đỉnh, không rõ chân.
• Đường nền đậm dù NS thường khá lớn (256, 512, 1024...)
• Thang chia rộng từ 0 – 240* ppm (1H: 0 − 14 ppm!)

nên các vạch tín hiệu hiếm khi bị chồng lấp (overlapped)
• Không có số tích phân (1C, 2C, 3C) bên dưới như 1H-NMR
• Rất dễ thấy chùm tín hiệu của dung môi đo (cực mạnh).
CDCl3 cho [3] ở 77.0 ppm (J ~ 32 Hz).
DMSO-d6 cho [7] ở 39.5 ppm (J ~ 21 Hz).
Phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz, NS 256) của Conessin
(C24H40N2 = 356)
231
Trích phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz, NS 256)
của conessin C24H40N2 = 356
1 tín hiệu kép

Phổ 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, NS 16) của Conessin
233
Phổ 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz, NS 16) của Conessin
Vùng 1.0 – 2 ppm bị overlapped
234
235
236
237
Phổ 13C-NMR của X
(CDCl3, 125.7 MHz)


238
Phổ 13C-NMR Phổ 1H-NMR
128, 256, 512, 1024... 8, 16, 32, 64...
13C # 1.11% & 1H # 99.98%

http://www.chem.ox.ac.uk/spectroscopy/nmr/acropage.htm
239
• Số lượng* carbon trong cấu trúc
• Loại carbon (CHn, spn, C−C / C−X)
• Các thông tin khác: rất đa dạng
yes/no -OMe, -Me, glycosid... ?

yes/no C-glyc hay O-glycosid ?
monosid: rha, glc, galactosid ?
biosid: kiểu (1→2) hay (1→6) ?
loại carbon (shielded/deshielded) ?
đối xứng ? v...v...
1
MeO-
HO
HO O O
esculetin
scopoletin
MeO
HO O O
MeO-
1
MeO-
scopoletin
MeO
HO O O
scopoletin
7-O-glucosid
glucosyl
MeO-
Đa số coumarin thông thường: C-2 ~ 160 − 161 ppm
5 4
5 4 5 4
10
10 6 10 6 3
6 3 3
(C) (P) (A)

7
7 9 2
9
O 2
O O 7 9
O 2
O O 8 O O
8 8
nhóm coumarin (C) 160,4 7-OMe (herniarin) 160,8
7-OH (umbeliferon) 160,7 7-O-D-glc (skimmin) 160,3
7,6-di-OH (esculetin) 161,4 7-OH, 6-OMe (scopoletin) 160,6
7,8-di-OH (daphnetin) 161,1 7-O-D-glc-scopoletin 160,5
nhóm psoralen (P) 161,1 nhóm angelicin (A) 160,2

8-OH-psoralen 160,0 oroselol 160,9
8-OMe-psoralen 160,4 marmesin 160,5
5-OMe-psoralen 160,3 xanthoxyletin 161,0
5,8-di-OMe-psoralen 160,5 seselin 160,4
1
OH O OH
MeO Me
physcion (14 + 2) O
OH O OH
H Me
chrysophanol (14+1) O
244
OH O OH
8 1
9 2 giá trị C lớn nhất của vài OMA thường gặp.
R6 6
10
3 R3
Note: nhánh có C được ưu tiên đánh số (C-3)
O
R6 R3 tên hợp chất C-9 C-10
H Me chrysophanol 192,4 181,8

H CH2OH aloe emodin 192,4 182,0
H COOH rhein 191,2 180,7
OH Me emodin 189,6 181,2
OH CH2OH citreo-rosein 181,8 181,0
OH COOH acid emodic 189,1 180,9
OMe Me physcion 190,9 181,9
OMe CH2OH fallacinol
OMe COOH
1
mangiferin (13 + glc) = 19 C

HO O OH
HO glc
O OH
OH
HO O
OH isoquercitrin (15 + glc) = 21 C
O
glc
OH O
¯
247
1 13
3
O
2
1 CH2 CH3
3 O
đối xứng hoàn toàn
O
CH2 CH3
1 CDCl3 CH2
CH3
>C=O
ppm
1
3/5
2/6
 
3 2
1 7
4
HO COOH
5 6
 
4
7
1
1 DMC (CDCl3 & MeOD; 125 MHz)
demethoxy-curcumin
MeO
CDCl3 MeOD
>C=O
1 DMC (CDCl3 & MeOD; 125 MHz)
 H
H H O O H H
H 9 5 3 1 3' 5' 9' H
Δc ~ 14 ppm 10 4 2 2' 4' 10'
A B
7 H H H 7'
HO 8 6 H H 6' 8' OH
H OMe
demethoxy-curcumin
1
(CH) + (CIV)
luteolin (3-H)
> 180 ppm
< 180 ppm 135 ppm (CIV)

(CIV)
luteolin-3-OH= quercetin
C 220 ppm 200 180 160 140
RCHO
RCHO Δβ
>C=O
>C=O Δβ
RCOOH
RCOO¯
RCOOH Δβ
-O-C-O- 100 ± 5
R-COOR
R-COOR Δβ 253

-O-C-O-
C=O C=C C–O C–C
200 150 100 50 ppm 0
C δC (ppm) C δC (ppm)
-O-CH3 50 – 60
-CH3 8 – 30
CH3-CO- 30 – 50
-O-CH2- 60 – 70
>CH2 14 – 54
=CH2 102 – 122
-O-CH< 65 – 75
>CH- 25 – 55
=CH- ≈> 100
>C-O- 65 – 75
C IV 30 – 40
-O-C-O- 100 – 110
254
Kiểu Carbon δc (ppm) Kiểu Carbon δc (ppm)
C=O (ceton) 205 - 220 RCH2OH 50 - 65
C=O (aldehyd) 190 - 200 RCH2Cl 40 - 45
C=O (ceton Δ-αβ) 170 - 185 RCH2NH2 37 - 45
C=O (acid, ester) 170 - 185 R3CH 25 - 35
C= (vòng thơm) 125 - 150 CH3CO- 20 - 30
C=C (olefin, alken) 115 - 140 R2CH2 16 - 25
RCH3 10 - 15
255
205.5 197.4 176.1 162.2 124.3
ceton ceton ester, lacton
có Δ
>C= >C=
deshieled shielded
256
CHCl3
(downfield) (upfield)
O=C< >C= -O-C-O >CH- -CH2- -CH3-

(ceton, acid, aromatic
ald., ester, lacton) sẽ downfield nếu gắn O, S, N
(>CHO-, -CH2O-, MeO-)
257
downfield
CDCl3
-O-CH3- -CH3-
downfield
>CH-O- >CH-O- >CH-
-CH2-
258
2 x (-CH=) 2 x (-CH=)
=CH-O- -O-C-O-
ceton =C-O-
có Δ =CH-O- =CH-O- =CH- =CH-
Cường độ tín hiệu 13C thì không tỉ lệ với số lượng hạt nhân 13C.
Thời gian hồi phục càng lâu → tín hiệu càng thấp (CIV, >C=O...)
259
mỗi tín hiệu # 1 C, nhưng cường độ khác nhau
CDCl3
13C-NMR (CDCl3, 125 MHz) của chrysophanol (15 C)

260
Là bộ phổ 13C-NMR (0 - 240 ppm)
Thường gồm 3 phổ nhỏ (DEPT 90, DEPT 135, CPD)
2.2. Thông tin (ít thông tin, nhưng rất cần)

- DEPT 90 : CH only ()
- DEPT 135 : CH & CH3 () CH2 (¯)
- C13-CPD : tất cả CH3, CH2, CH và CIV
(tín hiệu mới ở CPD → CIV)
đã thay thế hẳn cho phổ APT

261
DEPT CIV CH CH2 CH3
45o −   
90o −  − −
135o −  ¯ 
[CPD]    
• chỉ CH mới cho tín hiệu ở DEPT 90.

• chỉ CH2 mới cho tín hiệu ¯ ở phổ DEPT 135
• CIV chỉ xuất hiện trên phổ CPD mà thôi !
262
263
6 tín hiệu methin (CH)
4 tín hiệu methyl (CH3)

 
 
9 tín hiệu methylen (CH2)
2 tín hiệu CIV
264
6 tín hiệu CH
1 tín hiệu CH3 
không có tín hiệu CH2
7 tín hiệu CIV MeOD
265
9 tín hiệu CH

1 tín hiệu CH3
không có tín hiệu CH2
9 tín hiệu CIV

DMSO
266
(xét riêng vị trí C-2 và C-3)
H H
O O O O
H OH H OH
H H
O O O O
1 CH2 sp3 0 CH2 0 CH2 0 CH2

1 CH-O sp3 2 CH-O sp3 1 CH thơm 0 CH
Flavanon Flavanonol Flavon Flavonol
DEPT đã thay thế hẳn kỹ thuật APT
268
• Các đồng vị & vài tính chất liên quan (y/n, I = 1/2; 1)
• Phân bố: nhiều gấp ~ 90 lần 13C (99.98% vs 1.10%)
• Thời gian phục hồi  nhỏ (cường độ sẽ tỉ lệ số H...)
• Tỉ số từ hồi chuyển γH ~ 4 lần γC
• Độ nhạy tương đối gấp ~ 43 = 64 lần 13C
• Độ nhạy phát hiện gấp ~ (64 x 90) = 5760 lần 13C
• Tần số hoạt động # tần số thiết kế của máy
• Kênh phát hiện rộng 14-18 phần triệu của tần số hoạt động
của máy (H ~ 14 – 18 ppm)
269
- Thang từ 0,00 đến ~ 14 ppm (có khi ~ 20 ppm)
- Số scan thường nhỏ (NS ~ 8, 16, 32)
- Chân rộng, dễ xen phủ; đường nền mịn (S/N lớn)
- Có số tích phân (số lượng H* tại chỗ)
- Có phân đỉnh (d, dd, t, q...)
- Tín hiệu của dung môi khó phân biệt vs của m u
- Tín hiệu nước (ẩm) thay đổi vị trí tùy dung môi đo
270
(toàn vùng có thông tin)
 
271
 
 
 
272
(toàn vùng có tín hiệu)



273
(chế độ dãn, vùng trường thấp)
274
(chế độ dãn, vùng trường thấp)
275
3.2.1. Số lượng proton
3.2.2. Loại proton
3.2.3. Tín hiệu của dung môi, của nước ẩm
3.2.4. Tín hiệu của tạp liên quan, d.môi tạp
3.2.5. Tín hiệu của nhóm -OH, -NH / các d.môi
3.2.6. Tín hiệu của nhóm -Me, -OMe, -NMe
3.2.7. Dạng tín hiệu của các proton có ghép
Sự phân đỉnh & Hằng số ghép
3.2.8. Các thông tin khác

276
3.2.1. Số lượng proton
Thường được ghi ở dưới chân từng tín hiệu có ý nghĩa
Đơn vị (1,000) thường được chọn ứng với 1 singlet rõ.
277
 H2 O DMSO
1 1 1 1 2 2 1 1 proton
278
không chắc sẽ # 8 proton 3 H? 4 H? 279
• Không chọn tín hiệu của dung môi làm đơn vị
• Không ghi STP dưới tín hiệu của dung môi, nước
• STP # số nguyên gần nhất
(1,042 # 1 H) (2,012 # 2 H) (2,984 # 3 H)
• Máy có thể không ghi STP của -OH, -NH...
• STP sẽ không còn đúng khi bị xen phủ quá nhiều
• Tổng các STP chưa hẳn là số H trong cấu trúc.
281
3.2.2. Loại proton
mạch thẳng
aliphatic thế β
alkyn
aliphatic 1 thế 
aliphatic 2 thế 
-CH=CH-
thơm & dị vòng thơm
-CH=O
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
282
H
X-Me H ppm X-CH2- H ppm X-CH< H ppm khác H ppm
>C-Me 0.9 >C-CH2- 1.3 >C-CH< 1.5 >N-H 1–3
>C=C-Me 1.6 >C=C-CH2- 2.3 >C=C-CH< 2.6 R-OH 1 – 5 **
R-CO-Me 2.1 R-CO-CH2- 2.4 R-CO-CH< 2.5 -C  CH 2–3
ROOC-Me 2.2 R-OOC-CH2- 2.4 R-OOC-CH< 2.5 >C=CH- 4.5 – 6.5
R2N-Me 2.2 R2N-CH2- 2.5 R2N-CH< 2.9 Ar-H 6.7 – 7.9
Ar-Me 2.3 Ar-CH2- 2.7 Ar-CH< 3.0 -CHO 9.5 – 10
-CONH-Me 2.6 -CONH-CH2- 3.0 CONH-CH< 3.2 Ar-OH 9 – 13
R-OMe 3.3 R-O-CH2- 3.4 R-O-CH< 3.7 -COOH 10 – 12
Ar-OMe 3.8 Ar-O-CH2- 4.0 Ar-O-CH< 4.2 >C=C-OH 11 – 12
R-COO-Me 3.9 R-COO-CH2- 4.1 R-COO-CH< 5.0 -CH=CH-OH > 15

H
R−CH3 0.9 ppm −C−OH 1.0 - 5.5 HOOC−CH− 2.0 - 2.2
R2−CH2− 1.3 ppm −CH−OH 3.4 - 4.0 RCOO−CH− 3.7 - 4.1
R3−CH− 1.5 ppm Ar−CH− 2.2 - 3.0 ROOC−CH− 2.0 - 2.6
>C=CH− 4.6 - 5.9 Ar−OH 4.0 - 12.0 R−COOH 10 - 15
−C  CH 2.0 - 3.0 O=C−CH− 2.0 - 2.7 R−NH− 1.0 - 5.0
>C=C−OH 15 - 17 R−CH=O 9.0 - 10.3 R−N−CH− 2.4 - 2.5
>C−O−CH 3.3 - 4.0

H
R – OH 0.5 – 5.0 ***
R – NH2 0.5 – 5.0
Ar – OH 4.0 – 7.0
R – CO – NH2 5.0 – 8.0
R – CH=O ~ 10 ppm
R – COOH 10.5 – 12.0
>C=C – OH 11.0 – 12.0
– CH=CH – OH > 15 ppm
285
H
Do Oxy thay đổi rất nhanh, nói chung, tín hiệu của 1H/-OH:
a. thay đổi tùy dung môi đo
• rất rõ trong aceton-d6 & DMSO-d6 khan; khá rõ trong CDCl3
• biến mất trong MeOD, D2O (hydroxyl test!)
b. H có thể thay đổi khá rộng tùy nồng độ m u đo
c. khi dung môi là DMSO, H của các tín hiệu lại khá ổn định
d. hình dạng tín hiệu có thể là broad singlet (br s)
(H của -OH thay đổi theo nồng độ)
Phổ 1H-NMR (CCl4, 60 MHz) của EtOH

OH
¯
OH
100% EtOH
¯
5.13 t -OCH2- Me
10% EtOH in CCl4
4.28 s OH Me
¯
5% EtOH in CCl4
3.65 s Me
OH (1.03 br s)
-OCH2-
0.5% EtOH in CCl4
287
4' OH
5-OH 7-OH 4’-OH 3-OH HO 7 O
5 3 OH
OH O
1H-NMRof kaempferol
(DMSO-d6 , 500 MHz)
HSQC (-)
288
4' OH
HO 7 O
3' OH
3
OH
5 3-OH
OH O
5-OH 7-OH 4’-OH 3’-OH
1H-NMR of quercetin (DMSO-d6 , 500 MHz)

289
-4 nhóm –OH glycosyl
-O-CH-O- -CH-O-
(mỗi tín hiệu đều # 1 H)

HSQC
4 proton (-OH) này đều không có crosspeak trên HSQC +
(−)
+
Phổ 1H-NMR (CDCl3, 300 MHz) của CH3-CH2-OH
-CH2O- -CH3
-OH
-OH -CH2O- -CH3
DMSO
ghép với -CH2 ghép với -CH3 (tạo q), rồi ghép với -CH2
(tạo triplet) ghép tiếp với -OH (tạo dq) (tạo triplet)
CH3 − CH2− OH
ghép -CH3 4 đỉnh
ghép tiếp -OH 8 đỉnh

H
Me−NR2 2.2 ppm R−OMe 3.3 ppm (ether)
Me-Ar 2.3 ppm R−CO−Me 2.15 ppm (ceton)
Me−COOH 2.3 ppm R−CO−OMe 3.6 ppm (ester)
Me-COOR 2.6 ppm Ar−OMe 3.85 ppm (ether)
Tất cả các tín hiệu của methyl này đều là singlet
1
Ngay cả với các hợp chất chứa N (alkaloid...), tín hiệu –NH−
cũng ít được chú ý. Để ý rằng 14N (I = 1) chiếm 99.63%
còn 15N (I = 1/2) chỉ chiếm 0.37% đồng vị tự nhiên.
Các H gắn với 14N có thể biến đổi nhanh, vừa hoặc chậm.
a. Nếu H−N b ến đổ nhanh

- H này sẽ không ghép với 14N cũng như các H-C lân cận.
- Do vậy, nó sẽ thể hiện dưới dạng 1 singlet sắc nhọn (sharp).
- Các tín hiệu H-C lân cận cũng không bị phân đỉnh do H-N này.
- Ví dụ: các amin mạch thẳng.
1
b. Nếu N−H b ến đổ ung bình

- H gắn với N sẽ được giải ghép 1 phần.
- Kết quả là tín hiệu của NH → broad singlet.
- Các H-C lân cận cũng không bị phân đỉnh bởi H-N này.
- Ví dụ: N-methyl-p-nitroanilin
CH3 NH NO2
broad singlet
1
. Nếu H−N b ến đổ hậm

- Proton H-N< sẽ “thấy” 3 mức năng lượng của 14N (I = 1)
- Proton H-N< sẽ → broad singlet, có thể l n vào baseline
(không quan sát được!)
- Các proton H-C lân cận sẽ bị phân đỉnh bởi H-N này
- Ví dụ: H-N trong pyrrol, indol, carbamat, amin bậc I & bậc II
R1
N COOR
H
1
broad singlet
4.70 H O
14 N C quartet triplet
2.78 d (5 Hz) CH3 O CH2 CH3
do ghép với H-N<
-CH2-CH3 >N-CH3 -CH2-CH3
>NH
3.2.3. Môi trường hóa học của proton
Được khảo sát theo các tiêu chí
• tình trạng chắn / giảm chắn (giá trị H)
• dạng phân đỉnh của tín hiệu (s, d, t, dd, q...)
• cường độ tương đối của các phân đỉnh
• mức độ ghép với các proton lân cận (hằng số ghép J)
300
3.2.4. Độ tinh khiết tương đối của m u
0.276 0.391
tạp tạp
301
3.2.5. Các thông tin khác: rất đa dạng, ví dụ
- có rhamnose ? glucose / galactose ?

- 3-O-glyc, 7-O-glyc, 6/8-C-glycosid ???
-  hay -ose ?
- có / không 5-OH / Flavon(ol)
- iso/eu-flavonoid, flavanoid
- có đối xứng ở vòng (B) ? kiểu đối xứng ?
302
H2 O DMSO
303
Là phổ tương tác 1H−13C, phát hiện bởi kênh 1H (≠ HETCOR)
Nhậy hơn (và đã thay thế hoàn toàn) phổ HETCOR
Thường là hình chữ nhật, 2 trục là phổ 1H và 13C-NMR
4.2. Thông tin cung cấp

- H nào gắn trực tiếp vào C nào (crosspeak)
- nhóm >CH-, -CH3 (cho crosspeak màu đỏ)
- nhóm >CH2 (cho crosspeak màu xanh)
- C không gắn H sẽ không có crosspeak (CIV)
- H không gắn C sẽ không có crosspeak (-OH, >NH...)
305
306

307
cross peak ý nghĩa
H này gắn vào C này.

có crosspeak
(tìm H-1 anomer / ose !)
không có H này thuộc –OH, -NH...
màu đỏ CH hay CH3
màu xanh CH2
308
C-1’’ CH2
H-1’’
glucosyl in daidzin
309
310
C-glucosyl
311
CH CH CH CH
CH CH2
312
8
6
C-glucosyl
8
313
13 tín hiệu của 14 C / khung anthraquinon 6 C / 8-O-glucosyl
glucosyl O O OH
3-Me
8 1
7 2
? ?
6 3
HO 5 4
CH3
314
2 nhóm CH / 108.3 ppm (not CH2)
≠ CH2
315
H = 5,10 ppm
≠ 7,27 of CHCl3
tín hiệu núp trong dung môi
316
triplet 77 ppm of CHCl3 CH
triplet 77 ppm
of CDCl3
CH
δH = 5,10 ≠ 7,27 of CHCl3

317
C-2
8,29 s
318
(Heteronuclear Multiple-Bond Correlation)
5.1. Hình hứ ình bày

- Là phổ tương tác 1H-13C. Hai trục là phổ 1H và 13C-NMR.
- Số lượng crosspeak của HMBC nhiều hơn HSQC rõ rệt.
- Có tương tác  có crosspeak
5.2. Thông n ung p
- H này “nhìn thấy” C này qua 2, 3 (đôi khi 4) nối
- vị trí gắn -OH, -OMe, -NH, -glycosid trên khung
- từ artefacts/HMBC có thể biết tương tác HSQC ẩn.
319
320
• từ cross peak: H này “dòm thấy” C này (2J và 3J)
→ vị trí gắn n–OMe, n-O-glycosid
• từ artefact: H này “gắn với” C này (JCH) # HSQC!
glucose H1'' 4' O Me

H8
O O O
7
3 rhamnose
H6 O
O
OH O
H1''
- H-6 & H-8 đều “dòm thấy” C-7;

- OMe “dòm thấy” C-4’ → 4’-OMe
- H-1*/ glc “dòm thấy” C-7 → 7-O-glc
- H-1*/ rha “dòm thấy” C-3 → 3-O-rha 321
4 cặp artefact trên phổ HMBC của Scopoletin
H-a H-c H-d

H-b
C-c
C-b
C-d
C-a
H-8 H-6
C-8 
C-6 
C-10
Trung điểm của 2 artefact chính là crosspeak của HSQC ẩn
H-3’/5’ H-2’/6’
H-8 H-6 H-a
*3’5’ *3’5’ *2’6’ *2’6’ *8 *8 *6 *a *a
C-8
*6 *6
C-6
C-a
C-10
C-2’/6’
C-1’
C-3’/5’
C-4
H3'
H2' OH
H8
1'
HO O
H5'
10
H6'
H6 4 O
OH O glc
• H-8 “nhìn thấy” C-4 (nhưng H-6 thì không rõ)

• H-2’/6’ “nhìn thấy” C-1’ (nhưng H-3’/5’ thì không)
• H-8 và H-6 đều “nhìn thấy” C-10
a b
e d c
HMBC
H-a
artefact
H-b
H-c
H-d
cross-peak
H-e
326
H-1’’ → δC 165 ppm 160 ppm < 135 ppm
là dấu hiệu O-glyc ở → C-7 C-4’ C-3
327
HMBC, scopoletin-7-O-D-glucopyranosid
39 5 8 1’
2 7 10 6 4
H-4
H-5
H-8
H-3
7-O-glc H-1’
6-OMe 6-OMe
- thường là hình vuông, 2 cạnh là 2 phổ 1H-NMR (phân giải thấp)
- đường chéo hình vuông cũng là hình chiếu của phổ 1H-NMR.
- các tín hiệu đối xứng qua đường chéo được gọi là crosspeak.
6.2. Thông n ung p
- Hai proton có crosspeak trên COSY sẽ gần nhau trên khung.
- có thể tính 3JH-H nhờ các crosspeak trên phổ
329
330
331
C
A B
C'
H nào gần H nào trong không gian (< 4J và d < 5 Å)
- tương tự phổ 1H - 1H COSY (2 trục đều là phổ 1H-NMR)
- đường chéo là hình chiếu của phổ 1H-NMR
- số lượng crosspeak nhiều hơn phổ COSY (phức tạp hơn)
7.2. Thông n ung p
- có tương tác: có crosspeak (gần nhau trong không gian)
334
335
336
337
(Off-Resonance Decoupling)
• Tài liệu cũ (v n còn ghép H)

- C IV (s, singlet) - CH2 (t, triplet)
- CH (d, doublet) - CH3 (q, quartet)
Khuyết điểm: 1 vạch có thể là vạch chính của C này
hoặc 1 vạch phụ của C khác (thua !)
• Tài liệu hiện nay (hủy ghép với mọi H = BBD, CPD)
Mỗi C tương đương đều cho 1 singlet (dễ quan sát)
338
c b
(2b + 2c + d) CDCl3
d a CH2 CH3
c b
a
(2b + 2c)
d CH2 CH3
CDCl3
a
339
13C-NMR của menthol
c
j i h g f e dcb a
d f h
g i
j OH
a e b
 giải ghép proton

???
¯ có ghép proton
j i h g f e dcb a
340
Phổ 13C-NMR (CDCl3, 125 MHz) của cholesterol
còn ghép H
giải ghép H
chiếu xạ
triplet sextet triplet triplet quartet *
chiếu xạ
triplet sextet triplet singlet * singlet
chiếu xạ
triplet sextet triplet * triplet triplet

2
không chiếu xạ (đủ tín hiệu)

CH3−COO−CH2−CH3
Attached Proton Test (APT) hiện không còn thông dụng.
Đã được thay bằng DEPT (90 & 135) tuy S/N kém hơn APT.
1. Phổ APT cho các tín hiệu của mọi C
- CH chẵn (CIV và CH2) quay xuống (−)
- CH lẻ (CH và CH3) quay lên (+).
2. Phổ DEPT-135 chỉ cho các tín hiệu CHn
- chỉ có CH2 quay xuống (−)
- CH và CH3 quay lên (+)
- CIV không hiện diện.
345
CIV only ()
CIV & CH2 
CH & CH3 ¯
CPD
all of C
346
Cung cấp thông tin: C nào gần C nào trong công thức.
(Cn  Cn±1)
Rất hữu hiệu khi ng. cứu steroid, triterpenoid (nn.CIV).
Nhưng rất ít khi được sử dụng (vì lý do kinh tế)
[50 mg m u] & [máy 500 MHz]
# 24 – 30 g ờ !!!
347
C D
D C
F1
C
B C
A B
A B A D A B D
F2 F2
D
E
C D
C F1 D
D
A B A B C
A B A B
D C E
348
349
Đã được thay bằng HSQC (nhạy hơn!)
350
- 1H-1H COSY cho các tương tác của từng cặp H kề nhau.
- TOCSY cho các tương tác của mọi H cùng 1 mạch.
- TOCSY ít thông dụng
R1 R2 R3 R4
CH3 CH CH CH CH CH3
a b c d e f
a  b. b  c. f b
COSY c  d. d  e. TOCSY
e  f. e c
d
Tương tự như NOESY
Thích hợp với cấu trúc nhiều mạch đường
352
354
Cấu trúc chung nhóm
(C6 – C3) phenylpropanoid, coumarin
(C6 – C3)2-n lignanoid, lignin
(C6 – C4) naphtho-quinonoid
(C6 – C1)2 anthranoid, stilbenoid
C10, C15, C20 mono-, sesqui-, diterpenoid

(C6 – C1 – C6) xanthonoid
 (C6 – C3 – C6) flavonoid (eu-F, iso-F, neo-F) 
(C6 – C3 – C6)n tanninoid
C30 triterpenoid
CxHyNzOt alkaloid
355
• Chiếm ≈ 9 K / 160 K hợp chất tự nhiên (5,6%)
• aglycon & glycosid: phức tạp trung bình.
• đa dạng cấu trúc: Flavon(ol), Flavanon(ol); eu // iso-F
• đa dạng nhóm thế: -OH, -OMe, prenyl, furano, pyrano
• đa dạng glycosid: mono- // bi- // tri-desmosid

- O-glycosid // C-glycosid.
- monosid (rha, glc, gal, ara, xyl) // biosid (rut, neo...)
- loại ose: β-D (glc, gal...) // -L (rha, ara...)
• độ khó vừa phải (# 5/10); dễ → sang nhóm khác
356
Một thống kê (chưa đầy đủ, 2010):
Isoflavonoid + Flavon(ol) + Flavanon(ol)  (4500 / 6458)
(~ 70% các flavonoid khảo sát).
* Σ các flavonoid kh.sát 6458 (100%)

1. neo-flavonoid 82 (01,3%)
2. các Flavonoid phức tạp 692 (10,7%)
3. iso-flavonoid 914 (14,2%) 
4. các euflavonoid kh.sát 4770 (73,8%)
 (70%)
4.1. Flavon(ol) 2922 (45,2%) 
4.2. Flavanon(ol) 673 (10,4%) 
4.3. Chalcon, Auron 516 (08,0%)
4.4. Anthocyanin 380 (05,9%)
4.5. Catechin, LAC 269 (04.2%) 357
8
OH
3'
2'
4' OH
1 1
8 8
HO 9 O 2 HO 7 9 O 2 H
7
1' 5' OH
6'
  2'
6 4 6 4 1'
3'
5
10 3 OH 5
10 3
OH O O 6'
4'
5'
OH
 
358
Các eu-Flavonoid thường gặp, n  OH / B, tuần tự:
- không có * - 02 nhóm (4’ 3’-di-OH)
- 01 nhóm (4’-OH) - 03 nhóm (4’ 3’ 5’-tri-OH)
Flavon (CALT) Flavonol (GKQM)

0. Chrysin* 0. Galangin*
5' 5'
1. Apigenin 4' 4' 1. Kaempferol

HO 7 O 2 HO 7 O 2
2. Luteolin 3' 3'
2. Quercetin
3 H 3 OH
3. Tricetin 5
OH O
5
OH O
3. Myricetin
Flavanon (PNE) Flavanonol (PATA)
0. Pinocembrin* 5' 5'

0. Pinobanksin*
1. Naringenin HO 7 O 2
4'
HO 7 O
4'
1. Aromadendrin
2
3' 3'
2. Eriodictyol 2. Taxifolin
5
3 H 5
3 OH
3. chưa thấy OH O OH O 3. Ampelopsin
359
Vitexin = apigenin C-8-glc Iso-quercitrin
Glucose OH OH
HO O HO O
OH
F.1 F.4
H O Glucose
OH O OH O
OH Quercitrin OH
Afzelin
HO O HO O
OH
F.2 F.5 O Rhamnose
O Rha
OH O OH O
OH OH
Astragalin Rutin
HO O HO O
OH
F.3 F.6
O Glc O Glc Rha
OH O OH O
360
rhamnocitrin dihydrorhamnocitrin tamarixetin
3'
OH
3'
4' OH 5' 
2'
4' 2'
6'
4' OMe
 8 8 8
MeO 7 9 O 2 5' MeO 7 9 O 2 5' HO 7 9 O 2
3'
1' 1' 1' OH
5
6'
5
 6'
3
2'
6 4 6 4 6 4
10 3 OH 10 3 OH 10 OH
5
OH O OH O OH O
7-O-methylether 7-O-methylether 4’-O-methylether

kaempferol aromadendrin quercetin
361
H8
 R7 9
O 2
H2
 2'
4 1'
10 3
R6 3'
R5 O 6'
5'
4'
R4' 
 
isoflavon R7 R6 R5 R4’ glycosid thường gặp
daidzein* OH H H OH daidzin = daidzein-7-O-glc
glycetin OH OMe OH OH puerarin = daidzein-8-C-glc
genistein* OH H OH OH genistin = genistein-7-O-glc
biochanin A OH H OH OMe C-4, C-7: có Oxy
formononetin* OH H H OMe O-glycosid ở C-7
iso-formononetin OMe H H OH C-glycosid ở C-8

Ω = (số vòng + số nối đôi) của chất A = CxHyOnXzNt
y z t
Ω = (x + 1) – – +
2 2 2
Trừ các hợp chất có N (alkaloid...), đại đa số HCTN

có dạng CxHyOn. Khi đó, độ bất bão hòa:
y
Ω = (x + 1) –
2
(acid béo, tinh dầu, n-terpenoid, coumarin, flavonoid,

tanninoid, anthranoid, iridoid, quassinoid, STL...)
kỹ thuật MS (ES+) MS (ES−)
[M + 1]+ [M – 1]–
m/z :
[M + 23]+
Nếu trên MS-ES+ có các tín hiệu [M + 23]+

và [M + 1]+ chẵn thì (X) ≈ alkaloid (M lẻ).
364
MW chẵn MW lẻ
số Nitơ chẵn số Nitơ lẻ
(0, 2, 4...) (1, 3, 5...)
Như vậy, một HCTN (X) có MW lẻ thì
• (X) ≈ alkaloid !
• (X) ≠ coumarin, flavonoid, lignan, tannin, stilben,
anthraglycosid, xanthonoid, n-terpenoid,
saponin, iridoid, glycosid tim, ...
365

Flavon (Mo = 222) Flavanon (MA = 224)
OH OH
HO O HO O
OH OH

OH OH
OH O OH O
+ (n.OH) 1 2 3 4 5
Flavon M = 238 254 270 286 302
Flavanon M = 240 256 272 288 304
366
n.OH/khung MW (rha) (glc, gal) (glc+rha)
0 x OH 222 +146 +162 +308
1 x OH 238 384 400 546
2 x OH 254 400 416 562
3 x OH 270 416 432 578
4 x OH 286 432 448 594
5 x OH 302 448 464 610
6 x OH 318 464 480 616
367
(chỉ có thể trên vòng B)
R3 & R4’ = (H, OH, OMe, O-ose...)
H OH
4' R 4' 4' R 4'
5' 5'
3' 3'
HO 7 O HO 7 O
H OH
 
5
3 R3 5
3 R3
OH O OH O
• Flavon: chrysin, apigenin, luteolin, tricetin

• Flavonol: galangin, kaempferol, quercetin, myricetin
• Flavanon: pinocembrin, narigenin, eriodictyol...
• Flavanonol: pinobanksin, aromadendrin, taxifolin, ampelopsin
368
O
đường L đường D
4
1
5 5
O O
Oxy: góc Lõm (L) Oxy: góc Đầy (D)
3 2 3 2
4 1
(L, C hướng xuống) OH (D, C hướng lên)
1 C
5 5
O O
C OH
1
(, 1-OH ngược chiều C) (, 1-OH cùng chiều C)
369
 OH OH
4 6 6
CH2OH 4
CH2OH 1
HO 5
5
O O 6 O
5 Me
HO HO 3
OH OH 2
3 2 3 2 HO
HO 1 HO 4 OH
1 OH
-D-glc -D-gal -L-rha

(e e e e e) (e e e a e) (a a e e e)
mất CH2OH mất CH2OH

OH 1
4
4 OH
HO 5 5 * O
* O O OH
HO 2
* 5
HO 2
3 2
3 OH 3 OH OH
HO HO 4
1 1
OH
-D-xyl -L-ara -L-ara
(e e e e) (e e e a) (e e e a)
pentose pentose thường vẽ hơn!

370
OH
6
9 O 2 4
2 4 5 O
HO HO
C OH 8
HO 3 HO O 7
O 2
10 3 O 3 1
6 O O A
1 5 Ha
O 5 6
Ha 5 1 1
6 5
6 He He
Me O Me O OH
HO
HO 3 2 3 2
HO 4 HO
4
OH OH
aglycon-3-O − 1(glc6 ̶ 1rha) aglycon-7-O − 1(glc2 ̶ 1rha)

= aglycon-3-O − rutinose = aglycon-7-O − neohesperidose
aglycon-3-O − 1(glc6 ̶ 1glc) aglycon-7-O − 1(glc2 ̶ 1glc)

= aglycon-3-O − sophorose = aglycon-7-O − gentibiose
371
O O O
3
3 OH
O O O
Flavon Flavonol isoflavon
3'
2' 4'
8 1'
B 8
9 O 5' O 9 O
7 7 2
A C 2 6' A C 2'
6 4 3 6 4 1' 3'
10 3 OH 10 3
5 5
O O
B
O 6' 4'
5'
Flavanon Flavanonol isoflavanon

372
H
5'
H 4' H
H 6'
B
8 3'
H 9 O 2
  1' H
7 2'
A C
H
4
H 6 10
 3 H
5
H O
4 7 5 2 9 3 ... ... 10 6 8
H H
H OH H   OH
H  H
 O
HO   O  OH
HO
 OH


H H
H H   O
   O
OH O OSE OH O OSE
373
Cấu trúc aglycon căn bản: 15 C thơm
H3' H3'
H2' H4' H2' H4'
H8 H8
B B
H7 O H7 O 2
H5' H5'
A A
H6' 4 H6'
H6 H3 H6 3 OH
H5 O H5 O
10 proton thơm 9 proton thơm
• các proton sp3: flavanoids / mạch đường

nhánh prenyl / furano / pyrano
• nếu có đối xứng: chỉ trên vòng (B)
374
3' 3'
4' OMe 4' OMe
2' 2'
1' 1'
HO 7 9 O 5' HO 7 9 O 5'
8 8
I 6
2 6'
6
2 6'
II
4 4
5
10 3 OH 5
10 3 H
OH O OH O
• C / H sẽ upfield (giảm rõ) khi ortho với Oxy

• C / H sẽ downfield (tăng) khi ipso / meta với Oxy
(γ effect)
vị trí downfield nhất: 4 7 5 - 2 9

I
vị trí upfield nhất: 10 6 8 (và 3-CH ở II)
375
0
R 3' R 3'
3' 3'
R 4' R 4'
2' 2'
4' 4'
8 8
HO 9
O 2 HO 9
O 2
7
1' 5' R 5' 7
1' 5' R 5'
6' 6'
6 4 6 4
10 3 10 3
5 H 5 OH
OH O OH O
R 3'
R 3'
3'
R 4' 3'
2' R 4'
4' 2'
4'
8
HO O 2
8
9 HO O 2
7
1' 5' R 5' 9
6' 7
1' 5' R 5'
6'
6 4
10 3 6 4 3
5 H 5
10
OH
OH O
OH O
377
1
R 3'
3'
R 4'
2'
8
B
4'
-OH ở ipso : + 30
HO 9
O 2
7
1'
6'
5' R 5' -OH ở ortho / para : ̶- 10
6
10
4 3
-OH ở ipso / ortho : + 20
5 H
OH O
Flav n C-1’ C-2’ C-3’ C-4’ C-5’ C-6’
(B) ko thế = chrysin 130.7 129.0 126.3 131.9 126.3 129.0
(4’-OH) = apigenin 121.3 128.4 116.0 161.5 116.0 128.4
(4’-OMe) = acacetin 123.5 128.4 114.8 162.8 114.8 128.4
(4’3’-OH) = luteolin 122.1 113.8 146.2 150.1 116.4 119.3
(4’-OMe, 3’-OH) = diosmetin 123.3 113.1 146.9 151.2 112.1 118.7
(4’3’5’-OH) = tricetin 120.9 106.0 146.5 137.9 146.5 106.0

378
2
R 3'
3'
R 4'
2'
4'
8
B -OH ở ipso : + 30
HO 9
O 2
R 5'
7
1'
6'
5'
-OH ở ortho / para : ̶- 10
6
5
10
4 3
OH
OH O
Flavonol C-1’ C-2’ C-3’ C-4’ C-5’ C-6’
(B) ko thế = galangin 132.3 129.4 128.5 130.8 128.5 129.4
(4’-OH) = kaempferol 121.7 129.5 115.4 159.2 115.4 129.2
(4’-OMe) = kaempferid 123.3 129.4 114.1 160.7 114.1 129.4
(4’3’-OH) = quercetin 122.1 115.2 145.1 147.7 115.7 120.1
(4’-OMe, 3’-OH) = tamarixetin 123.4 111.8 146.2 149.4 114.6 119.8
(4’3’5’-OH) = myricetin 120.4 109.0 146.0 136.6 146.0 109.0

3
R 3'
3'
2'
R 4' -OH ở ipso : + 30
4'
8 B -OH ở ortho / para : ̶- 10
HO 9
O 2
1' 5' R 5'
7
6' -OH ở ipso / ortho : + 20
6 4 3
H
10
5 H
OH O
Flavanon C-1’ C-2’ C-3’ C-4’ C-5’ C-6’
(B) ko thế = pinocembrin 138.5 126.5 128.8 128.5 128.8 126.5
(4’-OH) = naringenin 129.4 128.7 115.7 158.1 115.7 128.7
(4’-OMe) = angophorol 130.5 128.6 113.5 159.4 113.5 128.6
(4’ 3’-OH) = eriodyctiol 129.4 114.2 145.1 145.6 115.3 117.8
(4’-OMe, 3’-OH) = hesperetin 131.4 114.3 146.7 148.1 112.1 118.0
380
4
R 3'
3'
R 4'
2'
8
B
4'
-OH ở ipso : + 30
HO 9
O 2
7
1'
6'
5' R 5' -OH ở ortho / para : ̶- 10
6
10
4 3
5 OH
OH O
Flavanonol C-1’ C-2’ C-3’ C-4’ C-5’ C-6’
(B) ko thế = pinobanksin 130.5 127.6 128.6 129.2 128.6 127.6
(4’-OH) = aromadendrin 129.4 130.4 116.3 159.2 116.3 130.4
(4’-OMe) = 129.2 129.4 113.6 159.6 113.6 129.4
(4’3’-OH) = taxifolin 128.1 115.3 144.9 145.7 115.3 119.2
(3’-OH, 4’-OMe) =
(4’3’5’-OH) = ampelopsin 127.1 106.9 145.6 133.4 145.6 106.9
381
GKQM CALT PNE PATA
 Isoflavon Flavonol Flavon Flavanon Flavanonol
C-4 < 180 < 180 > 180 > 195 > 195
C-2 150 (>CH-) 147 (CIV) 164 (CIV) 80 (>CH-) 85 (>CH-)
C-3 125 135 105 45 (> CH2) 75 (-CH-O)
H-2 8.4 s ̶ ̶ 5.4 m 5.0 d (11.5 Hz)
H-3 ̶ ̶ 6.5 s > CH2 4.6 d (11.5 Hz)
5-OH 13.0 12.5 13.0 13.0 12.5

OH
H
MeO O
2
3
OH
OH O H
5,02 d (11,5 Hz) 4,58 d (11,5 Hz)

H-2 H-3
H
MeO
7
2
O
5 4'
HO OH
3 OH
O
H
các proton sp3 của flavanon(ol)
nhóm Flavonoid H-2 ppm, (J, Hz) H-3 ppm, (J, Hz)
2.77 dd (17.0, 3.0)
pinocembrin 3.25 dd (17.0, 12.5)
5.57 dd (12.5, 3.0)
2.67 dd (17.0, 2.5)
naringenin 3.08 dd (17.0, 12.5)
5.31 dd (12.5, 2.5)
Flavanon
2.65 dd (17.0, 2.5)
eriodictyol 3.17 dd (17.0, 12.5)
5.34 dd (12.5, 2.5)
2,69 dd (17.0, 3.0)
herperetin 3.17 dd (17.0, 12.5)
5.42 dd (12.5, 3.0)
H (B) H (B)
HO O HO O
2 2
3 3
OH
H
H H
OH O OH O
aromadendrin = A 4.97 d (12.0) H-2 4.53 d (12.0) H-3
Flavanonol 7-OMe-A 5.02 d (11.5) H-2 4.58 d (11.5) H-3
taxifolin 4.88 d (14.0) H-2 4.50 d (14.0) H-3

Flavon Flavonol
Loại glycosid
Apigenin* Luteolin Kaempferol* Quercetin
3-O-D-glcp Astragalin Isoquercitrin
3-O-D-galp Trifolin Hyperin
3-O-L-rhap Afzelin Quercitrin
3-O-L-araf Juglanin Avicularin
7-O-D-glcp Cynarosid
7-O-D-galp
7-O-L-rhap
7-O-L-araf
3-O-D-glc6-1rha Scolymosid Nicotiflorin Rutin
3-O-D-glc2-1rha
386
số C (not –OMe) Nhóm cấu trúc dự kiến (sơ bộ) Marks
9 phenylpropanoid, coumarin* 1 lacton
9+5 furano, pyrano, prenyl-coumarin 1 lacton
9+6 coumarin glucosid 1 lacton
10 monoterpenoid (tinh dầu...) ̶
14 (+ 6) anthraquinon (hexosid), stilbenoid 2 ceton
13 (+ 6) xanthonoid (hexosid) 1 pyron
15 (+ 5) flavonoid (pentosid: ara, xyl...) 1 pyron
15 (+ 5) flavonoid pyrano, prenyl 1 pyron
15 (+ 6) flavonoid (hexosid: glc, gal, rha...) 1 pyron
15 (+ 12) flavonoid (bihexosid: neo, rut...) 1 pyron
19 (29; 29+6) steroid (phytosterol; phytosterol glc) n x CH2
20, 30 (+ 6n) diterpenoid, triterpenoid (glycosid) n x CH2
O
coumarin 9 13 xanthonoid
O O
O
anthranoid 14 14 stilbenoid
O
O O
flavonoid 15 15 isoflavonoid
O O
1
đối xứng
6 tín hiệu downfield (B) 1 thế
4' OH
HO O
3'
apigenin H
OH O
4' OH
luteolin O
3' OH
7 tín hiệu downfield

2
4' OH
8 tín hiệu downfield
HO O
3' OH
OH
quercetin
OH O
4' OH
kaempferol
HO O
3'
OH
7 tín hiệu downfield OH O
OH
R O 7 O
HO 6
5
H
OH O
scutellarein (R = H)
scutellarein-7-O-glc
3
quercetin
quercetin-3-O-glc
4
quercetin-3-O-rha
quercetin-3-O-glc
5
Luteolin-7-O-glc (monosid)
CH3
Luteolin-7-O-glc-rha (biosid)
394
6
O-glucosid

C-glucosid

395
7
-COOH glucuronic
mất –CH2OH
7’
-COOH glucuronic
mất –CH2OH
8
baicalein-7-O-glucuronid = baicalin
vòng B không thế
-COOH glucuronic mất –CH2OH

8’
baicalein-7-O-glucuronid = baicalin
-CHOH
glucuronic
Flavon
(B) đ.xứng ko thế
-COOH glucuronic O-glycosid
9
luteolin (Flavon)
3-OH luteolin =
quercetin (Flavonol)
400
10
Flavonol OMe DMSO
C-2 & C-3

Flavanonol
Flavanonol
OMe MeOD
401
C-4 (lớn nhất) của 1 số flavonoid thường gặp
< 180 ppm > 180 ppm ~ 195 ppm ~ 195 ppm
Flavonol (iso)Flavon (iso)Flavanon Flavanonol
4' OH 4' OH
4' OH 4' OH
HO 7 O O HO 7 O
OH HO 7 HO 7 O 3' OH
3' 3' OH OH
3'
4 4 4
OH 3 4 3 OH
3 5 3
5 5 5
OH O OH O OH O OH O
kaempferol apigenin naringenin aromadendrin

quercetin luteolin eriodyctiol taxifolin
myricetin tricetin hesperetin ampelopsin
402
pentamethoxy
tetramethoxy
403
tetramethoxy 5,6,7,8,4’-pentamethoxy 5,6,7,8,3’,4’-hexamethoxy
(all –OMe/ B) trong tangeretin trong nobiletin
(1 nhóm -OMe/B) (2 nhóm -OMe /B) 404
3'
4' OH 4' OH 3'
2' 4' OH
2'
8 8
HO 7 O 2 HO 7 9 O 2 HO 7 9 O 2
5' 5'
H H 6' 6'
H H H H
6 4 6 4
5
3 H 5
10 3 H 5
10 3 OH
H O OH O OH O
liquiritigenin (MeOD) naringenin (DMSO-d6) aromadendrin (MeOD)
C-2 81,0 (-CH-O-) 79,0 (-CH-O-) 85,0 (-CH-O-)
C-3 44,9 (>CH2) 42,6 (>CH2) 73,7 (-CH-O-)
C-4 193,5 ppm 196,4 ppm 198,8 ppm
405
rhamnosyl glucosyl galactosyl
406
• C-1’’ của ose trong
- O-glycosid: ≈ 100 ppm (-O-C-O)
- C-glycosid: ≈ 74-78 ppm (-O-C-C)
• C trong β-D-glc, gal giảm dần theo dãy

(1 > 5 > 3) > (2 > 4 > 6)
HO O HO O
1 5 OH 6 OH
3 2 4
HO OH HO OH
OH OH
các vị trí downfield các vị trí upfield

(1, 5, 3) (2, 4, 6)
407
5'
4' OR
6'
H
8
RO 7 9 O 2
1'
2'
3' OR
6 4 3
H 5
10
(OH)
OH O
• Trong flavon(ol) aglycon, có 2 giá trị CH < 100 ppm
CH-8 (94 ppm) < CH-6 (98 ppm).
• Nếu mất tín hiệu 94 ppm (của CH-8 cũ),
→ hy vọng 8-C-glucosid (ví dụ vitexin).
• Nếu mất tín hiệu 98 ppm (của CH-6 cũ),
→ hy vọng 6-C-glucosid (ví dụ isovitexin).
408
OH
H
8
HO O
glc 6 3 H mất 6-CH

OH O
isovitexin
(6-C-glc)
vitexin
(8-C-glc)
glc OH
HO 8
O mất 8-CH
H 6 3 H
OH O
13
Luteolin-7-O-glc (monosid)
DMSO
Luteolin-7-O-glc6-1rha (biosid)
MeOD rha -Me
410
14
Phổ 13C-NMR (MeOD, 125 MHz) ủa Ru n
không đối xứng
6’’-Me Rha
MeOH 
8 C downfield (5 x OR) C-1’’ O-glyc biosid

C-4 flavonol

411
14’
nối (1→6)
67.5 (not 62)
100 90 80 70 ppm
[ rha1→6glc ] 1− aglycon = [rutinose] − aglycon

(not neohesperidose)
412
14’’
(O-gly)-1’
¯ 6’ (-CH2OH)
O-monosid →
100 90 80 70 60
O-biosid → 6’ (downfield)
dấu hiệu nối 1→6
(O-gly)-1’
15
19 tín hiệu # 21 Carbon 414

15’
bộ tứ O-rha

arom (=C-O-)

415
19 tín hiệu # 21 Carbon
16
H3 '
H2 ' OH
B
HO O
H5 '
H6 '
O
OH O Rhamnosyl
2’ 6’ 3’ 5’
15 ppm
=CH-O- -O-C-O-
ceton =C-O-
có Δ =CH-O- =CH-
=CH-O- =CH-
416
16’
H OR OR
H3' H5' H3' H5' HO OH
B B B
H2' 1'
H6' H2' 1'
H6' H2' 1'
H6'
CHROMON CHROMON CHROMON
c -3’ 5’ 130 ppm 115 ppm 145 ppm
c -2’ 6’ 125 ppm 130 ppm 105 ppm
Dc + 5 ppm ̶ 15 ppm +40 ppm
Dc Dc
417
Lưu ý: Xyl hính là Gl m Cω (CH2OH) 
4' OH 4' OH
O 3' O 3'
HO 7  HO 7
1' OH 1' OH
CH2OH
3 O
4'' 3 O  4''
5
O 5'' OH 5
O 5'' OH
1'' 2'' OH 1'' 2'' OH
OH O 3'' OH O 3''
OH OH
H* H*
quercetin-3-O-βD-glc quercetin-3-O-βD-xyl
Tín h ệu 13C-NMR Cω ủa và đường đô hông dụng
đường đôi ppm Cω Cω ppm Note
neohesperidose 18 (rha)1 2(glc) 62 18 + 62
rutinose 18 (rha)1 6(glc) 67 18 + 67
gentibiose 62 (glc)1 2(glc) 62 62 + 62
sophorose 62 (glc)1 6(glc) 67 62 + 67

418
Rất hiếm khi gặp -Me gắn trực tiếp vào 3 vòng A, B, C.
Thường chỉ gặp -Me ở dạng
- OMe (thơm; -COOMe / đường),
- Me / rha, nhánh prenyl; vòng furano, vòng pyrano...
Me Me nhánh prenyl
OMe
methoxy thơm
vòng Me O O
OMe
pyrano Me
O
rhamnosyl
OMe O
O Me
methoxy OH
thơm OH
OH
419
Hiệu ứng thế methoxy trên khung monomethoxy-flavon (Agrawal 514)
c of 5-OMe 6-OMe 7-OMe 8-OMe 2’-OMe 3’-OMe 4’-OMe

C-2 –2,8 –0,6 +0,5 –0,6 –2,5 –0,8 –0,4
C-3 +0,8 –1,5 –0,9 –0,2 +5,0 –0,4 –2,1
C-4 –1,7 –1,4 –1,8 –1,1 –1,0 –1,1 –1,4
C-5 +33,6 –20,2 +0,4 –9,6 –0,6 –0,3 –0,6
C-6 –15,1 +31,6 –10,9 –0,2 –0,5 –0,5 –0,5
C-7 +0,3 –10,9 +29,0 –26,4 –0,3 +0,3 0,0
C-8 –0,5 +1,6 –17,3 +31,2 0 +0,1 –0,1
C-9 +1,3 –5,9 –1,1 –15,4 +0,4 –0,7 –0,7
C-10 –9,9 +0,1 –6,9 +1,5 –0,9 +0,3 +0,3
C-1’ –0,8 –0,5 –0,4 +0,1 –11,5 +0,7 –8,5
C-2’ –0,4 –0,2 –0,2 +0,4 +31,4 –14,6 +1,7
C-3’ –0,2 –0,1 –0,1 +0,3 –17,6 +30,7 –14,5
C-4’ –0,2 0,0 –0,2 +0,3 –0,9 –14,0 +30,5
C-5’ –0,2 –0,1 –0,1 +0,3 –8,3 +1,1 –14,5
C-6’ –0,5 –0,2 –0,2 +0,4 +2,7 –7,7 +1,7
421
Flavon Flavonol Flavanon
(I) (II) (III) (IV) (V) (VI) (VII) (VIII) (IX) (X)
3-OMe − − − − − 59,83 59,74 59,75 − −
5-OMe − − − 61,90 61,76 − − − 61,94 −
6-OMe 60,62 60,67 60,48 61,05 61,38 − − 60,58 61,50 60,64
7-OMe 56,46 62,00 61,74 56,46 61,95 56,16 56,51 61,79 56,92 61,23
8-OMe − 61,59 61,42 − 61,55 − 60,98 61,49 − 60,99
3’-OMe − − 55,67 − − 55,68 55,34 55,42 55,88 55,56
4’-OMe 55,59 55,69 55,61 55,33 55,30 55,69 55,65 55,69 − 55,56
• OMe trên vòng C: ≈ 60 ppm (C-3 only) • OMe trên vòng A: ≈ 60−62 ppm
• OMe trên vòng B: ≈ 55−56 ppm (1’-6’) (7-OMe không bị kẹp ≈ 56−57 ppm)
C* DEPT C ppm
OMe
4'
C-a -CH2- 22
HO 7 O 2
H
C-b =CH- 123
Me c
d b a
6
5
3 O -L-rha
C-c =C< 130 1'' 6''
e Me OH O
H O Me
C-d -CH3 25 OH
OH
OH
C-e -CH3 18
25 Me H C* H C ppm
c 130 123
4’-OMe 4.0 56
18 Me CH2 C6
c 22 ppm 6’’-Me 0.8 17
* 2  Me / nhánh prenyl thì không tương đương !

* nhánh prenyl còn có 1 nhóm a-CH2 sp3 (DEPT ¯)
423
13
Ít thông tin, nhưng quan trọng vì cho biết bậc carbon (CHn)
Đôi khi là gợi ý quan trọng, ví dụ CH2 có c 62 hay 67 ppm!
Phổ 13C-DEPT (MeOD, 125 MHz) của Rutin (biosid)
MeOH Me
C-4 flavonol

425


426
Mở đầu
- hạt nhân 1H có I = 1/2; % đồng vị cao (99,98%, ~ 90 lần 13C)
- H lớn (~ 4 lần 13C); độ nhạy tương đối ~ 43 = 64 lần 13C;
độ nhạy phát hiện ~ 5760 lần 13C.
- Thời gian hồi phục  ngắn, cường độ (diện tích) tín hiệu tỉ lệ
với số proton liên quan. Thời gian đo nhanh (1 vài phút),
cần ít m u (< 10 mg với MW #500)
- Giải tần hẹp ~ 1/5 lần so với 13C (ΔH 12 ppm / máy 500 MHz
= 6 KHz; so với ΔC 240 ppm x 125 MHz = 30 KHz của 13C).
- Tín hiệu rất dễ bị xen phủ, chồng lấp (overlapped)
- Phổ 1H phức tạp & thú vị vì có ghép với các proton lân cận,
cho nhiều thông tin về cấu trúc.
427
Các proton trong cấu trúc của Flavonoid thuộc 3 nhóm chính
- H thơm / vòng A, B, C (Ar-H, Ar-OH, Ar-OMe...)
- H (anomer, -CHOH, -OH, -Me, -COOR) / mạch đường
- H/C-2, C-3 của flavanoid, nhánh furano, pyrano, prenyl
Sự phân đỉnh ít phức tạp nếu so với triterpenoid, steroid...
Các hằng số ghép J thì khá đặc trưng cho từng loại proton.
Cá hông n hính kha há ừ phổ 1H-NMR

• vị trí của tín hiệu = trị số H lớn / nhỏ (giảm chắn / chắn)
• cường độ tín hiệu = số lượng proton của tín hiệu
• hình dạng tín hiệu = tình trạng phân đỉnh (s, d, t, dd, q, m, br)
• tình trạng ghép = J lớn / nhỏ; cis / trans; o / m; ax / eq...)
428
Plantaginin = Scutellarein-7-O-glc
CH thơm 4 nhóm CH thơm
3 nhóm OH thơm
d, 2 singlet 
d, 9
H8
H
meta dd
d, 2 H 5'
OH
HO O 2 H2
H H dd
8
6'
H isoflavon
flavonol HO O
OH
dd H6 3
dd
2'
H5 O
H d, 2 H OMe
d, 2 H 6 OH d, 9
dd H dd
OH O

9 Hz H H 10 Hz 9 Hz H
H OH H H OH
D
pyrano- O O O O pyrano-
OH OH
flavon D flavon
H H3 H3
10 Hz H OH O singlet OH O singlet
  

H 2 Hz 9 Hz H
5' H H 5'
H 6' OH H 6' OH
O O D O
O
OH OH
furano- H D furano-
flavonol 2 Hz OH OH
flavonol
 H OH O OH O 430
ghép ortho meta
8.051 6.933
8.033 6.915
0.018 ppm 0.018 ppm
(9.0 Hz) (9.0 Hz)

(2.0 Hz) (2.0 Hz)
431
13
3
 
  
 

432
1
3
6.51 s
6.52 s
7.46 dd 7.28 d 6.92 d 3 x OMe

(8.5, 2.0) (2.5) (8.5) (singlet)
H
CDCl3
5'
H 6' OMe
H 4'
8
HO 7 O 2
2' 3' OMe
6
4 H
MeO 5
3 H
OH O
433
Ha
Ha Ha
1 Ha
Ha 1
Ha
He Ha 1
6 O 5 Ha
Me 5 O 6 5
He CH2OH O 6
2 2 CH2OH
3 3 2
3 He
4 4
Ha 4
Ha
Ha Ha 
-L-rhamnose -D-glucose -D-galactose
• ở -D-glc: các -OH () đều là eq; các H đều là ax:
mọi 3Jaa đều lớn (7 - 9 Hz; có khi ≈ 5 Hz)
• ở -D-gal: 4-OH là ax; 4-H là eq nên 3 tín hiệu
H-3, H-4, H-5 sẽ có 3Jae nhỏ (2 - 3 Hz).
• ở -L-rha: trình tự -OH () là ax ax eq eq.
trình tự các H là eq eq ax ax ax.
434
kaempferol-3-O-βD-glc: H-1’’ ~ 5,45 ppm (7,5 Hz)
4' OH
HO 7 O 2
OH
6''
O OH
5
3 O
OH
OH O 1'' 2'' OH
H
5,45 d
(7,5 Hz)
(4 x -OH glucosyl)
435
kaempferol-3-O-L-rha = afzelin
4' OH
HO 7 O
5
O H
Me – Rha; 0.79 d (6 Hz) OH O 1'' 5'' 6''
H O Me
H OH
5.30 s* 2'' 3''
OH 4''
(H-1’’ / rha) OH
H-1’’ anomer (axial) của scutellarein-7-O-glucosid
(3J1’’-2’’ = 3Jaa = 7.5 Hz)
7.5 Hz Hax hmbc

OH
HO hsqc
O 1'' O
O
HO OH 7
2''
HO
Hax HO
OH O
H-1’’ (5,00 d 7,5 Hz)

luteolin-7-O-βD-glc: H-1’’ ~ 5,10 ppm (7,5 Hz)
H-3 in Flavon H OH
HO
O
HO OH
O 7 O
OH
H-1’’
OH
H 3 H
5
OH O
5,07 d
6,74 s (7,5 Hz)
438
daidzein-7-O-D-glc (DMSO-d6, 500 MHz)
5,41 d (4,5 Hz)

H
HO 1'' 8,38 s H2 O
O O O H2
HO OH 7
OH 2''
H H6 3
DMSO
4'
H5 O
OH
8,38 s H-2 5,41 d (4,5 Hz)
H-1’’
9,52 (4’-OH)
10 8 6 4 2 ppm
daidzin glycosid (DMSO, 500 MHz)
H
HO 1''
O O O H2
HO OH 7
OH 2''
H H6 3
4'
H5 O
OH
5,41 d (4,5 Hz)

H-1’’
440
C genistein (DMSO-d6) apigenin (DMSO-d6)
153.8 163.8
2 8.28 s ̶
CH CIV flav n & flav n
121.6 102.8
3 ̶ 6.76 s
CIV CH
4 180.3 ̶ 181.8 ̶
5 157.6 ̶ 161.1 ̶ 8.28 s

HO O 2 H
6 98.9 6.28 d (2.0) 98.8 6.19 d (2.0)
3
7 163.5 ̶ 164.1 ̶ B
OH O
OH
8 94.0 6.42 d (2.0) 94.0 6.47 d (2.0)
genistein
9 156.2 ̶ 157.3 ̶
10 104.5 ̶ 103.7 ̶ OH
B
HO O
1’ 122.2 ̶ 121.3 ̶ 2
2’ 130.2 7.32 d (8.5) 128.4 7.91 d (8.5) 3 H

OH O 6.76 s
3’ 115.2 6.95 d (8.5) 116.0 6.92 d (8.5)
4’ 161.2 ̶ 161.5 ̶ apigenin
5’ 115.2 6.95 d (8.5) 116.0 6.92 d (8.5)
6’ 130.2 7.32 d (8.5) 128.4 7.91 d (8.5)

daidzein aglycon (DMSO, 500 MHz)
8,5 Hz 8,5 Hz
8,29 s
HO 7 O H2
H6 3
8.5 Hz
4'
H5 O
OH
2.0 Hz
H-2 H-5 H-6
8,29 s
8.5 Hz
2.0 Hz
442
Luteolin (Flavon) C4 > 180 ppm
4' OH
HO 7 O
3' OH
H2 O
6
5 H3 6,65 s
12,95 s OH O
DMSO
5-OH
443
Luteolin-7-O-βD-glc (Flavon)
C4 > 180 ppm
5,07 d
(7,5 Hz)
H 4' OH
HO 1''
H-3 O O 7 O 2
(6,74 s) HO OH 3' OH
OH 2''
H 6 4
3 H3
5
OH O H-1’’
5,07 d
(7,5 Hz)
444
3,90
3,88
tetra-methoxy
3,84
3,83
445
4,10
4,02
3,95 penta-methoxy
3,95
3,89
446
4,11
4,03
hexa-methoxy
3,98
3,97
3,96
3,96
7,27
(CHCl3)
H2 O
in CDCl3
447
proton glycosid H-1’’ ppm H-6’’ ppm
7-O-L-rha 5.60 (2 Hz) 0.80 d (6 Hz)
3-O-L-rha 5.30 (2 Hz) 0.80 d (6 Hz)
6/8-C-D-glc 4.80 (10 Hz) CH2
7-O-D-glc 5.00 (7.5 Hz) CH2
3-O-D-glc 5.40 (7.5 Hz) CH2
7-O-D-gal 5.00 (7.5 Hz) CH2
3-O-D-gal 5.40 (7.5 Hz) CH2
448
proton glycosid H-1’’ ppm C-6’’ 
7-O-rutinose 5.00 d (7.5 Hz) 67.0
3-O-rutinose 5.40 d (7.5 Hz) 67.0
7-O-neohesperidose 5.20 d (7.5 Hz) 62.0
3-O-neohesperidose 5.70 d (7.5 Hz) 62.0
OH
9 O 2
4
4  6
2 HO 5 O
C OH HO
HO 3 O
8
10 3 O O  HO
2
7
6 O 3 1
1 5 O A
O Ha
Ha 5 1 5 6
6 He 6 1 5
Me O Me O He OH
HO HO
3 2 3 2
4 HO 4 HO
OH OH
rutinose neohesperidose 449

H (ppm) Kiểu proton / Flavonoid OH
1''
~ 1.0 Me-6’’ / rha (d, 6 Hz) H1'' O

5'' 6''
2'' 3'' Me
~ 1.7 Me / prenyl (H≠ : 3.5 - 5.2 ppm) OH

OH HO 4''
~ 2.0 AcO- & Me-thơm

5'
OH
2-3 H-3 flavanon (m, 2H)
4'
6'
8
HO 7 9 O 2
3.5 - 4.0 -OCH- (oses) 1'
2'
3' OH
6 4
3
10 OH
4.2 - 6.0 H-1’’ ose H-2 flavanonol: 5.0 ppm 5
OH O
~ 6.0 -OCH2O-, s H-2 flavanon: 5-5.5 ppm
6.0 - 8.0 H thơm / A & B (H-3 Flavon: 6.5 s)
8.0 - 8.5 H-2 isoflavon (s) (H-3 Flavon: 6.5 s)
11 - 9 -OH / 7, 4’, 3, 3’ (s, in DMSO)
12 - 14 5-OH (s, rất rõ / DMSO-d6) 450

Tìm C-1’’ và H-1’’ anomer của ose.
Phân biệt các tín hiệu sát nhau (nhưng khác bậc C: CIV vs CH...)
Tìm các nhóm –CH2 (flavanon, glucosyl...) nhờ màu crosspeak
Apigenin-8-C-glc (= Vitexin) – Trích vùng tín hiệu của glucosyl
C-1’’ -O-CH2
4.69 d (9.5 Hz) H-1’’

Kaempferol-3-O-L-rhamnosid = Afzelin
dmso Me-rha
C-1’’
H-1’’
C3
O
1'' hmbc
He
6'' 5''
O
Me He dmso
HO 3'' 2''
4'' HO OH
Me-rha
HSQC
C-1’’ anomer CH CH CH CH CH2
H-1’’
HSQC
H-6’’a
H-6’’b
Các thông tin thường được chú ý khai thác
• vị trí gắn mạch đường (vào C-3, 6, 7, 8 hay 4’...)
• vị trí gắn mạch nhánh (-OMe, prenyl, furano, pyrano...)
• vị trí của nhóm –OH (gắn vào C mấy)
• xác nhận H-2 của isoflavon, H-3 của flavon, H-1’’ anomer
- Cần kết hợp DEPT & HSQC để xác định CIV, CH, CH2, CH3
- Chú ý: C upfield (ko gắn O), C downfield (có gắn O, nối đôi...)
- Trên phổ HMBC, H sẽ “dòm thấy” C qua 2*, 3*, 4 nối
- H sẽ không thấy C ở vị trí para / vòng benzen
Cũng có thể khai thác thông tin từ các artefact trên phổ HMBC
Trung điểm của từng cặp artefact trên HMBC

chính là crosspeak ẩn của tương tác HSQC
Đừng nhầm l n các artefact này với crosspeak của HMBC!

(phải đánh dấu ngay từ lúc bắt đầu giải phổ HMBC)
CIV downfield CIV downfield upfield 1
4 7 5 4’ 2 3’ 3 10 6 8
9
CH CH CIV CH
5-OH
8
6
4’-OMe
4’-OMe
downfield
2’6’ 3’5’
1’
7 5 có artefact
upfield 10 6 8
4 4’ 9 2 3 1’
CH
5-OH
2’6’
3’5’
8
6
H2O
DMSO
7-OMe
7-OMe
đối xứng 1 thế / B
1’’
2’ 3’ C-8
4 7 9 4’ C-2 6’ 5’
4’-OH
H-2 isoflavonoid
artefact
H-2
C-4 artefact artefact

H-5
artefact
C-7
artefact
2’ 6’
artefact
6
8
3’ 5’
luteolin-7-O-D-glc 2
4 2 7 5 9
Ha 5.07 d (7.5 Hz)
H-1
anomer
kaempferol-3-O-D-glc 2
133 ppm C-1’’

3
5.46 d (7.5 Hz)
H-1’’
anomer
HMBC, scutellarein-7-O-glc
2 4’ 7 9 5 2’ 3’
6
6’ 1’ 5’ 10
5-OH
4’-OH
6-OH
2’ 6’
1’’
4 2 4’ 7 9 5 6 2’ 1’ 3’ 10 3 8
6’ 5’
3’ 5’
3
HMBC, scutellarein-7-O-glc
OH
OH
7-O-glc
1’
A. So sánh với các cấu trúc # trong TLTK
B. Gán các trị số H và C vào khung dự kiến 
C. Giải trực tiếp (ráp từng mảnh)
D. Giải bằng các phần mềm chuyên dụng
469
- Dự kiến nhóm (coumarin, flavonoid, anthranoid, stilbenoid,
tannin, xanthonoid, steroid, alkaloid, monoterpen, diterpen,
sesquiterpen lacton, triterpen, saponin...)
- Dự kiến kiểu khung (phổ UV, IR, MS; xuất xứ thực vật...)
- Dự kiến dạng aglycon // glycosid (độ phân cực, độ tan...)
- Chuẩn bị các TLTK về đối tượng nghiên cứu (NMR data của
m u nghiên cứu (Chi, loài, khung, nhóm hợp chất...)
470
1. Loại bỏ tín hiệu d.môi, nước, d.môi tạp, tạp... trên phổ 13C
2. Lập bảng C (đánh số tạm 1* 2*, sort theo C) từ phổ 13C
3. Xác định loại, bậc của tất cả CHn từ phổ DEPT
4. Ghi giá trị H, độ bội, J (Hz), số lượng H* lên phổ 1H
5. Tìm các cặp ghép C  H của các nhóm CHn (HSQC !)
6. Tìm các giá trị của -OH, -NH (nếu có, HSQC !)
7. Xác định vị trí gắn của các nhóm thế (HMBC !)
8. Xác định các H* có tg tác COSY, NOESY; H* ghép cặp (J !)
9. Đề nghị vài cấu trúc 3-D, loại bỏ các cấu trúc ko hợp lý
0. Kiểm tra cấu trúc đề nghị nhờ HMBC, COSY, NOESY, J, m
471
• Chỉ có giải phổ thực tế mới tích lũy được kinh nghiệm,
giúp nhớ được & hệ thống được lý thuyết.
• Các thông tin trong bài này cũng được rút ra từ thực tế.
• Các thông tin này rất cần có 1 cơ sở lý thuyết tối thiểu.
• Không nên máy móc “học thuộc lòng” các giá trị , J .
472
BÀI 1: ĐẠI CƯƠNG VỀ NMR slide
PHẦN 1: MỞ ĐẦU
1.1. Mô u h a họ xx
1.1.1. Trước đây: Hằng số vật lý x
1.1.2. Hiện nay: NMR x
1.1.3. Hiếm khi: Nhiễu xạ đơn tinh thể tia X. x
1.2. Nhắ l về nguyên lý quang phổ h p hụ xx
1.2.1. Các vùng năng lượng bức xạ điện từ x
1.2.2. Sự hình thành các tín hiệu phổ x
1.3. Phổ NMR là gì xx

1.3.1. Sự hình thành 1 tín hiệu phổ NMR x
1.3.2. Sự hình thành nhiều tín hiệu phổ NMR khác nhau x
a. Kiểu CW-NMR x
b. Kiểu FT-NMR x
2.1. H nhân ng phổ NMR xx
2.1.1. Các hạt nhân đồng vị x
2.1.2. Các hạt nhân có/không có từ tính x
2.1.3. Tỉ số từ hồi chuyển x
2.1.4. Thời gian hồi phục của hạt nhân x
2.1.5. Độ nhạy của hạt nhân x
a. Độ nhạy tương đối x
b. Độ nhạy phát hiện x
2.1.6. Số scan (NS) - Độ sạch của tín hiệu (S/N) x
a. Số scan cần thiết của các hạt nhân x
b. SSS x
2.2. Từ ường ng phổ NMR xx
2.2.1. Ngoại từ trường x
2.2.2. Nội từ trường (Từ trường cảm ứng) – Hệ số chắn x
2.2.3. Từ trường hữu hiệu x
2.3. Xung RF ng phổ NMR xx
2.3.1. Cường độ của xung - Năng lượng của xung x
2.3.2. Thời lượng phát xung x
2.3.3. Cách phát xung (liên tiếp, hàng loạt) x
2.3.4. Trình tự phát xung (Chuỗi xung) x
2.4. H nhân ng hệ h ng “RF & B” xx
2.4.1. Ảnh hưởng của từ trường đối với hạt nhân. x
a. Dân số Boltzmann x
b. Sự ổn định của từ trường x
2.4.2. Ảnh hưởng của xung RF đối với hạt nhân x
2.5. Sự hắn và g m hắn xx
2.5.1. Khái niệm về chắn và giảm chắn x
2.5.2. Nguyên nhân của sự chắn và giảm chắn – Hệ số chắn x
2.5.3. Hệ quả của sự chắn và giảm chắn x
2.5.4. Downfield & Upfield; Shielded & Deshielded x
2.6. Độ dờ h a họ xx
2.6.1. Định nghĩa về độ dời hóa học x
2.6.2. Thang đơn vị của độ dời hóa học x
2.6.3. Tính chất của độ dời hóa học x
2.7. Sự ghép ủa h nhân – Hằng ghép xx
2.7.1. Khái niệm về sự ghép spin-spin x
2.7.2. Sự tạo thành đỉnh bội của tín hiệu x
2.7.3. Hằng số ghép proton – proton (J) x
a. Khái niệm x
b. Cách biểu diễn J x
c. Các hằng số ghép proton thông dụng x
2.7.4. Xác định độ dời hóa học của 1 đỉnh bội x
2.7.5. Hằng số ghép C-H x
Các loại ghép CH chính x
Mức độ quan trọng x
2.8. Mẫu đ ng phổ NMR xx
Nồng độ và khối lượng m u x
Độ tinh khiết của m u x
2.9. Dung mô đ phổ NMR xx
2.9.1. Nguyên tắc của dung môi đo phổ NMR x
2.9.2. Các loại dung môi đo NMR thông dụng x
2.9.3. Tín hiệu của các dung môi trên phổ NMR x
2.9.4. Cách chọn lựa dung môi đo phổ NMR x
2.10. Tín h ệu ủa p ên phổ NMR xx
2.10.1. Tín hiệu của nước ẩm x
2.10.2. Tín hiệu của vết dung môi khác còn sót x
2.10.3. Tín hiệu của các tạp x
2.11. Cá l máy đ phổ NMR xx
2.5.1. Máy CW-NMR xx
2.5.2. Máy FT-NMR xx
2.5.3. Ảnh hưởng của tần số máy xx
2.12. Cá l phổ NMR hông dụng xx
2.12.1. Phổ 1 chiều xx
2.12.2. Phổ 2 chiều xx
a. Phổ 2 chiều đồng nhân xx
b. Phổ 2 chiều dị nhân xx
2.12.3. Các kỹ thuật phổ khác xx
2.12. Cá l phổ NMR hông dụng xx
2.12.1. Phổ 1 chiều (1D-NMR) xx
a. Phổ 13C-NMR ghép & giải ghép với proton xx
c. Phổ APT / DEPT* xx
e. Phổ 1H-NMR* xx
2.12.2. Phổ 2 chiều (2D-NMR) xx

* Sự hình thành tín hiệu phổ 2D-NMR (FT-NMR) xx
* Ảnh hưởng của các “lát cắt” / phổ 2D-NMR xx
a. Phổ 2 chiều đồng nhân xx
* Phổ 1H-1H-COSY* / NOESY* / ROESY xx
* Phổ 13C-13C COSY (INADEQUATE) xx
b. Phổ 2 chiều dị nhân (13C – 1H) xx
a. Phổ HETCOR / HSQC* / HMBC* xx
2.12.3. Các kỹ thuật phổ khác xx

000-Handout (Print) Ve NMR - Saigon 17-5-2014 A

Uploaded by

Document Information

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

000-Handout (Print) Ve NMR - Saigon 17-5-2014 A

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

1. Trình bày được các nguyên lý chính của phổ NMR.

• Mục đích chính

C6H12O6 khác C9H8O4

(270 + 162) (286 + 146)

(222 + 48) aglycon = 270 Glucosyl Rhamnosyl aglycon = 286

* cách gắn 3.OH

360 cấu trúc 1200 cấu trúc 840 cấu trúc

n=10 vị trí gắn -OH n! 10!

Phân lập: 1818 (P.J. Pelletier & J.B. Caventou)

128 năm sau !!!

Cấu trúc: 1946 (R. Robinson, Nobel 1947)

Tổng hợp: 1954 (R. Woodward, Nobel 1965)

(Qui Khuong Huu, 1959)

1956 : Taxine gồm ≥ 3 alk #

1967 : tách Taxol tinh khiết

chỉ 4 năm sau !!!

1971 : cấu trúc Taxol.

1988 : bán tổng hợp.

1993 : tổng hợp toàn phần

X-Ray NMR NMR IR, UV NMR HR-MS

C u c 3D Mảnh cấu trúc Nhóm chức CxHyOzNt

Mô hình 3D C’.trúc giả định

NMR dữ liệu khác Loại suy So sánh

UV, IR, MS, 2D-NMR TLTK

một chút bất tiện: kèm theo máy đo phổ NMR

3. Bằng dữ liệu phổ NMR (NMR data)

- các giá trị H

quay cực, phổ UV, IR, MS...

400 nm 500 600 700 750 nm

tia γ tia X UV IR MW ng ad (RF)

EUV > EIR >> ERF (ENMR)

các điện tử  các hạt nhân

các nhóm chức

(hằng số Planck h = 6,63 . 10−34 J.s)

• Bức xạ có tần số  này được phát hiện,

Ví dụ phổ kế FT-IR, FT-NMR

• Do BXĐT này phải cộng hưởng được với 1 từ trường Bo

các tín hiệu phức

thời gian tần số tăng dần

 = 1/100 sec Phổ NMR

200 150 100 Hz

2.2. Từ trường B trong phổ NMR 2.8. M u đo phổ NMR

• yêu cầu về năng lượng E: E thuộc vùng RF (cực thấp)

Phổ NMR òn nh ều ứng dụng

• Có thể tiếp cận được

• Sẽ phát triển mạnh ở nước ta

220 250 300 330 nm

# chromophore → # dạng phổ UV

2.1.2. Hạt nhân cho/không cho tín hiệu phổ NMR

2.1.3. Tỉ số từ hồi chuyển

14N 99,63 3,075 28,9

19F 100,0 40,059 376,5

31P 100,0 17,235 162,1

So với hạt nhân 13C, thì hạt nhân 1H có

ngoại từ trường

thời gian hồi phục

đ.vị (106 rad/s.T): 267,513 67,262 19,331 108,291

đơn vị (MHz/T): 42,576 10,705 3,077 17,235

Rất lưu ý: (γH/γC) ≈ 4

- với Bo: 1H đáp ứng hơn (nhậy hơn) 13C ≈ 4 lần.

(tần số cộng hưởng ν của 1H gấp ≈ 4 lần so với 13C).

Phổ 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) của strychnin

nhưng phải ghi:

Phổ 13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) của strychnin